JPH05320068A - ラクトフェリン分解物を有効成分とする抗菌剤、チロシナーゼ活性阻害剤、及びラクトフェリン分解物を用いる物品の処理方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 加熱，ｐＨ変化に対して安定であり、天然の
ラクトフェリン（未分解の）に比して顕著に優れた抗菌
性を有するラクトフェリン加水分解物を有効成分とする
抗菌剤、ラクトフェリン加水分解物を有効成分とするチ
ロシナーゼ活性阻害剤，ラクトフェリン加水分解物を用
いて物品（人又は動物の体内に取り入れられ，または体
表面に接触される）を処理する方法を提供すること。 【構成】 ラクトフェリンの加水分解物を有効成分とし
て含有する抗菌剤、チロシナーゼ活性阻害剤、ラクトフ
ェリン加水分解物で物品を処理する方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本件出願は、本件出願人と同一出願人によ
る特願平２ー１６９６３６号（出願日:平成２年６月２
６日、名称：ラクトフェリン分解物を有効成分とする抗
菌剤及びチロシナーゼ活性阻害剤）に基づく優先権を主
張する出願である。

【０００２】

【産業上の利用分野】本発明は、ラクトフェリンの分解
物を有効成分とする抗菌剤及びチロシナーゼ活性阻害剤
に関する。

【０００３】

【従来の技術】ラクトフェリンは、生体内では、涙，唾
液，抹消血，乳汁等に含まれている鉄結合性蛋白質であ
り、大腸菌，ブドウ球菌および腸球菌にたいして、０．
５〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度で抗菌作用を有することが知
られている［ノネッケ及びスミス；ジャーナル・オブ・
デアリー・サイエンス（Nonnecke, B.J. & Smith, K.
L.; Journal of Dairy Science) ６７巻；６０６頁：１
９８４年］。

【０００４】一般にラクトフェリンの抗菌作用は、菌の
増殖に必要な鉄とラクトフェリンとが結合して、菌が鉄
を利用できなくなることによるものと考えられている。
しかしラクトフェリンの抗菌作用は、必ずしも充分に強
いとは言えない。したがって、ラクトフェリンを使用す
る場合、殊にラクトフェリンを他の物品に配合，含浸，
付着させ、あるいは物品をラクトフェリンで被覆して、
抗菌作用を発揮せしめる場合には、大量のラクトフェリ
ンが必要となるため、従来の技術ではラクトフェリンの
利用には限界があった。

【０００５】この点を改良するため、従来からラクトフ
ェリンの抗菌作用を増強する研究が種々行われて来た。
例えば、ラクトフェリンとリゾチームとの共存により相
乗的に抗菌作用を増強する方法［特開昭６２ー２４９９
３１号公報］、ラクトフェリンと分泌型ＩｇＡとの共存
により相乗的に抗菌作用を増強する方法［ステフェンス
等；イムノロジー（Stephens, S., et al; Immunolog
y）；４１巻；５９７頁；１９８０年］等が報告されて
いる。

【０００６】しかしながら、高い抗菌活性を得るため
に、ラクトフェリンそのものを化学的に処理して、その
活性を改良しようとする試みは、本発明者等が知る限り
従来皆無であった。

【０００７】更に、ラクトフェリンは熱に不安定であ
り、６２．５℃で３０分間の加熱によりほぼ失活し、７
０℃で１５分間の加熱により完全に失活することが知ら
れている。［フォード等；ジャーナル・オブ・ペディア
トリックス（Ford, J.E., etal; Journal of Pediatric
s）；９０巻；２９頁；１９７７年］従って、従来ラク
トフェリン含有液を処理する場合であって、その工程中
に加熱処理を包含する場合には、ラクトフェリンが失活
する虞れがあり、充分な加熱処理を採用できないのが実
情であった。

【０００８】また、ラクトフェリン、及びその加水分解
物のチロシナーゼ活性阻害効果については、知られてい
ない。

【０００９】チロシナーゼは、チロシン、その他１価の
フェノール類及び相当するオルソ-２価フェノール類の
分子状酸素による酸化を触媒する酵素であり、キノコ，
ジャガイモ，リンゴ等多くの植物に広く存在し、また動
物組織にも広く存在する。植物においては、組織の損傷
部分の黒変現象に関与し、動物においては組織、特に皮
膚表皮細胞のメラニン色素の形成に関与していることが
知られている（化学大辞典編集委員会編、化学大辞典、
第５巻、第９７６ページ、共立出版、昭和３５年）。ア
ジソン病において皮膚又は粘膜でのメラニン沈着が、チ
ロシナーゼ活性を促進するメラノトロピンと拮抗する副
腎皮質ホルモンの分泌減少に起因することも知られてい
る（化学大辞典編集委員会編、化学大辞典、第１巻、第
６５ページ、共立出版、昭和３５年）。更にチロシナー
ゼは、食品の鮮度低下にも関与しているとも言われてい
る。

【００１０】以上のように、食品、化粧品又は医薬品分
野においてチロシナーゼの望ましくない作用を防止、予
防又は治療するためのチロシナーゼ活性阻害剤の開発が
強く望まれていた。特に化粧品業界では、メラニン色素
の生成を有効に抑制し、美白効果を付与した化粧品又は
皮膚外用剤の研究が活発であり、チロシナーゼ活性阻害
剤を配合した製品が次々と開発された。チロシナーゼ活
性阻害剤としては例えば、システイン,ビタミンＣ（三
島豊等、基礎皮膚科学、第２５８ページ、朝倉書店、昭
和４８年）、コウジ酸（日経産業新聞、昭和６３年５月
２４日）、アルブチン（富田健一、第２０回ＦＪセミナ
ー予稿集、第２１ページ、フレグランスジャーナル社、
平成２年３月１４日）、トリコデルマ属に属する微生物
の産生物（特開平２−１４５１８９号公報）が知られて
いる。

【００１１】

【発明が解決しようとする課題】本発明者等は、ラクト
フェリンの抗菌作用の増強及び耐熱性の改良について鋭
意研究を重ねた結果、哺乳類由来のラクトフェリン，そ
れらを化学的に処理した哺乳類由来のアポラクトフェリ
ン，哺乳類由来の金属飽和ラクトフェリン，又はこれら
の任意の混合物からなる群より選択されたラクトフェリ
ンを加水分解して得られるラクトフェリン分解物が、天
然のラクトフェリンよりも抗菌作用にすぐれ、加熱及び
ｐＨ変化に対して安定であることを発見し、本発明を完
成した。

【００１２】また、従来のチロシナーゼ活性阻害剤は、
製品中で不安定であったり、メラニン色素を合成するメ
ラノサイト細胞への作用が強すぎたり、原料の入手が困
難であるため高価であったり、何れも欠点があり、安全
で美白効果にすぐれた化粧品又は皮膚外用剤として満足
できるものでは無かった。

