JPH05500962A

JPH05500962A - 硫酸エステル基を有するヘキサペプチド

Info

Publication number: JPH05500962A
Application number: JP3501490A
Authority: JP
Inventors: ロザマンド，ジエイムズ・ドナルド
Original assignee: アストラ・アクチエボラーグ
Priority date: 1989-11-27
Filing date: 1990-11-16
Publication date: 1993-02-25
Also published as: DK0495013T3; IL96465A; IL96465A0; ATE119544T1; FI922404L; NZ236167A; HU211694A9; ZA909415B; NO922094D0; PT95996A; AU644128B2; HU00168A9; DE69017704T2; IE904239A1; EP0495013B1; WO1991008225A1; IE66837B1; PT95996B; NO922094L; KR927003630A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】硫酸エステル基を有するヘキサペプチド本出願は１９８９年１１月２７日出願の同時係属の米国出願第０７／４４１２７５号の一部継続出願である。

本発明は摂食抑制性質を有し、かつ胆のうの萎縮を刺激することのできる、硫酸エステル含有のへキサペプチドに関する。

発明の背景これらのペプチドは６個のアミノ酸を有する。それらは全て、摂食抑制性質を有することが知られているペプチド（例えば構造：　Ａｓｐ　−Ｔｙｒ（Ｓｏ、Ｈ）　−ｌｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−１ｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｎ［Ｉ、を有するＣ（Ｊ−８、および構造：Ｇｌｐ−Ｇｌｎ　−Ａｓｐ　−Ｔｙｒ（ＳＯ，Ｈ）　−Ｔｈｒ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−ｌｅｔ　−Ａｓｐ　−Ｐｈｅ−ＮＨ，を有するセルレチド）とは構造を異にする。本発明のペプチドは天然には見出されず、むしろ合成されなければならない。摂食抑制性質を有するいくつかの合成ペプチド、例えばヨーロッパ特許出願第８６１１７６１２号および第８７１１７０９６号に開示されたペプチドが知られている。本発明のペプチドはこれらとは、そのＮ−末端硫酸化チロジンが硫酸化ヒドロキシフェニル酢酸により置換されている点において相違している。

詳細な説明本発明により式ＩＬｅｕＳｌｅＬｅｕＳＰｒｏ、　Ｉｌｅ、　Ｍｅｌｌｅ、ＡｌａまたはＬｙｓであり；ＧはＧｌｙＳＤＡｌａ、　Ｐｒｏ、＾ｌａ、βＡｌａまたはＳａｒであり：ＷはＴｒｐＳＭｅＴｒｐ、ＡｌａまたはＮａｌであり；ＸはＭｅｔｌｌｌｅＭｅｔＳＭｅｔｏ、　Ａｈｘ、　ｌ１ｅＡｈｘ、　Ｌｅｕ、菖ｅＬｅｕ。

Ｐｒｏ、　Ｉｌｅ、　Ｍｅｌｌｅ、　ＡｌａまたはＬｙｓであり；ＪはＡｓｐＳＤＡｓｐ、　ＭｅＡｓｐ、ＡｌａまたはＡｓｎであり；ＦＩは（Ｓ）−ＮＨｌ（Ｒ）−ＮＵ、（Ｓ）−ＲＩＮまたは（Ｒ）−Ｒ”Ｎであり；Ｆ２はＨ，Ｃ１１１１Ｏｒ、Ｆ、　ＮＯｌ、ＮＵ２、ＲｓまたはＯＲ４であり；ＺはＮＵ２、ＮＨＲ’またはＮＲ５Ｒ’であり：ｇｌ、　Ｒ’ｌ、Ｒ３、Ｒ’オｃＪ−ヒＲ’ハＣｌ−５−７１ＬｔキＪＩｉテアリ；　ソしてＲ４はＨまたはＣ１〜６−アルキルである〕を有する化合物およびその製薬的に許容しつる塩が提供される。

また、本発明により肥満の予防または治療方法も提供される。それはそのような状態を患う哺乳動物に式■の化合物またはその製薬的に許容しつる塩の治療上有効な量を投与することからなる。

式■の好ましい化合物は式中、Ｍがｌｅｔ、＾ｈｘ、　Ｌｅｕ、　ＡｌａまたはＩｌｅ、好ましくはｌｅｔ。

＾ｈｘ、　ＡｌａまたはＩｌｅであり；ＧがＧｌｙまたはＤＡｌａ、好ましくはｃｔｙであり；ＷがＴｒｐであり：ＸがＭｅｔ、　Ａｈｘ、　ＬｅｕまたはＩｌｅ、好ましくは１ｌｅｔまたはＡｈｘであり：ＪがＡｓｐであり：Ｆｌが（Ｓ）−Ｎｌｌまたは（Ｓ）−ＲＩＮであり；Ｆ２がＨ，ＮＯ２、Ｒ３またはＯＲ４、好ましくはＨまたはＯＲ’であり；ＺがＮ■。

である化合物またはその製薬的に許容しつる塩である。

より好ましい化合物のサブグループはｇｌ、　Ｒ１またはＲ４がメチルを示す化合物である。

（Ｒ）および（Ｓ）は隣接メチン炭素原子についての絶対配置を意味する。

全ての光学活性アミノ酸は、特記しない限りＬ−配置である。

１［ｐａ（ＳＯＪ）は式式！の製薬的に許容しつる塩としては塩基付加塩がある。これらには有機および無機の両塩基例えばアンモニア、水酸化ナトリウム、水酸化バリウム、水酸化テトラエチルアンモニウム、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン等から誘導される塩がある。

簡略化のために、式Ｉのペプチドは例えばＨｐａ（ＳＯｓＨ）　−１１ｅｔ−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ｎｅｔ　−Ａｓｐ　−Ｐｈｅ　−Ｗｒｉｔとして表すことができ、これは式中Ｍが菖ｅｔ、　Ｇがｃｉｙ。

ＷがＴｒｐＳＸが１ｌｅｔＳＪが＾’ｐｓ　ｐｌが（Ｓ）−ＮｌｌＳＦ”がＨそして２がＮＨ！である式■の化合物を示す。

アミノ酸、ペプチド、保護基、活性基等を本明細書および請求の範囲中で記号により示す場合には、Ｉ　ＵＰＡＣおよびＩＵＢにより定義されているか、または本技術分野で使用されている慣用の記号が用いられる。記号の例は下記に示すとおりである。

