JPH048295A - 血液細胞処理剤 - Google Patents
血液細胞処理剤Info
- Publication number
- JPH048295A JPH048295A JP2108653A JP10865390A JPH048295A JP H048295 A JPH048295 A JP H048295A JP 2108653 A JP2108653 A JP 2108653A JP 10865390 A JP10865390 A JP 10865390A JP H048295 A JPH048295 A JP H048295A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- blood cell
- lactose
- treatment agent
- cytokine
- cell treatment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、血液細胞に作用して有用物質を産生させ得る
血液細胞処理剤およびサイトカインの製造方法に関する
。
血液細胞処理剤およびサイトカインの製造方法に関する
。
（従来の技術）
生理活性物質を不溶性担体に固定化したものはアフィニ
ティークロマトグラフ用吸着剤、治療用血液処理剤、抗
菌性材料その他分析用試薬などとして広く利用されてお
り、今後さらに幅広い応用が期待される重要な物質であ
る。
ティークロマトグラフ用吸着剤、治療用血液処理剤、抗
菌性材料その他分析用試薬などとして広く利用されてお
り、今後さらに幅広い応用が期待される重要な物質であ
る。
治療用血液処理剤のなかでも血液細胞を対象としたもの
としてはダラム陰性菌細胞壁由来のりポ多糖体を固定化
したもの（特開昭５９−２１１４５）やボークウッドマ
イトジェン等の植物レクチンを固定化したもの〔須賀原
はか、人口臓器 １８（３）。
としてはダラム陰性菌細胞壁由来のりポ多糖体を固定化
したもの（特開昭５９−２１１４５）やボークウッドマ
イトジェン等の植物レクチンを固定化したもの〔須賀原
はか、人口臓器 １８（３）。
１４０１ （１９’８９）Ｅ等が知られているが、これ
等は毒性の強い物質を固定化′したものである。
等は毒性の強い物質を固定化′したものである。
従って、それらの使用時にこれらリガンドの溶出があっ
てはならないが、化学構造が複雑な天然物を固定化した
ものであるため、その可能性が皆無である補償がない欠
点があり、また、リガンドが高分子であるためその分子
の中に複数の活性部位を持ち、それ故その作用が複雑で
ある欠点がある。
てはならないが、化学構造が複雑な天然物を固定化した
ものであるため、その可能性が皆無である補償がない欠
点があり、また、リガンドが高分子であるためその分子
の中に複数の活性部位を持ち、それ故その作用が複雑で
ある欠点がある。
（発明が解決しようとする課題）
本発明者らは、かかる従来技術の問題点に鑑み、毒性の
ない低分子化合物を不溶性担体に固定化し、これを血液
細胞と接触させることによって有用なサイトカイン等を
産生させられないか検討した結果、哺乳動物の初乳中に
含まれるＮ−アセチルノイラミンラクトースを固定化し
たものが単核球系細胞にインターロイキン−１、インタ
ーロイキン−６、ＴＮＦ、Ｇ−Ｃ５ＦおよびＧＭ−Ｃ５
Ｆ等を産生させることを見出だし、本発明に到達した。
ない低分子化合物を不溶性担体に固定化し、これを血液
細胞と接触させることによって有用なサイトカイン等を
産生させられないか検討した結果、哺乳動物の初乳中に
含まれるＮ−アセチルノイラミンラクトースを固定化し
たものが単核球系細胞にインターロイキン−１、インタ
ーロイキン−６、ＴＮＦ、Ｇ−Ｃ５ＦおよびＧＭ−Ｃ５
Ｆ等を産生させることを見出だし、本発明に到達した。
（課題を解決するための手段）
本発明は、以下の（１）〜（７）の技術的手段から構成
される。
される。
（１）不溶性担体の表面にＮ−アシルノイラミンラクト
ースをアミド結合で固定化して成る血液細胞処理剤。
ースをアミド結合で固定化して成る血液細胞処理剤。
（２）不溶性担体の形状が、シャーレ、瓶、膜、繊維、
