JPH04506974A - 凝血塊を溶解するためのグリコシル化されたタンパク質の製薬学的調剤およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 グリコジル化されたｔ−ＰＡの安定化 ヒトの組織−プラスミノ−ｒンアクチベーター（ｔ−ＰＡ）は、凝血塊を溶解す る場合、例えば心筋梗塞の際に大きな治療掌上の意味を有する。ｔ−ＰＡは、プ ラスミノ−ｒンが活性化されてプラスミンに変わることによって、凝血塊の溶解 を惹起させる。更にプラスミノはフィブリン、即ち流れる血のタンパク質マトリ ックスの主要成分を溶解する。

天然ｔ−ＰＡは多数の機能的ドメインＦ、　ＥＸＫｌ、Ｋ２およびＰから構成さ れている。ドメインＰはプラスミノ−ｒンからプラスミンへの分裂を生じさせる 、タンパク質分解の活性中心を内容として含んでいる。

ｔ−ＰＡまたは、ドメインＦ、、Ｅ、に１およびに２の１つま几は２つ以上が欠 失している種々のｔ−ＰＡ−突然変異タンパク質の、真核細胞および原核細胞内 での遺伝子技術的生成は、既に公知である。この場合に、原核細胞からのｔ−Ｐ Ａ−誘導体は、天然ｔ−ＰＡと異なって、グリコジル化されていない形で合成さ れる。

ｔ−ＰＡ−活性を有するグリコジル化され九タンパク質は、タンパク質を可溶化 する九めに常法で使用される緩衝液、例えばＮａ−クエン酸塩５０ミリモル／ｌ 　％リン酸塩ま几は生理的ＮａＣ１水溶液５０ミリモル／ｌ中で僅かな濃度での み溶解する。しかし、治療上の作用物質として使用するためにタンパク質溶液は 、少くとも１．４ＭＵ／ｄ、有利に１．４　ＭＯ／　ｒＬｌ〜１０　ＭｔＪ　／ 　ｒｎｌの高いｔ−ＰＡ活性で存在するべきである。

欧州特許出願公開第０２１７３７９号明細書の記載から、中性かま几は弱アルカ リ性のアルｆニン処方によって、ｔ−ＰＡの溶解度を高めることは、公知である 。しかし、この方法の欠点は、中性または弱アルカリ性条件下での高濃度溶液の 僅少な安定性にある。

米国特許第４．７７７．０４３号明細書は、ヒトのｔ−ＦＡと、製薬学的に認容 性のアルｆニウムイオンを含有し、塩素イオン濃度０．３モル／ｌまでを有する 緩衝液との製薬学的組成物を開示している。更に、欧州特許出願公開第０１５６ １６９号、同第０３０３３５１号および同第０２９７２９４号明細書は、ｔ−Ｆ Ａ活性を有するタンパク質を緩衝液中で、特定のアミノ酸、その塩、誘導体およ び同族体によって可溶化する可能性を開示している。更に、ｔ−ＰＡは、欧州特 許出願公開第０１２３３０４号明細書の記載によればゼラチンを添加することに よるか、同第０１１２９４０号明細書の記載によればアルブミンを添加すること によるか、または同第０１９８３２１号明細書の記載によればサツカリドのポリ 硫酸エステルまたは硫酸化した糖を添加することによって安定化されるＣとがで きる。

ＰＣＴ　／　Ｕ　Ｓ　８８　／　ＯＡ　４０２号明細書は、ｔ−ＦＡ溶解度を上 昇させる之めの方法を開示しており、この場合に塩基性アミノ酸、特にアルヤー ン’ｅ　０．０２〜０．２モル／ｌの濃度で有する水性媒体は、０．０２〜０． ０８モル／ｌの濃度、−値５〜８のクエン酸基と一緒に使用される。

しかし、これらの穫々の成分が、一般的にｔ−ＰＡ−性質を有する全てのタンパ ク質に適当なわけではない。従って、様々なグリコジル化されたかもしくはグリ コジル化されていないｔ−ＰＡ変異体は、著しく互いに異なった溶解性の性質を 有することが、確昭され友。

