JPH0453497A - 血液細胞処理剤 - Google Patents
血液細胞処理剤Info
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- JPH0453497A JPH0453497A JP2162794A JP16279490A JPH0453497A JP H0453497 A JPH0453497 A JP H0453497A JP 2162794 A JP2162794 A JP 2162794A JP 16279490 A JP16279490 A JP 16279490A JP H0453497 A JPH0453497 A JP H0453497A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- blood cell
- molded product
- treatment agent
- insoluble carrier
- treating agent
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- Pending
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、血液細胞に作用して有用物質を産生させ得る
血液細胞処理剤および当該処理剤による各種有用物質の
製造方法に関する。
血液細胞処理剤および当該処理剤による各種有用物質の
製造方法に関する。
（従来の技術）
生理活性物質を不溶性担体に固定化したものはアフィニ
ティークロマトグラフ用吸着剤、治療用血液処理剤、抗
菌性材料その他分析用試薬などとして広く利用されてお
り、今後さらに幅広い応用が期待される重要な物質であ
る。
ティークロマトグラフ用吸着剤、治療用血液処理剤、抗
菌性材料その他分析用試薬などとして広く利用されてお
り、今後さらに幅広い応用が期待される重要な物質であ
る。
治療用血液処理剤のなかでも血液細胞を対象としたもの
としてはダラム陰性菌細胞壁由来のリポ多糖体を固定化
したもの（特開昭５９−２１１４５）やポー、クラッド
マイトジェン等の植物レクチンを固定化したもの〔須賀
原はか、人口臓器 １８（３）。
としてはダラム陰性菌細胞壁由来のリポ多糖体を固定化
したもの（特開昭５９−２１１４５）やポー、クラッド
マイトジェン等の植物レクチンを固定化したもの〔須賀
原はか、人口臓器 １８（３）。
１４０１ （１９８９）：］等が知られているが、これ
等は毒性の強い物質を固定化したものである。
等は毒性の強い物質を固定化したものである。
従って、それらの使用時にこれらリガンドの溶出があっ
てはならないが、化学構造が複雑な天然物を固定化した
ものであるため、その可能性が皆無である補償がないと
いう問題点があり、また、リガンドが高分子であるため
その分子の中に複数の活性部位を持ち、それ故その作用
が複雑であるという問題点がある。
てはならないが、化学構造が複雑な天然物を固定化した
ものであるため、その可能性が皆無である補償がないと
いう問題点があり、また、リガンドが高分子であるため
その分子の中に複数の活性部位を持ち、それ故その作用
が複雑であるという問題点がある。
（発明が解決しようとする課題）
本発明者らは、かかる従来技術の問題点に鑑み、毒性の
ない低分子化合物を不溶性担体に固定化し、これを血液
細胞と接触させることによってサイトカイン等の有用物
質を産生させられないか検討した結果、細胞膜の構成成
分であるＮ−グリコリルノイラミン酸を固定化したもの
が単核球系細胞にインターロイキン−１、インターロイ
キン−６、ＴＮＦＳＧ−Ｃ８ＦおよびＧＭ−Ｃ８Ｆ等を
産生させることを見出だし、本発明に到達した。
ない低分子化合物を不溶性担体に固定化し、これを血液
細胞と接触させることによってサイトカイン等の有用物
質を産生させられないか検討した結果、細胞膜の構成成
