JPH0541978A - 試験プレート - Google Patents

試験プレート

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JPH0541978A
JPH0541978A JP3308265A JP30826591A JPH0541978A JP H0541978 A JPH0541978 A JP H0541978A JP 3308265 A JP3308265 A JP 3308265A JP 30826591 A JP30826591 A JP 30826591A JP H0541978 A JPH0541978 A JP H0541978A
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Abstract

(57)【要約】 【目的】栄養液体(培養基)中の細胞を多数のくぼみ区
画内で栄養液体(培養基)により細胞を増殖することな
どによって流体の相互作用プロセスを促進するのに適し
た試験プレート、特に、区画内の細胞その他の物質を乱
すことなく、くぼみ区画に液体を出し入れすることを可
能にする試験プレートを提供すること。 【構成】少くとも1組のくぼみ区画を有する試験プレー
トであって、各組のくぼみ区画は、2つの実質的に平行
なくぼみ区画列から成り、各くぼみ区画は、流体の相互
作用プロセスを実施するためのハウジングを収容するた
めの第1空間分部と、該第1空間部分と連通しており、
該ハウジングの嵌入を防止するために該ハウジングの外
寸より小さい寸法を有する第2空間部分とから成り、該
第2空間部分は、該第2空間部分に対して液体を出し入
れするための手段を導入することを可能にする形状を有
していることを特徴とする試験プレート。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、多数のくぼみ区画(以
下、単に「区画」とも称する)内で培養基等の栄養液体
により細胞を増殖することなどによって流体の相互作用
プロセスを促進するのに適した試験プレートに関し、特
に、区画内の細胞その他の物質を乱すことなく、くぼみ
区画に液体を出し入れすることを可能にする試験プレー
トに関する。
【0002】
【従来の技術】細胞の合体、増殖及び分裂を行わせるた
めの微孔質の膜を備えた筒状部材(ハウジング)を装着
することができる円形のくぼみ区画を有する多区画付試
験プレートは周知である。微孔質の膜は、上記筒状部材
の周りにあって該膜を通して浸透してくる液体媒体を介
して細胞とその頂部及び底部側方表面との間でイオン及
び高分子の自由な拡散を許す。くぼみ区画を有する試験
プレートは、標準分析装置に適合するように82.55
×127mm(3.25×5in)の標準サイズを有す
る長方形である。このプレートのサイズは規定されてお
り、区画内に液体滞留区域が生じるのを回避するために
区画にコーナーが存在するのを避けることが望ましいの
で、区画は円形にされている。更に、区画の内壁と、該
区画内の挿入される上記筒状部材の外壁との間のクリア
ランスは最少限にされる。挿入筒状部材は、データ収集
における誤りを少なくするのに役立つように細胞増殖領
域を最大限にするために、一般に、できるだけ大きくさ
れる。しかしながら、くぼみ区画の頂部の流体収容容積
と底部の流体収容容積とは、ピペット移送を容易にする
ためには区画の内方と外方の間の流体圧を最少限にする
ようにほぼ等しくするべきであるし、他方、ピペット移
送の頻度を少なくするためにはためには、くぼみ区画の
頂部及び底部の流体収容容積をできるだけ大きくすべき
であるから、この2つの要件のバランスを考慮しなけれ
ばならない。このスペース上の要件が、筒状部材が区画
内に挿入された状態のままで液体を出し入れするために
区画内にピペットを挿入する操作を困難にする。細胞の
生育力を維持するためには、細胞の排泄物を除去するた
めに液体を定期的に除去し、細胞の栄養分を供給するた
めに液体を定期的に追加することが必要である。更に、
細胞による分析観察記録を取るには、流体操作を必要と
する。又、自動制御によるピペット式移送装置は、筒状
部材の位置が不規則であり、ピペットが細胞を損傷した
