JPH05130862A - 培地の固化方法及び培地固化剤 - Google Patents
培地の固化方法及び培地固化剤Info
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- JPH05130862A JPH05130862A JP3241174A JP24117491A JPH05130862A JP H05130862 A JPH05130862 A JP H05130862A JP 3241174 A JP3241174 A JP 3241174A JP 24117491 A JP24117491 A JP 24117491A JP H05130862 A JPH05130862 A JP H05130862A
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Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 常温下において、植物等のプロトプラストを
培養するための培地を固化する方法及び、固化培地を作
るための新規な固化剤を提供することを目的とする。 【構成】 二価の金属イオンを含む液体にプロトプラス
トを懸濁して成る懸濁液に、多糖類と糖アルコールを混
合して成る固化剤を混合することによって、常温下で固
化培地を作る方法及び固化剤を提供する。
培養するための培地を固化する方法及び、固化培地を作
るための新規な固化剤を提供することを目的とする。 【構成】 二価の金属イオンを含む液体にプロトプラス
トを懸濁して成る懸濁液に、多糖類と糖アルコールを混
合して成る固化剤を混合することによって、常温下で固
化培地を作る方法及び固化剤を提供する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、植物等のプロトプラス
トを培養するための培地の固化方法及び、固化培地を作
るための新規な固化剤に関する。
トを培養するための培地の固化方法及び、固化培地を作
るための新規な固化剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、バイオテクノロジーの技術分野に
おいて、植物細胞等を実験室や工場において大量に培養
して栽培する技術の開発が目ざましい。このような培養
等を行うためには、各種の栄養素を混合した液体中に植
物等のプロトプラストを加えて懸濁し、この懸濁液をシ
ャーレ等の培養器に分注することによって液体状の培地
内で保存・管理する方法と、プロトプラストを含む懸濁
液を培養器内でゲル状に固化することによって、この固
化培地中にプロトプラストを包埋した状態で保存・管理
する方法とが知られている。
おいて、植物細胞等を実験室や工場において大量に培養
して栽培する技術の開発が目ざましい。このような培養
等を行うためには、各種の栄養素を混合した液体中に植
物等のプロトプラストを加えて懸濁し、この懸濁液をシ
ャーレ等の培養器に分注することによって液体状の培地
内で保存・管理する方法と、プロトプラストを含む懸濁
液を培養器内でゲル状に固化することによって、この固
化培地中にプロトプラストを包埋した状態で保存・管理
する方法とが知られている。
【０００３】前者の液体状の培地内で培養等する方法
は、時間の経過に伴ってプロトプラストが相互の吸着作
用によって結合してしまい、個々のプロトプラスト毎に
培養することが困難となる問題があるのに対し、後者の
固化培地中にプロトプラストを包埋した状態で培養等す
る方法は、プロトプラスト相互間での吸着等を生じるこ
とがないので、個々のプロトプラストの成長を容易に観
察等することができる利点がある。
は、時間の経過に伴ってプロトプラストが相互の吸着作
用によって結合してしまい、個々のプロトプラスト毎に
培養することが困難となる問題があるのに対し、後者の
固化培地中にプロトプラストを包埋した状態で培養等す
る方法は、プロトプラスト相互間での吸着等を生じるこ
とがないので、個々のプロトプラストの成長を容易に観
察等することができる利点がある。
【０００４】ところで、上記の固化培地中にプロトプラ
ストを包埋した状態で培養等する方法を実現するために
は、二価の金属イオンを含む液体にガランガム等の固化
剤を混入するとこの液体がゲル状に固化するという特性
を利用して、予め二価の金属イオンと各種栄養素及びプ