Ａｂｕ　２−アミノ酪酸Ａｈｘ　２−アミノヘキサン酸Ａｉｂ　２−アミノイソ酪酸Ａｌａ　アラニンＡｒｇ　アルギニンＡｓｎ　アスパラギンＡｓｐ　アスパラギン酸 βＡｓｐ　β−アスパラギン酸Ｂ　ｏ　ｃ　ｔｃｒｔ−ブチルオキシカルボニルＢｒＣＴ１１−Ｐａ間　４−（ブロモメチル）フェニルアセトアミドメチルＣｙｓ（Ｍｅ）　Ｓ−メチルシスティンＤＡｌａ　Ｄ−アラニンＤＡｈｘ　Ｄ、２−アミノヘキサン酸ＤＡｓｐ　Ｄ−アスパラギン酸ＤＭｅｔ　Ｄ−メチオニンＤＰｈｅ　Ｄ−フェニルアラニンＤＰｈｅ−ＮＨ，Ｄ−フェニルアラニンアミドＤＴｒｐ　Ｄ−）リプトファンＤＴｙ　ｒ　Ｄ−チロシンＥｔＰｈｅ　Ｎ−エチルフェニルアラニンＥｔＰｈｅ−ＮＵ、　Ｎ−エチルフェニルアラニンアミドＦｍｏｃ　９−フルオレニルメチルオキシカルボニルＧｉｎ　グルタミンＧｌｕ　グルタミン酸ｃｔｙ　グリシンＨｉｓ　ヒスチジンＨｐａ　４−ヒドロキシフェニル酢酸Ｈｐａ（ＳＯｓＨ）　Ｏ−スルホ−４−オキシフェニルアセチルｌｉｅ　イソロイシンＬｅｕ　ロイシンＬｙｓ　リジン１１ｅＡｈｘ　Ｎ−メチル−２−アミノへキサン酸墓ｅＡｓｐ　Ｎ−メチルアスパラギン酸ＭｅＬｅｕ　Ｎ−メチルロイシン１１ｅ１１ｅ　Ｎ−メチルイソロイシン１１ｅＭｅｔ　Ｎ−メチルメチオニンＭｅＰｈｅ　Ｎ−メチルフェニルアラニン１１ｅＰｈｅ−Ｎｉｌ、　Ｎ−メチルフェニルアラニンアミドＭｅｔ　メチオニンＭｅｔｏ　メチオニンスルホキシドＭｅＴｒｐ　Ｎ　−Ａ−メチルトリプトファン１１ｅＴｙｒ　Ｎ−メチルチロシンＭｅＴｙｒ（菖ｅ）　Ｎ、　０−ジメチルチロシンＭｅＴｙｒ（ｌｉｅ）−ＮＨ，Ｎ、０−ジメチルチロシンアミドＭ　ｏ　ｘ　メトキシニンＮａｌ　３−（２−ナフチル）アラニンＯＢｔ　１−ベンゾトリアゾリルエステル０ＣＲ１−Ｐａ■　４−オキシメチルフェニルアセトアミドメチルＯ３ｕ　スクシンイミジルオキシエステルＯｔ　Ｂ　ｕ　ｔｅｒｔ−ブチルエステルＰｈｅ　フェニルアラニンＰｈｅ−Ｎｔｌｌ　フェニルアラニンアミドＰｈｅ−ＮＨＥｔ　フェニルアラニンエチルアミドＰｈｅ−ＮｔｌＭｅ　フェニルアラニンメチルアミドＰｈｅ−Ｎ（Ｅｔ）ｚ　フェニルアラニンジエチルアミドＰｈｅ−Ｎ（Ｍｅ）　ｚ　フェニルアラニンジメチルアミドＰｈｅ−ＯＨフェニルアラニン酸Ｐｈｅ（４−Ｃ／）　３−　（４−クロロフェニル）アラニンＰｈｅ（４−（Ｊ）−Ｎｕｔ　３−　（４−クロロフェニル）アラニンアミドＰｈｅ（４−Ｍｅ）　３−　（４−メチルフェニル）アラニンＰｈｅ（４−Ｍｅ）−ＮＪ　３−　（４−メチルフェニル）アラニンアミドＰｈｅ（４−ＮＯｘ）　３−　（４−二トロフェニル）アラニンＰｈｅ（４−ＮＯｔ）−ＮＨ２３−（４−ニトロフェニル）アラニンアミドＰｈｅ（４−Ｎｕｓ）　３−　（４−アミノフェニル）アラニンＰｈｅ（４−Ｎｌｌｚ）−Ｎｆ１２　３−　（４−アミノフェニル）アラニンアミドＰｒｏ　プロリンｒｅｓｉｎ　ポリスチレンＳａｒ　サルコシンＳｅｒ　セリンｔ　Ｂ　ｕ　ｔｅｒｔ−ブチルＴｒｐ（５−Ｆ）　５−フルオロトリプトファンＴｒｐ（６−Ｆ）　６−フルオロトリプトファンＴｒｐ（）ｌｅ）　１−メチルトリプトファンＴｙｒ　チロシンＴｙｒ−Ｎｕｔ　チロシンアミドＴｙｒ（菖ｅ）　Ｏ−メチルチロシンＴｙｒ（菖ｅ）−ＮＨｚ　Ｏ−メチルチロシンアミドＴｙｒ（ＳＯｓＨ）　０− スルホ、チロシン本発明の新規硫酸エステルペプチドおよびそのための新規中間体は、本技術分野でよく知られた方法により製造することができる。

本発明により式Ｉの化合物またはその製薬的に許容しつる塩の製造方法が提供される。それはａ）式■ Ｍ、Ｇ、Ｗ、Ｘ、Ｊ、Ｆ電、Ｆ２およびＺは前述の定義を有し、Ｆ４は、ＭまたはＸがＬｙｓを示す場合にはアミノ保護基を示し、Ｐａは、Ｊが＾ｓｐ、Ｄ−Ａｓｐまたはｌｉｅ　−Ａｓｐを示す場合にはカルボキシル保護基を示し、Ｐｎは、Ｆ２がＮＵ、または０■を示す場合にはヒドロキシル保護基またはアミノ保護基を示し、そしてＰｏは、Ｚまたはカルボキシル保護基を示す〕の化合物を硫酸化し、ｂ）対応する式■ （式中、ＭＳＧＳＷ％ＸＳＪ　１Ｆｌ、Ｆ！、Ｐｌ、Ｐａ、　Ｐ、およびＰｃは前述の定義を有するが、ただしＰ、、　Ｐ、、ＰｏおよびＰＣのうち少なくとも１つは保護基を示す）の化合物から１つ以上の保護基を除去し、次に所望または必要により、得られた式１の化合物をその製薬的に許容しつる塩に変換するかまたはその逆を行うことからなる。

前記方法ａ）において、硫酸化剤は例えば二酸化硫黄またはその錯体例えば二酸化硫黄ピリジンであるのがよい。

硫酸化は極性非プロトン性溶媒例えばジメチルホルムアミドまたはピリジン中で実施するのが特に好ましい。該反応は過剰の、例えば１０〜４０モル過剰の硫酸化剤を用いて実施するのが好ましい。

前記方法ａ）およびｂ）において、ペプチド用の保護基およびそれらの除去方法は本技術分野で、例えばＴ、ＷＧｒｅｅｎｅ、　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ。

１Ｆｉ１ｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（１９８１）中でよく知られている。

保護基の選択およびそれらの除去に用いる方法はとりわけ、式■のペプチドの製造に用いられる合成方法およびペプチド中のアミノ酸による。

適当なアミノ保護基としては例えば、水素化分解または酢酸中の臭化水素により容易に除去されつるベンジルオキシカルボニル：ペプチドを冷トリフルオロ酢酸中に放置することにより除去されるｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）　；希ピペリジン（ＤＭＦ中の２０％）での処理により除去されうるＦｍｏｃ；（４ −メトキシベンジル）オキシカルボニルおよび２−ニトロフェニルスルフィニルがある。ＢｏｃおよびＦ■ＯＣ基が特に好ましい。

Ｐわが表すことのできる適当なカルボキシル保護基としては例えば、メチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジルおよび４−メトキシベンジルがある。特に好ましいのはベンジルであるが、これはアルコール性アミンまたはアンモニアでの処理によって容易に除去されうる。同様の基を用いて、チロシンにおけるフェノール基、リジンにおけるアミノ基、置換フェニルアラニンにおけるヒドロキシルまたはアミノ基およびアスパルテートにおけるカルボキシル基を保護することができる。

