JPH0455424B2 - - Google Patents

Description

請求の範囲 １ 次式を持つ化合物

【式】又は

【式】 （式中、X₁及びX₂は水素又はアシルであり炭
素１の置換基はα又はβ立体化学配置を有してい
る。） ２ X₁及びX₂が水素である特許請求の範囲第１
項記載の化合物。 ３ X₁及びX₂の少なくとも１つがアセチルであ
る特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ４ 次式を持つ特許請求の範囲第１項記載の化合
物。 （式中、X₁及びX₂は水素又はアシルである。） ５ X₁及びX₂は水素である特許請求の範囲第４
項記載の化合物。 ６ 結晶形である特許請求の範囲第５項記載の化
合物。 ７ 次式を持つ特許請求の範囲第１項記載の化合
物。 （式中、X₁及びX₂は水素又はアシルである。） ８ X₁及びX₂が水素である特許請求の範囲第６
項記載の化合物。 本発明はデパートメント・オブ・ヘルス・アン
ド・ヒユーマン・サービスから授与されたNIH
付与No.AM14881のもとに政府の支援によつてな
された。政府は本発明に対しある種の権利を有す
る。 技術分野 本発明は生物学的に活性なビタミンＤ化合物に
関する。さらに詳しくは、側鎖に22，23−シス−
２重結合を含む１−ヒドロキシビタミンＤ化合物
に関する。 背 景 動物や人間におけるカルシウム及びホスフエー
トホメオスタシスの調節に関する周知かつはつき
りと立証された1α−ヒドロキシビタミンＤ化合
物の活性の故に、その天然代謝物質の調製及び有
用な医学的性質を有する類似体の発見に興味がも
たれてきた。これは様様の化合物の調製へと導い
た（例えば、デルーカら、Topics in Carrent
Chemistry，Vol.83，p1（1979）；Ann.Rev.
Biochem.52，411（1983）；ヤキーモビツチ、
Russin Chem・Rev・49，371（1980）。それらの
うち、例えば1α−ヒドロキシビタミンD₃（米国特
許第3741996号）もしくは1α，25−ジヒドロキシ
ビタミンD₃（米国特許第3697559号）はすでにそ
の医学的実施における用途を見い出している。こ
れらの化合物における興味は、特に、それらのカ
ルシウムホメオスタシスの調節剤としての古典的
な機能に加えて、1α，25−ジヒドロキシビタミ
ンD₃とその類似体、1α−ヒドロキシビタミンD₃
はまた、細胞識別プロセスに影響を及ぼし、ある
種の悪性の細胞の成長、増殖を禁止することがで
きるということが見出され、今も継続している
（スダら、米国特許第4391802号、スダらProc.
Natl.Acad.Sei.USA80，201（1983）；Reitsmaら、
Nature，Vol.306，ｐ，492−494（1983））。ビタ
ミンＤ代謝物質及びその類似体が、生物学的活性
を示すのは、全体のプロセスの中のある段階で細
胞内レセプタータンパク質への結合を起している
ということを示す証拠が増加しつつある（デルー
カら、上記）。このレセプタータンパク質に対す
る親和性が高いことが、こうして高い効力のため
の前提条件となり、望ましいビタミンＤ類似体
は、レセプター結合部位に対し、天然ホルモン、
１，25−（OH）₂D₃と効果的に競争するものであ
る。 公知の側鎖不飽和ビタミンＤ化合物はビタミン
D₂のヒドロキシ誘導体、つまり、25−ヒドロキ
シビタミンD₂（米国特許第3585221号）、1α，25−
ジヒドロキシビタミンD₂（米国特許第3880894
号）、24−ヒドロキシ−及び24，25−ジヒドロキ
シビタミンD₂（ジヨンズら、Arch・Biochem・
Biophys・202，450（1980））、1α−ヒドロキシビ
タミンD₂（米国特許第3907843号）及びある種の
24−脱メチルビタミンD₂化合物（米国特許第
3786062；ボゴスロブスキーら、J.Gen.Chem.
