JPH0525166A - オアソマイシン、その調製方法およびその使用 - Google Patents

オアソマイシン、その調製方法およびその使用

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JPH0525166A
JPH0525166A JP3279083A JP27908391A JPH0525166A JP H0525166 A JPH0525166 A JP H0525166A JP 3279083 A JP3279083 A JP 3279083A JP 27908391 A JP27908391 A JP 27908391A JP H0525166 A JPH0525166 A JP H0525166A
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culture
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Siegrid Philipps
ジークリト・フイリツプス
Susanne Grabley
ズザネ・グラープライ
Ernold Granzer
エアノルト・グランツアー
Klaus Huetter
クラウス・ヒユター
Ralf Thiericke
ラルフ・テイーリツケ
Joachim Wink
ヨーアヒム・ヴインク
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Hoechst AG
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】 薬理学的作用を有する新しいマクロラクトン
である下記式のオアソマイシンをStreptoverticillium
およびStreptomycetes株を使用して調製する。 〔式中Ｒは水素または基： を示す〕 【効果】 上記の化合物は抗細菌剤ならびに脂質調節剤
として使用できる。特にＲが水素である化合物は、コレ
ステロール生合成抑制のための脂質調節剤として有利に
使用できる。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はオアソマイシン、その調
製方法およびその使用に関する。
【０００２】
【従来の技術】ストレプトマイセス科（Streptomycete
s）より得られる抗生物質は長年知られた活性物質であ
り、微生物より得られ、種々の方法で用いられている。
J. V. Uri（Acta Microbiologica 33, 271(1986)）はス
トレプトマイセス科より得た非ポリジーン性のマクロラ
イド抗生物質であるデセルトマイシンを記載している。
これらの化合物は広範囲の抗細菌スペクトルおよび選択
的抗カビ作用を有する。StreptoverticilliumおよびStr
eptomyces株が新しいマクロ環式ラクトンであるオアソ
マイシンを産生できることが知られている。これらの化
合物は薬理学的活性即ち治療活性を有し、特に抗細菌剤
およびコレステロール生合成抑制剤として好都合に使用
でき、それに応じた薬理学的有益性を有している。
【０００３】
【発明の詳細な記載】即ち本発明は培養液中で下記式
Ｉ：
【化３】 〔式中Ｒは水素または基：
【化４】 〕の化合物が蓄積するまで栄養培地中で、Streptoverti
cillium sp. および／またはStreptomyces sp. を培養
することを包含する式Ｉの化合物の調製方法；および、
抗細菌剤またはコレステロール生合成抑制剤としての式
Ｉの化合物の使用およびその薬理学的利用、に関する。
【０００４】本発明を特にその好ましい実施態様として
以下に詳述する。本発明は請求範囲においても更に定義
される。
【０００５】本発明の化合物は好ましくはStreptoverti
cillium sp. ＤＳＭ５９８９およびStreptomyces sp.
ＤＳＭ５９９０を使用して調製する。両株はインドの土
壌試料から単離し、上記番号の下に１９９０年６月１８
