JPH05504097A - 陰イオン交換体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 陰イオン交換体 本発明はクロマトグラフィーによる分離の分野に関し、特に互いに２個の原子の 距離をおいた２個の正電荷を有している新しい種類の陰イオン交換体に関する。

イオン交換クロマトグラフィーは試料を固定化した荷電基を含むマトリックスを 通過させ、反対電荷の試料成分と結合させる技術であって、とりわけ生体分子、 例えば蛋白質、ペプチドおよび核酸を分離するのに使用される。これは最も古い 分離方法の１つであるけれども、現代の生化学的分離の基本的な技術の１つとし て継続している。陰イオン交換体、すなわち正に荷電した基を有するイオン交換 体に関して云えば、このような交換体として使用される物質はある特定の条件で 荷電した基それ自体または荷電可能な基のいずれかを形成するために何らかの種 類の固定相に結合したアミン類である。第一、第二および第三アミン官能基は弱 陰イオン交換体基として分類されるが、一方第四アミン官能基は強陰イオン交換 体基として分類される。然しなから、これら「弱」および「強」の用語の使用は イオン交換体の作用について何ら品質的評価を反映しておらず、むしろ「強」イ オン交換体はより広いｐＨ範囲で荷電されていることを意味している。い（つか の実際上の適用では、弱イオン交換体は強イオン交換体より望ましく、逆もまた 同じと云える。

多年にわたって商業的に入手可能であった陰イオン交換体の例としては、それら の官能基としてジエチルアミノエチルおよび第四級アミノエチル基をそれぞれ有 するＤＥＡＥ　５ｅｐｈａｄｅｘ＠およびＱＡＥ　５ｅｐｈａｄｅｘ＠　（Ｐｈ ａｒｍａｃｉａ　ＬＫＢＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ＡＢ製）を挙げることが できる。また、アミノ基を有するイオン交換体もまた多数の刊行物に開示されて いる。例えば１０８９１０４２０３、ＥＰ−＾−１６７４８１！およびＥＰ−＾ −２９５４９５参照。

クロマトグラフィーを用いる全ての分離技術において、試料成分の個々の成分ま たは成分の個々の基へ可能な限りの最良の分離／分割を達成しなければならない ことは肝要なことである。分割は理論的には使用されたカラムの効率と選択性の 関数である。これらの要因はまずカラムの形状と一緒になって分離マトリックス の特性によって決定される。従ってこれらの要因はそのシステムの固定されたパ ラメーターを構成する。分割に影響を及ぼす他の要因は、例えば試料の充填、流 量、温度、ｐＨ、勾配等である。すなわちこれらは各一定の分離状況においてい かなるカラムでも最適化されなければならない。近年の傾向としてはより小さい 粒度のカラム充填物質を使用して、効率を高め、同時に分割能を増大させるよう 努力するべきであるということになった。一方、イオン交換体の選択性の改良を 目指して努力した研究はこれまで実に少なかったように思われる。選択性に影響 する要因の１つはマトリックスに結合した荷電した基の構造であイオン交換体の もう１つの重要な特性はそのイオン交換容量である。移動層イオンが小さな１価 のイオンである場合、この容量はマトリックス中の電荷の数に等しい。

小さいイオンは荷電した置換基によって形成された表面層を透過することができ 、また例えば狭い細孔の内部深くに存在する電荷にも達する。しかし生体分子と 結合する場合は、事情は異なってくる。イオン交換体に結合しつる蛋白質の量を 決定するのは単にゲルの電荷の数だけでなく、マトリックス表面に露出している 電荷の様子であり、これはマトリックスの多孔度とイオン交換基の構造が決定的 に重要なものであることを示している。もちろん、さらに蛋白質の電荷特性は結 合の程度に影響を及ぼすであろう。

ＴＯ９１１００１４５（この出願は本願出願日量前に刊行されておらずまた公然 と入手できなかった）において、強陰イオン交換体の選択性と容量を対で配列さ れた電荷を有する官能基を導入することによりかなり改善することができ、これ らの電荷は電荷遮蔽を最小化することにより周囲環境に最適な方法で露出させる 特殊な構造になっていることを開示している。ｔｏ　９１１００１４５に記載さ れている官能基はそれぞれ次の構造 ＣＨ。

