JPH05505421A - 結晶質セルロースの製造 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ある種のセルロース材料の酵素的加水分解による微結晶性セルロース 製品（７８％以上の結晶度）の製造に関する。本発明はさらに、ＬＯＰＤで大き な結晶度を有する微結晶性セルロースの酵素的製造に関する。

２、技術水準 ７８％以上の結晶度を有するセルロースである結晶質セルロースすなわちＭＣＣ は、食品、医薬品および化粧品業界で用いるタブレット賦形剤、凝結防止補助剤 、充填剤、キャリヤー、安定分散系の形成（ＣＭＣ１乳漿タンパク等の材料と共 処理（ｃｏｐｒｏｃｅｓｓ）　した形態のもの）、繊維の供給源、その他など、 広範囲の用途を有する。

微結晶性セルロース（ＭＣＣ）の現在商業的に得られる形態のものは、良質溶解 バルブ（ｄｉｓｓｏｌｖｉｎｇ　ｐｕｌｐ）から作られ、約２００〜３００のＬ ＯＤＰに加水分解され、Ｘ線回折で７８％を超える結晶度を有する。それらは、 米国特許第２゜９７８．４４６号（Ｂａｔｔｉｓｔａ）に記載されるように、ア モルファスおよび結晶質形態のセルロースを含む木材バルブを、通常２．５標準 塩酸中、およそ１０５℃以上の高温で、約１５分から１時間酸水解し、その後、 セルロース加水分解産物を機械的に砕解することによって作られる。このプロセ スは、通常、副反応から望ましくない副産物か生成されるのを防止するため、塩 酸を用いて純粋グレードの木材バルブを加水分解することにより行われる。加水 分解反応はアモルファスセルロースを除去し、セルロース鎖の重合度を下げて実 質的に不溶性の材料か残る。これを通常、業界ではレベルオフ重合度（Ｌｅｖｅ ｌ−ｏｆｒｄｅｇｒｅｅ　ｏｒｐｏｂｙｎｅｒｉｚａｔｉｏｎ　：　ＬＯＤＰ） セルロースと称する。

ＬＯＤＰ値は、主に出発セルロース材料に依存し、加水分解条件の苛酷性に多少 依存する。通常、天然のセルロース繊維のＬＯＤＰは約２００〜４００の範囲に あり、再生セルロースから得られるＬＯＤＰは約２５〜約６０の範囲にある。

微結晶性セルロース粉末の製造および用途にかかわる当業者にとって、あるセル ロース材料について約７８％を超える結晶度を与えるＬＯＤＰ値を得る唯一の方 法は、上述したように酸水解であることが一般的見解であった。この見解は、有 機酸のみが、必要な反応性とセルロース構造のよりしっかりと結合された部分を 攻撃する実施容易性とを有し、並びに７８９６以上の大きな結晶度のＬＯＤＰセ ルロースを与える、という考えに主に基づいていた。微結晶性セルロースは、出 発材料のＬＯＤＰ以外では得られない、と以前は考えられていた。

従来技術において、セルロース分解の他の方法（例えば酵素的加水分解）が研究 され、それに関して報告もなされているが、それらからは７８％を越える結晶度 が得られないので、ＬＯＤＰを有する微結晶性セルロース粉末の商業的生産には 適さないと考えられてきた。

米国特許第４，４２７．７７８号において、セルラーゼを用い、５０℃付近の温 度でｐＨ約４〜５を使用した、タブレット形成に適するセルロース粉末を作る方 法か記載されている。得られるＤＰは約８８０程度であり、報告されている結晶 度は約７５％を超えなかった（すなわち、微結晶性セルロースは得られず、ＬＯ ＤＰは達成されなかった）。

酸水解による方法に伴う問題点は、酸を沸騰させるのにエネルギを要すること、 に腐蝕性があること、反応が制御できないこと、モしてＬＯＤＰ以外のＤＰが得 られないことである。さらに、従来の酵素法に伴う問題点は、７５％を超える結 晶度が得られないこと、そして約８８０未満のＤＰが見られないことである。