り、膜を突き刺す確率が高いので、使用できない。
【0003】
【発明が解決しようとする課題】従って、ピペット式移
送装置による細胞の損傷を回避するには、現在のところ
手でピペット移送を行わなければならない。しかし、そ
のような手操作によるピペット移送は、一般に、くぼみ
区画の処理を個々におこなわなければならないので時間
がかかり、細胞を損傷するおそれがあるので望ましくな
い。従って、標準の自動ピペット式移送装置を用いて各
区画に対する液体の出し入れを可能にする試験プレート
装置を提供することが望まれる。本発明は、この課題を
解決することを企図したものである。
【0004】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
に、本発明は、細胞の増殖を可能にする多孔質の膜を備
えた細胞保持増殖器具(筒状部材のようなハウジング)
を収容するように付形されたくぼみ区画を有する試験プ
レートを提供する。本発明によれば、このくぼみ区画
は、その第1空間分部内に上記器具を隔離するようにし
て保持し、第2空間部分が開放されたままに残されるよ
うな形態に構成される。第2空間部分は、第1空間部分
と連通しており、該細胞保持増殖器具の嵌入を防止する
ために該器具の外寸より小さい寸法を有しているが、く
ぼみ区画の非攪乱領域即ち第1空間部分内の細胞保持増
殖器具内の細胞を乱すことなく、該第2空間部分即ちア
クセス領域に培養基等の液体を出し入れするためのピペ
ットのような手段の挿入を可能にするのに十分な大きさ
とされる。更に、本発明によれば、細胞保持増殖器具を
くぼみ区画の非攪乱領域を構成する第1空間部分内に位
置づけし保持するための手段が設けられ、くぼみ区画の
アクセス領域を構成する第2空間部分に液体が出し入れ
される際、細胞が乱されないようになされている。
【0005】
【実施例】以下に、本発明を細胞増殖を行うのに適用し
た場合に関連して説明するが、本発明は、流体を導入又
は排出するためのアクセス領域、及び、例えば細胞増
殖、透析又は拡散分離等の所望の処理を行う非攪乱領域
を必要とする操作一般に適用することができることを理
解されたい。
【0006】本発明は、細胞を保持し細胞増殖を可能に
するための細胞保持増殖手段(筒状部材の形としたハウ
ジング)を収容することができるように付形されてお
り、かつ、細胞増殖に悪影響を及ぼすことなく細胞増殖
を促進するための自動制御による操作を用いることを可
能にする複数のくぼみ区画を備えた試験プレートを提供
することを企図したものである。更に、本発明によれ
ば、細胞を保持するための膜を備えた細胞保持増殖手段
(筒状部材即ちハウジング)を上記くぼみ区画の第1空
間部分内に位置づけし保持するための手段が設けられ、
かつ、増殖中の細胞を妨害することなく、細胞の増殖を
促進するための細胞増殖促進剤(即ち、培養基)をくぼ
み区画の第2空間部分に出し入れするための手段(例え
ば、ピペット)を第2空間部分へアクセスする(挿入す
る)ことが可能にされる。細胞保持増殖手段(ハウジン
グ)を位置づけするための手段は、くぼみ区画自体の独
特の形状によって構成してもよく、あるいは、細胞保持
増殖手段及び試験プレートの一部を構成する、互いに嵌
り合うリブとスロットで構成してもよい。
【0007】第1図を参照すると、複数のくぼみ区画
(以下、単に「区画」とも称する)12を備えた試験プ
レート(以下、単に「プレート」とも称する)10が例
として示されている。これらの区画は、断面円形の部分
(以下、「断面円形部分」又は単に「円形部分」とも称
する)14と、2つの収斂する辺18,20を有する断
面三角形の部分(以下、「断面三角形部分」又は単に
「三角形部分」とも称する)16とから成る涙滴形状を
有する。このような涙滴状の区画12は、液体を滞留さ
せるような鋭いコーナーを有していないので、本発明に
使用するのに好ましい形態の区画である。断面円形部分
14は、後述する細胞増殖保持手段(即ち、細胞を保持
するための膜を備えた筒状部材のようなハウジング)を
収容するための第1空間部分を画定し、断面三角形部分
は、筒状部材の嵌入を防止するが、細胞培養基のような
液体を出し入れするための例えばピペットの挿入を可能
にする第2空間部分を画定する。