ペプチドが固相技法、例えばペプチドのカルボキシル末端が固体樹脂に結合される技法を用いて製造される場合には、該樹脂へのペプチドの結合がカルボキシル保護基として作用する。ペプチジル−樹脂結合の開裂は式■のカルボキシル末端を脱保護する。本発明の目的生成物である硫酸エステル含有ペプチドはカルボキシル末端アミドであるので、ペプチド鎖を樹脂に結合させる化学結合は、適当な試薬によるその開裂により容易にアミドが得られるような結合でなければならない。硫酸エステル基の強酸（例えば液体フッ化水素）に対する不安定性のために、ペプチジル−樹脂結合はより弱い酸（例えば、トリフルオロ酢酸、ＴＦ＾による簡単な処理）および／またはヌクレオフィル（例えばアンモニア、アミン、水酸化物およびアルコキシド）のいずれかを用いて開裂するの適当な樹脂誘導体としてはオキシメチル−ポリスチレン、４−（オキシメチルフェニル）　−（ＣＨｚ）ｎ−アミノメチル−ポリスチレン（ｎ＝０〜３）および４−（オキシメチルフェニル）−オキシメチル−ポリスチレンを挙げることができる。同様に置換されたポリアクリルアミド樹脂は、上記のポリスチレンに基づく樹脂のように同様に十分好都合である。“ポリスチレン”の用語は少量、通常は１％の不飽和モノマー例えばジビニルベンゼンとのコポリマーを包含する。

ペプチドアミドの生成には４−（オキシメチルフェニル）　ＣＨ２Ｃ０−アミノメチル−ポリスチレン〔以下、４−（オキシメチルフェニル）アセトアミドメチル−ポリスチレンまたは０ＣＨ１−ＰＣ鳳−樹脂と称する〕が特に好ましい。

この結合は必要に応じたアンモニアのメタノール溶液、アルキルアミンまたはジアルキルアミンとの反応により容易に開裂され得て、式■のペプチドが得られる。

式■のペプチドは、式■の対称する保護ペプチドの硫酸化によって製造することができる。

式■の未保護ペプチドは式■の対応するペプチドの脱保護により製造することができる。

式■の新規保護ペプチドおよびそのための新規中間体は、本技術分野でよ（知られた方法によって製造することができる。例えば、それらは個々のアミノ酸を固相樹脂上に段階的に結合させるか、あるいはまたアミノ酸のグループを固相樹脂上に結合させて所望のペプチジル−樹脂中間体を得ることにより製造できる。このような付加は知られているように、アミノ酸のアミノ基またはアミノ酸のグループを例えばそのｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）誘導体または９ −フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）誘導体に変換することにより保護し、次にかかるアミノ酸またはアミノ酸のグループのカルボキシル基を例えばその１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１１０ｓｕ）エステル誘導体に変換することにより活性化させて遂行される。次にこのような保護された活性化中間体をアミノ酸樹脂、または遊離アミノ基を有するペプチジル−樹脂と反応させ、そのペプチド鎖を延長して式■のペプチジル−樹脂が得られる。

式■のＣ−末端アミノ酸はいくつかの手法でＯＣＲ，−Ｐａｓ−樹脂に結合されつる。（ａ）例えば、Ｂｏｃ−保護されたＮ−メチルフェニルアラニンが適当な４−（ブロモメチル）フェニルアセテートエステル（例えばフェナシルエステル）と反応しついでさらに反応進行するとＢｏｃ　−ＭｅＰｈｅ　（４−オキシメチルフェニル）酢酸が得られ、それをアミノメチル−ポリスチレンに結合させるとＢｏａ　−璽ｅＰｈｅ−（４−オキシメチルフェニルルポリスチレン（Ｂｏｃ −　ＭｅＰｈｅ−　ＯＣＲ．−　Ｐａｗ−樹脂）を得ることができる。（ｂ）あるいはまた、４−（ブロモメチル）フェニル酢酸をアミノメチルポリスチレンと結合させると４−（ブロモメチル）フェニルアセトアミドメチルポリスチレン（ＢｒＣＨ，−Ｐａ−−樹脂）が得られ、されをＢｏｃ　−ＩｅＰｈｅ　−ＯＨのセシウム塩と反応させるとＢｏｃ　−Ｐｈｅ　−０Ｃｔｌ。

−Ｐａ閣−樹脂が得られる。

適当な活性化基としては、アミノ酸の酸官能基をより反応性にさせる基例えば酸クロリド、混合および対称無水物、カルボジイミド（例えば、ジシクロへキシルカルボジイミド、ＤＣＣ）との反応生成物および活性エステル（例えば、ＨＯＢｔ、　ＨＯＳｕ、　２−または４−ニトロフェノールおよび２，４．５−）ジシクロフェノールから誘導されるエステル）のいずれかの組み合わせを挙げることができる。ＤＣＣ並びにＨＯＢｔおよびＨＯＳｕの各エステルの使用は収率、副生成物の欠除およびその結果による精製の容易性の見地から特に好ましい。

本発明の硫酸化ペプチドアミドの固相合成にはペプチド自動シンセサイザーを用いることができる。硫酸エステル含有の式Ｉのペプチドは、慣用手法で脱塩および精製することができる。例えば、生成物はＴｒｉｓａｃｒｙｌ　ＭＤＥＡＥｌＤＥＡＥ−セルロース等の使用によるイオン交換クロマトグラフィー、５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｌｌｌ−２０，５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ−２５等の使用による分配クロマトグラフィー、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２，０ＤＳ−シリカゲル等の使用による逆相クロマトグラフィー、シリカゲル等の使用による順相クロマトグラフィーまたは高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製することができる。

アミノメチル−樹脂またはペプチジル−０ＣＪ　−Ｐａｗ　−樹脂（利用しつる窒素　１ミリモル）上への結合、脱保護、載のとおりである。

表１硫酸化ペプチドアミドの固相合成のプロトコルＩ　ＤＣＭ　洗浄　１分２　工程３．５または８に進む　−　−ＤＣＣ中における保護アミノ酸（ま　ＤＣＣ／ＨＯＢｔたは保護ジペプチド、３　ｍｍｏｌｅ）、　の結合ＨＯＢＴ（４，５ｍ＋５ｏｌｅ）およびＤＣＣ（３■醜ａｌｅ）の混合物を加える４　工程１０．１６．２１または２６に進む　−　−ジペプチド、３１ｓ＋ｏｌｅ）および　化したＤＣＣ／ＨＯＢｔ（４，５ｍｍｏｌｅ）を、次に２ｈｌ　ｌｌ０Ｂｔの結合ＤＣＭ中のＤＣＣ（３＋ｎｏｌｅ）を加える６　２−プロパツール　洗浄　１分７　工程ｌ０１１６．２１または２６に進む　−−物（３ｍｍｏｌｅ）を加える９　工程１０．１６．２１または２６に進む　−　−１０ＤＣＭ　洗浄　１分１１　４９：Ｉ　ＴＦ＾／アニソール／　ＤＣＩＩで　Ｂｏｃおよび　３０分処理する　ｔＢｕの除去１２　ＤｃＭ　洗浄　１分１３　１　：　１９　ＤＩＥＡ／ＤＣＭで処理する　中和する　１分１４　０ＣＭ　洗浄　１分１５　工程１０．１６．２１または２６に進む　−−１６ＤＭＦ　洗浄　１分１７　１：４　ピペリジン／ＤＭＦで処理　Ｆ璽ｏｃの除去　３分する１８　１：４　ピペリジン／ＤＭＦで処理　Ｆ■ＯＣの除去　７分する１９　ＤＭＦ　洗浄　１分２０　工程１０．１６．２１または２６に進む　−−２１ＤＭＦ　洗浄　１分２２　１：２　ピリジン／ＤＩＩＦ　洗浄　１分２３　６０ｍ１の１＝２　ピリジン／ＤＭＦ中　硫酸化　２０〜２４の二酸化硫黄ピリジン錯体（４０時間 −謹ｏ１ｅ）を加える２４　ＤＭＦ　洗浄　１分２５　工程１０．１６．２１または２６に進む　−−２６メタノール　洗浄　１分２７　アンモニア飽和の（−２０℃）メタ　樹脂の開裂　２〜５日ノールまたは２０％メタノール性アミン（２５０■１）２８　メタノール　洗浄　１分２９　工程２７〜２８からの濾液を合一し　単離　一ついで濃縮する３０　残留物を、ＡｍｂｅｒＬｉｔｅ　ＸＤ＾−２精製　−（Ｒｏｈｍ　ａｎｄ　Ｈａｓｓ、２．５Ｘ６０ｃｍ。

