JPH0549471A - 新規微生物、ならびにそれを用いて製造する乳酸発酵食品およびその製造法 - Google Patents
新規微生物、ならびにそれを用いて製造する乳酸発酵食品およびその製造法Info
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- JPH0549471A JPH0549471A JP24038091A JP24038091A JPH0549471A JP H0549471 A JPH0549471 A JP H0549471A JP 24038091 A JP24038091 A JP 24038091A JP 24038091 A JP24038091 A JP 24038091A JP H0549471 A JPH0549471 A JP H0549471A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 発酵用原料を、通常の微生物では生育し難い
高塩濃度条件下において乳酸発酵させることができる技
術を提供する。 【構成】 ラクトバチルス属に属する菌株、好ましくは
ラクトバチルス・プランタラム、とペディオコッカス・
ハロフィルスに属する菌株とを融合させることにより形
成され、高塩濃度の環境中において融合前の両菌株より
も旺盛な生育を示す、融合微生物。上記の融合微生物の
少なくとも１種を発酵原料の発酵時にスターターとして
接種し、他の微生物が旺盛に生育できずかつその融合微
生物にとっては増殖に適した高塩濃度下で、発酵物中の
他の微生物の繁殖を抑制しながら発酵を行うことを特徴
とする、乳酸発酵食品の製造法。上記の製造法によって
得られる乳酸発酵食品。
高塩濃度条件下において乳酸発酵させることができる技
術を提供する。 【構成】 ラクトバチルス属に属する菌株、好ましくは
ラクトバチルス・プランタラム、とペディオコッカス・
ハロフィルスに属する菌株とを融合させることにより形
成され、高塩濃度の環境中において融合前の両菌株より
も旺盛な生育を示す、融合微生物。上記の融合微生物の
少なくとも１種を発酵原料の発酵時にスターターとして
接種し、他の微生物が旺盛に生育できずかつその融合微
生物にとっては増殖に適した高塩濃度下で、発酵物中の
他の微生物の繁殖を抑制しながら発酵を行うことを特徴
とする、乳酸発酵食品の製造法。上記の製造法によって
得られる乳酸発酵食品。
Description
【０００１】 〔発明の背景〕
【産業上の利用分野】本発明は、乳酸発酵物の製造技術
に関するもである。具体的には、通常の微生物にとって
は生育が難しい高塩濃度下において植物質および動物質
の任意の原料を乳酸発酵させて得られる発酵物、の製造
技術に関するものである。さらに詳細には、ラクトバチ
ルス属に属する菌株とペディオコッカス・ハロフィルス
に属する菌株とを細胞融合させることにより得られた融
合微生物であって、高塩濃度下において旺盛な生育を示
す融合微生物、この微生物を用いる乳酸発酵食品の製造
法およびこれによって製造される乳酸発酵食品に関する
ものである。
に関するもである。具体的には、通常の微生物にとって
は生育が難しい高塩濃度下において植物質および動物質
の任意の原料を乳酸発酵させて得られる発酵物、の製造
技術に関するものである。さらに詳細には、ラクトバチ
ルス属に属する菌株とペディオコッカス・ハロフィルス
に属する菌株とを細胞融合させることにより得られた融
合微生物であって、高塩濃度下において旺盛な生育を示
す融合微生物、この微生物を用いる乳酸発酵食品の製造
法およびこれによって製造される乳酸発酵食品に関する
ものである。
【０００２】
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】高塩濃度下で良好な乳
酸発酵を行うことができると、雑菌による腐敗もなく、
抗菌剤添加あるいは加熱殺菌を必要としない、原料の生
のよさを生かした新しい乳酸発酵食品ができることにな
る。さらに、高塩濃度の状態で良好な乳酸発酵を行うこ
とができると従来になかった新しい発酵食品が生まれる
ことになる。本発明は、動物質および植物質の任意の発
酵用原料を、通常の微生物では生育が難しい高塩濃度条
件下において、乳酸発酵させることを可能にする技術、
すなわちこのための新規な微生物、これを用いた乳酸発
酵食品の製造法および乳酸発酵食品、を提供することを
目的とするものである。
酸発酵を行うことができると、雑菌による腐敗もなく、
抗菌剤添加あるいは加熱殺菌を必要としない、原料の生
のよさを生かした新しい乳酸発酵食品ができることにな
る。さらに、高塩濃度の状態で良好な乳酸発酵を行うこ
とができると従来になかった新しい発酵食品が生まれる
ことになる。本発明は、動物質および植物質の任意の発
酵用原料を、通常の微生物では生育が難しい高塩濃度条
件下において、乳酸発酵させることを可能にする技術、
すなわちこのための新規な微生物、これを用いた乳酸発
酵食品の製造法および乳酸発酵食品、を提供することを
目的とするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、鋭意研究
を行った結果、食塩濃度１５％付近においても旺盛な乳
酸発酵を行うことができる、ラクトバチルス・プランタ
ラムとペディオコッカス・ハロフィルスとの融合株を取
得することに成功し、この融合株を発酵のスターターと
して接種することで、上記目的の高塩濃度下においての
発酵が可能となることを見いだし、本発明を完成するに
至った。すなわち、本発明による微生物は、ラクトバチ
ルス属に属する菌株とペディオコッカス・ハロフィルス
に属する菌株とを融合させることにより形成され、高塩
濃度の環境中において融合前の両菌株よりも旺盛な生育
を示す、融合微生物であり、この好ましい例は、ラクト
バチルス・プランタラムとペディオコッカス・ハロフィ
ルスを細胞融合させることにより得られた融合微生物で
ある。また、本発明による乳酸発酵食品の製造法は、上
