JPH0555105B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 技術分野 本発明は、血液中の細菌を分離した培養するの
に使用される新規な血中細菌分離培養器に関する
ものである。

敗血症や菌血症等重篤な全身感染症においては
患者の血液中に細菌が存在しているのでこれら感
染症の診断には血液の細菌検査が行われる。また
抗菌剤の動物試験による薬効判定においても血液
の細菌検査が行われる。これらの細菌検査には先
ず検体血液から細菌を培養および分離することが
必要であり、次いで薬剤感受性試験や菌の同定等
が行われる。本発明の器具はこのような細菌検査
の際の検体処理に使用される。

（先行技術および問題点） 従来、血中細菌の培養および分離は、採取した
血液を液体栄養培地と混合して培地増殖した菌で
濁るまで培養し、次に増殖した菌を血液寒天平
板、チヨコレート寒天平板等の培地に移植してさ
らに培養することによつて行われている。

このように従来法において血液から少ない細菌
を直接分離して培養することが困難であり、コロ
ニーを育成する前処理として増菌培養という付加
的操作で菌数を増すことを必要とするため繁雑な
操作と長時間を要している。特に上記のような液
体中での増菌培養は一般に長時間を要する。また
血液はそれ自体菌の増殖を抑制する作用を有し、
抗菌剤が投与されている場合には血液中での菌の
増殖は一層困難であり、検体中の細菌数が少ない
場合には検出不可能な場合もある。さらに、菌を
増殖培地から分離培地へ移植する際、検査菌が環
境を汚染したりあるいは雑菌が検査面に混入した
りして検査精度を低下させるおそれがある。

発明の目的 そこで本発明者等は鋭意研究を重ねた結果、細
菌混入血液をすくなくとも溶血剤および抗血液凝
固剤からなる溶液あるいは溶血剤、抗血液凝固剤
および液体培地からなる溶液と混合し、前記混合
物を細菌を通さない大きさの孔を有するフイルタ
と前記フイルタの裏面に接着された吸水体あるい
は液体培地を含浸乾燥させた吸水体とを前記フイ
ルタを上にして容器に収容してなる過培養器で
過し、過されたフイルタ上の細菌をそのまま
培養することにより血中細菌を分離培養する方法
を開発した。

この培養法によれば、血中細菌を増菌培養する
等の前処理操作を必要とせず直接血液中の細菌を
集め、他の培地に移植することなくそのまま培養
することが可能である。而してこの培養法におい
ては、採血した血液を溶血剤および抗血液凝固剤
からなる溶液あるいは溶血剤、抗凝固剤および液
体培地からなる溶液と十分に混和する操作が必須
であり、この操作は、検査菌による環境汚染およ
び検体の汚染を防止するため、密閉容器中で行う
ことが要求される。

従つて発明の目的は、血液をすくなくとも溶血
剤および抗血液凝固剤からなる溶液あるいは溶血
剤、抗凝固剤および液体培地からなる溶液を密閉
系で混和することを可能とする器具を提供するこ
とにある。

しかして上記の目的は以下に示す本発明の血中
細菌分離培養器によつて達成される。

(1)(イ) すくなくとも溶血剤および抗血液凝固剤を
含む溶液を収容し、かつ血液収容空間を有す
る容器と前記容器開口部に着脱可能でかつ密
封可能に嵌挿された弾性を有するゴム栓体と
からなり滅菌処理されている血液処理器と、 (ロ) 細菌を通さない大きさの孔を有するフイル
タとフイルタの裏面に接着された吸水体とを
フイルタ側を上にして収容した容器本体と、
容器本体の開口部を着脱自在に被う蓋とから
なる過培養器 とからなる血中細菌分離培養器。

(2) 血液処理器に収容された溶液が培地を含んで
いることを特徴とする第１項記載の血中細菌分
離培養器。

(3) 血液処理器の血液収容空間が減圧されている
第１項または第２項記載の血中細菌分離培養
器。

(4) 血液処理器の容器が筒状体と、前記筒状体の
内壁を液密に摺動できるように配置した押子とか
らなる第１項または第２項記載の血中細菌分離培
養器。

上記の構造を有する本発明の血中細菌分離培養
器を使用することにより、血液は、溶血剤および
抗血液凝固剤からなる溶液あるいは、溶血剤、抗
血液凝固剤および液体培地からなる溶液と密閉系
で十分混和することができ、血液中の細菌が環境
を汚染したり、外部の雑菌が血液検体中に混入し
たりするおそれなしに血中細菌を分離培養するこ
とができる。