４−メチル−１，４−ジアザビンクロ［２，２，２］オクタン−１−イル（１） 、 １．４．４−トリメチルピペラジニウム−１−イル（２）、１．４−ジメチル− １，４−ジアザビンクロ（２，２，２３オクタン−２−イル（３）、および １、１．４．４．４−ペンタメチル−１，４−ジアザブタン−１−であり、その 特徴は２個の荷電した窒素原子が互いに２個の原子の距離をおいて配置されてい ることである。そのうえ構造（１）、（２）および（３）では窒素原子は環状構 造の部分を形成している。さらにその明細書には、イオン交換体に構造（１）お よび（３）を選ぶことによってイオン交換体を含む溶液中の試料分子との相互作 用を妨害する立体障害を最小にするであろうと述べられている。

本発明により上記の基本的な概念を発展させて強陰イオン交換体の選択性と容量 を改良するための他の多様な官能基が得られるようになった。

すなわち、本発明はクロマトグラフィー分離のための陰イオン交換体に関し、前 記陰イオン交換体は次の構造上記式中、Ｐは不溶性の支持体で、好ましくは個々 に分れた粒子、例えば１〜５００μ諺の粒径を有する当該技術分野で知られた種 類の球状粒子の形態である。

Ｓはいわゆるスペーサー、すなわち好ましくは分離操作を妨害するような方法で 試料分子と相互作用をしない分子鎖であるが、粒子表面の荷電された構造の露出 を促進するものである。例えばある量の疎水性基を分離操作に使用したい場合に は、スペーサーはもちろんそれ自体知られた方法で疎水性にすることができる。

Ａは荷電したリガンドであり、本発明によると互いに２個の原子の距離をおいた 窒素と硫黄からそれぞれ選ばれた２個の正に荷電した原子を包含するものである 。但しこの官能性リガンドＡは４−メチル−１，４−ジアザビシクロＣ２，２， ２３オクタン−１−イル、１．４．４−トリメチルビベラ／ニウム−１−イル、 ｌ、４−ジメチル−１，４−ジアザビシクロ（２，２，２）オクタン−２−イル または１、１．４．４．４−ペンタメチル−１，４−ジアザブタン−１−イルと はなりえない。

この正に荷電した原子を分離している２個の原子は炭素原子であるのが好ましい 。

荷電した原子は両方とも窒素原子であってもよく、または一方が硫黄で、他方が 窒素であってもよく、もしくは両方とも硫黄原子であってもよい。しかしながら 、両方の荷電した原子が窒素原子、すなわちリガンドが２個の第４級アミノ基か らなるのが好ましい。

スペーサーＳは荷電した原子の１個に、または荷電した原子を分離している２個 の原子の１個に結合していてもよい。

Ａとして上記の定義内にあるリガンドＡの好ましい基は次式（Ｉ＾）と（ＩＢ） により表わされる（二つの式を用いるのはリガンドをスペーサーＳに結合するた めの遊離原子価の位置が異なるからである）。

Ｒ２Ｒ？Ｒ９Ｒ４ Ｒ２１ｉ７Ｒ９Ｒ４ 上記式中、ＹｌおよびＹ２は互いに独立して窒素または硫黄であり、 Ｒ１、Ｒ２５Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５オヨヒＲ６ハ互イニ独立シテ次ノ式％式％： Ｒ７、ＦＩａ、　ＲＧおよび８口は互いに独立して水素またはＣ１〜４アルキル 、Ｃｌ−４アルコキシアルキルまたはヒドロキシＣ１−４アルキルであり： Ｒ１＋は水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃｌ−１１アルコキンアルキルまたはヒドロ キシ−０１〜６アルキルであり：Ｒ１２は水素、ヒドロキシルまたはＣ１〜４ア ルキルであり： ｌは０または１であり： ｍは０または１であり； ｎは１〜５であり： ＸはＯまたは１であり； ｙは０または１であり： Ｚは０または１である： 但し、Ｙ２が硫黄である場合、！は０であり。

Ｙｌが硫黄である場合、ｍはＯであり：Ｒ１２がヒドロキシルである場合、２は ０であり。

Ｒ２はＲ４と一緒になっておよび／またはＲ３はＲ６と一緒になってエチレン基 を形成し、ここでその１つまたは両方の炭素原子がＣ１−４アルキル、Ｃ１〜４ アルコキシ、Ｃ２−４アルコキシアルキルまたはヒドロキシ−Ｃ１−４アルキル でモノ−またはジ置換されていてもよい。