中空糸、粒状物またはこれ等を用いた組み立て品である
ことを特徴とする請求項第（１）項記載の血液細胞処理
剤。
中空糸、粒状物またはこれ等を用いた組み立て品である
ことを特徴とする請求項第（１）項記載の血液細胞処理
剤。
（３）血液細胞を請求項第（１）項記載の血液細胞処理
剤と接触させることを特徴とするサイトカインの製造方
法。
剤と接触させることを特徴とするサイトカインの製造方
法。
（４）血液細胞が、白血球であることを特徴とする請求
項第（３）項記載のサイトカインの製造方法。
項第（３）項記載のサイトカインの製造方法。
（５）サイトカインが、インターロイキン−１であるこ
とを特徴とする請求項第（３）項記載のサイトカインの
製造方法。
とを特徴とする請求項第（３）項記載のサイトカインの
製造方法。
（６）Ｎ−アシルノイラミンラクトースのアシル基が、
アセチル基であることを特徴とする請求項第（３）項記
載のサイトカインの製造方法。
アセチル基であることを特徴とする請求項第（３）項記
載のサイトカインの製造方法。
（７）不溶性担体がスチレンまたはα−メチルスチレン
を主体とするビニル重合体成型品の表面にアミノメチル
基を導入したものであることを特徴とする請求項第（１
）項記載の血液細胞処理剤。
を主体とするビニル重合体成型品の表面にアミノメチル
基を導入したものであることを特徴とする請求項第（１
）項記載の血液細胞処理剤。
本発明でいうＮ−アシルノイラミンラクトースとは、Ｎ
−アシルノイラミン酸の２位にラクトースをエーテル結
合で結合せしめたものを意味し、Ｎ−アシル基としては
、アセチル基、グリコリル基、プロピル基、ブチル基な
どの短鎖カルボン酸のアシル基が挙げられる。具体例と
しては、Ｎ−アシルノイラミン酸ヌク ノシル（１→４）−Ｄ−グルコビラノース、Ｎ−アセチ
ルノイラミル（２−６）β−ガラクトピラノシル（１−
４）−Ｄ−グルコビラノース等があげられる。
−アシルノイラミン酸の２位にラクトースをエーテル結
合で結合せしめたものを意味し、Ｎ−アシル基としては
、アセチル基、グリコリル基、プロピル基、ブチル基な
どの短鎖カルボン酸のアシル基が挙げられる。具体例と
しては、Ｎ−アシルノイラミン酸ヌク ノシル（１→４）−Ｄ−グルコビラノース、Ｎ−アセチ
ルノイラミル（２−６）β−ガラクトピラノシル（１−
４）−Ｄ−グルコビラノース等があげられる。
本発明でいう不溶性担体とは、実質上不溶性で、第１級
または第２級アミノ基を有し、かつ、Ｎ−アシルノイラ
ミンラクトースをアミド結合で固定することのできる担
体を意味する。該不溶性担体の形状はシャーレ、瓶、管
、膜、繊維、中空糸、粒状物またはこれ等を用いた組み
立て品のいずれでもよいが、とりわけ、これ等に光透過
性があると細胞の観察が容易にでき、細胞の管理がしや
すいので好ましい。
または第２級アミノ基を有し、かつ、Ｎ−アシルノイラ
ミンラクトースをアミド結合で固定することのできる担
体を意味する。該不溶性担体の形状はシャーレ、瓶、管
、膜、繊維、中空糸、粒状物またはこれ等を用いた組み
立て品のいずれでもよいが、とりわけ、これ等に光透過
性があると細胞の観察が容易にでき、細胞の管理がしや
すいので好ましい。
本発明でいう不溶性担体の具体例をあげると、■スチレ
ンまたはα−メチルスチレンの単独重合体もしくはこれ
らを主成分とする芳香族ビニル系共重合体をシャーレ、
試験管、管、フィルム、瓶、注射筒、カテーテルなどに
成型したものの表面にアミノメチル基を導入したもの、
■スチレン／エチレン・ブチレンのＡＢＡブロックコポ
リマの膜にアミノメチル基を導入したもの、■ポリプロ
ピレン補強ポリスチレン繊維の表面にアミノメチル基を
導入したもの、■ポリスチレンまたはスチレン・ジビニ
ルベンゼン共重合体ビーズに、アミノメチル基を芳香核
置換基として導入したもの、■アミノプロピル化ガラス
ピーズなどがあげられるが、これ等に限定されるもので
はない。また、これらのなかでも、■と■が光透過性が
高く、且つ、取り扱いやすいので、特に、好ましく用い
られる。
ンまたはα−メチルスチレンの単独重合体もしくはこれ
らを主成分とする芳香族ビニル系共重合体をシャーレ、
