JPH05208991A

JPH05208991A - α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法とその製造のための分離システム

Info

Publication number: JPH05208991A
Application number: JP4057617A
Authority: JP
Inventors: So Aga; 創阿賀; Masaru Yoneyama; 勝米山; Shuzo Sakai; 修造堺
Original assignee: Hayashibara Biochemical Laboratories Co Ltd
Current assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Priority date: 1992-01-30
Filing date: 1992-01-30
Publication date: 1993-08-20
Anticipated expiration: 2016-02-13
Also published as: EP0554090A2; DE69315234T2; DE69315234D1; TW293822B; US5338420A; JP3134236B2; KR100244910B1; EP0554090B1; US5630923A; KR930016433A; EP0554090A3

Abstract

(57)【要約】【目的】 α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸ととも
にＬ−アスコルビン酸、糖類などの夾雑物を含有する水
溶液から、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有
物の製造方法を確立する。【構成】本発明は、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸とともに、Ｌ−アスコルビン酸および糖類の一方ま
たは双方を含有する水溶液を、アニオン交換膜を用いる
電気透析にかけ、アニオン交換膜を介してＬ−アスコル
ビン酸を優先的に透過させてα−グリコシル−Ｌ−アス
コルビン酸と分離するか、または、α−グリコシル−Ｌ
−アスコルビン酸を優先的に透過させて糖類と分離する
ことを特徴とするα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸
高含有物の製造方法とその製造のための分離システムに
関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、α−グリコシル−Ｌ−
アスコルビン酸高含有物の製造方法とその製造のための
分離システムに関し、更に詳細には、α−グリコシル−
Ｌ−アスコルビン酸とともにＬ−アスコルビン酸、糖類
などの夾雑物を含有する水溶液からα−グリコシル−Ｌ
−アスコルビン酸高含有物を製造する方法とその分離シ
ステムに関する。

【０００２】

【従来の技術】α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸
は、特開平３−１３５９９２号公報、特開平３−１３９
２８８号公報などで開示されているように、化１で示さ
れる化学構造を有し、Ｌ−アスコルビン酸の場合とは違
って、直接還元性を示さず、安定性に優れ、しかも、生
体内では容易に加水分解を受けて、Ｌ−アスコルビン酸
本来の生理活性を発揮するＬ−アスコルビン酸の糖誘導
体である。

【０００３】

【化１】ただし、ｎはＯまたは１乃至６から選ばれる整数

【０００４】その製造方法は、特開平３−１３５９９２
号公報、特開平３−１８３４９２号公報などに開示され
ているように、例えば、Ｌ−アスコルビン酸とα−グル
コシル糖化合物とを含有する水溶液に糖転移酵素、また
は糖転移酵素とグルコアミラーゼとを作用させて行なわ
れる。

【０００５】このようにして、得られる反応溶液は、α
−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸含量が比較的低く、
多量のＬ−アスコルビン酸、糖類などの夾雑物を含有し
ている。

【０００６】更に、この溶液からα−グリコシル−Ｌ−
アスコルビン酸高含有物を製造するには、例えば、アニ
オン交換樹脂を用いる吸脱着法やカチオン交換樹脂を用
いるカラムクロマトグラフィーなどが知られている。

【０００７】アニオン交換樹脂を用いる吸脱着法は、ま
ず、カチオン交換樹脂（Ｈ^＋型）で脱ミネラルし、次い
で、アニオン交換樹脂（０Ｈ⁻型）にα−グリコシル−
Ｌ−アスコルビン酸およびＬ−アスコルビン酸を吸着さ
せて水洗し、Ｄ−グルコース、α−グルコシル糖化合物
などの糖類を除去し、更に、酸若しくは塩類溶液で脱着
処理する精製方法である。

【０００８】しかしながら、この方法は、操作が煩雑で
あるばかりか、多量の再生剤、脱着剤および水を必要と
し、加えて、得られるα−グリコシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸の濃度、収率の低い欠点を有している。

