【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
〔産業上の利用分野〕
本発明は、細胞が付着しにくいセンサー用保護
膜に関するものである。
ここでいうセンサーとは、臨床化学分析装置や
人工臓器に組み込んで使用するものであり、溶存
酸素、溶存炭酸ガス、及びPHのセンサー、さらに
酵素や微生物を固定化したバイオセンサーなどを
も包含するものであり、その検出部分は常に血
液、尿などの体液に接触しており、センサー保護
膜はその検出部分を覆い保護するものである。
〔従来技術〕
従来、センサー用保護膜には、ポリスルホン、
再生セルロース、酢酸セルロース等の高分子材料
が用いられている。これらの材料を用いたセンサ
ー用保護膜では、その材料表面に細胞が付着して
しまい、センサーとしての感度や応答速度の低下
を引きおこす。したがつて、センサー用保護膜に
おいては細胞の付着しない材料が求められてい
る。
〔発明の目的〕
本発明は、アミノ酸重合体を用いることによ
り、細胞付着の少ないセンサー用保護膜を提供す
ることを目的とする。
〔発明の構成〕
本発明者は、細胞の付着しにくい性質を有する
材料について種々研究を重ねたところ、ロイシン
重合体又はロイシンを含むアミノ酸共重合体の皮
膜は、細胞を著しく付着させない性質を有してお
り、センサー用保護膜として好適であることを見
い出し、本発明を完成するに到つた。
即ち、本発明によれば、センサー用保護膜にお
いて、その少なくとも表面層がロイシン重合体又
は、ロイシンを含むアミノ酸共重合体の皮膜から
構成されていることを特徴とするセンサー用保護
膜が提供される。
本発明のセンサー用保護膜は、ロイシン重合体
又は、ロイシンを含むアミノ酸共重合体（以下、
これらを単にアミノ酸重合体とも言う）を膜状に
成形することにより得ることができ、また、あら
かじめ他の高分子材料で形成した膜体の表面に、
アミノ酸重合体を膜状に塗布することによつて得
ることができる。
本発明のアミノ酸構成成分として用いるロイシ
ン及びその共重合成分として用いるアミノ酸は、
Ｄ体、Ｌ体、ラセミ体でもよい。また、ロイシン
の共重合成分として用いられるアミノ酸として
は、従来公知のもの、例えば、アラニン、グリシ
ン、メチオニン、バリン、グルタミン酸−γ−メ
チルエステル、グルタミン酸−γ−ベンジルエス
テル、アスパラギン酸−β−メチルエステル、ア
スパラギン酸−β−ベンジルエステル、N〓−ベ
ンジルオキシカルボニルリジン、N〓−ベンジル
オキシカルボニルオルニチン系が挙げられる。
アミノ酸重合体の分子量は、その皮膜が形成さ
れる程度であればよい。ロイシンを含むアミノ酸
共重合体中のロイシン含量は、共重合成分である
アミノ酸の種類により変化するが、好ましくは30
モル％以上である。
〔実施例〕
次に本発明を実施例によりさらに詳細に説明す
る。
実施例 １
Ｌ−ロイシンとＬ−グルタミン酸ベンジルとの
共重合体（ロイシンとグルタミン酸ベンジルとの
モル比＝７：３）のベンゼンとジオキサン（７：
３）との混合溶液をガラス板上に流延し、風乾し
て皮膜（膜厚約0.05mm）を得た。この皮膜をエタ
ノールでソツクスレー抽出を行つた後、乾燥し
た。
この皮膜上で、人由来の上皮性細胞を含む培養
液（約10万個／ml）を接触させたまま、炭酸ガス
濃度５％、湿度100、37℃の部屋に静置した。17
時間後、皮膜をリン酸緩衝液で軽く洗浄し、皮膜
上に付着している細胞の量を核染色法により定量
した。比較のため、グルタミン酸ベンジル単独重
合体皮膜及びセンサー用保護膜に使用されている
ポリスルホン、標準試料として市販の細胞培養シ
ートを用いて、同様の細胞付着試験を行つた。皮
膜に付着した細胞の量を、標準試料を付着した細
胞の量で割ることにより、細胞付着率を求めた。
その結果を第１表に示す。
[Industrial Application Field] The present invention relates to a protective film for sensors to which cells are difficult to adhere. The term "sensor" referred to here refers to a device that is used by being incorporated into a clinical chemistry analyzer or an artificial organ, and includes sensors for dissolved oxygen, dissolved carbon dioxide, and PH, as well as biosensors with immobilized enzymes and microorganisms. The detection part is always in contact with body fluids such as blood and urine, and the sensor protective film covers and protects the detection part. [Prior art] Conventionally, protective films for sensors include polysulfone,
Polymer materials such as regenerated cellulose and cellulose acetate are used. In protective films for sensors using these materials, cells adhere to the material surface, causing a decrease in the sensitivity and response speed of the sensor. Therefore, materials to which cells do not adhere are required for protective films for sensors. [Object of the Invention] An object of the present invention is to provide a protective film for a sensor with less cell adhesion by using an amino acid polymer. [Structure of the Invention] The present inventor has repeatedly conducted various studies on materials that have properties that make it difficult for cells to adhere to them, and has found that a film made of a leucine polymer or an amino acid copolymer containing leucine has properties that do not allow cells to adhere significantly. The present inventors have discovered that the present invention is suitable as a protective film for sensors, and have completed the present invention. That is, according to the present invention, there is provided a protective film for a sensor, wherein at least the surface layer thereof is composed of a film of a leucine polymer or an amino acid copolymer containing leucine. Ru. The protective film for sensors of the present invention is made of a leucine polymer or an amino acid copolymer containing leucine (hereinafter referred to as
These can be obtained by forming a film (also simply referred to as an amino acid polymer) into a film.