試験管、管、フィルム、瓶、注射筒、カテーテルなどに
成型したものの表面にアミノメチル基を導入したもの、
■スチレン／エチレン・ブチレンのＡＢＡブロックコポ
リマの膜にアミノメチル基を導入したもの、■ポリプロ
ピレン補強ポリスチレン繊維の表面にアミノメチル基を
導入したもの、■ポリスチレンまたはスチレン・ジビニ
ルベンゼン共重合体ビーズに、アミノメチル基を芳香核
置換基として導入したもの、■アミノプロピル化ガラス
ピーズなどがあげられるが、これ等に限定されるもので
はない。また、これらのなかでも、■と■が光透過性が
高く、且つ、取り扱いやすいので、特に、好ましく用い
られる。
■の場合、成型品の厚みには特に制限はないが、実用に
耐える強度を維持するためには、通常、１００ミクロン
以上の厚みを持つものが好ましく用いられる。また、そ
の光透過性に関しては該成型品の底面または側面の反対
側に存在する物質の形を確認可能にするに十分な光透過
性を有することが望ましい。該成型品の光透過性は主と
して表面での散乱によって決まるので、表面が完全に平
滑でなければならない。該成型品の場合、５００〜７０
０ナノメーターの波長の光に対する吸光度が３以下であ
ることが必要である。この吸光度が小さいほど該成型品
の光透過性が良（、吸光度が１以下であればさらに好ま
しい。
耐える強度を維持するためには、通常、１００ミクロン
以上の厚みを持つものが好ましく用いられる。また、そ
の光透過性に関しては該成型品の底面または側面の反対
側に存在する物質の形を確認可能にするに十分な光透過
性を有することが望ましい。該成型品の光透過性は主と
して表面での散乱によって決まるので、表面が完全に平
滑でなければならない。該成型品の場合、５００〜７０
０ナノメーターの波長の光に対する吸光度が３以下であ
ることが必要である。この吸光度が小さいほど該成型品
の光透過性が良（、吸光度が１以下であればさらに好ま
しい。
本発明の血液細胞処理剤の製造は、不溶性担体をＮ−ア
シルノイラミンラクトースとカルボジイミドの混合溶液
に加えるか、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルで
代表される活性エステルの溶液中に浸漬することにより
容易に達成される。
シルノイラミンラクトースとカルボジイミドの混合溶液
に加えるか、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルで
代表される活性エステルの溶液中に浸漬することにより
容易に達成される。
本発明でいうサイトカインとはインターロイキン−１、
インターロイキン−２、インターロイキン−６等で代表
されるインターロイキン類、ＧＭ−Ｃ８Ｆ、Ｇ−Ｃ８Ｆ
等で代表されるコロニー刺激因子、インターフェロン、
ＴＮＦ等を意味する。
インターロイキン−２、インターロイキン−６等で代表
されるインターロイキン類、ＧＭ−Ｃ８Ｆ、Ｇ−Ｃ８Ｆ
等で代表されるコロニー刺激因子、インターフェロン、
ＴＮＦ等を意味する。
本発明で用いるＮ−アシルノイラミンラクトースは動物
界に広く存在する物質であるが、有機合成の手段でも得
ることができる。水酸基をカルボン酸エステルにしたも
のも細胞が分泌する加水分解酵素によって容易に脱エス
テル化されるので、同様に用いることができる。なお実
施例２に示されるように、この物は固定化しない状態で
はサイトカインの誘導能は殆どない。不溶性担体に固定
化して初めて活性が得られることがわかった。
界に広く存在する物質であるが、有機合成の手段でも得
ることができる。水酸基をカルボン酸エステルにしたも
のも細胞が分泌する加水分解酵素によって容易に脱エス
テル化されるので、同様に用いることができる。なお実
施例２に示されるように、この物は固定化しない状態で
はサイトカインの誘導能は殆どない。不溶性担体に固定
化して初めて活性が得られることがわかった。
コロニー刺激因子は軟寒天中で顆粒球、マクロファージ
の幹細胞を刺激して、成熟した顆粒球やマクロファージ
から成るコロニーを形成させる特異的刺激因子として知
られている糖蛋白質である。
の幹細胞を刺激して、成熟した顆粒球やマクロファージ