【０００９】また、カチオン交換樹脂を用いるカラムク
ロマトグラフィーにおいては、成分分離のために多量の
水を必要とし、目的のα−グリコシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸が希釈され、生産コストのかさむ欠点のあることが
判明した。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】α−グリコシル−Ｌ−
アスコルビン酸とともにＬ−アスコルビン酸、糖類など
の夾雑物を含有する水溶液から、α−グリコシル−Ｌ−
アスコルビン酸高含有物を工業的に有利に製造する方法
の確立が望まれている。

【００１１】

【課題を解決するための手段】本発明者等は、α−グリ
コシル−Ｌ−アスコルビン酸とともにＬ−アスコルビン
酸、糖類などの夾雑物を含有する水溶液から、α−グリ
コシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を工業的に製造す
る方法の確立を目ざして、膜分離技術に着目して鋭意研
究を続けてきた。

【００１２】その結果、α−グリコシル−Ｌ−アスコル
ビン酸とともに、Ｌ−アスコルビン酸および糖類の一方
または双方を含有する水溶液を、アニオン交換膜を用い
る電気透析にかけることにより、アニオン交換膜を介し
て、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物が容
易に製造しうることを見出し、併せて、この分離方法
が、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を高
濃度、高収率で得られ、工業的に有利であることを見い
だし、加えて、このα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン
酸高含有物を製造するための工業的分離システムを確立
して、本発明を完成した。

【００１３】本明細書でいうＬ−アスコルビン酸とは、
特に不都合が生じない限り、遊離のＬ−アスコルビン酸
のみならず、Ｌ−アスコルビン酸アルカリ金属塩、若し
くは、Ｌ−アスコルビン酸アルカリ土類金属塩などのＬ
−アスコルビン酸の塩、またはそれらの混合物を意味す
る。

【００１４】また同様に、α−グリコシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸についても、特に不都合が生じない限り、遊離
の酸のみならずその塩をも意味する。

【００１５】本発明で採用される電気透析法は、Ｌ−ア
スコルビン酸およびα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン
酸を、目的に応じて、脱ミネラルした遊離の酸の状態で
採取することもできるし、塩の状態で採取することもで
きる。

【００１６】本発明に用いる原料供給液としては、α−
グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに、Ｌ−アスコ
ルビン酸および糖類の一方または双方を含有する水溶液
であればよく、例えば、特開平３−１３９２８８号公報
に開示されているような、Ｌ−アスコルビン酸とα−グ
ルコシル糖化合物とを含有する溶液に糖転移酵素または
糖転移酵素とグルコアミラーゼを作用させて得られるα
−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸とともにＬ−アスコ
ルビン酸および糖類を含有する反応溶液が有利に利用で
きる。

【００１７】糖転移酵素の作用により生成するα−グリ
コシル−Ｌ−アスコルビン酸について述べると、化１で
示されるように、Ｌ−アスコルビン酸の２位の炭素のア
ルコール基にα−Ｄ−グリコピラノシル基が結合し、そ
の結合数は１乃至７個程度のグルコシル基がα−１，４
結合しており、その個々の物質としては、２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、２−Ｏ−
α−Ｄ−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸、２−Ｏ−α
−Ｄ−マルトトリオシル−Ｌ−アスコルビン酸、２−Ｏ
−α−Ｄ−マルトテトラオシル−Ｌ−アスコルビン酸、
２−Ｏ−α−Ｄ−マルトペンタオシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトヘキサオシル−Ｌ−アス
コルビン酸、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトヘプタオシル−Ｌ
−アスコルビン酸などである。

【００１８】このα−Ｄ−グルコシル基の結合数は、使
用する糖転移酵素によって異なり、通常、シクロマルト
デキストリン・グルカノトランスフェラーゼ（ＥＣ２．
４．１．１９）の場合が最も大きく、１乃至７程度まで
分布し、α−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．１）の場合
が１乃至５程度、α−グルコシダーゼ（ＥＣ３．２．
１．２０）の場合が１乃至４程度である。

【００１９】以上述べたように、各種方法により生成せ
しめたα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸含有溶液
は、通常、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸のみな
らず、未反応のＬ−アスコルビン酸，Ｄ−グルコース，
α−グルコシル糖化合物などの糖類など多量の夾雑物を
含有している。