アンモニア中のメタノール勾配０．１Ｍ）、Ｔｒｉｓａｃｒｙｌ　Ｍ　ＤＥＡＥ（ＬＫＢＩｎｃ、、　２．５Ｘ４７ｃｍ、炭酸水素アンモニウム勾配）、および／またはＰ−４００ＤＳ−３（Ｗｈａｔｍａｎｎ、　４．８Ｘ　５０ｃ４　酢酸アンモニウム中におけるメタノール勾配０．２％）のカラム上でクロマトグラフィー処理する前記の各反応を固相成分（樹脂）なしで実施する類似の操作は技術上よ（知ら杆ており、しかも大規模製造によ（適している〔例えば米国特許第３．８９２．７２６号を参照さ本発明のペプチドは哺乳動物において摂食活性を抑制しつる能力を有する。その結果、それらは肥満の予防および治療において有用性を有する。

摂食抑制作用はラットで、以下のようにして証明することができる。

雄Ｓｐｒａｑｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（重量３００〜３５０９）を個別にカゴの中に入れ、１２時間の明、暗サイクルに維持し、次に暗サイクルの３時間中は摂食させるが、その３時間に先立つ２１時間は摂食させないように、少な（とも１４日間訓練する。調査日に、ラットの腹腔内に塩水（対照）または供試化合物（塩水中に溶解させた二通常はラット重量の＆ｇ当たり供試化合物０．３〜３００ｇの濃度）を投与する。塩水または供試化合物投与の１０分後に食物を導入する。供試化合物は、食物を与えてから０．５時間または３時間のいずれかで終了する摂食期間中に試験群が塩水対照よりもはるかに少ない食物を消費する場合には活性であると考えられる。

本発明のペプチドは哺乳動物において胆のう萎縮を刺激しつる能力を有する。すなわち、それらはまた胆のうのＸ線検査における診断助剤としても有用である。

診断助剤としての胆のう萎縮剤の使用は、十分に確立された医療手法である。

本発明のペプチドはコレシストキニンレセプターに結合しつる能力を有する。末梢組織および脳組織中にある別個のＣＣＫレセプターは、それぞれＣＣＫ　−ＡおよびＣＣＫ　−Ｂレセプターとして分類されている。ＣＣＫレセプターにおけるアゴニスト相互作用とアンタゴニスト相互作用との間の差異もまた機能アッセイにより決定されつる。末梢組織中にあるＣ（Ｊ−Ａレセプターの活性化は膵臓分泌、腸運動性および胆のう萎縮の抑制に重要な役割を果たす。

すなわち、ＣＣＫ　−Ａレセプターでアゴニスト活性を有する化合物は肥満および運動性疾患の治療において効能を有し、ＣＣＩＣ−Ａレセプターでアンタゴニスト活性を有する化合物は胃腸疾患例えば過敏性腸症候群、潰瘍、膵臓および胃の過剰分泌、急性膵炎および運動性疾患において効能を有することができる。

インビトロアッセイラット膵臓膜にあるＣＣＫ−Ａレセプターに結合しつる能力についての供試化合物の評価は、Ｃｈａｎｇ、Ｌｏｔｔｉ。

Ｃｈａｎ　ａｎｄ　Ｋｕｎｋｅｌ　（ｌｌｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、　３０：２１２−２１６、　１９８６）の手法に従って、ラット膵臓へのＢｏｌｔｏｎＨｕｎｔｅｒ　’　”　Ｉ　−ＣＣＫ−８および３１１−Ｌ３６４７１８の結合に対して測定した。

ＣＣＫ−Ｂ結合ラット大脳皮質膜にあるＣＣＫ−８−Ｂレセプターに結合しうる能力についての供試化合物の評価は、Ｃｈａｎｇａｎｄ　Ｌｏｔｔｉ（Ｓａｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　Ｖｏｌ、　８３．４９２３−４９２６）　（７）手法ｉ、：従ッテ、Ｉ”ｌ−ＣＣｌ３　に対しｒ測定り。

た。

ＣＣＫ　−Ａアゴニスト／アンタゴニスト活性についての機能アッセイラット膵臓組織断片（腺房細胞）によるアミラーゼ放出を抑制または刺激しつる能力についての供試化合物の評価は、Ｌｉｎ　ｅｔ　ａｌ、（Ｊ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍ、　ａｎｄ　Ｅｘｐｅｒ、　Ｔｈｅｒａｐｅ−ｕｔｉｃｓ、１９８６．　７２９−７３４）およびＪｕｎｇ　（Ｃ１ｉｎｉｃａ　Ｃｈｅｍａ＾ｅｔａ、１９８０．１００．７−１１）の手法に従って測定した。

式Ｉの化合物およびその製薬的に許容しつる塩は、いくらかの薬理学的モデルにおいて式■の化合物と類似の構造を有する化合物と比較した場合、より多（の効能があり、より強力であり、より長期にわたって作用し、特に酵素分解に対してより安定であり、より選択性であり、より少ない毒性であり、より少ない副作用例えば嘔吐の欠除が得られ、より容易に吸収され、より速やかに作用しまたはその他の有利な作用を有する。

本発明によりまた、肥満治療用医薬の製造における式Ｉの化合物およびその製薬的に許容しつる塩の使用も提供される。

本発明によりまた、製薬的に許容しつる補助剤、希釈剤または担体と組み合わせて、式ｌの化合物またはその製薬的に許容しつる塩（好ましくは８０重量％以下、より好ましくは５０重量％以下）を含有する医薬組成物も提供される。

式Ｉのペプチドまたはその製薬的に許容しうる塩は種々の経路により、例えば腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下または鼻内に投与されつる。式Ｉの化合物の投与量はい（つかの要因例えば患者の要求および使用する個々の化合物により左右されるが、しかし代表的には、単一投与量の場合または２〜４回の投与量に分けた場合のいずれでも１日当たり体重１ｋｑについて０．３ａｙ〜３．　Ｑｍｇである。

以下に本発明を実施例により説明するが、本発明は決してそれらに限定されるものではない。

本発明の硫酸化ペプチドアミドの固相合成にはペプチド自動シンセサイザーを使用した。アミノメチル−樹脂またはペプチジル−０ＣＲ，−Ｐａｗ−樹脂（利用しうる窒素１　＋ｗｍｏｌｅ）上への結合、脱保護、硫酸化、開裂および生成物精製のプロトコルは前記表１に示したとおりである。

