JPH05508097A - バイオプシー針に基づく蛍光を強化した光増感器 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 バイオプシー針に基づく蛍光を強化した光増感器発明の分野 本発明は一般に蛍光分光法を用いる転移癌の即時内部作動検出及びバイオプシー のための方法及び装置に関する。

背景 多分、癌はどひどく一般に恐れられる病気は近代文明で知られていない。心臓発 作や脳卒中は、満足のいくように長い生命に対し、正常な終りに、又は、それら が中年で起きるとき、年齢の正常な危険として、定住性の生き方の報いについて 考える傾向がある。対称的に、癌は、あたかもそれが外部の原因に何もおかげを こうむらないかのように、金持ち及び貧乏、肥満及び痩せ、老年及び若年に見さ かいな（−撃を加える予測できない疾病として考えられる。ジエイ、カーンズ。

ミューティジョン、セレクション・アンド・キャンサー、ネイチャー、２５５巻 、１９７−２００頁（１９７５）。

米国では毎年、約６００．０００の癌の新しい例が診断され、この国では５人に １人が癌又はその処置と関連した合併症で死ぬとされる。しかしながらこれらの 癌患者は彼等の一次腫瘍によっては死なない。彼らは、それどころか転移二元の 腫瘍からそれら自身を分離し、自体を経てしばしば離れた部位に移動する悪性の 細胞により確立された多発性の広範囲に及ぶ腫瘍コロニーで倒れる。ジー・ニコ ルソン、エクスベリメンタル・ツモア・メタスタシス：キャラクタリステイクス ・イン・オーガン・スベシフイシティ、バイオサイエンス、２８巻、７号、４４ １−４７頁（７月、１９７８）。もし−次腫瘍が十分に早く検出されるなら、そ れは通常、手術、放射線、化学療法又は光力学療法、又はそれらの処置の幾つか の組合せにより除去できる。不幸にも転移コロニーは、それらがしばしば援助し ない眼に見ることができず、大きさが非常に小さいか又は、組織又は器管に隠さ れるので、検出、除去するのが難かしい。この転移を検出し根絶することの困難 なことは、つかの間の予測できない疾病として癌のイメージを強める。

現在、−次腫瘍検出はＸ線、超音波検査、核磁気共鳴（ＮＭＲ）、ポジトロン放 射断層撮影法（ＰＥＴ）、化学検査分析及びバイオプシーにより行なわれる。し かしながら、−次腫瘍からの転移の散布はこれらの方法で検出することはしばし ば不可能である。結果として、これらのつかまえにくい転移コロニーを検出し集 める正確で繊細な技術を確立する必要がある。

癌の各診断は最も確実なバイオプシーにより立証されなければならない。加えて 、バイオプシーは癌の処理において決定的な技術である。異なる型の新生物は治 療の種々の様式にそれら自身の応答を有するので、組織的診断は悪性疾病の適当 な処理を計画するのに肝要である。さらにバイオプシーは腫瘍の適当な試料を病 理学者に提供する。バイオプシーに加えて、内部作動手段の間の即時の水冷切断 がしばしば悪性の最終診断に必要である。しかしながら、水冷切断組織学は時間 を消費し高価である。手術の間に行なうので、この手段は疑わしい癌組織の病理 が決定されるまで外科医に手術中流を停止させる必要がある。一度決まると、手 術は再開できる。続いて、転移の即時標示及び手術手段の間疑わしい組織の同時 バイオプシー試料を提供する装置が入手できることは、決定的なバイオプシーの 必要性を満たし、水冷組織組織学の不利を除去する。