から成るコロニーを形成させる特異的刺激因子として知
られている糖蛋白質である。
コロニー刺激因子の中には、ＧＭ−Ｃ８ＦＳＧ−Ｃ８Ｆ
、Ｍ−Ｃ８Ｆ等があることが知られている。
、Ｍ−Ｃ８Ｆ等があることが知られている。
また、これ等は単球、マクロファージ、線維芽細胞、血
管内皮細胞、骨髄ストローマ等によって産生されること
が知られている。ＧＭ−Ｃ５Ｆは白血球の数の増加だけ
でなく、顆粒球機能の先進の作用もあることが知られて
おり、骨髄性白血病の治療、ＡＩＤＳや癌の化学療法後
の白血球減少症の治療のためにも使われている（実験医
学 ヱ（１５）（増刊）１９８−２０３ （１９８９）
）。
管内皮細胞、骨髄ストローマ等によって産生されること
が知られている。ＧＭ−Ｃ５Ｆは白血球の数の増加だけ
でなく、顆粒球機能の先進の作用もあることが知られて
おり、骨髄性白血病の治療、ＡＩＤＳや癌の化学療法後
の白血球減少症の治療のためにも使われている（実験医
学 ヱ（１５）（増刊）１９８−２０３ （１９８９）
）。
また、Ｇ−Ｃ３Ｆも同様に重症感染症の予防や治療に用
いられる（実験医学 ７（１５）（増刊）１９１−１９
７ （１９８９））。
いられる（実験医学 ７（１５）（増刊）１９１−１９
７ （１９８９））。
インターロイキン−１は白血球が産生ずる発熱物質とし
て古くから知られているが、最近ではいろんな作用のあ
ることが知られており、特に抗腫瘍効果や造血促進作用
があり、臨床への利用が試みられている（実験医学 ７
（１５）（増刊）１７０−１７７ （１９８９））。
て古くから知られているが、最近ではいろんな作用のあ
ることが知られており、特に抗腫瘍効果や造血促進作用
があり、臨床への利用が試みられている（実験医学 ７
（１５）（増刊）１７０−１７７ （１９８９））。
血液細胞を本発明の血液細胞処理剤と接触させながら培
養すると、血液細胞は活性化されて、実施例３と同様に
して前記した種類の高濃度のサイトカインを産生ずるこ
とが判明した。この場合、血液細胞の中から単球だけを
取り出して処理することもできるし、いろんな血液細胞
の混合物を処理することも可能である。産生されたサイ
トカインは、例えばｉｎ ｖｉｖｏおよびｉｎ ｖｔｔ
ｒｏでの白血球増加剤等として利用できる。
養すると、血液細胞は活性化されて、実施例３と同様に
して前記した種類の高濃度のサイトカインを産生ずるこ
とが判明した。この場合、血液細胞の中から単球だけを
取り出して処理することもできるし、いろんな血液細胞
の混合物を処理することも可能である。産生されたサイ
トカインは、例えばｉｎ ｖｉｖｏおよびｉｎ ｖｔｔ
ｒｏでの白血球増加剤等として利用できる。
本発明の血液細胞処理剤の利用としては、血液回路、細
胞培養用器具、体外循環用カラム充填材料等への利用が
あげられる。
胞培養用器具、体外循環用カラム充填材料等への利用が
あげられる。
（発明の効果）
本発明の血液細胞処理剤は、■サイトカイン等の有用物
の産生に用いることができること、■化学的に安定なア
ミド結合で固定化されているので、溶出の心配がないこ
と、■万一、溶出しても無毒な化合物であること等の利
点を有する。
の産生に用いることができること、■化学的に安定なア
ミド結合で固定化されているので、溶出の心配がないこ
と、■万一、溶出しても無毒な化合物であること等の利
点を有する。
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。
なお、実施例中の評価方法は、以下に従った。
１、芳香族ビニル系重合体成型品の化学的解析成型品を
塩化メチレンでソックスレー抽出すると不溶性の膜状物
が得られるので、これを真空乾燥し、重量を量り、赤外
線吸収スペクトル測定等を行った。
塩化メチレンでソックスレー抽出すると不溶性の膜状物
が得られるので、これを真空乾燥し、重量を量り、赤外
線吸収スペクトル測定等を行った。
２、赤外線吸収スペクトル
島津フーリエ変換赤外分光光度計ＦＴ Ｉ Ｒ−４３０
０を用いＫＢｒ錠剤法で測定した。
０を用いＫＢｒ錠剤法で測定した。
３、成型品の光透過性の測定
島津分光光度計ＵＶ２１００を用い、５００ナノメータ
ーで板状成型品に垂直方向の吸光度を測定した。対照と