日にブダペスト条約の規則に従って、ドイツ微生物収集
所(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen）に寄託さ
れている。
【０００６】菌株Streptoverticillium sp. ＤＳＭ５９
８９は赤色の胞子を有する。胞子鎖は輪状であり、その
表面は平滑である。菌株Streptomyces sp. ＤＳＭ５９
９０は白色の胞子鎖を有し、これは狭いらせん状に配列
している、胞子表面は平滑と見られる。
【０００７】式Ｉの化合物は炭素源および窒素源および
慣用的な無機塩を含有する栄養溶液中のStreptovertici
llium sp. およびStreptomyces sp.、好ましくはＤＳＭ
５９８９およびＤＳＭ５９９０により製造する。当然な
がら、この化合物を合成する限り、菌株ＤＳＭ５９８９
またはＤＳＭ５９９０の代わりにそれらの突然変異株ま
たは変異体を用いることもできる。この種の突然変異株
はそれ自体知られた方法で、物理的手段、例えばＵＶま
たはＸ線の照射のような照射、あるいは化学的突然変異
原物質、例えばエチルメタンスルホネート（ＥＭＳ）、
２−ヒドロキシ−４−メトキシ−ベンゾフェノン（ＭＯ
Ｂ）またはＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグ
アニジン（ＭＮＮＧ）を用いて得ることができる。
【０００８】適当な好ましい好気培養炭素源は、同化可
能な炭水化物および糖アルコール、例えば、グルコー
ス、ラクトースまたはＤ−マンニトール、および炭水化
物含有天然物、例えば麦芽エキスである。適当な窒素含
有栄養物質はアミノ酸、ペプチドおよび蛋白質およびこ
れらの分解生成物、例えばペプトンまたはトリプトン、
更に肉エキス、粉砕種子、例えばトウモロコシ、小麦、
豆、大豆または綿花、アルコール製造工程で得られる蒸
留残渣、肉粉または酵母エキス、更にアンモニウム塩お
よび硝酸塩である。栄養溶液が含有できる無機塩の例
は、アルカリ金属またはアルカリ土類金属、鉄、亜鉛、
コバルトおよびマンガンの塩化物、炭酸塩、硫酸塩また
はリン酸塩である。
【０００９】式Ｉの化合物の製造は完全栄養溶液の重量
を基にして、それぞれ、大豆粉約０.２〜５％、好まし
くは１〜４％およびマンニトール約０.２〜５％、好ま
しくは１〜４％を含有する栄養溶液中で特に良好に行わ
れる。同様に、完全栄養溶液の重量を基にして、それぞ
れロール処理オート麦０.２〜５％、好ましくは１〜３
％、および塩化カルシウム０.１〜１０％、クエン酸鉄
(III)０.０１〜５％、硫酸マンガン０.０１〜０.１％、
塩化亜鉛０.００１〜０.５％、硫酸銅０.０００１〜０.
１％、４ホウ酸ナトリウム０.００１〜０.５％、塩化コ
バルト０.０００１〜０.０１％およびモリブデン酸ナト
リウム０.０００１〜０.０１％を含有する微量元素水溶
液０.１〜１０ml、好ましくは１〜５mlを含有する栄養
溶液、および、グリセロール約０.２〜１０％、好まし
くは１〜５％、カゼインペプトン０.０１〜１％、好ま
しくは０.１〜０.４％、リン酸水素カリウム０.０１〜
１％、好ましくは０.０５〜０.５％、塩化ナトリウム
０.００１〜２％、好ましくは０.０１〜０.８％、硫酸
マンガン０.０００１〜０.５％、好ましくは０.００１
〜０.２％、および、塩化カルシウム０.１〜１０％、ク
エン酸鉄(III)０.０１〜５％、硫酸マンガン０.０１〜
０.１％、塩化亜鉛０.００１〜０.５％、硫酸銅０.００
０１〜０.１％、４ホウ酸ナトリウム０.００１〜０.５
％、塩化コバルト０.０００１〜０.０１％およびモリブ
デン酸ナトリウム０.０００１〜０.０１％を含有する微
量元素水溶液０.１〜２０ml、好ましくは１〜１０mlを
含有する栄養溶液を用いた場合でも良好な結果が得られ
る。培養は好気的に、即ち例えば振とうフラスコまたは
培養器内で、振とうまたは撹拌しながら、必要に応じて
空気または酸素を導入しながら、液中で行う。培養温度
は、約１８〜３５℃、好ましくは約２５〜３５℃、特に
２８〜３２℃である。ｐＨ領域は６〜８であるが、６.
