JPH0520110B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

（産業上の利用分野） 本発明は、表面に細胞を付着させる方法に関す
る。さらに詳細には本発明は、ポリマー表面に内
皮細胞の層を付着させる方法及びこのようにして
作製された表面に関する。 （従来の技術） 体液に対して生物学的及び化学的に安定な物質
を見出すため、長年にわたつて多くの検討がなさ
れている。本研究分野は、血液と接触する可能性
のある種々の物品（例えば、人工臓器、脈管移植
片、消息子、カニユーレ、及びカテーテル等）が
開発されるにつれ、益々重要となつてきている。 このような物品に対する好ましい物質として、
合成プラスチツク類が広く使用されている。しか
しながら、これらの物質はトロンボゲンを形成す
るという大きな欠点を有する。殆どのプラスチツ
ク類に比べて血液との適合性が良いポリテトラフ
ルオロエチレンやシリコーンゴムのようなプラス
チツクでも、トロンボゲンを形成する傾向があ
る。 従来、ヘパリンのような抗凝血物質を使用する
ことによつて、トロンボゲンの形成が防止されて
いる。ヘパリンで凝血防止する代表的な方法が、
ウイリアムズらによる米国特許第4613517号及び
ソロモンらによる米国特許第4521564号明細書に
開示されている。 過去30年間にわたつて、虚血の部分に血液の流
れを回復させるために、血液透析患者に血液の流
れを与えるために、そして動脈瘤の治療のために
人工移植片が使用されている。これらの方法は、
一般に初めはうまくいくけれども、こうした移植
片を受け入れた患者に対する長期にわたる予後に
はすすめられない。なぜなら、移植片物質がトロ
ンボゲンを形成しやすいために、フイブリンの付
着や細胞の付着が起こることによつて、小さな直
径の移植片（４mm以下）は長時間たつと閉塞をき
たすからである。 理想的な血液−表面界面は自然に生成する内皮
細胞であると長い間考えられており、最近の研究
では内皮化方法に重点が置かれている。メイドリ
（Medri）らはジヤーナル・オブ・セルバイオロ
ジー（Journal of Cell Biology）97、153（1983）
において、介在性コラーゲン上に細胞が成長する
と、これらの細胞は増殖を起こし、連続的な細胞
層を形成すると報告している。ウイリアムズらは
ジヤーナル・オブ・サージカル・リサーチ
（Journal of Surgical Research）38、618
（1965）において、人工器官の移植片物質をフイ
ブロネクチン、コラーゲン、又は血漿で前処理す
ることについて説明しており、処理していない移
植片物質に対しては本質的に付着力が生じない
が、蛋白質被覆したポリエステル移植片の場合に
は付着力が大幅に増大する、と報告している。ジ
ヤーレル（Jarrel）らによる類似の研究によれば
〔アヌルズ・オブ・サージエリー（Annals of
Surgery）203、671（1986）〕、10分経過すると血
小板の多い血漿で被覆したポリエステルに、30分
経過すると羊膜／コラーゲン被覆したポリエステ
ルに、そして２時間経過すると何も被覆していな
いポリエステルに、内被細胞が高い割合で強固に
付着するが、移植片が完全に覆われたのは羊膜／
コラーゲン被覆した表面だけである。 近年、小さな直径の脈管移植片を使用すると一
般に良くない結果が得られるという点が注目され
ている。ヴアン・ワケム（van Wachem）らは
バイオマテリアルズ（Biomaterials）６、403
（1985）において、４mm以上のポリマー移植片を
使用した場合には臨床的に良い結果が得られる
が、４mm未満の移植片を使用すると、すぐに閉塞
を起こすために一般には満足できるような臨床結
果が得られない、と報告している。同様にベイカ
ー（Baker）らはアメリカン・ジヤーナル・オ
ブ・サージエリー（American Journal of
Surgery）150、197（1985）において、直径の大
きな脈管移植片の長期間にわたる開存性は比較的
許容しうるが、直径の小さな（４mm未満）移植片
は長期間にわたつて開存している割合が低い、と
述べている。 ベルデン（Belden）らはTrans.Am.Soc.Artif.