本明細書で使用されるアルキルの用語（個々にまたは組み合せて）は直鎖および 分子鎖の両方の基を含むことを意味する。

式ＩＡまたはＩＢのリカンドの１つの亜族では各置換基Ｒ１〜Ｒ８は独立して Ｈ −ＣＣＨ２−ＣＨ−ＣＨ２−０）。− ■ Ｈ （ｎは１〜３であるのが好ましく、特に１または２、さらに１であるのが好まし い）から選ばれた基に結合したＲ＋２を有している。

リガンドＡの好ましい基はＲ１−Ｒ６（互いに独立して）が１〜３個の炭素原子 を有するアルキル、アルコキシアルキルまたはヒドロキシアルキル（例えば、そ れぞれエチル、メトキンエチルまたはヒドロキシエチル）であるものからなって いる。

式１＾またはＩＢのもう１つの好ましいリガンドの亜族では、対の置換基、Ｒ２ 、Ｒ４とＲ３、Ｒ６の少なくとも１つがエチレン基を形成しており、これは場合 により好ましくは１個または２個の炭素原子を有するアルキル、アルコキシまた はヒドロキシアルキルで置換されていてもよい。

Ｒ７〜ｇｌ＋＋は好ましくは（互いに独立して）水素または１個または２個の炭 素原子のアルキルであり、さらに好ましくは水素である。

Ｒ１＋は好ましくは５個以下、さらに好ましくは３個以下の炭素原子を有するア ルキルである。

Ｒ′２は好ましくは水素、ヒドロキシルまたはメチルである。

官能基を結合させるための支持体マトリックスの選択に関しては、これは本発明 の構成する要素ではなく、当業者は本発明の概念をクロマトグラフィーによる分 離操作に使用するこれまで述べられてきた多数の支持体マトリックスに適用する ことができ、またほかの分離パラメーターの点で望ましい特性を有するものをそ れらの中から選ぶことができる。このようなマトリックスの例には、とりわけ多 糖類のゲル、例えばデキストラン、澱粉、セルロースおよび寒天があり、場合に より物質の剛性を増加するために架橋させた後、すなわちその圧縮および流動特 性を改良したものがある。そのほかの例としてはポリスチレン−ジビニルベンゼ ン、シリカおよびアクリレートをベースとする支持体マトリックスがある。

本発明によるイオン交換体の合成は選ばれたマトリックスに反応性基（この基は イオン交換基かまたはその誘導体のいずれかと反応する）を導入するか、または イオン交換基の反応性誘導体を直接にマトリックスと反応させるかのいずれかに よって行なうことができる。

カップリングはいわゆるスペーサーの助けにより、その一端をマトリックスに結 合させ、他端を前記リガンド構造Ａの１つを生成する試薬に結合させて行なう。

このような一方でスペーサーをゲルに、そして他方で試薬にカップリングさせる ことは、特にアフィニティクロマトグラフィーの分野で開発された多数のカップ リングのための任意方法によって行なわれる。このような方法の例としてはＣＮ Ｂｒ、エポキシド、シアネート、ヒドラジドおよびスルホニルカップリングを多 数のなかの一部として挙げることができる。同様に、マトリックス上でのスペー サーまたは露出させる官能基の使用はこの技術分野内では良く知られた方法であ るが、本発明の要素を構成するものではない。

本発明を次にクロマトグラフィーによる分離操作に用いるイオン交換体の合成と それらイオン交換体の使用の両方について実施例をあげて説明するが、これらに 限定されるものではない。

実施例 ■、ポリスチレン／ジビニルベンゼンマトリックス上におけるイオン交換体の合 成 実施例　ｌ ＾）アリル化 ヒドロキシル化されたポリスチレン／ジビニルベンゼンゲル（１００ｍＡ’）を 水素化ホウ素ナトリウム０．３８９を含む３Ｍ水酸化ナトリウム水溶液７６直／ で洗浄した。このゲルをそのアルカリ溶液４０ｄに加え、そしてアリルグリシジ ルエーテル１１５．５９を加えた。つぎに反応混合物を４５℃で一夜撹拌し、そ の後ゲルを濾過し、エタノールで、ついで水で洗浄した。