これと共に、幾つかのポルフィリンが新生物組織により、選択的に保持されるこ とが６０年以上にわたり知られて来た。エイ、ポリカード、エラデス・スル・レ ス・アスペクツ・オファーツ・パー・ド・ツマーズ・エクスベリメンタルス・エ クザミンエサ・う・ルミール・ド・ウッド、ジー・アール・セアン・ツク・パイ オル・９１：１４２３−４（１９２４）。これらの幾つかのポルフィリンも、蛍 光を励起するため適当な波長を含んでいる光にさらしたのち、特徴的な２つのピ ークを有する赤い蛍光を放つ。癌組織により選択的に保持される如何なる蛍光剤 も使用できるが、１９６１年にリブソンは、ポルフィリンのこれらの２つの性質 を用いて一次腫瘍検出系を開発した。リブソンは又、より良好な腫瘍を探り当て る性質を示すヘマトポルフィリン誘導体（ＨＰＤ）を導入した。アール、エル、 リブソン等、ザ・ユース・オブ・ア・プリバチイブ・オブ・ヘマトポルフィリン ・イン・ツーモア・デテクション、ジエイ、ナツト　キャンサー・インスト、２ ６：１−１１（１９６１）。次いでドゥファ・ティは、腫瘍を根絶するＨＰＤの 感光性性質の利点を取り、治療的癌様式性としてＨＰＤの使用に扉を開いた。こ の時から、癌競争の場でのＨＰＤの一次重要性が潜在的癌治療として存在し、広 範な調査がその使用を純化するのになされた。ティー・ドゥファ・ティ、シー、 アール、シー、クリティカル・レビュー・イン・オンコロシイ／ヘマトロジイ、 ニス。

ダビド、イー、ディー、（シー、アール、シー、プレス、フロリダ、１９８４） 。

「ヘマトポルフィリン誘導体光力学治療」と名づけられ、癌治療でのＨＰＤの機 構は他の組織に比例して悪性腫瘍へのその親和性に基づく。静脈内に注射された 場合、ＨＰＤは、高レベルで、正常組織よりも悪性腫瘍組織に集まる。次いでＨ ＰＤは光により活性化され、存在するトリブレット酸素から一重項酸素の生成を 触媒する。壊死の正確な機構は不明であるが、反応性−重項酸素がアミノ酸及び 脂肪酸の不飽和炭素−炭素結合を酸化することが示唆されて来た。細胞大分子の 構造統合性の続く損失が細胞破壊性効果及び腫瘍壊死となる。υ等、アプリケイ ジョン・オブ・ＨＰＤ・アンド・レイザー−インシュースト・フォト・ダイナミ カル・リアクション・イン・ザ・トリートメント・オブ・ラング・キャンサー、 レイザー・イン・サージェリイ・アンド・メディシン、４：３ｌ−７（１９８４ ）。

光力学癌処置でのＨＰＤのこの使用は、非常に驚くべきそして速やかに発達する 可能性である。しかしながら、癌の完全な治療は、リンパ又は循環系を経て有機 体にくまなくまき散きちらされたこれらの癌細胞の特異的検出及び切除なしには 不可能である。本発明は、転移のこの問題を扱いＨＰＤの腫瘍捜査性質及び蛍光 を用いることにより潜在的癌治療を促進し、慣用方法によっては検出されない癌 組織を即時に検出し、同時にバイオプシーする。

ＨＰＤを含む多くの調査が癌装置に関してなされたが、幾らかの研究者がＨＰＤ の腫瘍検出能力を見出した。しがしながら、この検出業務のゴールは、決定によ り最下部膜を突き貫かず、従って転移しない本来の場所に癌癌を集めるため表面 蛍光を用いて来た。これに対し、本発明は、転移部位を検出し、バイオプシーし 、そして腫瘍の深さ及び大きさを測定することが可能である。事実、本発明は、 一つには、慣用の診断方法によっては一般に検出されない転移部位が一次腫瘍及 び正常組織のそれと異なる蛍光スペクトルを生じるという発見に基づ（。転移部 位の感光型強化蛍光スペクトルは、−次腫瘍及び正常組織の蛍光スペクトルより 一貫して有意に高い。

ブロフィオ等は、ＨＰＤ蛍光により本来の位置に、小肺腫瘍及び癌を集める蛍光 気管支鏡系を記載した。イー・ブロフィオ、フルオレッセンス・ブロンコスコピ イ・フォア・ロー力うイゼイション・オブ・カルシノーマ・イン・シラ、メト。