【００１３】本発明者等は、ラクトフェリン、特にその
加水分解物が強いチロシナーゼ活性阻害効果を有するこ
とを発見し、本発明を完成した。

【００１４】発明の目的 本発明の一目的は、ラクトフェリン分解物を有効成分と
する抗菌剤を提供することである。

【００１５】本発明の他の一目的は、ラクトフェリン分
解物を抗菌性有効成分として含有する抗菌性組成物を提
供することである。

【００１６】本発明の更なる他の一目的は、ラクトフェ
リン分解物を用いて、物品を処理する方法を提供するこ
とである。

【００１７】本発明の他の一目的は、ラクトフェリン分
解物を有効成分として含有する、チロシナーゼ活性阻害
剤を提供することである。

【００１８】本発明の更に他の一目的は、人及び動物に
対して安全なラクトフェリン分解物を有効成分とする抗
菌剤兼チロシナーゼ活性阻害剤を提供することである。

【００１９】

【課題を解決するための手段】本発明において、出発物
質として使用するラクトフェリンは、市販のラクトフェ
リン、哺乳類（例えば人、牛、羊、山羊、馬等）の初
乳、移行乳、常乳、末期乳等、又はこれらの乳の処理物
である脱脂乳、ホエー等（以下、これらをまとめて乳等
と記載する）から常法（例えば、イオン交換クロマトグ
ラフィー）により分離したラクトフェリン、それらを塩
酸、クエン酸等により脱鉄したアポラクトフェリン、そ
れらを鉄、銅、亜鉛、マンガン等の金属でキレートさせ
た金属飽和ラクトフェリン、あるいはそれらの混合物で
あってよい（以下、これらをまとめてＬＦと記載す
る）。

【００２０】本発明によるラクトフェリン加水分解物
は、上記ＬＦを酸又は酵素で加水分解することによって
得られる。

【００２１】酸による加水分解は、ＬＦを０．１〜２０
％（重量。以下、特に断りの無い限り同じ）、望ましく
は５〜１５％の濃度で水又は精製水等に溶解し、得られ
た溶液に塩酸、リン酸等の無機酸、又はクエン酸等の有
機酸を添加し、溶液のｐＨを１〜４、望ましくは２〜３
に調整する。かくて得られた溶液は、調整されたｐＨに
応じて、適当な温度で所定時間加熱して加水分解する。
例えば、ｐＨが１〜２に調整された場合には８０〜１３
０℃、望ましくは９０〜１２０℃で、ｐＨ２〜４に調整
された場合には１００〜１３０℃、望ましくは１００〜
１２０℃で、夫々１〜１２０分間、望ましくは５〜６０
分間加熱する。

【００２２】酵素により加水分解する場合には、ＬＦを
０．５〜２０％望ましくは５〜１５％の濃度で水、精製
水等に溶解し、得られた溶液を使用される酵素の至適ｐ
Ｈとして加水分解する。

【００２３】使用される酵素は特に制限はなく、市販の
酵素、例えばモルシンＦ（商標、盛進製薬社製。至適ｐ
Ｈ２．５〜３．０）、豚ペプシン（和光純薬社製。至適
ｐＨ２〜３）スミチームＡＰ（商標、新日本化学社製。
至適ｐＨ３．０）、アマノＭ（商標、アマノ製薬社製。
至適ｐＨ３．０）、アマノＡ（商標、アマノ製薬社製。
至適ｐＨ７．０）、トリプシン（ノボ社製。至適ｐＨ
８．０）等を単用又は任意に併用する。抗菌剤の製造に
おいては、特に、豚ペプシン、スミチームＡＰを使用す
ることにより良好な結果が得られた。上述の酵素のほか
に、例えば市販のエキソペプチダーゼを含有する醤油酵
素（田辺製薬社製）を組み合わせて使用しても良い。

【００２４】使用する酵素の量は、基質にたいして０．
１〜５．０％の範囲、特に．０．５〜３．０％が望まし
い。

【００２５】ＬＦ溶液のｐＨを調整し、所望のプロテア
ーゼを所望の量添加した後、得られた溶液の温度を１５
〜５５℃，望ましくは３０〜５０℃で、３０〜６００分
間，望ましくは６０〜３００分間保持してＬＦを加水分
解する。

【００２６】次いで溶液をそのまま又は中和した後、酵
素を常法により加熱失活する。

【００２７】上記方法によって得られた反応液は、常法
により冷却し、必要に応じて中和、脱塩、脱色し、得ら
れた溶液をそのまま、または濃縮して液状製品とし、あ
るいは濃縮後乾燥して粉末製品とすることができる。

【００２８】上述の加水分解の条件は、厳密なものでは
なく、製造コスト、例えば、温度、時間、酸又は酵素の
種類及び量、反応装置（加圧の有無）等を考慮して適宜
条件を設定できる。

【００２９】以上の方法によって得られたＬＦ分解物
は、種々の分子量を有する分解物の混合物である。

【００３０】加水分解の分解率は、蛋白質の抗原性消失
の観点から、抗菌剤として利用する場合においては、ホ
ルモール滴定による分解度が６〜２０％、特に７〜１５
％の範囲が望ましく、チロシナーゼ活性阻害剤として利
用する場合においては、ホルモール滴定による分解率が
４〜５０％、特に６〜４０％の範囲が望ましい。

【００３１】かくて得られたＬＦ加水分解物は、熱及び
ｐＨの変化に対して極めて安定であり、加水分解されて
いないラクトフェリンに比して、抗菌性に優れており、
またチロシナーゼ活性阻害効果をも有する。

【００３２】従って、本発明によるラクトフェリン分解
物は、そのまま、あるいは賦形剤または他の薬剤と混合
して抗菌剤として用いることができる。

【００３３】この抗菌剤は、医薬品としてのみならず、
食品、飼料、化粧品等のように人及び動物の体内に取り
入れられ、あるいは体表面に適用される製品、その他一
般に細菌の増殖を防止又は抑制することが望まれるあら
ゆる製品に配合して、抗菌性組成物として用いることが
でき、あるいは該抗菌剤又は抗菌性組成物でそれらの製
品を処理することにより、抗菌性処理を施された物品と
して用いることができる。