【００２０】これから、α−グリコシル−Ｌ−アスコル
ビン酸高含有物を製造する場合には、α−グリコシル−
Ｌ−アスコルビン酸と未反応のＬ−アスコルビン酸、糖
類などの夾雑物との分子量、イオン性などの違いを利用
する種々の分離手段が利用できるが、とりわけ、本発明
で採用する電気透析法は、目的とするα−グリコシル−
Ｌ−アスコルビン酸を高濃度、高収率に採取でき、その
工業実施の実現も容易であることが判明した。

【００２１】この際、分離されるＬ−アスコルビン酸、
α−グルコシル糖化合物などを再度、糖転移反応の原料
として用いることも有利に実施できる。

【００２２】また、糖転移反応終了後、電気透析にかけ
るまでの間に、例えば、反応液を、膜処理して酵素を除
去したり、加熱して生じる不溶物を除去したり、活性炭
などで処理して反応液中の蛋白性物質、着色性物質を除
去するなどの精製方法を組合せることも有利に実施でき
る。

【００２３】また、必要ならば、例えば、アニオン交換
樹脂を用いる吸脱着法で糖類を除去したり、カチオン交
換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーでＬ−アスコ
ルビン酸を除去するなど他の精製方法を組合せて利用す
ることも随意である。

【００２４】電気透析にかける原料の供給溶液は、α−
グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン
酸、糖類などの無用な分解を防止するため、通常ｐＨ８
以下、望ましくは、ｐＨ約２乃至７から選ばれるｐＨ範
囲が好適である。

【００２５】以下、本発明で採用される電気透析法につ
いて述べる。

【００２６】イオン交換膜を用いる電気透析法は、自体
公知で、例えば、食品と開発、第２１巻、第７号、第５
４乃至５７頁（１９８６年）に記載されている。

【００２７】一般的に、溶液を収容できる槽に、カチオ
ン、アニオン両イオン交換膜を交互に多数配設して多数
の室を設け、これら両イオン交換膜と離して、溶液槽内
の両端に陰、陽一対の電極体を収容する電極室を設け、
この一対の電極体に直流電源を接続する電気透析装置が
用いられる。

【００２８】イオン交換膜としては、スチレン−ジビニ
ルベンゼン共重合体を主体とし、これに補強剤として合
成繊維を使用した有機高分子膜が使用され、カチオン交
換膜は、通常、スルフォン酸基を結合して、カチオン選
択透過性を有している。

【００２９】アニオン交換膜は、通常、第４級アンモニ
ウム塩基を結合して、アニオン選択透過性を有してい
る。

【００３０】電極室は、通常、約、０．１乃至２規定塩
類溶液からなる電極液で満たされており、電極体はこの
室内に収容される。

【００３１】しかしながら、イオン交換膜を用いる電気
透析法が採用できるかどうかは、原料供給液の成分、性
質などによって大きな影響を受け、その実施可能性を予
測することは困難である。

【００３２】この点について、前記文献の第５５頁中欄
第６乃至９行目では、「食品工業の原料は、成分が複雑
であり、天然の有機化合物によってイオン交換膜が、フ
ァウリングされるかどうか必ず実液で確認する必要があ
る。」とまで記載されている。

【００３３】本発明においては、イオン交換膜を用いる
電気透析法が、ファウリングなどのトラブルを起こすこ
となく、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物
の製造に採用できることを見いだしただけでなく、α−
グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を高濃度、高収率で製
造できることを見いだしたのである。

【００３４】加えて、イオン交換膜およびアニオン交換
膜を用いる電気透析法の採用に際し、カチオン交換膜は
必ずしも必要とせず、仮に用いる場合であっても、カチ
オン交換膜の選択は、共存する糖類の透過を阻止できる
分画分子量のものであれば特に制限がなく、これに対
し、アニオン交換膜の使用は必須で、その選択は重要で
あり、分画分子量約１００乃至１，０００から選ばれる
ものが好適であることが判明した。

【００３５】すなわち、α−グリコシル−Ｌ−アスコル
ビン酸とＬ−アスコルビン酸とを分離するに際しては、
Ｌ−アスコルビン酸が優先的に透過しうる分画分子量約
１００乃至２００から選ばれるアニオン交換膜が好適で
あり、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸と糖類とを
分離するに際しては、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸が優先的に透過しうる分画分子量約２００乃至１，
０００から選ばれるアニオン交換膜が好適であることが
判明した。