して同じ厚さのポリスチレン板状成型品の吸光度を測定
し、両者の差をＡ３００とした。従って、その値が小さ
いほど成型品の光透過性が高いことになる。
ーで板状成型品に垂直方向の吸光度を測定した。対照と
して同じ厚さのポリスチレン板状成型品の吸光度を測定
し、両者の差をＡ３００とした。従って、その値が小さ
いほど成型品の光透過性が高いことになる。
４、Ｎ−アシルノイラミンラクトースの定量シアル酸の
定量法（生化学実験法 ２３ 糖蛋白質実験法 １７頁
学会出版センター）にもとすいて、蛍光標識１，２−
ジアミノ−４，５−メチレンジオキシベンゼンを反応さ
せ、高速液体クロマトグラフィーで定量した。
定量法（生化学実験法 ２３ 糖蛋白質実験法 １７頁
学会出版センター）にもとすいて、蛍光標識１，２−
ジアミノ−４，５−メチレンジオキシベンゼンを反応さ
せ、高速液体クロマトグラフィーで定量した。
５、サイトカインの定量
インターロイキン−１はＭＴＴ法（Ｔ 、 Ｍｏｓｍａ
ｎジャーナル オブザ イミュノロジカル メソッズ
６５５５〜６３ （１９８３））により分析した。
ｎジャーナル オブザ イミュノロジカル メソッズ
６５５５〜６３ （１９８３））により分析した。
ＴＮＦはＬ９２９をインジケーターセルとした殺細胞能
により定量した。
により定量した。
実施例１゜
１−ニトロプロパン５００ｍ１と硫酸２７２ｍ１の混合
溶液を０℃に冷却し、２０−４ｇのＮ−メチロール−α
−クロルアセトアミドを加え、０〜１０℃で溶解した。
溶液を０℃に冷却し、２０−４ｇのＮ−メチロール−α
−クロルアセトアミドを加え、０〜１０℃で溶解した。
この溶液を１０℃に昇温したのち、φ３．５ｃｍＸ１．
２ｍｒｎＨの用すスチレン製培養皿（厚み１ｍｍ）に１
１ｍ１ずつ入れ、室温でｌｈｒ反応させた。反応液を捨
て、培養皿を零下２０℃のメタノールに浸し、さらにメ
タノ−および水で洗った後、真空乾燥して、内部表面だ
けクロルアセトアミドメチル化された成型品Ａを得た。
２ｍｒｎＨの用すスチレン製培養皿（厚み１ｍｍ）に１
１ｍ１ずつ入れ、室温でｌｈｒ反応させた。反応液を捨
て、培養皿を零下２０℃のメタノールに浸し、さらにメ
タノ−および水で洗った後、真空乾燥して、内部表面だ
けクロルアセトアミドメチル化された成型品Ａを得た。
この成型品のＡ、。。は０．０５０であった。
上記で得た成型品Ａ１個を、塩化メチレンでソックスレ
ー抽出したところ、薄膜状の不溶物３，１ａ＋ｇが得ら
れた。培養皿の反応面の表面積は２１ｃｄであるので、
反応部の厚みは大体１．２μと考えられる。また、この
不溶物の赤外線吸収スペクトルでは、１６５９ｃｍ”（
アミド−Ｉ） 、１５２９ｃｍ、’（アミド−■）およ
び３２９７ｃｒｒｒ’（Ｎ−Ｈ）にアミド基の強い吸収
が認められたことからその構造を確認した。
ー抽出したところ、薄膜状の不溶物３，１ａ＋ｇが得ら
れた。培養皿の反応面の表面積は２１ｃｄであるので、
反応部の厚みは大体１．２μと考えられる。また、この
不溶物の赤外線吸収スペクトルでは、１６５９ｃｍ”（
アミド−Ｉ） 、１５２９ｃｍ、’（アミド−■）およ
び３２９７ｃｒｒｒ’（Ｎ−Ｈ）にアミド基の強い吸収
が認められたことからその構造を確認した。
上記で得た成型品Ａ４０個を、２０００ｍ１の１０％ジ
メチルアミノエタノール・ジメチルスルホキサイド溶液
中に浸し、室温で１８ｈｒ静置した後、２０００ｍ１の
１０％ジメチルアミノエタノール水溶液中、７０℃で２
ｈｒ加熱した。成型品を水洗後、乾燥して、アミノメチ
ル化成型品Ｂを得た。
メチルアミノエタノール・ジメチルスルホキサイド溶液
中に浸し、室温で１８ｈｒ静置した後、２０００ｍ１の
１０％ジメチルアミノエタノール水溶液中、７０℃で２
ｈｒ加熱した。成型品を水洗後、乾燥して、アミノメチ
ル化成型品Ｂを得た。
この成型品のＡ、。。は０．０５であった。
上記本発明の成型品８１個を、塩化メチレンでソックス
レー抽出したところ、薄膜状の不溶物２．３ｍｇが得ら
れた。この不溶物の赤外線吸収スペクトルでは、成型品
Ａで認められた１６５９ｃｍ’（アミド−■）および１
５２９ｃｍ−’（アミド−■）の第一級アミド基の強い