【００３４】また、本発明によるラクトフェリン分解物
は、そのまま、あるいは賦形剤または他の薬剤と混合し
てチロシナーゼ活性阻害剤として用いることができる。

【００３５】このチロシナーゼ活性阻害剤は、医薬品と
してのみならず、食品、飼料、化粧品、医薬部外品ある
いはそれらの素材（例えば乳化剤、香料、その他一般に
食品、飼料、化粧品、医薬、医薬部外品の素材として許
容されている成分）等のように人および動物の体内に取
り入れられあるいは体表面に適用される製品、その他一
般にチロシナーゼ活性を阻害することが望まれるあらゆ
る製品に配合することによりチロシナーゼ活性阻害性組
成物として用いることができ、あるいは該阻害剤または
阻害性組成物でそれら製品を処理することにより、チロ
シナーゼ活性阻害処理を施された製品として用いること
ができる。

【００３６】作 用 本発明のラクトフェリン加水分解物を有効成分とする抗
菌剤及び抗菌性組成物は、内服薬として用いられた場
合、食品、飼料に添加して摂取された場合には、感染症
の治療又は予防、及び腸内の有害細菌の増殖の抑制に有
効である。

【００３７】本発明のラクトフェリン加水分解物を有効
成分とする抗菌剤、抗菌性組成物、チロシナーゼ活性阻
害剤及びチロシナーゼ活性阻害性組成物は化粧品または
外用剤として、人又は動物の体表面に適用された場合に
は、感染症の治療及び予防のみならず、メラニン色素沈
着の防止に有効である。

【００３８】本発明のラクトフェリン加水分解物は、そ
の抗菌性及びチロシナーゼ活性阻害性とを有するので、
食品，飼料等のように人又は動物が摂取する物品を処理
することによって、それらの物品の品質の劣化（変敗の
防止，抑制、変色の防止，鮮度維等）に有効であり、更
に処理済みの物品の摂取によって感染症の治療又は予
防、及び腸内の有害細菌の増殖の抑制に有効であり、ま
た、人又は動物の体表面に接する物品を処理する（例え
ばそれら物品に混合、含浸、付着、被覆させる）ことに
よって、それらの物品の衛生状態を維持し、かかる物品
を人又は動物の体表面に適用した場合には、感染症の治
療及び予防、メラニン色素沈着の防止に有効である。

【００３９】次に、試験例を示して本発明ＬＦ分解物を
有効成分とする抗菌剤の有用性を例証する。

【００４０】［試験例１］この試験は、酸により分解し
たＬＦ分解物の分解度と抗菌性との関係を調べるために
行われた。

【００４１】１）試験方法 試料の調製 乳等から分離したままの市販のＬＦ（ベルギーのオレオ
フィナ社製）を５％の濃度で精製水に溶解し、１Ｍの塩
酸を添加してｐＨを１，２，３及び４に調整した。ここ
に「乳等から分離したままの」なる文言は、ラクトフェ
リンの分離を行ったのみで、脱鉄、金属飽和等の化学処
理を行っていないことを意味する（以下同じ）。次い
で、各ｐＨの溶液を夫々６０℃から１３０℃までの温度
で５分から６０分間加熱し、種々の分解条件で加水分解
した種々の分解度のＬＦ分解物を調製した。

【００４２】分解度の測定 得られた各ＬＦ分解物の分解度（％）は、ホルモール滴
定法により、各試料中のホルモール態窒素を測定し、そ
れらの値から次式によって算出した。 分解度＝１００×（ホルモール態窒素量／全窒素量） 培地及び前培養液の調製 ［前培養液の調製］大腸菌（Escherichia coli)の保存
スラントから１白金耳を採取し、標準寒天培地（日水製
薬社製）に塗沫して３５℃で１６時間好気培養し、標準
寒天培地の表面に育成したコロニーを白金耳でかき取
り、滅菌生理食塩水に懸濁し、分光光度計（日立製作所
社製）で測定した濁度（Ｏ．Ｄ．；６６０ｎｍ）を１．
０に調整し、前培養液を調整した。

【００４３】［基本培地の調製］バクトカジトン（ディ
フコ社製）を１％の濃度で精製水に溶解させ、１Ｍ水酸
化ナトリウムでｐＨを７．０に調整し、１１５℃で１５
分間滅菌して、基本培地（液体培地）を調整した。

【００４４】［試験培地及び対照培地の調整］前記と
同一の方法で調製した種々の分解度のＬＦ分解物溶液及
び未分解のＬＦ溶液を、滅菌フィルター（アドバンテッ
ク社製）で除菌し、しかる後２５ｐｐｍ，５０ｐｐｍ，
１００ｐｐｍ，２５０ｐｐｍ，５００ｐｐｍ及び１００
０ｐｐｍの濃度で夫々基本培地に添加して、試験培地及
び対照培地を調製した。

【００４５】［抗菌効果試験］上記各試験培地及び各対
照培地に上記前培養液を１％の濃度で接種し、３５℃で
１６時間好気培養し、培養液の濁度を上記と同様の方法
で測定し、次式から大腸菌の増殖阻止率を算出した。 増殖阻止率（％）＝１００−（Ａ／Ｂ×１００） ［ここで、Ａは試験培養液の濁度差（培養１６時間後の
試験培養液の濁度と培養前の試験培養液の濁度との差）
を、Ｂは対照培養液の濁度差（培養１６時間後の対照培
養液の濁度と培養前の対照培養液の濁度との差）をそれ
ぞれ示す。］ ２）試験結果 この試験の結果を表１に示した。

【００４６】

【表１】 未分解のＬＦ（対照）は２５０ｐｐｍの添加量から抗菌
作用を示し始めたものの、１０００ｐｐｍの添加量でも
大腸菌の増殖を完全には阻止することができなかった
（弱い抗菌性）。これに対して、分解度が１０％のＬＦ
分解物は２５ｐｐｍの添加量から強い抗菌作用を示し、
１００ｐｐｍ以上の添加量で完全に大腸菌の増殖を阻止
した。表１の結果から、ＬＦを酸性側のｐＨで加熱して
加水分解して得られたＬＦ分解物のうち、分解度が６〜
２０％、特に７〜１５％のものは、大腸菌にたいして未
分解のＬＦよりも顕著に強い抗菌活性を有することが認
められた。

【００４７】［試験例２］この試験は、酵素によるＬＦ
の分解条件を調べるために行われた。

【００４８】１）試験方法 乳等から分離したままの、市販のＬＦ（ベルギーのオレ
オフィナ社製）を５％の濃度で精製水に溶解し、市販の
モルシンＦ，豚ペプシン、スミチームＡＰ、アマノＭ又
はトリプシンを、基質（ＬＦ）にたいして０．１〜６％
添加し、ｐＨをそれらの酵素の至適ｐＨに調整し、３７
℃に保持した。３０〜３６０分後、ｐＨを７に調整し、
８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、得られたＬ
Ｆ分解物の溶液を凍結乾燥して、種々のＬＦ分解物（１
種の酵素について２試料ずつ）を得た。得られたＬＦ分
解物の分解度（％）を、試験例１と同一の方法で測定、
算出した。