【００３６】次に、本発明のα−グリコシル−Ｌ−アス
コルビン酸高含有物を製造するための分離システムとそ
の利用方法を説明する。

【００３７】まず、分離システムの一例を図で説明す
る。

【００３８】図１は、溶液を収容できる槽１と、これを
原料供給室２と透過室３とに隔離するアニオン交換膜４
と、このアニオン交換膜と離れて、その両側の室内に設
けられる陰極体５と陽極体６と、これらに接続してなる
直流の陰極電源７と陽極電源８とを含んでなる分離シス
テムを示す。

【００３９】この際、分離速度の向上を目ざしてイオン
交換膜の面積を増すために、アニオン交換膜に加えて、
または、アニオン交換膜に代えて、少なくとも一対の互
いに間隔を置いて設けられるカチオン交換膜およびアニ
オン交換膜で隔離して、３室以上、望ましくは、５０乃
至５，０００室程度を設けて交互に原料供給室および透
過室にし、その両端の室を電極体を収容する電極室にす
ることも有利に実施できる。

【００４０】換言すれば、溶液を収容できる槽と、これ
を原料供給室と透過室とに隔離する少なくとも一対の互
いに間隔を置いて設けられるカチオン交換膜およびアニ
オン交換膜と、その両イオン交換膜と離れて、その外側
の室内に設けられる陰、陽一対の電極体と、その一対の
電極体に接続される直流電源とを含んでなる分離システ
ムは、本発明のα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高
含有物を製造するための工業的分離システムとして、き
わめて好都合である。

【００４１】本発明の分離システムの利用は、必要に応
じて、一段に行うことも、多段に行うこともできる。

【００４２】例えば、糖転移酵素による反応溶液のよう
な、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸とともにＬ−
アスコルビン酸および糖類の少なくとも三成分を含有す
る水溶液を原料供給液とする場合には、通常、二段に電
気透析が行なわれる。

【００４３】まず、アニオン交換膜として、分画分子量
約１００乃至２００から選ばれる膜を用いて電気透析
し、Ｌ−アスコルビン酸を原料供給室側から透過室側に
優先的に透過させ、その供給室側にα−グリコシル−Ｌ
−アスコルビン酸および糖類を残す方式により分離し、
次いで、その供給室側の水溶液を原料供給液として、分
画分子量約２００乃至１，０００から選ばれるアニオン
交換膜を用いて電気透析し、α−グリコシル−Ｌ−アス
コルビン酸を原料供給室側から透過室側に優先的に透過
させ、糖類をその供給室側に残す方式により分離し、こ
のα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を採取
すればよい。

【００４４】分離システムの二段の利用は、必要によ
り、順序を逆にして行うことも随意である。

【００４５】すなわち、まず、分画分子量約２００乃至
１，０００から選ばれるアニオン交換膜を用いて電気透
析し、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸およびＬ−
アスコルビン酸を原料供給室側から透過室側に優先的に
透過させ、次いで、その透過室側の水溶液を原料供給液
として、分画分子量約１００乃至２００から選ばれるア
ニオン交換膜を用いて電気透析し、Ｌ−アスコルビン酸
を供給室側から透過室側に優先的に透過させ、その供給
室側にα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を残す方式
を採用してもよい。

【００４６】また、本発明の分離システムの利用は、原
料供給液に含まれる主な成分の種類や採取されるα−グ
リコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の使用目的によ
っても違ってくる。

【００４７】通常、原料供給液が、主成分として、α−
グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに、Ｌ−アスコ
ルビン酸および糖類のいずれか一方だけを含む二成分系
の場合には、一段だけの利用で足りるし、α−グリコシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸とともにＬ−アスコルビン酸お
よび糖類の双方を含む三成分系の場合であっても、採取
するα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の使
用目的が、Ｌ−アスコルビン酸が共存していても、また
は、糖類が共存していてもかまわない場合には、一段だ
けの利用で足りる。

【００４８】勿論、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン
酸高含有物として、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル−Ｌ−アスコルビン酸を目ざす場合には、晶出前の
溶液からできるだけ夾雑物を除くのが望ましい。