ペプチド合成は、特記しない限り、１ミリ当量のアミノメチル−樹脂を用いて開始され、その際該樹脂は重量基準で９９．１のスチレン；ジビニルベンゼンコポリマーであつた。反応は特記しない限り室温で実施した。洗浄工程は特記しない限り、具体的に明記された溶媒５０■ｌを用いて３回実施した。

実施例　ＩＢｏｃ　−１１ｅＰｈｅ　−（４−オキシメチルフェニル）酢酸アセトニトリル（１００（］＋Ａ’）中に溶解したＢｏｃ　−ＭｅＰｈｅ　−０Ｈ（２７，９３ｑ　）および４−（ブロモメチル）フェニル酢酸フェナシルエステル（３３，３２ｙ　）の溶液にフッ化カリウム２水和物（１８，２８ｙ　）を加えた。その懸濁液を一夜撹拌し、濾過し次いで濾液を蒸発乾固した。残留物のＢｏａ　−ＭｅＰｈｅ−（４−オキシメチルフェニル）酢酸フェナシルエステルを８５％酢酸（１２００ｍ１り中に溶解し、亜鉛末（１２８ｇ）で処理し次いで２〜４時間撹拌した。濾過した反応混合物を約４００ｍ１に濃縮し、水３２００ｍｊで希釈して油状物を得、それを酢酸エチル中に溶解し次いでジシクロヘキシルアミン（ＤＣＨＡ）で処理して標記化合物のＤＣＨＡ塩４１．３１９を得た。■ｐ、　１２０〜１２２℃。

本質的に上記と同一の操作を用いて、下記化合物が製造された。

Ｂｏｃ　−ＥｔＰｈｅ　−（４−オキシメチルフェニル）酢酸、腸ｐ。

１３７〜１４１℃　（ＤＣ［ＩＡ塩）；Ｂｏｃ−Ｐｈｅ（４−Ｃ／）（４−オキジメチルフェニル）酢酸；３ｏｃ　−Ｔｙｒ（ｌｌｅ）　−（４−オキシメチルフェニル）酢酸、ｍｐ、　６４〜６７℃　（遊離塩基）′；Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−（４−オキシメチルフェニル）酢酸、１９２〜１９５℃（遊離塩基）。

実施例　２Ｆｍｏｃ　−１１ｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＯＨＴ［ＩＦ（２００ｍ／）中においてＦｍｏｃ−１ｅｔ−ＯＨ（１４，８７ｇ）、ＨＯ３ｕ（５，５２９）およびジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ。

８．２６９）を０℃で３．５時間反応させることにより、Ｆｍｏｃ−１ｅｔ　− Ｏ３ｕを反応系中で製造した。沈殿したジシクロヘキシル尿素（ＣＣＵ）を濾過により除去し、そのＴＨＦ濾液をＩＮ水酸化ナトリウム４０諺ｌを加えた２２０ｍ／のｌＯ：１　水／ＴＨＦ中に溶解したＨ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＯＨの冷溶液に加えた。反応混合物を室温で一夜撹拌した後に、固形クエン酸（２０ｇ）を酢酸エチル（６００ｍ１’）と共に加えた。酢酸エチル層ヲ分ｌｌし、１０％クエン酸およびブラインで洗浄し次に乾燥した（硫酸マグネシウム）。酢酸エチル溶液を蒸発させて残留物を得、それを酢酸エチル（２０００ｍＪ）中に溶解し次いでＤＣ■＾（７，８４ｍ／）で処理して標記化合物のＤＣ［ｌ＾塩１７、９２　ｙを沈殿させた。ｍｐ、　１５９〜１６２℃。

実施例　３Ｈ−Ｐｈｅ　−０ＣＨＩ　−Ｐａｗ−樹脂Ｂｏｃ−Ｐｈｅ　−（４−オキシメチルフェニル）酢酸（０，８３９，２■■ａｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ｔｌＯＢｔ。

０、４６９．３　ｍｍｏｌｅ）およびＤＣＣ（０，４１９，２ｍｍｏｌｅ）を５０．１の４　：　Ｉ　ＤＣ）Ｉ／ＤＩＩＦ中に溶解しついで０℃で１時間撹拌した。濾過した反応混合物（沈殿したＤＣＵが除去された）中にアミノメチル−樹脂（１，３４ｑ、利用しつる窒素　１ｓ醜ｏｔｅ）を懸濁し、２〜１５時間振盪した。生成物のＢｏｃ　−Ｐｈｅ　−０ＣＲ１−Ｐａｗ−樹脂を濾過により単離し、前記表１（工程１０〜１４）により処理して、標記化合物を得た。

本質的に同様の操作を用いて、■−Ｐｈｅ（４−ＣＩ）　−ＯＣＲ。

−Ｐａｗ−樹脂およびＨ−Ｔｙｒ（ｌｉｅ）　−０ＣＪ　−Ｐａｗ−樹脂が製造された。

実施例　４Ｈ−１１ｅＰｈｅ−０Ｃ１１，−Ｐａｗ−樹脂４Ｑｗｒｌのｌ　：　３　ＤＩＦ／ＤＣＩ中に入れたＢｏｃ　−ＭｅＰｈｅ　−（４−オキシメチルフェニル）酢酸（そのＤＣＨＡ塩１．８２　ｑ、３ｓ醜ｏｔｅ）およびｌｌ０Ｂｔ（６，９ｑ、４−５ｓ醜ｏｔｅ）　、次にＤＣＭ　’ｌＱｍｌ中のＤＣＣ（０，６２ｑ、３　ｍ５ｏｌｅ）をアミノメチル−樹脂（１，３４す、利用しうる窒素１　ｍｍｏｌｅ）に加えて懸濁液を得、それを２〜１５時間振盪した。Ｂｏｃ　−１１ｅＰｈｅ　−０ＣＩＩ　ｚ　−Ｐａｗ−樹脂を濾過により単離し、２−プロパツールおよびＤＣＩＩで洗浄し次いで前記表１（工程ｌＯ〜１４）により処理して、標記化合物を遊離塩基として得た。

本質的に同一の操作を用いて、Ｈ−ＥｔＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂が製造された。

実施例　５゛Ｈ−Ｐｈｅ（４−ＮＯｘ）　−０ＣＨ！−Ｐａｗ−樹脂Ｂｏｃ　−Ｐｈｅ（４− Ｎｏｗ）　−０Ｈ（１，３９ｇ）を７０％メタノール（１００ｍｊ）中に溶解し、ＩＮ重炭酸セシウムの添加でｐｔ１７に調整した。溶液を蒸発乾固し、残留物を添加したＤＩＩＦで３回以上蒸発させた。乾燥して得られたＢｏｃ−Ｐｈｅ（ＮＯｘ）−ＯＨのセシウム塩をＤＩＦ　（６０諺り中に溶解し次いでＢｒＣＩＩｚ−Ｐａｍ−樹脂（１ｍｅｑのＢｒ）と共に一夜振盪した。Ｂｏｃ−Ｐｈｅ（４ −Ｎ０ｘ）　−０ＣＨｚ　−Ｐａｗ−樹脂を濾過により単離し、ＤＣＩＩで洗浄し次いで前記表１（工程１０〜１４）により処理して、標記化合物を遊離塩基として得た。