吸収ｃｍ−１が完全に消失していたことからその構造を
確認した。
レー抽出したところ、薄膜状の不溶物２．３ｍｇが得ら
れた。この不溶物の赤外線吸収スペクトルでは、成型品
Ａで認められた１６５９ｃｍ’（アミド−■）および１
５２９ｃｍ−’（アミド−■）の第一級アミド基の強い
吸収ｃｍ−１が完全に消失していたことからその構造を
確認した。
上記本発明の成型品Ｂ１０個を５００ｍ１の水に浸し、
Ｎ／１００−塩酸でｐＨ５〜６に調整した後、成型品Ｂ
の内部に０．２■ｇ／ｍｌのＮ−アセチルノイラミンラ
クトース（シグマ ケミカル社）水溶液４ｍｌと１−エ
チル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイ
ミド塩酸塩５ｍｇを加え、室温で４８ｈｒ静置した。反
応液を捨て、水洗して、本発明の血液細胞処理剤である
成型品Ｃを得た。母液中のＮ−アセチルノイラミンラク
トースの濃度から０．０１９ｍｇ固定化されたことが確
認された。また、成型品上のＮ−アセチルノイラミンラ
クトースはＮ／４Ｏ−ＮａＯＨで洗浄しても溶出の無い
ことを確認した。
Ｎ／１００−塩酸でｐＨ５〜６に調整した後、成型品Ｂ
の内部に０．２■ｇ／ｍｌのＮ−アセチルノイラミンラ
クトース（シグマ ケミカル社）水溶液４ｍｌと１−エ
チル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイ
ミド塩酸塩５ｍｇを加え、室温で４８ｈｒ静置した。反
応液を捨て、水洗して、本発明の血液細胞処理剤である
成型品Ｃを得た。母液中のＮ−アセチルノイラミンラク
トースの濃度から０．０１９ｍｇ固定化されたことが確
認された。また、成型品上のＮ−アセチルノイラミンラ
クトースはＮ／４Ｏ−ＮａＯＨで洗浄しても溶出の無い
ことを確認した。
実施例２゜
マウスマクロファージ株ＴＭＥ９．（小川恭喜ほか、
日本免疫学会総会・学術集会記録、１７５９９ （１９
８７））を３ Ｘ １０−５Ｍの２−メルカプトエタノ
ール、５０Ｕ／ｍｌのペニシリン（万有）、５０μｇ
／ ｍｌのストレプトマイシン（明治製菓）およびウシ
胎児血清を１０％含むＲＰＭ１１６４０ （Ｇｉｂｃｏ
社）に３Ｘ１０−５個／ｍｌ浮遊したものを、実施
例１で得られた成型品ＢおよびＣ（紫外線照射滅菌）に
２ｍｌずつ入れ、インキュベーター中（３７℃、５％Ｃ
０２）で２０ｈｒ培養した。培養上清を取ってその中の
サイトカインを調べたところ、Ｎ−アセチルノイラミン
ラクトースを固定化したちのく成型品Ｃ）ではＩＬ−１
は ３．７Ｕ／ｍｌ、ＴＮＦは６７．２Ｕ／ｍｌといず
れも高い活性が認められた。一方、Ｎ−アセチルノイラ
ミンラクトースを固定化しなかったもの（成型品Ｂ）で
はＩＬ−１はＩＵ／ｍｌ以下、ＴＮＦは２ Ｕ ／ ｍ
１以下といずれも活性が認められ無かった。
日本免疫学会総会・学術集会記録、１７５９９ （１９
８７））を３ Ｘ １０−５Ｍの２−メルカプトエタノ
ール、５０Ｕ／ｍｌのペニシリン（万有）、５０μｇ
／ ｍｌのストレプトマイシン（明治製菓）およびウシ
胎児血清を１０％含むＲＰＭ１１６４０ （Ｇｉｂｃｏ
社）に３Ｘ１０−５個／ｍｌ浮遊したものを、実施
例１で得られた成型品ＢおよびＣ（紫外線照射滅菌）に
２ｍｌずつ入れ、インキュベーター中（３７℃、５％Ｃ
０２）で２０ｈｒ培養した。培養上清を取ってその中の
サイトカインを調べたところ、Ｎ−アセチルノイラミン
ラクトースを固定化したちのく成型品Ｃ）ではＩＬ−１
は ３．７Ｕ／ｍｌ、ＴＮＦは６７．２Ｕ／ｍｌといず
れも高い活性が認められた。一方、Ｎ−アセチルノイラ
ミンラクトースを固定化しなかったもの（成型品Ｂ）で
はＩＬ−１はＩＵ／ｍｌ以下、ＴＮＦは２ Ｕ ／ ｍ
１以下といずれも活性が認められ無かった。
また、市販の培養用シャーレ（ＦＡＬＣＯＮ１００８）
を用い、Ｎ−アセチルノイラミンラクトースを２０μｇ
／ｍｌおよび５μｇ／ｍｌを加えて、上記と同様に培養
した系ではＩＬ−１、ＴＮＦはそれぞれ１．ＯＵ／ｍ１
以下、２． ＯＵ／ｍｌ以下といずれも活性が認めら
れ無かった。
を用い、Ｎ−アセチルノイラミンラクトースを２０μｇ
／ｍｌおよび５μｇ／ｍｌを加えて、上記と同様に培養