【００４９】本発明の分離システムの利用により得られ
るα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物が、高
純度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸水溶液であって、遊離の酸として採取する場合
には、このまま、これを濃縮、過飽和にすればきわめて
容易に晶出することとなり、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を高収率で採取する
ことができる。

【００５０】また、得られたα−グリコシル−Ｌ−アス
コルビン酸高含有物が化１で示されるようなα−グリコ
シル基の結合数が１乃至数個にわたる混合物である場合
には、これにグルコアミラーゼ（ＥＣ３．２．１．３）
を作用させて、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸とＤ−グルコースとに加水分解し、次
いで、本発明の分離システムを利用することにより精製
するか、必要ならば、アニオン交換樹脂による吸脱着
法、カラムクロマトグラフィーなどにより精製し、高純
度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸水溶液とし、これを濃縮、過飽和にし、晶出させ
て、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸を採取することも有利に実施できる。

【００５１】このようにして得られた、α−グリコシル
−Ｌ−アスコルビン酸高含有物は、安定性、安全性の高
い天然型のビタミンＣ強化剤としてばかりでなく、呈味
改善剤、酸味剤、安定剤、品質改良剤、抗酸化剤、紫外
線吸収剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料など
に、また、ウィルス性疾患、細菌性疾患、悪性腫瘍など
の感受性疾患の予防剤、治療剤、更には、美肌剤、色白
剤などの化粧品に配合して、望ましくは、０．００１ｗ
／ｗ％（以下、本明細書では、特にことわらない限り、
ｗ／ｗ％を単に％で示す。）以上配合して有利に利用で
きる。

【００５２】また、本発明のα−グリコシル−Ｌ−アス
コルビン酸が遊離の酸の場合には、必要により、これを
水酸化金属、炭酸金属などを水溶液状で反応させて、α
−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸の塩、例えば、ナト
リウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、銅
塩、亜鉛塩などにして、ｐＨ調整するとともに、ビタミ
ンＣ作用とミネラル強化を併せ持つ物質を調製し、これ
を飲食物、医薬品、化粧品などに利用することも有利に
実施できる。

【００５３】以下、本発明を実験例で説明する。

【００５４】

【実験１】α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−
アスコルビン酸との分離

【００５５】２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸２５０ｍｇとＬ−アスコルビン酸２５０
ｍｇとを含有し、ｐＨ４．５に調整した水溶液５ｍｌを
原料供給液とし、旭化成工業株式会社製造の商品名アシ
プレックス・カートリッジＡＣ−１１０−１０（カチオ
ン交換膜の分画分子量約１００、アニオン交換膜の分画
分子量約１００、膜面積１０ｃｍ^２）を装着した卓上脱
塩装置、商品名マイクロアシライザーＧ１を用いて、
３．４ボルトで電気透析した。

【００５６】原料供給室側におけるそれぞれの残存率
（％）を経時的に測定した。

【００５７】結果を表１に示す。

【００５８】

【表１】

【００５９】表１の結果から明らかなように、Ｌ−アス
コルビン酸が、アニオン交換膜を介して、原料供給室側
から優先的に透過しており、このことは、透過室側の測
定によっても裏づけられた。

【００６０】

【実験２】α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸と糖類
との分離

【００６１】分子量的にほぼ等しい２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸２５０ｍｇとマル
トース２５０ｍｇとを含有し、ｐＨ５．０に調整した水
溶液５．０ｍｌを原料供給液として、商品名アシプレッ
クス・カートリッジＡＣ−１２０−１０（カチオン交換
膜の分画分子量約１００、アニオン交換膜の分画分子量
約３００、膜面積１０ｃｍ^２）を装着した卓上脱塩装
置、商品名マイクロアシライザーＧ１を用いて、実験１
と同様に電気透析した。

【００６２】原料供給室側におけるそれぞれの残存率
（％）を経時的に測定した。

【００６３】結果を表２に示す。

【００６４】

【表２】

【００６５】表２の結果から明らかなように、２−Ｏ−
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸が、ア
ニオン交換膜を介して、原料供給室側から優先的に透過
しており、このことは透過室側の測定によっても裏づけ
られた。