ロトプラストを混合した懸濁液を作っておき、この懸濁
液にガランガム等の固化剤を混入することで固化培地を
作ったり、又、常温でゲル状に固化するという特性を有
する寒天等の固化剤にプロトプラストを含む懸濁液を混
ぜることで固化培地を作ったりしていた。
ストを包埋した状態で培養等する方法を実現するために
は、二価の金属イオンを含む液体にガランガム等の固化
剤を混入するとこの液体がゲル状に固化するという特性
を利用して、予め二価の金属イオンと各種栄養素及びプ
ロトプラストを混合した懸濁液を作っておき、この懸濁
液にガランガム等の固化剤を混入することで固化培地を
作ったり、又、常温でゲル状に固化するという特性を有
する寒天等の固化剤にプロトプラストを含む懸濁液を混
ぜることで固化培地を作ったりしていた。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記ガ
ランガムや寒天等の固化剤は常温で固化するため、例え
ば４０°Ｃ以上に加熱して液状化させ、この液体状態の
固化剤を懸濁液に混入した後冷ますことによって固化培
地を実現している。したがって、高温の液体状態の固化
剤を混入するときに、プロトプラストが加熱されて活性
が低下したり、枯死する等の問題を生じ、歩留りの点で
も問題があった。
ランガムや寒天等の固化剤は常温で固化するため、例え
ば４０°Ｃ以上に加熱して液状化させ、この液体状態の
固化剤を懸濁液に混入した後冷ますことによって固化培
地を実現している。したがって、高温の液体状態の固化
剤を混入するときに、プロトプラストが加熱されて活性
が低下したり、枯死する等の問題を生じ、歩留りの点で
も問題があった。
【０００６】本発明は、このような固化培地を作る場合
における従来の問題点に鑑みて成されたものであり、常
温で固化培地を作ることができる方法及び固化剤を提供
することを目的とする。
における従来の問題点に鑑みて成されたものであり、常
温で固化培地を作ることができる方法及び固化剤を提供
することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】このような目的を達成す
るために本発明は、第１の容器に、少なくとも二価の金
属イオンを含む液体にプロトプラストを懸濁して成る懸
濁液を作り、第２の容器に、多糖類と糖アルコールを混
合して成る固化剤を作り、室温状態において、上記第
１，第２の容器中の懸濁液と固化剤を混合することによ
って上記懸濁液をゲル状に固化させることで固化培地を
作るようにした。
るために本発明は、第１の容器に、少なくとも二価の金
属イオンを含む液体にプロトプラストを懸濁して成る懸
濁液を作り、第２の容器に、多糖類と糖アルコールを混
合して成る固化剤を作り、室温状態において、上記第
１，第２の容器中の懸濁液と固化剤を混合することによ
って上記懸濁液をゲル状に固化させることで固化培地を
作るようにした。
【０００８】又、多糖類と糖アルコールとを混合して成
り、二価の金属イオンを含む液体培地と混合することに
よって該液体培地をゲル状に固化させる培地固化剤を提
供することとした。
り、二価の金属イオンを含む液体培地と混合することに
よって該液体培地をゲル状に固化させる培地固化剤を提
供することとした。
【０００９】
【作用】多糖類と糖アルコールとを混合して成る上記固
化剤は常温で液体であり、二価の金属イオンを含む液体
にプラトプラストを懸濁して成る懸濁液に、常温状態で
この固化剤を混ぜると、懸濁液はゲル状に固化する。し
たがって、ゲル状の固化培地を常温で作ることができる
ので、プラトプラストにダメージを与えることなく容易
に固化培地内に包埋することが可能である。
化剤は常温で液体であり、二価の金属イオンを含む液体
にプラトプラストを懸濁して成る懸濁液に、常温状態で
この固化剤を混ぜると、懸濁液はゲル状に固化する。し
たがって、ゲル状の固化培地を常温で作ることができる
ので、プラトプラストにダメージを与えることなく容易
に固化培地内に包埋することが可能である。
【００１０】更に、固化剤中の多糖類の濃度が低くても
上記固化を実現することができる。このことは、従来の
固化剤が固化を容易にするために多糖類の濃度を高く
し、その結果常温では固化してしまうため、加熱するこ
とで液体化していたのに対し、本発明では、糖アルコー
ルを混合することによって固化剤中の多糖類の濃度が低
くても常温で液体状態を維持し、加熱を不要にしてプラ