フイス、１０（１）３５−３９頁（１月／２月１９８３）。アンカースト、モン タン及びスバンベルグはそれぞれ正常及び腫瘍ラット組織におけるＨＰＤレーザ ー誘導蛍光を研究し、腫瘍検出のため最適ＨＰＤ表面蛍光を測定した。ジェイ、 アンカースト等、レーザー−インシュースト・フルオレセンス・スタディズ・オ ブ・ヘマトポルフィリン・プリバチイブ（ＨＰ　Ｄ）・イン・ノーマル・アンド ・ツーモア・ティシュ−・オブ・ラット、アプライド・スペクトログラフイ、３ ８巻、６号、８９０−８６頁（１９８４）、ニス、モントン、マルチカラー・イ メイジング・アンド・コントラスト・エンハンスメント・イン・キャンサー・ツ モア・ロー力うイゼイション・ユージング・レイザー−インシュースト・フルオ レセンス・イン・ヘマトポルフィリン−プリパテイブ・ベアリング・ティシュ− 、オプティクス・レターズ、１０巻、２号、５６−８頁（２月、１９８５）及び ケイ・スバンバーグ、フルオレセンス・スタディズ・オブ・ヘマトポルフィリン ・プリバチイブ・イン・ノーマル・アンド・マリグナント・ラット・ティシュ、 キャンサー・リサーチ、４６：３８０６−８０８（８月、１９８６）。カド等は 、気管及び中心気管支のＨＰＤ−標識扁平細胞癌の局在を促進した４つの異なる 気管支鏡蛍光検出系を記載した。レイザ・カド等、アーリイ・デテクション・オ ブ・ラング・キャンサー・パイ・ミーンズ・オブ・ヘマトポルフィリン・ディバ チイブ・フルオレセンス・アンド・レーザー・フォトラジェイション、クリエッ クス・イン・チェスト・メディシン、６巻、２号、３３７−５３頁（６月、１９ ８５）。

他の者はＨＰＤの腫瘍捜査性質を用い癌を検出することを試みたが失敗した。

この失敗は、明らかに癌組織における固有の多量の遊離のポルフィリン及び正常 組織におけるＨＰＤの取込みによるものであった。従って、ＨＰＤは検出に関し 良好なインビボ技術を提供しないことが結論づけられた。しかしながら本発明は これらの失敗に打ち勝ち、本来の位置の及び転移を見つけるのが困難な癌を検出 することが可能である。さらに、一度検出すると、本発明は又、転移部位の即時 のバイオプシーをも考慮する。

アール・アール・アルファノに対する米国特許番号４，９３０．５１６において 、細胞の自然可視のルミネッセンスを用いる本来の位置の腫瘍の存在を検出する 方法及び装置が記載される。発明は、亜細胞細胞器管に多量に見られる自然のフ ラビン及びポルフィリンにより生じた細胞の固有の蛍光にもっばら基づく。

発明の要約 転移癌の即時内部作動検出及びバイオプシーのための本発明は、発明の一実施態 様により、外科手術の前に癌組織により選択的に保持された感光剤（Ｐ　ｈｏｔ ｏｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇ　ａｇｅｎｔ）を投与することを含む。試験される部 分は次いで、ファイバーオブティックバイオブシーブローブのファイバーオプテ ィック部分から特異的波長に濾過された単色光及び／又は非干渉光のビームで照 らされ、発した蛍光はスペクトログラフにより記録され、スペクトル曲線として プロットされる。試験組織についての感光器誘導蛍光（Ｓｌ）及び自動蛍光（Ｓ ２）の強度比（Ｓ　１／Ｓ　２）は、同じ波長での一次腫瘍と正常組織について の強度比と比較する。正常と異なる蛍光パターンを示す全ての組織は直ちに腫瘍 深さを試験し、ファイバーオブティックバイオブシーブローブのバイオプシー部 分を用い削り、次いで組織学的試験に付すことができる。

一実施態様による本発明の装置は、光源、スペクトログラフ、ビデオカメラ、デ ィジタル装置、コンピューター、大多数の波長を越える放射光の強度を測定し、 比較するディスプレイ手段、並びにバイオプシー装置を含む。

他の実施態様による本発明の装置は、光源、光学フィルター、光検出器、異なる 波長で放射された光を測定するためのディスプレイ手段及びバイオプシー装置を 含む。しかしながら、他の実施態様が利用し得ること、及び構造的変更が発明の 範囲から脱することなくなしうることが理解される。従って、以下の詳細な記載 は、限定する感覚に取るべきでなく、本発明の範囲は添付の請求の範囲により最 善に定められる。