【００６６】

【実験３】α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−
アスコルビン酸および糖類との分離

【００６７】２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸２５０ｍｇ、Ｌ−アスコルビン酸２５０
ｍｇおよびマルトース２５０ｍｇを含有し、ｐＨ４．５
に調整した水溶液７．５ｍｌを原料供給液として、二段
に電気透析した。

【００６８】まず、実験１の方法に従って、アシプレッ
クス・カートリッジＡＣ−１１０−１０を装着した卓上
脱塩装置を用いて電気透析した。

【００６９】結果は、実験１の場合と同様に、Ｌ−アス
コルビン酸が優先的に透過し、１２０分後には、Ｌ−ア
スコルビン酸は透過室側に１００％透過し、原料供給室
側には、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸とマルトースとが、それぞれ残存率９１％、
９８％で残った。

【００７０】従って、その供給室側の２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシルーＬ−アスコルビン酸の純度は約３３
％から約４８％に上昇した。

【００７１】次に、その供給室側の液を、原料供給液と
して、実験２の方法に従って、アシプレックス・カート
リッジＡＣ−１２０−１０を装着した卓上脱塩装置を用
いて電気透析した。

【００７２】結果は、実験２の場合と同様に、２−Ｏ−
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸が優先
的に透過し、９０分後に透過室側で測定された値は、原
料供給液の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸に対して約８３％の収率であり、その純度
は約９０％であった。

【００７３】また、透析中、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸、
マルトースのいずれの成分も無用の分解を起こすことな
く、安定であった。

【００７４】以下、本発明の実施例を述べる。

【００７５】

【実施例１】α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有物の製造

【００７６】デキストリン３重量部を水５重量部に加熱
溶解し、Ｌ−アスコルビン酸２重量部を加え、ｐＨ５．
５、６０℃に維持しつつ、これにシクロマルトデキスト
リン・グルカノトランスフェラーゼ（株式会社林原生物
化学研究所販売）をデキストリングラム当り４００単位
加えて２４時間反応させた。

【００７７】反応液を高速液体クロマトグラフィーで分
析したところ、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトシル−Ｌ−
アスコルビン酸、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトトリオシル−
Ｌ−アスコルビン酸、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトテトラオ
シル−Ｌ−アスコルビン酸、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトペ
ンタオシル−Ｌ−アスコルビン酸など一連のα−グリコ
シル−Ｌ−アスコルビン酸を約４０％含有していた。

【００７８】本反応液をＵＦ膜で処理して酵素を除去し
た後、透過液を活性炭で脱色、濾過し得られる瀘液３０
０ｍｌ（固形物として９０ｇ）をアシプレックス・カー
トリッジＡＣ−１１０−４００（カチオン交換膜の分画
分子量約１００、アニオン交換膜の分画分子量約１０
０、膜面積４００ｃｍ^２）を装着した卓上脱塩装置マイ
クロアシライザーＧ３（電極室に、電極液として０．５
規定硝酸ナトリウムを使用）を用いて電気透析した。

【００７９】この際、１１．６ボルトで運転を開始し、
原料供給室側の比電気抵抗の上昇につれて、段階的に電
圧を下げて運転した。

【００８０】アニオン交換膜を介して、Ｌ−アスコルビ
ン酸が優先的に透過され、約７時間経過した時点で、Ｌ
−アスコルビン酸の約９８％とα−グリコシル−Ｌ−ア
スコルビン酸の微量が透過した。

【００８１】この結果、原料供給室側からは、α−グリ
コシル−Ｌ−アスコルビン酸と糖類の大部分を含有する
溶液が回収され、純度４８％のα−グリコシル−Ｌ−ア
スコルビン酸高含有物を得た。

【００８２】収率は、原料供給液のα−グリコシル−Ｌ
−アスコルビン酸に対して約９５％以上の高収率であっ
た。

【００８３】本品は、安定で、生理活性も充分であり、
ビタミンＣ強化剤としてばかりでなく、安定剤、品質改
良剤、抗酸化剤、呈味剤、生理活性剤、紫外線吸収剤な
どとして、飲食物、医薬品、化粧品など広範な用途に有
利に利用できる。

