JPH0552191B2 - - Google Patents
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- JPH0552191B2 JPH0552191B2 JP60096632A JP9663285A JPH0552191B2 JP H0552191 B2 JPH0552191 B2 JP H0552191B2 JP 60096632 A JP60096632 A JP 60096632A JP 9663285 A JP9663285 A JP 9663285A JP H0552191 B2 JPH0552191 B2 JP H0552191B2
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Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はポリアルコール脂肪酸エステルの製造
法、さらに詳しくは酵素法によりポリアルコール
脂肪酸エステルを高い合成到達率で容易に製造す
る方法に関する。 〔従来の技術〕 ポリアルコール類の脂肪酸エステルの化学的製
造法は色々提案されているが、工業的製法として
実用化されているのはエステル化またはアルコリ
シスのいずれかの方法である。エステル化は脂肪
酸に対して、アルコリシスは脂肪酸エステルに対
してポリアルコールを過剰に加え、一般的には触
媒の存在下に200〜250℃に加熱することにより、
ポリアルコール脂肪酸エステルが製造されてい
る。 一方、リパーゼによつてもグリセリンと脂肪酸
からグリセライドが合成されることは、動・植物
リパーゼについて古くから知られていたが、近年
になつて微生物リパーゼの開発とあいまつてリパ
ーゼによるグリセライドの生成に関する報告や特
許が見られるようになつた。 例えば、辻阪らは、アスペルギルス・ニガー
（Aspergillus niger）、リゾプス・デレマー
（Rhizopus delemar）、ゲオトリカム・キヤンデ
イダム（Geotricum candidam）、ペニシリウ
ム・シクロピウム（Penicillium cyclopium）の
４種類の酸性リパーゼを用いるグリセライドの生
成を報告している〔Biochim.Biophys.Acta.，
489，415（1979）〕。更に、彼等は、Biochim.
Biophys.Acta.575，156（1979）において、上記
リパーゼを用いプロピレングリコールやジグリセ
リンとオレイン酸の間でもエステルを生成したこ
とを報告している。 また、モノグリセライドの酵素的製法に関する
特許としては、上記辻阪らの用いた４種類の酸性
リパーゼを使用し、グリセリンと脂肪酸に水およ
び0.01％の蛋白質を加えエマルジヨンにてモノグ
リセライドを含むグリセライドを製造する方法
（特公昭51−7754号公報）、リゾプス・シネンシス
（Rhizopus chinensis）HISの生産するリパーゼ
を用いる方法（特公昭57−23535号公報）、さらに
リパーゼとしてキヤンデイダ・シリンドラセ
（Candida cylindracea）等を用い、グリセリン
と脂肪酸メチルに水を加えたエマルジヨンでグリ
セライドを生成させる方法（特開昭59−118094号
公報、特開昭59−118095号公報）などがある。 しかし、上記の方法は、いずれも脂肪酸に対し
てモル比で大過剰のグリセリンを加え、水を反応
溶媒とするエマルジヨンでのリパーゼによるモノ
グリセライドの生成に関するものである。 〔発明が解決しようとする問題点〕 上記したように、ポリアルコール脂肪酸エステ
ルの化学的製造法では高温条件下で反応が行われ
るが、反応温度を上げることは、反応を進める上
で必要である反面、熱によつてポリアルコールの
分子内脱水や分解が起り、着色、重合、更に焦げ
臭の発生原因となり、生成物の界面活性剤として
の性能や商品価値に好ましくない影響を与えてい
る。また、熱による悪影響を最小限度にとどめる
必要性から反応熱や、反応時間、基質濃度に一定
の許容限度があり、実際上製造しうるモノエステ
ル濃度は40〜50％が限度である。 一方、リパーゼを用いる酵素反応法は常温、常
圧の温和な条件での反応が可能であり、ポリアル
コールやそのエステル生成物にも何等の悪影響を
与えることはない。そしてリパーゼによるグリセ
ライドの生成に関しては、従来多くの技術的提案
がなされて来たが、これ等の提案には種々問題点
がある。その理由は色々と考えられるが、最大の
理由は合成到達率の低さにあると思われる。 即ち、従来提案された報告によれば、いずれも
脂肪酸やその低級アルコールエステルに対して大
過剰のグリセリンを加えて反応しているにもかか
わらず、エステル生成物の中に多量のグリセリン
と共に未反応の脂肪酸やその低級アルコールを少
ないものでも添加量の約30％を残していることで
ある。 そして未反応の脂肪酸やその低級アルコールエ
ステルを多く含んだモノグリセライドはほとんど
商品価値を持たず、また、これ等未反応物を生成
したモノグリセライド混合物から分離、除去しよ
うとしても、トリグリセライドからの分離と異
り、大変困難であり、あえて除去すれば経済性を
失うことになる。 また、従来の酵素法によるポリアルコール脂肪
酸エステルの製造法の提案においては、反応溶媒
として水が用いられている。これは脂肪酸とポリ
アルコールとが互いに難溶性であり、更にそれだ
けでは流動性も得られないため、水にリパーゼを
溶解し、更に水を媒体としてエマルジヨンを形成
し、界面面積を広げることで反応を行なわせよう
とするものであるが、この場合、安定なエマルジ
ヨンを維持するために界面活性剤を加えたり、ま
たは激しい攪拌によつて常に乳化状態を保ちつづ
けなければ脂肪酸とポリアルコールは分離して反
応を進めることが出来なくなる。 しかし界面面積の拡大にはおのずと限界がある
し、更にリパーゼは本来プロテアーゼやアミラー
ゼと並ぶ代表的な加水分解酵素として知られてお
り、その一般的機能としては、水の存在下におい
ては、エステルを生成する方向での働きを低下さ
せるだけでなく、折角生成したエステルの再分解
をも引き起こす恐れもある。また、水エマルジヨ
ン反応によつて得られるエステル生成物を、反応
後に乳化液より分離するためには、強力な遠心分
離処理を必要とするなど水溶媒系の提案はいずれ
も問題がある。 かくして、水溶媒系を用いるような欠点がな
く、高い合成到達率で酵素法によりポリアルコー
ル脂肪酸エステルを容易に得る方法が望まれてい
たのであり、この問題を解決したのが本発明であ
る。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明者らは、上記した事情に鑑み、従来のご
とく酵素の作用が水の存在と不可欠と考え、水系
での反応を考えるかぎりにおいて、エステル合成
反応は必然的に加水分解と合成反応との反応平衡
則に従わざるを得ず、低い合成率や再分解をまぬ
がれ得ないとの考えに立ち、従来の概念にとらわ
れずに、実質的に水を加えることなく、有機溶媒
の存在下もしくは不存在下でのポリアルコール脂
肪酸エステルの生成を可能にするリパーゼについ
て鋭意研究した。 その結果、リパーゼとして、例えばアクロモバ
クター（Achromobacter）属の微生物の生産す
るリパーゼ（特公昭49−32080号公報）、アルカリ
ゲネス（Alcaligenes）属の微生物の生産するリ
パーゼ（特公昭58−36953号公報、特開昭53−
59093号公報）などの微生物アルカリ性リパーゼ
が、実質的に水を加えることなく有機溶媒の存在
下もしくは不存在下に、脱水しながら反応系の含
水率が0.1重量％（以後、含水率の％は重量％を
示す）以下となるようにして作用させると、、広
範囲な脂肪酸とポリアルコールとの間で高濃度の
主にモノエステルからなるエステルを生成すると
いう驚くべき現象のあることを見出した。本発明
はこの発見に基いて完成されたものである。 即ち、本発明は、プロピレングリコール、グリ
セリン、ポリグリセリンより選ばれるポリアルコ
ールと、炭素数C2〜C22の飽和もしくは不飽和の
脂肪酸（ここで脂肪酸は置換基として水酸基、カ
ルボキシル基、フエニル基を有していてもよい）
またはC1〜C3の低級アルコールとエステルを形
成している上記脂肪酸との混合物に、実質的に水
を加えることなく、有機溶媒（但し、第１級アル
コール溶媒を除く）の存在下もしくは不存在下
に、反応系の含水率が0.1％以下となるように脱
水しながら微生物アルカリ性リパーゼを作用させ
ることを特徴とするポリアルコール脂肪酸エステ
ルの製造法であり、その目的とするところは、従
来の酵素法では不可能であつた高い合成到達率
（エステル化率）で容易にポリアルコール脂肪酸
エステルを得る方法を提供することにある。 なお、本発明でポリアルコール脂肪酸エステル
とは、リパーゼの作用によりポリアルコールと脂
肪酸より生成するエステルだけでなく、脂肪酸の
低級アルコールエステルとポリアルコールの間で
生成するポリアルコール脂肪酸エステルをも包含
する。 以下、本発明について詳細に説明する。 本発明で用いるポリアルコールとは、プロピレ
ングリコール〔CH3・CHOH・CH2OH〕、グリ
セリン〔CH2OH・CHOH・CH2OH〕、およびポ
リグリセリン〔CH2OH・CHOH・CH2−Ｏ（−
CH2−CHOH−CH2−Ｏ）oCH2−CHOH・CH2
OH〕（但し、ｎ＝０〜28）をいう。 一般的にポリグリセリンは、グリセリンを不活
性ガスと触媒存在下に150〜300℃で２〜20時間程
度加熱し、脱水縮合反応させることによつて製造
される。このため、ポリグリセリンは広い範囲の
重合度を有し、ｎ＝０〜28の直鎖のポリグリセリ
ンを得ることができるが、上記反応条件を選択す
ることによつて目的とする平均重合度のポリグリ
セリンが製造される。そして市販されるポリグリ
セリンとしては、例えばｎ＝０のジグリセリン、
ｎ＝２のテトラグリセリン、ｎ＝４のヘキサグリ
セリン、ｎ＝８のデカグリセリンなどが例示でき
るが、これ等はいずれも水酸基価から算出した平
均重合度を示す商品であつて、単一重合物のポリ
グリセリンではない。したがつて、本発明ではグ
リセリンの重合体であるかぎりすべてポリグリセ
リンとして使用できる。 また、本発明の方法で用いる脂肪酸とは、飽和
もしくは不飽和の、炭素数C2〜C22の脂肪酸（こ
こで該脂肪酸は水酸基、カルボキシル基、もしく
はフエニル基で置換されていてもよい）であつ
て、本発明で脂肪酸とは、単に油脂類中に存在す
る酸を意味するだけでなく、それ以外の有機酸を
も含めて脂肪酸と言う。 そして置換基を持たないC2〜C22の脂肪酸とし
ては、例えば酢酸、プロピオン酸、アクリル酸、
ブタン酸、クロトン酸、メタクリル酸、バレリン
酸、カプロン酸、２−メチルバレリン酸、ソルビ
ン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミ
リスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソ
ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレ
イン酸、エイコサン酸、ドコサン酸、アラキドン
酸などがあげられる。 また、置換基を持つ脂肪酸のうち、水酸基を有
するものとしては、例えばリシノレイン酸、ジヒ
ドロキシステアリン酸などがあげられ、カルボキ
シル基を持つものとしては、例えばマロン酸、マ
レイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、
ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシ
ン酸、テトラデカンジオン酸などがあげられ、フ
エニル基を持つものとしては、例えばフエニル酢
酸、ケイ皮酸、３−フエニルプロピオン酸などが
あげられる。 更に、上記脂肪酸は、C1〜C3の低級アルコー
ル類とエステルを形成していてもよく、このC1
〜C3の低級アルコールとしては、例えばメタノ
ール、エタノール、プロパノール、グリセリン、
イソプロパノールなどがあげられ、これらの脂肪
酸エステルの具体例としては、例えばメチルラウ
レート、メチルミリステート、メチルパルミテー
ト、メチルステアレート、エチルラウレート、エ
チルパルミテート、エチルステアレート、エチル
オレエート、ラウリン酸イソプロピル、ミリスチ
ン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピルな
どがあげられ、グリセライドとしては、例えばグ
リセリントリステアレート、グリセリントリオレ
エート、ヤシ油、大豆油、綿実油、パーム油、牛
脂、豚脂、オリーブ油などが例示できる。 上記の如き脂肪酸及びその低級アルコールエス
テルが例示できるが、本発明においては、脂肪酸
およびその低級アルコールエステルの選択に制限
はない。 つぎに本発明を実施するのに用いられる微生物
アルカリ性リパーゼについては、微生物アルカリ
性リパーゼであれば任意のものを使用することが
できるが、例えばアクモロバクター
（Achromobacter）属に属する名糖−AL−865号
（微工研菌寄第1213号）の生産するリパーゼ（特
公昭49−32080号公報）（以下、リパーゼ−ALと
いう）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属に属す
る名糖PL−266号（微工研菌寄第3187号）の生産
するリパーゼ（特公昭58−36953号公報）（以下、
リパーゼ−PL266という）、同じくアルカリゲネ
ス属に属する名糖PL−679号（微工研菌寄第3783
号）の生産するリパーゼ（特開昭53−59093号公
報）（以下、リパーゼ−PL679という）などが、
特に溶剤耐性およびエステル合成能にすぐれた有
効なリパーゼの具体例として挙げることができ
る。 この点に関し実験例を示して説明する。 実験例 １ 溶媒中での安定性 リパーゼ−PL679（名糖産業）、リパーゼ−
PL266（名糖産業）、リパーゼ−AL（名糖産業）の
粉末25mgずつを７ml栓付き遠沈管に取り、これに
各種溶媒、即ち第３級ブチルアルコール、アセト
ニトリル、第３級アミルアルコール、アセトン、
ヘキサン、ジアセトンアルコール、２，４−ジメ
チル−３−ペンタノール、水を２ml加え、充分攪
拌し、37℃で24時間振盪し、残存活性をリパーゼ
力価測定法で測定した。 リパーゼの測定は、リパーゼ−PL679、リパー
ゼ−PL266については国生等の方法〔Agric.Biol.
