JPH05219968A - ソルビン酸の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 本発明は微生物による新規なソルビン酸の製
造方法を提供する。 【構成】 ソルブアルデヒドをコマモナス属から選ばれ
る微生物の１種で処理する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はソルブアルデヒドを微生
物学的に酸化してソルビン酸を製造する方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】ソルビン酸或はその塩はいずれも抗カビ
力が優れているので食品保存剤として賞用されている
が、その工業的な製造法としては通常クロトンアルデヒ
ドとケテンとを反応させて中間的に形成されたβ−ラク
トンを経てそのポリエステルを製造し、次いで該ポリエ
ステルを熱分解、酸分解或はイオン交換樹脂分解してソ
ルビン酸を生成させる方法が実施されている。しかしな
がら、かかる方法においてはポリエステル分解後のソル
ビン酸の回収或は精製操作が面倒で工程が長く、複雑な
工程管理を必要とする等製造面、経済面において必ずし
も有利であるとは言えない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】かかる解決策として最
近、ソルブアルデヒドを特定の微生物で処理してソルビ
ン酸を製造する方法が提案された（特開昭６３−１５２
９９０号公報）がソルビン酸の収率面で工業的規模での
実施には未だ問題が残っていると言える。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者等は微生物学的
処理により、ソルビン酸を製造する方法について鋭意研
究を重ねた結果、ソルブアルデヒドをコマモナス属から
選ばれる微生物の少なくとも１種で処理する場合、収率
良くソルビン酸が得られることを見出し、本発明を完成
するに至った。ソルブアルデヒド（別称２,４−ヘキサ
ジエナール）を酸化するために用いられる微生物を具体
的に例示すれば、コマモナス・テリゲナ（Ｃｏｍａｍｏ
ｎａｓｔｅｒｒｉｇｅｎａ、ＩＦＯ １２６８５、ＩＦ
Ｏ １３２９９）がある。上記、微生物を培養するため
の培地としては炭素源、窒素源等を含有し微生物が生育
するものであればいずれでも良い。

【０００５】炭素源としては、微生物のもつソルビン酸
生産活性を阻害しない化合物であれば任意に使用でき、
例えばグルコース、シュークロース、エタノール、エチ
レングリコール、プロピレングリコール、１,４−ブタ
ンジオール、グリセリン、アセトアルデヒド、酢酸、プ
ロピオン酸などが挙げられる。又、窒素源としては肉エ
キス、ペプトン、コーンスティープリカー、尿素、硫酸
アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸ナトリウムなど
を用いることが出来る。更に、必要に応じてリン酸塩、
マグネシウム塩、カルシウム塩、鉄塩、銅塩、亜鉛塩な
どの無機塩類や微生物の生育に必要な栄養物質を培地に
適宜加えることができる。

【０００６】ソルブアルデヒドを処理するに当たって
は、上記の増殖した微生物を含む培地をそのまま使用し
ても、又、一且該培地から集菌し、これを水或は生理食
塩水、バッファーに懸濁したものを使用しても良い。反
応液に対してソルブアルデヒドは系中濃度が０.０１〜
１０％、好ましくは０.０５〜５％程度の範囲で添加さ
れる。仕込み方式は一括、分割、連続等任意に変更可能
であるが、実用上は逐次仕込方式が有利である。菌体は
懸濁液１リットル当たり０.５〜２０ｇ（乾燥菌）程度
用いられる。反応時には撹拌を行い好気的条件を採用す
る。かかる条件に設定するには系内に空気や酸素或は必
要に応じて他のガスを混合した混合ガスを吹き込むが、
溶液中の酸素濃度を１ppm以上とするのが望ましい。

【０００７】反応温度は１０〜７０℃、好ましくは２０
〜４０℃、ＰＨは３〜１０、好ましくは４〜９、反応時
間は０.１〜２００時間程度の範囲が有利である。又、
反応液へ必要に応じてＰＱＱやＮＡＤ（Ｐ）等の補酵
素、界面活性剤、有機溶媒等を適宜添加することも可能
である。更に、反応は増殖期の微生物を用い、培養液に
直接添加して反応する方法や休止菌体による反応を単独
もしくは組合せたり、他の固定化菌体、菌体抽出処理物
を用いる反応を単独もしくは上記方法と組合せて行う等
種々の態様が可能である。反応終了後、ソルビン酸を常
法に従って、精製して目的物を得る。

【０００８】

【作 用】本発明においては特定の微生物を用いてソ
ルブアルデヒドを酸化することによって、収率良く高純
度のソルビン酸を製造することが出来る。

【０００９】

【実 施 例】次に実例を挙げて本発明の方法を更に具体
的に説明する。 実施例１ 培地（酵素エキス１０ｇ、ポリペプトン１５ｇ、リン酸
２カリウム２ｇ、リン酸１カリウム１ｇ、硫酸マグネシ
ウム０.２ｇ、Ｌ−システイン１ｇ、モリブテン酸ナト
リウム８mg、ＰＨ７.０、水１リットル）５０mlを坂口
フラスコに入れ、滅菌処理後、ｎ−ブタノール４.８ml
を添加しコマモナス・テリゲナ（ＩＦＯ１２６８５）を
１白金耳接種して２８℃、２４時間往復振とう培養し
た。培養後遠心分離法にて集菌し、菌体をＰＨ７.０、
０.１Ｍリン酸バッファーにて２回洗浄し、ｄｒｙ換算
で９７mgの菌体を得た。

【００１０】次に大型試験管にｄｒｙ換算で１６mgの菌
体を入れ、ＰＨ７.０、０.１Ｍリン酸バッファーを５ml
加えて菌体を懸濁した後にソルブアルデヒド５mgを添加
して反応を開始した。反応は３０℃にて２０分間行い、
１分間に２００回往復振トウして反応液を撹拌した。反
応終了後、遠心分離法によって反応液の上澄み液を分取
し、これを塩酸でＰＨ２としたのち、高速液体クロマト
グラフィー（ＨＰＬＣ）分析法にてソルビン酸の収率を
測定した。ソルビン酸生成率は７０％であった。

【００１１】尚、ガスクロマト分析の条件は次の通りで
ある。 装 置 ；日立（ヒタチ）Ｌ−６０００型 カ ラ ム；Ｍ＆Ｓパック、Ｃ₁₈（ＯＤＳカラム） ０.５３mm×１５m カラム温度；３０℃、 検 出 ；日立 Ｌ−４２００ ＵＶ−ＶＩＳ検出機 ２２０ｎｍ

【００１２】実施例２〜６、比較例１ 実施例１の菌株の代わりに下表に示す菌株を用いた以外
は実施例１と同様に反応を行った。結果を表に示す。

【００１３】 表１ ソルビン酸 使 用 菌 株 の生成率(％) 実施例２ コマモナス・テリゲナ ７２ （Comamonas terrigena） ＩＦＯ １３２９９ 比較例１ シュードモナス シュードアルカリゲネス ３０ （Pseudomonas pseudoalcaligenes）ＩＦＯ １４１６７

【００１４】

【発明の効果】本発明においては特定の微生物を用いて
ソルブアルデヒドを酸化することによって、収率良く高
純度のソルビン酸を製造することが出来る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ソルブアルデヒドをコマモナス属から選
   ばれる微生物の少なくとも１種で処理することを特徴と
   するソルビン酸の製造方法。