USSR48（４）、828（1978）；Chem Abstr.89，
163848jと89，209016s）を含む。側鎖にシス−２
重結合を有する化合物の１例もまた知られている
（ボゴスロブスキーら、上記）。 発明の開示 本発明の新規な化合物は下に示される構造Ａ及
びＢによつて特徴づけられている。 （式中炭素１のヒドロキシ基（もしくは保護ヒ
ドロキシ基）はα−もしくはβ−立体化学的配置
を有していてもよく、また、X₁及びX₂は水素又
はヒドロキシ保護基、例えば、アルキルシリル、
メトキシメチル又はテトラヒドロピラニル基を示
す。） これらの化合物は、こうして、側鎖における
22，23−シス−２重結合（22Z−２重結合）によ
つて特徴づけられる。 好ましいヒドロキシ保護基は、炭素数１〜６の
アシル（アルカノイル）基（例えば、ホルミル、
アセチル、プロピオニル、ブチリル基など）又は
ベンゾイル、ハロもしくはニトロベンゾイルのよ
うなアロイル基、又はオキザリル、マロニル、ス
クシニル、グルタリル又はアジピルのような炭素
数２〜６のカルボキシアルカノイル基である。 特に好ましいものは、上記の、1α−ヒドロキ
シ基をもつ、タイプＡの化合物である。というの
は、これらの化合物はレセプタータンパク質に対
して予期し得ないほど親和性が高いからである。
これらの化合物は１−ヒドロキシビタミンＤ類似
体として公知の１−ヒドロキシル化ビタミンＤ化
合物に関連する。しかし22Z−２重結合の存在の
ために、22，23−シス−２重結合が側鎖を、レセ
プタータンパク質に対する高い親和性が公知であ
る（デルーカら公知）1α−ヒドロキシビタミン
D₃又は天然ホルモン１，25−（OH）₂D₃の両化合
物のような完全に飽和の側鎖より考えられるより
も全く異なる幾何的配列とさせるので、それはレ
セプターに対する親和性が、もしあつたとして
も、低いことが予期された。しかしながら、1α
−ヒドロキシ−22Z−デヒドロ化合物は、実際
は、そのレセプターに対し、1α−ヒドロキシビ
タミンD₃が示すよりも高い親和性を示すことが
見い出された。 本発明の新規化合物の合成は、プロセス・スキ
ームに概要が示される。このプロセスの以下の
説明及び各例中における数字（例えば、(1)，(2)，
(3)……など）による化合物の表示は、プロセス・
スキーム、又は明細書中でそのように番号が付
された構造を意味する。 この合成方法の出発物質は、構造(1)（ここでＲ
はメトキシメチル基）のジエン保護アルデヒドで
ある。この出発物質は、モーリスらの方法（J.
Org.Chem.46，3422（1981）によつてエルゴステ
ロールから調製される。化合物(1)を下記に示す構
造をもつウイテイヒ試薬と （CH₃）₂CHCH₂CH₂PPh₃Br 有機溶剤中、強塩基の存在で反応させると目的の
22Z−オレフイン側鎖で特徴づけられる生成物(2)
を与える。 ヒドロキシ保護基を酸性条件下で除くと、生成
物(2)が化合物(3)に変換され、そして、それは有機
溶剤中の強い水素化物還元剤で還元に付され５，
７−ジエンステロール、化合物(4)を得る。 この物質を、有機溶剤中で溶解して紫外線を照
射すると、５，７−ジエンは対応のプレビタミン
中間体に変化し、それは、単離精製後、有機溶媒
中で室温から還流温度の範囲の温度での温和な加
熱によつて異性化されて、構造(5)の22Z−デヒド
ロ−ビタミンD₃類似体になる。 構造(5)を有する中間体はビタミンＤ類似体とし
て知られているが、ボコスロブスキーらによつて
以前に調製されたが（J.Ghen.USSR，48(4)，828
（1978））、それはかなり不便な方法であつた。 中間体(5)は次に、５デルーカらの一般的方法
（米国特許第4195027号、同4260549号）を用いて
１−ヒドロキシル化して目的の最終生成物に変換
される。化合物(5)は最初にトシル化されて、構造