記した融合微生物の少なくとも１種を発酵原料の発酵時
にスターターとして接種し、他の微生物が旺盛に生育で
きず、かつ、その融合微生物にとっては増殖に適した高
塩濃度下で、発酵物中の他の微生物の繁殖を抑制しなが
ら発酵を行うこと、を特徴とするものである。さらにま
た、本発明による乳酸発酵食品は、上記の製造法によっ
て製造されたものである。
を行った結果、食塩濃度１５％付近においても旺盛な乳
酸発酵を行うことができる、ラクトバチルス・プランタ
ラムとペディオコッカス・ハロフィルスとの融合株を取
得することに成功し、この融合株を発酵のスターターと
して接種することで、上記目的の高塩濃度下においての
発酵が可能となることを見いだし、本発明を完成するに
至った。すなわち、本発明による微生物は、ラクトバチ
ルス属に属する菌株とペディオコッカス・ハロフィルス
に属する菌株とを融合させることにより形成され、高塩
濃度の環境中において融合前の両菌株よりも旺盛な生育
を示す、融合微生物であり、この好ましい例は、ラクト
バチルス・プランタラムとペディオコッカス・ハロフィ
ルスを細胞融合させることにより得られた融合微生物で
ある。また、本発明による乳酸発酵食品の製造法は、上
記した融合微生物の少なくとも１種を発酵原料の発酵時
にスターターとして接種し、他の微生物が旺盛に生育で
きず、かつ、その融合微生物にとっては増殖に適した高
塩濃度下で、発酵物中の他の微生物の繁殖を抑制しなが
ら発酵を行うこと、を特徴とするものである。さらにま
た、本発明による乳酸発酵食品は、上記の製造法によっ
て製造されたものである。
【０００５】〔発明の具体的説明〕 ＜融合微生物＞本発明による融合微生物は、ラクトバチ
ルス属（Lactobacillus （L.））に属する菌株とペディ
オコッカス属（Pediococcus （P.））に属する菌株とを
融合させることにより形成され、高塩濃度の環境中にお
いて融合前の両菌株よりも旺盛な生育を示すものである
ことは前記したところである。高塩濃度の環境とは、発
酵の際に存在する通常の微生物は死滅するかもしくは繁
殖できないが本発明融合微生物は旺盛な生育を示す高濃
度の塩を含むものであり、具体的には、たとえば約１０
〜２０％(W/V) の塩化ナリトウム（食塩）を含むもので
ある。ラクトバチルス属に属する菌株の好ましい例とし
ては、たとえばラクトバチルス・プランタラム（L. pl
antarum ）、ラクトバチルス・カゼイ（L. casei ）、
ラクトバチルス・カルバタス（L. curvatus）などがあ
げられる。本発明による融合微生物の好ましい具体例
は、ラトクバチルス・プランタラムとペディオコッカス
・ハロフィルスとの融合によるものであり、この代表的
な好ましい例として、たとえば後述するＦ−６株および
Ａ−９株があげられる。本発明者らは、野菜から分離し
たラクトバチルス・プランタラムＮＯ．１４株と醤油諸
味から分離したペディオコッカス・ハロフィルスＮＯ．
８株を親株とし、通常の細胞融合法により、高塩濃度の
環境中において、具体的にはたとえば約１５〜２０％濃
度の食塩添加において、旺盛な生育を示す融合株すなわ
ち、Ｆ−６株およびＡ−９株を作出・分離した。このＦ
−６株およびＡ−９株は、後記実施例に示すように、同
一の細胞融合株作出系から得られた生理学的性質の一部
異なる２種の融合微生物である（後記表１参照）。
ルス属（Lactobacillus （L.））に属する菌株とペディ
オコッカス属（Pediococcus （P.））に属する菌株とを
融合させることにより形成され、高塩濃度の環境中にお
いて融合前の両菌株よりも旺盛な生育を示すものである
ことは前記したところである。高塩濃度の環境とは、発
酵の際に存在する通常の微生物は死滅するかもしくは繁
殖できないが本発明融合微生物は旺盛な生育を示す高濃
度の塩を含むものであり、具体的には、たとえば約１０
〜２０％(W/V) の塩化ナリトウム（食塩）を含むもので
ある。ラクトバチルス属に属する菌株の好ましい例とし
ては、たとえばラクトバチルス・プランタラム（L. pl
antarum ）、ラクトバチルス・カゼイ（L. casei ）、
ラクトバチルス・カルバタス（L. curvatus）などがあ
げられる。本発明による融合微生物の好ましい具体例
は、ラトクバチルス・プランタラムとペディオコッカス
・ハロフィルスとの融合によるものであり、この代表的
な好ましい例として、たとえば後述するＦ−６株および
Ａ−９株があげられる。本発明者らは、野菜から分離し
たラクトバチルス・プランタラムＮＯ．１４株と醤油諸
味から分離したペディオコッカス・ハロフィルスＮＯ．
８株を親株とし、通常の細胞融合法により、高塩濃度の
環境中において、具体的にはたとえば約１５〜２０％濃
度の食塩添加において、旺盛な生育を示す融合株すなわ
ち、Ｆ−６株およびＡ−９株を作出・分離した。このＦ
−６株およびＡ−９株は、後記実施例に示すように、同
一の細胞融合株作出系から得られた生理学的性質の一部
異なる２種の融合微生物である（後記表１参照）。
【０００６】ラクトバチルス・プランタラムＮＯ．１４
株（親株）およびペディオコッカス・ハロフィルスＮ
Ｏ．８株（親株）ならびに融合株Ｆ−６株およびＡ−９
株の菌学的性質は以下の表１に示す通りである。これら
の菌学的性質は、バージェイズマニュアル・オブ・シス
テマティック・バクテリオロジー（Bergey's Mannual o
f Systematic Bacteriology)第２巻（１９８６年）およ
び腸内菌の世界‐嫌気性菌の分類と同定‐（光岡知足
著）記載の方法に準拠した。
株（親株）およびペディオコッカス・ハロフィルスＮ
Ｏ．８株（親株）ならびに融合株Ｆ−６株およびＡ−９
株の菌学的性質は以下の表１に示す通りである。これら
の菌学的性質は、バージェイズマニュアル・オブ・シス
テマティック・バクテリオロジー（Bergey's Mannual o
f Systematic Bacteriology)第２巻（１９８６年）およ
び腸内菌の世界‐嫌気性菌の分類と同定‐（光岡知足