It can be obtained by coating an amino acid polymer in the form of a film. Leucine used as the amino acid constituent of the present invention and the amino acid used as its copolymerization component are:
It may be D-form, L-form, or racemic form. In addition, the amino acids used as copolymerization components of leucine include conventionally known amino acids, such as alanine, glycine, methionine, valine, glutamic acid γ-methyl ester, glutamic acid γ-benzyl ester, and aspartic acid β-methyl ester. , aspartic acid-β-benzyl ester, N-benzyloxycarbonyl lysine, and N-benzyloxycarbonyl ornithine. The molecular weight of the amino acid polymer may be such that it forms a film. The leucine content in the leucine-containing amino acid copolymer varies depending on the type of amino acid that is the copolymerization component, but is preferably 30%
It is mol% or more. [Example] Next, the present invention will be explained in more detail with reference to Examples. Example 1 A copolymer of L-leucine and benzyl L-glutamate (molar ratio of leucine and benzyl glutamate = 7:3) in benzene and dioxane (7:3).
A mixed solution of 3) was cast on a glass plate and air-dried to obtain a film (film thickness approximately 0.05 mm). This film was subjected to Soxhlet extraction with ethanol and then dried. A culture solution containing human-derived epithelial cells (approximately 100,000 cells/ml) was left in contact with this film in a room at 37°C with a carbon dioxide concentration of 5% and humidity of 100°C. 17
After a period of time, the film was lightly washed with phosphate buffer, and the amount of cells adhering to the film was quantified by nuclear staining. For comparison, a similar cell adhesion test was conducted using a benzyl glutamate homopolymer film, polysulfone used in the sensor protective film, and a commercially available cell culture sheet as a standard sample. The cell attachment rate was determined by dividing the amount of cells attached to the film by the amount of cells attached to the standard sample.
The results are shown in Table 1.
【表】
実施例 ２
Ｌ−ロイシンとＬ−グルタミン酸ベンジルとの
共重合体のかわりに、Ｌ−ロイシンとＬ−N〓−
ベンジルオキシカルボニルリジンとの共重合体
（ロイシンとN〓−ベンジルオキシカルボニルリジ
ンとのモル比＝７：３）を用いた以外は実施例１
と同様にして、皮膜を成形し、細胞付着実験を行
つた。結果を第２表に示す。[Table] Example 2 Instead of the copolymer of L-leucine and benzyl L-glutamate, L-leucine and L-N〓-
Example 1 except that a copolymer with benzyloxycarbonyllysine (molar ratio of leucine and N-benzyloxycarbonyllysine = 7:3) was used.
In the same manner as above, a film was formed and a cell adhesion experiment was performed. The results are shown in Table 2.
〔発明の効果〕〔Effect of the invention〕
本発明は、センサー用保護膜において、アミノ
酸重合体膜を表面に有するもので、細胞の付着を
著しく抑制することができる。
従つて、本発明のセンサー用保護膜で被覆保護
したセンサー検出部は、これを血液や尿等の細胞
を含む試験液と接触させても、その試検液中の細
胞付着が防止されることから、センサーとしての
感度や応答速度の低下がない。
The present invention provides a protective film for a sensor that has an amino acid polymer film on its surface, and can significantly suppress cell adhesion. Therefore, even if the sensor detection part coated and protected with the sensor protective film of the present invention is brought into contact with a test liquid containing cells such as blood or urine, adhesion of cells in the test liquid will be prevented. Therefore, there is no decrease in sensitivity or response speed as a sensor.