５〜７.５が好都合である。微生物はこれらの条件下、
一般的には２４〜３００時間、好ましくは３６〜１４０
時間、培養する。
【００１０】培養は好都合には、数段階で行う。即ち、
先ず１つ以上の予備培養を液体栄養培地中で行い、次
に、例えば容量で１：１０の比率で、実際の生産培地に
移植し、主培養とする。予備培養は例えば胞子化した菌
体を栄養溶液に移植し、約３６〜１２０時間、好ましく
は４８〜７２時間生育させることにより行う。胞子化さ
れた菌体は、例えば、固体または液体の栄養培地、例え
ば、酵母／麦芽寒天または大豆粉／マンニトール寒天上
で、約３〜４０日間、好ましくは４〜１０日間、菌株を
生育させることにより得られる。
【００１１】培養の進行は培養液のｐＨまたは菌体量に
基づいてモニターするか、または、例えば薄層クロマト
グラフィーまたは高圧液体クロマトグラフィーのような
クロマトグラフィー法によるか、または、生物学的活性
を測定することにより観測する。式Ｉの化合物は菌体内
および培養液濾液中の両方に含有される。
【００１２】上記化合物は、生成物の化学的、物理学的
および生物学的性質を考慮しながら、知られた方法によ
り培養液から単離する。培養液中の抗生物質濃度または
各単離段階における抗生物質濃度は、例えばシリカゲル
上、移動相としてブタノール／氷酢酸／水または酢酸エ
チル／メタノール／水の混合物を用いて、薄層クロマト
グラフィーにより調べることができる。薄層クロマトグ
ラフィーによる分画の場合の検出は、例えば、アニスア
ルデヒドのような染色試薬を用いるか、または例えば細
菌、カビ、または原生動物を用いた生物学的試験によ
り、産生物質の量をカリブレーション溶液と適宜比較し
ながら行う。
【００１３】化合物Ｉを単離するためには、培養ブロス
と菌体を先ず非極性有機溶媒、例えばｎ−ヘキサン、石
油エーテルまたはハロゲン化炭化水素、例えばクロロホ
ルム等で抽出して非極性不純物を除去する。その後極性
有機溶媒、例えば低級アルコール、アセトンおよび／ま
たは酢酸エチルおよびこれらの溶媒の混合物で抽出す
る。
【００１４】式Ｉの純粋な化合物の単離は、適当な物質
上で、好ましくは例えばシリカゲル、アルミナ、イオン
交換剤または吸着樹脂上で、有機極性溶媒または溶媒混
合物、例えば、アルキルアセテート、アルキルアセテー
トと低級アルカノールの混合物、クロロホルムまたは塩
化メチレン、またはこれらの溶媒と低級アルカノールの
混合物で、場合により水も用いて溶離するか、あるい
は、イオン交換樹脂に適するｐＨまたは塩濃度勾配、例
えば塩化ナトリウムまたはトリス（ヒドロキシメチル）
アミノメタン塩酸塩（トリス緩衝液）を用いて溶離し、
そして、抗生物質活性を有する画分を合わせることによ
り行う。
【００１５】式Ｉの化合物は固体状態、および、ｐＨ１
〜８、特に３〜７の溶液中で安定であり、このため、慣
用の薬学的製剤中に配合できる。
【００１６】本発明の化合物は抗細菌剤ならびに脂質調
節剤として使用できる。Ｒが水素であるような式Ｉの化
合物は、特にコレステロール生合成抑制のための脂質調
節剤として特に有利に使用できる。
【００１７】式Ｉの化合物は高コレステロール濃度に基
づく疾患、特に冠動脈心臓疾患、動脈硬化および類似の
疾患の予防および治療に使用できる。本発明はまた式Ｉ
の化合物の薬学的製剤に関する。
【００１８】活性物質の外に、薬学的に許容される添加
物、例えば希釈剤および／または賦形剤を薬品の調製に
おいて使用することができる。これは混合後に投与に適
する形態に活性物質を変換するような生理学的に許容さ
れる物質を意味する。
【００１９】適当な固体または液体の薬学的製剤の例
は、錠剤、コーティング錠剤、粉末、カプセル、坐薬、
シロップ、乳液、懸濁液、ドロップまたは注射用溶液お
よび活性物質の遅延性放出の可能な製品である。頻繁に
使用される賦形剤および希釈剤の例は種々の糖類または
澱粉類、セルロース誘導体、炭酸マグネシウム、ゼラチ
ン、動物性および植物性の油、ポリエチレングリコー
ル、水またはその他の適当な溶媒および水含有緩衝液で