本発明の一般的目的は、裸眼に可視でない転移の即時内部作動の検出のための装 ！及び方法を提供することである。

本発明の他の目的は、−次腫瘍を検出するのに用いられる慣用の診断方法により 検出されない転移の即時内部作動検出のための装置及び方法を提供することであ る。

本発明のものと別の目的は、蛍光スペクトログラフイを用いる転移の即時内部作 動検出のための装置及び方法を提供することである。

本発明のその上の目的は、冒された組織における転移関連の程度の即時測定のた めの装置及び方法を提供することである。

本発明のさらにその上の目的は、疑がわしい転移組織を検出するのに直ちに削る 装置及び方法を提供することである。

氷冷した部分組織学により受けた時間及び費用を除くことも本発明の目的である 。

これらの及び他の目的は、以下の記載及び添付の請求の範囲からこの分野の当業 者に容易に明らかとなるであろう。

図面の簡単な説明 図１は実験の光学バイオプシープローブの概要の図である。

図２はフォトフリン■を含むラット悪性組織の蛍光スペクトル及びラット組織超 過時間の自動蛍光スペクトルである。

図３は、興なるラット組織での種々のフォトフリン■用量についての自動蛍光に 対するフォトフリン■の蛍光強度比のグラフ分布である。

図４は、特異的ラット組織超過時間でのフオトフリン■の蓄積についての自動蛍 光に対するフォトフリン■の蛍光強度比のグラフ分布である。

図５は、投与後４８時間特異的ラット組織での興なる用量のフオトフリンＨにつ いての自動蛍光に対するフォトフリンＨの蛍光強度比のグラフ分布である。

発明の詳細な説明 本発明は、蛍光分光学を用いる転移癌の即時内部作動検出及びバイオプシーのた めの方法及び装置に向けられる。

腹腔診察の間、蛍光スペクトルを測定するのに用いた実験配置は、励起源として ４４２止でのヘリウム−カドミウムレーザー操作を含んだ。４００ミクロン心径 ７ァイバーを有する手は低力（１７ｍｗ）放射を生じる組織に向けられた。同じ ファイバーを用い、反射したそして放出した光を５ＰＥＸ５００分光計の入力に もどした。分光計出力は光学多重チャンネル検光子（ＯＭＡＩＩＩＥＧ＆Ｇ）に 結合したシリコンダイオード配列（モデルＡ１４２０ＢＳＥＧ＆Ｇ）に向けられ た。次いでＯＭＡからの信号は、直ちに試験するためスクリーン上に表示された 。一連の正常スペクトルは基線のため左内側大腿筋肉から記録した。５４０ｎ■ （自動蛍光）及び６３０ｎａ＋（フォトフリン■）での蛍光強度を同時にモニタ ーした。これらの強度の比（工０．。ｎｍ／　Ｉ　ｓａ。ｎｍ）を用いることに より、相対値を各地区研究に割り当てることができた。強度の比（Ｉ　ｓｓ＋＋ ｎｍｌ／　Ｉ　５４゜ｎｍ）の増加値は可能な転移部位を知らせた。

そのような強度の増加した比を表示している組織はファイバーオプティックプロ ーブとまとめられたバイオプシー装置を用いて除去され、組織学的試験に付され た。

本発明によって癌組織の存在を検出するについて、２つのプローブ信号Ｓ１及び Ｓ２の比（Ｓ　１／Ｓ　２）は既知非癌部分を最初に測定した。Ｓｌは６３０ｎ Ｉｉ（フオトフリン■）での蛍光強度を表わし、Ｓ２は５４Ｑｎ＋ｎ（自動蛍光 ）での蛍光強度を表わす。Ｓ　１／Ｓ　２比の増加値は可能な転移部位を知らせ る。