(6)を有する3β−トシル化物を与え、それは次に、
緩衝メタノール中でソルボリシスに付して構造(7)
（Ｒ＝Ｈ）の新規な３，５−シクロビタミンＤ中
間体を得る。この生成物を次いで二酸化セレンで
処理し、そして有機溶媒中でtert−ブチルヒドロ
ペルオキシドで処理して、構造(8)（式中Ｒはヒド
ロキシ基）の1α−ヒドロキシシクロビタミンＤ
類似体を得る。 この炭素(1)におけるアリル位ヒドロキシル化
が、例外的なシス−２重結合を側鎖に有し、２つ
のアリル位を有する中間体(7)のような化合物に対
して複雑化をひき起すことなく、進行するという
ことは注目すべきことである。１−ヒドロキシシ
クロビタミンＤ生成物は次いで、氷酢酸中でソル
ポリシスに付され、3β−アセトキシ基を有する、
それぞれ構造(9)及び(10)の５，６−シスと５，６−
トランスビタミンＤ化合物を混合状態で得る。こ
れらのアセテート誘導体(9)と(10)は、次いで分別さ
れ、そして、 個々に、温和な塩基中で構造(11)と(12)（ここ
でX₁は水素を示す。）で特徴づけられる目的のフ
リーのジオール生成物を生産する。 上記の１−ヒドロキシル化シクロビタミンＤ生
成物のうち構造(8)の1α−ヒドロキシ−３，５−
シクロビタミンＤが主要成分であり、また少量の
対応の1β−ヒドロキシ−３，５−シクロビタミ
ンＤエピマー、つまり下記の構造(13)の生成物を
含むことがわかつた。氷酢酸中でソルボリシスし
て、この1βーヒドロキシ−エピマーは、下記の
構造(14)及び(15)で表わされる対応の５，６−シ
スと５，６−トランス−1β−ヒドロキシ−3β−
アセトキシ−ビタミンＤ類似体を発生させるが、
それは、もし望むなら、クロマトグラフイーによ
つてソルボリシス混合物から単離することがで
き、次いで、上述のように温和な塩基中で別々に
加水分解して構造(16)と(17)でそれぞれ特徴づけ
られる1β，3β−ジオールエピマーにすることが
できる。 実際上、上記構造１５の５，６−トランス−
1β−ヒドロキシ誘導体はしばしば、ソルボリシ
ス混合物のそのような少量成分を代表するので、
それの直接単離は極めて困難であつた。そのよう
な場合、５，６−トランス−1β−ヒドロキシ類
似体を公知のバーループらの（Rec.Trav−
Chim.Pays−Bas78，1004（1969））のヨウ素触媒
化異性化プロセスによつて対応の５，６−シス化
合物から調製する方法がより便利である。このよ
うに、炭化水素又はエーテル溶剤中の触媒量のヨ
ウ素で生成物(14)を処理すると５，６−トランス
生成物(15)を与え、(16)の類似の異性化は対応の
構造(17)のトランス化合物を与える。 本発明の生成物のアシル化誘導体は通常の方法
によつて容易に調製される。したがつて、構造
(9)，(10)もしくは(14)と(15)のモノアシル化はソル
ボリシスによつて直接生じる。そのようなモノア
シル化物はさらに対応の１，３−ジアシレートに
アシル化するか、さらに、目的のアシル化物は、
構造(11)，(12)もしくは(16)，(17)のフリーのジオー
ルを通常のアシル化にすることによつて調製され
る。構造(8)もしくは(13)の１−ヒドロキシシクロ
ビタミンＤ中間体は、対応の１−ｏ−アシル誘導
体にアシル化できることもまた留意すべきであ
る。そのようなアシル誘導体を氷酢酸又は酸性水
性触媒体中で、ひき続いてソルボリシスすると
（例えば、デルーカら、米国特許第4195027号）
５，６−シス及び５，６−トランス−１−ヒドロ
キシビタミンＤ類似体をそれらの１，３−ジ−ｏ
−アシル又は１−ｏ−アシル誘導体として、それ
ぞれ生じる。 本発明の新規化合物の注目に値する性質は、タ
ンパク質レセプターに対する高い結合親和力によ
つて示されるようにそれらの高い効力である。
22，23−シス−２重結合（22Z−２重結合）の存
在によつて決定される側鎖の幾何異性の変化が、