【0008】例えば各々6個の区画12を有する2つの
区画列22,24から成る複数組の区画が設けられてお
り、隣り合う列22,24の各区画12の断面三角形部
分26と28が該区画の断面円形部分32と34の間に
位置する中央部分30内へ延長するように配置されてい
る。区画12と12の間の、プレート10の中実部分
に、後述する目的のためにスロット36が形成されてい
る。所望ならば、各区画12を覆うカバーを支持するた
めに棚38を設けてもよい。更に、所望ならば、追加の
区画をプレート10の区域40内に設けることもでき
る。
【0009】第3、4図は、複数の筒状部材即ちハウジ
ング44を備えた一体ストリップ42を示す。細胞増殖
保持手段を構成する各筒状部材44は、開放端46と、
多孔質の膜48を封着することによって閉鎖された底部
を有する。ストリップ42は、その筒状部材44をプレ
ート10の1列のくぼみ区画12(第1及び5図参照)
に嵌合させたときプレート10の対応するスロット36
に嵌合する分節リブ50を有している。ストリップ42
は、各くぼみ区画列の両端のくぼみ区画12の内側面に
接触する端部リブ52,54を備えている。スロット3
6と、リブ50及び端部リブ52,54は、筒状部材4
4を対応する区画12の円形部分14内の所定位置に保
持する役割を果たす。第5図に示されるように、ストリ
ップ42は、開放端46を有する筒状部材44を区画1
2の円形部分14内に嵌合させるように位置づけされ
る。たとえリブ50がスロット36から外れたとして
も、区画12の三角形部分16の幅が筒状部材44の外
径より小さいので筒状部材44が区画12の三角形部分
16に完全に嵌入することはできない。従って、区画1
2の三角形部分16の少くとも一部分は、筒状部材44
によって閉鎖されることがなく、開放したままに保たれ
るので、区画12の円形部分14内の膜48上の細胞を
乱すことなく三角形部分16内で液体のピペット移送を
行うことができる。筒状部材44の位置づけを容易にす
るためにストリップ42に把手56を設けてもよい。あ
るいは別法として、プレート10の、把手56によって
占められる区域に追加のくぼみ区画12を設けてもよ
い。
【0010】第7,8図を参照すると、開放端58と閉
鎖端60を有する個々の筒状部材47が示されている。
閉鎖端60は、米国特許第4,917,793号に開示
されているような、細胞の増殖に適する膜55によって
閉鎖されている。膜55は、筒状部材47の端部60の
全円周を覆って封着されている。膜55上の細胞増殖の
観察を容易にするために筒状部材44は透明にすること
が好ましい。使用に当っては、閉鎖端60をくぼみ区画
12内の水性培養基内に浸漬し、次いで、膜55上へ生
きた細胞を導入する。細胞の上下両表面が培養基に接触
するように膜55を区画12の底面から離隔させるため
に筒状部材の端部60の周縁に間隔をおいて複数の突起
即ちスペーサ62が突設されている。
【0011】筒状部材44の外側に存在する培養基は、
定期的にピペットによって新鮮な培養基と入れ替える。
ピペットは、筒状部材44内の細胞及び膜55を乱すこ
となく区画12の三角形状部分16へ挿入することがで
きる。区画12内の培養基は、細胞が合体して単一層を
形成した後、区画内からピペットにより培養基を抽出し
て新鮮な培養基と交換すればよい。
【0012】複数個の筒状部材を一体の器具として構成
するための変型例が第9、10図に示されている。この
例では、筒状部材44及びそれに封着された膜55が、
それぞれのアーム66を介して共通の支持体64に連結
された4つの集群として形成されている。これらの4つ
の筒状部材44は、アーム66から切離して4つの隣接
した区画12内に嵌合させることができる。筒状部材4
4をアーム66から切離すのを容易にするためにアーム
66に切欠き67を形成しておくことができる。第9、
10図の変型例の構成は、所望に応じ拡大しくぼみ区画
の数を増加することができる。
【0013】第11図を参照すると、本発明に使用する
ことができるいろいろな異る形状のくぼみ区画68,7
0,72,74,84,88が示されている。これらの
くぼみ区画のうち区画68,70,72,74の形状
は、互いに組み合わされるように補完関係をなしてい