従って、本発明の課題は、殊に、活性１．４ＭＵ／を以上を有する、グリコジル 化されたｔ−ＰＡもしくはｔ−ＰＡ−突然変異タンパク質を含有し、この場合に ｔ−ＰＡが長い時間に亘って安定であるべきｉ薬学的調剤を開発することであつ 几。単位Ｕは、ＷＨＯ，ｈｈｔｉｏ−ｎａｌ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｂ ｉｏｌｏｇｉｃａｌ　５ｔａｎｄａｒｄｓ　ａｎｄ　Ｃｏｎ−ｔｒｏｌ　（Ｈ， Ｌｉ１Ｌ、　ＺＧＩＭＡＬ４２（１９８７）、４７８〜４８６参照）により定義 されている。

本発明の課題は、活性少くとも１゜４　ＭＵ　／　ｄの１−ＦＡ活性および市値 ４．５〜９を有する、グリコフル化されたタンパク質の製薬学的調剤によって解 決され、その際、これらの組成はクエン酸塩と、次のもの：ａ）アスコルビン酸 、 ｂ）　ＥＤＴＡ。

Ｃ）式： 〔式中、Ｘは５０３Ｈ，、Ｈ，ＮＨ２ま友はＯＰを表わし、Ｒはｃｌ−０９−ア ルキレン、Ｃ３−０６−シクロアルキレンま几はベンジリデンを表わし、がっＲ １およびＲ２は互いに無関係にＨまたはＣ□−０３−アルキルを表わす〕のアミ ン化合物、 ｄ）グアニジノ酪酸、 ｅ）ジメチルビグアニド、 ｆ）　７−アミンへブタン酸、８−アミノオクタン酸、ｐ−アミノメチルベンジ ェ酸、δ−アミノバレリアン酸、ｒ−アミノ酪酸、 ｇ）　グルコサミン、フルクトース、 ｈ）ピリミジンヌクレオシドおよびビリミゾンヌクレよび／または池のカルざキ シ基によって置換されているカルざン酸 からの群からなる、少くとも１つの化合物とを含有する。

本発明によるｔ８！薬学的調剤中のクエン酸イオンの濃度は、少くとも、５ミリ モル／１．有利に５〜１００ミリモル／ｌｋ有するべきであり、殊に有利にクエ ン酸イオン濃度５０ミリモル／ｌである。−値は、添加される化合物の塩基度に 応じて、有利にＨＣＩま几は塩基、例えばＮａＯＨま九はＫＯＨｔ−用いて調節 される。

アルカリ性クエン酸塩溶液の一値をＨＣＩを用いて調節すること、即ち組成物が 何部的に更に塩素イオンを含有するのが適当であると、証明された。つまり、驚 くべきことに塩素イオン存在下では、ｔ−ＰＡもしくはｔ−ＰＡ−誘導体の高濃 度溶液は、本質的に、例えばリン駿塩イオン有在下の場合よりも安定である。酸 性のクエン酸塩溶液の絹値は常法により　ＮａＯＨを用いて調節される。

本発明による組成のためには、−値４，５〜９の間、有利に一値６が適当である 。

本発明によるｔ−ＰＡ活性を有するグリコジル化されたタンパク質とは、真核生 物体から変性されていないｔ−ＰＡ、ならびに全てのグリコジル化されｔｔ−Ｐ Ａ−突然変異タンパク質を意味する。ｔ−ＰＡ−突然変異タンパク質の例は、例 えばＨａｒｒｉｓ　（ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　１　（１９８７ ）、４４９〜４５８）に記載されている。

有利に、本発明による組成物は、ＣＨＯ細胞からのドメインＦＸＥＸＫ１％　Ｋ ２およびＰｆｔ有する未変性の願公表第８７７０２６７３号明細書の記載により 製造）。

しかし適当なものは、更に真核生物体からの全ての他のｔ−ＰＡ−変異体でもあ る。

有利に、本発明による組成物には、アミン化合物として、タウリン、４−アミノ ブタノール−１，５〜アミノペンタノール−１，６−アミンへキサノール−１， １，９−ジアミノノナン、１，８−ジアミノオクタン、１．７−ジアミノへブタ ン、１．６−ジアミツヘキサン、１，５−ジアミノペンタン、１，４−アミノブ タンまたは１，３−アミノグロパンが使用される。タウリンおよび同様の化合物 の有利な濃度は、０．１〜０．５モル／１．殊に有利に０．１〜０．３モル／ｌ である。別の前記化合物（α、ω−ジアミンおよびα、ω−アミノアルコール） ハ有利に１０〜１００ミリモル／ｌで使用される。