した系ではＩＬ−１、ＴＮＦはそれぞれ１．ＯＵ／ｍ１
以下、２． ＯＵ／ｍｌ以下といずれも活性が認めら
れ無かった。
Claims (7)
- （１）不溶性担体の表面にＮ−アシルノイラミンラクト
ースをアミド結合で固定化して成る血液細胞処理剤。 - （２）不溶性担体の形状が、シャーレ、瓶、膜、繊維、
中空糸、粒状物またはこれ等を用いた組み立て品である
ことを特徴とする請求項第（１）項記載の血液細胞処理
剤。 - （３）血液細胞を請求項第（１）項記載の血液細胞処理
剤と接触させることを特徴とするサイトカインの製造方
法。 - （４）血液細胞が、白血球であることを特徴とする請求
項第（３）項記載のサイトカインの製造方法。 - （５）サイトカインが、インターロイキン−１であるこ
とを特徴とする請求項第（３）項記載のサイトカインの
製造方法。 - （６）Ｎ−アシルノイラミンラクトースのアシル基が、
アセチル基であることを特徴とする請求項第（３）項記
載のサイトカインの製造方法。 - （７）不溶性担体が、スチレンまたはα−メチルスチレ
ンを主体とするビニル重合体成型品の表面にアミノメチ
ル基を導入したものであることを特徴とする請求項第（
１）項記載の血液細胞処理剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2108653A JPH048295A (ja) | 1990-04-26 | 1990-04-26 | 血液細胞処理剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2108653A JPH048295A (ja) | 1990-04-26 | 1990-04-26 | 血液細胞処理剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH048295A true JPH048295A (ja) | 1992-01-13 |
Family
ID=14490266
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2108653A Pending JPH048295A (ja) | 1990-04-26 | 1990-04-26 | 血液細胞処理剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH048295A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9721679B2 (en) | 2008-04-08 | 2017-08-01 | Terrapower, Llc | Nuclear fission reactor fuel assembly adapted to permit expansion of the nuclear fuel contained therein |
-
1990
- 1990-04-26 JP JP2108653A patent/JPH048295A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9721679B2 (en) | 2008-04-08 | 2017-08-01 | Terrapower, Llc | Nuclear fission reactor fuel assembly adapted to permit expansion of the nuclear fuel contained therein |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0263184B1 (en) | Immobilized physiologically active material | |
| US4406830A (en) | Regulatory glycoprotein for immune response and the use thereof in the production of T-cell growth factor | |
