JPH0533988B2 - - Google Patents
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- JPH0533988B2 JPH0533988B2 JP59090799A JP9079984A JPH0533988B2 JP H0533988 B2 JPH0533988 B2 JP H0533988B2 JP 59090799 A JP59090799 A JP 59090799A JP 9079984 A JP9079984 A JP 9079984A JP H0533988 B2 JPH0533988 B2 JP H0533988B2
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- Japan
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- reaction
- hydrolysis
- pufa
- oil
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
〔産業上の利用分野〕
本発明は長鎖高度不飽和脂肪酸含有油脂の製造
方法に関する。 なお本発明において長鎖高度不飽和脂肪酸とは
１分子当り20個以上の炭素原子を有し、３個以上
の二重結合を有する脂肪酸を意味し、以下PUFA
と略記する。 〔従来の技術〕 PUFAは、最近人間に対する生理活性と薬理効
果が注目され、その利用について活発な検討がな
されるようになつた。 しかしながらPUFAは沸点が高いため、これを
回収するためには高真空、高温を必要とし、エネ
ルギーコストがかさむほか、高温にさらされるた
め重合などによる蒸留残査が増加し、収率が低下
するとともに二重結合の異性化が起り、好ましく
ない異性体が多量に生成するという問題点が指摘
されていた。 このため、油脂からのPUFAの回収にリパーゼ
を用いて、より温和な条件下で反応を進める方法
が有利な方法として知られている。 〔考案が解決しようとする問題点〕 しかるに、リパーゼは、油脂の加水分解反応だ
けでなく、その逆反応であるエステル合成反応も
触媒する。（Y.Tsujisaka et al，Biochim.
Biophys.Acta 489，415（1977）） 従つて単にリパーゼを用いて加水分解反応を進
めただけでは効率よく反応を進めることができな
い。特に水の少ない系ではその傾向が強い。 上述の問題点に鑑み、本発明は、加水分解反応
を利用し、PUFAを高濃度に含有する油脂の効率
的な製造を実現せしめるプロセスの提供を目的と
する。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明のPUFA含有油脂の製造方法は、PUFA
を含有する油脂にリパーゼを加えて反応させる
際、一価アルコールを添加し、加水分解により遊
離したPUFA以外の脂肪酸と、添加した該一価ア
ルコールとのエステル化反応を進行せしめ、
PUFAを高濃度に含有する油脂を得ることを特徴
とする。 〔作用〕 本発明に用いられるPUFA含有油脂としては例
えば魚脂、鯨脂、オキアミ油、海産クロレラ油等
があげられるが、これらの油脂を含む混合油や共
役異性化油又は部分水添油等も用いることができ
る。 上記油脂中には、EPA（エイコサペンタエン
酸）が10％以上、DHA（ドコサヘキサエン酸）が
３％以上含有されていることが好ましい。 本発明において油脂加水分解酸素として用いる
リパーゼとしては、アスペルギルス（Asper−
gillus）属、リゾプス（Rhizopus）属、ムコール
（Mucor）属、ペニシリウム（Penicillium）属、
ジオトリクム（Geotricum）属等の糸状菌リパー
ゼ、クロモバクテリウム（Chromobacterium）
属、シユードモナス（Pseudomoas）属等の細菌
リパーゼ、キヤンデイダ（Candida）属等の酵母
リパーゼなどの微生物起源のリパーゼの他に、動
物起源のすい臓リパーゼ（Pancreatin）等も用
いることができる。 加水分解条件は公知の方法に従い行ねえばよい
が、油脂分解酵素の使用量は油脂加水分解活性を
表わすＵ（ユニツト）で示すと、反応基質（油）
１ｇに対して50〜3000U、好ましくは100〜
3000Uである。 水の添加量は油脂に対して0.1〜20％（重量基
準、以下同じ）が好ましく、１〜10％が更に好ま
しい。 水のPHは4.5〜8.5の範囲が好ましく、このPHを
調節するために緩衡液を用いるとさらに効果的