分であるＮ−グリコリルノイラミン酸を固定化したもの
が単核球系細胞にインターロイキン−１、インターロイ
キン−６、ＴＮＦＳＧ−Ｃ８ＦおよびＧＭ−Ｃ８Ｆ等を
産生させることを見出だし、本発明に到達した。
すなわち、本発明は、血液細胞に作用してサイトカイン
等の有用物質を産生させ得る新規血液細胞処理剤を提供
することを目的とするものである。
等の有用物質を産生させ得る新規血液細胞処理剤を提供
することを目的とするものである。
さらに、本発明は、このような血液処理剤を使用したサ
イトカインの製造方法を提供することを目的とするもの
である。
イトカインの製造方法を提供することを目的とするもの
である。
（課題を解決するための手段）
このような目的を達成するための本発明の構成は、以下
の（１）〜（６）の技術的手段から構成される。
の（１）〜（６）の技術的手段から構成される。
（１）不溶性担体の表面にＮ−グリコリルノイラミン酸
をアミド結合で固定化して成る血液細胞処理剤。
をアミド結合で固定化して成る血液細胞処理剤。
（２）不溶性担体が、シャーレ、瓶、膜、繊維、中空糸
、粒状物またはこれ等を用いた組み立て品であることを
特徴とする上記（１）記載の血液細胞処理剤。
、粒状物またはこれ等を用いた組み立て品であることを
特徴とする上記（１）記載の血液細胞処理剤。
（３）血液細胞を請求項第（１）項記載の血液細胞処理
剤と接触させることを特徴とするサイトカインの製造方
法。
剤と接触させることを特徴とするサイトカインの製造方
法。
（４）血液細胞が白血球であることを特徴とする請求項
第（３）項記載のサイトカインの製造方法。
第（３）項記載のサイトカインの製造方法。
（５）サイトカインが、インターロイキン−１であるこ
とを特徴とする請求項第（３）項または第（４）項記載
のサイトカインの製造方法。
とを特徴とする請求項第（３）項または第（４）項記載
のサイトカインの製造方法。
（６）不溶性担体が、スチレンまたはα−メチルスチレ
ンを主体とするビニル重合体成型品の表面にアミノメチ
ル基を導入したものであることを特徴とする請求項第（
１）項記載の血液細胞処理剤。
ンを主体とするビニル重合体成型品の表面にアミノメチ
ル基を導入したものであることを特徴とする請求項第（
１）項記載の血液細胞処理剤。
本発明でいう不溶性担体とは、実質上不溶性で、第１級
または第２級アミノ基を有し、かつ、Ｎグリコリルノイ
ラミン酸をアミド結合で固定することのできる担体を意
味する。該不溶性担体の形状はシャーレ、瓶、管、膜、
繊維、中空糸、粒状物またはこれ等を用いた組み立て品
のいずれでもよいが、とりわけ、これ等に光透過性があ
ると細胞の観察が容易にでき、細胞の管理がしやすいの
で好ましい。
または第２級アミノ基を有し、かつ、Ｎグリコリルノイ
ラミン酸をアミド結合で固定することのできる担体を意
味する。該不溶性担体の形状はシャーレ、瓶、管、膜、
繊維、中空糸、粒状物またはこれ等を用いた組み立て品
のいずれでもよいが、とりわけ、これ等に光透過性があ
ると細胞の観察が容易にでき、細胞の管理がしやすいの
で好ましい。
本発明でいう不溶性担体の具体例をあげると、■スチレ
ンまたはα−メチルスチレンの単独重合体もしくはこれ
らを主成分とする芳香族ビニル系共重合体をシャーレ、
試験管、管、フィルム、瓶、注射筒、カテーテルなどに
成型したものの表面にアミノメチル基を導入したもの、
■スチレン／エチレン会ブチレンのＡＢＡブロックコポ
リマの膜にアミノメチル基を導入したもの、■ポリプロ
ピレン補強ポリスチレン繊維の表面にアミノメチル基を
導入したもの、■ポリスチレンまたはスチレン・ジビニ
ルベンゼン共重合体ビーズに、アミノメチル基を芳香核
置換基として導入したもの、■アミノプロピル化ガラス
ピーズなどがあげられるが、これ等に限定されるもので
はない。また、これらのなかでも、■と■が光透過性が
高く、且つ、取り扱いやすいので、特に、好ましく用い
られる。