【００４９】２）試験結果 この試験の結果は表２に示すとおりであった。

【００５０】

【表２】 モルシンＦ，豚ペプシン、スミチームＡＰおよびアマノ
Ｍ等の酸性プロテアーゼを用いた分解物の分解度は５．
９〜１４．７％であった。また、中性プロテアーゼであ
るトリプシンを用いたＬＦ分解物の分解度は１０．３〜
１２．５％であった。

【００５１】［試験例３］この試験は、有機酸により分
解したＬＦ分解物の抗菌性を調べるために行われた。

【００５２】実施例２と同一の方法（クエン酸により分
解）で製造した分解度１２％の抗菌性ＬＦ分解物及び未
分解のＬＦとを用いて、試験例１と同一の方法により、
大腸菌にたいする抗菌性を試験した。

【００５３】その結果は表３に示したとおりであった。

【００５４】

【表３】 以上の試験例より、本発明の抗菌性ＬＦ分解物の製造に
おけるＬＦの分解は、無機酸、有機酸及び酵素の何れで
も良いことが証明された。

【００５５】［試験例４］この試験は、本発明により抗
菌性ＬＦ分解物を用いた物品の処理方法の抗菌効果を確
認するために行われた。

【００５６】市販の一次加工野菜（カット野菜）を、１
００ｇずつ３群に分け、実施例１と同一の方法により製
造した抗菌性ＬＦ分解物（無機酸により分解、分解度９
％）の１％溶液にそれぞれ３０秒間浸漬し、充分に水切
りし、５℃にて保存し、生菌数の変化を常法により経時
的に測定した。

【００５７】尚、対照として、未分解ＬＦを同一濃度で
溶解した溶液、及び何も添加しない水についても、上記
と同一の試験を行った。

【００５８】この試験結果は表４に示すとおりであっ
た。

【００５９】

【表４】 この試験によって、本発明の抗菌性ＬＦ分解物を物品の
処理に用いた場合には、未分解のＬＦに比して顕著に高
い抗菌作用を有することが例証された ［試験例５］この試験は、本発明による抗菌性ＬＦ分解
物を有効成分として食品に配合した場合の、配合物の抗
菌効果を例証するために行われた。

【００６０】生乳を６５℃で３０分間加熱して１０ｍｌ
ずつ試験管に分注した。これらに、分解度９％の抗菌性
ＬＦ分解物（実施例１と同一の方法で製造した）、又は
未分解のＬＦを各々０．１％の濃度で添加し、均一に混
合し、密封した試料（試料１及び試料２）及び何も添加
していないことを除いては同様の試料（対照）を調製し
た。各試料を２５℃で保存し、凝固するまでの日数を測
定した。

【００６１】この試験の結果、試料１は９日で凝固した
のに対して、試料２及び対照は、それぞれ４日及び２日
で凝固し、本発明の抗菌性ＬＦ分解物は、未分解のＬＦ
に比べて牛乳の凝固を著しく延長することが判明した。
また、本発明の抗菌性ＬＦ分解物を添加した直後の牛乳
と、添加していない牛乳とについて官能試験を行った
所、それらの間には、風味、外観等に何等の相違もない
ことが確認された。

【００６２】［試験例６］この試験は酵素により分解し
たＬＦ分解物の抗菌性を調べるために行われた。 １）試験方法 試験例２と同一の方法で調製した種々のＬＦ分解物溶液
（種々の酵素で分解）及び未分解のＬＦ溶液（対照）
を、滅菌フィルター（アドバンテック社製）で除菌し、
基本培地（試験例１のものに同じ）に異なった濃度（５
０，１００，２５０，５００及び１０００ｐｐｍ）で添
加した試験培地及び対照培地を調製した。上記以外は試
験例１と同一の方法で、抗菌活性を試験した。

【００６３】２）試験結果 この試験の結果を表５に示した。

【００６４】

【表５】 未分解のＬＦ（対照）は、２５０ｐｐｍから弱い抗菌作
用を示したものの、１０００ｐｐｍの添加量でも大腸菌
の増殖を完全に阻止することはできなかった。モルシン
Ｆ、豚ペプシン、スミチームＡＰ及びアマノＭ（これら
は全て酸性プロテアーゼである）で分解度１０％以上に
分解した分解物は１００ｐｐｍの添加量でも強い抗菌作
用を示し、２５０ｐｐｍ以上の添加量で完全に大腸菌の
増殖を阻止した。一方、トリプシン（中性プロテアー
ゼ）による分解物は１０００ｐｐｍの添加量でも全く抗
菌作用を示さなかった。

【００６５】表５の結果から、ＬＦを酸性プロテアーゼ
により分解して得られるＬＦ分解物のうち、分解度が１
０％以上のものは未分解のＬＦよりも大腸菌にたいする
抗菌活性が強いことが確認された。

【００６６】［試験例７］この試験の目的は、金属飽和
ＬＦの分解物を配合した配合物における抗菌活性を調べ
ることである。

【００６７】有効成分として実施例５と同一の方法で製
造した抗菌性ＬＦ分解物（鉄飽和ＬＦ分解物）を用いた
こと、及び市販の牛乳を用いたこと以外は試験例５と全
く同様の試験を行った。

【００６８】即ち、市販の牛乳を１０ｍｌずつ試験管に
分注し、これらに上記抗菌性ＬＦ分解物（鉄飽和ＬＦ分
解物）または未分解のＬＦ（対照）を各々１ｍｇ／ｍｌ
の濃度で添加し、均一に混合し、密封した試験試料、及
び何も添加していない対照試料を、各々３試料ずつ調製
した。これらの試料を２５℃で保存し、外観の変化を肉
眼で観察した。

【００６９】この試験の結果は表６に示すとおりであっ
た。

【００７０】

【表６】 本発明の抗菌性ＬＦ分解物を添加した牛乳は、３試料と
も、試験開始１４日後まで全く変化を認めなかった。

【００７１】これに対して、未分解のＬＦを添加した牛
乳は、試験開始１０日までは変化がなかったが、１４日
目には３試料とも凝固した。また、対照群では１０日目
で２試料が、１４日目で全試料が凝固した。

【００７２】この結果から、本発明の抗菌性ＬＦ分解物
は、未分解のＬＦよりも優れた抗菌性を有することが立
証された。

【００７３】［試験例８］この試験の目的は、鉄分の存
在下におけるＬＦ分解物の抗菌活性を調べることであ
る。

【００７４】試験例６で用いた幾つかの試料、即ち試料
Ｎｏ．１，Ｎｏ．２，Ｎｏ．５，Ｎｏ．６及び未分解の
ＬＦ（対照）について、培地に硫酸第１鉄を０．０１ｍ
Ｍ添加した以外は、試験例６と同一の方法により抗菌活
性を試験した。