で、PHとして5.5〜8.0が特に望ましい範囲であ
る。さらに、より効果的な反応を行うためには、
乳化剤例えば、ポリビニルアルコール、脂肪酸エ
ステルなどを用いることもでき、また、加水分解
活性を高めるために胆汁酸塩の添加も効果があ
る。加水分解反応は、大気下で行つても良いが、
魚油、鯨油のように長鎖の高度不飽和酸を多量に
含む場合は、不活性ガス下、例えば窒素ガス、炭
酸ガスの雰囲気にしておくと脂肪酸の劣化を防ぐ
ばかりでなく、酵素の失活をも防止できる。ま
た、酸化防止剤、例えばトコフエロール、
TBHQ，BHA，BHTを併用しても良い。 加水分解反応は20〜60℃で行なうのが好まし
い。20℃未満では反応が遅く、60℃を超えると酵
素が失活する。30〜45℃で行うのが更に好まし
い。 また、反応は攪拌した方が、望ましいが、乳化
状態にして静置反応もできる。さらに、反応は一
段反応でも良いが、さらに反応を効率的に早く進
めるために、多段反応でもかまわない。また、連
続反応として、固定化酵素カラムの使用もでき
る。 本発明の方法において加水分解の際に添加され
る一価アルコールとは炭素数１〜28の脂肪族アル
コールで、例えばメタノール、エタノール、プロ
パノール、ブタノール、ヘキサノール、オクタノ
ール、デカノール、ドデカノール、ヘキサデカノ
ール、オクタデカノール、テトラコサノール、ヘ
キサコダノール等であり、とりわけ好ましいもの
はブタノール、オクタノール、デカノール、ドデ
カノール、ヘキサデカノール、オクタデカノール
等である。 上記アルコールの使用量は油脂１モルに対し、
通常0.1〜20モル、好ましくは0.1〜10モルであ
る。 さらに本発明においては、加水分解反応に際
し、不活性有機溶剤を添加して反応を行なわしめ
ることができ、その使用量は、油脂に対し10倍以
下、好ましくは３倍以下である。 本発明の油脂の製造方法において一価アルコー
ルは反応の当初から添加することが好ましいが、
反応によつては、全量を一度に添加することな
く、一部ずつ数度にわたつて添加してもよく、ま
た連続的に系内に供給する方法を用いることもで
きる。 〔発明の効果〕 本発明の油脂の製造方法は、リパーゼによる加
水分解を用い、加水分解の際一価アルコールを添
加するので、加水分解により遊離したPUFA以外
の脂肪酸と、添加した上記一価アルコールとのエ
ステル化反応が進行し、これにより、PUFAを高
濃度に含有する油脂を効果的に得ることが可能と
なる。 〔実施例〕 以下本発明を実施例について説明するが、本発
明はこれらの実施例に限定されるものではない。 実施例 １ 魚油（IV＝178.9，EPA 16.8％，DHA ８％）
500ｇにリゾプスデルマー20万Ｕを５ｇの水と共
に添加し、ヘキサン500ｇ中で35℃1hrかくはんし
加水分解する。その後デシルアルコール100ｇを
添加し、更に脱水しながら加水分解を続ける。
24hrs後に反応を終了し反応生成物を得た。この
生成物からカラムクロマトグラフイーでトリグリ
セリドを分画し、脂肪酸組成をメチルエステル化
しGLCで分析した結果、EPA 28.0％，DHA17.5
％であつた。 実施例 ２ 魚油100ｇ（IV 178.9，EPA 16.8％，DHA ８
％）にキヤンデイダ属起源のリパーゼ４万Ｕを５
ｇのイオン交換水と共に添加し、これにヘキサン
500ｇとプチルアルコール10ｇを添加し加水分解
反応を脱水しながら行なう。24hrs後に反応を停
止し、反応組成物から遠心分離により油層を分離
した。この油層からカラムクロマトグラフイーで
トリグリセリドを分画し、脂肪酸組成をメチルエ
ステル化しGLCで分析した結果EPA 28.8％，
DHA 8.2％となり濃縮されていることがわかる。 比較例 １ 実施例−１に於てデシルアルコールを添加しな
い外は同様に加水分解を24時間行なつた。この反
応生成物からカラムクロマトグラフイーでトリグ
リセリドを分画し分析した所EPA 17.5％，DHA
10％であつた。 比較例 ２ 実施例−２に於てプチアルコールを添加しない
外は同様に加水分解を24時間行なつた。この反応
生成物からカラムクロマトグラフイーでトリグリ
セリドを分画し、分析した結果EPA 19.5％，
DHA 12.0％であつた。 以上の実施例及び比較例で得られたトリグリセ
リドの脂肪酸組成を表−１に示す。 実施例１と比較例１を比べると、リパーゼは
PUFA以外の脂肪酸に作用して加水分解を進める
が、実施例１では、アルコール添加により、加水
分解の結果、遊離した脂肪酸はただちにリパーゼ
の作用によりアルコールエステルが形成される。
このものはリパーゼにとつて難分解性のエステル