著）記載の方法に準拠した。
【０００７】 表１ ＮＯ．１４ ＮＯ．８ Ｆ−６ Ａ−９ a)形態 (1) 細胞の形及び大きさ 桿菌 球菌 球菌 球菌 (2) 運動性の有無 − − − − (3) 胞子の有無 − − − − (4) グラム染色 陽性 陽性 陽性 陽性 b)生理学的性質 (1) 硝酸塩の還元 − − − − (2) ＭＲ反応 ＋ ＋ ＋ ＋ (3) ＶＰ反応 − − − − (4) インドールの生成 − − − − (5) 硫化水素の生成 − − − − (6) デンプンの加水分解 − − − − (7) クエン酸の利用 − − − − (8) 色素の生成 − − − − (9) ウレアーゼ − − − − (10)オキシダーゼ − − − − (11)カタラーゼ − − − − (12)Ｏ−Ｆテスト 発酵 発酵 発酵 発酵 (13)耐塩性試験（W/V) 〜１０％ 〜２２％ 〜２２％ 〜２２％ (14)無機窒素源の利用 − − − − (15)ゼラチンの液化 − − − − (16)乳酸の旋光性 ＤＬ Ｌ Ｌ Ｌ (17)リトマス・ミルク 酸性化 弱い還元 弱い還元 弱い還元 (18)生育の範囲 生育ｐＨ 4.0 〜8.0 6.0 〜9.0 5.0 〜9.0 5.0 〜9.0 至適ｐＨ 7.0 7.0 〜8.0 7.0 〜8.0 7.0 〜8.0 生育温度 15〜38℃ 15〜38℃ 15〜38℃ 15〜38℃ 至適温度 33〜35℃ 33〜35℃ 33〜35℃ 33〜35℃ (19)グルコースからの − − − − ガスの生成 (20)糖類から酸の生成 Ｌ‐アラビノース −* ＋ ＋ ＋ Ｄ‐キシロース −* − − − Ｄ‐グルコース ＋ ＋ ＋ ＋ Ｄ‐マンノース ＋ ＋ ＋ ＋ Ｄ‐フラクトース ＋ ＋ ＋ ＋ Ｄ‐ガラクトース ＋ ＋ ＋ ＋ マルトース ＋ − ＋ − シュークロース ＋ − ＋ − ラクトース ＋ − − − トレハロース ＋ − − − Ｄ‐ソルビット ＋ − − − Ｄ‐マンニット ＋ ＋ ＋ ＋ イノシット −* − − − グリセリン −* ＋ ＋ ＋デンプン ＋ − − − ＊：は、生育できなかっことを示す。
【０００８】本発明に関わる融合微生物もしくは細胞融
合株の作出は、基本的には、まず増殖活性の高い２種の
菌体を常法により、プロトプラスト化した後にプロトプ
ラスト細胞同士を融合させて、細胞に対して高張状態の
培地にて細胞壁を再生させる。このようにして再生した
融合細胞の中から高塩濃度、例えば食塩１０〜２０％、
好ましくは約１５％（グラムパーセント濃度）、の培地
にて旺盛な生育を示すものを選び出すことにより目的の
細胞融合株を容易に得ることができる。プロトプラスト
化に使用する融合用の菌株としては、通常の乳酸菌培地
あるいは融合用の菌株が生育できる種々の培地で培養し
た栄養細胞を用いればよい。培養に用いる培地は、Ｒｏ
ｇｏｓａ培地、ＧＰＹ培地あるいはＭＲＳ培地に代表さ
れる種々の乳酸菌用の培地等融合用の菌株が生育できる
任意の培地を使用することができる。これらの培地で培
養した栄養細胞は、通常に用いられる高張状態にした緩
衝液（たとえば、トリス‐マレイン酸緩衝液、燐酸緩衝
液等）で培地成分を洗浄除去した菌体懸濁液を作成し、
この菌体懸濁液に乳酸菌細胞壁溶解酵素を作用させるこ
とによりプロトプラスト化させることができる。細胞壁
溶解酵素としては、具体的にはたとえば卵白リゾチーム
（生化学工業社製、以後リゾチームと略する）あるいは
N-acetyl-muramidase(生化学工業社製、以後ＮＡＭと略
する）等があげられるが、上記した２種の酵素を併用す
ることにより、より効率的にプロトプラストを得ること
ができる。融合微生物もくしは細胞融合株は、上記のよ
うにして調製したプロトプラスト細胞の混合液を用い
て、通常の電気パルス法あるいはポリエチレングリコー
ル法等の細胞融合法により容易に得ることができる。細
胞融合のための上記したような種々の方法に関する一般
的な記載は、たとえば「電気パルスによる細胞融合・遺
伝子導入法とその現状」（島津評論、Vo1.46,No4,1989.
12）を参照することができる。
合株の作出は、基本的には、まず増殖活性の高い２種の
菌体を常法により、プロトプラスト化した後にプロトプ
ラスト細胞同士を融合させて、細胞に対して高張状態の
培地にて細胞壁を再生させる。このようにして再生した
融合細胞の中から高塩濃度、例えば食塩１０〜２０％、
好ましくは約１５％（グラムパーセント濃度）、の培地
にて旺盛な生育を示すものを選び出すことにより目的の
細胞融合株を容易に得ることができる。プロトプラスト
化に使用する融合用の菌株としては、通常の乳酸菌培地
あるいは融合用の菌株が生育できる種々の培地で培養し
た栄養細胞を用いればよい。培養に用いる培地は、Ｒｏ
ｇｏｓａ培地、ＧＰＹ培地あるいはＭＲＳ培地に代表さ
れる種々の乳酸菌用の培地等融合用の菌株が生育できる
任意の培地を使用することができる。これらの培地で培
養した栄養細胞は、通常に用いられる高張状態にした緩
衝液（たとえば、トリス‐マレイン酸緩衝液、燐酸緩衝
液等）で培地成分を洗浄除去した菌体懸濁液を作成し、
この菌体懸濁液に乳酸菌細胞壁溶解酵素を作用させるこ
とによりプロトプラスト化させることができる。細胞壁
溶解酵素としては、具体的にはたとえば卵白リゾチーム
（生化学工業社製、以後リゾチームと略する）あるいは
N-acetyl-muramidase(生化学工業社製、以後ＮＡＭと略
する）等があげられるが、上記した２種の酵素を併用す
ることにより、より効率的にプロトプラストを得ること
ができる。融合微生物もくしは細胞融合株は、上記のよ
うにして調製したプロトプラスト細胞の混合液を用い
て、通常の電気パルス法あるいはポリエチレングリコー
ル法等の細胞融合法により容易に得ることができる。細
胞融合のための上記したような種々の方法に関する一般
的な記載は、たとえば「電気パルスによる細胞融合・遺
伝子導入法とその現状」（島津評論、Vo1.46,No4,1989.