【００７５】この試験結果は表７に示すとおりであっ
た。

【００７６】

【表７】 未分解ＬＦは、０．０１ｍＭの硫酸第１鉄の存在下で、
増殖防止効果を失ったが、ＬＦの酸性プロテアーゼによ
る本発明の分解物は、何れも０．０１ｍＭの硫酸第一鉄
の存在下においても抗菌活性を維持していた。

【００７７】［試験例９］この試験は、ＬＦの酵素によ
る加水分解物の各種微生物に対する抗菌効果を調べるた
めに行われた。

【００７８】（１）試料の調製 試験例６において最も高い増殖阻止率を示した試料４を
試験例６と同一の方法により調製した。尚、使用前にフ
ィルター（０．４５μｍマイレックス・フィルター）で
濾過して除菌した。

【００７９】（２）試験方法 表８及び表９に示した各種微生物を、１％バクトペプト
ン（ディフコ・ラボラトリー社製）からなるペプトン培
地２ｍｌ，及び１％バクトペプトン（ディフコ・ラボラ
トリー社製）、１％グルコース及び０．０５％酵母エキ
ストラクトからなるＰＹＧ培地２ｍｌで１６〜２０時間
培養した。各培地には０〜１６００μｇ／ｍｌの各種割
合でＬＦの酵素加水分解物を添加した。対数期の各種微
生物の標準菌株を１０⁶／ｍｌの菌濃度で各培地に接種
し、表の注に記載した菌株以外は３７℃で培養した。各
種微生物の成育状態を６６０ｎｍの吸光度を測定してモ
ニタした。各種微生物の成育を完全に阻止したＬＦの酵
素加水分解物の最小濃度を最小育成阻止濃度（ＭＩＣ。
μｇ／ｍｌ）とした。

【００８０】（３）試験結果 この試験の結果は、表８及び表９に示すとおりであっ
た。

【００８１】

【表８】

【表９】 表８及び表９から明らかなように、ＬＦの酵素加水分解
物は、好気性及び嫌気性の細菌及び酵母を含む多種類の
グラム陽性菌、グラム陰性菌、及び酵母に対して９４０
μｇ／ｍｌ以下の低濃度で抗菌作用を示した。完全に微
生物の成育を阻止するＬＦの酵素加水分解物の濃度は、
培地により異なっていた。試験した微生物の中でＰｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ ＩＦＯ−
１４１６０２及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃ
ａｌｉｓ ＡＴＣＣ−Ｅ１９４３３は、この試験条件で
ＬＦの酵素加水分解物に耐性を示した。

【００８２】次に、実施例を示して、本発明による抗菌
剤を更に詳述する。

【００８３】

【実施例】［実施例１］乳等から分離したままの市販の
ＬＦ（ベルギーのオレオフィナ社製）５０ｇを精製水９
５０ｇに溶解し、得られた溶液に１Ｍの塩酸を添加して
ｐＨを２に調整し、１２０℃で１５分間加熱し、冷却し
て、ＬＦ分解物を５％の濃度で含有する液状の抗菌性分
解物１０００ｇを得た。

【００８４】このＬＦ分解物の分解度は９％であった
（試験例１と同一の方法により測定）。

【００８５】［実施例２］乳糖から分離したままの市販
のＬＦ（ベルギーのオレオフィナ社製）１５０ｇを精製
水８５０ｇに溶解し、得られた溶液に１Ｍのクエン酸を
添加してｐＨを３に調整し、１３０℃で６０分間加熱し
た。加熱後、溶液を冷却し、１Ｍの水酸化ナトリウムを
添加してｐＨを７に調整した後、濾過し、脱塩し、凍結
乾燥して、粉末状の抗菌性ＬＦ分解物約４５ｇを得た。

【００８６】この抗菌性ＬＦ分解物の分解度は１２％で
あった（試験例１と同一の方法により測定）。

【００８７】［実施例３］乳等から分離したままの市販
のＬＦ（ベルギーのオレオフィナ社製）２０ｇを精製水
１８０ｇに溶解し、これに硫酸第一鉄七水和物２００ｍ
ｇを添加し、２５℃で１２時間反応させたのち、限外濾
過モジュールＳＥＰ−１０１３（商標、旭化成社製）で
未反応の鉄を除去し、凍結乾燥し、鉄飽和ＬＦ約１９ｇ
を得た。得られた鉄飽和ＬＦ１５ｇを精製水２８５ｇに
溶解し、２Ｍの塩酸でｐＨを１．０に調整し、９０℃で
１５分間加熱し、のち冷却して、５％の濃度の液状の抗
菌性ＬＦ分解物約３００ｇを得た。

【００８８】得られた抗菌性ＬＦ分解物の分解度は７％
であった（試験例１と同一の方法で測定）。

【００８９】［実施例４］カルボキシメチル基のイオン
交換基を有するセパビーズＦＰ−ＣＭ１３（商標、三菱
化成社製）５００ｍｌを、内径１０ｃｍのカラムに充填
し、１０％食塩水２ｌを通液し、のち水洗し、Ｎａ型の
イオン交換体を調製した。次いで、山羊から得たチーズ
ホエー（ｐＨ６．５）６０ｌを４℃の温度及び４ｌ／時
の流速で上記カラムに通液した。のちカラムを水洗し、
該チーズホエーの非吸着成分を除去し、１０％の食塩水
５ｌを５ｌ／時の流速で通液し、イオン交換体に吸着し
た該チーズホエーの成分を脱離し、溶出液５ｌを得た。
この溶出液を限外濾過モジュールＳＥＰ−１０１３（商
標、旭化成社製）を用いて濃縮し、水を添加してダイア
フィルトレーションを行って食塩を除去し、１％の山羊
ＬＦを含有する液約２００ｍｌを得た。この液に１Ｍの
塩酸を添加してｐＨを２．０に調整し、１２０℃の温度
で２０分間加熱し、のち冷却して１％の液状抗菌性ＬＦ
分解物約２００ｇを得た。 得られた抗菌性ＬＦ分解物
の分解度は１０％であった（試験例１と同一の方法によ
り測定）。

【００９０】［実施例５］乳等から分離したままの市販
のＬＦ（ベルギーのオレオフィナ社製）１ｋｇを精製水
９ｋｇに溶解し、硫酸第一鉄七水和物１０ｇを添加し、
２５℃で１２時間反応させ、のち限外濾過モジュールＳ
ＥＰ−１０１３（商標、旭化成社製）で未反応の鉄を除
去し、０．５規定の塩酸を添加してｐＨを３．５に調整
し、市販のモルシンＦ（商標、盛進製薬社製）１０ｇ
（４２，０００単位／１ｇ蛋白質）を添加して均一に混
合し、３７℃に１８０分間保持し、中和し、８５℃で１
０分間加熱して酵素を失活させ、のち冷却し、液状の抗
菌性ＬＦ分解物約１０ｋｇを得た。