結合親和力を失わせてしまうか少なくとも結合親
和力を著しく減少させるだろうということが、予
想された。というのは立体化学の微妙な変化でさ
え、（例えば24R−ヒドロキシから24S−ヒドロキ
シへの変化）結合親和力に、明白な相違を生じさ
せることができるということが知られている（例
えば、デルーカら、Topics in Curr.Chem.上記）
からである。そして、これらの化合物がこの推測
の確認のために実際に調製されたところ、驚くべ
きことに構造(11)の1α−ヒドロキシ−22Z−デヒド
ロ類似体が公知の高効能ビタミンD₃誘導体であ
る1α−ヒドロキシビタミンD₃の３〜５倍高い親
和力をタンパク質レセプターに対して有している
ことが競争結合分析（シエパードらのプロトコー
ルによつて実施された、Biochem.J.182，55
（1979））によつて見い出された。本発明の他の生
成物、低い結合親和力を示すが、それでも天然の
代謝物質又は他の公知の類似体のような飽和側鎖
を特長とする対応の化合物の各結合親和力よりも
実質的に高い結合親和力を有する。 高い結合親和力をもつので、本発明の化合物
は、人間のくる病、上皮小体機能こう進症、骨ジ
ストロフイー、骨軟化症、骨粗しよう症のような
カルシウム不調又は動物の関連のカルシウム欠乏
症（例えば授乳熱）の治療又は予防における公知
の代謝物質の代替物として極めて有用である。同
様にこれらの化合物は人間の白血病のようなある
種の悪性病の治療にも使用できる。上記の利用に
好適なのは、プロセス・スキームにおいて構造
(11)で描かれた類似体又は構造(12)の対応の５，６
−トランス−化合物、又はそれらのアシル化誘導
体である。 上記生成物の好適な混合物はまた、医学又は獣
医学での応用に用いることができる。例えば構造
（１１）と(12)で表わされる化合物の組合せである。
治療上の目的では、選択した投与方法に好適など
のような通常のルートとどのような形状ででも投
与することができる。この化合物は許容でき、か
つ、無毒の調剤担体と丸薬、錠剤、ゼラチンカプ
セル、又は座薬の形でまた、無毒の溶剤又は油の
溶液、エマルジヨン、分散物又は懸濁物として調
合される。この調合物は、特別の用途に適当と思
われるような治療的に活性でかつ有益な成分を含
んでいてもよい。人間用としては、その化合物は
１日約0.5〜約10μgの量投与するのが有利である。
それぞれの投与量は、与える特別の化合物、処置
すべき病気、患者の反応によつて調整することは
当業者にとつて明白である。 本発明は、以下の詳細な説明によつてさらに説
明されるが、それは単に説明的なものであり、添
付の請求の範囲を限定するものではない。 本明細書中、物理−化学的データは言及した方
法及び装置を用いて測定した。高圧液体クロマト
グラフイ−（HPLC）はZorbax−Sil（デユポン
社）を用いるウオーターズ・アソシエイツモデル
ALC／GPC204（6.2mm×25cmカラム、流速４ml／
min、1500psi）上で行つた。カラムクロマトグ
ラフイーはシリカゲル60，70〜230メツシュ
ASTM（メルク社）上で行つた。分離用薄層クロ
マトグラフイー（TLC）はシリカ60PF−254（20
×20cmプレート、１mmシリカゲル）上で行つた。
光照射は、ビコールフイルターを取り付けたハノ
ービア608A36水銀アークランプを用いて行われ
た。全ての反応は、好ましくは不活性雰囲気中
（例えばアルゴン）で行われる。 （22Z）−3β−（メトキシメトキシ）−5α，8α−
（４−フエニル−１，２−ウラゾロ）コレスター
６，22−ジエン(2)ドライのテトラヒドロフラン
（73ml）中のイソペンチルホスホニウムブロミド
〔（CH₃）₂CHCH₂CH₂PPh₃Br〕（1.67g，
4.04mmol）をｎ−ブチルリチウム（1.7Mヘキサ
ン溶液、2.42ml、4.11mmol）で、３〜５℃でか