１つまたは２つ以上のヒドロキシ基、ケト基および／または他のカルボキシ基で 置換されて因るカルボン酸として、例えばリンゴ酸、乳酸、フマル酸または２− オキソグルタル酸が使用される。これらの物質は、有利に１ミリモル／ｌ〜１０ ００ミリモル／１．特に有利に１０〜５００ミリモル／ｌで使用される。

グアニジノ酪酸は、有利ＶＣ１０〜２００ミリモル／ｌ、特に有利に５０〜１Ｄ Ｏミリモル／ｌで使用される。ジメチルビグアニドに対して、濃度は５０〜４０ ０ミリモル／ｌ、有利に１００〜３００ミリモル／ｌである。

７−アミンへブタン酸、８−アミンオクタン酸、δ−アミノバレリアン酸、γ− アミノ酪酸またはｐ−アミノメチルベンジェ酸は、有利に０．５〜２０ミリモル ／ｌ、％に！利に１〜１０ミリモル／ｌで使用される。

これらの物質は、意外なことに、既に若干のモル過剰（１０〜４０倍）で、グリ コジル化されたｔ−ＰＡ−誘導体の傑出した溶解性を惹起する。

グルコサミンおよびフルクトースは、有利に１〜５００ミ！ｊモル／１．特に有 利に１０〜３００ミ！Ｉモル／ｌの濃度で使用される。

ピリミジンヌクレオシドまたはピリミジンヌクレオチドとしては、例えばチミジ ン、シトシンおよびウリジンもしくは相応するヌクレオチドが適当である。これ らの物質は有利に、濃度１〜３００　ミＩＪモル／１゜特に有利に１０〜３００ 　ミＩＪモル／ｌで使用される。

更に、本発明の対象は、付加的に１つまたは２つ以上のアミノ酸、特にヒスチジ ンを含有する本発明による組成物である。

以下に、本発明による一連の特に有利な調剤を記載する。

処方はＮａ−クエン酸塩５０ミリモル／ｌ、ＰＩ−１６およびタウリン０．１〜 ０．３モル／ｌを含有する。ま几、有利なのは、Ｎａ−クエン酸塩／　ＮａＯＨ ５０ミリモル／更に、有利なのは、Ｎａ−クエン酸塩／ＨＣＩ　５０　ミリモル ／ｌ、　ｐＪ（６および７−アミンオクタン酸、８−アミンオクタン酸、δ−ア ミノバレリアン酸、ｒ−アミノ酪酸またはｐ−アミノメチルベンジェ酸１ミリモ ル／ｌ〜１０ミリモル／Ａｔ有する処方である。

更に、殊に有利なのは、Ｎａ−クエン酸塩／　ＨＣＬ　５０ま几、有利なのは、 Ｎａ−クエン酸塩５０ミリモルン酸塩／［１５０ミリモル／１ＸＩＨ６およびジ メチル−６およびチミジン、シトシンま九はウリジン１０〜リモル／１ＸＰＨ６ および４−アミノブタノール−１゜５−アミノペンタノール−１，６−アミンへ キサノール−１，１，９−ジアミノノナン、１，８−ジアミノオクタン、１．７ −ジアミノへブタン、１，６−ジアミツヘキサン、１．５−ジアミノペンタン、 １．ａ−アミノブタンまたは１，６−７ミノプロ／（７１０〜９モル／１ＸｐＨ ６およｑフルクトースまたはグルコ−／ｌ、ｐＨ６およびリンゴ酸、乳酸、フマ ル酸または２−オキシグルタル酸１０〜５００ミリモル／ｌｋ含有する。

また、前記の化合物のいくつかと、クエン酸塩とからなる組合せ物は、ｔ−ＰＡ 活性を有し、殊にＣＨＯ細胞からのｔ−ＰＡのグリコジル１じされたタンパク質 の著しく良好な溶解性を惹起する。

また、発明の対象は、溶液の形の作用物質として、または前記した作用物質およ び場合により更になお製薬学的に認容性の添加剤、助剤、担持剤および充填剤を 有する凍結物質としての、ｔ−ＰＡ−活性を有するグリコジル化されたタンパク 質を基礎とする医薬品でもある。