Chem.46(5)、第1159頁、1982〕、リパーゼ−ALに
ついては国生等の方法〔油化学23(2)、第98頁、
1974〕で行なつた。その結果を第１表に示す。 【表】 実験例 ２ 各種リパーゼの溶媒中でのエステル合成能 各種リパーゼ、即ちアルカリ性リパーゼである
リパーゼ−PL679（名糖産業）、リパーゼ−PL266
（名糖産業）、リパーゼ−AL（名糖産業）、そして
アルカリ性リパーゼでないリパーゼ−MY（名糖
産業）、リパーゼ−MAP4（天野製薬）、リパーゼ
−AP10（天野製薬）、オリパーゼ2S（大阪細研）、
タリパーゼ（田辺製薬）等のリパーゼ粉末100mg
を、各種の溶媒、即ち第３級ブチルアルコール、
第３級アミルアルコール、ジアセトンアルコー
ル、２，４−ジメチル−３−ペンタノール５mlの
存在下に、脱水剤モレキユラシーシーブス3A〔和
光純薬(株)販売〕0.5ｇを加えて、ポリアルコール
としてグリセリン0.163ｇ、脂肪酸としてオレイ
ン酸0.5ｇに37℃で48時間作用させてエステル合
成を行ない、エステルの生成を脂肪酸の消費によ
り求めた。その結果を第２表に示す。 【表】 上記のリパーゼ−AL、リパーゼ−PL266、リ
パーゼ−PL679は、いずれも高分子量蛋白からな
り、しかも至適PHがアルカリ側にあることを特徴
とするアルカリ性リパーゼであり、これらの性質
が有機溶媒中での、特に高い安定性やエステル合
成能に何等かの関連を有しているのではないかと
推定される。 従つて、これら以外のリパーゼであつても、実
質的に水を加えることなく、有機溶媒（但し、第
１級アルコール溶媒を除く）の存在下もしくは不
存在下で、安定的に活性を維持し且つポリアルコ
ールと脂肪酸とのエステル合成能の強い微生物ア
ルカリ性リパーゼであり、本発明の実施に適合す
るものであるかぎり、いかなる微生物アルカリ性
リパーゼでも使用でき、その起源や種類に制限は
ない。 また、本発明において、合成反応系に加える微
生物アルカリ性リパーゼは精製品でも粗製品でも
よく、その形態としては粉末状または顆粒状の酵
素あるいは菌体の乾燥品を使用ることができる。 更に、固定化担体、例えばポリプロピレン膜、
イオン交換樹脂のごとき各種重合体や、セライ
ト、ガラスビーズ、ゼオライト、ベントナイト等
の無機材料等に担持固定化した乾燥固定化酵素を
利用することもできる。そしてこれ等の担体に酵
素を固定化することによつて基質と酵素の接触綿
を広げることができ、酵素粉末を用いるよりも反
応を進める上で有利となる。 本発明で有機溶媒の存在下に反応を行う場合に
用いる有機溶媒（但し、第１級アルコール溶媒を
除く）は、反応温度において液状をなし、リパー
ゼ活性を安定的に維持し、且つ不溶状態のリパー
ゼが、ポリアルコールと脂肪酸のエステルを生起
させうるものであるかぎり、なんでもよいが、上
記条件を満足する限りにおいて、更にポリアルコ
ール、脂肪酸の両基質を同時に溶解しうる有機溶
媒またはそのような有機溶媒と混合して使用する
ことが望ましい。 本発明で用いる有機溶媒の例としては、例えば
ｎ−ヘプタン、ペンタン、ｎ−ヘキサン、石油エ
ーテル、イソオクタンなどの如き脂肪族炭化水素
類；シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロプ
タンなどのごとき脂環式炭化水素類；ベンゼン、
トルエン、キシレン、フエノールなどのごとき芳
香族炭化水素類；アセトン、メチルイソブチルケ
トンなどのごときケトン類；アセトニトリル、２
−ニトロプロパン、ピリジン、キノリン、ジメチ
ルホルムアミドなどのごとき含窒素溶媒類；ジメ
チルエーテル、ジエチルエーテル、ジイソプロピ
ルエーテル、ジオキサンなどのごときエーテル
類；四塩化炭素、クロロホルム、塩化メチレンな
どのごときハロゲン化炭化水素類；ジメチルスル
ホキシドのごときスルホキシド溶媒類；２，４−
ジメチル−３−ペンタノール、２，６−ジメチル
−４−ヘプタノールのごとき第２級アルコール
類；第３級ブチルアルコール、第３級アミルアル
コール、ジアセトンアルコール、３−メチル−３
−ペンタノール、３−エチル−３−ペンタノー
ル、２−メチル−２−ヘキサノールのごとき第３
級アルコール類などを例示することができる。 これらの中で特に好ましいのは、芳香族炭化水
素類、脂肪酸炭化水素類、第２級および第３級ア
ルコール類であり、中でも上記アルコール溶媒
は、ポリアルコールと脂肪酸またはその低級アル
コールエステル共によく溶かすことができるの
で、反応を進める上から好ましく、特に連続的に
酵素充填槽に反応液を流して行なう場合などは極
めて有効な反応溶媒となる。 また、反応溶媒は単独でも使用できるが、２種
以上の溶媒を自由に混ぜ合せて使用することもで
きる。 脂肪酸とポリアルコールとを有機溶媒の存在下
で微生物アルカリ性リパーゼと接触せしめ、エス
テルを生起させうるための態様は、適宜に選択で
きるが、攪拌もしくは振盪条件下に行うことがで
きる。両基質が有機溶媒に溶解できる反応条件に
おいては、固形リパーゼ粉末もしくはベントナイ
ト等に担持固定化・脱水したリパーゼを反応塔に
充填し、この中を反応液を循環させる方法によつ
て行うことができる。 つぎに、本発明において有機溶媒を使用しない
場合は、脂肪酸を必要な場合には加温液化し、ポ
リアルコールと脂肪酸を液状の混合物として微生
物アルカリ性リパーゼを作用させればよい。 本発明において、ポリアルコールと脂肪酸また
はその低級アルコールエステルとの混合モル比
や、リパーゼの使用量、有機溶媒の使用量などは
適宜に選択でき、最もよく反応を促進し、高い収
率が得られ、かつ反応操作のしやすい条件を採用
すればよい。 ポリアルコール１モルに対する脂肪酸またはそ
の低級アルコールエステルの添加モル比として
は、例えば0.01〜100モル、好ましくは0.1〜10モ
ル、最も好ましくは0.2〜５モルの反応比を例示
することができる。 また、ポリアルコールや脂肪酸などは数種類混
合して反応してもさしつかえない。 つぎに、微生物アルカリ性リパーゼの使用量に
は制限はないか、例えば脂肪酸またはその低級ア
ルコールエステル１ｇ当り10〜100000単位、好ま
しくは500〜50000単位程度の使用量を例示するこ
とができ、反応条件や用いる微生物アルカリ性リ
パーゼの種類によつて左右されることを考慮して
使用量を決めればよい。 担体に酵素を固定化して使用する場合には、そ
の比活性は高いものほど好ましく、担体１ｇ当り
1000〜300000単位程度の微生物アルカリ性リパー
ゼを担持した担体を例示することができる。 また有機溶媒の使用量としては、用いる溶媒、
基質の種類や濃度によつても左右されるが、目安
としては基質を溶解した有機溶媒が自由に移動し
て酵素と接触し、反応が促進される程度に有機溶
媒を添加するのが望ましく、特に制限はないが、
例えば反応系の１〜99％（Ｗ／Ｗ）、好ましくは
10〜95％（Ｗ／Ｗ）程度加えて反応すればよい。 本発明での１つの特徴は、実質的に水を加える
ことなく、有機溶媒（但し、第１級アルコール溶
媒を除く）の存在下もしくは不存在下に、微生物
アルカリ性リパーゼにより行われるエステル生成
反応にあるが、このことは反応系の水分が絶対的
０を意味するものではない。そのような状態を実
際に作り出すことは不可能であり、また不必要で
ある。しかし、反応系の水し可及的に少ないほど
高いポリアルコール脂肪酸エステル生成率に達
し、かつ再分解の恐れがなく、更に酵素の活性を
長く安定的に持続し、酵素の再利用度を高めるこ
とができるので、本発明では実質的に水を加えな
いだけでなく、更に反応によつて副生する水をも
除きつつ固体の微生物アルカリ性リパーゼを用い
てポリアルコール脂肪酸エステル生成反応を行な
うのである。 しかし、このことは反応系に水を僅かに共存さ
せることでエステルを生成しなくなることを意味
するものではない。本発明で実質的に水を加えな
いと言う意味は、基質や酵素を反応に用いるにあ
たつて、いささかの水も使用せず、そのままで、
または有機溶媒に基質を溶解または分散して反応
を行うということである。即ち、反応に関与する
物質はすべてある程度の水分を保有しており、そ
の量はポリアルコールで約１〜５％、脂肪酸また
はその低級アルコールエステルで約0.02％、酵素
で約４〜18％、有機溶媒でも約0.02〜0.1％であ
り、これらをそのまま用いても、反応系全体とし
ての初発含水率は約0.2〜1.0％の範囲にあるが、
このような場合は実質的に水を加えないことにな
るのである。また、反応中に空気中よりの吸湿や
エステル合成に伴つて副生する水がある場合には
更に含水率は上昇するが、この場合も実質的に水
を加えないことになるのである。 そして反応系の含水率は、反応に用いる基質、
酵素、有機溶媒などを可及的に乾燥して使用する
ことや、更に空気中より侵入する水や合成反応に
よつて副生する水がある場合には、乾燥剤として
例えばゼオライト、シリカゲル、焼せつこう、芒
硝などを用いて除去する他、乾燥した空気や不活
性ガスを反応槽中に通気し攪拌して反応槽外に排
気したり、あるいはその排気ガスを冷却凝縮させ
て水分を除去し、有機溶媒を還流させるなどの手
段で反応系の水分を除くことができる。 このような手段により反応系の含水率を0.1％
以下に低下することによつて、例えばグリセリン
とオレイン酸のモル比が１：１の場合、エステル
合成率を約80〜98％にまで上げることができ、得
られるグリセライド中のモノグリセライドの濃度
を約60〜90％にまで高めることができる。 微生物アルカリ性リパーゼとしてリパーゼ−
PL679を用い、反応系の含水率（％）に対するエ
ステル合成率を調べた実験例を示すと、次のとお
りである。 実験例 ３ オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、グリセリン
1.63ｇ（17.7ミリモル）またはヘキサグリセリン
（阪本薬品工業製ポリグリセリン＃500）8.2ｇ
（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコール50ml、
リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユラーシーブ
ス3A〔和光純薬(株)販売の脱水剤〕５ｇを500ml容
三角フラスコに取り、水を０〜20％（反応系全体
に対する％）になるように加え、40℃で48時間振
盪して反応させ、後記実施例２に記載したように
してエステル合成率を測定した。また、反応後、
反応液0.5ｇを取り、カールフイツシヤー試薬に
よる水分測定装置（三菱化成工業社製）を用いて
反応液の含水率を調べた。その結果を第３表に示
す。 【表】 本発明におけるエステル生成反応は、室温程度
でも進行するので、特に加熱の必要はないが、一
般的には用いる有機溶媒の沸点や、酵素の作用温
度を考慮し、適当な温度を選んで行なうことが望
ましく、その範囲としては、例えば０〜90℃のご
とき温度を例示することができるが、通常は20〜
60℃の範囲で行なうことができる。 また、反応時間も、適宜選択することができ、
例えば10分〜10日を例示することができるが、好
ましくは１〜96時間のごとき反応時間を明示する
ことができる。 また、必要に応じて、例えば反応系の脂肪酸の
減少率を測定したり、TLC（薄層クロマトグラフ
イー）などの手法を利用してエステル生成過程を
追跡し、所望の目的物の形成を確認することによ
り反応時間を決めてもよい。 反応終了後、有機溶媒不存在下で生成したポリ
アルコール脂肪酸エステルは有機溶媒により分離
することができる。 また、有機溶媒中で反応を行なつて生成したポ
リアルコール脂肪酸エステルは、ケイ酸アルミ
ナ、イオン交換樹脂、分子ふるい用ゲル、吸着ク
ロマトグラフイーを用いて反応系より分離した
り、反応溶媒を除去した後、上記方法や蒸留、溶
剤分画、尿素付加法、高速液体クロマトグラフイ
ー等を用いて分離精製することができる。 〔発明の効果〕 本発明によれば、従来提案の酵素法では不可能
であつた高い合成到達率（エステル化率）で、添
加した脂肪酸をほとんど残さずに、ポリアルコー
ル脂肪酸エステルを得ることができる。また、本
発明では、脂肪酸やその低級アルコールエステル
に対して大過剰のポリアルコールを必要とせず、
１対１モル比でも充分に高濃度のエステルを得る
ことができ、基質濃度も数％の低濃度から数10％
の高濃度に到るまで広い範囲で変えることができ
る。そしてまた、本発明では、化学的方法では得
にくいモノエステル濃度の高いポリアルコール脂
肪酸エステルを得ることができる。 さらに、本発明では、化学的方法で用いられる
ような有毒な反応触媒を用いる必要がなく、極め
て温和な反応条件下にエステルが合成されるため
に、ポリアルコール自体の構造に変化を起さず、
優れた性質を持つた安全性の高い界面活性剤とし
て有用なポリアルコール脂肪酸エステルが得られ
る。 本発明で得られるポリアルコール脂肪酸エステ
ル中、酸がモノカルボン酸であるポリアルコール
脂肪酸エステルは食品に利用することができ、例
えばマーガリン、シヨートニング、マヨネーズ、
ピーナツツバター等の脂肪性食品類の乳化や、乳
製品、ジユース、香料、精油等の可溶化に用いら
れ、またパン、ケーキ、クツキー、めん類、ちく
わ、かまぼこ、魚肉ソーセージ等の老化防止剤、
ソーセージ、プレスハム等の油分離防止剤、スポ
ンジケーキ、アイスクリーム、マシユマロ等の起
泡剤、チヨコレート、ココア、チユーインガム、
粉乳等の潤滑、分散剤などとして多くの用途が考
えられる。 また、本発明で得られる各種ポリアルコール脂
肪酸エステルは、化粧品として、例えばクリー
ム、乳液、化粧水のような基礎化粧品、フアンデ
ーシヨン、白粉、口紅等のメーキヤツプ製品、ヘ
ヤートニツク、ポマード、ヘヤーリキツド等の毛
髪製品、香水、オーデコロン等の芳香品、その他
エナメルのような美爪料、シヤンプー、リンスの
ような洗浄剤や、或いは歯磨など多くの製品に応
用し利用できる。 また、本発明で得られるポリアルコール脂肪酸
エステルについては、化粧品と同様、界面活性剤
としての機能を応用できる対象として、各種軟膏
の乳化、脂溶性ビタミン剤、コルチコステロイド
などの可溶化などの他、眼薬などの医薬品への利
用が考えられる。さらに、農薬の分野でも、殺虫
剤、展着剤など多くの製品の乳化、分散などにも
応用することができる。 なお、本発明で得られるポリアルコール脂肪酸
エステルの一部には、弱酸性界面活性剤も含まれ
るが、その多くは非イオン性の界面活性剤であ
り、生体毒性をもたず、接触アレルギーを示さな
い安全性の高い界面活性剤として期待される。 〔実施例〕 以下、本発明の実施例を示す。なお、実施例で
は反応系の含水率が0.1％以下となるように脱水
剤モレキユラーシーブス〔和光純薬(株)販売〕を用
いた。 実施例 １ オレイン酸0.5ｇ（1.77ミリモル）、グリセリン
0.163ｇ（1.77ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル５ml、リパーゼ−PL679粉末0.1ｇ、モレキユ
ラーシーブス3A0.5ｇを共栓試験管に取り、よく
混合した後、37℃で48時間振盪した。反応後、遠
心分離し、上清5μをシリカゲル薄層（メルク
社製、シリカゲル60TLCプレートNo.5721 20×20
cm）にスポツトし、石油エーテル−エーテル−酢
酸（70：30：1V／Ｖ）を展開溶媒として展開し
た。スポツトの検出には50％硫酸またはヨウ素を
用いた。 50％硫酸又はヨウ素によりスポツトを検出する
と、未反応のオレイン酸とグリセリン以外に２つ
のスポツトが検出された。この未知のスポツトの
Rf値は市販のグリセリンモノオレート（フナコ
シ薬品社製）とグリセリンジオレート（フナコシ
薬品社製）に一致したので、この２つのスポツト
をグリセリンのオレイン酸エステルであるグリセ
リンモノオレート、グリセリンジオレートとし
た。なお、グリセリンモノオレートのTLC上の
スポツトが圧倒的にグリセリンジオレートより大
きかつたので、グリセリンモノオレートを精製す
ることにした。 グリセリンモノオレートは分取用TLCを用い
て精製した。シリカゲル薄層（メルク社製シリカ
ゲルTLCプレートNo.13894，0.5mm、20×20cm）に
前記反応液0.5mlをライン上にスポツトし、石油
エーテル−エーテル−酢酸（70：30：1V／Ｖ）
を展開溶媒として展開した。展開後、両端を３cm
ずつ切り取り、50％硫酸で検出し、グリセリンモ
ノオレートのRf値を求めた。求めたRf値の部分
のシリカゲルをTLCプレートからかき取り、シ
リカゲルを10mlのクロロホルム−メタノール
（２：1V／Ｖ）で抽出した。抽出液をNo.5Cの紙
で過し、シリカゲルを除いた後、３mlの水で３
回洗いクロロホルム層を分取した。分取したクロ
ロホルム層を30℃、減圧下で乾固した。得られた
グリセリンモノオレートの収量は10mgでTLC上
は単一であつた。グリセリンモノオレートのIR
スペクトル（赤外線吸収スペクトル）は日本分光
A202型赤外分光光度計を用い、液膜法で測定し
た。その結果を第４表に示す（Run No.１）。 さらにオレイン酸0.5ｇの代わりに、第４表に
示す他の脂肪酸または脂肪酸エステル0.5ｇを用
いて上記と同様に実施しグリセリンのモノエステ
ルを得た。そのIRスペクトルを第４表に示す
（Run No.２〜25）。 次にグリセリン0.163ｇの代りに、プロピレン
グリコール0.135ｇ、またはジグリセリン0.294
ｇ、またはテトラグリセリン（阪本薬品工業社製
ポリグリセリン＃310）0.56ｇ、またはヘキサグ
リセリン（同上ポリグリセリン＃500）0.82ｇ、
またはデカグリセリン（同上ポリグリセリン＃
750）1.34ｇを用い、また第４表に示す各種脂肪
酸または脂肪酸エステル0.5ｇを用いて上記と同
様に実施しプロピレングリコール、ジグリセリ
ン、テトラグリセリン、ヘキサグリセリン、デカ
グリセリンのエステルを得た。そのIRスペクト
ルを第４表に示す（Run No.26〜150）。 【表】 【表】 【表】 【表】 【表】 【表】 【表】 【表】 第４表の結果から、1740カイザー付近にエステ
ル結合の吸収と3400カイザー付近にアルコールの
吸収が見られることから、上記生成物はポリアル
コール脂肪酸エステルであることがわかる。 実施例 ２ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユラ
ーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに取
り、40℃にて48時間振盪反応しグリセリンオレー
トを調製した。この反応液のエステル合成率は94
％であつた。なお、エステル合成率は反応系に添
加した脂肪酸のうちエステル合成に消費された量
を、アルカリ溶液で滴定することにより求め、反
応前の脂肪酸量に対する脂肪酸の減少率の百分率
をもつて示した。 反応後、10000ｇで10分遠心分離して不溶物を
除き、上清を得た。さらに不溶物に第３級ブチル
アルコール30mlを加え、不溶物を洗つた後、遠心
分離して上清を得た。これらの上清を合わせ、エ
バポレーターにて濃縮し、第３級ブチルアルコー
ルを除去し、グリセリンオレート6.0ｇを得た。
このグリセリンオレートの酸価は９であつた。な
お、酸価は基準油脂分析試験法に基づき測定し
た。 グリセリンオレートの成分組成比はイアトロス
キヤン（ヤトロン社製イアトロスキヤンTH10）