であるため、一旦遊離して脂肪酸は再びグリセリ
ドを構成できなくなる。その結果PUFA含有トリ
グリセリドの濃度が高くなり、反応が効率的に進
んでいることがわかる。これに対し比較例１で
は、アルコール無添加のため、再エステル化が進
行し、PUFA含有トリグリセリドの濃度は実施例
１より低い。
方法に関する。 なお本発明において長鎖高度不飽和脂肪酸とは
１分子当り20個以上の炭素原子を有し、３個以上
の二重結合を有する脂肪酸を意味し、以下PUFA
と略記する。 〔従来の技術〕 PUFAは、最近人間に対する生理活性と薬理効
果が注目され、その利用について活発な検討がな
されるようになつた。 しかしながらPUFAは沸点が高いため、これを
回収するためには高真空、高温を必要とし、エネ
ルギーコストがかさむほか、高温にさらされるた
め重合などによる蒸留残査が増加し、収率が低下
するとともに二重結合の異性化が起り、好ましく
ない異性体が多量に生成するという問題点が指摘
されていた。 このため、油脂からのPUFAの回収にリパーゼ
を用いて、より温和な条件下で反応を進める方法
が有利な方法として知られている。 〔考案が解決しようとする問題点〕 しかるに、リパーゼは、油脂の加水分解反応だ
けでなく、その逆反応であるエステル合成反応も
触媒する。（Y.Tsujisaka et al，Biochim.
Biophys.Acta 489，415（1977）） 従つて単にリパーゼを用いて加水分解反応を進
めただけでは効率よく反応を進めることができな
い。特に水の少ない系ではその傾向が強い。 上述の問題点に鑑み、本発明は、加水分解反応
を利用し、PUFAを高濃度に含有する油脂の効率
的な製造を実現せしめるプロセスの提供を目的と
する。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明のPUFA含有油脂の製造方法は、PUFA
を含有する油脂にリパーゼを加えて反応させる
際、一価アルコールを添加し、加水分解により遊
離したPUFA以外の脂肪酸と、添加した該一価ア
ルコールとのエステル化反応を進行せしめ、
PUFAを高濃度に含有する油脂を得ることを特徴
とする。 〔作用〕 本発明に用いられるPUFA含有油脂としては例
えば魚脂、鯨脂、オキアミ油、海産クロレラ油等
があげられるが、これらの油脂を含む混合油や共
役異性化油又は部分水添油等も用いることができ
る。 上記油脂中には、EPA（エイコサペンタエン
酸）が10％以上、DHA（ドコサヘキサエン酸）が
３％以上含有されていることが好ましい。 本発明において油脂加水分解酸素として用いる
リパーゼとしては、アスペルギルス（Asper−
gillus）属、リゾプス（Rhizopus）属、ムコール
（Mucor）属、ペニシリウム（Penicillium）属、
ジオトリクム（Geotricum）属等の糸状菌リパー
ゼ、クロモバクテリウム（Chromobacterium）
属、シユードモナス（Pseudomoas）属等の細菌
リパーゼ、キヤンデイダ（Candida）属等の酵母
リパーゼなどの微生物起源のリパーゼの他に、動
物起源のすい臓リパーゼ（Pancreatin）等も用
いることができる。 加水分解条件は公知の方法に従い行ねえばよい
が、油脂分解酵素の使用量は油脂加水分解活性を
表わすＵ（ユニツト）で示すと、反応基質（油）
１ｇに対して50〜3000U、好ましくは100〜
3000Uである。 水の添加量は油脂に対して0.1〜20％（重量基
準、以下同じ）が好ましく、１〜10％が更に好ま
しい。 水のPHは4.5〜8.5の範囲が好ましく、このPHを
調節するために緩衡液を用いるとさらに効果的
で、PHとして5.5〜8.0が特に望ましい範囲であ
る。さらに、より効果的な反応を行うためには、
乳化剤例えば、ポリビニルアルコール、脂肪酸エ
ステルなどを用いることもでき、また、加水分解
活性を高めるために胆汁酸塩の添加も効果があ
る。加水分解反応は、大気下で行つても良いが、
魚油、鯨油のように長鎖の高度不飽和酸を多量に
含む場合は、不活性ガス下、例えば窒素ガス、炭
酸ガスの雰囲気にしておくと脂肪酸の劣化を防ぐ
ばかりでなく、酵素の失活をも防止できる。ま
た、酸化防止剤、例えばトコフエロール、
TBHQ，BHA，BHTを併用しても良い。 加水分解反応は20〜60℃で行なうのが好まし
い。20℃未満では反応が遅く、60℃を超えると酵
素が失活する。30〜45℃で行うのが更に好まし
い。 また、反応は攪拌した方が、望ましいが、乳化
状態にして静置反応もできる。さらに、反応は一
段反応でも良いが、さらに反応を効率的に早く進