本発明による製薬学的調剤は、有利に注射液および注入液として使用される。こ れは、本発明による組成また製薬学的調剤を凍結物質の形で提供することも可能 である。次に、これは自体公知の、注射の目的に適当な薬剤または溶液を用いて 再構成される。注射媒体としては、有利に、注射液の場合に常用の添加剤、例え ば安定剤、溶解助剤、緩衝液および等張添加剤、例えば生理的ＮａＣ１−濃厚物 、を有する水が使用される。

この糧の添加剤は、例えばマンニット、酒石散塩−ま之はクエン酸塩緩衝液、エ タノール、錯体形成剤例えばエチレンジアミンテトラ酢酸およびその非毒性塩、 ならびに高分子重合体、例えば粘度調節のための液体ポリエチレンオキシドであ る。注射液のための液体担持剤は、無菌性でなくてはならず、かつ有利に注射液 用アンプルに充填される。

最後に本発明は、ま九、本発明による製薬学的調剤製造のためのｔ−ＰＡ活性を 有するグリコジル化され几タンパク質の使用をも包含する。

例 ＣＨＯ−ｔＰＡの溶解性 精製したＣＨＯ−ｔｐＡ（アルでニン／　Ｈ３ＰＯ４０−５モル／を中に溶解し た、＃　７．３　）を、ＹＭ１〇−膜（ＡＩｎｌｃＯｎ）を通過させる限外濾過 によって濃縮する。各々濃厚初冬ｈ　１ｒａｔ　（活性：　６．６　ＭＩＪ　／ 　ｍｌ　）　ｔ、第１表に記載した緩衝液に対して透析する。試料の遠心分離後 、澄明な上澄み中で酵素活性を測定する。

酵素活性は、容量単位としてＭＵ／ｌｌ１ｌで、および全活性として）１４Ｕで 記載されている。

この場合にｔＰＡ−活性の測定は、常法で呈色基質の分解Ｋ　ｊ　り決定さジル （Ｈ，Ｌｉ１１．　Ｚ（）ＩＭＡＬ　４２、（１９８７Ｌ　４７８〜４８６）。

単位ＵはＷＴ（Ｏ，Ｎａｔｉｏｎａｌ　工ｎ５ｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｂｉｏｌ ｏｇｉ、ｃａｌＳｔａｏ、ｄａｒｄｓ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔｒｏｌの定義による活 性の単位である。