12）を参照することができる。
【０００９】微生物の寄託 ラクトバチルス・プランタラムＮＯ．１４株は、工業技
術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第１１５５０号
（FERM P-11550) として寄託されている。ペディオコッ
カス・ハロフィルスＮＯ．８株は、工業技術院微生物工
業技術研究所に微工研菌寄第１２２２４号（FERM P-122
24) として寄託されている。細胞融合株Ｆ−６株および
Ａ−９株は、工業技術院微生物工業技術研究所に微工研
菌寄第１２２２６号（FERM P-12226) および微工研菌寄
第１２２２５号（FERM P-12225) として寄託されてい
る。
術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第１１５５０号
（FERM P-11550) として寄託されている。ペディオコッ
カス・ハロフィルスＮＯ．８株は、工業技術院微生物工
業技術研究所に微工研菌寄第１２２２４号（FERM P-122
24) として寄託されている。細胞融合株Ｆ−６株および
Ａ−９株は、工業技術院微生物工業技術研究所に微工研
菌寄第１２２２６号（FERM P-12226) および微工研菌寄
第１２２２５号（FERM P-12225) として寄託されてい
る。
【００１０】＜乳酸発酵食品の製造法＞本発明による乳
酸発酵食品の製造法は、上記したような本発明融合微生
物の少なくとも１種を発酵原料の発酵時にスターターと
して接種し、他の微生物が旺盛に生育できずかつその融
合微生物にとっては増殖に適した高塩濃度下で、発酵物
中の他の微生物の繁殖を抑制しながら発酵を行うこと、
を特徴とするものであり、高塩濃度下における旺盛な乳
酸発酵を可能にしたものである。従って、本発明による
製造法は高塩濃度下で発酵を行わせるため、加熱あるい
は殺菌剤などによる原料中の微生物の殺菌の必要がない
という特徴を有している。 （１）発酵用原料 発酵物（発酵食品）用の原料としては、本発明融合微生
物が利用できる植物質あるいは動物質の任意のものであ
りうるが、例えば、植物質では、きゅうり、白菜、大
根、人参等の野菜、林檎、梨、バナナ、苺等の果実、大
豆、小麦、小豆等の穀類があげられ、また、動物質で
は、種々の肉、魚等の一般的なものがあげられる。 （２）発酵 上記したような発酵用原料を、通常、まず水洗いまたは
殺菌剤、例えば次亜塩素酸ソーダ等による殺菌処理を行
った後（この際、通常は原料の生のよさを保護するため
に加熱殺菌を行わないが、必要があればこの加熱処理を
施してもよい）、高塩濃度の状態、好ましくは食塩１０
％〜２０％、より好ましくは１５％〜１８％(W/V) の添
加状態にする。塩としては、食塩の他に必要に応じて他
の塩、たとえばＫＣｌあるいはＭｇＣｌ2 等を必要量添
加することができる。また、必要に応じてアミノ酸、核
酸等の調味料を所望の量添加することもできる。この高
塩濃度の状態にした発酵用原料に、本発明融合微生物の
培養液（通常１×１０6 〜１×１０9 cells/ml、好まし
くは１×１０8 cells/mlの濃度）を０．１％から１０
％、好ましくは約１％（それぞれ容量％）接種する。そ
の後、通常１０℃〜４０℃、好ましくは２８℃〜３５℃
の温度で発酵を行うことができる。発酵時間は、原料あ
るいは好みの発酵度等の条件により変化しうるが、１〜
４週間程度が一般的である。なお、高濃度の塩は、必要
に応じて、発酵後に所望の濃度までに通常の脱塩によっ
て低濃度にすることができる。上記したような本発明製
造法により、高塩濃度下における旺盛な乳酸発酵によ
る、加熱あるいは殺菌剤などによる原料中の微生物の殺
菌の必要がない、全く新しい乳酸発酵食品を得ることが
できる。
酸発酵食品の製造法は、上記したような本発明融合微生
物の少なくとも１種を発酵原料の発酵時にスターターと
して接種し、他の微生物が旺盛に生育できずかつその融
合微生物にとっては増殖に適した高塩濃度下で、発酵物
中の他の微生物の繁殖を抑制しながら発酵を行うこと、
を特徴とするものであり、高塩濃度下における旺盛な乳
酸発酵を可能にしたものである。従って、本発明による
製造法は高塩濃度下で発酵を行わせるため、加熱あるい
は殺菌剤などによる原料中の微生物の殺菌の必要がない
という特徴を有している。 （１）発酵用原料 発酵物（発酵食品）用の原料としては、本発明融合微生
物が利用できる植物質あるいは動物質の任意のものであ
りうるが、例えば、植物質では、きゅうり、白菜、大
根、人参等の野菜、林檎、梨、バナナ、苺等の果実、大
豆、小麦、小豆等の穀類があげられ、また、動物質で
は、種々の肉、魚等の一般的なものがあげられる。 （２）発酵 上記したような発酵用原料を、通常、まず水洗いまたは
殺菌剤、例えば次亜塩素酸ソーダ等による殺菌処理を行
った後（この際、通常は原料の生のよさを保護するため
に加熱殺菌を行わないが、必要があればこの加熱処理を
施してもよい）、高塩濃度の状態、好ましくは食塩１０
％〜２０％、より好ましくは１５％〜１８％(W/V) の添
加状態にする。塩としては、食塩の他に必要に応じて他
の塩、たとえばＫＣｌあるいはＭｇＣｌ2 等を必要量添
加することができる。また、必要に応じてアミノ酸、核
酸等の調味料を所望の量添加することもできる。この高
塩濃度の状態にした発酵用原料に、本発明融合微生物の
培養液（通常１×１０6 〜１×１０9 cells/ml、好まし
くは１×１０8 cells/mlの濃度）を０．１％から１０
％、好ましくは約１％（それぞれ容量％）接種する。そ
の後、通常１０℃〜４０℃、好ましくは２８℃〜３５℃
の温度で発酵を行うことができる。発酵時間は、原料あ
るいは好みの発酵度等の条件により変化しうるが、１〜
４週間程度が一般的である。なお、高濃度の塩は、必要
に応じて、発酵後に所望の濃度までに通常の脱塩によっ
て低濃度にすることができる。上記したような本発明製
造法により、高塩濃度下における旺盛な乳酸発酵によ