【００９１】得られた抗菌性ＬＦ分解物の分解度は１
３．５％であった（試験例１と同一の方法で測定）。

【００９２】［実施例６］乳等から分離したままの市販
のＬＦ（ベルギーのオレオフィナ社製）１ｋｇを精製水
９ｋｇに溶解し、２Ｍのクエン酸を添加してｐＨを２．
５に調整し、市販の豚ペプシン（１：１０，０００。和
光純薬工業社製）３０ｇを添加して均一に混合し、３７
℃に１８０分間保持し、８５℃で１０分間加熱して酵素
を失活させ、のち冷却し、常法により濃縮し、液状の抗
菌性ＬＦ分解約１０ｋｇを得た。

【００９３】得られた抗菌性ＬＦ分解物の分解度は１
１．３％であった（試験例１と同一の方法で測定）。

【００９４】［実施例７］脱脂山羊乳５０ｌに、０．０
０３Ｍの塩化第２鉄を含む０．１Ｍのクエン酸ナトリウ
ム溶液５ｌを添加し、均一に混合した。次いで、ＣＭ−
セファデックスＣ−５０（Ｈ⁺型。ファルマシア社製）
約５ｌを加えて約１時間撹拌した。撹拌後、樹脂を十分
に洗浄して未吸着の山羊乳成分を除去したのち、０．０
５Ｍトリスー塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）に懸濁し、カラ
ム（２０×５０ｃｍ）に充填し、同一の緩衝液で樹脂を
充分に洗浄した。次に０．０５Ｍトリスー塩酸緩衝液
中、０〜２Ｍ塩化ナトリウムを含むグラジェントで溶出
させて、ＬＦ画分約８００ｍｌを得た。このＬＦ画分を
限外濾過膜ＰＭ−１０（商標、アミコン社製）を用いて
約１５０ｍｌに濃縮し、０．５Ｍ塩化ナトリウムを含む
０．０５Ｍトリスー酢酸緩衝液（ｐＨ８．２）で透析し
た。この透析液を同一の緩衝液で平衡化した銅キレーテ
ィング・セファロース６Ｂ（商標、ファルマシア社製）
カラム（１０×３０ｃｍ）に通液し、ＬＦを吸着させ
た。このカラムを同じ緩衝液で洗浄し、０．５Ｍ塩化ナ
トリウムを含むｐＨ４．０の酢酸緩衝液を通液してＬＦ
を溶出し、のち純水にたいして透析し、凍結乾燥して約
２ｇの粉末状ＬＦを得た。

【００９５】この粉末状ＬＦ２ｇを精製水１７ｇに溶解
し、１Ｍ乳酸を添加してｐＨを３．５に調整し、市販の
スミチームＡＰ（商標、新日本化学工業社製）６０ｍｇ
（５０，０００単位／１ｇ蛋白質）を添加して均一に混
合し、５０℃で１８０分間分解し、中和し、８５℃で１
０分間加熱して、酵素を失活させ、冷却し、のち常法に
より濃縮し、凍結乾燥して粉末状の抗菌性ＬＦ分解物約
２ｇを得た。

【００９６】得られた抗菌性ＬＦ分解物の分解度は１
３．８％であった（試験例１と同様の方法により測
定）。

【００９７】次に試験例を示して本発明のＬＦ分解物を
有効成分とするチロシナーゼ活性阻害剤の有用性を例証
する。

【００９８】［試験例１０］この試験は、ＬＦの酸によ
り加水分解物のチロシナーゼ活性阻害効果を調べるため
に行われた。

【００９９】（１）試料の調製 市販のＬＦ（オレオフィナ社製）を５％の濃度で精製水
に溶解し、１Ｍ塩酸を添加してｐＨを１，２，３及び４
に調整した４種類の溶液を調製した。各溶液をそれぞれ
６０℃から１３０℃までの温度で５分から６０分間加熱
して加水分解を行い、次いで１Ｍ苛性ソーダ溶液でｐＨ
を７に調整し、凍結乾燥して、分解率が４〜３０％の各
種ＬＦ分解物試料を調製した。

【０１００】（２）試験方法 １）分解率の測定 ＬＦ分解物の分解率（％）は、ホルモール滴定法により
各試料中のホルモール態窒素量を測定し、各試料中の全
窒素量に対する百分率を次式から算出した。

【０１０１】分解率（％）＝１００×（Ａ／Ｂ） ここでＡはホルモール態窒素量、Ｂは全窒素量を示す。

【０１０２】２）チロシナーゼ活性阻害効果の測定 ａ）各種溶液の調製 基質溶液の調製 試薬特級のＬ−チロシン（和光純薬工業社製）を０．１
Ｍリン酸緩衝液に０．０４５％（Ｗ／Ｖ）の濃度で溶解
した。

【０１０３】酵素溶液の調製 マッシュルーム由来のチロシナーゼ（シグマ社製。３，
０００単位／ｍｇ）を、０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
７．０に０．１％（Ｗ／Ｖ））の濃度で溶解した。

【０１０４】銅イオン溶液の調製 試薬特級の硫酸銅（和光純薬工業社製）を精製水に１％
（Ｗ／Ｖ）の濃度で溶解した。

【０１０５】試料溶液の調製 前記（１）において調製した各試料を表１０に示す各濃
度の２倍の濃度で０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）
に溶解した。

【０１０６】ｂ）酵素反応 予め３７℃に加温した基質溶液０．９ｍｌ，試料液１．
０ｍｌ，銅イオン溶液０．０２ｍｌを試験管に採取し、
同温度に加温した酵素溶液０．０８ｍｌを添加し（全量
２．０ｍｌ），３７℃で３分間反応させた。次いで３０
％酢酸溶液２ｍｌを添加して反応を停止させ、分光光度
計で波長６４０ｎｍでの吸光度を測定した（この吸光値
をＢとする）。対照として試料溶液の代わりに０．１Ｍ
リン酸緩衝液１．０ｍｌを添加したことを除いて上記と
同様に酵素反応させ、上記と同様に吸光度を測定した
（この吸光値をＡとする）。尚、試料溶液が白濁してい
る場合は、酵素溶液の代わりに０．１Ｍリン酸緩衝液
０．０８ｍｌを添加して同様に吸光度を測定し（この吸
光値をＣとする）、反応液の濁り部分に由来する吸光度
を除去した。測定された各吸光値からチロシナーゼ活性
阻害率（％）を次式により算出した。