めるために、多段反応でもかまわない。また、連
続反応として、固定化酵素カラムの使用もでき
る。 本発明の方法において加水分解の際に添加され
る一価アルコールとは炭素数１〜28の脂肪族アル
コールで、例えばメタノール、エタノール、プロ
パノール、ブタノール、ヘキサノール、オクタノ
ール、デカノール、ドデカノール、ヘキサデカノ
ール、オクタデカノール、テトラコサノール、ヘ
キサコダノール等であり、とりわけ好ましいもの
はブタノール、オクタノール、デカノール、ドデ
カノール、ヘキサデカノール、オクタデカノール
等である。 上記アルコールの使用量は油脂１モルに対し、
通常0.1〜20モル、好ましくは0.1〜10モルであ
る。 さらに本発明においては、加水分解反応に際
し、不活性有機溶剤を添加して反応を行なわしめ
ることができ、その使用量は、油脂に対し10倍以
下、好ましくは３倍以下である。 本発明の油脂の製造方法において一価アルコー
ルは反応の当初から添加することが好ましいが、
反応によつては、全量を一度に添加することな
く、一部ずつ数度にわたつて添加してもよく、ま
た連続的に系内に供給する方法を用いることもで
きる。 〔発明の効果〕 本発明の油脂の製造方法は、リパーゼによる加
水分解を用い、加水分解の際一価アルコールを添
加するので、加水分解により遊離したPUFA以外
の脂肪酸と、添加した上記一価アルコールとのエ
ステル化反応が進行し、これにより、PUFAを高
濃度に含有する油脂を効果的に得ることが可能と
なる。 〔実施例〕 以下本発明を実施例について説明するが、本発
明はこれらの実施例に限定されるものではない。 実施例 １ 魚油（IV＝178.9，EPA 16.8％，DHA ８％）
500ｇにリゾプスデルマー20万Ｕを５ｇの水と共
に添加し、ヘキサン500ｇ中で35℃1hrかくはんし
加水分解する。その後デシルアルコール100ｇを
添加し、更に脱水しながら加水分解を続ける。
24hrs後に反応を終了し反応生成物を得た。この
生成物からカラムクロマトグラフイーでトリグリ
セリドを分画し、脂肪酸組成をメチルエステル化
しGLCで分析した結果、EPA 28.0％，DHA17.5
％であつた。 実施例 ２ 魚油100ｇ（IV 178.9，EPA 16.8％，DHA ８
％）にキヤンデイダ属起源のリパーゼ４万Ｕを５
ｇのイオン交換水と共に添加し、これにヘキサン
500ｇとプチルアルコール10ｇを添加し加水分解
反応を脱水しながら行なう。24hrs後に反応を停
止し、反応組成物から遠心分離により油層を分離
した。この油層からカラムクロマトグラフイーで
トリグリセリドを分画し、脂肪酸組成をメチルエ
ステル化しGLCで分析した結果EPA 28.8％，
DHA 8.2％となり濃縮されていることがわかる。 比較例 １ 実施例−１に於てデシルアルコールを添加しな
い外は同様に加水分解を24時間行なつた。この反
応生成物からカラムクロマトグラフイーでトリグ
リセリドを分画し分析した所EPA 17.5％，DHA
10％であつた。 比較例 ２ 実施例−２に於てプチアルコールを添加しない
外は同様に加水分解を24時間行なつた。この反応
生成物からカラムクロマトグラフイーでトリグリ
セリドを分画し、分析した結果EPA 19.5％，
DHA 12.0％であつた。 以上の実施例及び比較例で得られたトリグリセ
リドの脂肪酸組成を表−１に示す。 実施例１と比較例１を比べると、リパーゼは
PUFA以外の脂肪酸に作用して加水分解を進める
が、実施例１では、アルコール添加により、加水
分解の結果、遊離した脂肪酸はただちにリパーゼ
の作用によりアルコールエステルが形成される。
このものはリパーゼにとつて難分解性のエステル
であるため、一旦遊離して脂肪酸は再びグリセリ
ドを構成できなくなる。その結果PUFA含有トリ
グリセリドの濃度が高くなり、反応が効率的に進
んでいることがわかる。これに対し比較例１で
は、アルコール無添加のため、再エステル化が進
行し、PUFA含有トリグリセリドの濃度は実施例
１より低い。
【表】
脂肪酸表示において、最初の数字は炭素数を次の数
字は不飽和結合の数を示す。
ω(オメガ)は、末端メチル基から数えてどこの位置
に最初の二重結合があるかを示す数字である。
従つて例えばC20：5ω3は、炭素数20の脂肪酸
で二重結合は５個あり、そのうち最初の二重結合
は末端メチル基から数えて３コ目にある脂肪酸で
あることを示す。
字は不飽和結合の数を示す。
ω(オメガ)は、末端メチル基から数えてどこの位置
に最初の二重結合があるかを示す数字である。
従つて例えばC20：5ω3は、炭素数20の脂肪酸