Intern.Organs、28、173（1982）において、内径
４mmのポリエステル脈管移植片への内皮細胞の接
種、及び犬に移植した後の開存性について報告し
ている。 ある特定の結果を得るために、ポリマー表面を
種々のプラズマで処理して変性することがよく知
られている。例えば、表面湿潤性、静電特性、付
着性ポリマー物質の層が表面に付着する際の表面
の受理性などについて報告されている。リー・
M.スミス（Lee M.Smith）による博士論文“支
持体の表面特性によつて影響される細胞付着”
〔ユタ大学材料科学・材料工学科、1978、p.67〕
によれば、細胞の付着が表面の炭素／酸素比の関
数であるとされている。ヴアン・ワケムらは前記
文献において、ガラス又はグロー放電処理したポ
リスチレン上で内皮細胞を培養できることを説明
している。 ダン（Dunn）らによる米国特許第4452679号明
細書は、ポリマー表面をプラズマで処理する（こ
のとき、プラズマの中性、陽性又は陰性の化学種
の少なくとも１種が表面に接触しないようにす
る）ことによつて特定の化学基を導入してポリマ
ー表面を変性する方法を開示している。 さらに出願者らは、処理されていないダクロン
（Dacron）^TMポリエステルの表面に対しては、内
皮細胞は部分的に付着するが、集密的には付着し
ないこと；24時間経過すると集密的に表面が覆わ
れること；そして血小板含量の多い血漿のような
蛋白質で前処理したダクロン^TM表面の場合には直
ちに集密的な被覆がなされること、などについて
知見を得ている。本明細書においては、“集密的”
という用語は、あらゆる方向において連続的に存
在している細胞で実質的に覆われた表面を表すの
に使用する。 （発明が解決しようとする課題） 抗トロンボゲンの人工器官用器具に関する広範
な研究にもかかわらず、トロンボゲン形成の問題
（特に直径の小さい移植片に関して）は未だ十分
に解決されてはいない。本発明は、こうした問題
点の解決を目的としている。 （課題を解決するための手段） 本発明の１つの態様は、内皮細胞の集密的な層
を有する表面を作製する方法である。窒素を含ん
だ物質から生成されるプラズマに、支持体を暴露
する。プラズマ処理すると、アミノ基が支持体に
結合する。アミノ基を含有した支持体に、支持体
には付着する内皮細胞を接触させる。接触媒体に
おける細胞の密度は、細胞の増殖を起こさせる必
要なく、付着している細胞が支持体上に集密的な
層を形成するのに十分な密度とする。好ましい支
持体はポリマーである。 本発明の他の態様は、付着した内皮細胞の集密
的な層を有するプラズマ処理した支持体からなる
抗トロンボゲン物品である。本物品はポリマーで
あるのが好ましく、いかなる形状のものであつて
もよい。好ましい物品は、内径が0.5mm以上の導
管である。ある１つの好ましい実施態様は、内径
が約２〜６mmの導管である。これらの導管の管腔
壁は、プラズマ処理され、そして内皮化されてい
る。 プラズマは、イオン化することのできるいかな
る窒素源からも生成させることができる。好まし
いプラズマはアンモニアから生成させたプラズマ
であり、低濃度の酸素を含有したアンモニアから
生成させたプラズマが最も好ましい。 例えば緩衝塩水のような適切な媒体中で、好ま
しくは培養条件下にて、プラズマ処理した支持体
に内皮細胞を接触させて、支持体上に細胞の付着
した集密的な層を形成させることができる。 従つて本発明によれば、物品の表面をプラズマ
で前処理してアミノ基を多く含んだ表面にする工
程；及びこの評めに内皮細胞を施す工程；を含む
２工程からなる方法によつて、プラズマ処理した
ポリマー表面及び付着性上皮細胞の集密的な層を
有する物品を作製することができる。内皮化の前
にプラズマ処理した表面は極めて安定であり、従
つて保存寿命が長い。細胞は速やかに付着し、細