Ｂ）　ＤＡＢＣＯのブロム化とカップリングイオン交換体Ｎｏ、１（比較例） 上記の工程＾）のアリル化したゲル（５０＋＋１）を０．０１４Ｍ酢酸ナトリウ ム溶液３０ｍ／に加えた。臭素水を撹拌しながら、黄色が連続して見えるように なるまで加えた。過剰の臭素をギ酸ナトリウムで除去した。ＤＡＢＣＯ（１，４ −ジアザビシクロ〔２，２，２〕オクタン）　１２．１ｇを加え、４５％水酸化 ナトリウム水溶液を加えてｐＨを１０．５に調整した。つぎに反応混合物を４５ ℃で一夜撹拌し、その後ゲルを濾過し、水、エタノール、そして最後に水で洗浄 した。

実施例　２ ＤＡＢＣＯ−カップリングゲルのメチル化イオン交換体Ｎｏ、２（比較例、　１ ０９１１００１４５）実施例１のＤＡＢＣＯ−カンブリングゲル７ｍｌをエタノ ールで３回、ついでアセトニトリルで３回洗浄した。つぎにゲルをガラスフィル ターでそれが乾燥するまで吸収した。その後ゲルをアセトニトリル１４ｍ１に加 えた。３０°Ｃで沃化メチル０．４３９を加えた。反応混合物を３０℃で一夜撹 拌し、その後ゲルを濾過し、水、エタノール、水、１Ｍ塩化ナトリウム水溶液お よび水で洗浄した。

実施例　３ ＤＡＢＣＯ−カップリングゲルのエチル化イオン交換体Ｎ０１３ 実施例１のＤＡＢＣＯ−カップリングゲル５ｍｌを実施例２のイオン交換体Ｎ０ ０２合成のために記載された反応条件を用いて沃化エチル（０，４３ｇ）でアル キル化した。

実施例　４ イオン交換体Ｎｏ、　４ 実施例１のＤＡＢＣＯ−カップリングゲル７麿ｌを水１４麿βに加え、２Ｍ塩酸 溶液でｐＨを５．７に調整した。つぎにプロピレンオキシド７ｇを加え、反応混 合物を４５℃で一夜撹拌した。ゲルを濾過し、水、エタノール、水、１Ｍ塩化ナ トリウム水溶液および水で洗浄した。

実施例　５ イオン交換体Ｎ０９５ Ｈ □ Ｈ 実施例１のＩ）ＡＢＣＯ−カップリングゲル５真ｌを水ｌＱ＋＋１に加え、２Ｍ 塩酸溶液でｐｎを５７に調整した。つぎにアリルグリシジルエーテルの１０ｇを 加え、反応混合物を５０°Ｃで一夜撹拌した。ゲルを濾過し、エタノール、水、 １Ｍ塩化ナトリウム水溶液および水で洗浄した。アリルグリシジルエーテルアル キル化ゲルを０．０１４Ｍ酢酸ナトリウム水溶液の５ｍｌへ添加してヒドロキシ ル化した。臭素水を撹拌しながら安定した黄色が得られるまで加えた。過剰の臭 素をギ酸ナトリウムで除去した。つぎに４Ｍ水酸化ナトリウムを加えてｐｌＴを １２に調整した。反応混合物を４５℃で一夜撹拌し、その後ゲルを濾過し、水、 エタノールおよび水で洗浄した。

実施例　６ ＾）チオモルホリンのブロム化とカップリング実施例１のアリル化されたゲルの １０ｍ／を０．０１４Ｍ酢酸ナトリウム水溶液６１１２に加えた。臭素水を撹拌 しながら安定した黄色が得られるまで加えた。過剰の臭素をギ酸ナトリウムで除 去した。つぎに４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐｎを９に調整し、チオモ ルホリンの２．５ｇを加えた。ついで反応混合物を４５℃で一夜撹拌し、その後 ゲルを濾過し、水、エタノールおよび水で洗浄した。

Ｂ）チオモルホリン−カップリングゲルのメチル化イオン交換体Ｎ０１６ 上記工程＾）のチオモルホリン−カップリングゲル４ｍｌをエタノールで３回、 アセトニトリルで３回洗浄した。

つぎにゲルをガラスフィルターで乾燥するまで吸引した。

その後ゲルをアセトニトリル８１４’に加え、３０℃で沃化メチル１．５ｇを加 えた。反応混合物を３０℃で一夜撹拌した。

つぎにゲルを濾過し、水、エタノール、水、１Ｍ塩化ナトリウム水溶液および水 で洗浄した。

実施例　７ Ａ）アリル化したゲルのアザスルフェニル化実施例１のアリル化したゲル”１Ｑ ｙｓｌをニトロメタンで３回洗浄した。つぎにゲルをニトロメタンの６Ｑｍｌに 加え、ジメチル（メチルチオ）スルホニウムフルオロポレート２．１ｇを２℃で 加えた。反応混合物を２℃で２時間撹拌し、ついで室温で一夜撹拌し、その後ゲ ルを濾過し、モしてニトロメタンで洗浄した。

