JPH0484896A - 光学活性なイソインドリン―１―オン誘導体の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、光学活性なイソインドリン−１オン誘導体の
製造法に関する。光学活性なイソインドリン−１−オン
誘導体は抗不整脈薬として有用な２−ジエチルアミノエ
チルイソインドリンー１−オン誘導体の光学活性体の製
造原料として有用である。

従来の技術 イソインドリン−１−オン誘導体の製造法は、米国特許
第３０９１５６８号および米国特許第３８４９５７０号
に報告されいる。２−ジエチルアミノエチルイソインド
リンー１−オン誘導体については、強い抗不整脈作用が
特開昭６３２６４４５７号公報にその合成法とともに開
示されている。これらはいずれもラセミ体であり、光学
活性なイソインドリン−１−オン誘導体の製造法は知ら
れていない。

発明が解決しようとする課題 一般に、ある薬理作用が知られているラセミ化合物にお
いては、その光学活性体が研究上、開発上京に期待され
求められている。

本発明の目的は、強し）抗不整脈作用を有するジエチル
アミノエチルイソインドリン−１〜オン誘導体の光学活
性体の製造原料として有用な光学活性なイソインドリン
−１−オン誘”ＪＢｋの製造法を提供することにある。

課題を解決するための手段 本発明は下記式（Ｉ） で表されるイソインドリン−１−オン誘導体〔以下、化
合物（１）という〕と式 （式中、Ｒは低級アルキル基を表す。）で表されるカル
ボン酸もしくはそのエステルまたはその反応性誘導体と
を、溶媒中、化合物（１）を不斉アシル化する能力を有
する酵素の存在下反応させて、化合物（１）を立体選択
的にアシル化し、反応液より該アシル化された化合物（
１）を分離し、次いで加水分解処理に付すことを特徴と
する化合物（１）の光学活性体の製造法に関する。

さらに本発明は下記式（ＩＩ） （式中、Ｒは低級アルキル基を表す。）で表される化合
物〔以下、化合物（ＩＩ）という〕する能力を有する酵
素の存在下、立体選択的に加水分解し、反応液より該加
水分解された化合物（ＩＩ）を分離することを特徴とす
る化合物（Ｉ）の光学活性体の製造法に関する。

式（ＩＩ）の定義中、低級アルキル基としては、炭素数
１〜４の直鎮または分岐状アルキル基、例えばメチル、
エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル
、５ｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔブチル等が包含される。

次に、光学活性な化合物（１）の製造法について説明す
る。

参考例１で得られるラセミ体の化合物（１）をカルボン
酸もしくはそのエステルまたはその反応性誘導体と不斉
アシル化する能力を有する酵素の存在下、溶媒中、立体
選択的にアシル化することによりアシル化体である化合
物（ｆｆ）の光学活性体を得ることができる。不斉アシ
ル化する能力を有する酵素としては、化合物（ｒ）を立
体選択的にアシル化する能力を有する酵素であればいず
れでも用いることができる。例えを、水性媒体中、化合
物（ＩＩ）を不斉加水分解ば、微生物により生産される
か、または動物組織より分離されるトリアジルグリセロ
ールリパーゼ（ＥＣ３，１，１，３）　、カルボキシエ
ステラーゼ（ε［：　３．１．１．　Ｉ）、アリルエス
テラーゼ（ＥＣ３，１，１゜２）、アセチルエステラー
ゼ（ＥＣ３，１，１，６）、コレステロールエステラー
ゼ（ＥＣ３，１，１，１３）等の精製物、粗精製物、こ
れらの酵素の含有物、例えば、これらの酵素を含有する
菌体または菌体処理物等があげられる。トリアジルグリ
セロールリパーゼとしては、例えばリパーゼＰアマノ（
シュードモナス属微生物由来、大野製薬社製）、リポプ
ロティンリパーゼ（ＬＰＬ；ンユー１’モナス属微生物
由来、協和メデックス社製）、キャンシダリパーゼ（キ
ャンシダ属微生物白来、シグマ社製）、豚膵ＩＩＩ　Ｉ
Ｊパーゼ（ＰＰＬ；シグマ社製）等の酵素またはりポザ
イム（ムコール属微生物由来、ノボ社製）等の固定化酵
素等のほか、シュードモナス　（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ）属、リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属、アスペルギ
ルス（＾３ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ムコール（Ｍｕｃ
ｏｒ）属、キャンシダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、アースロ
バフタ−（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）属由来の微生物
が生産するトリアジルグリセロールリパーゼ等があげら
れる。