本発明は、種々の物を製造する際の代替として使用できるＬＯＤＰＭＣＣを製造 する酵素的方法を提供する。

本発明により、７８％を超える結晶度およびＬＯＤＰより大きいＤＰを有するＭ ＣＣを製造することか可能となる。

約１１００〜１３００の出発ＤＰを有する精製木材バルブなどのセルロース性原 料が、エンド−セルロース（ｅｎｄｏ−ｃｃ　ｌ　ｌ　ｕ　ｌ　。

ｓｅ）型活性を用いて２００〜３００の範囲のＬＯＤＰを達成することによりＬ ＯＤＰ微結晶性セルロースに転換できることが見い出された。また、このセルロ ース加水分解処理は、酸水解により製造される市販のＭＣＣの結晶塵における標 準値である７８％付近あるいはそれ以上（Ｘ線回折による）の高結晶質材料を与 えることがわがった。

本発明による高結晶質分解生成物（〜ＩＣＣ）へのセルロースの酵素的加水分解 は、以下の点において酸水解などの従来技術より優れている。すなわち、酵素的 プロセスは、ＬＯＤＰを達成するのに過激ではなく、穏やがなｐｌ！条件で行い 得る。本発明において、従来の酵素的加水分解に愛子効果は、ＭＣＣ製造に必要 な大きい結晶塵が得られると共にセルロースのＬ　ＯＤ　Ｐを達成できることに よる。

従って、本発明は、セルロース性＋イ料を、エンド−セルロース活性を有する酵 素を用いて、約３５〜７５℃の温度で、約２０〜４．０の範囲のｐｕにおいて、 約７８％以上の結晶塵を有するセルロースを形成するのに十分な時間、加水分解 に供することからなる、セルロース性材料を微結晶性セルロースに転換する方法 に関する。さらにまた、本発明は、約７８％を超える結晶塵と、セルロースのＬ ＯＤＰを超えるＤＰ１好ましくは約８００程度までのＤＰを有するセルロースか ら成る新規な組成物に関する。

本発明の方法は、従来の方法では得られなかった組成物を提供するのみならず、 拡張された温度反応条件を用いることなく結晶質セルロースを製造することがで き、従って資本および運転コストを削減した製造が可能となる。従来の酵素方法 とは異なり、ＬＯＤＰへの分解と共に、大きな結晶塵が達成できる。

一ドおよび形態のセルロース性材料が、酵素の特異性による望ましくない副反応 を生じることなく使用できる。そのような材料としては、セルロースの天然供給 源、セルロースの天然供給源から誘導された生成物などがある。

木材バルブの溶解グレード、モスリンクロス（ｍｕｓｌｉｎ　ｃｌｏｔｈ）、エ クスブローデッド木材バルブ（ｅｘｐｌｏｄｅｄ　ｗｏｏｄ　ｐｕｔｐ）および コツトンリンター（ｃｏｔｔｏｎ　ｌ１ｎｔｅｒ）などの容易に入手できるセル ロース性原料を用いることができる。この中で、木材バルブの溶解グレードは、 微結晶性セルロースの商業的製造に用いられる高度に精製した材料であり、本発 明に使用するのに好ましい原料である。モスリンクロスはコツトンのトリムエン ド（ｔｒｉＩＩｅｎｄ）に類似するものであり、綿織物製造の際の屑材料である 。エクスブローデッド木材バルブは、高温高圧の蒸気で処理し、その後爆発的減 圧工程（ｅｘｐｌｄｓｆｖｅ　ｄｅｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ　５ｔｅｐ）にさら されたセルロース材料である。この後者の処理は、ヘミセルロースを除去し、リ グニンを露出させ、そして材料の反応性表面積を増大させることが報告されてい る。さらに、エクスブローデッド木材バルブをアルカリ−アルコール抽出に供し てリグニンを除去することが有利である。

本発明に使用するセルロース性材料として特に好ましいものは、ウェットラップ バルブ（ｗｅｔｌａｐ　ｐｕｌｐ）　、すなわち、バルブ処理いかなる時点でも 乾燥を行わず、材料の脱水または水分除去を最少限にとどめそして高セルロース 含量を達成するようにして標準バルブまたは植物処理方法から得られた、未乾燥 、バルブスラリーまたはその他の水和植物セルロース性材料である。乾燥前の本 発明におけるウェット粉砕材料は、標準バルブまたは植物処理方法から得られる 。この例として、Ｉ　Ｔ　Ｔ　−Ｒａｙｏｎｉｅｒの予備加水分解スルフェート 法（ｐｒｅｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄ　５ｕｅｆａｔｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ）により南 部硬水からのウェットラップとして得られる５ｕｌｆａｔａｔｅ　Ｈ−Ｊバルブ がある。