別法として、光源は特異的波長に濾過された実質的に単色光及び／又は統一のな い光を放っている如何なる装置をも含む。ファイバーオプティックプローブは多 重又は単一ファイバー配列からなり、その小径は好ましくは約４００ミクロンで ある。ファイバーオプティックプローブを、腫瘍の深さの即時測定及び即時の組 織除去のためバイオプシー針（バクスター、トリーカット（商標）又は全ての慣 用のバイオプシー針）と統合する。バイオプシー針は、冒された組織における腫 瘍関連の深さを視覚で測定するために目盛ることができる（インチ、ミリメータ ー）。実験の光学バイオプシープローブの概要図は図１に示される。光学プロー ブ１はバイオプシー刃の頂上表面にどんな方法でもまとめることができ、次いで プローブ包装３に収めることができる。しかしながら他の実施態様も利用しうる し、構造的変化を、発明の範囲から脱することなく光学バイオプシープローブに なしうることが理解される。

２０匹の雄ロブンドーウイスターラットの癌及び正常組織から放出された蛍光を 研究した。全腫瘍は、ボラードラット前立腺アデノカルシノーマ（ＤＡ−１１１ ）の１０’生細胞を各動物の右横腹に接種することにより皮下に移植した。この 腫瘍モデルは、同側のリンパ管を経てのみ血管外部位から均一にそして自然に転 移することが知られているので選択した。この腫瘍のユニークな、予測のつく広 がりのために、動物の反対側をコントロールとして用いることができた。加えて 、態検出は、ＰＡ−ｍ細胞を伴うラットが身体的損傷の証拠なしに移植後４０日 を越えて生きるので、このモデルで強められた。

観察の４２日後、フォトフリンＩＩ（ＱＬＴフォトセラビューティクス、インコ ーホレーテッド、パンクーパ、カナダ）を、０．７５−７．５■ｇ／ｋｇの用量 で、手術調査前２４−４８時間に腹腔内に投与した。１８匹の動物を８グループ に分けて４つの異なる濃度のフォトフリンｎ（７，５ｍｇ／ｋｇ、　２．５ｍｇ ／ｋｇ、　１．５ａｇ／ｋｇ及び０　、７５　ｍｇ／ｋｇ）を注射した。転移検 出は、開腹後、腎、側・大動脈及び腸骨リンパ節の腹部調査の間に実施した。ラ ットはケタミン４Ｑｍｇ／ｋｇ及びキシラジン５．０ｍｇ／ｋｇ腹腔内で麻痺さ せ、腹部を中線切開で開けた。尾に、頭蓋に促進させて、体の同じ側にできたソ ケイ部、腸骨、側大動脈及び腎リンパ節を走査した。領域は、腸骨動脈に沿って 中央への及び大動脈に沿って側大動脈及び腎リンパ節へのファイバーを保った手 で接触モードで走査した（５０取得点／秒、３−４検出部位／分、戻りと出発、 さもないと部位の数は増加する）。

１９の異常組織試料を組織学的分析のために除き、その１１は５＋ｕ＋より長か った。レーザー誘導蛍光分光法は全ての１１例で悪性を明らかにした。５ＩＩ１ １より小の寸法を有する８の切断組織試料は悪性を示唆したが、組織学はわずか に３試料に悪性を確認した（表Ｉ下方参照）。腫瘍が検出されたリンパ節及び組 織は次の組織実験のため直ちに切断した。反対側を同様の方法で走査し、反対の リンパ節を組織実験のために切断した。蛍光スペクトルは、又、肝臓、腎臓、胃 、皮膚、筋肉並びに大及び小腸から得た。

表Ｉ ＬＩＦＳ（ｎ＝１９）により悪性と確認された組織試料腫瘍サイズ　組織学的同 定 悪性　正常 ｐ＜、０１（フィッシャーの正確試験）図２は、フォトフリン■投与後、癌及び 正常組織についての時間関連スペクトル曲線を示す。Ｙ軸は蛍光強度を表し、Ｘ 軸は波長を表し、Ｚ軸は時間を表す。

蛍光スペクトルはＯＭＡＩＩ［系を用い各２０ミリ秒毎に記録し、一方標的ラッ ト組織を光学バイオプシー針で刺した。組織の自動蛍光及びフオトフリン■を含 んでいる悪性組織の蛍光信号を記録した。自動蛍光ピークは６３０ｎｍに位置し 、転移を表わすより突出したピークは６３０ｎｍに位置した。６３０ｎｌｌの突 出したピークの強度は光学バイオプシー針が転移に進むにつれて増加することに 注意せよ。