ンまたはα−メチルスチレンの単独重合体もしくはこれ
らを主成分とする芳香族ビニル系共重合体をシャーレ、
試験管、管、フィルム、瓶、注射筒、カテーテルなどに
成型したものの表面にアミノメチル基を導入したもの、
■スチレン／エチレン会ブチレンのＡＢＡブロックコポ
リマの膜にアミノメチル基を導入したもの、■ポリプロ
ピレン補強ポリスチレン繊維の表面にアミノメチル基を
導入したもの、■ポリスチレンまたはスチレン・ジビニ
ルベンゼン共重合体ビーズに、アミノメチル基を芳香核
置換基として導入したもの、■アミノプロピル化ガラス
ピーズなどがあげられるが、これ等に限定されるもので
はない。また、これらのなかでも、■と■が光透過性が
高く、且つ、取り扱いやすいので、特に、好ましく用い
られる。
■の場合、成型品の厚みには特に制限はないが、実用に
耐える強度を維持するためには、通常、１００ミクロン
以上の厚みを持つものが好ましく用いられる。また、そ
の光透過性に関しては該成型品の底面または側面の反対
側に存在する物質の形を確認可能にするに十分な光透過
性を有することが望ましい。該成型品の光透過性は主と
して表面での散乱によって決まるので、表面が完全に平
滑でなければならない。該成型品の場合、５００〜７０
０ナノメーターの波長の光に対する吸光度が３以下、と
りわけ、１以下であることが必要である。二の吸光度が
小さいほど該成型品の光透過性が良く、吸光度が０．１
以下であればさらに好ましい。
耐える強度を維持するためには、通常、１００ミクロン
以上の厚みを持つものが好ましく用いられる。また、そ
の光透過性に関しては該成型品の底面または側面の反対
側に存在する物質の形を確認可能にするに十分な光透過
性を有することが望ましい。該成型品の光透過性は主と
して表面での散乱によって決まるので、表面が完全に平
滑でなければならない。該成型品の場合、５００〜７０
０ナノメーターの波長の光に対する吸光度が３以下、と
りわけ、１以下であることが必要である。二の吸光度が
小さいほど該成型品の光透過性が良く、吸光度が０．１
以下であればさらに好ましい。
本発明の血液細胞処理剤の製造は、不溶性担体をＮ−グ
リコリルノイラミン酸とカルボジイミドの混合溶液に加
えるか、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルで代表
される活性エステルの溶液中に浸漬することにより容易
に達成される。
リコリルノイラミン酸とカルボジイミドの混合溶液に加
えるか、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルで代表
される活性エステルの溶液中に浸漬することにより容易
に達成される。
本発明でいうサイトカインとは、インターロイキン−１
、インターロイキン−２、インターロイキン−６等で代
表されるインターロイキン類、ＧＭ−Ｃ３ＦＳＧ−Ｃ８
Ｆ等で代表されるコロニ刺激因子、インターフェロン、
ＴＮＦ等を意味する。
、インターロイキン−２、インターロイキン−６等で代
表されるインターロイキン類、ＧＭ−Ｃ３ＦＳＧ−Ｃ８
Ｆ等で代表されるコロニ刺激因子、インターフェロン、
ＴＮＦ等を意味する。
本発明で用いるＮ−グリコリルノイラミン酸は動物界に
広く存在する炭素数が９個のα−ケト酸であるが、有機
合成の手段でも得ることができる。
広く存在する炭素数が９個のα−ケト酸であるが、有機
合成の手段でも得ることができる。
水酸基をカルボン酸エステルにしたものも細胞が分泌す
る加水分解酵素によって容易に脱エステル化されるので
、同様に用いることができる。なお、この物は固定化し
ない状態ではサイトカインの誘導能は殆どない。不溶性
担体に固定化して初めて活性がでる。
る加水分解酵素によって容易に脱エステル化されるので
、同様に用いることができる。なお、この物は固定化し
ない状態ではサイトカインの誘導能は殆どない。不溶性
担体に固定化して初めて活性がでる。