本発明の方法に用いる酵素は、エンジン−セルロース性活性（ｅｎｄｏ−ｃｅｌ ｌｕｌｏｓｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ）を存し、種々の天然微生物ソースおよび最 近では組換微生物ソースから得られる。

それらには、セルラーゼの市販配合物（ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）　（エンド− （ｅｎｄｏ−）およびエキソ−（ｅｘｏ−）セルロース性活性を有する数種の異 なった酵素の組合せ）、またはエンド−セルロース性活性を存する成分を強化さ れる。あるいはエキソ−セルロース性活性を有する成分を強化される。あるいは エキソ−セルロース性活性を有する成分を減じるか除去するように改質されたセ ルラーゼなどがある。エンド−セルロース性活性は、セルロースのアモルファス 部分を選択的に除去する。エキソ−セルロース性活性は結晶質部分を除去するよ う作用し、従って望ましくない。セルラーゼの豊富なソースは、Ｔｒｊｃｈｏｄ ｒＩＩａ　ｖｉｒｉｄｅから得られ、エンド−セルロース性活性の強化されたも のを含むいくつかの市販の配合物が入力できる。セルロース性材料が約０．２５ ｇ／象から７５ｇ／Ｊ！の濃度で存在する場合、酵素の好ましい量は約１１００ ｐｐ＋から約５０００ｐｐｍである。好ましくは、プロダクト（ｐｒｏｄｕｃｔ ）が約０．５　ｇ／Ｊ！から約４．０ｇ／ｌの量で加えられる場合にジエネンコ ア社（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｉｎｃ、）のＣｅ１ｌ ｕｌａｓｅ　１２３である。より好ましくは、ＣＢＨ１および／またはＣＢＨＩ Ｉ欠失された（ｄｅｌｅｔｅｄ）セルロース材料である。種々の酵素は異なった 比活性（ｓｐｅｃｊｆｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ）を有し、従って同じ結果を得る のに異なった量を必要とすることは理解されよう。しかしなから、酵素の正確な 量を決定することは、本発明の教示内容からみて、十分に技術範囲内にある。

本発明における酵素的加水分解は、水溶液中で、約３５〜７５℃の範囲の温度（ 好ましくは４０〜６０℃の範囲の温度、より好ましくは約り０℃〜約６０℃の範 囲の温度）で行われる。

加水分解は、約２〜４の範囲のｐＨ１好ましくは約２．５〜３゜５の範囲のｐＨ １より好ましくは約２．５〜３．０の範囲のｐＨで臨海的に行われる。

加水分解の正確な時間は、出発材料の性質、ｐＨ１並びに酵素の量と比活性によ って変わるが、一般に、２４時間以−ドの加水分解時間で望ましい結果が得られ る。時間、温度、ｐＨ１バルブのタイプおよび酵素の量などを含む（これらに限 定されるものではないか）種々の処理条件がＭＣＣを生成する。これらの条件は また、７８％以上の結晶度およびセルロース性材料の本来の出発ＤＰからＬＯＤ Ｐまでの範囲のＤＰを有する結晶質セルロース材−スされるような範囲の生成物 を生成する。加水分解の後、結晶質セルロース材料を機械的に砕解（例えば剪断 作用により）することによって、種々の達成可能な粒度とし得る。これは、微結 晶性セルロースを製造する際に特に有用である。