第　１　表 ＭＵ／ｍｌ　ＭＵ Ｎａクエン酸塩／ＮａＯＨ，ｐ）Ｉ　６５０　ｍｍｏｌ／Ｌ　Ａ、ｔ５０　５． ５２タウリン　Ｑ、３　ｍ　ｏｌ／Ｉ Ｎａクエン酸塩／ＨＣ１，Ａ　６５０　ｍｍｏｌ／ｌ　１．６５　１．７３フル クトース　０．３ｍ０Ｌ／Ｉ Ｎａクエン酸塩／ＮａＯＨ，ｐＨ６５０ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｌ７６　４．７６アスコ ルビン酸　Ｑ、３　ｍｏｌ／Ｌ Ｎａクエン酸塩／ＨＣ１，ｐＨ６５０ｍｍｏｌ／ｌ　５．５８　６．４０ｐ−ア ミノメチルベンジェ酸１０　ｍｍｏｌ／ＩＮａクエン酸塩／ＨＣ１，ｐＪｌ　６ ５０　ｍｍｏｌ／１　５．９１　６．５０ジメチルビグアニド　６００Ｊ預１／ １トリス／ＨＣ１，ｐ）１　７．２　０−０５ｍｏｌ／ｌ　０−０２　０−０４ ＮＨ４ＨＣＯ３５０ｍｍｏＬ／Ｌ　０１Ｄ６　０．０９Ｎａ、２ＨＰＯ４／Ｈ３ ＰＯ４＋　ｐａｌ　６　５［］　ｍｍｏｌ／ｌ　Ｏ，１＋１　０．１９Ｎａクエ ン酸塩／ＨＣＩ、　ｐＪ（６５０ｍｍｏｌ／Ｌ　５−０７　７．００７−アミノ へブタン酸　１０　ｍｍｏｌ／ＩＮａクエン酸塩／ＨＣＩ、　ｐＨ６５０ｍｍｏ Ｌ／Ｌ　４．００　４．８０δ−アミノオクタン酸　１Ｑ　ｔｎｍｏＬ／ＩＮａ クエン酸塩／ＨＣＩ、　ｐＨ６５０ｍｍｏｌ／ｌ　３．１８　４１３γ−アミノ 酪酸　１Ｑ　ｍｍｏｌ／Ｌ Ｎａクエン酸塩／ＨＣＩ、　ｐ）（６５０ｍｍｏｌ／Ｌ　５−２０　６．３０１ ．６−ジアミツヘキサン　５０　ｍｍｏｌ／１緩衝液　活　性 ＭＴＪ／ｍｌ　ＭＵ Ｎａクエン酸塩／ＨＣＩ、ｐ）（６５０ｍｍｏｌ／ｌ　６−ＤＯ６−００５−ア ミノペンタノール　５Ｑ　ｍｍｏｌ／ＩＮａクエン酸塩／ＨＣ１，ｐＨ６５０ｍ ｍｏｌ／ｌ　３．２４　３．９０グアニゾノ酪酸　５Ｑ　ｍｍｏｌ／Ｉ Ｎａクエン酸塩／ＮａＯＨ，ｐ）（６５０ｍｍｏｌ／１　３．４２　３．７６Ｅ ＤＴＡ　５０　ｍｍｏｌ／Ｉ Ｎａクエン酸塩／ＮａＯＨ，ｐＨ６５０ｍｍｏｌ／ｌ　５．０７　５．８ｇＤＴ Ａ　１００　ｍｍｏｌ／Ｉ Ｎａクエン酸塩／ＨＣＩ、ｐＨ６５０ｍｍｏｌ／１　３．４２　３．７６グルコ サτ）／〆　Ｑ、３　ｍｏｌ／１要　約　書 本発明は、少なくとも１．４ＭＵ／ｍｌの活性を有するｔ−ＰＡ−活性およびｐ Ｈ値４．５〜９を有する、クエン酸塩および次のもの： ａ）アスコルビン酸、 ｂ）ＥＤＴＡ、 Ｃ）式： ％式％ ［式中、Ｘは５ｏｆｆＨ，Ｈ，ＮＨ，またはＯＨを表わし、ＲはＣ，−Ｃ，−ア ルキレン、Ｃ，−Ｃ，−シクロアルキレンまたはベンジリデンを表わし、かつＲ １およびＲ２は互いに無関係にＨまたはＣ１−Ｃ１−アルキルを表わす］のアミ ノ化合物、ｄ）グアニジノ酪酸、 ｅ）ジメチルビグアニド、 ｆ）７−アミノへブタン酸、８−アミノオクタン酸、ｐ−アミノメチルベンジェ 酸、δ−アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸、 ｇ）グルコサミン、フルクトース、 ｈ）ピリミジンヌクレオシドおよびピリミジンヌクレオナト ｌ）１つまたは２つ以上のヒドロキシ基、ケト基および／または他のカルボキシ 基によって置換されているカルボン酸 からの群からなる、少なくとも１つの化合物とを含有する、グリコジル化された タンパク質の製薬学的調剤ならびにｔ−ＰＡ活性を有するグリコジル化されたタ ンパク質をベースとする医薬品およびその製造法に関する。

手続補正書（自発） １、事件の表示 ＰＣＴ／ＥＰ　９０１０２２５２ ２、発明の名称 凝血塊を溶解するためのグリコジル化されたタンパク質の製薬学的調剤およびそ の製造法 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 名　称　ベーリンガー　マンハイム　ゲゼルシャフト　ミツト　ベシュレンクテ ル　ハフラング ４、代理人 住所　〒１００　東京都千代田区丸の内３丁目３番１号新東京ビルヂング　５５ ３号　電話（３２１６）５０３１−５番６、補正の対象 たｔ　−Ｐ　Ａ　？の安定化」を「凝血塊を溶解するためのグリコジル化された タンパク質の製薬学的調剤およびその製造法」と補正する。