胞増殖なしで集密的となるので、本発明のプラズ
マ処理した表面を有する人工器官用器具は、在庫
品から取り出し、内皮化し、そして十分な細胞が
用意されたらその数分以内に移植に供することが
できる。手術を受ける患者にとつて、迅速に処置
できることの利点は明らかである。 本発明は多くの異なつた形の実施態様によつて
達成されるけれども、本明細書では本発明の好ま
しい実施態様について詳細に説明する。但し、本
開示内容は本発明の原理の代表的なものを示して
おり、本発明はこれらの実施態様によつて限定さ
れるものではないことは言うまでもない。本発明
の範囲は、特許請求の範囲とそれらの等価物によ
つて判断される。 本発明の１つの態様は、有機支持体や無機支持
体の表面を不可逆的に変性する方法である。さら
に詳細には、本発明によれば、細胞の付着と密着
を容易にするために、有機支持体及び無機支持体
の表面に気化物質のプラズマを接触させることに
より当該支持体の表面上に官能基をもつ特定の化
学種を結合させることによつて、有機・無機支持
体の表面が不可逆的に変性される。 本発明は、天然高分子及び合成による付加重合
体や縮合重合体も含めた固体ポリマー物質の表面
を変性するのに利用することができる。このよう
なポリマー物質としては（但し以下に記載のもの
に限定されない）、ポリエチレン、ポリプロピレ
ン、ポリイソブチレン、及びエチレン−α−オレ
フインコポリマー等のポリオレフイン；ポリアク
リレート、ポリメチルメタクリレート、及びポリ
エチルアクリレート等のアクリルポリマーやアク
リルコポリマー；ポリ塩化ビニル等のビニルハロ
ゲン化物ポリマーやコポリマー；ポリビニルメチ
ルエーテル等のポリビニルエーテル；ポリフツ化
ビニリデンやポリ塩化ビニリデン等のポリハロゲ
ン化ビニリデン；ポリアクリロニトリル；ポリビ
ニルケトン；ポリスチレン等のポリビニル芳香族
化合物；ポリ酢酸ビニル等のポリビニルエステ
ル；エチレン−メタクリル酸メチルコポリマー、
アクリロニトリル−スチレンコポリマー、ABS
樹脂、及びエチレン−酢酸ビニルコポリマー等の
ビニルモノマー同士又はビニルモノマーとオレフ
インのコポリマー；ブタジエン−スチレンコポリ
マー、ポリイソプレン、合成ポリイソプレン、ポ
リブタジエン、ブタジエン−アクリロニトリルコ
ポリマー、ポリクロロプレンゴム、ポリイソブチ
レンゴム、エチレン−プロピレンジエンゴム、イ
ソブチレン−イソプレンコポリマー、及びポリウ
レタンゴム等も含めた、天然ゴム及び合成ゴム；
ナイロン66やポリカプロラクタム等のポリアミ
ド；ポリエチレンテレフタレートやアルキド樹脂
等のポリエステル；フエノール−ホルムアルデヒ
ド樹脂；ユリアーホルムアルデヒド樹脂；メラミ
ン−ホルムアルデヒド樹脂；ポリカーボネート；
ポリオキシメチレン；ポリイミド；ポリエーテ
ル；エポキシ樹脂：ポリウレタン：羊毛；綿：
絹：レーヨン：レーヨン−トリアセテート；セル
ロース；酢酸セルロース：酪酸セルロース；酢酪
酸セルロース；セロフアン；硝酸セルロース；プ
ロピオン酸セルロース；セルロースエーテル；並
びにカルボキシメチルセルロースなどがある。 本発明に従つてその表面を変性することのでき
る無機物質としては（但し以下に記載のものに限
定されない）、グラフアイト等の非金属；鉄、ア
ルミニウム、錫、銅、及びニツケル等の金属；酸
化マグネシウム、シリカ、アルミナ、及びチタニ
ア等の金属元素や他の元素の酸化物；クレー、黄
鉄鉱、及びアスベスト等の鉱物；塩化ナトリウム
や炭酸カルシウム等の塩；並びにガラスや耐火物
のような合成組成物などがある。 支持体（有機物・無機物いずれの場合も）は、
比較的平ら又は湾曲したいかなる形状でもよく、
また連続状又は粒状であつても、多孔質又は不透
質であつても、そして大きくても又は小さくて