【０１０７】 阻害率（％）＝１００［１−（Ｂ−Ｃ）／Ａ］ （３）試験結果 この試験の結果は表１０に示す通りであった。分解率が
４％の試料１は０．３％の添加で約１０％のチロシナー
ゼ活性阻害効果を示した。阻害効果は添加量が増大する
に連れて向上し、１％の添加で約３０％、２％の添加で
約５０％の阻害率を示した。

【０１０８】

【表１０】 一方、分解率が６〜３０％の試料２〜８は、何れも０．
０５％の添加ですでに約３０％のチロシナーゼ活性阻害
効果を示した。阻害効果は添加量が増大するに連れて向
上し、０．１％の添加で約６０％、０．３％の添加で約
８０％、０．５％の添加で１００％の阻害率を示した。

【０１０９】尚、アポラクトフェリン、亜鉛、銅、鉄等
の金属をキレートさせた金属ラクトフェリンの酸による
加水分解物でも同様のチロシナーゼ活性阻害効果が得ら
れた。

【０１１０】［試験例１１］この試験は、ＬＦの酵素に
よる加水分解物のチロシナーゼ活性阻害効果を調べるた
めに行われた。

【０１１１】（１）試料の調製 市販のＬＦ（オレオフィナ社製）を５％の濃度で精製水
に溶解し、１Ｍ塩酸又は１Ｍ苛性ソーダでｐＨを酵素の
至適ｐＨ付近に調整し、前記市販の豚ペプシン、アマノ
Ａ，又はペプチダーゼを含有する市販の醤油酵素（田辺
製薬社製）を組み合わせ、ＬＦ溶液に対して０．１〜６
％添加し、３７℃に保持した。１０分〜２４時間の異な
った時間にわたり反応させた後、ｐＨを７に調整し、８
０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、凍結乾燥し、
分解率が６〜５０％のＬＦ加水分解物を調製した。

【０１１２】（２）試験方法 分解率及びチロシナーゼ活性阻害効果の測定は、試験例
１０と同一の方法で行った。

【０１１３】（３）試験結果 酵素によるＬＦ加水分解物のチロシナーゼ活性阻害効果
を表１１に示した。

【０１１４】

【表１１】 分解率が６〜４０％の試料９〜１４は、いずれも０．０
５％の添加量ですでに約３０％のチロシナーゼ活性阻害
効果を示した。阻害効果は添加量が増大するに連れて向
上し、０．１％の添加で約６０％、０．３％の添加で約
８０％、０．５％の添加で１００％の阻害率を示した。

【０１１５】一方、分解率が４５〜５０％の試料１５、
１６は０．３％の添加で約１０％のチロシナーゼ活性阻
害効果を示した。阻害効果は添加量が増大するに連れて
向上し、１％の添加で約３０％、２％の添加で約５０％
の阻害率を示した。

【０１１６】尚、アポラクトフェリン、及び亜鉛、銅、
鉄等の金属をキレートさせた金属ラクトフェリンの酵素
により加水分解物でも同様のチロシナーゼ活性阻害効果
が得られた。

【０１１７】次に、本発明によるチロシナーゼ活性阻害
剤の実施例を示す。

【０１１８】［実施例８］市販のＬＦ（オレオフィナ社
製）８０ｇを精製水１０００ｍｇに溶解した後、１Ｍの
塩酸を添加してｐＨを２に調整した。次いで該溶液を１
１５℃の温度で１０分間加熱した後、１Ｍの苛性ソーダ
溶液でｐＨを７に調整し、凍結乾燥し、試験例１０と同
一の方法で測定した分解率が１５％のＬＦ加水分解物７
７ｇを得た。このＬＦ加水分解物５０ｇ、グリシン（和
光純薬工業社製）９００ｇ及びリゾチーム（和光純薬工
業社製）５０ｇを均一に混合し、食品の鮮度保持用のチ
ロシナーゼ活性阻害剤約１０００ｇを得た。

【０１１９】得られた食品の鮮度保持用のチロシナーゼ
活性阻害剤を２０％の濃度で水に溶解し、チロシナーゼ
活性阻害剤を試験例１０と同一の方法で測定した結果、
１００％であった。

【０１２０】［実施例９］市販のＬＦ（オレオフィナ社
製）２７０ｇを精製水６３００ｍｌに溶解した後、１０
％クエン酸水溶液を添加して、そのｐＨを２．５に調整
し、室温において１時間反応させた。この反応生成物を
限外濾過し、そのケーキを凍結乾燥してアポラクトフェ
リン約２６０ｇを得た。このアポラクトフェリン６０ｇ
を１０００ｍｌに溶解した後、２Ｍのリン酸溶液を添加
してｐＨを３に調整した。次いで該溶液を１２１℃の温
度で２５分間加熱し、１Ｍの苛性ソーダでｐＨを７に調
整し、凍結乾燥し、試験例１０と同一の方法により測定
した分解率が２３％のＬＦ加水分解物５５ｇを得た。こ
のＬＦ加水分解物２０ｇ，プロピレングリコール（和光
純薬工業社製）４００ｇ、オレイルアルコール（和光純
薬工業社製）４ｇ、エタノール（和光純薬工業社製）２
００ｇ及び精製水３３７６ｇを均一に混合し、化粧品用
チロシナーゼ加水阻害剤約４０００ｇを得た。

【０１２１】得られた化粧品用チロシナーゼ活性阻害剤
のチロシナーゼ活性阻害率を試験例１０と同一の方法で
測定した結果、見掛けの阻害率は７５％であったが、濃
度換算を行った実際の阻害率は１００％であった。

【０１２２】［実施例１０］市販のＬＦ（オレオフィナ
社製）１００ｇを１０００ｍｌの精製水に溶解し、１Ｍ
の塩酸を添加してｐＨを２に調整した後３７℃に保持
し、市販の豚ペプシン（和光純薬工業社製）を５ｇ添加
し６０分間反応させた。次いで、８０℃で１０分間加熱
して酵素を失活させ、凍結乾燥し、試験例１０と同一の
方法により測定した分解率が１２％のＬＦ加水分解物約
９５ｇを得た。このＬＦ加水分解物を３０ｇ，プロピレ
ングリコール（和光純薬工業社製）２００ｇ、オレイル
アルコール（和光純薬工業社製）２ｇ、エタノール（和
光純薬工業社製）１００ｇ及び精製水１６６８ｇを均一
に混合し、化粧品用チロシナーゼ活性阻害剤約２０００
ｇを得た。