（２）同第３頁第２１行〜第２２行の「を有する、グリコジル化されたＪを「を 有する、凝血塊を溶解するためのグリコジル化されたＪと補正する。

（３）ｎ求の範囲を別紙の通り補正する。

請求の範囲 １、　少なくとも１．４ＭＵ／ｍｌの活性を有するｔ−ＰＡ−活性およびｐＨ値 ４．５〜９を有する、凝血塊を溶解するためのグリコジル化されたタンパク質の 製薬学的調剤において、クエン酸塩および次のもの： ａ）アスコルビン酸、 Ｒ’Ｒ”Ｎ−Ｒ−Ｘ ［式中、ＸはＳＯ，Ｈ，Ｈ，ＮＨ，またハＯＨを表わし、ＲはＣ，−Ｃ，−アル キレン、Ｃ８−０６−シクロアルキレンまたはベンジリデンを表わし、かっＲ１ およびＲ２は互いに無関係にＨまたはＣ，−Ｃ１−アルキルを表わすコのアミノ 化合物、 ｄ）グアニジノ酪酸、 ｅ）ジメチルビグアニド、 ｆ）７−アミノへブタン酸、８−アミノオクタン酸、ｐ−アミノメチルベンジェ 酸、δ−アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸、 ｇ）グルコサミン、フルクトース、 ｈ）ピリミジンヌクレオシドおよびピリミジンヌクレオチド ｉ）１つまたは２つ以上のヒドロキシ基、ケト基および／または他のカルボキシ 基によって置換されているカルボン酸 からの群からなる、少なくとも１つの化合物とを含有することを特徴とする、製 薬学的調剤。

２、　アミノ化合物がタウリン、４−アミノブタノール−１，５−アミノペンタ ノール−１，６−アミノへキサノール−１，１，９−ジアミノノナン、１．８− ジアミノオクタン、１．７−ジアミノへブタン、１．６−ジアミツヘキサン、１ ．５−ジアミノペンタン、１．４−ジアミノブタンまたは１．３−ジアミノプロ パンである、請求項１記載の製薬学的調剤。

３、　１つまたは２つ以上のヒドロキシ基、ケト基および／または他のカルボキ シ基によって置換されているカルボン酸がリンゴ酸、乳酸、フマル酸または２− オキソグルタル酸である、請求項１記載の製薬学的調剤。

４、　付加的に１つまたは２つ以上のアミノ酸を特徴する請求項１記載の製薬学 的調剤。

５、　クエン酸塩濃度が５〜１００ミリモル／ｌ、有利に５０ミリモル／１であ る、請求項１から４までのいずれか１項記載の製薬学的調剤。

６、　付加的に塩素イオンを特徴する請求項１から５までのいずれか１項記載の 製薬学的調剤。

７、Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／１．ｐＨ６およびアスコルビン酸０．１〜１ モル／ｌ、有利に０．２〜０．３モル／ｌを特徴する請求項１記載の製薬学的調 剤。

８、Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびＥＤＴＡＩ〜２００ミリモ ル／１．有利に１０−１００ミリモル／ｌを特徴する請求項１記載の製薬学的調 剤。

９、Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびタウリン０．１〜０．５モ ル／ｌ、有利に０．１〜０．３モル／ｌを特徴する請求項ｌ記載の製薬学的調剤 。

１０、Ｎａクエン酸塩／ＨＣＩ　５０ミリモル／Ｉ、ｐＨ６および４−アミノブ タノール−１，５−アミノペンタノール−１，６−アミノへキサノール−１，１ ，３−ジアミノプロパン、１．４−ジアミノブタン、１．５−ジアミノペンタン 、１．６−ジアミツヘキサン、１．７−ジアミノへブタン、１．８−ジアミノオ クタンまたは１゜９−ジアミノノナン１０〜１００ミリモル／ｌを特徴する請求 項１記載の製薬学的調剤。

１１、Ｎａクエン酸塩／ＨＣＩ　５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびグアニジノ酪 酸ｌＯ〜２００ミリモル／１．有利に５０〜１００ミリモル／ｌを特徴する請求 項ｌ記載の製薬学的調剤。

１２、Ｎａクエン酸塩／ＨＣ１５０ミリモル／１およびジメチルビグアニド５０ 〜４００ミリモル／ｌ、有利に１００〜３００ミリモル／１を特徴する請求項１ 記載の製薬学的調剤。

１３、Ｎａクエン酸塩／ＨＣＩ　５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６および７−アミノへ ブタン酸、８−アミノオクタン酸、δ−アミノバレリアン酸、γ−アミノ酪酸ま たはｐ−アミノメチルベンジェ酸０．５〜２０ミリモル／１、有利に１−１ｏミ リモル／１を特徴する請求項１記載の製薬学的調剤。