実施例　６Ｈ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）　−０ＣＨ１−Ｐａｗ−樹脂Ｆｍｏｃ　−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）　−（４−オキシメチルフェニル）酢酸（１，８２９，３ｓ醜ｏｔｅ）　、１ −ヒドロキシベンゾトリアゾール（０，６９９，４，５ｓ醜ｏｔｅ）およびＤＣＣ（０，６２９，３ｍｍｏｌｅ）を５０鳳！の４　：　Ｉ　ＤＣＭ／ＤＭＦ中に溶解し次いで０℃で１時間撹拌した。濾過した反応混合物（沈殿したＤＣＵが除去された）中にアミノメチル−樹脂（１，３４９、利用しつる窒素１　ｇｅｓｏｌｅ）を懸濁し、２〜１５時間振盪した。Ｆｍｏｃ　−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）　−０ＣＲｓ　−Ｐａｗ−樹脂を濾過により単離し次０で前記表１（工程１６〜２０）により処理して、標記化合物を遊離塩基として得た。

本質的に同一の操作を用いて、■−璽ｅＴｙｒ（ｌｌｅ）　−０ＣＨ！−Ｐａｍ −樹脂が製造された。

実施例　７Ｈｐａ（ＳＯ，Ｈ）　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ−Ａｓｐ　−Ｐｈｅ　−ＮＨ４Ｉ　−Ｐｈｅ　−０Ｃｔ１．−　Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｓｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＯＨｌＦｍｏｃ−１ｅｔ　−ＯＨＳＦｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−ＯＨｌＦｍｏｃ　−Ｇｌｙ　−０■およびＦｍｏｃ−１ｅｔ−ＯＲと逐次結合させて、Ｈ −菖ｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−Ｐｈｅ　− ０ＣＨ２−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５、次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って４−ヒドロキシフェニル酢酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（Ｈｐａ　−０３ｕ）と結合させて標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従つて逐次Ａ■ｂｅｒ−１ｉｔｅ　ＸＡＤ−２、Ｔｒｉｓａｃｒｙｌ　Ｉ　ＤＥＡＥおよびＰ−４００ＤＳ−３上でクロマトグラフィー処理して精製を行うことにより標記化合物のアンモニウム塩１１００ＩＩを得た。酸分解によるアミノ酸分析より　Ａｓｐ　１．０３（１）、ｌｅｔ　１．９８（２）、Ｇｕｙ　１．０２（１）およびＰｈｅ　Ｏ，９８（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５１０５Ｏ鳴こおいて硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　８Ｈｐａ（ＳＯｓＨ）−＾１ａ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−ｌｅｔ　−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＵ。

Ｈ−Ｐｈｅ　−ＤＣＩＩ　−Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−〇■、Ｆｍｏｃ−１ｅｔ−ＯＨｌＦｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−ＯＨ，Ｆｍｏｃ　−Ｇｌｙ　− ＯＨおよびＦｍｏｃ−＾１ａ−０１１と逐次結合させてＨ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　 −Ｔｒｐ−厘ｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−Ｐｈｅ　−０ＣＲｓ　−Ｐａｗ− 樹脂を得、ソレヲ表１（工程８〜９）に従ってＨｐａ　−ＯＳｕと結合させてｔｌｐａ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−１１ｅｔ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　− Ｐｈｅ　−ＯＣＬ　−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しついで樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従ッＴ、逐次Ａｓｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でクロマトグラフィー処理して精製を行うことにより標記化合物のアンモニウム塩１５０Ｂを得た。酸分解によるアミノ酸分析よりＡｓｐ　１．１８（１）、璽ｅｔ　Ｏ，８５（１）、Ａｌａ　０．９４（１）、Ｇｌｙ　１．０９（１）およびＰｈｅ　Ｏ，９２（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５０ｃ１１−１において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　９Ｈｐａ（ＳＯ２計）　−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−１１ｅｔ　−Ａｓｐ−ＭｅＰｈｅ−ＮＨ２Ｉ　−ＭｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦ！ＩＯｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｗｏｃ−菖ｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨｌＦｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−０Ｈ１Ｆｔａｏｃ　−Ｇｌｙ　−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｍｅｔ−ｏｎと逐次結合させてＨ−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１１ｅＰｈｅ−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＢｐａ　−ＯＳｕと結合させてＨｐａ　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　 −ＭｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａａ＋−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩１３０ｍｅを得た。酸分解によるアミノ酸分析よりｌ１ｅｔ　１．９５（２）、Ａｓｐ　１．００（１）、ｃｔｙ　Ｏ，９７（１）および１１ｅＰｈｅ　１．０８（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５０ｃ’ｓ−’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１０Ｈｐａ（ＳＯＪ）　−Ａｌａ−ＧＬｙ−Ｔｒｐ　−１１ｅｔ−Ａｓｐ−ＭｅＰｈｅ−ＮＨ４Ｉ　−１１ｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｗｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ　−）ｌｅｔ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−〇■、Ｆｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−０■、Ｆ＋ｓｏｃ　−Ｇｌｙ　 −ＯＨおよびＦｍｏｃ−＾１ａ−ＯＨと逐次結合させてＨ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　 −Ｔｒｐ　−ｌｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１１ｅＰｈｅ　−０ＣＨｚ　− Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってｆｌｐａ−ＯＳｕと結合させてＨｐａ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１ｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次＾ｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩１８０鳳りを得た。酸分解によるアミノ酸分析によりＡｌａ　０．９７（１）、Ｍｅｔ　Ｏ，８２（１）、ｃｔｙ　１．００（１）、Ａｓｐ１、１０（１）およびＭｅＰｈｅ　１．１１（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５１０５Ｏ’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１１［１ｐａ（ＳＯ２計）−蓋ｅｔ　−ＤＡｌａ　−Ｔｒｐ　−１１ｓｔ−＾ｓｐ− 蓋ｅＰｈｅ−ＮＨ４Ｉ　−１ｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ＋−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ　−Ｍｅｔ −Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−〇■、Ｆｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−Ｏｔｌ、Ｆｍｏｃ−ＤＡｌａ−ＯｔｆおよびＦｍｏｃ　−１１ｅｔ−Ｏｌｌと逐次結合させてＨ−Ｍｅｔ −ＤＡｌａ　−Ｔｒｐ　−１１ｅｔ−＾ｓｐ程８〜９）に従ってＨｐａ　−ＯＳｕと結合させて１ｌｐａ　−Ｍｅｔ　−ＤＡｌａ　−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＭｅＰｈｅ　−ＯＣＨ，−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ− ３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩４０諺９を得た。酸分解によるアミノ酸分析より　Ａｓｐ　１．１０（１）、Ｍｅｔ　１．７９（２）、Ａｌａ　Ｏ，９８（１）およびＭｅＰｈｅ　１．１３（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５１０５Ｏ’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１２Ｈｐａ（ＳＯ５計）−１１ｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−菖ｅｔ−＾ｓｐ　−ＭｅＰｈｅ　−ＮＨ４Ｉ　−１１ｅＰｈｅ　−ＯＣＨ！　−Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｓｏｃ　−ｌｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ｏｎ、Ｆｓｏｃ　−Ａｌａ　−ＯＨｌＦｍｏｃ　−Ｇｌｙ　−ＯＨおよびＦｓｏｃ−１１ｅｔ−ＯＨと逐次結合させてＨ−ｌｅｔ　− Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１［ｅＰｈｅ　−０ＣＨＩ　−Ｐａｎ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＨｐａ　−ＯＳｕと結合させてＨｐａ　−ｌｅｔ　−Ｇｌｙ−Ａｌａ−菖ｅｔ−＾５ｐ（ＯｔＢｕ）　−ＭｅＰｈｅ　−ＯＣＨｚ−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩３０慮９を得た。酸分解によるアミノ酸分析より、菖ｅｔ　１．７６（２）、Ａｓｐ　１．１２（１）、ｃｉｙ　１．０７（１）、Ａｌａｌ、　０３（１）および１ＩｅＰｈｅ　１．０２（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５１０５Ｏ’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１３Ｈｐａ（ＳＯ２計）　−１１ｅｔ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ａｌａ　−Ａｓｐ　−ＭｅＰｈｅ　−ＮＨ４Ｉ　−１１ｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ−Ａｌａ　− Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨｌＦｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−ＯＨｌＦｍｏｃ　−Ｇｌｙ　−ＯＨおよびＦｍｏｃ　−１［ｅｔ−ｏｎと逐次結合させてＨ−１［ｅｔ　− Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ａｌａ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１１ｅＰｈｅ　−ＯＣＲ，−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＨｐａ　−ＯＳｕと結合させてＨｐａ　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１１ｅＰｈｅ−０ＣＨｚ　−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次Ａｓｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩１４０１１９を得た。酸分解によるアミノ酸分析より、Ａｌａ　Ｏ，９７（１）、Ｎｅｔ　０．８３（１）、ｃｔｙ　Ｏ，９７（１）、Ａｓｐｌ、　０９（１）およびＭｅＰｈｅ　１．１５（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５１０５Ｏ’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１４Ｈｐａ（ＳＯＪ）−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ−菖ｅｔ−Ａｌａ−ＭｅＰｈｅ −ＮＯ。