トプラストにダメージを与えないで済むという効果が得
られる。
上記固化を実現することができる。このことは、従来の
固化剤が固化を容易にするために多糖類の濃度を高く
し、その結果常温では固化してしまうため、加熱するこ
とで液体化していたのに対し、本発明では、糖アルコー
ルを混合することによって固化剤中の多糖類の濃度が低
くても常温で液体状態を維持し、加熱を不要にしてプラ
トプラストにダメージを与えないで済むという効果が得
られる。
【００１１】
【実施例】以下、本発明の固化剤及びそれを適用した固
化培地の製造方法の一実施例を説明する。尚、固化培地
の製造過程にしたがって説明する。図１において、試験
管等の第１の容器１に、窒素（Ｎ）、燐（Ｐ）、カリウ
ム（Ｋ）等の培養に必要な無機物質と、必要に応じて植
物ホルモン、エネルギー源となる蔗糖、浸透圧を調整す
るためのマンニトール、更に、カルシウム（Ｃａ）等の
二価イオンを持つ無機イオンを水に混入してなる液体１
ａを作り、この液体１ａに植物のプラトプラスト１ｂを
入れて懸濁することで懸濁液を作る。
化培地の製造方法の一実施例を説明する。尚、固化培地
の製造過程にしたがって説明する。図１において、試験
管等の第１の容器１に、窒素（Ｎ）、燐（Ｐ）、カリウ
ム（Ｋ）等の培養に必要な無機物質と、必要に応じて植
物ホルモン、エネルギー源となる蔗糖、浸透圧を調整す
るためのマンニトール、更に、カルシウム（Ｃａ）等の
二価イオンを持つ無機イオンを水に混入してなる液体１
ａを作り、この液体１ａに植物のプラトプラスト１ｂを
入れて懸濁することで懸濁液を作る。
【００１２】一方、試験管等の第２の容器２に、多糖類
のゲランガムと糖アルコールのマンニトールとの混合溶
液をオートクレーブし、常温温度の固化剤を作る。尚、
これによって作られた固化剤は常温中で液体状態を保っ
ている。次に、シャーレ等の培養器３に必要な分の懸濁
液を分注し、更に、第２の容器２中の固化剤を懸濁液に
加えて混合・攪拌すると、懸濁液はゲル状に固化して固
化培地が形成され、この固化培地内にプロトプラストを
包埋することができる。
のゲランガムと糖アルコールのマンニトールとの混合溶
液をオートクレーブし、常温温度の固化剤を作る。尚、
これによって作られた固化剤は常温中で液体状態を保っ
ている。次に、シャーレ等の培養器３に必要な分の懸濁
液を分注し、更に、第２の容器２中の固化剤を懸濁液に
加えて混合・攪拌すると、懸濁液はゲル状に固化して固
化培地が形成され、この固化培地内にプロトプラストを
包埋することができる。
【００１３】更に、より詳細に処理手順を説明する。上
記第１の容器１に入れた蔗糖と植物性ホルモンは、最終
的に固化培地の目的とする濃度の２倍の濃度にしてお
く。更に、第２の容器２に固化剤を作る際に、第１の容
器１中の蔗糖の濃度と同じ濃度となるように、ゲランガ
ムとマンニトールの他に蔗糖を加えて固化剤の溶液を作
っておく。
記第１の容器１に入れた蔗糖と植物性ホルモンは、最終
的に固化培地の目的とする濃度の２倍の濃度にしてお
く。更に、第２の容器２に固化剤を作る際に、第１の容
器１中の蔗糖の濃度と同じ濃度となるように、ゲランガ
ムとマンニトールの他に蔗糖を加えて固化剤の溶液を作
っておく。
【００１４】そして、同量の懸濁液と固化剤を培養器３
内で混ぜることで、当初の目的の濃度の植物性ホルモン
と蔗糖を含む固化培地を実現している。このように、ゲ
ランガムとマンニトールとの混合溶液から成る固化剤は
常温状態で液状であり、更に、固化剤に含まれるゲラン
ガムは低濃度であっても二価の金属イオンによって固化
する特性を有するので、常温で固化培地を容易に作るこ
とができ、更に、従来のような加熱した固化剤を加える
ことによって、プラトプラストへダメージを与える等の
問題を解消することができる。
内で混ぜることで、当初の目的の濃度の植物性ホルモン
と蔗糖を含む固化培地を実現している。このように、ゲ
ランガムとマンニトールとの混合溶液から成る固化剤は
常温状態で液状であり、更に、固化剤に含まれるゲラン
ガムは低濃度であっても二価の金属イオンによって固化
する特性を有するので、常温で固化培地を容易に作るこ
とができ、更に、従来のような加熱した固化剤を加える
ことによって、プラトプラストへダメージを与える等の
問題を解消することができる。
【００１５】
【発明の効果】以上説明したように、二価の金属イオン
を含む液体にプロトプラストを懸濁して成る懸濁液に、