も、いかなる構成であつてもよい。本発明は、結
晶、粉末、プレート、ストリツプ、フイルム、シ
ート、ワイヤ、繊維、布帛、フイラメント、チユ
ーブ、及び注型品・押出品・又は圧縮成形品等の
表面を変性するのに利用することができる。 本発明に従つたほとんどのプラズマ処理に対し
ては、従来のプラズマ発生器を使用することがで
きる。このような発生器としては、内部及び外部
の容量結合、電磁結合、抵抗係合、並びに導波管
法を利用した、熱プラズマ発生器、無線周波プラ
ズマ発生器、直流プラズマ発生器、可聴周波プラ
ズマ発生器、及びマイクロ波プラズマ発生器など
がある。内部電極、又は可聴周波数から無線周波
数をへてマイクロ波周波数までのより高い周波数
電源を備えた電磁手段もしくは容量手段を使用し
たカツプリングによつて発生されるDC又は低周
波ACグロー放電により、電気的励起が与えられ
る。さらにマイクロ波導波管法も使用することが
できる。適切なプラズマ発生器の代表的なものと
しては、ブランソン（Branson）／IPC製のプラ
ズマ反応器及びプラズマ・サイエンス・Inc.製の
プラズマ表面処理システムなどがある。 小さな直径の導管をプラズマで処理する本発明
の好ましい実施態様の場合、本明細書と共に同じ
日付で提出している同時係属中の特許出願に開示
の装置を使用するのが好ましい。この同時係属中
の特許出願（本発明の共通の譲受人）を参照の形
でここに引用する。 本発明に従つたプラズマはいかなるガス又はガ
ス状混合物からも生成させることができ、移植さ
れるガスからの反応性官能基を表面に与える。好
適なガスとしては、例えば、酸素、窒素、及びメ
タノール、アセトニトリル、又はシアン化水素の
ような、酸素もしくは窒素の低分子量有機・無機
化合物などがある。好ましいガスは、窒素、１〜
６個の炭素原子を有する脂肪族アミン、ヒドラジ
ン、アンモニア、又はこれらの混合物等の窒素含
有化合物である。ガス混合物中には、水素、ハロ
ゲン、並びにヘリウム、ネオン、クリプトン、及
びキセノン等の不活性ガスのような他の成分が存
在してもよい。 細胞付着の調製における表面変性のための好ま
しいプラズマは、低濃度の酸素を含有したアンモ
ニアから生成される。酸素とアンモニアの比は約
0.005〜0.8、好ましくは0.01〜0.1である。所望の
比は、従来のポンプダウンの後に、適当量のガス
を反応チヤンバー中に供給することによつて達成
することができる。しかしながら、本発明に従つ
た表面処理の場合では、ポンプダウン後の真空チ
ヤンバー中に十分な量の酸素が残存していて、こ
れにより所望の比が得られることが多い。チヤン
バー中に残存している酸素の量が、排気されたチ
ヤンバーのポンプダウン圧力に関係していること
は明らかである。従つて、適切なトータルガス圧
力範囲内での所望の酸素／窒素比は、チヤンバー
を所定の圧力にまで排気し、そして必要量のアン
モニアを供給することによつて達成される。一般
には、単にポンプダウン時間を調節することによ
つて、所望の酸素濃度にかなり近い濃度が得られ
る。 本発明に従つた表面変性を行うためのプラズマ
生成は、広範囲のエネルギー設定、無線周波数、
暴露時間、温度、及びガス圧力の下で行われる。
これらのパラメーターに関して有利な結果をもた
らす範囲は、0.001〜400W／cm³のレベルのDC又
はAC出力密度、最大100メガヘルツまでの振動周
波数、２秒〜12時間の暴露時間、０〜200℃の温
度、及び0.01〜100トルのガス圧力である。これ
らのパラメーターに対する好ましい範囲は、0.01
〜200W／cm³、５〜30メガヘルツ、５秒〜120分、
10〜50℃、及び0.01〜20トルである。ガスの流量
は、流れない状態から１秒当たりチヤンバー容積
に相当する量が数回分置き換わる程度まで変える
ことができる。 酸素の濃度を制御するポンプダウン圧力は約