図３は、ラット筋肉、−次腫瘍（右横腹）及び腹部転移でのフオトフリン■分布 についてのフォトフリン■対自動蛍光の強度比を示す。Ｙ軸は強度比（Ｉ６．。

ｎｍ／ＸＳｔ。口１）を表わし、Ｘ軸は試験した特定の試料番号を表し、棒は走 査した３つの異なる領域を表す。円は転移を示し、影の棒は腫瘍を示し、黒ぬり の棒は正常筋肉塊を示す。６３０止におけるフオトフリン■蛍光及び５４０ｎｌ ｓにおける組織自動蛍光の強度比は、各２０匹のラットについて計算し、癌組織 における固有のポリフィリン、及び正常組織における限られたポリフィリン取込 みによる背景蛍光から干渉を除いた。ラット１番及び１８番はコントロールとし て用いた。強度比は、４つの異なる用量のフオトフリンＩＩ（０，７５醜ｇ／ｋ ｇ、１．５　ｍｇ／ｋｇ、２．５■ｇ／ｋｇ及び７．５ｍｇ／ｋｇ）及び２４及 び４８時間の２つの注射後時間により生じた蛍光から計算した。転移についての 突出したピークは、全ての注射後時間について、−次腫瘍によるよりも転移によ りフオトフリン■の矛盾のない有意に高い取込みを示す。

図４におけるグラフは、フオトフリン■蛍光対自動蛍光の同じ強度比を用い、注 射後、筋肉、−次腫瘍及び転移におけるフオトフリン■蓄積の最適時間を示す。

再びＹ軸は強度比を表すが、Ｘ軸は、中心の左の３本の棒についての２４時間の 、及び中心の右の３本の棒についての４８時間の、２つの注射後時間を表わす。

３つの棒は、強度比をモニターした体の３つの異なる領域を示す。斜めの陰影は 転移を示し、点の陰影は腫瘍を示し黒ぬりの棒は正常筋肉塊を示す。転移を伴う 一次腫瘍及びリンパ節の部位での信号はフオトフリン■投与後２４時間よりも４ ８時間でより高い比を示す。並びに大腿筋肉部位での比は４８時間よりも２４時 間で高かった（下の表■及び■を参照）。

表■ 強度比：　Ｉ　ｓｓｏｎｍ／　Ｉ　ｆｉ４０ｎｌｌ　対フォトフリン■の投与後 時間 注射用量＝１．５−ｇ／ｋｇ 投与後時間：　２４時間、ｎ−２ 組織　強度比（Ｉ　５ｓａｎｉｔ／　Ｉ　５４ａｎ１１）筋肉　０．５±０．１ 腫瘍　１．０±０．１ 転移　３．３±０．１ 投与後時間：　４８時間、ｎ＝２ 組織　強度比（Ｉ　５ｓｏｎｌ／　Ｉ　５４ｅｎｌｌ）筋肉　０．２２±０．１ ５ 腫瘍　２．５５±１．５ 転移　５．００±０．１ 表■ 強度比：　Ｉ　１３０１１／　Ｉ　５４ｏｎ１ｍ　対フォトフリン■投与用量 投与後時間：　４８時間 組織　フオトフリン■用量（■ｇ／ｋｇ）０．７５（ｎ＝３）　１．５（ｎ＝２ ）筋肉　０．３４±０．０６　０．２２±０．１５腫瘍　０．８０″：領７　２ ．５５±１．５転移　２．５±０．８　５．００±０．１２．５（ｎ＝２）　７ ．５（ｎ＝２） 筋肉　０．３６士１３６　０゜４８±０．２４腫瘍　１．８２±１．９　３．６ ４±３．６５転移　５．２±３．２６　４．６４±２．９９図５は、投与後４８ 時間、異なる用量についてのフオトフリン■蛍光対自動蛍光の同じ蛍光強度比を 用いる転移検出のための最適フオトフリン■用量範囲を示す。Ｙ軸は強度比を表 し、一方Ｘ軸は試験した４つの異なるフオトフリン■注射用量を表わす。グラフ の左側から最初の３つの棒は７．５＋ａｇ／ｋｇの用量での強度比を示し、左か ら２番目の３つの棒は２．５ｍｇ／ｋｇの用量での強度比を示し、３番目の３つ の棒は１．５　ｍｇ／ｋｇの用量での強度比を示し、一方、最後の３つの棒は０ ．７５ｍｇ／ｋｇの用量での強度比を示す。再び斜めの陰影を有する棒は転移を 表わし、点の陰影を有する欅は腫瘍を表わし、黒ぬりの棒は正常筋肉組織を表わ す。棒グラフは、１．２５鳳ｇ／ｋｇ、２．５脂ｇ／ｋｇ及び７．５＋＊ｇ／ｋ ｇのフォトフリン■用量についての腫瘍強度比において有意差のないことを示す 。０．７５ｍｇ／ｋｇでの転移強度比は、他の３つの用量におけるよりも幾らか 低いが、それは−次腫瘍から転移組織を区別するのに依然として有用であった。