菌体処理物としては、菌体の乾燥処理物、界面活性剤処
理物、酵素処理物、超音波処理物、機械的摩砕処理物、
溶媒処理物、菌体の蛋白質分画、菌体および菌体処理物
の固定化物等が用いられる。

溶媒としては、トルエン、ベンゼン、酢酸エチル、ジメ
チルホルムアミド、テトラヒドロフラン、イソプロピル
エーテル、クロロホルム等が単独もしくは組み合わせて
用いられる。カルボン酸としては、酢酸、プロピオン酸
、酪酸等の低級脂肪酸族カルボン酸類が、そのエステル
としては、メチルエステル、エチルエステル、ビニルエ
ステル、イソプロペニルエステル、ブチルエステル等の
低級アルキルエステル頚またはエノールエステル類等が
、その反応性誘導体としては、酸無水物等がそれぞれ用
いられる。

化合物（１）は、反応液に対し０．５〜２５重量％、酵
素は化合物（Ｉ）に対し０．１〜５０重量％用いられる
。反応は一２０〜５０℃で行われ、通常１〜４６時間で
終了する。

次いで、化合物（ＩＩ）の光学活性体と、未反応の化合
物（１）を分離する。

化合物（１）は立体選択的にアシル化されるため、未反
応の化合物（１）もまた光学活性体として得られる。

また、化合物（ＩＩ）の光学活性体を公知の方法で加水
分解することにより光学活性な化合物Ｎ）を得ることが
できる。

光学活性な化合物（Ｉ）はまた、化合物（ＩＩ＞を水性
媒体中、不斉加水分解する能力を有する酵素の存在下、
立体選択的に加水分解することにより得ることができる
。化合物（Ｉｔ）は、ラセミ体のほか、前記不斉アシル
化反応で得られる化合物（ＩＩ）の光学活性体を用いて
もよい。

不斉加水分解する能力を有する酵素としては、化合物（
Ｕ）を立体選択的に加水分解する能力を有する酵素であ
ればいずれでも用いることができる。例えば、微生物に
より生産されるか、または動物組織より分離されるトリ
アジルグリセロールリパーゼ（ＥＣ３，１，１，３）　
、カルボキシエステラーゼ（ＥＣ３，１，１，１）、ア
リルエステラーゼ（ＥＣ３，１，１，２）、アセチルエ
ステラーゼ（ＥＣ３１１，６）、コレステロールエステ
ラーゼ（ＥＣ３，１１、１３）等の精製物、粗精製物、
これらの酵素の含有物、例えば、これらの酵素を含有す
る菌体または菌体処理物等があげられる。トリアジルグ
リセロールリパーゼとしては、例えばリパーゼＰアマノ
　（シュードモナス属微生物由来、天野製薬社＋／Ｍ）
、リポプロティンリパーゼ（ＬＰＬ：シュードモナス属
微生物由来、協和メデックス社製）、キャンシダリパー
ゼ（キャンシダ属微生物白来、シグマ社製）、豚膵臓リ
パーゼ（ＰＰＬ；シグマ社製）等の酵素またはりボザイ
ム（ムコール属微生物由来、ノボ社製）等の固定化酵素
等のほか、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）
属、リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）　ＩＩ、アスペルギ
ルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ムコール（Ｍｕｃ
ｏｒ）属、キャンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、アースロ
バフタ−（＾ｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）　Ｉｉ由来の微
生物が生産するトリアジルグリセロールリパーゼ等があ
げられる。

菌体処理物としては、曲記と同様のものがあげられる。

水性媒体としては、水または水とエタノール、アセトン
、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン等との混
合溶媒が用いられる。また基質である化合物（ＩＩ）の
分散性を向上させるためにノニオン（日本油脂社製）、
スパン（関東化学社製）、トリトン（牛丼化学社製）な
どの界面活性剤を添加することもできる。

さらに、反応中のｐＨを一定に保つために緩衝液を用い
ることもできる。緩衝液としては、リン酸ナトリウム、
リン酸カリウム等の無機酸塩の緩衝液、酢酸ナトリウム
、クエン酸ナトリウム等の有機酸塩の緩衝液等があげら
れる。また、必要に応じて、水酸化ナトリウム等の塩基
を添加することも可能である。

化合物（ＩＩ）は反応液に対して０．１〜５０重量％用
いられ、酵素は化合物（ＩＩ）に対して０、１〜５０重
量％用いられる。反応は、１０〜７０℃、好ましくは２
０〜５０℃で行われ、１〜２４時間で終了する。