きまぜながら処理した。常温で１時間かきまぜた
のち、そのオレンジレツドの溶液を３℃にまで冷
却し、ドライTHF（24ml）中のアルデヒド(1)
（1.84g，3.36mmol）を添加した。無色の反応混
合物を、室温で一夜かきまぜたのち水中に注ぎ、
ベンゼンで抽出した。その有機抽出物を５％
HCl、飽和炭酸水素ナトリウム、及び水で洗浄
し、乾燥し（Na₂SO₄）、そして減圧下ではオイ
ルにまで濃縮した。そしてそれをシリカゲルカラ
ム上で精製した。ベンゼル−エテル（94：６）混
合物で溶出させてアダクト(2)を与えた。（1.38g，
68％）泡としてNMRδ0.83（3H，ｓ，18−H₃），
0.89と0.91（6H、各々ｄ，ｊ＝6.8Hz，26−H₃と27
−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.8Hz，26−H₃と27−
H₃），0.97（3H，ｄ，ｊ＝6.8Hz，21−H₃）、0.98
（3H，ａ，19−H₃），3.30（1H，dd，J₁＝4.4Hz，
J₂＝14Hz，９−Ｈ），3.38（3H，ｓ，OCH₃），4.33
（1H，ｍ，３−Ｈ），4.70と4.81（2H，ABq，Ｊ＝
6.8Hz，OCH₂Ｏ），５，21（2H，brm，22−Ｈと
23−Ｈ）、6.23と6.39（2H，ABq，Ｊ＝8.5Hz，６
−Ｈと７−Ｈ），7.41（5H，brm，Ar−Ｈ）；IR：
1756，1703，1601，1397，1046cm^-1；マススペク
トル、ｍ／z601（M⁺，＜１％）、4.26(4)，364(61)，
349(16)，253(18)，251(18)，119（PhNCO，100）． （22Z）−5α，8α−（４−フエニル−１，２−ウラ
ゾロ）コレスタ−６，22−ジエン−3β−オール
(3) アダクト(2)（601mg、1mmol）の溶液とｐ−ト
ルエンスルホン酸（523mg、2.75mmol）のメタノ
ール（20ml）−THF（12ml）中混合物を室温で２
日間かきまぜた。反応混合物を飽和炭酸水素ナト
リウム中に注ぎ、ベンゼンで数回抽出した。抽出
物を水で洗浄し、乾燥し（Na₂SO₄）、減圧下で
蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフイ
ーで精製して（ベンゼンエーテル70：30を溶出液
とする）アダクト(3)（550mg，99％）を泡として
得た。NMRδ0.83（3H，ａ，18−H₃），0.89と
0.91（6H、各各ｄ，Ｊ＝6.8Hz，26−H₃と27−
H₃），0.95（3H，ａ，19−H₃），0.98（3H，ｄ，Ｊ
＝6.8Hz，21−H₃），3.16（1H，dd，J₁＝4.4Hz，J₂
＝14Hz，９−Ｈ），4.44（1H，ｍ，３−Ｈ），5.22
（2H，brm，22−Ｈと23−Ｈ）、6.22と６，39
（2H，ABq，Ｊ＝8.5Hz，６−Ｈと７−Ｈ），7.40
（5H，brm，Ar−Ｈ）；IR：3447，1754，1700，
1600，1397cm^-1；マススペクトル，ｍ／ｚ（557
（M⁺，＜１％），382(35)，349(33)，253(20)，251(3
３），119(100) ，55(82)。（22Z）−コレスタ−５，
７，22−トリエン−3β−オール(4) アダクト(3)（530mg，０，95mmol）をリチウ
ムアルミニウムハイドライド（1g）で、テトラ
ヒドロフラン（60ml）中、還流下で18時間還元し
てジエン(4)に変換した。通常の操作ののち、生成
物をシリカゲル上のクロマトグラフイーによつて
精製し（ベンゼン−エーテル94：６を溶出液とす
る）、エタノールから晶出させて純粋なジエン(4)
（290mg，76％を与えた。m.p148〜151℃〔α〕²⁴ _D＝
132℃（ｃ＝0.9，CHCl₃）；NMRδ0.66（3H，ｓ，