あり、これらはグルコースまたは塩を添加することによ
り等張液とすることができる。
【００２０】適切な場合は、本発明の薬学的製剤中の更
に別の添加物として、界面活性剤、着色料およびフレー
バー、安定剤および保存料を使用することもできる。ま
た、例えばポリフェニルピロリドンのような薬理学的に
許容できる重合体賦形剤、またはシクロデキストリンま
たは多糖類のような他の薬学的に許容できる添加物を使
用することもできる。化合物は、特に、胆汁酸と結合す
る添加物、特に胃腸管内で吸収されない非毒性の塩基性
アニオン交換物質と組合せることができる。
【００２１】生成物は経口投与、肛門投与または非経腸
投与することができる。投与単位として製品を調製する
のが可能かつ望ましく、錠剤、カプセル、坐薬が特に適
当な投与単位の例である。各投与単位は、特に経口投与
の場合、活性成分１０００mgまで、好ましくは１０〜１
００mgを含有することができる。しかしながら、適切な
場合には投与前に分割ないしは倍増して上記より多いか
または少ない投与単位で用いてもよい。
【００２２】適切な場合は、例えば活性物質を適当な重
合体またはワックス等の粒状形態でコーティングするか
これに包埋することにより、経口投与の投与単位をマイ
クロカプセル化して放出を遅延させたり、または長時間
持続させることができる。
【００２３】非経腸投与は筋肉内注射または皮下注射を
意図した滅菌溶液または懸濁液のような液体剤型を用い
ることにより可能である。これらの種類の剤型は、例え
ば、水性または油性の媒体のような適当な生理学的に許
容される希釈剤中に活性成分の適量を溶解または懸濁
し、溶液または懸濁液を滅菌し、適切には更に適当な安
定剤、乳化剤および／または保存料および／または抗酸
化剤を使用することにより調製する。
【００２４】経口投与形態は、特に長期間の治療という
観点から好ましく、上記した疾患の防止および治療を多
大に促進する。
【００２５】薬学的製品は一般的な常法により調製す
る。投与方法は患者および危険性を有する対象の種類、
年齢、体重および性別および症状により変化する。
【００２６】本発明を以下の実施例により更に説明す
る。特段の記載が無い限り、数値は重量で示したもので
ある。
【００２７】実施例 １.ａ) 産生菌株の胞子懸濁液の調製 滅菌した５００ml容の三角フラスコ中栄養溶液〔グリセ
ロール１２.５ｇ、アルギニン１ｇ、ＮａＣｌ １ｇ、リ
ン酸水素２カリウム１ｇ、硫酸マグネシウム０.５ｇ、
微量元素溶液Ａ（蒸留水１リットル中塩化カルシウム３
ｇ、クエン酸鉄(III)１ｇ、硫酸マグネシウム０.２ｇ、
塩化亜鉛０.１ｇ、硫酸銅０.０２５ｇ、４ホウ酸ナトリ
ウム０.０２ｇ、塩化コバルト０.００４ｇ、モルブデン
酸ナトリウム０.０１ｇ）２.５ml、水を１リットルとな
るまで添加；滅菌前ｐＨ７.３〕１００mlに菌株ＤＳＭ
５９８９またはＤＳＭ５９９０を植菌し、７２時間回転
撹拌機上で１５０rpmで２８℃でインキュベートした。
次に、上記組成の栄養培地を入れてこれに寒天を２０ｇ
／リットルとなるように入れて固化させておいた滅菌５
００ml容三角フラスコ中に、培養液２０mlを均一に分散
させ、そしてデカンテーションにより廃液した。これら
の培養物を１０〜１４日間３０℃でインキュベートし
た。この期間の後、１つのフラスコ内で形成された胞子
を市販の非イオン系界面活性剤（例えばServa社のTrito
n Ｘ １００）１滴を含有する脱イオン水５００mlです
すぎ、その直後に使用するか、または５０％グリセロー
ル中で−２２℃で保存した。
【００２８】ｂ） 三角フラスコ内の産生菌株の培養物
または予備培養物の調製 ａ）で記載した栄養溶液１００mlの入った５００ml容の
滅菌三角フラスコに試験管内斜面培養物または胞子懸濁
液０.２mlを植菌し、３０℃１５０rpmで撹拌機上でイン
キュベートした。式Ｉの化合物の最大産生は約７２時間
後に達成された。同じ栄養溶液による４８時間経過した
液内培養物は、１０リットルおよび１００リットルの培