る、加熱あるいは殺菌剤などによる原料中の微生物の殺
菌の必要がない、全く新しい乳酸発酵食品を得ることが
できる。
【００１１】
【実施例】以下は本発明の実施例を示すものであるが、
本発明はこれによって限定されるものではない。実施例１ ラクトバチルス・プランタラムとペディオコ
ッカス・ハロフィルスの細胞融合株の取得 （１）培養 (i) ラクトバルチス・プランタラムＮＯ．１４株（ｔｅ
ｔ＋，ＮａＣｌ−）保存培地から１白金耳をＧＰＹ培地
（表２）１０mlに接種して、３０℃、１日間培養した。
培養液を同培地に接種し、３０℃、１日間の継代培養を
数回繰り返すことにより生育を安定させ、これを前培養
とした。次に、前培養液０．３mlを同培地３０mlに接種
して、３０℃、１０時間培養して本培養とした。 (ii)ペディオコッカス・ハロフィルスＮＯ．８株（ｔｅ
ｔ−，ＮａＣｌ＋）保存培地１白金耳を、ＮａＣｌ７％
（W/V)添加したＲｏｇｏｓａ培地（表３）１０mlに接種
して、３０℃、２日間培養した。培養液を同培地に接種
し、３０℃、２日間の継代培養を数回繰り返すことによ
り生育を安定させ、これを前培養とした。次に、前培養
液０．３mlを同培地３０mlに接種して、３０℃、２４時
間培養して本培養とした。 表３ Ｒｏｇｏｓａ培地 トリプチケース １０ｇ 酵母エキス ５ｇ トリプトース ３ｇ Ｋ２ＨＰＯ４ ３ｇ ＫＨ２ＰＯ４ ３ｇ クエン酸アンモニウム ２ｇ 塩溶液＊ ５ml Ｔｗｅｅｎ ８０ １ｇ 酢酸ナトリウム・３Ｈ２Ｏ １．７ｇ グルコース ２０ｇ システイン（塩酸塩） ０．２ｇ （寒天 １５ｇ） 蒸留水 １０００ml （ｐＨ６．８） ＊塩溶液：ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ １１．５ｇ， ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．６８ｇ， ＭｎＳＯ４・ｎＨ２Ｏ ２．４ｇを水１００mlに溶解したもの なお、上記(i) 、(ii)における（ｔｅｔ＋，ＮａＣｌ
−）および（ｔｅｔ−，ＮａＣｌ＋）は次のような内容
を意味するものである。 テトラサイクリン(20 μｇ／ml) ＮａＣｌ(10%(W/V)) ラクトバチルス・ プランタラムNo.14 株 ＋（耐性） −（感受性） ペディオコッカス・ ハロフィルスNo.8株 − ＋ （２）プロトプラスト化 本培養終了菌体を遠心分離（７５００×ｇ／５min ／４
℃）し、集菌を行った。常法に従って集菌した菌体をＴ
ＭＳ緩衝液（表４）で２回洗浄を行い、洗浄後、同緩衝
液を用いてＯ．Ｄ．660nm の値が、０．７になるように
菌懸濁液を調整した。次に、菌懸濁液４mlと酵素溶液１
mlを加え、全量を５mlとした。酵素反応は、３５℃、微
弱振とうで行った。また酵素を加えることによって反応
開始とし、酵素の反応時間は、それぞれ６０分とした。
それぞれの酵素濃度は表５に示す。 表５ プロトプラスト化に用いた酵素と酵素濃度* L.plantarum NO.14 α‐amylase 50μｇ／ml N-acetyl-muramidase 10μｇ／ml P.halophilus NO.8 α‐amylase 250μｇ／ml lysozyme 25μｇ／ml ＊：最終濃度 プロトプラスト化反応後、電気パルス用溶液1)を用いて
２回の洗浄を行った。洗浄後、同溶液を用いてプロトプ
ラスト菌体懸濁液をつくり、２種類の菌体を等量ずつ混
合し細胞融合の試料とした。1) 電気パルス用溶液：０．３Ｍスクロース溶液 （３）融合操作 調整した細胞融合用試料０．２mlを融合チャンバー（島
津製作所製ＦＴＣ−０１）に注入し、そのまま１分間静
置し、以下に示す条件で融合操作を行った。融合操作を
行った後、２分間放置し細胞融合処理菌体を回収した。 （４）細胞融合装置 株式会社島津製作所製：ＳＳＨ−１ 融合チャンバー ：ＦＴＣ−０１ （５）反応条件 以下の条件で融合を行った。 ＦＲＥＱ １．０ＭＨｚ ＶＡＣ（ＰＲＩ） ４０Ｖ ＩＮＩＴＩＡＬ ＴＩＭＥ １２０ｓ ＶＡＣ（ＳＥＣ） ４０Ｖ ＲＥＰＥＡＴ ＩＮＴＥＲＶＡＬ １ｓ ｎ ５ ＶＤＣ ＤＥＣ ＲＡＴＥ １００％ ＦＩＮＡＬ ＴＩＭＥ １ｓ ＶＡＣ ＤＥＣ ＲＡＴＥ １００％ ＴＥＭＰ ＡＭＢ パルス幅 ３０〜３００μ
sec. パルス回数 ５回 電界強度 １．０〜１４．
０ｋＶ／cm （６）再生 選択培地2)に寒天０．８％（W/V)加えたものに融合反応
後のプロトプラスト混合液０．１mlを混釈し、３０℃の
培養器で再生を行わせ、融合株のコロニー形成を行わせ
た。選択固体培地において出現したコロニーを７％Ｎａ
Ｃｌを添加したＲｏｇｏｓａ培地に釣菌し、３０℃で培
養を行い増殖を行わせる。菌体が増殖した培地０．１ml
を同培地１０mlに接種して３０℃で培養を行い、これを
前培養とする。また、同様の操作を行い両親株も前培養
を行った。前培養液０．１mlを７％ＮａＣｌを含むＲｏ
ｇｏｓａ培地１０mlと１５％ＮａＣｌを含むＲｏｇｏｓ
ａ培地１０mlにそれぞれ接種して３０℃で培養を行っ
た。これらの菌株の中から１５％ＮａＣｌを含むＲｏｇ
ｏｓａ培地において親株より増殖の速いものを選抜し
た。2) 選択培地：Ｒｏｇｏｓａ培地に１０％（W/V)ＮａＣｌ
とテトラサイクリン２０μｇ／ml（最終濃度）、それに
０．３Ｍスクロースを加えたもの。
本発明はこれによって限定されるものではない。実施例１ ラクトバチルス・プランタラムとペディオコ
ッカス・ハロフィルスの細胞融合株の取得 （１）培養 (i) ラクトバルチス・プランタラムＮＯ．１４株（ｔｅ
ｔ＋，ＮａＣｌ−）保存培地から１白金耳をＧＰＹ培地
（表２）１０mlに接種して、３０℃、１日間培養した。
培養液を同培地に接種し、３０℃、１日間の継代培養を
数回繰り返すことにより生育を安定させ、これを前培養
とした。次に、前培養液０．３mlを同培地３０mlに接種
して、３０℃、１０時間培養して本培養とした。 (ii)ペディオコッカス・ハロフィルスＮＯ．８株（ｔｅ
