【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明はミツモンキンウワバ及びその近縁種に
対する誘引剤に関する。
ミツモンキンウワバ（Plusia agnata
Staudinger）は大豆の害虫として寒冷地を除く
各地に分布していて、大量発生を繰り返してしだ
いに北上するとされており、本種の発生時期を的
確に知ることは極めて重要である。一方、最近多
くの害虫についていわゆる性フエロモンの化学構
造が明らかにされており、この性フエロモンを用
いて害虫の発生消長調査が効率的に行われるよう
になつてきている。性フエロモンとは一般に雌成
虫が分泌する化学物質で、同種の雄成虫に対して
種特異的な誘引作用を示す。このような誘引性の
性フエロモンの化学構造を明らかにして、その物
質を化学合成して、いわゆる性誘引物質として用
いることにより、効率的に発生消長を調査するこ
とが可能となる。更に、この物質を用いて大量の
雄を誘殺したり、雌雄の交尾行動を撹乱したりす
ることにより成虫期を対象とした害虫の防除を行
うこともできる。
本発明者らは、これらの事情に鑑み、ミツモン
キンウワバの性フエロモンの研究を行い、ミツモ
ンキンウワバの処女雌から雄に対する誘引活性を
有する成分を抽出し、その化学構造を決定した。
更に化学的に合成した化合物が、ミツモンキンウ
ワバに対して有効な誘引作用を示すことを確認し
た。本発明はこれらの知見に基づいて完成された
ものである。
即ち、本発明は式（）で示される(Z)−７−ド
デセン−１−オールアセタートと、式（）で示
される(Z)−９−ドデセン−１−オールアセタート
とを有効成分とする昆虫誘引剤に関する。
CH3−（CH2）3−CH＝CH−（CH2）6
−Ｏ−CO−CH3 （）
CH3−CH2−CH＝CH−（CH2）8
−Ｏ−CO−CH3 （）
これらの化合物をミツモンキンウワバ用誘引剤
の有効成分として使用する場合、種々の形態が可
能である。これらの化合物は極めて微量で著効を
奏すること、及び揮発性の油状液であることか
ら、そのまま、あるいはヘキサン等の適当な溶媒
に溶解したものを適当な担体（各種合成高分子
体、天然ゴム、合成ゴム）に吸着させたり、これ
らの担体素材の成型物に封入した形態で使用する
ことが好ましい。
有効成分の含有量は適宜に定めることができる
が、担体に吸着させたり担体素材成型物に封入す
る場合は、担体１ｇ中に式（）及び式（）の
両化合物の和として0.1−100mg程度が好ましい。
誘引剤中の式（）及び（）の化合物の比率
は、後記の粗抽出物中の両化合物の比率に近いこ
とが好ましく、通常は（）：（）＝100：１〜
20、更に好ましくは100：５〜10程度である。
このような両有効成分を含有する担体あるいは
担体素材成型物を適当な支持体によつて、例え
ば、コーントラツプ、石鹸水や殺虫剤を入れた容
器上あるいは適当な粘着物質を塗布した物体上ま
たはその付近に設置することによりミツモンキン
ウワバが誘引され、容器中に落下またはコーント
ラツプや粘着物質に捕捉されて死亡する。
次に本発明に係わる両化合物の単離とその構造
決定について説明する。
供試昆虫は白インゲンなどを成分とする人工飼
料で25℃で飼育した。得られた蛹を雄雌に分け、
羽化後は砂糖水を餌として与えた。まず、性フエ
ロモンの粗抽出物を得るための条件を検討した。
雌を羽化後、長日条件（16時間明期−８時間暗
期）に３日間置いておき、経時的に切り取つた腹
部末端抽出物をキヤピラリーガスクロマトグラフ
イにより分析した。経時的に大きさが変化する性
フエロモン成分と考えられるピークは暗期５時間
目に最大となつたが、全明条件に３日間置いた後
に１〜３時間暗処理した場合のほうがそのピーク
は大きかつた。そこで、羽化後全明条件に３日間
置いた後、２時間の暗処理をしてから腹部末端を
切り取り、ヘキサンに浸漬して粗抽出物を得た。
精製過程における生物活性の追跡は野外網室で次
のように行なつた。野外網室（５×５ｍ、高さ２
ｍ）に羽化してから野外に２日間置いた雄蛾を夕
方に放飼した。試料を綿ロープに含浸しコーント
ラツプに付け、翌朝に誘引された数を調べた。
5000匹の処女雌から得た粗抽出物を用い、活性成
分の単離を行つた。フロリシルカラムクロマトグ
ラフイにより、ヘキサン、５％エーテル／ヘキサ
ン、15％エーテル／ヘキサン、25％エーテル／ヘ
キサン、50％エーテル／ヘキサン、２％メタノー
ル／エーテル、４％酢酸／エーテルによつて順次
される画分を得た。５％エーテル／ヘキサンで溶
出された画分は粗抽出物と同等の活性を示した
（第１表、Ａ）。次いで、この画分を高速液体クロ
マトグラフイ（HPLC）で精製した。シリカゲル
カラム（リクロソルブSI−60，内径4.7mm、長さ
25cm）から0.5酢酸エチル／ヘキサンを溶媒とし
て毎分１mlの流速で溶出したところ、ドデシルア
セテートの溶出される部分に活性があつた（表１
表、Ｂ）。更に、ガスクロマトグラフイ（GC）に
より３％OV−１（クロモソルブWAW HMDS6
０／８０）を充填したガラスカラム（内径２mm、長さ
1m）を用いて150℃のオーブン温度条件下で分取
した。この条件でドデシルアセテートは5.2分に
溶出した。活性はこの保持時間のピークに認めら
れた（第１表、Ｃ）。この活性の認められた分取
画分をキヤピラリーカラム（液層SP−2340、内
径2.5mm、長さ50m）を使い、スプリツトレス試
料導入方式を用いたガスクロマトグラフイにより