18−H₃），0.90と0.91（6H，各ｄ，Ｊ＝6.8Hz），26
−H₃と27−H₃），0.96（3H，ｓ，19−H₃），0.98
（3H，ｄ，Ｊ＝6.9Hz，21−H₃），3.64（1H，ｍ，
３−Ｈ），5.20（2H，brm，22−Ｈと23−Ｈ），
5.39と5.57（2H，ABq，Ｊ＝６Hz，７−Ｈと６−
Ｈ）；UVλ_nax281nm；IR：3346，1463，1375，
1364，1067，1040，831cm^-1；マススペクトル
ｍ／z382（M₊，100），349(65)，323(32)，271(15)，
253(30)。 （5Z，7E，22Z）−９，10−セココレスター５，
７，10１９，22−テトラエン−3β−オール５ ５，７−ジエン(4)（150mg，0.39mol）エーテ
ル（120ml）とベンゼン（30ml）（アルゴンで40分
間脱気）に溶解して０℃で13分間、UV−ランプ
とビコールフイルターを用いて光照射した。生成
混合物をHPLC（ヘキサン中１％の２−プロパノ
ール）に付してプレビタミン（56.9mg，38％）を
無色の油としてえた。NMRδ0.75（3H，ｓ，18−
CH₃），0.90と0.91（6H，各ｄ，Ｊ＝6.7Hz，26−
H₃と27−H₃），0.99（3H，ｄ，Ｊ＝6.8Hz，21−
H₃），1.64（3H，ｓ，19−H₃），3.90（1H，ｍ，３
−Ｈ），5.20（2H，brm，22−Ｈと23−Ｈ），5.69
と5.95（2H，ABq，Ｊ＝12Hz，７−Ｈと６−
Ｈ）；UVλ_nax261nm，λ_nio234nm。 このプレビタミン中間体（56mg，0.15mmol）
を還流エタノール中で（３時間）熱異性化に付し
てHPLCによる分離ののち油状ビタミン類似体(5)
（43mg，77％）を与えた。NMRδ0.60（3H，ａ，
18−H₃），0.89と0.90（6H，各々ｄ，Ｊ＝6.7Hz，
26−H₃と27−H₃）、0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.6Hz，21
−H₃），3.96（1H，ｓ，３−Ｈ），4.82と5.05（2H，
各々狭いｍ，19−H₂），5.20（2H，brm，22−Ｈ
と23−Ｈ），6.04と6.24（2H，ABq，Ｊ＝11.4Hz，
７−Ｈと６−Ｈ）；UVλ_nax265.5_onλ_nio228nm；
IR：3427，1458，1379，1048，966，943，
892cm^-1；マススペクトル、ｍ／z382（M⁺，21），
349(5)，271(8)，253(14)，136(100) ，118(82)。 化合物５の１−ヒドロキシル化 新しく再結晶させたｐ−トルエンスルホン酸ク
ロリド（50mg，0.26mmol）をドライピリジン
（300μl）中のビタミン(5)（50mg，0.13mmol）の
溶液に添加した。４℃で30時間後、反応混合物を
かきまぜながら氷／飽和N_aHCO₃上に注いだ。混
合物を15分間かきまぜ、ベンゼンで抽出した。有
機抽出物を飽和N_aHCO₃、飽和硫酸銅及び水で洗
浄し、乾燥し（Na₂SO₄）そして減圧下で濃縮し
て油状のトシル化物(6)を得た。この粗トシル化物
(6)を無水メタノール（10ml）中N_aHCO₃（150mg）
で処理して、その混合物を55℃で8.5時間攪拌し
た。冷却後、〜２mlにまで濃縮後、その混合物を
ベンゼン（80ml）で希釈し、水で洗浄し、乾燥し
（Na₂SO₄）、減圧下で蒸発させた。このようにし
て得られた油状の３，５−シクロビタミンＤ化合
物は十部に純粋であり、精製せずに次の酸化段階
に用いることができた。ドライCH₂Cl₂（５ml）中
のSeO₂（5.1mg，0.046mmol）のはげしくかきまぜ
た懸濁物中に、tert−ブチルヒドロペルオキシド
（16.5μl，0.118mmol）を添加した。30分間、ド