0.1〜100ミリトル、好ましくは約５〜50ミリトル
である。ポンプの能力に応じ、これらのポンプダ
ウン圧力は約１分〜72時間で到達する。 アンモニア−酸素混合物から生成されるプラズ
マに暴露することによつて変性した本発明のポリ
マー表面は、その表面に結合した形のアミノ基を
含む。さらに表面と反応性の酸素化学種との反応
の結果として、カルボニル基、カルボキシル基、
ヒドロキシル基、エーテル基、及びペルオキシド
基等の酸素含有等も存在する。 以下の例においては、酸素−アンモニア混合物
から生成されるプラズマにポリマー支持体がさら
される。プラズマ処理した支持体表面は、従来の
化学分析電子分光法（ESCA）により検討して結
合エネルギーシフトを測定し、そしてその結果か
ら表面に対する官能基の特性を明らかにすること
ができる。本発明のプラズマ処理した表面と未処
理の表面に対するESCA比較データを第表に示
す。 プラズマによつて支持体表面上にアミノ基及び
酸素含有基が導入されたことによつて、支持体表
面は細胞の付着及び密着に対してなじみ易くなつ
ている。本発明の方法の第２工程においては、い
かなるタイプの細胞も本発明のプラズマ処理した
表面に施すことができる。一般に、適切な細胞の
タイプは上皮タイプのものである。プラズマ処理
した表面に施すための最も好ましい細胞は内皮細
胞である。種々の供給源から内皮細胞を単離して
精製する方法はよく知られており、本発明のプラ
ズマ処理した支持体表面に密着させるための細胞
の供給は本発明の一部を構成してはいない。 プラズマ処理した支持体表面と媒体中に懸濁さ
せた十分な量の細胞とを接触させて、細胞の増殖
を起こさせる必要なく、密着した集密的な層を形
成させることによつて、内皮化を行うことができ
る。本発明に従い、この方法及び懸濁用媒体をそ
れぞれ被覆法（sodding）及び被覆用媒体
（sodding medium）と呼ぶ。 細胞に対して有害でなければいかなる被覆用媒
体も使用することができる。好ましい被覆用媒体
は、例えば緩衝塩水のような緩衝液である。細胞
は、一般に約１分〜60分経過すると集密的に密着
する。必要であれば、被覆した表面を約10〜50℃
（好ましくは37℃）の温度で培養することによつ
て密着を促進してもよい。 プラズマ処理した表面を被覆するのに必要な細
胞の数は、ポリマーの種類及びプラズマ処理後の
表面化学に従つて幾分変わる。一般に、被覆すべ
き表面１cm²当たり約10⁵個の細胞があれば十分で
あるが、さらに高い濃度で使用してもよい。細胞
数の決定及び被覆用媒体中の細胞の濃度（これは
重要なポイントではない）については、当技術者
には公知である。同様に、染色後に走査電子顕微
鏡又は光学顕微鏡によつて細胞の付着性や集密性
を調べることも、従来通りに行えばよい。 本発明の他の態様においては、プラズマ処理し
た表面及びこのプラズマ処理した表面に直接付着
した集密性の内皮細胞層を有する抗トロンボゲン
の物品が提供される。本発明の範囲内に入る代表
的な物品は血液と接触する人工器官用器具であ
り、人工心臓、人工心臓弁、ピン、及び好ましく
は脈管移植片などがある（但し、これらに限定さ
れない）。本発明の最も好ましい物品は、プラズ
マ処理して内皮化した管腔壁を有する内径が６mm
以下の導管のような、小さな直径の脈管移植片で
ある。 実施例 フラツトなポリウレタンフイルムのサンプルを
RFプラズマ放電システムで変性した。３ 3/4イ
ンチ離して配置した一対の８インチ直径のアルミ
ニウム電極を、直径12インチで高さ22インチの真
空チヤンバー内に使用した。RFエネルギーを可
変周波数発振器／増幅器の対から“Ｔ”マツチン
グネツトワークに、そしてシールされたフイード
スルーを使用してバラン変圧器を通して真空チヤ
ンバー中に供給し、次いで平衡となつたラインを