分析した。分析はオーブン温度80℃で試料を導入
し、30秒その温度を保持した後毎分10℃で160℃
まで昇温する条件で行つた。16.51、16.99、17.60
分に面積比率0.5：100：８のピークが検出され
た。この保持時間を合成化合物の保持時間と比較
したところ、それぞれ16.51分のドデシルアセテ
ート、16.98分の(Z)−７−ドデセン−１−オール
アセテート、17.59分の(Z)−９−ドデセン−１−
オールアセテートとよく一致した。更に、ガスク
ロマトグラフ／マススペクトロメトリー（GC−
MS）により70eVのEIモードで分析し、コンピユ
ーター処理によりマススペクトルを得た。ガスク
ロマトグラフイはガラスカラム（内径２mm、長さ
1.2m）に10％PEG−20M（クロモソルブWAW
HMDS60/80）を充填して用い、160℃のオーブ
ン温度で行つた。GC−MSによつて得られたマ
ススペクトル、ｍ／ｚ（相対強度）54（100），61
(7)，67（100），166（31）、から２番目と３番目に溶
出される成分はドデセン−１−オールアセテート
であることが確認された。更に、二重結合の位置
を確認するために、二重結合が５，７，９の位置
にあるドデセン−１−オールアセテートを標準品
として、オゾン分解して分析する条件を次のよう
に設定した。オゾン発生装置から得られたオゾン
を−60℃に冷却した試料のヘキサン溶液に30秒間
吹き込んだ後、そのままGC−MSに導入し、オ
ゾン分解産物であるω−アセトキシアルデヒドを
80℃から210℃まで毎分10℃の昇温する温度条件
で分析した。この分析でω−アセトキシヘプタナ
ール、ｍ／z43（100），61（56），69（82），129(10)
、
とω−アセトキシノナナール、ｍ／z54（100），61
（79），97（40），157(3)、とが検出され、二重結合
の位置が確認された。この２成分の生物活性を調
べたところ、２成分の混合物が活性があることが
確認された（第１表、Ｄ，Ｅ）。また、１成分で
は誘引力は認められなかつた（第１表、Ｆ）。こ
れらの結果から、ミツモンキンウワバの性フエロ
モンは(Z)−７−ドデセン−１−オールアセテート
と(Z)−９−ドデセン−１−オールアセテートの２
成分の混合物であると結論された。
TECHNICAL FIELD The present invention relates to an attractant for C. chinensis and its related species. Plusia agnata
Staudinger is a soybean pest that is distributed throughout the country, except in cold regions, and is said to occur repeatedly in large numbers and gradually move northward, so it is extremely important to know exactly when this species appears. On the other hand, the chemical structures of so-called sex pheromones for many pests have recently been clarified, and it has become possible to efficiently investigate the occurrence and fate of pests using these sex pheromones. Sex pheromones are chemical substances that are generally secreted by adult females and exhibit a species-specific attracting effect on adult males of the same species. By clarifying the chemical structure of such attractive sex pheromone, chemically synthesizing the substance, and using it as a so-called sex attractant, it becomes possible to efficiently investigate the development and development of sex pheromone. Furthermore, this substance can be used to attract and kill large numbers of males or to disrupt the mating behavior of males and females, thereby controlling pests targeting the adult stage. In view of these circumstances, the present inventors conducted a study on the sex pheromone of A. japonica, extracted a component having an activity to attract males from a virgin female of a.