【０１２３】得られた化粧品用チロシナーゼ活性阻害剤
のチロシナーゼ活性阻害率を試験例１０と同一の方法で
測定した結果、１００％であった。

【０１２４】［実施例１１］市販のＬＦ（オレオフィナ
社製）１５０ｇを精製水１０００ｍｌに溶解し、１Ｍの
苛性ソーダを添加してｐＨを６に調整した後、６０℃で
１０分間加熱殺菌した。この溶液を５０℃に冷却保持
し、市販のトリプシン（ノボ社製）を１５ｇ及びペプチ
ダーゼを含有する市販の醤油酵素（田辺製薬社製）３０
ｇを添加し５時間反応させた。次いで、８０℃で１０分
間加熱して酵素を失活させ、凍結乾燥し、試験例１０と
同一の方法で測定した分解率が３８％のＬＦ加水分解物
約１４５ｇを得た。このＬＦ加水分解物２７ｇ、ヒアル
ロン酸ナトリウム（和光純薬工業社製）１ｇ、グリセリ
ン（和光純薬工業社製）１０ｇ及び精製水９６２ｇを均
一に混合し、化粧品用チロシナーゼ活性阻害剤約１００
０ｇを得た。

【０１２５】得られた化粧品用チロシナーゼ活性阻害剤
のチロシナーゼ活性阻害率を試験例１０と同一の方法で
測定した結果、１００％であった。

【０１２６】［実施例１２］市販のＬＦ（オレオフィナ
社製）９０ｇを精製水２１００ｍｌに溶解し、これを
２．６ｍＭ硫酸鉄水溶液７５５ｍｌと室温において２４
時間反応させた。この反応生成物を限外濾過し、そのケ
ーキを凍結乾燥してラクトフェリン鉄約７８ｇを得た。
このラクトフェリン鉄４０ｇを、精製水５００ｍｌに溶
解し、１Ｍの塩酸を添加してｐＨを３に調整した後３０
℃に保持し、市販のスミチームＡＰ（新日本化学社製）
を５ｇ添加し、３時間反応させた。次いで、８０℃で１
０分間加熱して酵素を失活させ、凍結乾燥し、試験例１
０と同一の方法により測定した分解率が１８％のＬＦ加
水分解物約３５ｇを得た。このＬＦ加水分解物を３０
ｇ、グリシン（和光純薬工業社製）４５０ｇ及びリゾチ
ーム（和光純薬工業社製）２０ｇを均一に混合し、食品
の鮮度保持用のチロシナーゼ活性阻害剤約５００ｇを得
た。

【０１２７】得られた食品の鮮度保持用のチロシナーゼ
活性阻害剤を２０％の濃度で水に溶解し、チロシナーゼ
活性阻害率を試験例１０と同一の方法で測定した結果、
１００％であった。

【０１２８】

【発明の効果】本発明によって奏せられる効果は、次の
とおりである。

【０１２９】１）本発明のＬＦ分解物を有効成分とする
抗菌剤，抗菌性組成物，チロシナーゼ活性阻害剤，チロ
シナーゼ活性阻害性組成物は、乳等に由来する天然の抗
菌性物質の分解物であるから、化学的に合成した抗菌性
物質に比して安全である。

【０１３０】２）本発明のＬＦ分解物を有効成分とする
抗菌剤，抗菌性組成物は、天然のＬＦ（未分解の）より
も顕著に優れた抗菌性を有している。

【０１３１】３）本発明のＬＦ分解物を有効成分とする
抗菌剤，抗菌性組成物，チロシナーゼ活性阻害剤，チロ
シナーゼ活性阻害性組成物は、液状又は粉末状の何れの
形態でも使用でき用途が広範である。

【０１３２】４）本発明のＬＦ加水分解物を有効成分と
する抗菌剤，抗菌性組成物，チロシナーゼ活性阻害剤，
チロシナーゼ活性阻害性組成物は、各種製品に添加して
も安定であり、加熱に対しても安定であるので、用途が
広範である。

【０１３３】５）本発明のＬＦ加水分解物を有効成分と
する抗菌剤，抗菌性組成物，チロシナーゼ活性阻害剤，
チロシナーゼ活性阻害性組成物を人、動物の食品，飼料
等に適用（例えば食品，飼料の洗浄、食品，飼料に添
加，配合，含浸）することにより、それらの品質の維持
（変色，変敗の防止）のみならず、それらを接種した場
合には、上述の抗菌剤に関して述べた効果をも有し、ま
た、人の皮膚に接触する物品（例えば化粧用脱脂綿，ウ
ェットティッシュー等）に適用（混入，含浸）すれば、
それらの物品の衛生状態の維持と、それらを用いた場合
には美白効果が得られる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 37/14 ＡＥＤ 8314−4Ｃ 37/64 8314−4Ｃ (72)発明者 川瀬 興三 埼玉県浦和市白鍬761−１ (72)発明者 田村 吉隆 神奈川県横浜市港北区富士塚１−４−５ (72)発明者 高瀬 光徳 埼玉県大宮市南中丸138−10 (72)発明者 山内 恒治 神奈川県鎌倉市玉縄４−２−２ ガーデン ハイツ鎌倉玉縄405 (72)発明者 齋藤 仁志 神奈川県川崎市麻生区百合ケ丘２−７−４ 森永百合ケ丘社宅301 (72)発明者 阿部 広明 神奈川県横須賀市浦郷町３−43

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 哺乳類のラクトフェリン，哺乳類のア
   ポラクトフェリン，哺乳類の金属飽和ラクトフェリン，
   及びこれらの任意の混合物からなる群より選択されたラ
   クトフェリンを加水分解して得られるラクトフェリン分
   解物を有効成分とする抗菌剤。
2. 【請求項２】 哺乳類のラクトフェリン，哺乳類のア
   ポラクトフェリン，哺乳類の金属飽和ラクトフェリン，
   及びこれらの任意の混合物からなる群より選択されたラ
   クトフェリンを加水分解して得られるラクトフェリン分
   解物を有効成分として含有する抗菌性組成物。
3. 【請求項３】 哺乳類のラクトフェリン，哺乳類のア
   ポラクトフェリン，哺乳類の金属飽和ラクトフェリン，
   及びこれらの任意の混合物からなる群より選択されたラ
   クトフェリンを加水分解して得られるラクトフェリン分
   解物を有効成分として含有するチロシナーゼ活性阻害
   剤。
4. 【請求項４】 ラクトフェリン分解物が少なくとも
   ０．０５％（重量）の濃度で含有されている請求項４記
   載のチロシナーゼ活性阻害剤。
5. 【請求項５】 ラクトフェリン分解物の分解率が少な
   くとも６％（重量）である請求項４又は５記載のチロシ
   ナーゼ活性阻害剤。
6. 【請求項６】 哺乳類のラクトフェリン，哺乳類のア
   ポラクトフェリン，哺乳類の金属飽和ラクトフェリン，
   及びこれらの任意の混合物からなる群より選択されたラ
   クトフェリンを加水分解して得られるラクトフェリン分
   解物を用いて、物品を処理する方法。