米国特許第２．９１８．４４６号（Ｂａｔｔｉｓｔａ）に述へられているように 、加水分解および剪断の後、ＭＣＣ製造に必要なもう１つの重要な処理工程は、 セルロースの乾燥である。それは、従来の技術によって行ってもよいし、セルロ ースをスプレードライに供するか、周知の他の乾燥方法で行うか、あるいはしか るべく行ってもよい。最終製品は、タブレットの調製、接着性バインダー、乾燥 滑剤、エマルジョン安定剤、インクパーミュテート（ｉｎｋ　ｐｅｒｉｕｔａｔ ｅ）　、モールド組成物、殺虫剤のキャリヤー、コム添加物、木材床、ペットフ ード、ベビー製品、スターチ製品、懸濁液のマウスフィール添加剤（ｍｏｕｔｈ 　ｆｅｅｌ　ａｄｄｉｔｉｖｅ）　、ペイント、化粧品、パッケージング、酪農 製品、サラダドレッシング、ヘークト製品（ｂａｋｅｄ　ｇｏｏｄ　）その他な どの高範囲な製品に使用できる。

Ｒｕ５ｋｉｎタービンブレンドを備えたＬｉｇｔｈｎｏｎ型かくはん機を用いて 、温度制御された１１の水浴中で加水分解を行った。かくはんは、５００ｒ、ｐ 、ｍて反応が起こっている間行った。

この実施例において、ｔｏｏ　ｇのウェットラップＳｕｌ　ｒａｔａｔｅＨＪバ ルブを、ＨＣＥ中に調製したｐＨ２，９の緩衝液９００ｇに加えた。反応温度を ６５℃に制御し、酵素レベル（シトラーゼ（ｃｃｙｔｏｌａｓｅ）１２３）を０ ．５　ｇ／Ｊおよび４．０ｇ／Ｉ！にした。反応を２４時間と４８時間行わせた 。その後、サンプルを反応器から取り出し、真空口過によって変性させた。次に 、サンプルを、洗浄物のｐＨが７．０になるまで豊富な量の水を用い、５サイク ルに亘り、洗浄そしてその後前述したように変性した。次に、サンプルを凍結乾 燥し、ＤＰを測定した。その結果を以下に示す。

酵素レベル　２４時間　４８時間 ０．５　ｇ／ｆ　３４５　３２１ ４．０　ｇ／ｌ　２７５　２５４ 実施例２ 経済的に実施可能な変更範囲をもって最小ＤＰを得るための最適条件を達成する ため、統計的に設定された中心的複合調査を行った。設定は、ｐＨ，温度、酵素 レベルに関して行い、１つのエキソ−セルロース活性を欠落させｆ＝　セルロー スブリペレーション（ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）　（より特定的にはセロバイオ ハイドロラーゼ（ｃｅｌｌｏｂｉｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ　ｌ）　）を用いた。実 験および反応は、実施例１に記載したように行つた。調査した範囲は次の通りで あった：ｐＨの範囲　：２．８〜６．２ 温度の範囲：４６℃〜６３，５℃ 酵素コーンのレベル範囲：０〜２．５　ｇ／１２９６のＤＰが以下の条件を用い て（剪断なし）得られた。

ｐＨ３，５、温度５５℃、酵素−２ｇ／Ｊ２、時間２４時間、９０％の収量 実施例３ ＣＢＨ１＆２除去のセルロースの酵素ブリペレーション（ｅｎｚｙｍｅ　ｐｒｅ ｐａｒａｔｔｏｎ）　（１６ｇ／Ｊ！タンパク）を用いた。ここでも、ウェット ラップ５ｕｌｆａｔａｔｅ　ＨＪを使用し、前述の実験条件を用いた。酵素は８ ｇ／ｌ、Ｌｏｇ／ｆ！および１２ｇ／ｌでテストし、温度は５５℃、ｐＨは３． ０、そして全ての反応を２４時間とした。３５３のＤＰが得られた。

実施例４ ＣＢＨ１＆２欠落酵素生成物のエンリッチドプリベレーション（ｅｎｒｉｃｈｅ ｄ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）　（１３３ｇ／　１のタンパク）を用いて実施例 ３の手順をくり返した。反応条件を同しにし、酵素レベルをそれぞれ２ｇ／Ｉ！ と３ｇ／ｌとした。