コロニー刺激因子は軟寒天中で顆粒球、マクロファージ
の幹細胞を刺激して、成熟した顆粒球やマクロファージ
から成るコロニーを形成させる特異的刺激因子として知
られている糖蛋白質である。
の幹細胞を刺激して、成熟した顆粒球やマクロファージ
から成るコロニーを形成させる特異的刺激因子として知
られている糖蛋白質である。
コロニー刺激因子の中には、ＧＭ−Ｃ８ＦＳＧ−Ｃ８Ｆ
ＳＭ−Ｃ８Ｆ等があることが知られている。
ＳＭ−Ｃ８Ｆ等があることが知られている。
また、これ等は、単球、マクロファージ、線維芽細胞、
血管内皮細胞、骨髄ストローマ等によって産生されるこ
とが知られている。ＧＭ−Ｃ８Ｆは白血球の数の増加だ
けでなく、顆粒球機能の光道の作用もあることが知られ
ており、骨髄性白血病の治療、ＡＩＤＳや癌の化学療法
後の白血球減少症の治療のためにも使われている（実験
医学 ７（１５）（増刊＞１９８−２０３ （１９８９
））。
血管内皮細胞、骨髄ストローマ等によって産生されるこ
とが知られている。ＧＭ−Ｃ８Ｆは白血球の数の増加だ
けでなく、顆粒球機能の光道の作用もあることが知られ
ており、骨髄性白血病の治療、ＡＩＤＳや癌の化学療法
後の白血球減少症の治療のためにも使われている（実験
医学 ７（１５）（増刊＞１９８−２０３ （１９８９
））。
また、Ｇ−Ｃ５Ｆも同様に重症感染症の予防や治療に用
いられる（実験医学 ７（１５）（増刊）１９１−１９
７ （１９８９））。
いられる（実験医学 ７（１５）（増刊）１９１−１９
７ （１９８９））。
インターロイキン−１、は白血球が産生ずる発熱物質と
して古くから知られているが、最近ではいろんな作用の
あることが知られており、特に抗腫瘍効果や造血促進作
用があり、臨床への利用が試みられている（実験医学
７（１５）（増刊）１７０−１７７ （１９８９））。
して古くから知られているが、最近ではいろんな作用の
あることが知られており、特に抗腫瘍効果や造血促進作
用があり、臨床への利用が試みられている（実験医学
７（１５）（増刊）１７０−１７７ （１９８９））。
血液細胞を本発明の血液細胞処理剤と接触させながら培
養すると、血液細胞は活性化されて、高濃度の種々のサ
イトカインを産生ずることが判明した。この場合、血液
細胞の中から単球だけを取り出して処理することもでき
るし、いろんな血液細胞の混合物を処理することも可能
である。産生されたサイトカイン、はｉｎ ｖｉｖｏお
よびｉｎ ｖｉｔｒ。
養すると、血液細胞は活性化されて、高濃度の種々のサ
イトカインを産生ずることが判明した。この場合、血液
細胞の中から単球だけを取り出して処理することもでき
るし、いろんな血液細胞の混合物を処理することも可能
である。産生されたサイトカイン、はｉｎ ｖｉｖｏお
よびｉｎ ｖｉｔｒ。
での白血球増加剤として利用できる。
本発明の血液細胞処理剤の利用としては、例えば、血液
回路、細胞培養用器具、体外循環用カラム充填材料等へ
の利用があげられる。
回路、細胞培養用器具、体外循環用カラム充填材料等へ
の利用があげられる。
（発明の効果）
本発明の血液細胞処理剤は、■サイトカイン等の有用物
の産生に用いることができること、■化学的に安定なア
ミド結合で固定化されているので、溶出の心配がないこ
と、■万一、溶出しても無毒な化合物であること、等の
利点を有する。
の産生に用いることができること、■化学的に安定なア
ミド結合で固定化されているので、溶出の心配がないこ
と、■万一、溶出しても無毒な化合物であること、等の
利点を有する。
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。
なお、実施例中の評価方法は、以下に従った。
１、芳香族ビニル系重合体成型品の化学的解析成型品を
塩化メチレンでソックスレー抽出すると不溶性の膜状物
が得られるので、これを真空乾燥し、重量を量り、赤外
線吸収スペクトル測定等を行った。
塩化メチレンでソックスレー抽出すると不溶性の膜状物