ｔ−，ＮａＣｌ＋）保存培地１白金耳を、ＮａＣｌ７％
（W/V)添加したＲｏｇｏｓａ培地（表３）１０mlに接種
して、３０℃、２日間培養した。培養液を同培地に接種
し、３０℃、２日間の継代培養を数回繰り返すことによ
り生育を安定させ、これを前培養とした。次に、前培養
液０．３mlを同培地３０mlに接種して、３０℃、２４時
間培養して本培養とした。 表３ Ｒｏｇｏｓａ培地 トリプチケース １０ｇ 酵母エキス ５ｇ トリプトース ３ｇ Ｋ２ＨＰＯ４ ３ｇ ＫＨ２ＰＯ４ ３ｇ クエン酸アンモニウム ２ｇ 塩溶液＊ ５ml Ｔｗｅｅｎ ８０ １ｇ 酢酸ナトリウム・３Ｈ２Ｏ １．７ｇ グルコース ２０ｇ システイン（塩酸塩） ０．２ｇ （寒天 １５ｇ） 蒸留水 １０００ml （ｐＨ６．８） ＊塩溶液：ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ １１．５ｇ， ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．６８ｇ， ＭｎＳＯ４・ｎＨ２Ｏ ２．４ｇを水１００mlに溶解したもの なお、上記(i) 、(ii)における（ｔｅｔ＋，ＮａＣｌ
−）および（ｔｅｔ−，ＮａＣｌ＋）は次のような内容
を意味するものである。 テトラサイクリン(20 μｇ／ml) ＮａＣｌ(10%(W/V)) ラクトバチルス・ プランタラムNo.14 株 ＋（耐性） −（感受性） ペディオコッカス・ ハロフィルスNo.8株 − ＋ （２）プロトプラスト化 本培養終了菌体を遠心分離（７５００×ｇ／５min ／４
℃）し、集菌を行った。常法に従って集菌した菌体をＴ
ＭＳ緩衝液（表４）で２回洗浄を行い、洗浄後、同緩衝
液を用いてＯ．Ｄ．660nm の値が、０．７になるように
菌懸濁液を調整した。次に、菌懸濁液４mlと酵素溶液１
mlを加え、全量を５mlとした。酵素反応は、３５℃、微
弱振とうで行った。また酵素を加えることによって反応
開始とし、酵素の反応時間は、それぞれ６０分とした。
それぞれの酵素濃度は表５に示す。 表５ プロトプラスト化に用いた酵素と酵素濃度* L.plantarum NO.14 α‐amylase 50μｇ／ml N-acetyl-muramidase 10μｇ／ml P.halophilus NO.8 α‐amylase 250μｇ／ml lysozyme 25μｇ／ml ＊：最終濃度 プロトプラスト化反応後、電気パルス用溶液1)を用いて
２回の洗浄を行った。洗浄後、同溶液を用いてプロトプ
ラスト菌体懸濁液をつくり、２種類の菌体を等量ずつ混
合し細胞融合の試料とした。1) 電気パルス用溶液：０．３Ｍスクロース溶液 （３）融合操作 調整した細胞融合用試料０．２mlを融合チャンバー（島
津製作所製ＦＴＣ−０１）に注入し、そのまま１分間静
置し、以下に示す条件で融合操作を行った。融合操作を
行った後、２分間放置し細胞融合処理菌体を回収した。 （４）細胞融合装置 株式会社島津製作所製：ＳＳＨ−１ 融合チャンバー ：ＦＴＣ−０１ （５）反応条件 以下の条件で融合を行った。 ＦＲＥＱ １．０ＭＨｚ ＶＡＣ（ＰＲＩ） ４０Ｖ ＩＮＩＴＩＡＬ ＴＩＭＥ １２０ｓ ＶＡＣ（ＳＥＣ） ４０Ｖ ＲＥＰＥＡＴ ＩＮＴＥＲＶＡＬ １ｓ ｎ ５ ＶＤＣ ＤＥＣ ＲＡＴＥ １００％ ＦＩＮＡＬ ＴＩＭＥ １ｓ ＶＡＣ ＤＥＣ ＲＡＴＥ １００％ ＴＥＭＰ ＡＭＢ パルス幅 ３０〜３００μ
sec. パルス回数 ５回 電界強度 １．０〜１４．
０ｋＶ／cm （６）再生 選択培地2)に寒天０．８％（W/V)加えたものに融合反応
後のプロトプラスト混合液０．１mlを混釈し、３０℃の
培養器で再生を行わせ、融合株のコロニー形成を行わせ
た。選択固体培地において出現したコロニーを７％Ｎａ
Ｃｌを添加したＲｏｇｏｓａ培地に釣菌し、３０℃で培
養を行い増殖を行わせる。菌体が増殖した培地０．１ml
を同培地１０mlに接種して３０℃で培養を行い、これを
前培養とする。また、同様の操作を行い両親株も前培養
を行った。前培養液０．１mlを７％ＮａＣｌを含むＲｏ
ｇｏｓａ培地１０mlと１５％ＮａＣｌを含むＲｏｇｏｓ
ａ培地１０mlにそれぞれ接種して３０℃で培養を行っ
た。これらの菌株の中から１５％ＮａＣｌを含むＲｏｇ
ｏｓａ培地において親株より増殖の速いものを選抜し
た。2) 選択培地：Ｒｏｇｏｓａ培地に１０％（W/V)ＮａＣｌ
とテトラサイクリン２０μｇ／ml（最終濃度）、それに
０．３Ｍスクロースを加えたもの。
【００１２】実施例２ 選択固体培地において出現したコロニーを７％ＮａＣｌ
を添加したＲｏｇｏｓａ培地に釣菌し、３０℃で培養を
行い増殖を行わせた。続いて、菌体が増殖した培地０．
１mlを同培地１０mlに接種して３０℃で培養を行い、こ
れを前培養とした。また、同様の操作を行い両親株も前
培養を行った。前培養液０．１mlを７％ＮａＣｌを含む
Ｒｏｇｏｓａ培地１０mlと１５％ＮａＣｌを含むＲｏｇ
ｏｓａ培地１０mlにそれぞれ接種して３０℃で培養を行
った。培養を開始してから３時間毎にＯ．Ｄ．660nm の
値を測定しこれを増殖速度とした（図１、図２）。
を添加したＲｏｇｏｓａ培地に釣菌し、３０℃で培養を
行い増殖を行わせた。続いて、菌体が増殖した培地０．
１mlを同培地１０mlに接種して３０℃で培養を行い、こ
れを前培養とした。また、同様の操作を行い両親株も前
培養を行った。前培養液０．１mlを７％ＮａＣｌを含む
Ｒｏｇｏｓａ培地１０mlと１５％ＮａＣｌを含むＲｏｇ
ｏｓａ培地１０mlにそれぞれ接種して３０℃で培養を行
った。培養を開始してから３時間毎にＯ．Ｄ．660nm の
値を測定しこれを増殖速度とした（図１、図２）。
【００１３】実施例３ １３％、１５％、１８％ＮａＣｌを添加したＲｏｇｏｓ
ａ培地に親株であるペディオコッカス・ハロフィルスＮ
Ｏ．８株とＦ−６株、Ａ−９株のそれぞれ前培養した菌
体を等量接種し３０℃で１週間培養を行った。培養終了
の培養液中の乳酸生成量を比較して高塩濃度における乳
酸の生成に関して比較を行った（図３）。