を用いて求めた。即ち、クロマロツトSII（ヤトロ
ン社製シリカゲルロツド）にグリセリンオレート
の１％クロロホルム溶液1μをスポツトし、ヘ
キサン−クロロホルム−酢酸（50：20：0.5V／
Ｖ）を展開溶媒として約10cm展開し、イアトロス
キヤンにかけ、ピーク面積比から成分の重量比を
求めた。グリセリンオレート成分組成比は、グリ
セリンモノオレート72％、グリセリンジオレート
24％、オレイン酸４％であつた。そしてグリセリ
ントリオレートは検出されなかつた。なお、標準
物質としてはモノオレイン（和光純薬社製）を用
いた。 実施例 ３ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、２，４−ジメチル−３
−ペンタノール50ml、リパーゼ−PL679粉末１
ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇを300ml容三角
フラスコに取り、40℃にて48時間振盪反応しグリ
セリンオレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は89％であつた。以後、実施例２と同様
に行いグリセリンオレート5.8ｇを得た。このグ
リセリンオレートの酸価は15であつた。 イアトロスキヤンで求めたグリセリンオレート
の成分組成比はグリセリンモノオレート77％、グ
リセリンジオレート12％、オレイン酸10％であつ
た。そしてグリセリントリオレートは検出されな
かつた。 実施例 ４ オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチ
ルアルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、
モレキユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラ
スコに取り、グリセリンの量を1.63ｇ（17.7ミリ
モル）、3.26ｇ（35.4ミリモル）、4.89ｇ（53.1ミ
リモル）にしてそれぞれ上記三角フラスコに入
れ、30℃で72時間振盪反応しグリセリンオレート
を調製した。以後、実施例２と同様に行い反応液
のエステル合成率、およびグリセリンオレートの
収量と酸価そしてイアトロスキヤンにより求めた
グリセリンオレートの成分組成比を求めた。その
結果を第５表に示す。 【表】 第５表の結果から、グリセリン／オレイン酸の
比を高くすると、グリセリンモノオレートの含量
が高くなることがわかる。 実施例 ５ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、ジアセトンアルコール
50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユラー
シーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃にて72時間振盪反応しグリセリンオレートを
調製した。この反応液のエステル合成率は82％で
あつた。以後、実施例２と同様に行いグリセリン
オレート5.9ｇを得た。このグリセリンオレート
の酸価は27であつた。 実施例 ６ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル50ml、リパーゼ−AL粉末３ｇ、モレキユラー
シーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃にて48時間振盪反応しグリセリンオレートを
調製した。この反応液のエステル合成率は88％で
あつた。以後、実施例２と同様に行いグリセリン
オレート6.0ｇを得た。このグリセリンオレート
の酸価は18であつた。 またリパーゼ−AL粉末の代りに、リパーゼ−
PL266粉末３ｇを用い、上記と同様に行つた。こ
の反応液のエステル合成率は82％であつた。そし
て得られたグリセリンオレートの収量は5.8ｇで、
酸価は25であつた。 実施例 ７ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、ｎ−ヘキサン50ml、モ
レキユラーシーブス3A5ｇ、リパーゼ−PL679粉
末１ｇを500ml容三角フラスコに取り、30℃にて
48時間振盪反応しグリセリンオレートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は95％であつ
た。反応後、減圧下にｎ−ヘキサンを除き、残渣
に第３級ブチルアルコール50mlを加えた。以後、
実施例２と同様に行いグリセリンオレート5.8ｇ
を得た。このグリセリンオレートの酸価は６であ
つた。 また、ｎ−ヘキサンの代りに、イソオクタン20
mlと第３級ブチルアルコール30mlの混合溶媒を用
いて上記と同様に行いグリセリンオレートを調製
した。この反応液のエステル合成率は94％であつ
た。そして得られたグリセリンオレートの収量は
5.7ｇで、酸価は８であつた。 実施例 ８ グリセリン1.62ｇ（17.6ミリモル）、ステアリ
ン酸５ｇ（17.6ミリモル）、第３級アミルアルコ
ール50ml、モレキユラーシーブス4A5ｇ、リパー
ゼ−PL679粉末１ｇを500容三角フラスコに取り、
50℃にて72時間振盪反応しグリセリンステアレー
トを調製した。この反応液のエステル合成率は98
％であつた。以後、実施例２と同様に行いグリセ
リンステアレート5.8ｇを得た。このグリセリン
ステアレートの酸価は３であつた。 イアトロスキヤンで求めたグリセリンステアレ
ートの成分組成比は、グリセリンモノステアレー
ト79％、グリセリンジステアレート18％、ステア
リン酸３％であつた。そしてグリセリントリステ
アレートは検出されなかつた。 実施例 ９ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、バルミチ
ン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコ
ール50ml、モレキユラーシーブス5A5ｇ、リパー
ゼ−PL679粉末１ｇを500ml容三角フラスコに取
り、40℃にて72時間振盪反応しグリセリンパルミ
テートを調製した。この反応液のエステル合成率
は98％であつた。以後、実施例２と同様に行いグ
リセリンパルミテート5.5ｇを得た。このグリセ
リンパルミテートの酸価は２であつた。 イアトロスキヤンで求めたグリセリンパルミテ
ートの成分組成比は、グリセリンモノパルミテー
ト62％、グリセリンジパルミテート35％、パルミ
チン酸２％、グリセリントリパルミテート１％で
あつた。 実施例 10 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、ラウリン
酸3.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル50ml、モレキユラーシーブス3A5ｇ、リパーゼ
−PL679粉末２ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃にて48時間振盪反応しグリセリンラウレート
を調製した。この反応液のエステル合成率は81％
であつた。以後、実施例２と同様に行いグリセリ
ンラウレート4.5ｇを得た。このグリセリンラウ
レートの酸価は36であつた。 また、ラウリン酸3.5ｇの代りに、リシノレイ
ン酸5.3ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いグリセリンリシノレートを調製した。この
反応液のエステル合成率は81％であつた。そして
得られたグリセリンリシノレートの収量は6.3ｇ、
酸価は29であつた。 実施例 11 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、カプロン
酸2.05ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコ
ール25ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユ
ラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに取
り、40℃48時間振盪反応しグリセリンカプロネー
トを調製した。この反応液のエステル合成率は72
％であつた。以後、実施例２と同様に行いグリセ
リンカプロネート3.1ｇを得た。このグリセリン
カプロネートの酸価は70であつた。 また、カプロン酸2.05ｇの代りに、ケイ皮酸
2.6ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様に行
いグリセリンシンナメートを調製した。この反応
液のエステル合成率は30％であつた。以後、実施
例２と同様に行いグリセリンシンナメート3.7ｇ
を得た。 実施例 12 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、セバシン
酸3.6ｇ（17.7ミリモル）、リパーゼ−PL679粉末
１ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇ、第３級ブチ
ルアルコール50mlを500ml容三角フラスコに取り、
40℃で48時間振盪反応しグリセリンセバシネート
を調製した。この反応液のエステル合成率は40％
であつた。以後、実施例２と同様に行いグリセリ
ンセバシネート4.3ｇを得た。 実施例 13 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、メチルオ
レート5.2ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアル
コール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキ
ユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに
取り、30℃で24時間振盪反応しグリセリンオレー
トを調製した。以後、実施例２と同様に行いグリ
セリンオレート5.8ｇを得た。 このグリセリンオレートの成分組成比をイアト
ロスキヤンによつて求めると、グリセリンモノオ
レート70％、グリセリンジオレート10％、オレイ
ン酸１％、メチルオレート19％であつた。 実施例 14 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オリーブ
油7.8ｇ（8.9ミリモル）、リパーゼ−PL679粉末１
ｇ、第３級ブチルアルコール50ml、モレキユラー
シーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃で24時間振盪反応しグリセリンオリーブ油脂
肪酸エステルを調製した。以後、実施例２と同様
に行いグリセリンオリーブ油脂肪酸エステル8.7
ｇを得た。このグリセリンオリーブ油脂肪酸エス
テルの酸価は２であつた。 このエステルの成分組成比をイアトロスキヤン
により求めると、グリセリンモノエステル65％、
グリセリンジエステル30％、脂肪酸２％、グリセ
リントリエステル１％であつた。 また、オリーブ油の代りに、牛脂7.8ｇ（8.9ミ
リモル）を用いて上記と同様に行いグリセリン牛
脂脂肪酸エステルを調製した。以後、実施例２と
同様に行いグリセリン牛脂脂肪酸エステル8.2ｇ
を得た。このグリセリン牛脂脂肪酸エステルの酸
価は２であつた。 このエステルの成分組成比はイアトロスキヤン
で求めると、グリセリンモノエステル60％、グリ
セリンジエステル36％、脂肪酸２％、グリセリン
トリエステル２％であつた。 実施例 15 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モ
レキユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラス
コに取り、40℃で48時間振盪反応しプロピレング
リコールオレートを調製した。この反応液のエス
テル合成率は92％であつた。以後、実施例２と同
様に行いプロピレングリコールオレート5.6ｇを
得た。このプロピレングリコールの酸価は12であ
つた。 イアトロスキヤンで求めたプロピレングリコー
ルオレートの成分組成比は、プロピレングリコー
ルモノオレート81％、プロピレングリコールジオ
レート12％、オレイン酸７％であつた。なお、標
準サンプルとしてはプロピレングリコールモノオ
レート（理研ビタミン社製）を用いた。 また、リパーゼ−PL679粉末１ｇの代りに、リ
パーゼ−PL266粉末３ｇまたはリパーゼ−AL粉
末３ｇを用いて、上記と同様に行いプロピレング
リコールオレートを調製した。リパーゼ−PL266
を用いた時のエステル合成率は82％で、得られた
プロピレングリコールオレートの収量は5.5ｇ、
酸価は30であつた。リパーゼ−ALを用いた時の
エステル合成率は80％で、得られたプロピレング
リコールオレートの収量は5.5ｇ、酸価は32であ
つた。 実施例 16 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、ジアセトンア
ルコール30ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコ
に取り、40℃で48時間振盪反応しプロピレングリ
コールオレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は80％であつた。以後、実施例２と同様
に行いプロピレングリコールオレート5.2ｇを得
た。このプロピレングリコールオレートの酸価は
30であつた。 また、ジアセトンアルコール30mlの代りに、
２，４−ジメチル−３−ペンタノール50mlを用い
て上記と同様に行つた。この反応液のエステル合
成率は82％で、得られたプロピレングリコールオ
レートの収量は5.5ｇ、酸価は29であつた。 実施例 17 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、ｎ−ペンタン
50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユラー
シーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃で48時間振盪反応しプロピレングリコールオ
レートを調製した。この反応液のエステル合成率
は97％であつた。以後、実施例２と同様に行いプ
ロピレングリコールオレート5.0ｇを得た。この
プロピレングリコールオレートの酸価は４であつ
た。 また、ｎ−ペンタン50mlの代りに、ｎ−ヘキサ
ン30mlと第３級ブチルアルコール20mlの混合溶媒
を用いて上記と同様に行つた。この反応液のエス
テル合成率は97％で、得られたプロピレングリコ
ールオレートの収量は5.0ｇ、酸価は３であつた。 実施例 18 プロピレングリコール1.34ｇ（17.6ミリモル）、
ステアリン酸５ｇ（17.6ミリモル）、第３級アミ
ルアルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、
モレキユラーシーブス4A10ｇを500ml容三角フラ
スコに取り、50℃で48時間振盪反応しプロピレン
グリコールステアレートを調製した。この反応液
のエステル合成率は96％であつた。以後、実施例
２と同様に行いプロピレングリコールステアレー
ト5.6ｇを得た。このプロピレングリコールステ
アレートの酸価は７であつた。 イアトロスキヤンで求めたプロピレングリコー
ルステアレートの成分組成比は、プロピレングリ
コールモノステアレート83％、プロピレングリコ
ールジステアレート11％、ステアリン酸６％であ
つた。 実施例 19 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
パルミチン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチ
ルアルコール500ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、
モレキユラーシーブス5A5ｇを500ml容三角フラ
スコに取り、40℃で48時間振盪反応しプロピレン
グリコールバルミテートを調製した。この反応液
のエステル合成率は95％であつた。以後、実施例
２と同様に行いプロピレングリコールパルミテー
ト5.2ｇを得た。このプロピレングリコールパル
ミテートの酸価は８であつた。 イアトロスキヤンで求めたプロピレングリコー
ルパルミテートの成分比は、プロピレングリコー
ルモノパルミテート57％、プロピレングリコール
ジパルミテート35％、パルミチン酸８％であつ
た。 実施例 20 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
ラウリン酸3.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末２ｇ、モ
レキユラーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラス
コに取り、40℃で96時間振盪反応しプロピレング
リコールラウレートを調製した。この反応液のエ
ステル合成率は80％であつた。以後、実施例２と
同様に行いプロピレングリコールラウレート4.7
ｇを得た。このプロピレングリコールラウレート
の酸価は35であつた。 また、ラウリン酸3.5ｇの代りに、リシノレイ
ン酸5.3ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いプロピレングリコールリシノレートを調製
した。この反応液のエステル合成率は80％で、得
られたプロピレングリコールリシノレートの収量
は5.1ｇ、酸価は30であつた。 実施例 21 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
セバシン酸3.6ｇ（17.7ミリモル）、リパーゼ−
PL679粉末１ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇ、
第３級ブチルアルコール50mlを500ml容三角フラ
スコに取り、40℃で48時間振盪反応しプロピレン
グリコールセバシネートを調製した。この反応液
のエステル合成率は30％であつた。以後、実施例
２と同様に行いプロピレングリコールセバシネー
ト4.0ｇを得た。 また、セバシン酸3.6ｇの代りに、ケイ皮酸2.6
ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様に行いプ
ロピレングリコールシンナメートを調製した。こ
の反応液のエステル合成率は25％で、得られたプ
ロピレングリコールシンナメートの収量は3.3ｇ
であつた。 実施例 22 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモ
ル）、メチルオレート5.3ｇ（17.7ミリモル）、第
３級ブチルアルコール50ml、リパーゼ−PL679粉
末２ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇを500ml容
三角フラスコに取り、40℃で48時間振盪反応しプ