要約すると、フォトフリン■蛍光対自動蛍光の強度の比を観察するとき（１，、 。

ｎｍ／　Ｉ　ｓ４ｏ止）、転移及び−次腫瘍並びに転移及び正常又は良性組織の 間に矛盾のない有意の差があることが発見された。転移についての比読み取りは 、−次腫瘍及び正常組織についてよりも有意な差により矛盾なく高い。この知識 に基づいて、散在性の転移癌の検出及び続（バイオプシーを癌診断及び処置にな すことができる。

／２夾ＩＪ− ／；及ｍ 強度・数 強度比：１（６３０ｎｍ）／ｌ　（５４０ｎｍ）強度比：　Ｉ　（６３０ｎｍ） ／Ｉ（５４０ｎｍ）強度比　：　Ｉ　（６３０ｎｍ）／ｉ　（５４０ｎｍ）要約 書 蛍光分光法を用いる転移癌の即時内部作動検出及びバイオプシーについての方法 及び装置が開示される。癌組織により選択的に保持された感光剤が手術の前に投 与される。バイオプシー装置（２）と統合されたファイバーオプティックプロー ブ（１）は試験組織を照明し、スペクトログラフにより記録され、スペクトル曲 線としてプロットされる蛍光を生じる。試験組織についての感光剤からの蛍光（ Ｓｌ）及び自動蛍光（Ｓ２）の強度比（Ｓ　１／Ｓ　２）は、同じ波長で一次腫 瘍及び正常組織についての強度比と比較する。正常組織のそれとは異なる強度比 を示す組織は、直ちに腫瘍関連の深さを分析し、バイオプシー装置（２）を用い 組織学的試験のために切断できる。