Ｈ−ＭｅＰｈｅ　−ＯＣＨ２−Ｐａ膳−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ−Ｎｅｔ−＾１ａ−ＯＲ１Ｆｇ＋ｏｃ　−Ｔｒｐ　−０［１、Ｆｍｏｃ　−Ｇｌｙ　−ＯＨおよびＦｗ＋ｏｃ　−Ｍｅｔ　−ＯＢと逐次結合させてＨ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｎｅｔ−Ａｌａ　 −ＭｅＰｈｅ　−０ＣＨＩ　−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＢｐａ　−ＯＳｕと結合させてＨｐａ　−１１ｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−Ａｌａ−ＭｅＰｈｅ　−０ＣＨＩ　−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次Ａｍｂｅｒ−１ｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩１７０寓９を得た。酸分解によるアミノ酸分析より、１ｌｅｔ　１．７３（２）、ｃｉｙ　Ｏ，９８（１）、Ａｌａ　Ｏ，９８（１）および１ＩｅＰｈｅ　１．３１（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５１０５Ｏ’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１５ｆｌｐａ（ＳＯｓＨ）−＾１ａ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ａｌａ　−Ａｓｐ　−ＭｅＰｈｅ　−ＮＢ２Ｈ−１１ｅＰｈｅ　−ＯＣＨ２−Ｐａｇ＋−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｓｏｃ　−Ａｌａ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨｌＦｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−０■、Ｆｍｏｃ　−ＧＬｙ　 −ＯＨおよびＦｍｏｃ　−Ａｌａ−〇■と逐次結合させてＨ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ−Ａｌａ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１１ｅＰｈｅ　−０Ｃｔｌｌ　 −Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＨｐａ　−ＯＳｕと結合させてＨｐａ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−Ａｌａ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＭｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従ッテ逐次＾ｍｂｅｒＩｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩を得た。

実施例　１６ｆｌｐａ（ＳＯ２計）−Ａｈｘ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−Ａｈｘ−Ａｓｐ　−ＭｅＰｈｅ　−ＮＨ２Ｈ−ＭｅＰｈｅ　−ＯＣＲ，−Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ　−Ａｈｘ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−Ｏｔｌ、Ｆｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−０Ｈ１Ｆｓｏｃ　−Ｇｌｙ　−０■およびＦｍｏｃ　−Ａｈｘ−ＯＢと逐次結合させてＨ−Ａｈｘ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ａｈｘ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＭｅＰｈｅ　−０ＣＲ２− Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってｔｌｐａ　−ＯＳｕと結合させてＢｐａ−＾ｈｘ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−Ａｈｘ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　− ＭｅＰｈ’ｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次＾ｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩８０諺９を得た。酸分解によるアミノ酸分析より、Ａｈｘ　１．９３（２）、Ａｓｐ　１．００（１）、ｃｔｙ　Ｏ，９７（１）および１１ｅＰｈｅ　１．１０（１）が得られた。

赤外吸収スペクトルは１０５０Ｃｆ’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１７Ｈｐａ（ＳＯ２計）　−１１ｅ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−１１ｅ−Ａｓｐ　−１ｅＰｈｅ　−Ｎ■。

Ｈ−ＭｅＰｈｅ−ＯＣＨ！−Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ−１１ｅ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨＳＦｍｏｃ　−Ｔｒｐ−ＯＨ，Ｆｍｏｃ　−Ｇｌｙ−ＯＨおよびＦｍｏｃ−１１ｅ−ＯＨと逐次結合させてＨ−１１ｅ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−１１ｅ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１１ｅＰｈｅ　−ＯＣＨ！−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＨｐａ−ＯＳｕと結合させてＨｐａ　−ＩＩｓ　−Ｇｌｙ −Ｔｒｐ　−１１ｅ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＭｅＰｈｅ　−ＯＣＨ１−Ｐａｗ −樹脂を得、それを表１（工程１０−１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従ッテ逐次Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ −２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩５０りを得た。酸分解によるアミノ酸分析より、Ｉｌｅ　１．８８（２）、Ａｓｐ　１．０２（１）、ｃｔｙ　Ｏ，９８（１）および１１ｅＰｈｅ　１．１２（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５０ｃｍ− １において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１８Ｈｐａ（ＳＯ３ｔｌ）　−１１ｅ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ−Ａｈｘ　−Ａｓｐ　− ＭｅＰｈｅ　−Ｎｌｌ２Ｈ−１１ｅＰｈｅ　−０ＣＢ２−　Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ　−Ａｈｘ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−〇■、Ｆｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−ＯＨ，Ｆｍｏｃ　− Ｇｌｙ　−ＯＢおよびＦｍｏｃ−ＩＬｅ−ｏｎと逐次結合させてＨ−１１ｅ　− Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ａｈｘ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１ｅＰｈｅ　−０ＣＨｚ　−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＨｐａ−ＯＳｕと結合させてｌ１ｐａ　−１１ｅ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−Ａｈｘ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−菖ｅＰｈｅ　−ＯＣＨ！　−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次＾ｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩１２０ｍｗを得た。酸分解によるアミノ酸分析より、Ｉｌｅ　１．０４（１）、Ｔｒｐ　Ｏ，８２（１）、Ａｓｐ　１．０４（１）、ｃｔｙｌ、　０３（１）、Ａｈｘ　１．０３（１）およびＭｅＰｈｅ　Ｏ，８６（１）が得られた。赤外吸収スペクトルはｔｏｓｏｃ冨−鳳において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　１９Ｈｐａ（ＳＯＪ）−１ｅｔ−Ａｌａ　−Ｔｒｐ　−ｌｅｔ　−Ａｓｐ　−１ｅＰｈｅ　−Ｎｆｌ＊Ｈ−１ｅＰｈｅ　−ＯＣＨ！−Ｐａｗ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ　−ｌｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ　−Ｔｒｐ　−Ｏｔｌ、Ｆｍｏｃ　−Ａｌａ　−ＯＨおよびＦｍｏｃ−１１ｅｔ−０１１と逐次結合させてＨ−１１ｅｔ−Ａｌａ　−Ｔｒｐ　−１１ｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−１１ｅＰｈｅ　−ＯＣＨ！　−Ｐａｎ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＨｐａ　−Ｏ３ｕと結合させてＨｐａ　−１１ｅｔ　−Ａｌａ−Ｔｒｐ　−１ｅｔ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＭｅＰｈｅ　−ＯＣＲ，−Ｐａａ＋−樹脂を得、それを表１（工程ｌＯ〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従ッテ逐次＾５ｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４０００Ｓ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩６０ｍｇを得た。酸分解によるアミノ酸分析より、１ｌｅｔ　１．８９（２）、Ａｓｐ　Ｏ，９９（１）、Ａｌａ　Ｏ，９９（１）および１１ｅＰｈｅ　１．１２（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５１０５Ｏ’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　２０Ｈｐａ（ＳＯ２計）　−Ｍｅｔ−βＡｌａ　−Ｔｒｐ　−１１ｅｔ−＾ｓｐ−ＭｅＰｈｅ−Ｎｕ。