養機に植菌するのに十分であった（植菌量約５％）。
【００２９】２．式Ｉの化合物の調製：以下の条件下で
１０リットルの培養機を運転した。
【００３０】栄養培地：２０ｇ／リットル大豆粉、２０
ｇ／リットルマンニトール、ｐＨ７.５（滅菌前） インキュベーション時間：７２時間 インキュベーション温度：３０℃ 撹拌速度：２５０rpm 給気：空気４リットル／分
【００３１】エタノール性ポリオール溶液数滴を繰り返
し添加することにより発泡を抑制した。最大産生は約７
２時間後に達成された。収量は約１００mg／リットルで
あった。
【００３２】３．式Ｉの化合物の単離：ＤＳＭ５９８９
またはＤＳＭ５９９０の培養終了後、約２％の濾過補助
剤（例えばセライト）を添加して培養ブロスを濾過し
た。図１および図２に示すフロー図に従って後処理を行
った。
【００３３】４．コレステロール生合成抑制に関する生
物学的試験 ａ） in vitro測定 リポ蛋白非含有栄養培地中ＨＥＰ−Ｇ２細胞の単層を、
１時間、適切な濃度の式Ｉの被験物質とともに予備培養
した。14Ｃ−標識生合成前駆体14Ｃ−酢酸ナトリウムを
添加し、３時間インキュベーションを継続した。次に3
Ｈ−コレステロールの内部標準物質を添加した後に、細
胞の一部をアルカリ加水分解に付した。加水分解した細
胞から得られる脂質をクロロホルム／メタノール混合物
で抽出した。この脂質混合物は、担体コレステロールの
添加後に、調製用薄層クロマトグラフィーにより分画
し、染色後、コレステロールのバンドを単離し、14Ｃ−
前駆体から形成された14Ｃ−コレステロールの量をシン
チグラフィーにより測定した。細胞蛋白は、単位時間当
たり、細胞蛋白mg当たり、14Ｃ−前駆体から形成された
14Ｃ−コレステロールの量が計算できるように、細胞の
少量を用いて測定した。培地中の被験生成物の特定のモ
ル濃度におけるコレステロール生合成の抑制を直接示す
ことができるように、添加した被験生成物の抑制作用を
比較するための対照物質を用いた。細胞培養の一体性、
および、生成物への曝露による細胞の損傷の無いこと
を、形態学的（光学顕微鏡）に評価し、そして、細胞培
養の少量を用いたインキュベーション培地中への乳酸デ
ヒドロゲナーゼ分泌の測定により生化学的にも測定し
た。標準生成物としてはロバスタチン(Lovastatin)を用
いた。Ｒ＝Ｈの式Ｉの化合物によるコレステロール生合
成の抑制は、濃度１０-7モル／リットルで７２％、濃度
１０-8モル／リットルで４１％であった。
【００３４】ロバスタチンによるコレステロール生合成
抑制は１０-7モル／リットルで７４％、１０-8モル／リ
ットルで４８％であった。
【００３５】ｂ） in vivo測定 雄ラットの長期試験で示されている通り、肝コレステロ
ール生合成の抑制は血清中脂質の低下に対して作用を有
する。ＨＯＥ：ＷＩＳＫｆ（ＳＰＦ ７１）系統で初期
体重約２４０ｇの雄ラットの群に、ポリエチレングリコ
ール４００中の被験物質を、胃管栄養法により毎朝与
え、対照群には担体のみを与えた。最終投与の２４時間
後および２４時間絶食後に採血し、１つのラット群の試
料プールより得た血清中のリポ蛋白を調製用超遠心分離
法により分離した。この場合ＶＬＤＬ、ＬＤＬおよびＨ
ＤＬを分離するためには以下の密度限界を用いた。 ＶＬＤＬ １.００６；ＬＤＬ １.０４；ＨＤＬ １.
２１
【００３６】Boehringer／Mannheimによる完全に酵素的
な方法を用いてコレステロールとトリグリセリドを測定
し、Lowry等の方法を用いて蛋白を測定した。
【００３７】Ｒが水素であるような式Ｉの化合物につい
て、測定した数値をクロフィブレート(clofibrate)と比
較しながら以下に示す。
【００３８】
【表１】
【００３９】５.ａ) Ｒが水素であるような化合物Ｉの
特性化 オアソマイシンＡを不定形の固体として単離した。
【００４０】融点：１４６℃、旋光度：−１３.１°
（ｃ＝０.１２２、メタノール） 薄層クロマトグラフィー：シリカゲル６０、Ｆ２５４：
クロロホルム／メタノール(９：１、ｖ：ｖ)：Ｒｆ０.