ロピレングリコールオレートを調製した。以後、
実施例２と同様に行いプロピレングリコールオレ
ート6.1ｇを得た。 イアトロスキヤンで求めたプロピレングリコー
ルオレートの成分比は、プロピレングリコールモ
ノオレート60％、プロピレングリコールジオレー
トとメチルオレートの混合物40％であつた。 実施例 23 ジグリセリン2.94ｇ（17.7ミリモル）、オレイ
ン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコ
ール25ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユ
ラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに取
り、30℃で48時間振盪反応しジグリセリンオレー
トを調製した。この反応液のエステル合成率は93
％であつた。以後、実施例２と同様に行いジグリ
セリンオレート7.2ｇを得た。得られたジグリセ
リンオレートの酸価は９であつた。 実施例 24 テトラグリセリン5.6ｇ（17.7ミリモル）、オレ
イン酸（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル30ml、ｎ−ヘキサン10ml、リパーゼ−PL679粉
末１ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇを500ml容
三角フラスコに取り、40℃で48時間振盪反応しテ
トラグリセリンオレートを調製した。この反応液
のエステル合成率は95％であつた。以後、実施例
２と同様に行いテトラグリセリンオレート9.5ｇ
を得た。このテトラグリセリンオレートの酸価は
４であつた。 実施例 25 テトラグリセリン5.5ｇ（17.6ミリモル）、ステ
アリン酸５ｇ（17.6ミリモル）、第３級ブチルア
ルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス4A5ｇを500ml容三角フラスコ
に取り、50℃で48時間振盪反応しテトラグリセリ
ンステアレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は97％であつた。以後、実施例２と同様
に行いテトラグリセリンステアレート9.7ｇを得
た。このテイラグリセリンステアレートの酸価は
３であつた。 実施例 26 テトラグリセリン5.5ｇ（17.7ミリモル）、パル
ミチン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級アミルア
ルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス3A5ｇを300ml容三角フラスコ
に入れ、40℃で48時間振盪反応しテトラグリセリ
ンパルミテートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は98％であつた。以後、実施例２と同様
に行いテトラグリセリンパルミテート9.1ｇを得
た。このテトラグリセリンパルミテートの酸価は
２であつた。 また、パルミチン酸4.5ｇの代りに、ラウリン
酸3.5ｇを用いて上記と同様に行いテトラグリセ
リンラウレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は90％で、得られたテトラグリセリンラ
ウレートの収量は8.0ｇ、酸価は10であつた。 実施例 27 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、オレ
イン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアル
コール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキ
ユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに
取り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセリン
オレートを調製した。この反応液のエステル合成
率は96％であつた。以後、実施例２と同様に行い
ヘキサグリセリンオレート12ｇを得た。このへキ
サグリセリンオレートの酸価は３であつた。 また、ヘキサグリセリン8.2ｇの代りに、デカ
グリセリン13.4ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記
と同様に行いデカグリセリンオレートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は95％で、得ら
れたデカグリセリンオレートの収量は16ｇ、酸価
は２であつた。 上記のように調製したヘキサグリセリンオレー
ト（サンプル１）とデカグリセリンオレート（サ
ンプル２）の２％クロロホルム溶液１mlをクロマ
ロツトSIIにスポツトし、ベンゼン−クロロホル
ム−メタノール−アンモニア（80：40：10：
1V／Ｖ）を展開溶媒として展開し、イアトロス
キヤンで分析した。なお、標準物質として、SY
グリスターMO500（ヘキサグリセリンモノオレー
ト、阪本薬品工業製）、SYグリスターPO500（ヘ
キサグリセリンペンタオレート、阪本薬品工業
製）、SYグリスターMO750（デカグリセリンモノ
オレート、阪本薬品工業製）、およびSYグリスタ
ーDAO750（デカグリセリンデカオレート、阪本
薬品工業製）を用いた。その結果を第１図に示
す。 第１図から、上記のヘキサグリセリンオレート
（サンプル１）およびデカグリセリンオレート
（サンプル２）は、その分析パターンが、市販の
ポリグリセリンモノオレートの分析パターンと類
似しているので、主としてモノエステルからなる
ものと思われる。 実施例 28 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、オレ
イン酸５ｇ（17.7ミリモル）、ジアセトンアルコ
ール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユ
ラーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに取
り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセリンオ
レートを調製した。この反応液のエステル合成率
は91％であつた。以後、実施例２と同様に行いヘ
キサグリセリンオレート12.1ｇを得た。このヘキ
サグリセリンオレートの酸価は７であつた。 また、ジアセトンアルコール50mlの代りに、
２，４−ジメチル−３−ペンタノール50mlを用い
て上記と同様に行いヘキサグリセリンオレートを
調製した。この反応液のエステル合成率は80％
で、得られたヘキサグリセリンオレートの収量は
12ｇ、酸価は15であつた。 さらに、ジアセトンアルコール50mlの代りに、
ｎ−ヘプタン50mlを用いて上記と同様に行いヘキ
サグリセリンオレートを調製した。この反応液の
エステル合成率は80％で、得られたヘキサグリセ
リンオレートの収量は12ｇ、酸価は15であつた。 実施例 29 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、オレ
イン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアル
コール50ml、リパーゼ−PL266粉末３ｇ、モレキ
ユラーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに
取り、40℃で96時間振盪反応しヘキサグリセリン
オレートを調製した。この反応液のエステル合成
率は91％であつた。以後、実施例２と同様に行い
ヘキサグリセリンオレート11.5ｇを得た。このヘ
キサグリセリンオレートの酸価は７であつた。 また、リパーゼ−PL266粉末３ｇの代りに、リ
パーゼ−AL粉末３ｇを用いて上記と同様に行い
ヘキサグリセリンオレートを調製した。この反応
液のエステル合成率は93％で、得られたヘキサグ
リセリンオレートの収量は11.3ｇ、酸価は６であ
つた。 実施例 30 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、ステ
アリン酸5.1ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルア
ルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス5A5ｇを500ml容三角フラスコ
に取り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセリ
ンステアレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は98％であつた。以後、実施例２と同様
に行いヘキサグリセリンステアレート11.7ｇを得
た。このヘキサグリセリンステアレートの酸価は
１であつた。 また、ステアリン酸5.1ｇの代りに、パルミチ
ン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いヘキサグリセリンパルミテートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は98％で、得ら
れたヘキサグリセリンパルミテートの収量は8.5
ｇ、酸価は１であつた。 さらに、ステアリン酸5.1ｇの代りに、ラウリ
ン酸3.5ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いヘキサグリセリンラウレートを調製した。
この反応液のエステル合成率は90％で、得られた
ヘキサグリセリンラウレートの収量は10.3ｇ、酸
価は９であつた。 実施例 31 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、リシ
ノレイン酸5.3ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モ
レキユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラス
コに取り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセ
リンリシノレートを調製した。この反応液のエス
テル合成率は85％であつた。以後、実施例２と同
様に行いヘキサグリセリンリシノレート11.5ｇを
得た。このヘキサグリセリンリシノレートの酸価
は10であつた。 また、リシノレイン酸5.3ｇの代りに、カプロ
ン酸2.05ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いヘキサグリセリンカプロネートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は83％で、得ら
れたヘキサグリセリンカプロネートの収量は8.7
ｇ、酸価は14であつた。 さらに、リシノレイン酸5.3ｇの代りに、ケイ
皮酸2.6ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いヘキサグリセリンシンナメートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は20％で、得ら
れたヘキサグリセリンシンナメートの収量は9.1
ｇであつた。 実施例 32 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、セバ
シン酸3.6ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアル
コール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキ
ユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに
取り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセリン
セバシネートを調製した。この反応液のエステル
合成率は50％であつた。以後、実施例２と同様に
行いヘキサグリセリンセバシネート10.7ｇを得
た。 実施例 33 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、メチ
ルオレート5.2ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末２ｇ、モ
レキユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラス
コに取り、40℃で72時間振盪反応しヘキサグリセ
リンオレートを調製した。以後、実施例２と同様
に行いヘキサグリセリンオレート12.4ｇを得た。 このヘキサグリセリンオレートの成分組成比を
イアトロスキヤンにより調べると、ヘキサグリセ
リンモノオレート80％、メチルオレート20％であ
つた。 実施例 34 デカグリセリン13.4ｇ（17.7ミリモル）、ステ
アリン酸5.1ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルア
ルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコ
に取り、40℃で48時間振盪反応しデカグリセリン
ステアレートを調製した。この反応液のエステル
合成率は95％であつた。以後、実施例２と同様に
行いデカグリセリンステアレート17.5ｇを得た。
このデカグリセリンステアレートの酸価は３であ
つた。 また、ステアリン酸5.1ｇの代りに、パルミチ
ン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いデカグリセリンパルミテートを調製した。
この反応液のエステル合成率は97％で、得られた
デカグリセリンパルミテートの収量は17ｇ、酸価
は２であつた。 さらに、ステアリン酸5.1ｇの代りに、ラウリ
ン酸3.5ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いデカグリセリンラウレートを調製した。こ
の反応液のエステル合成率は91％で、得られたデ
カグリセリンラウレートの収量は15.0ｇ、酸価は
７であつた。 実施例 35 リパーゼ−PL679粉末10ｇを200ml容ビーカー
に取り、水100mlを加え溶解した後、ベントナイ
ト10ｇを加え室温で30分間攪拌してベントナイト
にリパーゼ−PL679を吸着させた。5000ｇで５分
間遠心分離してベントナイトを回収し、これにア
セトン100mlを加え攪拌して懸濁させた後、再び
遠心分離にてベントナイトを回収した。以後、こ
の操作を２回繰り返して脱水した後、減圧乾燥
し、ベントナイト吸着固定化リパーゼPL−679を
調製した。 このベントナイト吸着回定化リパーゼ−
PL6791ｇ、グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、
オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、モレキユラーシーブス3A5ｇを
500ml容三角フラスコに取り、40℃で48時間振盪
反応しグリセリンオレートを調製した。この反応
液のエステル合成率は95％であつた。以後、実施
例２と同様に行いグリセリンオレート5.9ｇを得
た。このグリセリンオレートの酸価は８であつ
た。 また、グリセリン1.63ｇの代りに、プロピレン
グリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）を用い上記と
同様に行いプロピレングリコールオレートを調製
した。この反応液のエステル合成率は93％で、得
られたプロピレングリコールオレートの収量は
5.7ｇ、酸価は10であつた。 さらに、グリセリン1.63ｇの代りに、ヘキサグ
リセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と
同様に行いヘキサグリセリンオレートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は96％で、得ら
れたヘキサグリセリンオレートの収量は12.1ｇ、
酸価は３であつた。 実施例 36 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、モレキユラーシーブス
3A5ｇ、リパーゼ−PL679粉末１ｇを100ml容三
角フラスコに取り、40℃で48時間振盪反応しグリ
セリンオレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は95％であつた。反応後、第３級ブチル
アルコール50mlを加え、以後、実施例２と同様に
行いグリセリンオレートを5.7ｇ得た。このグリ
セリンオレートの酸価は９であつた。 また、グリセリン1.63ｇの代りに、プロピレン
グリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記
と同様に行いプロピレングリコールオレートを調
製した。この反応液のエステル合成率は96％で、
得られたプロピレングリコールオレートの収量は
5.3ｇ、酸価は７であつた。 さらに、グリセリン1.63ｇの代りに、ヘキサグ
リセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と
同様に行いヘキサグリセリンオレートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は81％で、得ら
れたヘキサグリセリンオレートの収量は12.1ｇ、
酸価は13であつた。
法、さらに詳しくは酵素法によりポリアルコール
脂肪酸エステルを高い合成到達率で容易に製造す
る方法に関する。 〔従来の技術〕 ポリアルコール類の脂肪酸エステルの化学的製
造法は色々提案されているが、工業的製法として
実用化されているのはエステル化またはアルコリ
シスのいずれかの方法である。エステル化は脂肪
酸に対して、アルコリシスは脂肪酸エステルに対
してポリアルコールを過剰に加え、一般的には触
媒の存在下に200〜250℃に加熱することにより、
ポリアルコール脂肪酸エステルが製造されてい
る。 一方、リパーゼによつてもグリセリンと脂肪酸
からグリセライドが合成されることは、動・植物
リパーゼについて古くから知られていたが、近年
になつて微生物リパーゼの開発とあいまつてリパ
ーゼによるグリセライドの生成に関する報告や特
許が見られるようになつた。 例えば、辻阪らは、アスペルギルス・ニガー
（Aspergillus niger）、リゾプス・デレマー
（Rhizopus delemar）、ゲオトリカム・キヤンデ
イダム（Geotricum candidam）、ペニシリウ
ム・シクロピウム（Penicillium cyclopium）の
４種類の酸性リパーゼを用いるグリセライドの生
成を報告している〔Biochim.Biophys.Acta.，
489，415（1979）〕。更に、彼等は、Biochim.