１４、Ｎａクエン酸塩／ＨＣ１５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびグルコサミンま たはフルクトース１〜５００ミリモル／Ｉ、有利に１０〜３００ミリモル／Ｉを 特徴する請求項１記載の製薬学的調剤。

１５、Ｎａクエン酸塩／ＨＣ：ｌ　５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびチミジン、 シトシンまたはウリジン１〜３００ミリモル／１、有利に１０〜３００ミリモル ／１を特徴する請求項１記載の製薬学的調剤。

１６、Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／１．ｐＨ６およびリンゴ酸、乳酸、フマル 酸または２−オキソグルタル酸１〜１０００ミリモル／１、有利に１０〜５００ ミリモル／ｌを特徴する請求環１記載の製薬学的調剤。

１７．Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／Ｉ、ｐＨ６および群ａ）からｉ）までから なる物質の組合せ物を特徴する請求項ｌ記載の製薬学的調剤。

１８、作用物質としてｔ−ＰＡ−活性を有する工呈血塊を溶解するためのグリコ ジル化されたタンパク質を基礎とする製薬学的調剤において、請求項１から１７ までのいずれか１項による組成物が、場合により、常用の製薬学的添加剤、助剤 および／または担持剤を一緒に有することを特徴とする、グリコジル化されたタ ンパク質を基礎とする製薬学的調剤。

１９、請求項１から１８までのいずれか１項記載の製薬学的調剤を製造する方法 において、ｔ−ＰＡ−活性を有するグリコジル化されたタンパク質を、請求項１ による群ａ）〜ｉ）からの少なくとも１つの物質と一緒に、適当な製薬学的投薬 形に変えることを特徴とする、製薬学的調剤の製造法。

ある、請求項１９記載の方法。

国際調査報告 １１“１＾１１１１″ＰＣＴ／ＥＰ　９０１０２２５２国際調査報告 ＥＰ　９００２２５２ ＳＡ　４２７６７ −−沁−＾帥−一角勧ＰＣＴ／ＥＰ卸１０２２５２

Claims (21)