る。プレート10の区画68は、基部と脚部を有するほ
ぼL字形であり、該脚部は、2つの平行なくぼみ区画列
の間の中央部分へ延長している。プレート10の区画6
8,70,72,74に嵌合するストリップ76,7
8,80,82の筒状部材44の外径は、区画68,7
0,72,74の幅狭部分の幅よりも小さいので、スト
リップ76,78,80,82には、プレート10の上
述したようなスロットに嵌合するリブを設ける必要がな
い。一方、第11図のプレート10の区画84,88に
嵌合するストリップ90,92の筒状部材44は、その
外径より小さい径の部分を有していないので、ピペット
が挿入されていないとき筒状部材44を区画84、88
の一部分内に保持するために、ストリップ90,92
に、リブ50が設けられている。このように、筒状部材
即ちハウジング44をプレート10のくぼみ区画の所定
部分内に保持するためのハウジング保持手段は、互いに
補完関係をなすリブとスロットの組合せであってもよ
く、あるいはそして好ましくは、くぼみ区画をその一部
分が筒状部材44又は47の外径より小さい直径を有す
るような形状とすることによって構成してもよい。
【0014】第12、13図を参照すると、筒状部材4
7をくぼみ区画98の所定部分内に保持するための保持
手段を該くぼみ区画の壁96から内方へ突出させた突部
94によって構成した実施例が示されている。突部94
の端部99と、壁96の、該端部99に対峙する部分と
の間の距離は、筒状部材47の外径より小さくし、筒状
部材47が突部94の端部99からすり抜けないように
なされている。
【0015】第14、15図を参照すると、筒状部材4
7をくぼみ区画95の所定部分内に保持するための保持
手段を該くぼみ区画の床93から突出させた突部91に
よって構成した実施例が示されている。突部91と、区
画95の壁97との間の距離は、筒状部材47の外径よ
り小さくし、筒状部材47が図示の部分に保持されるな
されている。
【0016】以上、本発明を実施例に関連して説明した
が、本発明は、ここに例示した実施例の構造及び形態に
限定されるものではなく、本発明の精神及び範囲から逸
脱することなく、いろいろな実施形態が可能であり、い
ろいろな変更及び改変を加えることができることを理解
されたい。
【図面の簡単な説明】
【図1】第1図は、本発明の試験プレートの上面図であ
る。
【図2】第2図は、第1図のプレートの線2−2に沿っ
てみた断面図である。
【図3】第3図は、本発明に使用することができる複数
の細胞保持器のストリップの上面図である。
【図4】第4図は、第3図のストリップの側面図であ
る。
【図5】第5図は、第3図のストリップを装着した第1
図の試験プレートの上面図である。
【図6】第6図は、第5図の装置の線6−6に沿ってみ
た断面図である。
【図7】第7図は、本発明に使用することができる単一
の細胞保持器の断面図である。
【図8】第8図は、第1図のプレートの区画内に装着さ
れた第7図の細胞保持器の部分上面図である。
【図9】第9図は、本発明に使用することができる細胞
保持器の群体の上面図である。
【図10】第10図は、第9図の群体の線10−10に
沿ってみた断面図である。
【図11】第11図は、本発明に使用することができる
いろいろな設計の区画の上面図である。
【図12】第12図は、筒状部材の動きを拘束するため
に区画の壁から延長させた延長部分を有する区画の上面
図である。
【図13】第13図は、第12図の区画の側面図であ
る。
【図14】第14図は、筒状部材の動きを拘束するため
に区画の床から延長させた延長部分を有する区画の上面
図である。
【図15】第15図は、第14図の区画の側面図であ
る。
【符号の説明】
10:試験プレート 12:くぼみ区画 14:断面円形部分(第1空間部分) 16:断面三角形部分(第2空間部分) 22,24:区画の列 26,28:断面三角形部分(第2空間部分) 30:中央部分 32,34:断面円形部分(第1空間部分) 36:スロット 42:一体ストリップ 44:筒状部材(ハウジング) 47:筒状部材(ハウジング) 48:膜 50:リブ 55:膜 62:突起(スペーサ) 64:共通の中心支持体 66:アーム 67:切欠き 68,70,72,74:くぼみ区画 76,78,80,82:ストリップ 84,86:くぼみ区画 90,92:ストリップ 91:突部 93:床 95:区画 97:壁 94:突部 96:壁 98:区画