多糖類と糖アルコールを混合して成る固化剤を混合する
ことによって固化培地を作る方法及びその固化剤を提供
したので、常温下で固化培地を容易に作ることができる
と共に、従来のように加熱した固化剤を使用しなくて済
むことから、プラトプラストへダメージを与える等の問
題を解消することができる。
を含む液体にプロトプラストを懸濁して成る懸濁液に、
多糖類と糖アルコールを混合して成る固化剤を混合する
ことによって固化培地を作る方法及びその固化剤を提供
したので、常温下で固化培地を容易に作ることができる
と共に、従来のように加熱した固化剤を使用しなくて済
むことから、プラトプラストへダメージを与える等の問
題を解消することができる。
【００１６】又、常温状態で処理が出来ることから温度
管理等が容易となり、したがって、機械的流れ作業によ
って多数の培養器を使って、プラトプラストを包埋する
固化培地を形成することが可能となり、工業化を容易に
することができる等の効果もある。
管理等が容易となり、したがって、機械的流れ作業によ
って多数の培養器を使って、プラトプラストを包埋する
固化培地を形成することが可能となり、工業化を容易に
することができる等の効果もある。
【図１】一実施例による固化培地の製造工程を示す説明
図である。
図である。
１；第１の容器 １ａ；懸濁液 １ｂ；プラトプラスト ２；第２の容器 ２ａ；固化剤 ３；培養器
Claims (2)
- 【請求項１】第１の容器に、二価の金属イオンを含む液
体にプロトプラストを懸濁して成る懸濁液を作り、 第２の容器に、多糖類と糖アルコールを混合して成る固
化剤を作り、 室温状態において、上記第１，第２の容器中の懸濁液と
固化剤を混合することによって上記懸濁液をゲル状に固
化させる培地の固化方法。 - 【請求項２】多糖類と糖アルコールとを混合して成り、
二価の金属イオンを含む液体培地と混合することによっ
て該液体培地をゲル状に固化させる培地固化剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3241174A JPH05130862A (ja) | 1991-09-20 | 1991-09-20 | 培地の固化方法及び培地固化剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3241174A JPH05130862A (ja) | 1991-09-20 | 1991-09-20 | 培地の固化方法及び培地固化剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05130862A true JPH05130862A (ja) | 1993-05-28 |
Family
ID=17070346
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3241174A Pending JPH05130862A (ja) | 1991-09-20 | 1991-09-20 | 培地の固化方法及び培地固化剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05130862A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018079797A1 (ja) * | 2016-10-31 | 2018-05-03 | 日産化学工業株式会社 | 高品質な３次元培養用培地組成物の製造方法、及び３次元培養用培地組成物の保存安定性の評価方法 |
-
1991
- 1991-09-20 JP JP3241174A patent/JPH05130862A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018079797A1 (ja) * | 2016-10-31 | 2018-05-03 | 日産化学工業株式会社 | 高品質な３次元培養用培地組成物の製造方法、及び３次元培養用培地組成物の保存安定性の評価方法 |
| JPWO2018079797A1 (ja) * | 2016-10-31 | 2019-09-19 | 日産化学株式会社 | 高品質な３次元培養用培地組成物の製造方法、及び３次元培養用培地組成物の保存安定性の評価方法 |
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