Furthermore, it was confirmed that the chemically synthesized compound exhibits an effective attracting effect on C. chinensis. The present invention was completed based on these findings. That is, the present invention uses (Z)-7-dodecen-1-ol acetate represented by the formula () and (Z)-9-dodecen-1-ol acetate represented by the formula () as active ingredients. Concerning insect attractants. CH 3 −(CH 2 ) 3 −CH=CH−(CH 2 ) 6 −O−CO−CH 3 () CH 3 −CH 2 −CH=CH−(CH 2 ) 8 −O−CO−CH 3 ( ) When these compounds are used as an active ingredient of an attractant for the honeysuckle, various forms are possible. Since these compounds are effective in extremely small amounts and are volatile oily liquids, they can be used directly or dissolved in an appropriate solvent such as hexane in an appropriate carrier (various synthetic polymers, natural rubber, etc.). It is preferable to use it in the form of being adsorbed onto a material such as , synthetic rubber) or encapsulated in a molded product of these carrier materials. The content of the active ingredient can be determined as appropriate, but when it is adsorbed onto a carrier or encapsulated in a molded carrier material, it is approximately 0.1 to 100 mg as the sum of both compounds of formula () and formula () in 1 g of carrier. is preferred. The ratio of the compounds of formulas () and () in the attractant is preferably close to the ratio of both compounds in the crude extract described below, usually ():() = 100:1 ~
20, more preferably about 100:5 to 10. The carrier or carrier material molding containing both active ingredients is placed on a suitable support, for example on a corn trap, a container containing soapy water or an insecticide, or on an object coated with a suitable adhesive substance. By placing it nearby, honeysuckle will be attracted, and they will fall into the container or become trapped in corn traps or sticky substances and die. Next, the isolation and structure determination of both compounds according to the present invention will be explained. The test insects were raised at 25°C on artificial feed containing ingredients such as white beans. Separate the obtained pupae into male and female,
After emergence, they were fed sugar water. First, we investigated the conditions for obtaining a crude sex pheromone extract.
After the females emerged, they were left under long-day conditions (16 hours of light - 8 hours of darkness) for 3 days, and extracts from the abdominal end, which were cut over time, were analyzed by capillary gas chromatography. The peak, which is thought to be a sex pheromone component whose size changes over time, reached its maximum at the 5th hour of the dark period, but the peak was higher when the cells were left in full light for 3 days and then treated in the dark for 1 to 3 hours. It was big. Therefore, after eclosion, they were left in full light for 3 days, then dark-treated for 2 hours, and then the abdominal end was cut off and immersed in hexane to obtain a crude extract.
Biological activity during the purification process was monitored in an outdoor screened room as follows. Outdoor screen room (5 x 5 m, height 2
Male moths were left in the field for 2 days after emerging in 2007, and then released in the evening. A cotton rope was impregnated with the sample and attached to a corn trap, and the number attracted was determined the next morning.