０ ｎ−ブタノール／酢酸／水（上相）（４：１：５、ｖ：
ｖ：ｖ）：Ｒｆ０.４５ 染色特性：Ehrlich試薬：茶色、バニリン／硫酸：茶色
／紫色 ＦＡＢ−ＭＳ：m/e＝1065(M＋K)；1049(M＋Na)； 分子量：1027.3(Ｃ55Ｈ94Ｏ17） IR(KBr)：3420(br)、2960、2930、1780、1725、1710、1
600、1570cm-1 UV(MeOH)：202nm(＝14000)；220(6100) ＋HCl：＝202(16400)；220(5700) ＋NaOH：＝225(7000)
【００４１】1H-NMR(500MHz, DMSO-d6)δ＝0.86(53-
H3)、0.78(55-H3)、0.64(54-H3)、0.64(49-H3)、1.54(5
2-H3)、1.77(47-H3)、0.78(48-H3)、0.86(50-H3)、0.99
(51-H3)、1.88および2.16(44-H2)、2.16(4-H2)、2.44(45
-H2)、1.90および2.18(11-H2)、1.20および1.50(10-
H2)、2.32(40-H2)、1.26および1.54(5-H2)、1.52(6-
H)、2.18(18-H)、1.46(30-H)、2.14(42-H)、1.26(32-
H)、1.42(24-H2)、1.58(8-H)、2.08(14-H)、1.11および
1.42(34-H2)、1.52(28-H2)、1.40(26-H2)、1.34(36-
H2)、3.90(25-H)、3.82(35-H)、3.90(27-H)、4.06(33-
H)、4.14(37-H)、3.68(31-H)、4.06(23-H)、3.66(9-
H)、3.62(29-H)、5.00(41-H)、3.74(22-H)、3.74(15-
H)、3.25(7-H)、4.48(43-H)、3.50(19-H)、5.48(39-
H)、5.26(21-H)、5.40(12-H)、5.34(16-H)、5.39(13-
H)、5.39(17-H)、5.48(38-H)、6.69(3-H)。
【００４２】13C-NMR(125.7MHz, DMSO-d6)δ＝9.4(q, C
-53)、 9.6(q, C-55)、 10.5(q, C-54)、 11.1(q, C-49)、
11.5(q, C-52)、 12.1(q, C-47)、 12.2(q, C-48)、 15.2
(q, C=50)、 16.8(q, C-51)、 24.8(t, C-44)、 26.0(t, C
-4)、 28.2(t, C-45)、 28.9(t,C-11)、 32.0(t, C-10)、 3
2.4(t, C-40)、 32.9(t, C-5)、 34.3(d, C-6)、 39.2(d,
C-18)、 39.5(d, C-30)、 39.9(d, C-42)、 40.1(d, C-3
2)、 40.4(t, C-24)、 41.4(d, C-8)、 42.2(d, C-14)、 4
2.2(t, C-34)、 42.2(t, C-28)、 45.6(t, C-26)、 45.7
(t, C-36)、 63.7(d, C-25)、 63.8(d, C-35)、 66.7(d, C
-27)、 66.8(d, C-33)、 66.8(d, C-37)、 70.8(d, C-31)、
70.9(d, C-23)、 72.0(d, C-9)、 72.8(d, C-29)、 73.0
(d, C-41)、74.3(d, C-22)、 74.3(d, C-15)、 74.6(d, C-
7)、 80.4(C-43)、 81.0(d, C-19)、 122.4(d, C-39)、126.
8(s, C-2)、 126.9(d, C-21)、 129.5(d,C-12)、 130.9(d,
C-16)、 132.5(d,C-13)、 132.7(d, C-17)、 138.1(s, C-
20)、 138.2(d, C-38)、 142.5(d, C-3)、166.4(s, C-1)、
176.7(s, C-46)。
【００４３】元素分析値 理論値：Ｃ ６４.３０ Ｈ ９.２２ 実測値：Ｃ ６４.２０ Ｈ ９.２２
【００４４】ｂ） Ｒがマンノース残基であるような化
合物Ｉの特性化 オアソマイシンＢを不定形の固体として単離した。
【００４５】融点：１５７℃、旋光度：−２４.６°
（ｃ＝０.１９９、メタノール） 薄層クロマトグラフィー：シリカゲル６０、Ｆ２５４：
クロロホルム／メタノール(９：１、ｖ：ｖ)：Ｒｆ０.