化合物（ＩＩ）は、立体選択的に加水分解されるため、
未反応の化合物（ｆｆ）もまた光学活性体として得られ
る。この未反応の光学活性な化合物（Ｉ［）を公知の方
法で加水分解することにより、光学活性な化合物（Ｉ）
を得ることができる。

光学活性な化合物（ｒ）は、抗不整脈薬として有用な２
−ジエチルアミノエチルイソインドリン−１−オン誘導
体〔以下、化合物（Ｉｌｌｒ）という〕の光学活性体の
製造原料として有用であり、以下に化合物（ＩＩＩ）の
製造法について説明する。

光学活性な化合物（Ｉ）と溶媒中、塩基の存在下、メチ
ルクロライド、トシルクロライド等とを反応させて水酸
基を活性化した後にジエチルアミンと反応させることに
より光学活性な下記式で示される化合物（ＩＩ［）を得
ることができる。

溶媒としては、ジメチルホルムアミド、アセトン、テト
ラヒドロフラン、クロロホルム等が単独または組み合わ
せて用いられる。塩基としては、トリエチルアミン、メ
チルモルホリン等の有機塩基が、化合物（ＩＩ）に対し
て１〜１０等量用いられる。ジエチルアミンは、化合物
（ＩＩ）に対して２〜１０等量用いられる。反応は、常
温から１００℃の間で１〜２４時間で終了する。

上記製造法における目的化合物は濾過、抽出、洗浄、乾
燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィーに付して単
離精製することができる。また、中間体においては、と
くに精製することなく、次の反応に供することも可能で
ある。

以下に実施例および参考例を示す。

実施例１ 参考例１で得られる３−（２−アミノ−５シアノフエニ
ル）−２−（２−ヒドロキシエチル）イソインドリン−
１−オン４００ｍｇを１０−の酢酸エチルに溶解し、無
水酢酸０．２８ｍｃｙ（！：リポプロテインリパーゼ（
ＬＰＬ、協和メデックス社製）６７ｍｇを加え、室温で
４時間反応させた。反応液から酵素を戸別し、ｐ液を減
圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマト
グラフィーにより精製することにより（＋）−３−（２
−アミノ−５−シアノフェニル）−２−（２−ア七トキ
シエチルンイソインドリンー１−オン〔以下、（＋）〜
アセテートと略記する〕２１３■（収率４６％）と未反
応の（−）−３−（２−アミノ−５−シアノフェニル）
−２−（２−ヒドロキシエチル）イソインドリン−１−
２ｉン〔以下、（−）−アルコールと略記する１１８３
ｍｇ（収率４５．８％）を得た。これらの光学純度を高
速液体クロマトグラフィー［ＨＰＬＣ，カラム　キラル
セルＯＤ（ダイセル社製）、ヘキサン：エタノール：ジ
エチルアミン−９００・１００：１を用い、流速０．８
ｄ／分で溶出〕に付し、２５４ｎｍの吸収で測定すると
（＋）−アセテート、（−）−アルコールの光学純度は
それぞれ８０％ｅｅ、〉９５％ｅｅであった。（−）−
アルコールの旋光度は−４６，５゜（ｃ＝１．　エタノ
ール）であった。

実施例２〜４ 実施例１で用いたＬＰＬの代わりに下記の酵素を用い、
実施例１と同様に反応を行った。第１表に生成した（＋
）−アセテート、（−）アルコールの光学純度を示す。

第１表 リパーゼＰアマノ　　１８　　　４６　　　　２２リボ
ザイム　　　　　　　４　　　　１２　　　　　１０キ
ヤンシダリパーゼ　２４　　　３２　　　　２８＊：反
応時間は約５０％がアシル化された時間である。

実施例５ 実施例１で得られる（＋）−アセテート１５９ｇ（光学
純度８８％ｅｅ）を１．６ｄのジメチルホルムアミドに
溶解し、ＬＰＬ６０ｍｇと０．５％トリトンＸとを含む
８０−のリン酸緩衝液（ｐ）１７）と８−のエタノール
との混合溶媒を加えて懸濁させ、室温で５時間反応させ
た。反応液に１００−の酢酸エチルを加えて抽出し、有
機層を減圧下濃縮した残渣をシリカゲルカラムクロマト
グラフィーで精製することにより９６０ａ＋ｇ（収率６
９％）の（＋）−アルコールが得られた。