発明の具体的説明 以下本発明の構成を図面に示す実施例に基づい
て詳細に説明する。

第１図に本発明の血液処理器の一実施例を示
す。この血液処理器はすくなくとも溶血剤および
抗血液凝固剤の混合溶液２を収容した容器１と前
記容器１の開口部に着脱可能でかつ密封可能に嵌
着されたゴム栓３とからなり容器１の内部は減圧
に保たれている。この血液処理器を用いて血液を
処理するには、採血した注射器（図示省略）の針
をゴム栓３を貫通するように突き刺し、容器１内
の減圧を利用して血液を容器１内に導入し、血液
導入完了後針を抜き、容器を転倒させて血液を容
器内の溶液と混和させる。溶血剤としてはサポニ
ンが好適に使用され、抗血液凝固剤としてはアミ
ロ硫酸ナトリウム、ポリアネトール硫酸ナトリウ
ム等が好適に使用される。これらの混合溶液には
所望よ液体培地を混合することもできる。この場
合には次の操作で使用する分離培養器の吸水体に
培地を含浸させる必要がない。また、菌の増殖が
早くなる。

第２図は本発明の血液処理器の他の実施例を示
す。この血液処理器は筒状体４と該筒状体の内壁
を液密に摺動できるように配置した押子５からな
り、筒状体４の開口部にはゴム栓３が着脱可能で
かつ密封可能に嵌着され、筒状体４と押子５で形
成される空間に先の実施例と同様の溶血剤および
抗血液凝固剤からなる混合液２が収容されてい
る。この混合液も液体培地が混合してあつてもよ
い。この血液処理器を用いて血液を処理するに
は、採血した注射器の針をゴム栓３を貫通するよ
うに突き刺し、注射器で血液を圧入すると血液処
理器の押子５が下方へ摺動しながら血液が容器内
に導入される。血液の導入完了後、容器を転倒し
血液を溶血剤および抗血液凝固剤と十分混和す
る。これら血液処理器は検体血液に雑菌が混入す
るのを防ぐために、γ線照射またはオートクレー
プにより滅菌されている。

本発明の血液処理器で血液を処理することによ
り赤血球の破壊と血液凝固の防止が行われる。こ
れらの操作は、次の血液過操作および血液細菌
の培養を行うために不可欠である。また、液体培
地が混入されている場合には培養液との混合処理
も同時にできる。

本発明の血液処理器で血液を処理した後ゴム栓
をはずし、次に示す過培養器のフイルタ上に検
体血液を注ぐ。過培養器は第３図に示す如く、
細菌を通さない大きさの孔を有するフイルタ６と
フイルタ６の裏面に接着された吸水体７とをフイ
ルタ６側を上にして収容した容器本体８と容器本
体８の開口部をを着脱自在に被う蓋９とからな
る。容器本体８はフイルタ６、容器本体側壁１０
および蓋９により画成される空間１１ならびに吸
水体７、容器本体側壁１０および容器本体底１２
により画成される空間１３を有し、吸水体７より
下方に通気孔１４が設けられている。

フイルタ６は血中細菌を過するためのもので
あつて細菌を通さない大きさの孔を有する。フイ
ルタ６の孔の大きさは0.75ミクロン以下好ましく
0.45ミクロン程度である。フイルタ６の材質は血
液に対して不活性であれば特に制限はないが、代
表例としてニトロセルロース、ポリカーボネー
ト、ポリアミド、セルロースエステルなどをあげ
ることができ、市販のものとしてはミリポア（ミ
リポラコーポレーシヨン製品）、メトリセル（ゲ
ルマンインストルメントカンパニー製品）などが
あげられる。フイルタ６は血液がなじみやすいよ
うにそれ自体公知の方法によつて親水処理されて
いるのが望ましい。