ライピリジン（50μl）を添加し、混合物を室温で
さらに25分間かきまぜ、CH₂Cl₂（4.5ml）中の粗
3.5−シクロビタミン生成物(7)を次いで添加した。
反応を０℃で15分間進め、次いでそれを室温にま
でゆつくりと（30分間）温めた。その混合物を分
液漏斗に移し、30mlの10％NaOHを加えて振と
うした。エーテル（150ml）を添加し、そして分
別有機層を10％NaOH、水で洗浄し、Na₂SO₄上
で乾燥した。減圧乾燥で濃縮して黄色油状残留物
を与えた。それを７：３ヘキサン−エチルアセテ
ートで展開するシリカゲルTLCプレート上で精
製して１−ヒドロキシシクロビタミン生成物（20
mg，37％）を与える。NMRδ0.59（3H，ｓ，18，
H₃），0.63（1H，ｍ，３−Ｈ），0.89と0.90（6H、
各々ｄ，Ｊ＝6.9Hz，26−H₃と27−H₃），0.96
（3H，ｄ，Ｊ＝6.9Hz，21−H₃），3.25（3H，ｓ，
−OCH₃），4.17（2H，ｍ，１−Ｈと６−Ｈ）、
4.96（1H，ｄ，Ｊ＝9.3Hz，７−Ｈ），5.1−5.4
（4H，brm，19−H₂，22−Ｈと23−Ｈ）；マスス
ペクトル，ｍ／z412（M⁺，26），380(48)，339(2
２），269(28)，245(20)，135(100) ．この生成物は
主に構造８に1α−ヒドロキシシクロビタミンＤ
化合物からなり、また少量の対応の1α−ヒドロ
キシ−エピマ−(13)を含有している。これらの成
分は、望むならこの段階で分別できるが、そのよ
うな分別は必要でない。 上記で得られた１−ヒドロキシシクロビタミン
生成物（18mg）を氷酢酸（0.8ml）中で加熱し
（55℃／15分間）、混合物を中和し（氷／飽和
NaHCO₃）、次いでベンゼン及びエーテルで抽出
してHPLC（ヘキサン中1.5％の２−プロパノール
を溶出剤として使用）分離ののち純粋な3β−ア
セトキシ−ビタミン(9)（6.60mg、34％、42mlで溶
出）、(10)（4.20mg，22％，50mlで溶出）及び(14)
（1.44mg，７％，36mlで溶出）を得た。 化合物(9)：NMRδ0.60（3H，ｓ，18−H₃），
0.90と0.92（6H，各々ｄ，Ｊ＝7.0Hz，26−H₃と27
−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.8Hz，21−H₃），
2.04（3H，ｓ，−OCOCH_-3），４，41（1H，ｍ，
１−Ｈ），5.02（1H，狭いｍ，19−Ｈ）、5.1−5.4
（4H，brm，３−，19−，22−と23−Ｈ），6.03
と6.35（2H，ABq，Ｊ＝11.4Hz，７−Ｈと６−
Ｈ）；UVλ_nax264.5nm，λ_nio227.5nm；マススペ
クトル，ｍ／z440（M₊，10），380(72)，362(7)，
269(31)，251(12)，135(100) ，134(99)． 化合物(10)：NMRδ0.60（3H，ｓ，18−H₃），
0.90と0.91（6H，各々ｄ，Ｊ＝7.0Hz，26−H₃と27
−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.9Hz，21−H₃），
0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.9Hz，21−H₃），2.05（3H，
ｓ，−OCOCH₃），４，49（1H，ｍ，１，−Ｈ），
５，00と５，14（2H，各々狭いｍ，19−H₂），
5.20（3H，brm，３−，22−と23−Ｈ），５，82
と6.59（2H，ABq，Ｊ＝12.0Hz，７−Ｈと６−
Ｈ）；UVλ_nax270nm；λ_nio228nm；マススペクト
ル，ｍ／z440（M⁺，４），380(30)，269(10)，351(10
０） ，134(52)、化合物(14)：NMRδ0.58（3H，ｓ，