で二重結合は５個あり、そのうち最初の二重結合
は末端メチル基から数えて３コ目にある脂肪酸で
あることを示す。
Claims (1)
- １ 長鎖高度不飽和脂肪酸を含有する油脂をリパ
ーゼと反応させる際、一価アルコールを添加し、
加水分解により遊離した長鎖高度不飽和脂肪酸以
外の脂肪酸と添加した一価アルコールのエステル
化反応を進行させ、長鎖高度不飽和脂肪酸を高濃
度に含有する油脂を得ることを特徴とする油脂の
製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59090799A JPS60234590A (ja) | 1984-05-07 | 1984-05-07 | 油脂の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59090799A JPS60234590A (ja) | 1984-05-07 | 1984-05-07 | 油脂の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60234590A JPS60234590A (ja) | 1985-11-21 |
| JPH0533988B2 true JPH0533988B2 (ja) | 1993-05-20 |
Family
ID=14008631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59090799A Granted JPS60234590A (ja) | 1984-05-07 | 1984-05-07 | 油脂の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60234590A (ja) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2571587B2 (ja) * | 1987-12-22 | 1997-01-16 | 旭電化工業株式会社 | 油脂のエステル交換方法 |
| US5316927A (en) * | 1988-10-04 | 1994-05-31 | Opta Food Ingredients, Inc. | Production of monoglycerides by enzymatic transesterification |
| FR2652588A1 (fr) * | 1989-10-04 | 1991-04-05 | Medgenix Group Sa | Procede de production d'un melange de glycerides enrichis en acides gras. |
| US5116745A (en) * | 1990-04-19 | 1992-05-26 | The Procter & Gamble Company | Process for preparing 2-acylglycerides or 1,2-diacyl diglycerides or 2,3-diacyl diglycerides |
| US5149642A (en) * | 1990-04-20 | 1992-09-22 | The Procter & Gamble Company | Process for preparing 2-acylglycerides or 1,2 or 2,3-diacylglycerides |
| US5137660A (en) * | 1991-03-15 | 1992-08-11 | The Procter & Gamble Company | Regioselective synthesis of 1,3-disubstituted glycerides |
| JP5237627B2 (ja) * | 2007-12-27 | 2013-07-17 | 株式会社マルハニチロ水産 | 高度不飽和脂肪酸の濃縮方法 |
| JP5852972B2 (ja) * | 2013-02-13 | 2016-02-03 | マルハニチロ株式会社 | 高度不飽和脂肪酸の濃縮方法 |
-
1984
- 1984-05-07 JP JP59090799A patent/JPS60234590A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60234590A (ja) | 1985-11-21 |
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