相対する側の水平電極と接続した。フイルムサン
プルを低いほうの電極の頂部に配置した。 チヤンバーをポンプダウンし、６分間で60ミリ
トルにした。ポンプダウンを続けながら、正確な
計量弁を通して、200ミリトルの圧力を保持する
のに十分な割合で乾燥アンモニアガスをチヤンバ
ー中に供給した。本システムを１分間バージした
後、10.5MHz25ワツトのRFプラズマを２分間生
成させてフイルムを処理した。処理終了後、本シ
ステムを大気に通気してサンプルを取り出した。 ESCAを使用してサンプルの表面化学を測定し
た。処理したサンプルと処理していないサンプル
に対して得られた元素組成を第表に示す。

【表】 タン
実施例 直径の小さなポリスチレン導管のプラズマ処理 前記同時係属中の出願に記載のプラズマ発生器
にて生成させたプラズマに、長さ15cm、内径2.5
mmのポリスチレンチユーブ断片の内壁を暴露し
た。11.4MHz75ワツトのRFプラズマを使用した
こと、及びアンモニアガスの圧力を14トルに保持
したこと以外は、実施例の場合と類似のプラズ
マ処理条件を適用した。処理時間は25秒であつ
た。 実施例 直径の小さなポリウレタン導管のプラズマ処理 長さ100cm、内径3.5cmのポリウレタン導管断片
の内壁を、実施例にて記載したようにプラズマ
変性した。 実施例 内皮細胞をポリマー表面に付着させるための一
般的な手順 プラズマ処理したポリマーフイルムを２cm²の面
積のデイスクにカツトし、得られたデイスクをフ
アルコン（FALCON）^TM24−ウエル（well）組織
培養プレートのウエル中に配置した。１mlの１％
ゼラチンを６個のウエルそれぞれに、そして１ml
の0.9％塩水を他の６個のウエルに加えることに
よつて、一連の実験用対照標準を調製した。プラ
ズマ処理したポリマーデイスクを含有した各ウエ
ルに、１mlの0.9％塩水を加えた。両方の24−ウ
エルプレートをパラフイルムで被覆し、４℃で24
時間保持して、試験表面及び対照標準面に十分に
水和が起こるようにした。 ゼラチンと塩水からなる溶液を吸引によつて除
去し、１ml当たり、2.5×10⁵個の内皮細胞を含有
した0.8mlのストツク懸濁液をウエルに加えた。
この内皮細胞を５％二酸化炭素の雰囲気中37℃で
１時間培養し、緩衝液で洗浄し、そしてトリプシ
ンを使用してデカントした。試験表面と対照標準
を再び洗浄し、密着した細胞をヘマトキシリンで
染色した。標準的な光学顕微鏡法を使用して、密
着した細胞の数を求めた。 本実験の結果を、密着した内皮細胞の固体群密
度（種々のプラズマ処理したポリマー組成物に関
して１cm²当たりの細胞の数）として第表に示
す。

【表】

【表】 実施例 一次性内皮細胞の密着性に対するプラズマ処理
の影響 実施例に記載したポリマー表面へ内皮細胞を
付着させるための一般的手順を実施した後、プラ
ズマ処理したポリウレタンのデイスクサンプル及
びプラズマ処理していないポリウレタンのデイス
クサンプルに人間の一次性内皮細胞の移植片を施
した。２つのタイプのポリウレタンについて検討
した。棒の付着性の結果を第表に示す。一次性
の内皮細胞は、ポリマー表面への付着に関して、
培養した内皮細胞と同じ傾向を示さないけれど
も、プラズマ処理したポリマー表面に対する親和
性のほうが未処理のポリマー表面に対する親和性
より相対的に高い。 第表 プラズマ処理したポリウレタン及び プラズマ処理していないポリウレタ ンに対する一次性内皮細胞の密着性 ポリマー 密着した内皮細胞の 個体群密度（細胞／cm²） 平均±標準偏差 ポリウレタンＡ プラズマ処理品 14606±7211 未処理品 6287±2183 ポリウレタンＢ プラズマ処理品 15058±7607 未処理品 7005±5301 実施例 プラズマ処理した小直径ポリウレタン導管の内