〔光学純度：〉９５％ｅｅ、旋光度：　−４−５７，３
゜（Ｃ＝１、エタノール）〕 参考例１ ２−シアノ−１１−ヒドロキシ−５，１１−ジヒドロ−
６Ｈ−ジベンゾＣｂ、ｅ］　アゼピン６−オン２．５ｇ
を４０ｍ１のテトラヒドロフランと２，８−のジメチル
アセトアミドに溶解し、水冷下２．１ｇのトリエチルア
ミンと１５ｇのメシルクロライドを添加した。反応液を
室温で１時間反応させ、２．２ｇのモノアミノエタノー
ルを加え、さらに３時間反応させた。反応液に５０−の
水と１００ｍ１の酢酸エチルを加えて抽出を行い有機層
を分離した。この有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣に塩化水素を飽和さ
せたエタノール５０証を加えて３時間加熱還流した。冷
却後、反応液を濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加
え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸
マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（２００ｄ；酢酸エチル
で溶出）で精製し、２．１ｇ（収率７１．７％）の３−
（２−アミノ−５−シアノフェニル）−２−（２−ヒド
ロキシエチル）イソインドリン−１−オンを淡黄色粉末
として得た。

参考例２ 実施例１で得られる（−）−アルコール７４８ｍｇを１
５艷の塩化メチレンに溶解し、水冷下、０．５６９艷の
トリエチルアミンと０．３０３艷のメシルクロライドを
滴下した。室温で１時間反応させた後、５０−のクロロ
ホルムを加えて抽出を行った。有機層を水洗し無水硫酸
マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮して８２０ｍｇ（収
率８６．６％）のメシレートの粉末を得た〔旋光度１３
５．４°　（ｃ＝１．　　エタノール）〕。

この粉末をクロロホルム１５−に溶解し、０゜９１−の
ジエチルアミンを加え４時間緩やかに加熱還流した。冷
却後、クロロホルムを加えて抽出を行い、有機層を水洗
し無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。得
られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢
酸エチル：トリエチルアミン−４０，１で溶出）に付し
、溶出液を減圧下濃縮した。得られた残渣を、少量のエ
タノールに溶解し、塩化水素を飽和したエタノールを加
えて塩酸塩とした後に水より固化させ、乾燥することに
より（−）３−（２−アミノ−５−シアノフェニル）−
２（２−ジエチルアミノエチル）イソインドリン−１−
オン・塩酸塩６９０ｍｇ（収率７０．４％）を得た。〔
光学純度：９３％ｅｅ、融点＝１３１〜１３４℃、旋光
度：　−８７，８°　（Ｃ−１、エタノール）〕 参考例３ （−）−アルコールの代わりに実施例３で得られる（＋
）−アルコールを用いる以外は参考例２と同様に行い、
７１２ｍｇ（収率７１．２％）の（＋）−３−（２−ア
ミノ−５−シアノフェニル）−２−（２−ジエチルアミ
ノエチル）イソインドリン−１−オン・塩酸塩を得た〔
光学純度：９５％ｅｅ、融点°１２９〜１３２℃、旋光
度：９１．４°　（ｃ＝１．　エタノール）〕。

発明の効果 本発明により、光学活性なイソインドリン−１−オン誘
導体の製造法が提供される。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） で表されるイソイソドリン−１−オン誘導体〔以下、化
   合物（ I ）という〕と式 ＲＣＯＯＨ （式中、Ｒは低級アルキル基を表す。） で表されるカルボン酸もしくはそのエステルまたはその
   反応性誘導体とを、溶媒中、化合物（ I ）を不斉アシ
   ル化する能力を有する酵素の存在下反応させて、化合物
   （ I ）を立体選択的にアシル化し、反応液より該アシ
   ル化された化合物（ I ）を分離し、次いで加水分解処
   理に付すことを特徴とする化合物（ I ）の光学活性体
   の製造法。
2. （２）請求項１記載の反応液より、未反応の化合物（
   I ）を採取することを特徴とする請求項１記載の化合物
   （ I ）の光学活性体の製造法。
3. （３）式（II） ▲数式、化学式、表等があります▼（II） （式中、Ｒは低級アルキル基を表す。） で表される化合物〔以下、化合物（II）という〕を、水
   性媒体中、化合物（II）を不斉加水分解する能力を有す
   る酵素の存在下、立体選択的に加水分解し、反応液より
   該加水分解された化合物（II）を分離することを特徴と
   する請求項１記載の化合物（ I ）の光学活性体の製造
   法。
4. （４）請求項３記載の反応液より、未反応の化合物（I
   I）を分離し、加水分解処理に付すことを特徴とする請
   求項１記載の化合物（ I ）の光学活性体の製造法。