Ｈ−１１ｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａａ−樹脂を表１（結合工程５〜７、次にＦｍｏｃ除去工程１６〜２０）に従ってＦｍｏｃ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）− 〇■、Ｆ＋＊ｏｃ　−Ｔｒｐ　−Ｏｔｌ、Ｆ＋＊ｏｃ−βＡｌａ−ＯＨおよびＦｍｏｃ　−墓ｅｔ　−ＯＨと逐次結合させてＨ−１１ｅｔ−β＾ｌａ　−Ｔｒｐ　−１１ｅｔ　−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＭｅＰｈｅ　−０ＣＨ２−Ｐａｗ−樹脂を得、それを表１（工程８〜９）に従ってＨｐａ−Ｏ３ｕと結合させてＢｐａ −璽ｅｔ−β＾ｌａ　−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）　−ＭｅＰｈｅ　−ＯＣＨ，−Ｐａ５−樹脂を得、それを表１（工程１０〜１５、工程２１〜２５次にアンモニアを用いる工程２６〜２９）に従って脱保護し、硫酸化しそして樹脂から開裂して標記化合物を得、それを表１（工程３０）に従って逐次Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ−２およびＰ−４００ＤＳ−３上でのクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物のアンモニウム塩４１ｍ９を得た。酸分解によるアミノ酸分析より、Ｍｅｔ　１．９４（２）、Ａｓｐ　１．０２（１）、β＾ｌａ　Ｏ，８４（１）および）ＩｅＰｈｅ　１．０１（１）が得られた。赤外吸収スペクトルは１０５１０５Ｏ’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。

実施例　２１Ｈｐａ（３０３１）　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−ＤＡｓｐ　 −１１ｅＰｈｅ　−ＮＩＴ！実施例９の合成中におけるラセミ化の結果として、Ｈｐａ（ＳＯ２計）−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ−璽ｅｔ　−ＤＡｓｐ　−１１ｅＰｈｅ　−ＮＨ２が、表１（工程３０）による実施例９の精製中に副生成物として単離されて、標記化合物のアンモニウム塩４７ｍ９を得た。

酸分解によるアミノ酸分析より、Ｍｅｔ　１．８０（２）、ｃｔｙｌ、　０３（１）、Ａｓｐ　（１，０６）、およびＭｅＰｈｅ　１．１１（１）が得られた。

赤外吸収スペクトルは１０５０ｃｍ＋−’において硫酸エステルを代表する強いピークを示した。ＤＡｓｐの存在はＭａｒｆｅｙ（Ｐ、　Ｍａｒｆｅｙ、　Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍｕｎ、、　１９８４．４９．５９１−５９６）の手法により証明された。

補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成４年５月２６日

Claims

【特許請求の範囲】

１．式Ｉ ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）〔式中：ＭはＭｅｔ、ＤＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ、Ｍｅｔｏ、Ａｈｘ、ＤＡｈｘ、ＭｅＡｈｘ、Ｌｅｕ、ＭｅＬｅｕ、Ｐｒｏ、Ｉｌｅ、ＭｅＩｌｅ、ＡｌａまたはＬｙｓであり；ＧはＧｌｙ、ＤＡｌａ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、βＡｌａまたはＳａｒであり；ＷはＴｒｐ、ＭｅＴｒｐ、ＡｌａまたはＮａｌであり；ＸはＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ、Ｍｅｔｏ、Ａｈｘ、ＭｅＡｈｘ、Ｌｅｕ、ＭｅＬｅｕ、Ｐｒｏ、Ｉｌｅ、ＭｅＩｌｅ、ＡｌａまたはＬｙｓであり；ＪはＡｓｐ、ＤＡｓｐ、ＭｅＡｓｐ、ＡｌａまたはＡｓｎであり；Ｆ１は（Ｓ）−ＮＨ、（Ｒ）−ＮＨ、（Ｓ）−Ｒ１Ｎまたは（Ｒ）−Ｒ２Ｎであり；Ｆ２はＨ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、Ｆ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｒ■またはＯＲ４であり；ＺはＮＨ２、ＮＨＲ５またはＮＲ５Ｒ６であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ１−６−アルキルであり；そしてＲ４はＨまたはＣ１−６−アルキルである〕を有する化合物およびその製薬的に許容しりる塩。
２．ＭがＭｅｔ、Ａｈｘ、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＩｌｅである請求項１記載の化合物。
３．ＸがＭｅｔ、Ａｈｘ、ＬｅｕまたはＩｌｅである前記請求項のいずれか１項に記載の化合物。
４．Ｆ１が（Ｓ）−ＮＨまたは（Ｓ）−Ｒ２Ｎである前記請求項のいずれか１項に記載の化合物。
５．ＺがＮＨ２である前記請求項のいずれか１項に記載の化合物。
６．式Ｉの化合物がＨｐａ（ＳＯ３Ｈ）−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−ＭｅＰｈｅ−ＮＨ２またはその製薬的に許容しうる塩である請求項１記載の化合物。
７．式Ｉの化合物が【配列があります】またはその製薬的に許容しうる塩である請求項１記載の化合物。
８．請求項１記載の式Ｉの化合物またはその製薬的に許容しうる塩を製薬的に許容しうる担体と混合して含有する医薬組成物。
９．肥満の治療または予防用医薬の製造における、請求項１記載の式Ｉの化合物またはその製薬的に許容しうる塩の使用。
１０．請求項１記載の式Ｉの化合物の製造において、ａ）式ＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）〔式中、Ｍ、Ｇ、Ｗ、Ｘ、Ｊ、Ｆ１、Ｆ２およびＺは前述の定義を有し、Ｐ■は、ＭまたはＸがＬｙｓを示す場合にはアミノ保護基を示し、Ｐａは、ＪがＡｓｐ、Ｄ−Ａ３ｐまたはＭｅ−Ａｓｐを示す場合にはカルボキシル保護基を示し、Ｐｎは、Ｆ２がＮＨ２またはＯＨを示す場合にはヒドロキシル保護基またはアミノ保護基を示し、そしてＰｃは、Ｚまたはカルボキシル保護基を示す〕の化合物を硫酸化し、ｂ）対応する式ＩＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩＩ）（式中、Ｍ、Ｇ、Ｗ、Ｘ、Ｊ、Ｆ１、Ｐ２、Ｐ■、Ｐａ、ＰｎおよびＰｃは前述の定義を有するが、ただしＰ■、Ｐａ、ＰｎおよびＰｃのうち少なくとも１つは保護基を示す）の化合物から１つ以上の保護基を除去し、次に所望または必要により、得られた式Ｉの化合物をその製薬的に許容しうる塩に変換するかまたはその逆を行うことからなる上記化合物の製造方法。