壁への細胞の付着 実施例とに記載の条件を使用して、内径が
3.5mmの実施例のポリウレタン導管をプラズマ
処理した。ポリマー表面積１cm²当たり２×10⁵個
の内皮細胞という植えつけ密度にて（導管の管腔
に対して算出）、実施例に記載の緩衝液中に一
次性内皮細胞の固体群を懸濁させた。 接続ポートの付いた支持用ガラスチユーブ内に
各チユーブを入れ、このガラスチユーブ中に細胞
懸濁液と緩衝液を導入した。チユーブを２つのグ
ループに分けて培養した。グループを１分当た
り360回転の定速で軸方向に回転させ、グループ
を15分毎に90回転という増分にて軸方向に回転
させた。５％二酸化炭素の雰囲気において、37℃
で１時間、両方のグループを培養した。実施例
に記載の手順に従つて、ゼラチンによる対照標準
も調製した。 細胞の密着性の結果を第表に示す。どちらの
培養方法も内皮細胞の密着を起こさせることがで
きるが、一定の割合で回転させるとより均一な層
が得られる。

【表】

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ (a) 窒素を含んだガス状物質から生成される
   プラズマをポリマー表面に接触させ、これによ
   つて前記ポリマー表面が表面アミノ基を含有す
   るよう変性される工程；及び (b) 前記変性表面に十分な量の内皮細胞を施し
   て、細胞の増殖を起こさせる必要なく、前記ア
   ミノ基含有表面に集密的細胞層を形成させる工
   程； を含む、ポリマー表面を内皮化する方法。 ２ 前記ガス状物質が、水素、ハロゲン、アルゴ
   ン、ネオン、クリプトン及びキセノン、酸素、並
   びに酸素化合物からなる群から選ばれる別の物質
   をさらに含む、請求項１記載の方法。 ３ (a) ガスから生成されるプラズマを表面に接
   触させ、これによつて前記表面が前記ガスから
   の反応性官能基を含有するよう変性される工
   程；及び (b) 前記変性表面に十分な量の細胞を施して、細
   胞の増殖を起こさせる必要なく、前記官能基を
   含有した前記表面に集密的細胞層を形成させる
   工程； を含む、表面に細胞を施す方法。 ４ (a) ガスから生成されるプラズマでポリマー
   導管の管腔壁を処理する工程、このとき前記プ
   ラズマにより、前記ガスからの反応性官能基が
   前記管腔壁に結合される；及び (b) 前記反応性官能基を含有した前記管腔壁を十
   分な量の内皮細胞でおおつて、細胞の増殖を起
   こさせる必要なく、前記管腔壁に付着した集密
   的細胞層を形成させる工程； を含む方法。 ５ 処理される前記管腔壁が４mm以下の内径を有
   する、請求項４記載の方法。 ６ (a) アミノ基を表面に結合した形で有するプ
   ラズマ処理されたポリマー表面；及び (b) アミノ基を有する前記表面に付着した集密的
   内皮細胞層； を含む、トロンボゲンを形成しない物品。 ７ プレート、ストリツプ、フイルム、シート、
   繊維、布帛、導管、及びキヤストからなる群から
   選ばれる、請求項６記載の物品。 ８ (a) 反応性官能基を表面に結合した形で有す
   るプラズマ処理された表面；及び (b) 反応性官能基を有する前記表面に付着した集
   密的上皮細胞層； を含む、トロンボゲンを形成しない物品。 ９ 前記官能基が、アミノ基及び酸素を含有した
   基からなる群から選ばれる、請求項８記載の物
   品。 １０ プラズマ処理された管腔壁を含んだ、内径
   が約６mm未満のポリマー導管であつて、このとき
   前記管腔壁が当該管腔壁に結合したアミノ基、及
   び前記管腔壁に付着した集密的内皮細胞層を有し
   ていて、これにより前記導管がトロンボゲンを形
   成しないようになつている、前記ポリマー導管。