The active ingredient was isolated using crude extracts obtained from 5000 virgin females. Florisil column chromatography was performed with hexane, 5% ether/hexane, 15% ether/hexane, 25% ether/hexane, 50% ether/hexane, 2% methanol/ether, 4% acetic acid/ether. A fraction was obtained. The fraction eluted with 5% ether/hexane showed an activity comparable to that of the crude extract (Table 1, A). This fraction was then purified by high performance liquid chromatography (HPLC). Silica gel column (Licrosolve SI-60, inner diameter 4.7 mm, length
25cm) using 0.5 ethyl acetate/hexane as a solvent at a flow rate of 1 ml per minute, the area where dodecyl acetate was eluted was active (Table 1
Table, B). Furthermore, 3% OV-1 (Chromosolve WAW HMDS6
Glass column (inner diameter 2 mm, length
1m) at an oven temperature of 150°C. Under these conditions, dodecyl acetate eluted at 5.2 minutes. Activity was observed at the peak at this retention time (Table 1, C). The fractions in which this activity was observed were analyzed by gas chromatography using a splitless sample introduction method using a capillary column (liquid phase SP-2340, inner diameter 2.5 mm, length 50 m). The analysis was performed by introducing the sample at an oven temperature of 80°C, holding that temperature for 30 seconds, and then increasing it to 160°C at a rate of 10°C per minute.
The test was carried out under conditions where the temperature was raised to . 16.51, 16.99, 17.60
A peak with an area ratio of 0.5:100:8 was detected. When this retention time was compared with the retention time of the synthetic compounds, the results were 16.51 minutes for dodecyl acetate, 16.98 minutes for (Z)-7-dodecen-1-ol acetate, and 17.59 minutes for (Z)-9-dodecen-1-ol.
It was in good agreement with all acetate. Furthermore, gas chromatography/mass spectrometry (GC-
MS) was analyzed in EI mode at 70 eV, and a mass spectrum was obtained by computer processing. Gas chromatography uses a glass column (inner diameter 2 mm, length
1.2m) to 10% PEG-20M (Chromosolve WAW
HMDS60/80) was used and the oven temperature was 160°C. Mass spectrum obtained by GC-MS, m/z (relative intensity) 54 (100), 61
It was confirmed that the second and third components eluted from (7), 67 (100), and 166 (31) were dodecen-1-ol acetate. Furthermore, in order to confirm the position of the double bond, dodecen-1-ol acetate with double bonds at positions 5, 7, and 9 was used as a standard product, and the conditions for ozonolysis and analysis were set as follows. did. Ozone obtained from the ozone generator was blown into a hexane solution of the sample cooled to -60°C for 30 seconds, and then introduced into the GC-MS as it was to extract ω-acetoxyaldehyde, an ozone decomposition product.
The analysis was carried out under temperature conditions in which the temperature was increased from 80°C to 210°C at a rate of 10°C per minute. In this analysis, ω-acetoxyheptanal, m/z 43 (100), 61 (56), 69 (82), 129 (10)
,
and ω-acetoxynonanal, m/z54(100), 61
(79), 97(40), and 157(3) were detected, and the position of the double bond was confirmed. When the biological activity of these two components was investigated, it was confirmed that the mixture of the two components was active (Table 1, D and E). Moreover, no attractive force was observed with one component (Table 1, F). Based on these results, the sex pheromones of the C. chinensis are composed of two compounds: (Z)-7-dodecen-1-ol acetate and (Z)-9-dodecen-1-ol acetate.
It was concluded that it was a mixture of components.
【表】【table】
【表】
試験例 １
合成性フエロモン成分(Z)−７−ドデセン−１−
オールアセテート及び(Z)−９−ドデセン−１−オ
ールアセテートならびにこれらを組合わせたもの
についてミツモンキンウワバ成虫に対する誘引性
を野外で試験した。
各合成化合物をプラスチツクキヤツプに浸みこ
ませたものを誘引源とし、地上1.2mの高さにし
たコーントラツプに設置した。誘殺された蛾は解
剖して交尾器を調べ種を確認した。その結果、第
２表に示されるように野外条件下で誘引性が確認
された。なお、誘引源のないトラツプにはいずれ
も誘殺されなかつた。[Table] Test example 1 Synthetic pheromone component (Z)-7-dodecene-1-
All acetate and (Z)-9-dodecen-1-ol acetate, as well as their combinations, were tested in the field for their attractiveness to adults of the goldenrod. The attraction source was a plastic cap impregnated with each synthetic compound and placed in a corn trap at a height of 1.2 m above the ground. The lured and killed moths were dissected and their copulatory organs were examined to confirm the species. As a result, as shown in Table 2, attractiveness was confirmed under field conditions. In addition, none of the traps without an attraction source were able to attract or kill them.
【表】【table】