| Ogawa et al. | Immunobiological activities of chemically defined lipid A from lipopolysaccharides of Porphyromonas gingivalis | |
| JPH09510493A (ja) | 新規なヘパリン様硫酸化多糖類 | |
| Kumazawa et al. | Importance of fatty acid substituents of chemically synthesized lipid A-subunit analogs in the expression of immunopharmacological activity | |
| Andreesen et al. | Cytotoxic effector cell function at different stages of human monocyte-macrophage maturation | |
| US4795745A (en) | Macrophage-activating composition and a process for its manufacture | |
| EP3398971A1 (en) | Sulfated heparin oligosaccharide and preparation method and application thereof | |
| Nolte et al. | Endotoxins affect diverse biological activity of chitosans in matters of hemocompatibility and cytocompatibility | |
| Kumazawa et al. | Mitogenic and polyclonal B cell activation activities of synthetic lipid A analogues | |
| Taniyama et al. | Cytolytic activity against tumor cells by macrophage cell lines and augmentation by macrophage stimulants | |
| JP2833664B2 (ja) | 血液細胞処理剤 | |
| JP2834514B2 (ja) | 血液細胞処理剤 | |
| JP2834532B2 (ja) | 血液細胞活性化剤 | |
| JPH0453497A (ja) | 血液細胞処理剤 | |
| Amano et al. | A monosaccharide precursor of Escherichia coli lipid A has the ability to induce tumor-cytotoxic factor production by a murine macrophage-like cell line, J774. 1. | |
| JPH03240485A (ja) | 血液細胞処理剤 | |
| JPH0471478A (ja) | 細胞培養用容器およびその製造方法 | |
| US7285536B2 (en) | Anti-cancer therapeutic compounds | |
| CN101070401A (zh) | 一种具有核壳结构的糖基化聚丙烯微球的制备方法及其应用 | |
| JPH05502893A (ja) | Ｃｄ１４を含有する医薬品 | |
| US4661447A (en) | Regulatory glycoprotein for immune response and the use there of in the production of T-cell growth factor | |
| EP1384786B1 (en) | Process for producing oligosaccharide chains | |
| JPH04126073A (ja) | キラー細胞の誘導方法 | |
| CN100444942C (zh) | 一种糖基化聚丙烯亲和膜的制备方法及其应用 |