【特許請求の範囲】
1. １．少くとも１．４ＭＵ／ｍｌの活性を有するｔ−ＰＡ−活性およびｐＨ値４． ５〜９を有する、グリコシル化されたタンパク質の製薬学的調剤において、クエ ン酸塩および次のもの： ａ）アスコルピン酸、 ｂ）ＥＤＴＡ、 ｃ）式： Ｒ１Ｒ２Ｎ−Ｒ−Ｘ 〔式中、ＸはＳＯ３Ｈ、Ｈ、ＮＨ２またはＯＨを表わし、ＲはＣ１−Ｃ９−アル キレン、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキレンまたはベンジリデンを表わし、かつＲ１ かよびＲ２は互いに無関係にＨまたはＣ１−Ｃ３−アルキルを表わす〕のアミノ 化合物、 ｄ）グアニジノ酪酸、 ｅ）ジメチルビグアニド、 ｆ）７−アミノヘプタン酸、８−アミノオクタン酸、ｐ−アミノメチルペンゾエ 酸、δ−アミノパレリアン酸、γ−アミノ酪酸、 ｇ）グルコサミン、フルクトース、 ｈ）ピリミジンヌクレオシドおよびピリミジンヌクレオチド ｉ）１つまたは２つ以上のヒドロキシ基、ケト基および／または他のカルボキシ 基によって置換されているカルボン酸 からの群からなる、少くとも１つの化合物とを含有することを特徴とする、製薬 学的調剤。
2. ２．アミノ化合物タウリン、４−アミノプタノール−１、５−アミノペンタノー ル−１，６−アミノヘキサノール−１、１，９−ジアミノノナン、１，８−ジア ミノオクタン、１，７−ジアミノヘプタン、１，６−ジアミノヘキサノ、１，５ −ジアミノペンタン、１，４−ジアミノブタンまたは１，３−ジアミノプロパン である、請求の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
3. ３．１つまたは２つ以上のヒドロキシ基、ケト基おわび／または他のカルボキシ 基によって置換されているカルボン酸がリンゴ酸、乳酸、フマル酸または２−オ キソグルタル酸である、請求の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
4. ４．付加的に１つまたは２つ以上のアミノ酸を含有する、請求の範囲第１項に記 載の製薬学的調剤。
5. ５．クエン酸塩濃度が５〜１００ミリモル／ｌ、有利に５０ミリモル／ｌである 、請求の範囲第１項から第４項までのいずれか１項に記載の製薬学的調剤。
6. ６．付加的に塩素イオンを含有する、請求の範囲第１項から第５項までのいずれ か１項に記載の製薬学的調剤。
7. ７．Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびアスコルピン酸０．１〜１ モル／ｌ、有利に０．２〜０．３モル／ｌを含有する、請求の範囲第１項に記載 の製薬学的調剤。
8. ８．Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６および別ＤＴＡ１〜２００ミリモ ル／ｌ、有利に１０〜１００ミリモル／ｌを含有する、請求の範囲第１項に記載 の製薬学的調剤。
9. ９．Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびタウリン０．１〜０．５モ ル／ｌ、有利に０．１〜０．３モル／ｌを含有する、請求の範囲第１項に記載の 製薬学的調剤。
10. １０．Ｎａクエン酸塩／ＨＣｌ５ミリモル／ｌ、ｐＨ６および４−アミノプタノ ール−１，５−アミノペンタノール−１、６−アミノヘキサノール−１、１，３ −ジアミノプロパン、１，４−ジアミノブタン、１，５−ジアミノペンタン、１ ，６−ジアミノヘキサン、１，７−ジアミノヘプタン、１，８−ジアミノオクタ ンまたは１，９−ジアミノノナン１０〜１００ミリモル／ｌを含有する、請求の 範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
11. １１．Ｎａクエン酸塩／ＨＣｌ５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびグアニジノ酪酸 １０〜２００ミリモル／ｌ、有利に５０〜１００ミリモル／ｌを含有する、請求 の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
12. １２．Ｎａクエン酸塩／ＨＣｌ５０ミリモル／ｌおよびアジメチルピグアニド５ ０〜４００ミリモル／ｌ、有利に１００〜３００ミリモル／ｌを含有する、請求 の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
13. １３．Ｎａクエン酸塩／ＨＣｌ５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６心よび７−アミノヘプ タン酸、８−アミノオクタン酸、δ−アミノパレリアン酸、γ−アミノ酪酸また はｐ−アミノメチルペンゾエ酸０．５、２０ミリモル／ｌ、有利に１〜１０ミリ モル／ｌを含有する、請求の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
14. １４．Ｎａクエン酸塩／ＨＣり５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６尾よびグルコサミンま たはフルクトース１〜５００ミリモル／ｌ、有利に１０〜３００ミリモル／ｌを 含有する、請求の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
15. １５．Ｎａクエン酸塩／ＨＣｌ５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびチミジン、シト シンまたはウリジン１〜３００ミリモル／ｌ、有利に１０〜３００ミリモル／ｌ を含有する、請求の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
16. １６．Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６およびリンゴ酸、乳酸、フマル 酸または２−オキソグルタル酸１〜１０００ミリモル／ｌ、有利に１０〜５００ ミリモル／ｌを含有する、請求の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
17. １７．Ｎａクエン酸塩５０ミリモル／ｌ、ｐＨ６および群ａ）からｉ）までから なる物質の組合せ物を含有する、請求の範囲第１項に記載の製薬学的調剤。
18. １８．作用物質としてｔ−ＰＡ−活性を有するグリコシル化されたタンパク質を 基礎とする製薬学的調剤において、請求の範囲第１項から第１７項までのいずれ か１項による組成物が、場合により、常用の製薬学的添加剤、助剤および／また は担持剤を一緒に有することを特徴とする、グリコシル化されたタンパク質を基 礎とする製薬学的調剤。
19. １９．請求の範囲第１項から第１８項までのいずれか１項に記載の製薬学的調剤 を製造する方法において、ｔ−ＰＡ−活性を有するグリコシル化されたタンパク 質を、請求の範囲第１項による群ａ）〜ｉ）からの少くとも１つの物質と一緒に 、適当な製薬学的投薬形に変えることを特徴とする、製薬学的調剤の製造法。
20. ２０．製薬学的投薬形が注射液または凍結乾燥物である、請求の範囲第１９項に 記載の方法。
21. ２１．請求の範囲第１項から第１８項までのいずれか１項に記載の製薬学的調剤 製造のための、ｔ−ＰＡ活性を有するグリコシル化されたタンパク質の使用。