Ｂ）アザスルフェニル化したゲルのメチル化イオン交換体ＮＯ１７ 上記工程Ａ）のアザスルフェニル化したゲル５ｍｌをアセトニトリルで３回洗浄 した。つぎにゲルをガラスフィルターで乾燥するまで吸引した。その後ゲルをア セトニトリル１０ｍＡ’に加え、３０℃で沃化メチル０．７７　ｑを加えた。つ ぎに反応混合物を３０℃で一夜撹拌し、その後ゲルを濾過し、水、エタノール、 水、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液および水で洗浄した。

実施例　８ イオン交換体Ｎ００８ ＣＨ。

ＣＨ３ 実施例７のアザスルフェニル化したゲル５ｍｌをニトロメタン２Ｑｚｌとトリエ チルアミン１．０９９を含む溶液に加えた。反応混合物を室温で４日間撹拌した 。つぎにゲルを濾過し、実施例７のイオン交換体Ｎ００７の合成のために記載さ れた反応条件を用いて沃化メチル（０，７７９）でアルキル化した。

■、イオン交換体の選択性の確認 トランスフェリン　１０冨ｇ／真！ オバルブミン　２０１ｇ／璽ｌ β−ラクトグロブリン　２０ｗｇ／ｍｌからなる試験用混合物を用いて上述の製 造したイオン交換体１〜６の選択性が溶離容量の差を空隙容量Ｖ。で割ったもの 、（ｖｅ、□−Ｖｅ、ｎ）　／ｖｏを測定することによって特性を決定した。ｍ とｎはクロマトグラムのピークに対応させた連続数を表わす。

カラム：　ＨＲ５１５（Ｐｈａｒ＋ａａｃｉａ　ＬＫＢ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ｏｇｙ　ＡＢ製）：容量１．　Ｏｗｌ 充填試料：０．５ｚｑ蛋白質／肩ｌゲルバツフアーＡ　：　２０ｍＭピペラジン ｐ■６．０バッファーＢ：バッファ−Ａ　＋　０．６Ｍ塩化ナトリウム流　量： 　１５に鳳／ｈ 勾　配二〇〜１００％バッファーＢ／２０カラム容量（２０肩ｌ） 上に挙げた試験用混合物はｐＦｌｆｉ、　０で強陰イオン交換体で溶離されると ４つのピークを生ずる。この混合物は異なったサイズの蛋白質を含有している。

そして実際にＶ。

値は異なった蛋白質に対してはそれぞれ異なった値であり、たとえそれらがイオ ン交換相互作用によって遅延されなくとも、すべて異なる容量で溶離されるであ ろう。

これがゲル濾過現象である。しかしながら、全ての蛋白質は１つのカラム容量内 で溶離してしまうであろう。一連の試験では、ｖｏはこの影響に関して補正され なかった。

なぜなら同一の支持体マトリックス上でなされる比較ではＶ。の誤差は異なるイ オン交換体上の各蛋白質に対して同じであるからである。

また比較のため、対応する数値を従来技術のイオン交換体Ｍｏｎｏ　Ｑ　（Ｐｈ ａｒｍａｃｉａ　ＬＫＢ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ＡＢ製）を用いて得た が、これらのイオン交換体は次の官能基（イオン交換体Ｎ０１０）を有していた ： 几３ ０　０．２８　０．２８　：１２２　１．３４　１．３６　４．９２１　０．１ ２　０，１２　１．９３　０，７７　１，２６　３．９６２　０．１２　０，２ ４　３，９６　２，５９　２，２９　８．８４３　０．１２　０，１５　２，４ ０　１．３４　１，４６　５．２０４０．１２　０，２３　３，６３　２．３０ 　１，９６　７．８９５　０．１２　０．１６　３．４３　１，４８　１．５９ 　６．５０６　Ｑ、０６　０．１２　３．８０１．４１　１，４３　６．６４結 論として、イオン交換体ＮＯ６２〜６（Ｎｏ、３〜６が本発明の範囲内である） は陰イオン交換体Ｎ０００の従来のタイプよりより良好な選択性を有している。