Biophys.Acta.575，156（1979）において、上記
リパーゼを用いプロピレングリコールやジグリセ
リンとオレイン酸の間でもエステルを生成したこ
とを報告している。 また、モノグリセライドの酵素的製法に関する
特許としては、上記辻阪らの用いた４種類の酸性
リパーゼを使用し、グリセリンと脂肪酸に水およ
び0.01％の蛋白質を加えエマルジヨンにてモノグ
リセライドを含むグリセライドを製造する方法
（特公昭51−7754号公報）、リゾプス・シネンシス
（Rhizopus chinensis）HISの生産するリパーゼ
を用いる方法（特公昭57−23535号公報）、さらに
リパーゼとしてキヤンデイダ・シリンドラセ
（Candida cylindracea）等を用い、グリセリン
と脂肪酸メチルに水を加えたエマルジヨンでグリ
セライドを生成させる方法（特開昭59−118094号
公報、特開昭59−118095号公報）などがある。 しかし、上記の方法は、いずれも脂肪酸に対し
てモル比で大過剰のグリセリンを加え、水を反応
溶媒とするエマルジヨンでのリパーゼによるモノ
グリセライドの生成に関するものである。 〔発明が解決しようとする問題点〕 上記したように、ポリアルコール脂肪酸エステ
ルの化学的製造法では高温条件下で反応が行われ
るが、反応温度を上げることは、反応を進める上
で必要である反面、熱によつてポリアルコールの
分子内脱水や分解が起り、着色、重合、更に焦げ
臭の発生原因となり、生成物の界面活性剤として
の性能や商品価値に好ましくない影響を与えてい
る。また、熱による悪影響を最小限度にとどめる
必要性から反応熱や、反応時間、基質濃度に一定
の許容限度があり、実際上製造しうるモノエステ
ル濃度は40〜50％が限度である。 一方、リパーゼを用いる酵素反応法は常温、常
圧の温和な条件での反応が可能であり、ポリアル
コールやそのエステル生成物にも何等の悪影響を
与えることはない。そしてリパーゼによるグリセ
ライドの生成に関しては、従来多くの技術的提案
がなされて来たが、これ等の提案には種々問題点
がある。その理由は色々と考えられるが、最大の
理由は合成到達率の低さにあると思われる。 即ち、従来提案された報告によれば、いずれも
脂肪酸やその低級アルコールエステルに対して大
過剰のグリセリンを加えて反応しているにもかか
わらず、エステル生成物の中に多量のグリセリン
と共に未反応の脂肪酸やその低級アルコールを少
ないものでも添加量の約30％を残していることで
ある。 そして未反応の脂肪酸やその低級アルコールエ
ステルを多く含んだモノグリセライドはほとんど
商品価値を持たず、また、これ等未反応物を生成
したモノグリセライド混合物から分離、除去しよ
うとしても、トリグリセライドからの分離と異
り、大変困難であり、あえて除去すれば経済性を
失うことになる。 また、従来の酵素法によるポリアルコール脂肪
酸エステルの製造法の提案においては、反応溶媒
として水が用いられている。これは脂肪酸とポリ
アルコールとが互いに難溶性であり、更にそれだ
けでは流動性も得られないため、水にリパーゼを
溶解し、更に水を媒体としてエマルジヨンを形成
し、界面面積を広げることで反応を行なわせよう
とするものであるが、この場合、安定なエマルジ
ヨンを維持するために界面活性剤を加えたり、ま
たは激しい攪拌によつて常に乳化状態を保ちつづ
けなければ脂肪酸とポリアルコールは分離して反
応を進めることが出来なくなる。 しかし界面面積の拡大にはおのずと限界がある
し、更にリパーゼは本来プロテアーゼやアミラー
ゼと並ぶ代表的な加水分解酵素として知られてお
り、その一般的機能としては、水の存在下におい
ては、エステルを生成する方向での働きを低下さ
せるだけでなく、折角生成したエステルの再分解
をも引き起こす恐れもある。また、水エマルジヨ
ン反応によつて得られるエステル生成物を、反応
後に乳化液より分離するためには、強力な遠心分
離処理を必要とするなど水溶媒系の提案はいずれ
も問題がある。 かくして、水溶媒系を用いるような欠点がな
く、高い合成到達率で酵素法によりポリアルコー
ル脂肪酸エステルを容易に得る方法が望まれてい
たのであり、この問題を解決したのが本発明であ
る。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明者らは、上記した事情に鑑み、従来のご
とく酵素の作用が水の存在と不可欠と考え、水系
での反応を考えるかぎりにおいて、エステル合成
反応は必然的に加水分解と合成反応との反応平衡
則に従わざるを得ず、低い合成率や再分解をまぬ
がれ得ないとの考えに立ち、従来の概念にとらわ
れずに、実質的に水を加えることなく、有機溶媒
の存在下もしくは不存在下でのポリアルコール脂
肪酸エステルの生成を可能にするリパーゼについ
て鋭意研究した。 その結果、リパーゼとして、例えばアクロモバ
クター（Achromobacter）属の微生物の生産す
るリパーゼ（特公昭49−32080号公報）、アルカリ
ゲネス（Alcaligenes）属の微生物の生産するリ
パーゼ（特公昭58−36953号公報、特開昭53−
59093号公報）などの微生物アルカリ性リパーゼ
が、実質的に水を加えることなく有機溶媒の存在
下もしくは不存在下に、脱水しながら反応系の含
水率が0.1重量％（以後、含水率の％は重量％を
示す）以下となるようにして作用させると、、広
範囲な脂肪酸とポリアルコールとの間で高濃度の
主にモノエステルからなるエステルを生成すると
いう驚くべき現象のあることを見出した。本発明
はこの発見に基いて完成されたものである。 即ち、本発明は、プロピレングリコール、グリ
セリン、ポリグリセリンより選ばれるポリアルコ
ールと、炭素数C2〜C22の飽和もしくは不飽和の
脂肪酸（ここで脂肪酸は置換基として水酸基、カ
ルボキシル基、フエニル基を有していてもよい）
またはC1〜C3の低級アルコールとエステルを形
成している上記脂肪酸との混合物に、実質的に水
を加えることなく、有機溶媒（但し、第１級アル
コール溶媒を除く）の存在下もしくは不存在下
に、反応系の含水率が0.1％以下となるように脱
水しながら微生物アルカリ性リパーゼを作用させ
ることを特徴とするポリアルコール脂肪酸エステ
ルの製造法であり、その目的とするところは、従
来の酵素法では不可能であつた高い合成到達率
（エステル化率）で容易にポリアルコール脂肪酸
エステルを得る方法を提供することにある。 なお、本発明でポリアルコール脂肪酸エステル
とは、リパーゼの作用によりポリアルコールと脂
肪酸より生成するエステルだけでなく、脂肪酸の
低級アルコールエステルとポリアルコールの間で
生成するポリアルコール脂肪酸エステルをも包含
する。 以下、本発明について詳細に説明する。 本発明で用いるポリアルコールとは、プロピレ
ングリコール〔CH3・CHOH・CH2OH〕、グリ
セリン〔CH2OH・CHOH・CH2OH〕、およびポ
リグリセリン〔CH2OH・CHOH・CH2−Ｏ（−
CH2−CHOH−CH2−Ｏ）oCH2−CHOH・CH2
OH〕（但し、ｎ＝０〜28）をいう。 一般的にポリグリセリンは、グリセリンを不活
性ガスと触媒存在下に150〜300℃で２〜20時間程
度加熱し、脱水縮合反応させることによつて製造
される。このため、ポリグリセリンは広い範囲の
重合度を有し、ｎ＝０〜28の直鎖のポリグリセリ
ンを得ることができるが、上記反応条件を選択す
ることによつて目的とする平均重合度のポリグリ
セリンが製造される。そして市販されるポリグリ
セリンとしては、例えばｎ＝０のジグリセリン、
ｎ＝２のテトラグリセリン、ｎ＝４のヘキサグリ
セリン、ｎ＝８のデカグリセリンなどが例示でき
るが、これ等はいずれも水酸基価から算出した平
均重合度を示す商品であつて、単一重合物のポリ
グリセリンではない。したがつて、本発明ではグ
リセリンの重合体であるかぎりすべてポリグリセ
リンとして使用できる。 また、本発明の方法で用いる脂肪酸とは、飽和
もしくは不飽和の、炭素数C2〜C22の脂肪酸（こ
こで該脂肪酸は水酸基、カルボキシル基、もしく
はフエニル基で置換されていてもよい）であつ
て、本発明で脂肪酸とは、単に油脂類中に存在す
る酸を意味するだけでなく、それ以外の有機酸を
も含めて脂肪酸と言う。 そして置換基を持たないC2〜C22の脂肪酸とし
ては、例えば酢酸、プロピオン酸、アクリル酸、
ブタン酸、クロトン酸、メタクリル酸、バレリン
酸、カプロン酸、２−メチルバレリン酸、ソルビ
ン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミ
リスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソ
ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレ
イン酸、エイコサン酸、ドコサン酸、アラキドン
酸などがあげられる。 また、置換基を持つ脂肪酸のうち、水酸基を有
するものとしては、例えばリシノレイン酸、ジヒ
ドロキシステアリン酸などがあげられ、カルボキ
シル基を持つものとしては、例えばマロン酸、マ
レイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、
ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシ
ン酸、テトラデカンジオン酸などがあげられ、フ
エニル基を持つものとしては、例えばフエニル酢
酸、ケイ皮酸、３−フエニルプロピオン酸などが
あげられる。 更に、上記脂肪酸は、C1〜C3の低級アルコー
ル類とエステルを形成していてもよく、このC1
〜C3の低級アルコールとしては、例えばメタノ
ール、エタノール、プロパノール、グリセリン、
イソプロパノールなどがあげられ、これらの脂肪
酸エステルの具体例としては、例えばメチルラウ
レート、メチルミリステート、メチルパルミテー
ト、メチルステアレート、エチルラウレート、エ
チルパルミテート、エチルステアレート、エチル
オレエート、ラウリン酸イソプロピル、ミリスチ
ン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピルな
どがあげられ、グリセライドとしては、例えばグ
リセリントリステアレート、グリセリントリオレ
エート、ヤシ油、大豆油、綿実油、パーム油、牛
脂、豚脂、オリーブ油などが例示できる。 上記の如き脂肪酸及びその低級アルコールエス
テルが例示できるが、本発明においては、脂肪酸
およびその低級アルコールエステルの選択に制限
はない。 つぎに本発明を実施するのに用いられる微生物
アルカリ性リパーゼについては、微生物アルカリ
性リパーゼであれば任意のものを使用することが
できるが、例えばアクモロバクター
（Achromobacter）属に属する名糖−AL−865号
（微工研菌寄第1213号）の生産するリパーゼ（特
公昭49−32080号公報）（以下、リパーゼ−ALと
いう）、アルカリゲネス（Alcaligenes）属に属す
る名糖PL−266号（微工研菌寄第3187号）の生産
するリパーゼ（特公昭58−36953号公報）（以下、
リパーゼ−PL266という）、同じくアルカリゲネ
ス属に属する名糖PL−679号（微工研菌寄第3783
号）の生産するリパーゼ（特開昭53−59093号公
報）（以下、リパーゼ−PL679という）などが、
特に溶剤耐性およびエステル合成能にすぐれた有
効なリパーゼの具体例として挙げることができ
る。 この点に関し実験例を示して説明する。 実験例 １ 溶媒中での安定性 リパーゼ−PL679（名糖産業）、リパーゼ−
PL266（名糖産業）、リパーゼ−AL（名糖産業）の
粉末25mgずつを７ml栓付き遠沈管に取り、これに
各種溶媒、即ち第３級ブチルアルコール、アセト
ニトリル、第３級アミルアルコール、アセトン、
ヘキサン、ジアセトンアルコール、２，４−ジメ
チル−３−ペンタノール、水を２ml加え、充分攪
拌し、37℃で24時間振盪し、残存活性をリパーゼ
力価測定法で測定した。 リパーゼの測定は、リパーゼ−PL679、リパー
ゼ−PL266については国生等の方法〔Agric.Biol.