０ ｎ−ブタノール／酢酸／水（上相）（４：１：５、ｖ：
ｖ：ｖ）：Ｒｆ０.３０ 染色特性：Ehrlich試薬：茶色、バニリン／硫酸：茶色
／紫色 ＦＡＢ−ＭＳ：m/e＝1228(M＋K)；1212(M−Na)； 分子量：1189.5(Ｃ61Ｈ104Ｏ22） IR(KBr)：3400(br)、2960、2930、1770、1725、1710、1
580cm-1 UV(MeOH)：＝202nm(＝23100）；220(10900) ＋HCl：＝202（24600)；220(10100) ＋NaOH：＝218(14000)
【００４６】1H-NMR(500MHz、DMSO-d6)δ＝0.90(53-
H3)、 0.82(55-H3)、 0.68(54-H3)、 0.68(49-H3)、 1.63(5
2-H3)、 1.80(47-H3)、 0.82(48-H3)、 0.90(50-H3)、 1.02
(51-H3)、 1.94および2.18(44-H2)、 2.18(4-H2)、 2.53(4
5-H2)、 1.96および2.21(11-H2)、1.24および1.50(10-
H2)、 2.36(40-H2)、 1.32および1.50(5-H2)、 1.57(6-H)、
2.24(18-H)、 1.48(30-H)、 2.18(42-H)、1.44(32-H)、
1.30(24-H2)、1.62(8-H)、2.12(14-H)、 1.23(34-H2)、
1.59(28-H2)、 1.42(26-H2)、1.30(36-H2)、 3.48および
3.68(6′-H2)、 3.86(25-H)、 3.82(35-H)、 3.92(27-H)、
4.10(33-H)、 4.15(37-H)、 3.44(4′-H)、 3.82(23-H)、
3.54(2′-H)、 3.78(31-H)、 3.56(3′-H)、 3.64(9-H)、
3.60(29-H)、 5.02(41-H)、 3.40(5′-H)、 4.16(22-H)、
3.70(15-H)、 3.26(7-H)、 4.42(43-H)、 3.54(19-H)、 4.6
3(1′-H)、 5.20(21-H)、 5.52(39-H)、 5.40(12-H)、 5.37
(16-H)、 5.42(13-H)、 5.48(17-H)、 5.52(38-H)、 6.72(3
-H)。
【００４７】13C-NMR(125.7MHz、DMSO-d6)δ＝9.4(q, C
-53)、 9.6(q, C-55)、 10.4(q, C-54)、 11.2(q, C-49)、
11.7(q, C-52)、 12.1(q, C-47)、 12.2(q, C-48)、15.2
(q, C-50)、 16.6(q, C-51)、 24.8(t, C-44)、 26.1(t, C
-4)、 28.2(t, C-45)、 28.9(t,C-11)、 32.1(t, C-10)、 3
2.4(t, C-40)、 32.9(t, C-5)、 34.3(d, C-6)、 39.4(d,C
-18)、 39.4(d, C-30)、 39.9(d, C-42)、 40.4(d, C-32)、
40.8(t, C-24)、 41.4(d, C-8)、 42.2(d, C-14)、 42.2
(t, C-34)、 42.3(t, C-28)、 45.6(t, C-26)、 45.7(t, C
-36)、 61.2(t, C-6′)、 63.4(d, C-25)、 63.8(d, C-3
5)、 66.7(d, C-27)、66.8(d, C-33)、 66.8(d, C-37)、 6
7.2(d, C-4′)、69.4(d, C-23)、 70.6(d, C-2′)、 70.7
(d, C-31)、 70.9(d, C-3′)、 72.0(d, C-9)、 72.8(d, C
-29)、 73.0(dC-41)、 73.5(d, C-5′)、 73.7(d, C-22)、
74.4(d, C-15)、 74.6(d, C-7)、 80.4(d, C-43)、 80.7
(d, C-19)、 95.9(d, C-1′)、 122.2(d, C-21)、 122.4
(d, C-39)、126.9(s, C-2)、 129.5(d, C-12)、 131.0(d,