Claims (9)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】少くとも1組のくぼみ区画を有する試験プ
    レートであって、 各組のくぼみ区画は、2つの実質的に平行なくぼみ区画
    列から成り、各くぼみ区画は、流体の相互作用プロセス
    を実施するためのハウジングを収容するための第1空間
    分部と、該第1空間部分と連通しており、該ハウジング
    の嵌入を防止するために該ハウジングの外寸より小さい
    寸法を有する第2空間部分とから成り、該第2空間部分
    は、該第2空間部分に対して液体を出し入れするための
    手段を導入することを可能にする形状を有していること
    を特徴とする試験プレート。
  2. 【請求項2】前記各くぼみ区画は、前記第1空間部分を
    形成するための断面円形部分と、前記第2空間部分を形
    成するための、2つの収斂辺によって画定される断面三
    角形部分とから成る涙滴形状であることを特徴とする請
    求項1に記載の試験プレート。
  3. 【請求項3】前記各組の2つの実質的に平行なくぼみ区
    画列の間の中央部分内において、各組の一方のくぼみ区
    画列中の1つのくぼみ区画は、他方のくぼみ区画列の対
    応する1つのくぼみ区画の一辺に対してその実質的に全
    長に亙って実質的に平行に位置する一辺を有しているこ
    とを特徴とする請求項2に記載の試験プレート。
  4. 【請求項4】前記各くぼみ区画は、基部と脚部を有する
    ほぼL字形であり、該脚部は、前記2つの実質的に平行
    なくぼみ区画列の間の中央部分へ延長していることを特
    徴とする請求項1に記載の試験プレート。
  5. 【請求項5】前記ハウジングが前記第2空間部分へ嵌入
    するのを防止するために前記各くぼみ区画の壁から突出
    した突部が設けられていることを特徴とする請求項1に
    記載の試験プレート。
  6. 【請求項6】前記ハウジングが前記第2空間部分へ嵌入
    するのを防止するために前記各くぼみ区画の床から突出
    した突部が設けられていることを特徴とする請求項1に
    記載の試験プレート。
  7. 【請求項7】細胞を増殖するための装置であって、 請求項1〜4のいずれかに記載の試験プレートと、該試
    験プレートの前記各くぼみ区画内に位置づけされた筒状
    部材とから成り、該筒状部材は、開放端と、多孔質膜に
    よって閉鎖された閉鎖端を有し、該筒状部材を前記くぼ
    み区画の前記第1空間部分内に保持するための手段を備
    えていることを特徴とする細胞増殖装置。
  8. 【請求項8】細胞を増殖するための装置であって、 請求項1〜4のいずれかに記載の試験プレートと、各々
    該試験プレートの1つのくぼみ区画内に位置づけされた
    複数の筒状部材とから成り、該試験プレートの1つの列
    のくぼみ区画に嵌合される筒状部材は、一体的に成形さ
    れており、該各筒状部材は、開放端と、多孔質膜によっ
    て閉鎖された閉鎖端を有し、該筒状部材を前記くぼみ区
    画の前記第1空間部分内に保持するための手段を備えて
    いることを特徴とする細胞増殖装置。
  9. 【請求項9】細胞を増殖するための装置であって、 請求項1〜4のいずれかに記載の試験プレートと、各々
    該試験プレートの1つのくぼみ区画内に位置づけされた
    複数の筒状部材とから成り、該筒状部材の組が、該試験
    プレートの互いに隣接するくぼみ区画列の隣接するくぼ
    み区画内に位置づけされるように一体的に成形されてお
    り、該各筒状部材は、開放端と、多孔質膜によって閉鎖
    された閉鎖端を有し、該筒状部材を隣接するくぼみ区画
    列のくぼみ区画の前記第1空間部分内に保持するための
    手段を備えていることを特徴とする細胞増殖装置。
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