バルブミルで標準乾燥操作によって乾燥された５ｕｌｒａｔａｔｅＨＪパルプの サンプルも使用した。結果は以下の通りである。

バルブ　酵素の量　ＤＰ／２４時間 乾燥ＨＪ　２ｇ／ｆ！　６６１ ネツト（ｎｅｔ）　ＨＪ　２ｇ／Ｊ！　４０２ネツト（ｎｅｔ）ＨＪ　３ｇ／ｌ 　２９２実施例５ ミルから出たバルブの乾燥シートとして調製した市販の標準的形態で得られた種 々のバルブ（硬水および軟材の両方）をスクリーニングするため、一連の統計的 に設定した実験を行った。多数の変数についてスクリーニングし、パラメータに は、ｐ）Ｉ、温度、酵素レベル、加水分解の時間を含めた。１つの実験に種々の 酵素配合物（ｅｎｚｙＩｌｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｔｏｎ）を用いた。結果をＤＰ 測定値で分析した。

Ｒｕ５ｋｉｎタービンブレードを用い、５００ｒ、ｐ、ｉにおいて、前述のよう にして加水分解を行った。それらスクリーニング実験の結果を以下に要約する。

バルブプのタイプ　ｐＨａμ（Ｉ素しベル　反応時間（時Ｉｆｆ）ＤＰＰｏｎｔ ｉａｃ　Ｍａｐｌｅ　４．０　４０℃　４．０ｇ／　１　２４　６９４Ｓｔ、Ａ ｎｎｅＵｌｔｒａ　４．０　４０　４．０　２４　７０１Ｔｅｉｂｅｃ　４．０ 　６０　４．０　２４　８７０Ｔｅｍｐｈｉｔｅ　４．０　［ｉｏ　４．０　２ ４　７４４Ｓｔ、ＡｎｎｅＲｅｇ、　４．０　６０　４．０　２４　７２７ＨＶ Ｘ　４．０　６０　４．０　２４　Ｂ２３ＳｏｌｋａＦ］ｏｃ４０　４．０　［ ｉｏ　４．０　２４　７４８ＳｏｌｋａＦｌｏｃ２００　４．０　６０　４．０ 　２４　６７ＯＮＢ８　４．０　８０　４．０　２４　７４４Ｐｏｐｌａｒ　４ ．０　８０　４．０　２４　７２７＾５ｐｅｎ　４．０　６０　４．０　２４　 ６２３Ｓｔ、Ｃｒｏｌｘ　４．０　６０　４．０　２４　７４８Ｐｕｇｅｔ　＾ １ｐｈａ　４．０　６０　４．０　２４　６７０Ｃａｎｆｏｒ　４．Ｏｆｉｎ　 ４．０　２４ＳｕｌｆａｔａｔｅＨＪ　４．０　６０　４．０　２４　８３８Ｅ ｕｃａｌｙｐｔｕｓ　４．０　［ｉｏ　４．０　２４　８５６Ｓｕｌｒａｔａｔ ｅＨＪ　２Ｊ５　５５　２．０　２４　５１０Ｒｅｐａｐ　４．０　６０　４． ０　２４　５６５Ｇａ、Ｐａｃｉｆ’ｊｃ　４．０　６０　４．０　２４　８１ ８Ｓｕｌｆａｔａｔｅ　ＨＪ Ｃｙｔｏｌａｓｅ１２３　２．６　６５　４．０　２４　５２１ＣＢＨ１ｄｅｌ ｅｔｅｄ　２．６　８５　４．０　２４　５６９Ｍｉｌｅｓｚｙｍｅ　２．６　 ６５　４．０　２４　６２８Ｍｕｌｔｉｆｅｃｔ　２．６　Ｂ５　４．０　２４ 　５９８Ｃｅｌｌｕｚｙａ＋ｅ　２．６　６５　４．０　２４　８０３要　約　 書 本発明は、酵素的加水分解により大きな結晶塵を有するセルロースを製造する新 規な方法に関し、さらに、それらの方法によって製造された、広範囲のＤＰ値を 有する新規なセルロース性材料に関する。本発明の方法は、特に微結晶性セルロ ースを製造するのに有用である。

手続補正書 １　事件の表示 平成０４年特許願　第５０６．６９４号２、　発明の名称 結晶質セルロースの製造 ３、　補正をする者 事件との関係　特許出願人 名　称　ジェネンコア　インターナショナル　インコーホレーテッド４　代理人 住　所　東京都港区六本木５−２−１　はうらいやビル７階５、　補正命令の日 付 ブレ ６、補正の対象 明細書および請求の範囲 ７、補正の内容 （１）明細書第３頁第１６行と第１７行の間に下記の記載を挿入する。