C-16)、 132.6(d, C-13)、 132.7(d,C-17)、 138.2(d, C-3
8)、 142.5(d, C-3)、 143.2(s, C-20)、 166.4(s, C-1)、
176.7(s, C-46)。
【００４８】元素分析値 理論値：Ｃ ６１.８９ Ｈ ８.８１ 実測値：Ｃ ５９.９１ Ｈ ８.８５
【図面の簡単な説明】
【図１】培養液上澄液からのオアソマイシンＡおよびオ
アソマイシンＢの単離の工程を示すフロー図。
【図２】菌体からのオアソマイシンＡおよびオアソマイ
シンＢの単離の工程を示すフロー図。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｐ 17/08 2104−4Ｂ 19/62 7432−4Ｂ //(Ｃ１２Ｐ 17/08 Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｐ 17/08 Ｃ１２Ｒ 1:625） (Ｃ１２Ｐ 19/62 Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｐ 19/62 Ｃ１２Ｒ 1:625） (72)発明者 ズザネ・グラープライ ドイツ連邦共和国デー−6240ケーニヒシユ タイン／タウヌス．ヘルダーリーンシユト ラーセ７ (72)発明者 エアノルト・グランツアー ドイツ連邦共和国デー−6233ケルクハイム ／タウヌス．フアルケンシユタイナーシユ トラーセ24 (72)発明者 クラウス・ヒユター ドイツ連邦共和国デー−6232バートゾーデ ン・アム・タウヌス．ローベルト−シユト ルツ−シユトラーセ３ (72)発明者 ラルフ・テイーリツケ ドイツ連邦共和国デー−6057デイーツエン バハ．アウエシユトラーセ35 (72)発明者 ヨーアヒム・ヴインク ドイツ連邦共和国デー−6074レーダーマル ク．マグデブルガーシユトラーセ14

Claims (11)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 下記式Ｉ： 【化１】 〔式中Ｒは水素または基： 【化２】 〕の化合物。
  2. 【請求項２】 培養液中に式Ｉの化合物が蓄積されるま
    で、栄養培地中でStreptoverticillium sp.またはStrep
    tomyces sp. を培養することからなる請求項１記載の式
    Ｉの化合物の調製方法。
  3. 【請求項３】 細菌株ＤＳＭ５９８９および／またはＤ
    ＳＭ５９９０を培養する請求項２記載の方法。
  4. 【請求項４】 栄養培地が完全栄養溶液の重量を基にし
    て、それぞれ、大豆粉０.２〜５％およびマンニトール
    ０.２〜５％を含有する請求項２または３記載の方法。
  5. 【請求項５】 栄養培地がロール処理オート麦０.２〜
    ５％、および、塩化カルシウム０.１〜１０％、クエン
    酸鉄(III)０.０１〜５％、硫酸マンガン０.０１〜０.１
    ％、塩化亜鉛０.００１〜０.５％、硫酸銅０.０００１
    〜０.１％、４ホウ酸ナトリウム０.００１〜０.５％、
    塩化コバルト０.０００１〜０.０１％およびモリブデン
    酸ナトリウム０.０００１〜０.０１％を含有する微量元
    素水溶液０.１〜１０mlを含有する請求項４記載の方
    法。
  6. 【請求項６】 培養を１８〜３５℃で行う請求項２〜５
    の１つ以上に記載の方法。
  7. 【請求項７】 培養をｐＨ領域６〜８で行う請求項２〜
    ６の１つ以上に記載の方法。
  8. 【請求項８】 コレステロール生合成の抑制剤としての
    請求項１記載の式Ｉの化合物の使用。
  9. 【請求項９】 Ｒがマンノース残基である化合物を使用
    する請求項８記載の使用。
  10. 【請求項１０】 抗細菌物質としての請求項１記載の式
    Ｉの化合物の使用。
  11. 【請求項１１】 Streptoverticillium sp. ＤＳＭ５９
    ８９およびStreptomyces sp. ＤＳＭ５９９０および請
    求項１記載の式Ｉの化合物を産生するその変異体および
    突然変異株。
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