が得られるので、これを真空乾燥し、重量を量り、赤外
線吸収スペクトル測定等を行った。
２、赤外線吸収スペクトル
島津フーリエ変換赤外分光光度計ＦＴ Ｉ Ｒ−４３０
０を用いＫＢｒ錠剤法で測定した。
０を用いＫＢｒ錠剤法で測定した。
３、成型品の光透過性の測定
島津分光光度計ＵＶ２１００を用い、５００ナノメータ
ーで板状成型品に垂直方向の吸光度を測定した。対照と
して同じ厚さのポリスチレン板状成型品の吸光度を測定
し、両者の差をＡ３００とした。従って、その値が小さ
いほど成型品の光透過性が高いことになる。
ーで板状成型品に垂直方向の吸光度を測定した。対照と
して同じ厚さのポリスチレン板状成型品の吸光度を測定
し、両者の差をＡ３００とした。従って、その値が小さ
いほど成型品の光透過性が高いことになる。
４、Ｎ−グリコリルノイラミン酸の定量シアル酸の定量
法（生化学実験法 ２３ 糖蛋白質実験法 １７頁 学
会出版センター）にもとずいて、蛍光標識１，２−ジア
ミノ−４，５−メチレンジオキシベンゼンを反応させ、
高速液体クロマトグラフィーで定量した。
法（生化学実験法 ２３ 糖蛋白質実験法 １７頁 学
会出版センター）にもとずいて、蛍光標識１，２−ジア
ミノ−４，５−メチレンジオキシベンゼンを反応させ、
高速液体クロマトグラフィーで定量した。
５、サイトカインの定量
インターロイキン−１はＭＴＴ法（Ｔ 、 Ｍｏ５ｎ＋
ａｎジヤーナル オブ ザ イミュノロジカル メソッ
ズ ６５５５〜６３ （１９８３））により分析した。
ａｎジヤーナル オブ ザ イミュノロジカル メソッ
ズ ６５５５〜６３ （１９８３））により分析した。
ＴＮＦはＬ９２９をインジケーターセルとした殺細胞能
により定量した。
により定量した。
実施例１゜
１−ニトロプロパン５００ｍ１と硫酸２７２ｍ１の混合
溶液を０℃に冷却し、２０．４ｇのＮ−メチロールーα
−クロルアセトアミドを加え、０〜１０℃で溶解した。
溶液を０℃に冷却し、２０．４ｇのＮ−メチロールーα
−クロルアセトアミドを加え、０〜１０℃で溶解した。
この溶液を１０℃に昇温したのち、φ３．５ｃｍＸ１．
２ｍｍＨのポリスチレン製培養皿（厚み１ｍｍ）に１１
ｍ１ずつ入れ、室温でｌｈｒ反応させた。反応液を捨て
、培養皿を零下２０℃のメタノールに浸し、さらにメタ
ノ−および水で洗った後、真空乾燥して、内部表面だけ
クロルアセトアミドメチル化された成型品Ａを得た。こ
の成型品のＡ ５００は０．０５０であった。
２ｍｍＨのポリスチレン製培養皿（厚み１ｍｍ）に１１
ｍ１ずつ入れ、室温でｌｈｒ反応させた。反応液を捨て
、培養皿を零下２０℃のメタノールに浸し、さらにメタ
ノ−および水で洗った後、真空乾燥して、内部表面だけ
クロルアセトアミドメチル化された成型品Ａを得た。こ
の成型品のＡ ５００は０．０５０であった。
上記で得た成型品Ａ１個を、塩化メチレンでソックスレ
ー抽出したところ、薄膜状の不溶物３．１■ｇが得られ
た。培養皿の反応面の表面積は２１ｃｄであるので、反
応部の厚みは大体１．２μと考えられる。また、この不
溶物の赤外線吸収スペクトルでは、１６５９ｃｍ−１（
アミド−Ｉ） 、１５２９ｃｍ”（アミド−■）および
３２９７ｃｍ ” （Ｎ−Ｈ）にアミド基の強い吸収が
認められたことからその構造を確認した。
ー抽出したところ、薄膜状の不溶物３．１■ｇが得られ
た。培養皿の反応面の表面積は２１ｃｄであるので、反
応部の厚みは大体１．２μと考えられる。また、この不
溶物の赤外線吸収スペクトルでは、１６５９ｃｍ−１（
アミド−Ｉ） 、１５２９ｃｍ”（アミド−■）および
３２９７ｃｍ ” （Ｎ−Ｈ）にアミド基の強い吸収が
認められたことからその構造を確認した。
上記で得た成型品Ａ４０個を、２０００ｍ１の１０％ジ
メチルアミノエタノール・ジメチルスルホキサイド溶液
中に浸し、室温で１８ｈｒ静置した後、２０００ｍ１の
１０％ジメチルアミノエタノール水溶液中、７０℃で２