「発明の概要」 （２）同第１２頁第１６行の後に下記の記載を追加する。

「　以下、本発明の実施態様を項に分けて記載する。

１、セルロース性材料を結晶質セルロースに転換する方法であって、 乾燥されていないウェットラップバルブセルロース性材料を、約３５〜７５℃の 温度、約２．０〜４．０の範囲のｐＨにおいて、約７８％以上の結晶塵を有する 結晶質セルロースを形成するのに十分な時間、エンド−セルロース性活性を有す る酵素を用いて加水分解に供し、ＤＰをセルロース性材料のＬＯＤＰから出発セ ルロース性材料のＤＰまでとすることを特徴とする方法。

２、前記温度が約４０〜６０℃であることを特徴とする実施態様第１項記載の方 法。

３、前記温度が約５０〜６０℃であることを特徴とする実施態様第１項記載の方 法。

４、前記ｐＨが約２．５〜３．５の範囲にあることを特徴とする実施態様第１項 記載の方法。

５、前記ｐＨが約２，５〜３．０の範囲にあることを特徴とする実施態様第１項 記載の方法。

６、出発セルロース性材料が繊維性植物材料から得られるアルファセルロースで あることを特徴とする実施態様第１項記載の方法。

７、前記８発セルロース性材料か木材パルプの溶解グレードであることを特徴と する実施態様第６項記載の方法。

８、前記酵素がセルラーゼであることを特徴とする実施態様第１項記載の方法。

９、前記酵素が、エンド−セルロース活性が強化されているか、あるいはＣＢＨ ＩまたはＣＢＨＩＩ活性を低下させたセルラーゼであることを特徴とする実施態 様第１項記載の方法。

１０、前記方法を、約８５％以上の結晶度を有するセルロースを形成するのに十 分な時間行うことを特徴とする実施態様第１項記載の方法。

１１、前記方法を、結晶質セルロースの重合度が、セルロース性材料で達成可能 なレベルオフ重合度より大きく、オリジナル重合度の７５％より小さくなるのに 十分な時間行うことを特徴とする実施態様第１項記載の方法。

１２、前記方法を、結晶質セルロースがレベルオフ重合度に達するのに十分な時 間行うことを特徴とする実施態様第１項記載の方法。

１３、前記方法を、約２４時間またはそれ以下の時間行うことを特徴とする実施 態様第１項記載の方法。

１４、前記酵素が約０．５　ｇ／Ｊ！から約４．０　ｇ／１２の範囲の量で存在 することを特徴とする実施態様第１項記載の方法。

■５、約７８％以上の結晶度を有するセルロースと、エンド−セルロース性活性 を有する酵素とを含むことを特徴とする組成物。

１６、結晶質セルロースが約２００〜１２００のＤＰを有することを特徴とする 実施態様第１５項記載の組成物。

１７、結晶質セルロースが約２００〜８００のＤＰを有することを特徴とする実 施態様第１５項記載の組成物。

１８、約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより大きいＤＰとを有すること を特徴とするセルロース。

１９、約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより大きく、約８００より小さ いＤＰとを有することを特徴とするセルロース。

２０、約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより大きく、約６５０より小さ いＤＰとを有することを特徴とするセルロース。

２１、約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより太き（、約５００より小さ いＤＰとを有することを特徴とするセルロース。」 （３）請求の範囲を別紙のように補正する。

請求の範囲 １、セルロース性材料を結晶質セルロースに転換する方法であって、 乾燥されていないウェットラップパルプセルロース性材料を、約３５〜７５℃の 温度、約２，０〜４．０の範囲のｐＨにおいて、約７８％以上の結晶度を有する 結晶質セルロースを形成するのに十分な時間、エンド−セルロース性活性を有す る酵素を用いて加水分解に供し、ＤＰをセルロース性材料のＬＯＤＰから出発セ ルロース性材料のＤＰまでとすることを特徴とする方法。

２、出発セルロース性材料が繊維性植物材料から得られるアルファセルロースで あることを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。