Chem.46(5)、第1159頁、1982〕、リパーゼ−ALに
ついては国生等の方法〔油化学23(2)、第98頁、
1974〕で行なつた。その結果を第１表に示す。 【表】 実験例 ２ 各種リパーゼの溶媒中でのエステル合成能 各種リパーゼ、即ちアルカリ性リパーゼである
リパーゼ−PL679（名糖産業）、リパーゼ−PL266
（名糖産業）、リパーゼ−AL（名糖産業）、そして
アルカリ性リパーゼでないリパーゼ−MY（名糖
産業）、リパーゼ−MAP4（天野製薬）、リパーゼ
−AP10（天野製薬）、オリパーゼ2S（大阪細研）、
タリパーゼ（田辺製薬）等のリパーゼ粉末100mg
を、各種の溶媒、即ち第３級ブチルアルコール、
第３級アミルアルコール、ジアセトンアルコー
ル、２，４−ジメチル−３−ペンタノール５mlの
存在下に、脱水剤モレキユラシーシーブス3A〔和
光純薬(株)販売〕0.5ｇを加えて、ポリアルコール
としてグリセリン0.163ｇ、脂肪酸としてオレイ
ン酸0.5ｇに37℃で48時間作用させてエステル合
成を行ない、エステルの生成を脂肪酸の消費によ
り求めた。その結果を第２表に示す。 【表】 上記のリパーゼ−AL、リパーゼ−PL266、リ
パーゼ−PL679は、いずれも高分子量蛋白からな
り、しかも至適PHがアルカリ側にあることを特徴
とするアルカリ性リパーゼであり、これらの性質
が有機溶媒中での、特に高い安定性やエステル合
成能に何等かの関連を有しているのではないかと
推定される。 従つて、これら以外のリパーゼであつても、実
質的に水を加えることなく、有機溶媒（但し、第
１級アルコール溶媒を除く）の存在下もしくは不
存在下で、安定的に活性を維持し且つポリアルコ
ールと脂肪酸とのエステル合成能の強い微生物ア
ルカリ性リパーゼであり、本発明の実施に適合す
るものであるかぎり、いかなる微生物アルカリ性
リパーゼでも使用でき、その起源や種類に制限は
ない。 また、本発明において、合成反応系に加える微
生物アルカリ性リパーゼは精製品でも粗製品でも
よく、その形態としては粉末状または顆粒状の酵
素あるいは菌体の乾燥品を使用ることができる。 更に、固定化担体、例えばポリプロピレン膜、
イオン交換樹脂のごとき各種重合体や、セライ
ト、ガラスビーズ、ゼオライト、ベントナイト等
の無機材料等に担持固定化した乾燥固定化酵素を
利用することもできる。そしてこれ等の担体に酵
素を固定化することによつて基質と酵素の接触綿
を広げることができ、酵素粉末を用いるよりも反
応を進める上で有利となる。 本発明で有機溶媒の存在下に反応を行う場合に
用いる有機溶媒（但し、第１級アルコール溶媒を
除く）は、反応温度において液状をなし、リパー
ゼ活性を安定的に維持し、且つ不溶状態のリパー
ゼが、ポリアルコールと脂肪酸のエステルを生起
させうるものであるかぎり、なんでもよいが、上
記条件を満足する限りにおいて、更にポリアルコ
ール、脂肪酸の両基質を同時に溶解しうる有機溶
媒またはそのような有機溶媒と混合して使用する
ことが望ましい。 本発明で用いる有機溶媒の例としては、例えば
ｎ−ヘプタン、ペンタン、ｎ−ヘキサン、石油エ
ーテル、イソオクタンなどの如き脂肪族炭化水素
類；シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロプ
タンなどのごとき脂環式炭化水素類；ベンゼン、
トルエン、キシレン、フエノールなどのごとき芳
香族炭化水素類；アセトン、メチルイソブチルケ
トンなどのごときケトン類；アセトニトリル、２
−ニトロプロパン、ピリジン、キノリン、ジメチ
ルホルムアミドなどのごとき含窒素溶媒類；ジメ
チルエーテル、ジエチルエーテル、ジイソプロピ
ルエーテル、ジオキサンなどのごときエーテル
類；四塩化炭素、クロロホルム、塩化メチレンな
どのごときハロゲン化炭化水素類；ジメチルスル
ホキシドのごときスルホキシド溶媒類；２，４−
ジメチル−３−ペンタノール、２，６−ジメチル
−４−ヘプタノールのごとき第２級アルコール
類；第３級ブチルアルコール、第３級アミルアル
コール、ジアセトンアルコール、３−メチル−３
−ペンタノール、３−エチル−３−ペンタノー
ル、２−メチル−２−ヘキサノールのごとき第３
級アルコール類などを例示することができる。 これらの中で特に好ましいのは、芳香族炭化水
素類、脂肪酸炭化水素類、第２級および第３級ア
ルコール類であり、中でも上記アルコール溶媒
は、ポリアルコールと脂肪酸またはその低級アル
コールエステル共によく溶かすことができるの
で、反応を進める上から好ましく、特に連続的に
酵素充填槽に反応液を流して行なう場合などは極
めて有効な反応溶媒となる。 また、反応溶媒は単独でも使用できるが、２種
以上の溶媒を自由に混ぜ合せて使用することもで
きる。 脂肪酸とポリアルコールとを有機溶媒の存在下
で微生物アルカリ性リパーゼと接触せしめ、エス
テルを生起させうるための態様は、適宜に選択で
きるが、攪拌もしくは振盪条件下に行うことがで
きる。両基質が有機溶媒に溶解できる反応条件に
おいては、固形リパーゼ粉末もしくはベントナイ
ト等に担持固定化・脱水したリパーゼを反応塔に
充填し、この中を反応液を循環させる方法によつ
て行うことができる。 つぎに、本発明において有機溶媒を使用しない
場合は、脂肪酸を必要な場合には加温液化し、ポ
リアルコールと脂肪酸を液状の混合物として微生
物アルカリ性リパーゼを作用させればよい。 本発明において、ポリアルコールと脂肪酸また
はその低級アルコールエステルとの混合モル比
や、リパーゼの使用量、有機溶媒の使用量などは
適宜に選択でき、最もよく反応を促進し、高い収
率が得られ、かつ反応操作のしやすい条件を採用
すればよい。 ポリアルコール１モルに対する脂肪酸またはそ
の低級アルコールエステルの添加モル比として
は、例えば0.01〜100モル、好ましくは0.1〜10モ
ル、最も好ましくは0.2〜５モルの反応比を例示
することができる。 また、ポリアルコールや脂肪酸などは数種類混
合して反応してもさしつかえない。 つぎに、微生物アルカリ性リパーゼの使用量に
は制限はないか、例えば脂肪酸またはその低級ア
ルコールエステル１ｇ当り10〜100000単位、好ま
しくは500〜50000単位程度の使用量を例示するこ
とができ、反応条件や用いる微生物アルカリ性リ
パーゼの種類によつて左右されることを考慮して
使用量を決めればよい。 担体に酵素を固定化して使用する場合には、そ
の比活性は高いものほど好ましく、担体１ｇ当り
1000〜300000単位程度の微生物アルカリ性リパー
ゼを担持した担体を例示することができる。 また有機溶媒の使用量としては、用いる溶媒、
基質の種類や濃度によつても左右されるが、目安
としては基質を溶解した有機溶媒が自由に移動し
て酵素と接触し、反応が促進される程度に有機溶
媒を添加するのが望ましく、特に制限はないが、
例えば反応系の１〜99％（Ｗ／Ｗ）、好ましくは
10〜95％（Ｗ／Ｗ）程度加えて反応すればよい。 本発明での１つの特徴は、実質的に水を加える
ことなく、有機溶媒（但し、第１級アルコール溶
媒を除く）の存在下もしくは不存在下に、微生物
アルカリ性リパーゼにより行われるエステル生成
反応にあるが、このことは反応系の水分が絶対的
０を意味するものではない。そのような状態を実
際に作り出すことは不可能であり、また不必要で
ある。しかし、反応系の水し可及的に少ないほど
高いポリアルコール脂肪酸エステル生成率に達
し、かつ再分解の恐れがなく、更に酵素の活性を
長く安定的に持続し、酵素の再利用度を高めるこ
とができるので、本発明では実質的に水を加えな
いだけでなく、更に反応によつて副生する水をも
除きつつ固体の微生物アルカリ性リパーゼを用い
てポリアルコール脂肪酸エステル生成反応を行な
うのである。 しかし、このことは反応系に水を僅かに共存さ
せることでエステルを生成しなくなることを意味
するものではない。本発明で実質的に水を加えな
いと言う意味は、基質や酵素を反応に用いるにあ
たつて、いささかの水も使用せず、そのままで、
または有機溶媒に基質を溶解または分散して反応
を行うということである。即ち、反応に関与する
物質はすべてある程度の水分を保有しており、そ
の量はポリアルコールで約１〜５％、脂肪酸また
はその低級アルコールエステルで約0.02％、酵素
で約４〜18％、有機溶媒でも約0.02〜0.1％であ
り、これらをそのまま用いても、反応系全体とし
ての初発含水率は約0.2〜1.0％の範囲にあるが、
このような場合は実質的に水を加えないことにな
るのである。また、反応中に空気中よりの吸湿や
エステル合成に伴つて副生する水がある場合には
更に含水率は上昇するが、この場合も実質的に水
を加えないことになるのである。 そして反応系の含水率は、反応に用いる基質、
酵素、有機溶媒などを可及的に乾燥して使用する
ことや、更に空気中より侵入する水や合成反応に
よつて副生する水がある場合には、乾燥剤として
例えばゼオライト、シリカゲル、焼せつこう、芒
硝などを用いて除去する他、乾燥した空気や不活
性ガスを反応槽中に通気し攪拌して反応槽外に排
気したり、あるいはその排気ガスを冷却凝縮させ
て水分を除去し、有機溶媒を還流させるなどの手
段で反応系の水分を除くことができる。 このような手段により反応系の含水率を0.1％
以下に低下することによつて、例えばグリセリン
とオレイン酸のモル比が１：１の場合、エステル
合成率を約80〜98％にまで上げることができ、得
られるグリセライド中のモノグリセライドの濃度
を約60〜90％にまで高めることができる。 微生物アルカリ性リパーゼとしてリパーゼ−
PL679を用い、反応系の含水率（％）に対するエ
ステル合成率を調べた実験例を示すと、次のとお
りである。 実験例 ３ オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、グリセリン
1.63ｇ（17.7ミリモル）またはヘキサグリセリン
（阪本薬品工業製ポリグリセリン＃500）8.2ｇ
（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコール50ml、
リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユラーシーブ
ス3A〔和光純薬(株)販売の脱水剤〕５ｇを500ml容
三角フラスコに取り、水を０〜20％（反応系全体
に対する％）になるように加え、40℃で48時間振
盪して反応させ、後記実施例２に記載したように
してエステル合成率を測定した。また、反応後、
反応液0.5ｇを取り、カールフイツシヤー試薬に
よる水分測定装置（三菱化成工業社製）を用いて
反応液の含水率を調べた。その結果を第３表に示
す。 【表】 本発明におけるエステル生成反応は、室温程度
でも進行するので、特に加熱の必要はないが、一
般的には用いる有機溶媒の沸点や、酵素の作用温
度を考慮し、適当な温度を選んで行なうことが望
ましく、その範囲としては、例えば０〜90℃のご
とき温度を例示することができるが、通常は20〜
60℃の範囲で行なうことができる。 また、反応時間も、適宜選択することができ、
例えば10分〜10日を例示することができるが、好
ましくは１〜96時間のごとき反応時間を明示する
ことができる。 また、必要に応じて、例えば反応系の脂肪酸の
減少率を測定したり、TLC（薄層クロマトグラフ
イー）などの手法を利用してエステル生成過程を
追跡し、所望の目的物の形成を確認することによ
り反応時間を決めてもよい。 反応終了後、有機溶媒不存在下で生成したポリ
アルコール脂肪酸エステルは有機溶媒により分離
することができる。 また、有機溶媒中で反応を行なつて生成したポ
リアルコール脂肪酸エステルは、ケイ酸アルミ
ナ、イオン交換樹脂、分子ふるい用ゲル、吸着ク
ロマトグラフイーを用いて反応系より分離した
り、反応溶媒を除去した後、上記方法や蒸留、溶
剤分画、尿素付加法、高速液体クロマトグラフイ
ー等を用いて分離精製することができる。 〔発明の効果〕 本発明によれば、従来提案の酵素法では不可能
であつた高い合成到達率（エステル化率）で、添
加した脂肪酸をほとんど残さずに、ポリアルコー
ル脂肪酸エステルを得ることができる。また、本
発明では、脂肪酸やその低級アルコールエステル
に対して大過剰のポリアルコールを必要とせず、
１対１モル比でも充分に高濃度のエステルを得る
ことができ、基質濃度も数％の低濃度から数10％
の高濃度に到るまで広い範囲で変えることができ
る。そしてまた、本発明では、化学的方法では得
にくいモノエステル濃度の高いポリアルコール脂
肪酸エステルを得ることができる。 さらに、本発明では、化学的方法で用いられる
ような有毒な反応触媒を用いる必要がなく、極め
て温和な反応条件下にエステルが合成されるため
に、ポリアルコール自体の構造に変化を起さず、
優れた性質を持つた安全性の高い界面活性剤とし
て有用なポリアルコール脂肪酸エステルが得られ
る。 本発明で得られるポリアルコール脂肪酸エステ
ル中、酸がモノカルボン酸であるポリアルコール
脂肪酸エステルは食品に利用することができ、例
えばマーガリン、シヨートニング、マヨネーズ、
ピーナツツバター等の脂肪性食品類の乳化や、乳
製品、ジユース、香料、精油等の可溶化に用いら
れ、またパン、ケーキ、クツキー、めん類、ちく
わ、かまぼこ、魚肉ソーセージ等の老化防止剤、
ソーセージ、プレスハム等の油分離防止剤、スポ
ンジケーキ、アイスクリーム、マシユマロ等の起
泡剤、チヨコレート、ココア、チユーインガム、
粉乳等の潤滑、分散剤などとして多くの用途が考
えられる。 また、本発明で得られる各種ポリアルコール脂
肪酸エステルは、化粧品として、例えばクリー
ム、乳液、化粧水のような基礎化粧品、フアンデ
ーシヨン、白粉、口紅等のメーキヤツプ製品、ヘ
ヤートニツク、ポマード、ヘヤーリキツド等の毛
髪製品、香水、オーデコロン等の芳香品、その他
エナメルのような美爪料、シヤンプー、リンスの
ような洗浄剤や、或いは歯磨など多くの製品に応
用し利用できる。 また、本発明で得られるポリアルコール脂肪酸
エステルについては、化粧品と同様、界面活性剤
としての機能を応用できる対象として、各種軟膏
の乳化、脂溶性ビタミン剤、コルチコステロイド
などの可溶化などの他、眼薬などの医薬品への利
用が考えられる。さらに、農薬の分野でも、殺虫
剤、展着剤など多くの製品の乳化、分散などにも
応用することができる。 なお、本発明で得られるポリアルコール脂肪酸
エステルの一部には、弱酸性界面活性剤も含まれ
るが、その多くは非イオン性の界面活性剤であ
り、生体毒性をもたず、接触アレルギーを示さな
い安全性の高い界面活性剤として期待される。 〔実施例〕 以下、本発明の実施例を示す。なお、実施例で
は反応系の含水率が0.1％以下となるように脱水
剤モレキユラーシーブス〔和光純薬(株)販売〕を用
いた。 実施例 １ オレイン酸0.5ｇ（1.77ミリモル）、グリセリン
0.163ｇ（1.77ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル５ml、リパーゼ−PL679粉末0.1ｇ、モレキユ
ラーシーブス3A0.5ｇを共栓試験管に取り、よく
混合した後、37℃で48時間振盪した。反応後、遠
心分離し、上清5μをシリカゲル薄層（メルク
社製、シリカゲル60TLCプレートNo.5721 20×20
cm）にスポツトし、石油エーテル−エーテル−酢
酸（70：30：1V／Ｖ）を展開溶媒として展開し
た。スポツトの検出には50％硫酸またはヨウ素を
用いた。 50％硫酸又はヨウ素によりスポツトを検出する
と、未反応のオレイン酸とグリセリン以外に２つ
のスポツトが検出された。この未知のスポツトの
Rf値は市販のグリセリンモノオレート（フナコ
シ薬品社製）とグリセリンジオレート（フナコシ
薬品社製）に一致したので、この２つのスポツト
をグリセリンのオレイン酸エステルであるグリセ
リンモノオレート、グリセリンジオレートとし
た。なお、グリセリンモノオレートのTLC上の
スポツトが圧倒的にグリセリンジオレートより大
きかつたので、グリセリンモノオレートを精製す
ることにした。 グリセリンモノオレートは分取用TLCを用い
て精製した。シリカゲル薄層（メルク社製シリカ
ゲルTLCプレートNo.13894，0.5mm、20×20cm）に
前記反応液0.5mlをライン上にスポツトし、石油
エーテル−エーテル−酢酸（70：30：1V／Ｖ）
を展開溶媒として展開した。展開後、両端を３cm
ずつ切り取り、50％硫酸で検出し、グリセリンモ
ノオレートのRf値を求めた。求めたRf値の部分
のシリカゲルをTLCプレートからかき取り、シ
リカゲルを10mlのクロロホルム−メタノール
（２：1V／Ｖ）で抽出した。抽出液をNo.5Cの紙
で過し、シリカゲルを除いた後、３mlの水で３
回洗いクロロホルム層を分取した。分取したクロ
ロホルム層を30℃、減圧下で乾固した。得られた
グリセリンモノオレートの収量は10mgでTLC上
は単一であつた。グリセリンモノオレートのIR
スペクトル（赤外線吸収スペクトル）は日本分光
A202型赤外分光光度計を用い、液膜法で測定し
た。その結果を第４表に示す（Run No.１）。 さらにオレイン酸0.5ｇの代わりに、第４表に
示す他の脂肪酸または脂肪酸エステル0.5ｇを用
いて上記と同様に実施しグリセリンのモノエステ
ルを得た。そのIRスペクトルを第４表に示す
（Run No.２〜25）。 次にグリセリン0.163ｇの代りに、プロピレン
グリコール0.135ｇ、またはジグリセリン0.294
ｇ、またはテトラグリセリン（阪本薬品工業社製
ポリグリセリン＃310）0.56ｇ、またはヘキサグ
リセリン（同上ポリグリセリン＃500）0.82ｇ、
またはデカグリセリン（同上ポリグリセリン＃
750）1.34ｇを用い、また第４表に示す各種脂肪
酸または脂肪酸エステル0.5ｇを用いて上記と同
様に実施しプロピレングリコール、ジグリセリ
ン、テトラグリセリン、ヘキサグリセリン、デカ
グリセリンのエステルを得た。そのIRスペクト
ルを第４表に示す（Run No.26〜150）。 【表】 【表】 【表】 【表】 【表】 【表】 【表】 【表】 第４表の結果から、1740カイザー付近にエステ
ル結合の吸収と3400カイザー付近にアルコールの
吸収が見られることから、上記生成物はポリアル
コール脂肪酸エステルであることがわかる。 実施例 ２ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユラ
ーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに取
り、40℃にて48時間振盪反応しグリセリンオレー
トを調製した。この反応液のエステル合成率は94
％であつた。なお、エステル合成率は反応系に添
加した脂肪酸のうちエステル合成に消費された量
を、アルカリ溶液で滴定することにより求め、反
応前の脂肪酸量に対する脂肪酸の減少率の百分率
をもつて示した。 反応後、10000ｇで10分遠心分離して不溶物を
除き、上清を得た。さらに不溶物に第３級ブチル
アルコール30mlを加え、不溶物を洗つた後、遠心
分離して上清を得た。これらの上清を合わせ、エ
バポレーターにて濃縮し、第３級ブチルアルコー
ルを除去し、グリセリンオレート6.0ｇを得た。
このグリセリンオレートの酸価は９であつた。な
お、酸価は基準油脂分析試験法に基づき測定し
た。 グリセリンオレートの成分組成比はイアトロス
キヤン（ヤトロン社製イアトロスキヤンTH10）
を用いて求めた。即ち、クロマロツトSII（ヤトロ
ン社製シリカゲルロツド）にグリセリンオレート
の１％クロロホルム溶液1μをスポツトし、ヘ
キサン−クロロホルム−酢酸（50：20：0.5V／
Ｖ）を展開溶媒として約10cm展開し、イアトロス
キヤンにかけ、ピーク面積比から成分の重量比を
求めた。グリセリンオレート成分組成比は、グリ
セリンモノオレート72％、グリセリンジオレート
24％、オレイン酸４％であつた。そしてグリセリ
ントリオレートは検出されなかつた。なお、標準
物質としてはモノオレイン（和光純薬社製）を用
いた。 実施例 ３ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、２，４−ジメチル−３
−ペンタノール50ml、リパーゼ−PL679粉末１
ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇを300ml容三角
フラスコに取り、40℃にて48時間振盪反応しグリ
セリンオレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は89％であつた。以後、実施例２と同様
に行いグリセリンオレート5.8ｇを得た。このグ
