JPH0529040Y2 - - Google Patents

Description

【考案の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本考案は、細胞を懸濁した細胞懸濁液を一対の
電極間に入れ、その電極間に電界を印加すること
により細胞を融合させる電気的細胞融合チヤンバ
に関するものである。

（従来の技術） 細胞融合を行なうには細胞懸濁液の温度を調節
する必要がある。また、細胞の融合状態を顕微鏡
で観察できることが望ましい。

そこで、細胞懸濁液の温度を調節手段、顕微鏡
で観察しつつ細胞融合を行なうことのできる細胞
融合チヤンバとしては、第４図に示されるものが
報告されている（プランタ（Plant）誌、第151
巻、第26〜32頁（1981年）参照）。

２はスライドガラス板であり、スライドガラス
板２上で絶縁物で囲まれたチヤンバ４に一対の対
向電極６，８が設けられている。チヤンバ４の外
部において、電極６，８がそれぞれ冷却管１０，
１２と接触しており、電極６，８の温度が調節さ
れるようになつている。

（考案が解決しようとする問題点） 第４図の細胞融合チヤンバでは、温度調節はチ
ヤンバ外部で電極６，８と冷却管１０，１２とが
接触することにより行なわれる。そのため、チヤ
ンバ４内の細胞懸濁液の温度調節を十分に行なう
ことができない。

本考案は、細胞懸濁液の温度を十分に制御する
ことができ、しかも、顕微鏡で細胞の融合状態を
観察することのできる細胞融合チヤンバを提供す
ることを目的とするものである。

（問題点を解決するための手段） 実施例を示す第１図を参照して説明すると、本
考案の細胞融合チヤンバは、透明板１８上に一対
の電極１４，１６が互いに対向して配置されてお
り、一対の電極１４，１６間に細胞を懸濁した細
胞懸濁液１８が収容されるように一対の電極１
４，１６が透明板１８に固着されており、また、
一対の電極１４，１６はその内部において温度調
節用流体と接している。

（実施例） 第１図は一実施例を示す断面図、第２図は同実
施例の底面図である。

１４はリング状の内電極、１６はリング状の外
電極である。内電極１４と外電極１６は、互いに
間隔をもつてドーナツ状の透明板１８上に対置さ
れ、それぞれ透明板１８の反対側から押え板２
０，２２によりネジ止めされることにより、透明
板１８に固着されている。

内電極１４と透明板１８の間にはゴム製のＯリ
ング２４が介在し、外電極１６と透明板１８の間
にはゴム製のＯリング２６が介在している。内電
極１４と外電極１６の間隙には細胞を懸濁した細
胞懸濁液２８が収容される。Ｏリング２４，２６
により細胞懸濁液２８の液漏れが防止されてい
る。

３０はドーナツ状のセパレータであり、絶縁物
により形成されている。セパレータ３０は第３図
に示される形状をもち、内電極１４と外電極１６
にネジで固着され、内電極１４と外電極１６の間
隔を正確に保つとともに、この細胞融合チヤンバ
の機械的強度を保つている。セパレータ３０には
円周に沿つて多数の穴３２が開けられている。こ
れらの穴３２は細胞懸濁液を操作するために用い
られ、また、光をよく通して顕微鏡による観察を
容易にする。

内電極１４にはリング状の水路３４が設けら
れ、外電極１６にはリング状の水路３６が設けら
れている。内電極１４の水路３４と外電極１６の
水路３６の間は絶縁性のチユーブ３８により連結
され、外電極１６の水路３６には温度調節源から
温度調節用流体（例えば水）を供給する絶縁性の
チユーブ４０が接続され、内電極１４の水路３４
には温度調節源へ温度調節用流体を戻す絶縁性の
チユーブ４２が接続されている。

４４は細胞懸濁液２８を収容している空間を封
止する蓋であり、透明な絶縁体によりドーナツ状
に形成され、セパレータ３０の間隙部に嵌め込ま
れるようになつている。蓋４４とセパレータ３０
の接触部分にはＯリング４６，４８が介在し、Ｏ
リング４６，４８は細胞懸濁液２８が収容されて
いる空間を気密に保つて無菌状態を確保するとと
もに、細胞懸濁液２８の蒸発を抑えている。

５０は内電極１４につながるリード線、５２は
外電極１６につながるリード線である。

本実施例において、細胞融合を行なわせるに
は、内電極１４と外電極１６の間に細胞懸濁液２
８を収容し、蓋４４を被せて細胞懸濁液２８を無
菌状態に保つ。温度調節用流体を温度調節源から
供給する。温度調節用流体はチユーブ４０から外
電極１６の水路３６に入り、その水路３６を通つ
てチユーブ３８から内電極１４の水路３４に入
り、その水路３４を通つてチユーブ４２から温度
調節源へ戻る。温度調節用流体のこのような循環
により、内電極１４と外電極１６の温度が調節さ
れ、両電極１４，１６間の細胞懸濁液２８の温度
が調節される。

温度調節された細胞懸濁液２８中で、透明板１
８上に細胞が沈殿する。内電極１４と外電極１６
の間に所要の電気を供給することにより、細胞融
合が開始される。

細胞の融合状態を観察するには、倒立顕微鏡を
用いる。倒立顕微鏡では上方から蓋４４を通して
細胞懸濁液２８に光が入射し、透明板１８を透過
して下方のレンズ系（図示されていない）に入射
し、観察が行なわれる。

融合が終了すると、この細胞融合チヤンバをオ
ートクレーブで最高130℃程度で消毒することが
ある。本実施例では両電極１４，１６と透明板１
８の間の液漏れ防止用にゴム製Ｏリング２４，２
６を使用しているので、加熱消毒の際、構成部品
の材質の違いによる熱膨張差に起因する歪を吸収
することができる。また、Ｏリング２４，２６の
代りにゴム状接着剤を使用しても同等の効果を得
ることができる。

また、本考案は平行平板電極を用いた小型スラ
イド型チヤンバに通用することもできる。その場
合、平行平板電極の内側に水路を形成し、その水
路内を温度調節用流体が流れるようにする。

（考案の効果） 本考案の細胞融合チヤンバでは、透明板上の電
極がその内部において温度調節用流体と直接接触
するようにした。その結果、細胞懸濁液の温度調
節を正確に行なうことができるようになる。ま
た、透明板上にチヤンバを形成しているので、顕
微鏡による融合状態の観察が可能である。

【図面の簡単な説明】

第１図は本考案の一実施例を示す断面図、第２
図は同実施例の底面図、第３図は同実施例で使用
されるセパレータを示す斜視図、第４図は従来の
細胞融合チヤンバを示す平面図である。 １４……内電極、１６……外電極、１８……透
明板、２８……細胞懸濁液、３４，３６……水
路。

Claims (1)

1. 【実用新案登録請求の範囲】 (1) 透明板上に一対の電極が互いに対向して配置
   されているとともに、前記一対の電極間に細胞
   を懸濁した細胞懸濁液が収容されるように前記
   一対の電極が前記透明板上に固定されており、 前記一対の電極はその内部において温度調節
   用流体と接している細胞融合チヤンバ。 (2) 前記一対の電極は同心円上に配置されたリン
   グ状電極であり、前記温度調節用流体がそれら
   のリング状電極内を流れる実用新案登録請求の
   範囲第(1)項に記載の細胞融合チヤンバ。