３、前記酵素がセルラーゼであることを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法 。

４、前記酵素が、エンド−セルロース活性が強化されているか、あるいはＣＢＨ ＩまたはＣＢＨＩＩ活性を低下させたセルラーゼであることを特徴とする請求の 範囲第１項記載の方法。

５、前記方法を、結晶質セルロースの重合度が、セルロース性材料で達成可能な レベルオフ重合度より大きく、オリジナル重合度の７５％より小さくなるのに十 分な時間行うことを特徴とする実施態様第１項記載の方法。

６、約７８％以上の結晶度を有するセルロースと、エンド−セルロース性活性を 有する酵素とを含むことを特徴とする組成物。

物。

旦、約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより大きいＤＰとを宵することを 特徴とするセルロース。

国際調査報告 １”ｌ＋４＋、＋ｌ１６’ｌ’　Ａｌ１６１＜、ｌｂ６＋　Ｎｏ　ＰＣＴ／ＵＳ ９２１０１３８７

Claims (21)

【特許請求の範囲】
1. １．セルロース性材料を結晶質セルロースに転換する方法であって、 乾燥されていないウェットラップパルプセルース性材料を、約３５〜７５℃の温 度、約２．０〜４．０の範囲のｐＨにおいて、約７８％以上の結晶度を有する結 晶質セルロースを形成するのに十分な時間、エンドーセルロース性活性を有する 酵素を用いて加水分解に供し、ＤＰをセルロース性材料のＬＯＤＰから出発セル ロース性材料のＤＰまでとすることを特徴とする方法。
2. ２．前記温度が約４０〜６０℃であることを特徴とする請求の範囲第１項記載の 方法。
3. ３．前記温度が約５０〜６０℃であることを特徴とする請求の範囲第１項記載の 方法。
4. ４．前記ｐＨが約２．５〜３．５の範囲にあることを特徴とする請求の範囲第１ 項記載の方法。
5. ５．前記ｐＨが約２．５〜３．０の範囲にあることを特徴とする請求の範囲第１ 項記載の方法。
6. ６．出発セルロース性材料が繊維性植物材料から得られるアルファセルロースで あることを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。
7. ７．前記出発セルロース性材料が木材パルプの溶解グレードであることを特徴と する請求の範囲第６項記載の方法。
8. ８．前記酵素がセルロースであることを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法 。
9. ９．前記酵素が、エンドーセルロース活性が強化されているか、あるいはＣＢＨ ＩまたはＣＢＨＩ１活性を低下させたセルロースであることを特徴とする請求の 範囲第１項記載の方法。
10. １０．前記方法を、約８５％以上の結晶度を有するセルロースを形成するのに十 分な時間行うことを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。
11. １１．前記方法を、結晶質セルロースの重合度が、セルロース性材料で達成可能 なレベルオフ重合度より大きく、オリジナル重合度の７５％より小さくなるのに 十分な時間行うことを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。
12. １２．前記方法を、結晶質セルロースがレベルオフ重合度に達するのに十分な時 間行うことを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。
13. １３．前記方法を、約２４時間またはそれ以下の時間行うことを特徴とする請求 の範囲第１項記載の方法。
14. １４．前記酵素が約０．５ｇ／ｌから約４．０ｇ／ｌの範囲の量で存在すること を特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。
15. １５．約７８％以上の結晶度を有するセルロースと、エンドーセルロース性活性 を有する酵素とを含むことを特徴とする組成物。
16. １６．結晶質セルロースが約２００〜１２００のＤＰを有することを特徴とする 請求の範囲第４項記載の組成物。
17. １７．結晶質セルロースが約２００〜８００のＤＰを有することを特徴とする請 求の範囲第１５項記載の組成物。
18. １８．約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより大きいＤＰとを有すること を特徴とするセルロース。
19. １９．約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより大きく、約８００より小さ いＤＰとを有することを特徴とするセルロース。
20. ２０．約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより大きく、約６５０より小さ いＤＰとを有することを特徴とするセルロース。
21. ２１．約７８％以上の結晶度と、自身のＬＯＤＰより大きく、約５００より小さ いＤＰとを有することを特徴とするセルロース。