ａ培地に親株であるペディオコッカス・ハロフィルスＮ
Ｏ．８株とＦ−６株、Ａ−９株のそれぞれ前培養した菌
体を等量接種し３０℃で１週間培養を行った。培養終了
の培養液中の乳酸生成量を比較して高塩濃度における乳
酸の生成に関して比較を行った（図３）。
【００１４】実施例４ キュウリを洗浄し、幅約１．５cmの輪切りにした。それ
を食塩を用い塩もみを行い１０分間放置の後十分に水洗
いし、水切りを行った。水切り後のキュウリを２００pp
m の次亜塩素酸溶液に３分間浸漬し、十分に水洗水切り
を行いキュウリ９０ｇに対し最終濃度で塩分１５％（W/
V)の食塩水１００mlを加えた。これに親株ならびに融合
株をそれぞれ１％（V/V)濃度となるように接種し、３０
℃の培養器で培養を行った。対照として菌を接種しない
最終濃度で塩分１５％（W/V)のものを同様に処理を行っ
た。結果は、漬物の状態と漬液の菌体による白濁により
比較した（表６、表７参照）。 表６ 漬け液 におい １５％ＮａＣｌ菌無接種 白濁無し キュウリ特有の青いにおい Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ 白濁無し キュウリ特有の青いにおい Ｐ．ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ 薄く白濁 弱いキュウリのにおい 融合株（Ｆ−６） 白濁 漬物臭
を食塩を用い塩もみを行い１０分間放置の後十分に水洗
いし、水切りを行った。水切り後のキュウリを２００pp
m の次亜塩素酸溶液に３分間浸漬し、十分に水洗水切り
を行いキュウリ９０ｇに対し最終濃度で塩分１５％（W/
V)の食塩水１００mlを加えた。これに親株ならびに融合
株をそれぞれ１％（V/V)濃度となるように接種し、３０
℃の培養器で培養を行った。対照として菌を接種しない
最終濃度で塩分１５％（W/V)のものを同様に処理を行っ
た。結果は、漬物の状態と漬液の菌体による白濁により
比較した（表６、表７参照）。 表６ 漬け液 におい １５％ＮａＣｌ菌無接種 白濁無し キュウリ特有の青いにおい Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ 白濁無し キュウリ特有の青いにおい Ｐ．ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ 薄く白濁 弱いキュウリのにおい 融合株（Ｆ−６） 白濁 漬物臭
【００１５】実施例５ ラクトバチルス・プランタラムＮＯ．１４株、ペディオ
コッカス・ハロフィルスＮＯ．８株、融合株であるＦ−
６株およびＡ−９株の菌体をＲｏｇｏｓａ培地並びに７
％ＮａＣｌ添加Ｒｏｇｏｓａ培地にて培養を行った。培
養菌体を集菌、洗浄を行い希釈をし、１×１０8 cells/
mlに調整した。この調整菌体をスターターとした。次
に、楽京を皮むきし、根を切り取って水洗いした。水切
りした楽京６０ｇとＮａＣｌを添加した蒸留水６０mlを
合わせ最終食塩濃度１５％（W/V)となるように調整を行
った。そこに調整を行った菌体を最終濃度１×１０6 ce
lls/mlとなるように接種し３０℃で発酵させることによ
り試験を開始とした。対照試験区として菌体未接種のも
のを用意し同様の処理を行った。発酵期間は４週間、試
験項目は各々の試験区について乳酸、ｐＨ、乳酸菌数、
一般細菌数の四項目について測定を行った（図４〜７参
照）。
コッカス・ハロフィルスＮＯ．８株、融合株であるＦ−
６株およびＡ−９株の菌体をＲｏｇｏｓａ培地並びに７
％ＮａＣｌ添加Ｒｏｇｏｓａ培地にて培養を行った。培
養菌体を集菌、洗浄を行い希釈をし、１×１０8 cells/
mlに調整した。この調整菌体をスターターとした。次
に、楽京を皮むきし、根を切り取って水洗いした。水切
りした楽京６０ｇとＮａＣｌを添加した蒸留水６０mlを
合わせ最終食塩濃度１５％（W/V)となるように調整を行
った。そこに調整を行った菌体を最終濃度１×１０6 ce
lls/mlとなるように接種し３０℃で発酵させることによ
り試験を開始とした。対照試験区として菌体未接種のも
のを用意し同様の処理を行った。発酵期間は４週間、試
験項目は各々の試験区について乳酸、ｐＨ、乳酸菌数、
一般細菌数の四項目について測定を行った（図４〜７参
照）。
【００１６】
【発明の効果】本発明融合微生物は、通常の微生物では
生育し難い高塩濃度下において旺盛な生育を示す特性を
有している。この本発明融合微生物を、通常の微生物で
は生育が難しい高塩濃度下において発酵用原料の発酵時
にスターターとして使用することにより、高塩濃度下に
おける旺盛な乳酸発酵が可能となる。従って、高塩濃度
下での発酵であるため、加熱あるいは殺菌剤などによる
原料中の微生物の殺菌の必要がない、全く新しい乳酸発
酵食品を得ることができる。本発明はまた、味噌、醤
油、アンチョビー等の塩分濃度の高い発酵食品に応用す
ることが可能である。
生育し難い高塩濃度下において旺盛な生育を示す特性を
有している。この本発明融合微生物を、通常の微生物で
は生育が難しい高塩濃度下において発酵用原料の発酵時
にスターターとして使用することにより、高塩濃度下に
おける旺盛な乳酸発酵が可能となる。従って、高塩濃度
下での発酵であるため、加熱あるいは殺菌剤などによる
原料中の微生物の殺菌の必要がない、全く新しい乳酸発
酵食品を得ることができる。本発明はまた、味噌、醤
油、アンチョビー等の塩分濃度の高い発酵食品に応用す
ることが可能である。
【図１】本発明細胞融合株および親株の７％ＮａＣｌ添
加Ｒｏｇｏｓａ培地における生育性を示す説明図。
加Ｒｏｇｏｓａ培地における生育性を示す説明図。
【図２】本発明細胞融合株および親株の１５％ＮａＣｌ
添加Ｒｏｇｏｓａ培地における生育性を示す説明図。
添加Ｒｏｇｏｓａ培地における生育性を示す説明図。
【図３】本発明細胞融合株および親株の高塩濃度培地中
における乳酸の生成量を示す説明図。
における乳酸の生成量を示す説明図。
【図４】本発明細胞融合株および親株の楽京発酵試験に