18−H₃），0.89と0.90（6H，それぞれｄ，Ｊ＝6.9
Hz，26−H₃と27−H₃），0.96（3H，ｄ，Ｊ＝6.9
Hz，21−H₃），2.06（3H，ｓ，−OCOCH₃），４，
16（1H，ｍ，１−Ｈ）、4.98（2H，ｍ，３−Ｈと
19−Ｈ），5.1−5.4（3H，brm，19−，22−と23−
Ｈ）；UVλ_nax263nm，λ_nio227nm；マススペクト
ル，ｍ／z440（M⁺，32）、380(78)，362(21)，269
（２８），251(19)，135(100) ，134(82)。 化合物(9)，(10)及び(14)における3β−アセトキシ基
の加水分解 3β−アセトキシ−誘導体(9)，(10)及び(14)の各々
を、同じ手順を用い、別々に加水分解した。エタ
ノール中（0.1ml）の3β−アモトキシビタミン
（0.7〜６mg）の溶液をメタノール（0.8ml）中の
10％KOHで処理し、その混合物を50℃で１時間
加熱した。通常の操作ののち、最終HPLC精製
（ヘキサン中の８％２−プロパノールを溶出液と
する）して、対応の１−ヒドロキシビタミンを得
た。すなわち、 化合物(11)：NMRδ0.59（3H，ｓ，18−H₃），
0.89と0.90（6H、それぞれｄ，Ｊ＝7.0Hz，26−H₃
と27−H₃），0.96（3H，ｄ，Ｊ＝6.8Hz，21−H₂），
4.23（1H，ｍ，３−Ｈ），4.43（1H，ｍ，１−Ｈ），
5.00（1H，狭いｍ，19−Ｈ）、5.1−5.4（3H，brm，
19−，22−と23−Ｈ）、6.02と6.39（2H，ABq，
Ｊ＝11.4Hz，７−Ｈと６−Ｈ）；UVλ_nax264.5nm，
λ_nio227.5nm；マススペクトル，ｍ／z398（M⁺，
21），380(8)、287(6)，269(7)，251(5)，152(32)，
134(100) ．（溶出容積39ml）． 化合物(12)：NMRδ0.61（3H，ｓ，18−H₃），
0.89と0.91（6H、それぞれｄ，Ｊ＝7.0Hz，26−H₃
と27−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.9Hz，21−H₃），
0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.9Hz，21−H₃），4.25（1H，
ｍ，３−Ｈ），4.51（1H，ｍ，１−Ｈ），4.98と
5.13（2H，それぞれ狭いｍ，19−H₂），5.21（2H，
brm，22−Ｈと23−Ｈ），5.89と6.59（2H，ABq，
Ｊ＝11.5Hz，７−Ｈと６−Ｈ）；UVλ_nax273nm，
λ_nio229.5nm；マススペクトル，ｍ／z398（M⁺，
17），380(4)，287(5)，269(5)，251(4)，152(29)，
134(100) ．（溶出容積38ml）． 化合物(16)：NMRδ0.60（3H，ｓ，18−H₃），
0.89と0.91（6H、それぞれｄ，Ｊ＝7.Hz，26−H₃
と27−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.9Hz，21−H₃），
4.10（1H，ｍ，３−Ｈ），4.36（1H，ｍ，１−Ｈ），
5.01（1H，ｄ，Ｊ＝２Hz，19−Ｈ），5.1−5.4
（3H，brm，19−，22−と23−Ｈ），6.60と6.45
（2H，ABq，Ｊ＝11.3Hz，７−Ｈと６−Ｈ）；
UVλ_nax262.5nm，λ_nio226.5nm；マススペクト
ル，ｍ／z398（M⁺，20），380(19)，269(11)，251
(10)，152(100) ，134(60)．（溶出容積32ml）． 所望なら、本発明の化合物は、当業者に周知か
つ明白な如く、エーテル、ヘキサン、アルコール
及びそれらの混合物のような適応な溶剤から晶出
させて容易に得ることができる。