【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
〔産業上の利用分野〕
本発明は、細胞が付着しにくいセンサー用保護
膜に関するものである。
ここでいうセンサーとは、臨床化学分析装置や
人工臓器に組み込んで使用するものであり、溶存
酸素、溶存炭酸ガス、及びPHのセンサー、さらに
酵素や微生物を固化したバイオセンサーなどをも
包含するものであり、その検出部分は常に血液、
尿などの体液に接触しており、センサー保護膜は
その検出部分を覆い保護するものである。
〔従来技術〕
従来、センサー用保護膜には、ポリスルホン、
再生セルロース、酢酸セルロース等の高分子材料
が用いられている。これらの材料を用いたセンサ
ー用保護膜では、その材料表面に細胞が付着して
しまい、センサーとしての感度や応答速度の低下
を引きおこす。したがつて、センサー用保護膜に
おいては細胞の付着しない材料が求められてい
る。
〔発明の目的〕
本発明は、アミノ酸重合体を用いることによ
り、細胞付着の少ないセンサー用保護膜を提供す
ることを目的とする。
〔発明の構成〕
本発明者は、細胞の付着しにくい性質を有する
材料について種々研究を重ねたところ、メチオニ
ン重合体又はメチオニンを含むアミノ酸共重合体
の皮膜を酸化処理したものは、細胞を著しく付着
させない性質を有しており、センサー用保護膜と
して好適であることを見い出し、本発明を完成す
るに到つた。
即ち、本発明によれば、センサー用保護膜にお
いて、その少なくとも表面層がメチオニン重合体
又はメチオニンを含み、ロイシンを含まないアミ
ノ酸共重合体の皮膜から構成され、かつ該皮膜は
酸化処理を受け、該メチオニン成分がそのスルホ
キシドに酸化されていることを特徴とするセンサ
ー用保護膜が提供される。
本発明のセンサー用保護膜は、メチオニン重合
体又はメチオニンを含み、ロイシンを含まないア
ミノ酸共重合体（以下、これらを単にアミノ酸重
合体とも言う）を膜状に成形した後、この膜体を
酸化剤で酸化処理することにより得ることがで
き、また、あらかじめ他の高分子材料で形成した
膜体の表面に、アミノ酸重合体を膜状に塗布し、
その後、酸化剤で酸化処理することによつて得る
ことができる。
本発明のアミノ酸構成成分として用いるメチオ
ニン及びその共重合成分として用いるアミノ酸
は、Ｄ体、Ｌ体、ラセミ体でもよい。また、メチ
オニンの共重合成分として用いられるアミノ酸と
しては、従来公知のもの、例えば、アラニン、グ
リシン、バリン、グルタミン酸−γ−メチルエス
テル、グルタミン酸−γ−ベンジルエステル、ア
スパラギン酸−β−メチルエステル、アスパラギ
ン酸−β−ベンジルエステル、N〓−ベンジルオ
キシカルボニルリジン、N〓−ベンジルオキシカ
ルボニルオルニチン系が挙げられる。
アミノ酸重合体の分子量は、その皮膜が形成さ
れる程度であればよい。メチオニンを含むアミノ
酸共重合体中のメチオニン含量は、共重合成分で
あるアミノ酸の種類により変化するが、好ましく
は30モル％以上である。
酸化処理剤としては、過酸化水素、過酢酸、ヨ
ウ素、ヨウ素酸塩などの慣用の酸化剤が用いられ
る。酸化処理時間は酸化剤の種類、濃度、温度及
びアミノ酸の種類、共重合組成に応じて適宜選択
するが、いずれにしても、酸化処理により、膜体
の表面部分のメチオニン成分がスルホキシド（メ
チオニンスルホキシド）の段階にまで酸化される
ように行えばよい。
〔実施例〕
次に本発明を実施例によりさらに詳細に説明す
る。
実施例 １
ポリ−Ｌ−メチオニンをテトラクロルエチレン
に溶解して、ガラス板上に流し、風乾して皮膜
（膜厚0.054mm）を得た。この皮膜を15％の過酸化
水素水溶液に室温で35分間侵漬して酸化処理を行
つた後、熱水中に８時間以上浸漬した。この酸化
処理により、皮膜中のメチオニン成分はスルホキ
シドに酸化されていることが確認された。
次に、この酸化処理皮膜上に、人由来の上皮性
細胞を含む培養液（約10万個／ml）を接触させた
まま、炭酸ガス濃度５％、湿度100％、37℃の部
屋に静置し、17時間後、皮膜をリン酸緩衝液で軽
く洗浄して、皮膜上に付着している細胞の量を核
染色法により定量した。比較のためセンサー用保
護膜として使用されているポリスルホン、標準試
料として市販の細胞培養シートを用いて、同様の
細胞付着試験を行つた。皮膜に付着した細胞の量
を、標準試料に付着した細胞の量で割ることによ
り、細胞付着率を求めた。その結果を第１表に示
す。
[Industrial Application Field] The present invention relates to a protective film for sensors to which cells are difficult to adhere. The term "sensor" referred to here refers to a device that is used by being incorporated into a clinical chemistry analyzer or an artificial organ, and includes sensors for dissolved oxygen, dissolved carbon dioxide, and PH, as well as biosensors made of solidified enzymes and microorganisms. The detection part is always blood,
The sensor is in contact with body fluids such as urine, and the sensor protective film covers and protects the detection area. [Prior art] Conventionally, protective films for sensors include polysulfone,
Polymer materials such as regenerated cellulose and cellulose acetate are used. In protective films for sensors using these materials, cells adhere to the material surface, causing a decrease in the sensitivity and response speed of the sensor. Therefore, materials to which cells do not adhere are required for protective films for sensors. [Object of the Invention] An object of the present invention is to provide a protective film for a sensor with less cell adhesion by using an amino acid polymer. [Structure of the Invention] The present inventor has conducted various studies on materials that have properties that make it difficult for cells to adhere to them, and has found that oxidation-treated films of methionine polymers or amino acid copolymers containing methionine significantly inhibit cells. It has been found that it has the property of not causing any adhesion and is suitable as a protective film for sensors, and has completed the present invention. That is, according to the present invention, in a protective film for a sensor, at least the surface layer thereof is composed of a film of a methionine polymer or an amino acid copolymer containing methionine and not containing leucine, and the film is subjected