【００８４】なお、本説塩装置を用いて、本実施例の透
析運転を２０回繰返してみたところ、ファウリングによ
る分離性能の低下は観察されなかった。

【００８５】

【実施例２】α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有物の製造

【００８６】実施例１の方法で得た酵素反応液中の酵素
を、同様に除去し、活性炭で脱色、濾過し得られる濾液
３００ｍｌ（固形物９０ｇ）を、アシプレックス・カー
トリッジＡＣ−１３０−４００（カチオン交換膜の分画
分子量約１００、アニオン交換膜の分画分子量約１，０
００、膜面積約４００ｃｍ^２）を装着した卓上脱塩装
置マイクロアシライザーＧ３を用いて、実施例１の方法
に準じて電気透析した。

【００８７】アニオン交換膜を介して、α−グリコシル
−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−アスコルビン酸とが優先的
に透過され、透過室側から純度の高められたα−グリコ
シル−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−アスコルビン酸の大部
分を回収し、真空乾燥、粉末化して、粉末状のα−グリ
コシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を得た。

【００８８】その収率は、原料供給液のα−グリコシル
−Ｌ−アスコルビン酸に対して約９０％以上の高収率で
あった。

【００８９】本品は、Ｌ−アスコルビン酸が共存してい
る分だけ、直接還元性を示すものの、実質的には、α−
グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸の特長を有しており、
実施例１の場合と同様に、飲食物、医薬品、化粧品など
広範な用途に有利に利用できる。

【００９０】なお、本脱塩装置を用いて、本実施例の透
析運転を２０回繰返してみたところ、ファウリングによ
る分離性能の低下は観察されなかった。

【００９１】

【実施例３】α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有物の製造

【００９２】実施例２の方法で調製したＬ−アスコルビ
ン酸を含むα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有
物粉末を水で濃度約２０％に溶解し、この溶液を、アシ
プレックス・カートリッジＡＣ−１１０＝４００（カチ
オン交換膜の分画分子量約１００、アニオン交換膜の分
画分子量約１００、膜面積約４００ｃｍ^２）を装着した
卓上脱塩装置マイクロアシライザーＧ３を用いて、実施
例１の方法に準じて電気透析した。

【００９３】実施例１の場合と同様に、Ｌ−アスコルビ
ン酸が優先的に透過され、原料供給室側から純度約７０
％に高められたα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を
回収し、液状のα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高
含有物を得た。

【００９４】収率は、原料供給液のα−グリコシル−Ｌ
−アスコルビン酸に対して約９５％以上の高収率であっ
た。

【００９５】本品は、実施例１の場合と同様に安定で、
飲食物、医薬品、化粧品など広範な用途に有利に利用で
きる。

【００９６】

【実施例４】２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸高含有物の製造

【００９７】実施例１の方法で、酵素反応、電気透析し
て得たα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を
含有する溶液を５５℃、ｐＨ４．５に維持しつつ、これ
にグルコアミラーゼを固形物グラム当り１０単位、２４
時間作用させ、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸とＤ−グルコースとに変換させた。

【００９８】本反応液を加熱して、グルコアミラーゼを
失活させ、活性炭で脱色、瀘過し得られる濾液を、カチ
オン交換樹脂（Ｈ^＋型）のカラムにかけ、脱ミネラル
し、次いで、アニオン交換樹脂（ＯＨ⁻型）のカラムに
かけてアニオンを樹脂に吸着させ、水洗してＤ−グルコ
ースを除去し、更に、０．５Ｎ−塩酸溶液で溶出して、
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸高含有画分を採取した。

【００９９】本溶液を減圧濃縮して、濃度約７３％と
し、助晶缶にとり、種晶を加えて４０℃とし、ゆっくり
攪拌しつつ徐冷して２日間を要して１５℃まで下げ、バ
スケット型遠心分離器で分蜜し、結晶を少量の水でスプ
レー洗浄して結晶を採取した。

【０１００】純度約９９％の結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を、原料のＬ−アス
コルビン酸に対して、収率約３５％で得た。

【０１０１】本品は、高純度の結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸であって、直接還
元性を示さず、安定で、生理活性も充分であり、ビタミ
ンＣ強化剤としてばかりでなく、安定剤、品質改良剤、
抗酸化剤、生理活性剤、紫外線吸収剤などとして、飲食
物、医薬品、化粧品など広範な用途に有利に利用でき
る。