ｈｒ加熱した。成型品を水洗後、乾燥して、アミノメチ
ル化成型品Ｂを得た。
メチルアミノエタノール・ジメチルスルホキサイド溶液
中に浸し、室温で１８ｈｒ静置した後、２０００ｍ１の
１０％ジメチルアミノエタノール水溶液中、７０℃で２
ｈｒ加熱した。成型品を水洗後、乾燥して、アミノメチ
ル化成型品Ｂを得た。
この成型品のＡ、。。は０．０５であった。
上記本発明の成型品Ｂ１個を、塩化メチレンでソックス
レー抽出したところ、薄膜状の不溶物２．３■が得られ
た。この不溶物の赤外線吸収スペクトルでは、成型品Ａ
で認められた１６５９ｃｍ−１（アミド−■）および１
５２９ｃｍ−’（アミド−■）の第一級アミド基の強い
吸収Ｃｍ−１が完全に消失していたことからその構造を
確認した。
レー抽出したところ、薄膜状の不溶物２．３■が得られ
た。この不溶物の赤外線吸収スペクトルでは、成型品Ａ
で認められた１６５９ｃｍ−１（アミド−■）および１
５２９ｃｍ−’（アミド−■）の第一級アミド基の強い
吸収Ｃｍ−１が完全に消失していたことからその構造を
確認した。
上記本発明の成型品８１０個を５００ｍ１の水に浸し、
Ｎ／１００−塩酸でｐＨ５〜６に調整した後、成型品Ｂ
の各々の内部に０． ２■ｇ／ｍｌのＮ−グリコリルノ
イラミン酸水溶液４ｍｌと１−エチル−３−（３−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩４■を加え
、室温で４８ｈｒ静置した。反応液を捨て、水洗して、
本発明の血液細胞処理剤である成型品Ｃを得た。母液中
のＮ−グリコリルノイラミン酸の濃度から０．０１２ｍ
ｇ固定化されたことが確認された。また、成型品上のＮ
−グリコリルノイラミン酸はＮ／４Ｏ−ＮａＯＨで洗浄
しても溶出の無いことを確認した。
Ｎ／１００−塩酸でｐＨ５〜６に調整した後、成型品Ｂ
の各々の内部に０． ２■ｇ／ｍｌのＮ−グリコリルノ
イラミン酸水溶液４ｍｌと１−エチル−３−（３−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩４■を加え
、室温で４８ｈｒ静置した。反応液を捨て、水洗して、
本発明の血液細胞処理剤である成型品Ｃを得た。母液中
のＮ−グリコリルノイラミン酸の濃度から０．０１２ｍ
ｇ固定化されたことが確認された。また、成型品上のＮ
−グリコリルノイラミン酸はＮ／４Ｏ−ＮａＯＨで洗浄
しても溶出の無いことを確認した。
実施例２
マウスマクロファージ株ＴＭＥ９ （小川恭喜ほか、日
本免疫学会総会・学術集会記録、１７５９９ （１９８
７））を３Ｘ１０−５Ｍの２−メルカプトエタノール、
５０Ｕ／ｍｌのペニシリン（万有）、５０μｇ ／ ｍ
ｌのストレプトマイシン（明治製菓）およびウシ胎児血
清を１０％含むＲＰＭ１１６４０（Ｇｉｂｃｏ）に３Ｘ
１０−’個／ｍｌ浮遊したものを、実施例１で得られた
、Ｎ−グリコリルノイラミン酸を固定化した２個の成型
品Ｃ（紫外線照射滅菌）とＮ−グリコリルノイラミン酸
を固定化してない２個の成型品Ａおよび２個の成型品Ｂ
（共に紫外線照射滅菌）とに１ｍｌずつ入れ、インキュ
ベーター中（３７℃、５％Ｃ０２）で２０ｈｒ培養した
。培養上清を取ってその中のサイトカインを調べたとこ
ろ、Ｎ−グリコリルノイラミン酸を固定化した２個の成
型品ではインターロイキン１は４ 、 ５ Ｕ ／ ｍ
ｌ、ＴＮＦは９．８Ｕ／ｍｌ、といずれも高い活性が認
められた。一方、Ｎ−グリコリルノイラミン酸を固定化
してない成型品Ａおよび成型品Ｂでは、いずれも、イン
ターロイキン−１は１，５Ｕ／ｍ１以下、ＴＮＦは０．
３Ｕ／ｍ１以下と活性が認められ無かった。また、Ｎ−
グリコリルノイラミン酸のかわりにラクトビオン酸を実
施例１と同様に固定化した成型品（固定化量０゜０６８
ｍｇ：紫外線照射滅菌）でもインターロイキン−１は１
．５Ｕ／ｍ１以下、ＴＮＦは０．３Ｕ／ｍ１以下と活性
が認められ無かった。
本免疫学会総会・学術集会記録、１７５９９ （１９８