要　約　書 次の構造ニ −５−Ａ （式中、Ｐは不溶性の支持体であり、Ｓはスペーサーであり、モしてＡは官能性 リガンドである）を有するクロマトグラフィー分離のためのイオン交換体。

本発明による官能性リントＡは互いに２個の原子の距離をおいた窒素と硫黄から それぞれ選ばれた２個の正に荷電した原子を包含するものであるが但し、Ａは４ −メチル−１，４−ジアザビシクロ〔２，２，２〕−オクタン−１−イル、１， ４．４−　トリメチルピペラジニウム−１−イル、１．４−ジメチル−１，４− ジアザビシクロ［２，２，２）オクタン−２−イルまたは１．１．４．４．４− ペンタメチル−１，４−ジアザブタン−１−イルではありえない。

国際調査報告

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．次の構造： Ｐ−Ｓ−Ａ を有するクロマトグラフィー分離のためのイオン交換体。 上記式中、Ｐは不溶性の支持体であり、Ｓはスペーサーであり、そしてＡは官能 性リガンドであって、前記官能性リガンドＡは互いに２個の原子の距離をおいた 窒素と硫黄からそれぞれ選ばれた２個の正に荷電した原子を包含することを特徴 とするが、但しＡは４−メチル−１，４−ジアザビシクロ〔２．２．２〕オクタ ン−１−イル、１，４，４−トリメチルピペラジニウム−１−イル、１，４−ジ メチル−１，４−ジアザビシクロ〔２．２．２〕オクタン−２−イルおよび１， １，４，４，４−ペンタメチル−１，４−ジアザブタン−１−イルとはなりえな いものとする。
2. ２．前記正に荷電した原子を分離する２個の原子が炭素原子である請求項１記載 のイオン交換体。
3. ３．前記正に荷電した原子が窒素原子である請求項１または２記載のイオン交換 体。
4. ４．前記正に荷電した原子の一方が窒素原子であり、他方が硫黄原子である請求 項１または２記載のイオン交換体。
5. ５．前記官能性リガンドＡが構造式（ＩＡ）または（ＩＢ）：▲数式、化学式、 表等があります▼（ＩＡ）▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＢ）によって 示される請求項１〜４のいずれか１項に記載のイオン交換体。 上記式中、Ｙ１およびＹ２は互いに独立して窒素または硫黄であり、 Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は互いに独立して次の式（ＩＩ）で表 される： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は互 いに独立して水素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシアルキルまたはヒド ロキシＣ１〜４アルキルであり； Ｒ１１は水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシアルキルまたはヒドロキ シ−Ｃ１〜６アルキルであり；Ｒ１２は水素、ヒドロキシまたはＣ１〜４アルキ ルであり； ｌは０または１であり； ｍは０または１であり； ｎは１〜５であり； ｘは０または１であり； ｙは０または１であり； ｚは０または１であり； 但し、Ｙｚが硫黄である場合ｌは０であり；Ｙ１が硫黄である場合ｍは０であり ； Ｒ１２がヒドロキシルである場合ｚは０であり；Ｒ２はＲ４と一緒になっておよ び／またはＲ３はＲ６と一緒になってエチレン基を形成し、ここでその１つまた は両方の炭素原子がＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキ シアルキルまたはヒドロキシ−Ｃ１〜４アルキルでモノ−またはジ置換されてい てもよい。
6. ６．Ｒ１〜Ｒ６が独立して ▲数式、化学式、表等があります▼およ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中ｎは請求項５で定義した通りである）から選ばれた基からなる請求項５記 載のイオン交換体。
7. ７．ｎは１または２であり； Ｒ７〜Ｒ１０は互いに独立して水素またはＣ１〜２アルキルであり； Ｒ１１はＣ１〜３アルキルであり； Ｒ１２は水素、ヒドロギレルまたはメチルであることを特徴とする請求項５また は６記載のイオン交換体。
8. ８．Ｒ１〜Ｒ６が互いに独立してＣ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルコキシアルキ ルまたはヒドロキシ−Ｃ１〜３アルキルである請求項５〜７のいずれか１項に記 載のイオン交換体。
9. ９．対の置換基のＲ２、Ｒ４とＲ３、Ｒ６の少なくとも１つか場合により置換さ れたエチレン基を形成する請求項５〜８のいずれか１項に記載のイオン交換体。
10. １０．前記支持体が粒状の架橋したアガロースまたはポリスチレン−ジビニルベ ンゼンマトリックスである請求項１〜９のいずれか１項に記載のイオン交換体。