国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、転移癌の検出及びバイオプシー方法であって以下を含む。 ａ．有効量の、光誘導蛍光が可能である感光剤を投与すること、ｂ．光源からの 光のビームで試験すべき組織を切断すること、ｃ．試験組織から発した蛍光を、 その条件が既知である組織から発した蛍光と比較すること、及び ｄ．光源と統合されたバイオプシー刃を用い、その条件が既知である組織とは異 なる蛍光パターンを示す組織を組織学的試験のために切断すること。 ２．転移癌の検出及びバイオプシー方法であって以下を含む。 ａ．有効量の、光誘導蛍光が可能である感光剤を投与すること、ｂ．光源からの 光のビームで試験すべき組織を切断すること、ｃ．試験すべき粗織及びその条件 が既知である組織から発した蛍光をそれぞれ２つの波長で観察すること、 ｄ．該測定の通りに組織が癌かどうか決定すること、及びｅ．光源と統合された バイオプシー刃を用い、癌組織を切断すること。 ３．転移癌の検出及びバイオプシー方法であって以下を含む。 ａ．有効量の、光誘導蛍光が可能である感光剤を投与すること、ｂ．光源からの 光のビームで試験すべき組織を切断すること、ｃ．試験すべ音組織及びその条件 が既知である組織から発した蛍光をそれぞれ２つの波長で観察すること、 ｄ．該測定の通りに組織が癌かどうか決定すること、ｅ．光源と統合されたバイ オプシー刃を用い、冒された組織における癌関連の深さを測定すること、及び ｆ．バイオプシー刃を用い組織学的試験のために癌組織を切断すること。 ４．転移癌の検出及びバイオプシー方法であって以下を含む。 ａ．有効量の、光誘導蛍光が可能である感光剤を投与すること、ｂ．特異的波長 に濾過された少くとも実質的に単色及び／又は非干渉光である光源からの光のビ ームで試験すべき組織を切断すること、ｃ．試験組織から発した蛍光を、その条 件が既知である組織から発した蛍光と比較すること、及び ｄ．光源と統合されたバイオプシー刃を用い、その条件が既知である組織と異な る蛍光パターンを示す組織を組織学的試験のために切断すること。 ５．転移癌の検出及びバイオプシー方法であって以下を含む。 ａ．有効量の、光誘導蛍光が可能である感光剤を投与すること、ｂ．特異的波長 に濾過された少くとも実質的に単色及び／又は非干渉光である光のビームで試験 すべき組織を切断すること、ｃ．試験すべき組織及びその条件が既知である組織 から発した蛍光をそれぞれ２つの波長で観察すること、 ｄ．該測定の通りに組織が癌であるかどうか決定すること、及びｅ．光源と統合 されたバイオプシー刃を用い、癌組織を組織学的試験のために切断すること。 ６．転移癌の検出及びバイオプシー方法であって以下を含む。 ａ．有効量の、光誘導蛍光が可能である感光剤を投与すること、ｂ．特異的波長 に濾過された少くとも実質的に単色及び／又は非干渉光である光のビームで試験 すべき組織を切断すること、ｃ．試験すべき組織及びその条件が既知である組織 から発した蛍光をそれぞれ２つの波長で観察すること、 ｄ．該測定の通りに組織が癌であるかどうか決定すること、ｅ．光源と統合され たバイオプシー刃を用い、冒された組織における癌関連の深さを測定すること、 及び ｆ．バイオプシー刃を用い、癌組織を組織学的試験のために切断すること。 ７．強度の比を２つの波長で測定すること、次いで一次腫瘍及び正常組織につい て、同じ波長で強度の比を比べることを含む癌粗織が存在するかどうかを決定す る請求項６の方法。 ８．２つの波長での強度の間の比に対応する信号を生じること、次いで該信号を 示すこと含む、癌組織が存在するかどうかを決定する請求項６の方法。 ９．転移癌の検出及びバイオプシー方法であって以下を含む。 ａ．有効量の、光誘導蛍光が可能である感光剤を投与すること、ｂ．光源から特 異的波長に濾過された単色光及び／又は非干渉色のビームで試験すべき組織を切 断すること、 ｃ．組織より発する光の蛍光スペクトルを産生すること、ｄ．試験組織について ２つの波長での強度の比を測定すること、次いで一次腫瘍及び正常組織について 同じ波長での強度の比を比べること、ｅ．光源と統合されたバイオプシー刃を用 い、冒された組織における癌関連の深さを測定すること、及び ｆ．バイオプシー刃を用い、既知組織のそれと異なる蛍光パターンを示す組織を 組織学的試験のために切断すること。 １０．感光剤が癌組織により選択的に維持される請求項９の方法。 １１．有効量の感光剤を注射により投与する請求項９の方法。 １２．冒された組織の癌関連の深さを測定することが目盛のあるバイオプシー針 を用いることを含む請求項９の方法。 １３．転移癌の検出及びバイオプシー装置であって以下を含む。 ａ．癌組織により選択的に維持された感光剤により蛍光を誘導することが可能で ある光源、及び ｂ．その刃に光源が統合される、疑わしい癌組織を除くための刃。 １４．転移癌の検出及びバイオプシー装置であって以下を含む。 ａ．癌組織により選択的に維持された感光剤により蛍光を誘導することが可能な 特異的波長に濾過された実質的に単色光及び／又は非干渉光を発する光源、及び ｂ．その刃に光源が統合された、疑わしい癌組織を除くための刃。 １５．光源が約４００ミクロンからの心径を有する多重又は単一ファイバー配列 を含む請求項１５の装置。 １６．刃が組織における癌関連の深さを測定するために目盛られている請求項１ ５の装置。