７））を３Ｘ１０−５Ｍの２−メルカプトエタノール、
５０Ｕ／ｍｌのペニシリン（万有）、５０μｇ ／ ｍ
ｌのストレプトマイシン（明治製菓）およびウシ胎児血
清を１０％含むＲＰＭ１１６４０（Ｇｉｂｃｏ）に３Ｘ
１０−’個／ｍｌ浮遊したものを、実施例１で得られた
、Ｎ−グリコリルノイラミン酸を固定化した２個の成型
品Ｃ（紫外線照射滅菌）とＮ−グリコリルノイラミン酸
を固定化してない２個の成型品Ａおよび２個の成型品Ｂ
（共に紫外線照射滅菌）とに１ｍｌずつ入れ、インキュ
ベーター中（３７℃、５％Ｃ０２）で２０ｈｒ培養した
。培養上清を取ってその中のサイトカインを調べたとこ
ろ、Ｎ−グリコリルノイラミン酸を固定化した２個の成
型品ではインターロイキン１は４ 、 ５ Ｕ ／ ｍ
ｌ、ＴＮＦは９．８Ｕ／ｍｌ、といずれも高い活性が認
められた。一方、Ｎ−グリコリルノイラミン酸を固定化
してない成型品Ａおよび成型品Ｂでは、いずれも、イン
ターロイキン−１は１，５Ｕ／ｍ１以下、ＴＮＦは０．
３Ｕ／ｍ１以下と活性が認められ無かった。また、Ｎ−
グリコリルノイラミン酸のかわりにラクトビオン酸を実
施例１と同様に固定化した成型品（固定化量０゜０６８
ｍｇ：紫外線照射滅菌）でもインターロイキン−１は１
．５Ｕ／ｍ１以下、ＴＮＦは０．３Ｕ／ｍ１以下と活性
が認められ無かった。
同様に、インターロイキン−６、Ｇ−Ｃ８Ｆ。
ＧＭ−Ｃ８Ｆなどのサイトカインが高濃度に産生される
ことが確認された。
ことが確認された。
Claims (6)
- （１）不溶性担体の表面にＮ−グリコリルノイラミン酸
をアミド結合で固定化して成る血液細胞処理剤。 - （２）不溶性担体の形状が、シャーレ、瓶、膜、繊維、
中空糸、粒状物またはこれ等を用いた組み立て品である
ことを特徴とする請求項第（１）項記載の血液細胞処理
剤。 - （３）血液細胞を請求項第（１）項記載の血液細胞処理
剤と接触させることを特徴とするサイトカインの製造方
法。 - （４）血液細胞が白血球であることを特徴とする請求項
第（３）項記載のサイトカインの製造方法。 - （５）サイトカインが、インターロイキン−１であるこ
とを特徴とする請求項第（３）項または第（４）項記載
のサイトカインの製造方法。 - （６）不溶性担体が、スチレンまたはα−メチルスチレ
ンを主体とするビニル重合体成型品の表面にアミノメチ
ル基を導入したものであることを特徴とする請求項第（
１）項記載の血液細胞処理剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2162794A JPH0453497A (ja) | 1990-06-22 | 1990-06-22 | 血液細胞処理剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2162794A JPH0453497A (ja) | 1990-06-22 | 1990-06-22 | 血液細胞処理剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0453497A true JPH0453497A (ja) | 1992-02-21 |
Family
ID=15761336
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2162794A Pending JPH0453497A (ja) | 1990-06-22 | 1990-06-22 | 血液細胞処理剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0453497A (ja) |
-
1990
- 1990-06-22 JP JP2162794A patent/JPH0453497A/ja active Pending
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