【０１０２】

【発明の効果】本文で述べたごとく、本発明において
は、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに、Ｌ
−アスコルビン酸および糖類の一方または双方を含有す
る水溶液からα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有物を製造するに際し、該水溶液をアニオン交換膜を用
いる電気透析にかけることにより、アニオン交換膜を介
してＬ−アスコルビン酸を優先的に透過させてα−グリ
コシル−Ｌ−アスコルビン酸と分離するか、または、α
−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を優先的に透過させ
て糖類と分離できることとなり、α−グリコシル−Ｌ−
アスコルビン酸高含有物が、比較的容易に、高純度、高
収率で得られる特長を有する。

【０１０３】また、溶離剤、再生剤などを必要とせず、
使用水量の少ないことも特長である。

【０１０４】従って、溶液が不必要に希釈されず、工業
生産上、きわめて有利である。

【０１０５】また、電気透析中に、無用な分解の起きな
いことも好都合である。

【０１０６】このようにして得られたα−グリコシル−
Ｌ−アスコルビン酸高含有物は、安定で、生理活性も充
分であり、ビタミンＣ強化剤としてばかりでなく、安定
剤、品質改良剤、抗酸化剤、呈味剤、生理活性剤、紫外
線吸収剤などとして、飲食物、医薬品、化粧品など広範
な用途に有利に利用できる。

【０１０７】従って、本発明のα−グリコシル−Ｌ−ア
スコルビン酸高含有物の製造方法とその製造のための分
離システムは、食品、医薬品、化粧品、化学など広範な
産業分野における工業的意義がきわめて大きい。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の分離システムの一例を示した説明図で
ある。

【符号の説明】

１溶液を収容できる槽２原料供給室３透過室４アニオン交換膜５陰極電極体６陽極電極体７陰極電源８陽極電源

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】 α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸と
ともに、Ｌ−アスコルビン酸および糖類の一方または双
方を含有する水溶液を、アニオン交換膜を用いる電気透
析にかけ、アニオン交換膜を介して、Ｌ−アスコルビン
酸を優先的に透過させてα−グリコシル−Ｌ−アスコル
ビン酸と分離するか、または、α−グリコシル−Ｌ−ア
スコルビン酸を優先的に透過させて糖類と分離するかし
て、得られるα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有物を採取することを特徴とするα−グリコシル−Ｌ−
アスコルビン酸高含有物の製造方法。
【請求項２】アニオン交換膜として、Ｌ−アスコルビ
ン酸を優先的に透過させてα−グリコシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸と分離するに際しては、分画分子量約１００乃
至２００から選ばれる膜を用い、α−グリコシル−Ｌ−
アスコルビン酸を優先的に透過させて糖類と分離するに
際しては、分画分子量約２００乃至１，０００から選ば
れる膜を用いることを特徴とする請求項１記載のα−グ
リコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法。
【請求項３】アニオン交換膜とともにカチオン交換膜
を用いることを特徴とする請求項１または２記載のα−
グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法。
【請求項４】 α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高
含有物が、高純度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸であることを特微とする請求項
１、２または３記載のα−グリコシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸高含有物の製造方法。
【請求項５】 α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高
含有物が、高純度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸水溶液であるか、または、この水
溶液を濃縮、過飽和にし、晶出させた結晶２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸であること
を特徴とする請求項１、２、３または４記載のα−グリ
コシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法
【請求項６】溶液を収容できる槽と、これを原料供給
室と透過室とに隔離する分画分子量約１００乃至１，０
００から選ばれるアニオン交換膜と、そのアニオン交換
膜と離れて、その両側の室内に設けられる陰、陽一対の
電極体と、この一対の電極体に接続される直流電源とを
含んでなるα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有
物を製造するための分離システム。
【請求項７】溶液を収容できる槽と、これを原料供給
室と透過室とに隔離する少なくとも一対の互いに間隔を
置いて設けられるカチオン交換膜および分画分子量約１
００乃至１，０００から選ばれるアニオン交換膜と、そ
の両イオン交換膜と離れて、その外側の室内に設けられ
る陰、陽一対の電極体と、その一対の電極体に接続され
る直流電源とを含んでなるα−グリコシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸高含有物を製造するための分離システム。