to an oxidation treatment, A protective film for a sensor is provided, characterized in that the methionine component is oxidized to its sulfoxide. The protective film for sensors of the present invention is produced by forming a methionine polymer or an amino acid copolymer containing methionine and not containing leucine (hereinafter also simply referred to as an amino acid polymer) into a film shape, and then oxidizing this film body. It can be obtained by oxidation treatment with a chemical agent, and by applying an amino acid polymer in the form of a film on the surface of a film formed in advance from other polymeric materials.
After that, it can be obtained by oxidizing treatment with an oxidizing agent. Methionine used as an amino acid constituent of the present invention and the amino acid used as a copolymer component thereof may be D-form, L-form, or racemic form. In addition, the amino acids used as copolymerization components of methionine include conventionally known amino acids, such as alanine, glycine, valine, glutamic acid γ-methyl ester, glutamic acid γ-benzyl ester, aspartic acid β-methyl ester, and asparagine. Examples include acid-β-benzyl ester, N-benzyloxycarbonyl lysine, and N-benzyloxycarbonyl ornithine. The molecular weight of the amino acid polymer may be such that it forms a film. The methionine content in the methionine-containing amino acid copolymer varies depending on the type of amino acid that is a copolymerization component, but is preferably 30 mol% or more. As the oxidizing agent, commonly used oxidizing agents such as hydrogen peroxide, peracetic acid, iodine, and iodate are used. The oxidation treatment time is appropriately selected depending on the type, concentration, and temperature of the oxidizing agent, the type of amino acid, and the copolymerization composition. ). [Example] Next, the present invention will be explained in more detail with reference to Examples. Example 1 Poly-L-methionine was dissolved in tetrachloroethylene, poured onto a glass plate, and air-dried to obtain a film (thickness: 0.054 mm). This film was oxidized by immersing it in a 15% aqueous hydrogen peroxide solution at room temperature for 35 minutes, and then immersed in hot water for 8 hours or more. It was confirmed that the methionine component in the film was oxidized to sulfoxide by this oxidation treatment. Next, a culture solution containing human-derived epithelial cells (approximately 100,000 cells/ml) was left in contact with the oxidized film, and the film was placed in a room at 37°C with a carbon dioxide concentration of 5% and humidity of 100%. After 17 hours, the film was lightly washed with phosphate buffer, and the amount of cells adhering to the film was quantified by nuclear staining. For comparison, a similar cell adhesion test was conducted using polysulfone, which is used as a protective film for sensors, and a commercially available cell culture sheet as a standard sample. The cell attachment rate was determined by dividing the amount of cells attached to the film by the amount of cells attached to the standard sample. The results are shown in Table 1.
〔発明の効果〕〔Effect of the invention〕
本発明は、センサー用保護膜において、酸化処
理されたアミノ酸重合体膜を表面に有するもの
で、細胞の付着を著しく抑制することができる。
従つて、本発明のセンサー用保護膜で被覆保護
したセンサー検出部は、これを血液や尿等の細胞
を含む試験液と接触させても、その試験液中の細
胞付着が防止されるとから、センサーとしての感
度や応答速度の低下がない。
The present invention provides a protective film for a sensor that has an oxidized amino acid polymer film on its surface, which can significantly suppress cell adhesion. Therefore, even if the sensor detection part coated and protected with the sensor protective film of the present invention is brought into contact with a test liquid containing cells such as blood or urine, adhesion of cells in the test liquid will be prevented. , there is no decrease in sensitivity or response speed as a sensor.