リセリンオレートの酸価は15であつた。 イアトロスキヤンで求めたグリセリンオレート
の成分組成比はグリセリンモノオレート77％、グ
リセリンジオレート12％、オレイン酸10％であつ
た。そしてグリセリントリオレートは検出されな
かつた。 実施例 ４ オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチ
ルアルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、
モレキユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラ
スコに取り、グリセリンの量を1.63ｇ（17.7ミリ
モル）、3.26ｇ（35.4ミリモル）、4.89ｇ（53.1ミ
リモル）にしてそれぞれ上記三角フラスコに入
れ、30℃で72時間振盪反応しグリセリンオレート
を調製した。以後、実施例２と同様に行い反応液
のエステル合成率、およびグリセリンオレートの
収量と酸価そしてイアトロスキヤンにより求めた
グリセリンオレートの成分組成比を求めた。その
結果を第５表に示す。 【表】 第５表の結果から、グリセリン／オレイン酸の
比を高くすると、グリセリンモノオレートの含量
が高くなることがわかる。 実施例 ５ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、ジアセトンアルコール
50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユラー
シーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃にて72時間振盪反応しグリセリンオレートを
調製した。この反応液のエステル合成率は82％で
あつた。以後、実施例２と同様に行いグリセリン
オレート5.9ｇを得た。このグリセリンオレート
の酸価は27であつた。 実施例 ６ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル50ml、リパーゼ−AL粉末３ｇ、モレキユラー
シーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃にて48時間振盪反応しグリセリンオレートを
調製した。この反応液のエステル合成率は88％で
あつた。以後、実施例２と同様に行いグリセリン
オレート6.0ｇを得た。このグリセリンオレート
の酸価は18であつた。 またリパーゼ−AL粉末の代りに、リパーゼ−
PL266粉末３ｇを用い、上記と同様に行つた。こ
の反応液のエステル合成率は82％であつた。そし
て得られたグリセリンオレートの収量は5.8ｇで、
酸価は25であつた。 実施例 ７ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、ｎ−ヘキサン50ml、モ
レキユラーシーブス3A5ｇ、リパーゼ−PL679粉
末１ｇを500ml容三角フラスコに取り、30℃にて
48時間振盪反応しグリセリンオレートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は95％であつ
た。反応後、減圧下にｎ−ヘキサンを除き、残渣
に第３級ブチルアルコール50mlを加えた。以後、
実施例２と同様に行いグリセリンオレート5.8ｇ
を得た。このグリセリンオレートの酸価は６であ
つた。 また、ｎ−ヘキサンの代りに、イソオクタン20
mlと第３級ブチルアルコール30mlの混合溶媒を用
いて上記と同様に行いグリセリンオレートを調製
した。この反応液のエステル合成率は94％であつ
た。そして得られたグリセリンオレートの収量は
5.7ｇで、酸価は８であつた。 実施例 ８ グリセリン1.62ｇ（17.6ミリモル）、ステアリ
ン酸５ｇ（17.6ミリモル）、第３級アミルアルコ
ール50ml、モレキユラーシーブス4A5ｇ、リパー
ゼ−PL679粉末１ｇを500容三角フラスコに取り、
50℃にて72時間振盪反応しグリセリンステアレー
トを調製した。この反応液のエステル合成率は98
％であつた。以後、実施例２と同様に行いグリセ
リンステアレート5.8ｇを得た。このグリセリン
ステアレートの酸価は３であつた。 イアトロスキヤンで求めたグリセリンステアレ
ートの成分組成比は、グリセリンモノステアレー
ト79％、グリセリンジステアレート18％、ステア
リン酸３％であつた。そしてグリセリントリステ
アレートは検出されなかつた。 実施例 ９ グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、バルミチ
ン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコ
ール50ml、モレキユラーシーブス5A5ｇ、リパー
ゼ−PL679粉末１ｇを500ml容三角フラスコに取
り、40℃にて72時間振盪反応しグリセリンパルミ
テートを調製した。この反応液のエステル合成率
は98％であつた。以後、実施例２と同様に行いグ
リセリンパルミテート5.5ｇを得た。このグリセ
リンパルミテートの酸価は２であつた。 イアトロスキヤンで求めたグリセリンパルミテ
ートの成分組成比は、グリセリンモノパルミテー
ト62％、グリセリンジパルミテート35％、パルミ
チン酸２％、グリセリントリパルミテート１％で
あつた。 実施例 10 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、ラウリン
酸3.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル50ml、モレキユラーシーブス3A5ｇ、リパーゼ
−PL679粉末２ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃にて48時間振盪反応しグリセリンラウレート
を調製した。この反応液のエステル合成率は81％
であつた。以後、実施例２と同様に行いグリセリ
ンラウレート4.5ｇを得た。このグリセリンラウ
レートの酸価は36であつた。 また、ラウリン酸3.5ｇの代りに、リシノレイ
ン酸5.3ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いグリセリンリシノレートを調製した。この
反応液のエステル合成率は81％であつた。そして
得られたグリセリンリシノレートの収量は6.3ｇ、
酸価は29であつた。 実施例 11 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、カプロン
酸2.05ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコ
ール25ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユ
ラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに取
り、40℃48時間振盪反応しグリセリンカプロネー
トを調製した。この反応液のエステル合成率は72
％であつた。以後、実施例２と同様に行いグリセ
リンカプロネート3.1ｇを得た。このグリセリン
カプロネートの酸価は70であつた。 また、カプロン酸2.05ｇの代りに、ケイ皮酸
2.6ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様に行
いグリセリンシンナメートを調製した。この反応
液のエステル合成率は30％であつた。以後、実施
例２と同様に行いグリセリンシンナメート3.7ｇ
を得た。 実施例 12 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、セバシン
酸3.6ｇ（17.7ミリモル）、リパーゼ−PL679粉末
１ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇ、第３級ブチ
ルアルコール50mlを500ml容三角フラスコに取り、
40℃で48時間振盪反応しグリセリンセバシネート
を調製した。この反応液のエステル合成率は40％
であつた。以後、実施例２と同様に行いグリセリ
ンセバシネート4.3ｇを得た。 実施例 13 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、メチルオ
レート5.2ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアル
コール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキ
ユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに
取り、30℃で24時間振盪反応しグリセリンオレー
トを調製した。以後、実施例２と同様に行いグリ
セリンオレート5.8ｇを得た。 このグリセリンオレートの成分組成比をイアト
ロスキヤンによつて求めると、グリセリンモノオ
レート70％、グリセリンジオレート10％、オレイ
ン酸１％、メチルオレート19％であつた。 実施例 14 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オリーブ
油7.8ｇ（8.9ミリモル）、リパーゼ−PL679粉末１
ｇ、第３級ブチルアルコール50ml、モレキユラー
シーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃で24時間振盪反応しグリセリンオリーブ油脂
肪酸エステルを調製した。以後、実施例２と同様
に行いグリセリンオリーブ油脂肪酸エステル8.7
ｇを得た。このグリセリンオリーブ油脂肪酸エス
テルの酸価は２であつた。 このエステルの成分組成比をイアトロスキヤン
により求めると、グリセリンモノエステル65％、
グリセリンジエステル30％、脂肪酸２％、グリセ
リントリエステル１％であつた。 また、オリーブ油の代りに、牛脂7.8ｇ（8.9ミ
リモル）を用いて上記と同様に行いグリセリン牛
脂脂肪酸エステルを調製した。以後、実施例２と
同様に行いグリセリン牛脂脂肪酸エステル8.2ｇ
を得た。このグリセリン牛脂脂肪酸エステルの酸
価は２であつた。 このエステルの成分組成比はイアトロスキヤン
で求めると、グリセリンモノエステル60％、グリ
セリンジエステル36％、脂肪酸２％、グリセリン
トリエステル２％であつた。 実施例 15 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モ
レキユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラス
コに取り、40℃で48時間振盪反応しプロピレング
リコールオレートを調製した。この反応液のエス
テル合成率は92％であつた。以後、実施例２と同
様に行いプロピレングリコールオレート5.6ｇを
得た。このプロピレングリコールの酸価は12であ
つた。 イアトロスキヤンで求めたプロピレングリコー
ルオレートの成分組成比は、プロピレングリコー
ルモノオレート81％、プロピレングリコールジオ
レート12％、オレイン酸７％であつた。なお、標
準サンプルとしてはプロピレングリコールモノオ
レート（理研ビタミン社製）を用いた。 また、リパーゼ−PL679粉末１ｇの代りに、リ
パーゼ−PL266粉末３ｇまたはリパーゼ−AL粉
末３ｇを用いて、上記と同様に行いプロピレング
リコールオレートを調製した。リパーゼ−PL266
を用いた時のエステル合成率は82％で、得られた
プロピレングリコールオレートの収量は5.5ｇ、
酸価は30であつた。リパーゼ−ALを用いた時の
エステル合成率は80％で、得られたプロピレング
リコールオレートの収量は5.5ｇ、酸価は32であ
つた。 実施例 16 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、ジアセトンア
ルコール30ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコ
に取り、40℃で48時間振盪反応しプロピレングリ
コールオレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は80％であつた。以後、実施例２と同様
に行いプロピレングリコールオレート5.2ｇを得
た。このプロピレングリコールオレートの酸価は
30であつた。 また、ジアセトンアルコール30mlの代りに、
２，４−ジメチル−３−ペンタノール50mlを用い
て上記と同様に行つた。この反応液のエステル合
成率は82％で、得られたプロピレングリコールオ
レートの収量は5.5ｇ、酸価は29であつた。 実施例 17 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、ｎ−ペンタン
50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユラー
シーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに取り、
40℃で48時間振盪反応しプロピレングリコールオ
レートを調製した。この反応液のエステル合成率
は97％であつた。以後、実施例２と同様に行いプ
ロピレングリコールオレート5.0ｇを得た。この
プロピレングリコールオレートの酸価は４であつ
た。 また、ｎ−ペンタン50mlの代りに、ｎ−ヘキサ
ン30mlと第３級ブチルアルコール20mlの混合溶媒
を用いて上記と同様に行つた。この反応液のエス
テル合成率は97％で、得られたプロピレングリコ
ールオレートの収量は5.0ｇ、酸価は３であつた。 実施例 18 プロピレングリコール1.34ｇ（17.6ミリモル）、
ステアリン酸５ｇ（17.6ミリモル）、第３級アミ
ルアルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、
モレキユラーシーブス4A10ｇを500ml容三角フラ
スコに取り、50℃で48時間振盪反応しプロピレン
グリコールステアレートを調製した。この反応液
のエステル合成率は96％であつた。以後、実施例
２と同様に行いプロピレングリコールステアレー
ト5.6ｇを得た。このプロピレングリコールステ
アレートの酸価は７であつた。 イアトロスキヤンで求めたプロピレングリコー
ルステアレートの成分組成比は、プロピレングリ
コールモノステアレート83％、プロピレングリコ
ールジステアレート11％、ステアリン酸６％であ
つた。 実施例 19 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
パルミチン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチ
ルアルコール500ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、
モレキユラーシーブス5A5ｇを500ml容三角フラ
スコに取り、40℃で48時間振盪反応しプロピレン
グリコールバルミテートを調製した。この反応液
のエステル合成率は95％であつた。以後、実施例
２と同様に行いプロピレングリコールパルミテー
ト5.2ｇを得た。このプロピレングリコールパル
ミテートの酸価は８であつた。 イアトロスキヤンで求めたプロピレングリコー
ルパルミテートの成分比は、プロピレングリコー
ルモノパルミテート57％、プロピレングリコール
ジパルミテート35％、パルミチン酸８％であつ
た。 実施例 20 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
ラウリン酸3.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末２ｇ、モ
レキユラーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラス
コに取り、40℃で96時間振盪反応しプロピレング
リコールラウレートを調製した。この反応液のエ
ステル合成率は80％であつた。以後、実施例２と
同様に行いプロピレングリコールラウレート4.7
ｇを得た。このプロピレングリコールラウレート
の酸価は35であつた。 また、ラウリン酸3.5ｇの代りに、リシノレイ
ン酸5.3ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いプロピレングリコールリシノレートを調製
した。この反応液のエステル合成率は80％で、得
られたプロピレングリコールリシノレートの収量
は5.1ｇ、酸価は30であつた。 実施例 21 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）、
セバシン酸3.6ｇ（17.7ミリモル）、リパーゼ−
PL679粉末１ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇ、
第３級ブチルアルコール50mlを500ml容三角フラ
スコに取り、40℃で48時間振盪反応しプロピレン
グリコールセバシネートを調製した。この反応液
のエステル合成率は30％であつた。以後、実施例
２と同様に行いプロピレングリコールセバシネー
ト4.0ｇを得た。 また、セバシン酸3.6ｇの代りに、ケイ皮酸2.6
ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様に行いプ
ロピレングリコールシンナメートを調製した。こ
の反応液のエステル合成率は25％で、得られたプ
ロピレングリコールシンナメートの収量は3.3ｇ
であつた。 実施例 22 プロピレングリコール1.35ｇ（17.7ミリモ
ル）、メチルオレート5.3ｇ（17.7ミリモル）、第
３級ブチルアルコール50ml、リパーゼ−PL679粉
末２ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇを500ml容
三角フラスコに取り、40℃で48時間振盪反応しプ
ロピレングリコールオレートを調製した。以後、
実施例２と同様に行いプロピレングリコールオレ
ート6.1ｇを得た。 イアトロスキヤンで求めたプロピレングリコー
ルオレートの成分比は、プロピレングリコールモ
ノオレート60％、プロピレングリコールジオレー
トとメチルオレートの混合物40％であつた。 実施例 23 ジグリセリン2.94ｇ（17.7ミリモル）、オレイ
ン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコ
ール25ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユ
ラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに取
り、30℃で48時間振盪反応しジグリセリンオレー
トを調製した。この反応液のエステル合成率は93
％であつた。以後、実施例２と同様に行いジグリ
セリンオレート7.2ｇを得た。得られたジグリセ
リンオレートの酸価は９であつた。 実施例 24 テトラグリセリン5.6ｇ（17.7ミリモル）、オレ
イン酸（17.7ミリモル）、第３級ブチルアルコー
ル30ml、ｎ−ヘキサン10ml、リパーゼ−PL679粉
末１ｇ、モレキユラーシーブス3A5ｇを500ml容
三角フラスコに取り、40℃で48時間振盪反応しテ
トラグリセリンオレートを調製した。この反応液
のエステル合成率は95％であつた。以後、実施例
２と同様に行いテトラグリセリンオレート9.5ｇ
を得た。このテトラグリセリンオレートの酸価は
４であつた。 実施例 25 テトラグリセリン5.5ｇ（17.6ミリモル）、ステ
アリン酸５ｇ（17.6ミリモル）、第３級ブチルア
ルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス4A5ｇを500ml容三角フラスコ
に取り、50℃で48時間振盪反応しテトラグリセリ
ンステアレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は97％であつた。以後、実施例２と同様
に行いテトラグリセリンステアレート9.7ｇを得
た。このテイラグリセリンステアレートの酸価は
３であつた。 実施例 26 テトラグリセリン5.5ｇ（17.7ミリモル）、パル
ミチン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）、第３級アミルア
ルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス3A5ｇを300ml容三角フラスコ