おける発酵液のｐＨの経時変化を示す説明図。
おける発酵液のｐＨの経時変化を示す説明図。
【図５】本発明細胞融合株および親株の楽京発酵試験に
おける発酵液中の乳酸量の経時変化を示す説明図。
おける発酵液中の乳酸量の経時変化を示す説明図。
【図６】本発明細胞融合株および親株の楽京発酵試験に
おける発酵液中の各乳酸菌数の経時変化を示す説明図。
おける発酵液中の各乳酸菌数の経時変化を示す説明図。
【図７】本発明細胞融合株および親株の楽京発酵試験に
おける発酵液中の一般細菌数の経時変化を示す説明図。
おける発酵液中の一般細菌数の経時変化を示す説明図。
フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｎ 15/03 //(Ｃ１２Ｎ 15/03 Ｃ１２Ｒ 1:25 7804−4Ｂ 1:10） (72)発明者 森 田 昭 博 埼玉県春日部市大字赤沼字堂面410 株式 会社桃屋研究所内
Claims (8)
- 【請求項１】ラクトバチルス属に属する菌株とペディオ
コッカス・ハロフィルスに属する菌株とを融合させるこ
とにより形成され、高塩濃度の環境中において融合前の
両菌株よりも旺盛な生育を示す、融合微生物。 - 【請求項２】高塩濃度が、少なくとも塩化ナトリウムを
約１０％〜２０％(W/V) 含むものである、請求項１記載
の融合微生物。 - 【請求項３】ラクトバチルス属に属する菌株がラクトバ
チルス・プランタラムである、請求項１または２記載の
融合微生物。 - 【請求項４】融合微生物がＦ−６株である、請求項３記
載の融合微生物。 - 【請求項５】融合微生物がＡ−９株である、請求項３記
載の融合微生物。 - 【請求項６】請求項１〜５に記載の融合微生物の少なく
とも１種を発酵原料の発酵時にスターターとして接種
し、他の微生物が旺盛に生育できずかつその融合微生物
にとっては増殖に適した高塩濃度下で、発酵物中の他の
微生物の繁殖を抑制しながら発酵を行うことを特徴とす
る、乳酸発酵食品の製造法。 - 【請求項７】高塩濃度が、少なくとも塩化ナトリウムを
約１０％〜２０％(W/V) 含むものである請求項６記載の
製造法。 - 【請求項８】請求項６または７に記載の製造法によって
得られる乳酸発酵食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24038091A JPH0549471A (ja) | 1991-08-27 | 1991-08-27 | 新規微生物、ならびにそれを用いて製造する乳酸発酵食品およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24038091A JPH0549471A (ja) | 1991-08-27 | 1991-08-27 | 新規微生物、ならびにそれを用いて製造する乳酸発酵食品およびその製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0549471A true JPH0549471A (ja) | 1993-03-02 |
Family
ID=17058631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24038091A Pending JPH0549471A (ja) | 1991-08-27 | 1991-08-27 | 新規微生物、ならびにそれを用いて製造する乳酸発酵食品およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0549471A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007077054A (ja) * | 2005-09-13 | 2007-03-29 | Momoya Co Ltd | ラクトバチルス・プランタラムの菌体を有効成分とする体脂肪率低減剤 |
| JP2007126365A (ja) * | 2005-11-01 | 2007-05-24 | Momoya Co Ltd | ラクトバチルス・プランタラムの培養物を有効成分とする抗アレルギー剤 |
| CN111996143A (zh) * | 2020-08-27 | 2020-11-27 | 松刚(福建)生物工程有限公司 | 一株耐高温植物乳杆菌及其制备方法 |
| US12503018B2 (en) | 2022-10-27 | 2025-12-23 | Hyundai Transys Inc. | Vehicle foldable seat |
-
1991
- 1991-08-27 JP JP24038091A patent/JPH0549471A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007077054A (ja) * | 2005-09-13 | 2007-03-29 | Momoya Co Ltd | ラクトバチルス・プランタラムの菌体を有効成分とする体脂肪率低減剤 |
| JP2007126365A (ja) * | 2005-11-01 | 2007-05-24 | Momoya Co Ltd | ラクトバチルス・プランタラムの培養物を有効成分とする抗アレルギー剤 |
| CN111996143A (zh) * | 2020-08-27 | 2020-11-27 | 松刚(福建)生物工程有限公司 | 一株耐高温植物乳杆菌及其制备方法 |
| CN111996143B (zh) * | 2020-08-27 | 2022-11-15 | 松刚(福建)生物工程有限公司 | 一株耐高温植物乳杆菌及其制备方法 |
| US12503018B2 (en) | 2022-10-27 | 2025-12-23 | Hyundai Transys Inc. | Vehicle foldable seat |
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