に入れ、40℃で48時間振盪反応しテトラグリセリ
ンパルミテートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は98％であつた。以後、実施例２と同様
に行いテトラグリセリンパルミテート9.1ｇを得
た。このテトラグリセリンパルミテートの酸価は
２であつた。 また、パルミチン酸4.5ｇの代りに、ラウリン
酸3.5ｇを用いて上記と同様に行いテトラグリセ
リンラウレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は90％で、得られたテトラグリセリンラ
ウレートの収量は8.0ｇ、酸価は10であつた。 実施例 27 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、オレ
イン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアル
コール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキ
ユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに
取り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセリン
オレートを調製した。この反応液のエステル合成
率は96％であつた。以後、実施例２と同様に行い
ヘキサグリセリンオレート12ｇを得た。このへキ
サグリセリンオレートの酸価は３であつた。 また、ヘキサグリセリン8.2ｇの代りに、デカ
グリセリン13.4ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記
と同様に行いデカグリセリンオレートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は95％で、得ら
れたデカグリセリンオレートの収量は16ｇ、酸価
は２であつた。 上記のように調製したヘキサグリセリンオレー
ト（サンプル１）とデカグリセリンオレート（サ
ンプル２）の２％クロロホルム溶液１mlをクロマ
ロツトSIIにスポツトし、ベンゼン−クロロホル
ム−メタノール−アンモニア（80：40：10：
1V／Ｖ）を展開溶媒として展開し、イアトロス
キヤンで分析した。なお、標準物質として、SY
グリスターMO500（ヘキサグリセリンモノオレー
ト、阪本薬品工業製）、SYグリスターPO500（ヘ
キサグリセリンペンタオレート、阪本薬品工業
製）、SYグリスターMO750（デカグリセリンモノ
オレート、阪本薬品工業製）、およびSYグリスタ
ーDAO750（デカグリセリンデカオレート、阪本
薬品工業製）を用いた。その結果を第１図に示
す。 第１図から、上記のヘキサグリセリンオレート
（サンプル１）およびデカグリセリンオレート
（サンプル２）は、その分析パターンが、市販の
ポリグリセリンモノオレートの分析パターンと類
似しているので、主としてモノエステルからなる
ものと思われる。 実施例 28 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、オレ
イン酸５ｇ（17.7ミリモル）、ジアセトンアルコ
ール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキユ
ラーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに取
り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセリンオ
レートを調製した。この反応液のエステル合成率
は91％であつた。以後、実施例２と同様に行いヘ
キサグリセリンオレート12.1ｇを得た。このヘキ
サグリセリンオレートの酸価は７であつた。 また、ジアセトンアルコール50mlの代りに、
２，４−ジメチル−３−ペンタノール50mlを用い
て上記と同様に行いヘキサグリセリンオレートを
調製した。この反応液のエステル合成率は80％
で、得られたヘキサグリセリンオレートの収量は
12ｇ、酸価は15であつた。 さらに、ジアセトンアルコール50mlの代りに、
ｎ−ヘプタン50mlを用いて上記と同様に行いヘキ
サグリセリンオレートを調製した。この反応液の
エステル合成率は80％で、得られたヘキサグリセ
リンオレートの収量は12ｇ、酸価は15であつた。 実施例 29 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、オレ
イン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアル
コール50ml、リパーゼ−PL266粉末３ｇ、モレキ
ユラーシーブス3A10ｇを500ml容三角フラスコに
取り、40℃で96時間振盪反応しヘキサグリセリン
オレートを調製した。この反応液のエステル合成
率は91％であつた。以後、実施例２と同様に行い
ヘキサグリセリンオレート11.5ｇを得た。このヘ
キサグリセリンオレートの酸価は７であつた。 また、リパーゼ−PL266粉末３ｇの代りに、リ
パーゼ−AL粉末３ｇを用いて上記と同様に行い
ヘキサグリセリンオレートを調製した。この反応
液のエステル合成率は93％で、得られたヘキサグ
リセリンオレートの収量は11.3ｇ、酸価は６であ
つた。 実施例 30 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、ステ
アリン酸5.1ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルア
ルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス5A5ｇを500ml容三角フラスコ
に取り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセリ
ンステアレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は98％であつた。以後、実施例２と同様
に行いヘキサグリセリンステアレート11.7ｇを得
た。このヘキサグリセリンステアレートの酸価は
１であつた。 また、ステアリン酸5.1ｇの代りに、パルミチ
ン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いヘキサグリセリンパルミテートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は98％で、得ら
れたヘキサグリセリンパルミテートの収量は8.5
ｇ、酸価は１であつた。 さらに、ステアリン酸5.1ｇの代りに、ラウリ
ン酸3.5ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いヘキサグリセリンラウレートを調製した。
この反応液のエステル合成率は90％で、得られた
ヘキサグリセリンラウレートの収量は10.3ｇ、酸
価は９であつた。 実施例 31 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、リシ
ノレイン酸5.3ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モ
レキユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラス
コに取り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセ
リンリシノレートを調製した。この反応液のエス
テル合成率は85％であつた。以後、実施例２と同
様に行いヘキサグリセリンリシノレート11.5ｇを
得た。このヘキサグリセリンリシノレートの酸価
は10であつた。 また、リシノレイン酸5.3ｇの代りに、カプロ
ン酸2.05ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いヘキサグリセリンカプロネートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は83％で、得ら
れたヘキサグリセリンカプロネートの収量は8.7
ｇ、酸価は14であつた。 さらに、リシノレイン酸5.3ｇの代りに、ケイ
皮酸2.6ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いヘキサグリセリンシンナメートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は20％で、得ら
れたヘキサグリセリンシンナメートの収量は9.1
ｇであつた。 実施例 32 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、セバ
シン酸3.6ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルアル
コール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレキ
ユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコに
取り、40℃で48時間振盪反応しヘキサグリセリン
セバシネートを調製した。この反応液のエステル
合成率は50％であつた。以後、実施例２と同様に
行いヘキサグリセリンセバシネート10.7ｇを得
た。 実施例 33 ヘキサグリセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）、メチ
ルオレート5.2ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末２ｇ、モ
レキユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラス
コに取り、40℃で72時間振盪反応しヘキサグリセ
リンオレートを調製した。以後、実施例２と同様
に行いヘキサグリセリンオレート12.4ｇを得た。 このヘキサグリセリンオレートの成分組成比を
イアトロスキヤンにより調べると、ヘキサグリセ
リンモノオレート80％、メチルオレート20％であ
つた。 実施例 34 デカグリセリン13.4ｇ（17.7ミリモル）、ステ
アリン酸5.1ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチルア
ルコール50ml、リパーゼ−PL679粉末１ｇ、モレ
キユラーシーブス3A5ｇを500ml容三角フラスコ
に取り、40℃で48時間振盪反応しデカグリセリン
ステアレートを調製した。この反応液のエステル
合成率は95％であつた。以後、実施例２と同様に
行いデカグリセリンステアレート17.5ｇを得た。
このデカグリセリンステアレートの酸価は３であ
つた。 また、ステアリン酸5.1ｇの代りに、パルミチ
ン酸4.5ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いデカグリセリンパルミテートを調製した。
この反応液のエステル合成率は97％で、得られた
デカグリセリンパルミテートの収量は17ｇ、酸価
は２であつた。 さらに、ステアリン酸5.1ｇの代りに、ラウリ
ン酸3.5ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と同様
に行いデカグリセリンラウレートを調製した。こ
の反応液のエステル合成率は91％で、得られたデ
カグリセリンラウレートの収量は15.0ｇ、酸価は
７であつた。 実施例 35 リパーゼ−PL679粉末10ｇを200ml容ビーカー
に取り、水100mlを加え溶解した後、ベントナイ
ト10ｇを加え室温で30分間攪拌してベントナイト
にリパーゼ−PL679を吸着させた。5000ｇで５分
間遠心分離してベントナイトを回収し、これにア
セトン100mlを加え攪拌して懸濁させた後、再び
遠心分離にてベントナイトを回収した。以後、こ
の操作を２回繰り返して脱水した後、減圧乾燥
し、ベントナイト吸着固定化リパーゼPL−679を
調製した。 このベントナイト吸着回定化リパーゼ−
PL6791ｇ、グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、
オレイン酸５ｇ（17.7ミリモル）、第３級ブチル
アルコール50ml、モレキユラーシーブス3A5ｇを
500ml容三角フラスコに取り、40℃で48時間振盪
反応しグリセリンオレートを調製した。この反応
液のエステル合成率は95％であつた。以後、実施
例２と同様に行いグリセリンオレート5.9ｇを得
た。このグリセリンオレートの酸価は８であつ
た。 また、グリセリン1.63ｇの代りに、プロピレン
グリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）を用い上記と
同様に行いプロピレングリコールオレートを調製
した。この反応液のエステル合成率は93％で、得
られたプロピレングリコールオレートの収量は
5.7ｇ、酸価は10であつた。 さらに、グリセリン1.63ｇの代りに、ヘキサグ
リセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と
同様に行いヘキサグリセリンオレートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は96％で、得ら
れたヘキサグリセリンオレートの収量は12.1ｇ、
酸価は３であつた。 実施例 36 グリセリン1.63ｇ（17.7ミリモル）、オレイン
酸５ｇ（17.7ミリモル）、モレキユラーシーブス
3A5ｇ、リパーゼ−PL679粉末１ｇを100ml容三
角フラスコに取り、40℃で48時間振盪反応しグリ
セリンオレートを調製した。この反応液のエステ
ル合成率は95％であつた。反応後、第３級ブチル
アルコール50mlを加え、以後、実施例２と同様に
行いグリセリンオレートを5.7ｇ得た。このグリ
セリンオレートの酸価は９であつた。 また、グリセリン1.63ｇの代りに、プロピレン
グリコール1.35ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記
と同様に行いプロピレングリコールオレートを調
製した。この反応液のエステル合成率は96％で、
得られたプロピレングリコールオレートの収量は
5.3ｇ、酸価は７であつた。 さらに、グリセリン1.63ｇの代りに、ヘキサグ
リセリン8.2ｇ（17.7ミリモル）を用いて上記と
同様に行いヘキサグリセリンオレートを調製し
た。この反応液のエステル合成率は81％で、得ら
れたヘキサグリセリンオレートの収量は12.1ｇ、
酸価は13であつた。
第１図は実施例27の生成物をイアトロスキヤン
で分析し標準物質と比較した結果を示す図であ
る。
で分析し標準物質と比較した結果を示す図であ
る。
Claims (1)
- １ プロピレングリコール、グリセリン、ポリグ
リセリンより選ばれるポリアルコールと、炭素数
C2〜C22の飽和もしくは不飽和の脂肪酸（ここで
脂肪酸は置換基として水酸基、カルボキシル基、
フエニル基を有していてもよい）またはC1〜C3
の低級アルコールとエステルを形成している上記
脂肪酸との混合物に、実質的に水を加えることな
く、有機溶媒（但し、第１級アルコール溶媒を除
く）の存在下もしくは不存在下に、反応系の含水
率を0.1重量％以下となるように脱水しながら微
生物アルカリ性リパーゼを作用させることを特徴
とするポリアルコール脂肪酸エステルの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9663285A JPS61257191A (ja) | 1985-05-09 | 1985-05-09 | ポリアルコ−ル脂肪酸エステルの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9663285A JPS61257191A (ja) | 1985-05-09 | 1985-05-09 | ポリアルコ−ル脂肪酸エステルの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61257191A JPS61257191A (ja) | 1986-11-14 |
| JPH0552191B2 true JPH0552191B2 (ja) | 1993-08-04 |
Family
ID=14170209
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9663285A Granted JPS61257191A (ja) | 1985-05-09 | 1985-05-09 | ポリアルコ−ル脂肪酸エステルの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61257191A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20160100733A (ko) * | 2015-02-16 | 2016-08-24 | 한국원자력연구원 | 할바흐 배열을 이용한 입자빔의 스캐닝장치 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| AU766539B2 (en) * | 2001-04-20 | 2003-10-16 | Evonik Goldschmidt Gmbh | Compositions for controlling microorganisms, comprising an effective content of enzymatically prepared esters of polyglycerol |
| AU766418B2 (en) * | 2001-04-20 | 2003-10-16 | Goldschmidt Gmbh | Compositions for controlling microorganisms, comprising primary and secondary esters of polyglycerol in an effective ratio |
| JP2009183210A (ja) * | 2008-02-06 | 2009-08-20 | Taiyo Corp | グリセリンリシノール酸モノエステル及びポリグリセリンリシノール酸モノエステルの製造方法 |
| CN102094050B (zh) | 2009-12-14 | 2012-07-25 | 深圳波顿香料有限公司 | 一种十六酸丙二醇酯的制造方法 |
| JP2012144489A (ja) * | 2011-01-13 | 2012-08-02 | Daicel Corp | 桂皮酸ポリグリセリンエステル誘導体、紫外線吸収剤及び皮膚外用剤 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JPS4932080A (ja) * | 1972-07-25 | 1974-03-23 | ||
| JPS6015312B2 (ja) * | 1976-11-05 | 1985-04-18 | 名糖産業株式会社 | 新規なリパ−ゼの製造法 |
| DE3108927A1 (de) * | 1981-03-10 | 1982-09-23 | Haarmann & Reimer Gmbh, 3450 Holzminden | Verfahren zur enzymatischen herstellung von estern und laktonen |
| JPS6058086A (ja) * | 1983-09-09 | 1985-04-04 | Nitto Electric Ind Co Ltd | エステル類の製造方法 |
-
1985
- 1985-05-09 JP JP9663285A patent/JPS61257191A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20160100733A (ko) * | 2015-02-16 | 2016-08-24 | 한국원자력연구원 | 할바흐 배열을 이용한 입자빔의 스캐닝장치 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS61257191A (ja) | 1986-11-14 |
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