吸水体７は、フイルタ６で過された過血液
を吸収保持し、フイルタ６上に捕捉された細菌に
栄養を提供するためのものである。吸水体７は
液をほぼ全量吸収する能力をもつことが望まし
い。その材質としてはセルロース系の紙、不織
布等が適当である。吸水体７はフイルタ６の裏面
に接着剤等により密に密着固定されていることが
必要であり、密着度が不十分な場合は過が円滑
に行われず、また過後吸水体７からフイルタ６
上の細菌への栄養補給が十分行われない。

使用される接着剤としては過を阻害しない低
融点重合体繊維による熱シールが好適である。吸
水体７には所望により液体培地を含浸乾燥させて
おくこともできる。この場合には乾燥培地は吸水
体７に吸収保持される液に溶解し、フイルタ６
上の細菌に栄養と水分や提供する。一体化された
フイルタ６と吸水体７は容器本体壁１０に対し〓
間なく嵌めこまれ固定されており、検体血液がフ
イルタ６を透過せずに漏れ落ちるのを防いてい
る。フイルタ６および吸水体７の容器本体壁への
固定には接着剤を用いるかまたは図に示すように
かしめ具１５により圧着する。この場合には容器
本体８の側壁１０部分に段部Ｓを形成し、この段
部Ｓに一体化されたフイルタ６と吸水体７を載置
してからかしめ具１５を圧入すればよい。フイル
タ６の上方の空間１１は検体血液を貯留するため
のものであり、吸水体７の下方の空間１３は吸水
体７に吸収しきれなかつた液を受けるためのも
のである。通気口１４は液により圧迫された空
間１３内の空気を排出するためのものであり、容
器本体壁１０または容器本体底１２に大気と連通
するように設けられる。この通気口１４の存在に
より検体血液全量が速やかに自然過される。通
気口１４には雑菌の侵入を防止するために細菌フ
イルタ１６、例えば棉栓を嵌着するのが望まし
い。通気口１４が容器本体底部１２に設けられる
ときは、貯留する液が通気口１４から流出する
ののを防ぐため通気口１４のまわりに障壁１７が
設けられる。また容器本体底部１２全体に障壁を
同心円状に設け、液が通気口１４の周辺に集ま
るのを防止するのが望ましい。

以上の構成を有する過培養器はγ線照射また
はエチレンオキサイドガスによる滅菌処理を行い
検査の信頼性を向上させる。

このように構成される過培養器の形状は特に
限定されないが、一般に円形にするのが望まし
い。そのサイズも特に限定されることはないが例
えば検体として血液２mlを使用する場合、これに
適合させるためには容器本体の直径約60mm定程度
にするのがよい。

かくして本発明の血液処理器で処理された血液
検体を上記の過培養器のフイルタ６上に注ぎ蓋
９で開放口を被う。血液は自重で自然過され
る。血中細菌はフイルタ６上に残り、血液はフイ
ルタ６を透過して吸水体７に吸収され、飽和量以
上の血液は滴下して容器本体底部１２に溜まる。
により圧迫された空気は通気口１４から排出さ
れるので、過は検体血液の自重で円滑に行われ
る。過終了後、該過培養器を恒温に保持する
ことによりフイルタ６上に細菌のコロニーが形成
される。該コロニーから細菌を採取して細菌の同
定、薬剤感受性試験等の細菌検査が行われる。尚
吸水体７に液体培地が含浸乾燥させてある場合に
は、血液の処理操作において、液体培地を加える
ことは不要となる。

発明の具体的作用効果 本発明の血中細菌分離培養器によれば血液検体
を密封状態で溶血・抗凝固処理することができ
る。従つて血中細菌による環境汚染を防止するこ
とができ、また、検体中に外部から雑菌が混入す
るのを防止できるので検査の信頼度を高めること
ができる。さらに、本発明の血中細菌分離培養器
を使用することにより、溶血および抗凝固さらに
培地との混合操作が簡素化されるとともに処理後
の培養器への移植に伴う検査菌による環境染およ
び検査菌への雑菌の混入も最小限となる。さら
に、本発明の血中細菌分離培養器を使用すること
により、採取された検体血液中全細菌が、そのま
ま分離培養されるので細菌の検出率が高く、検体
中の菌数を測定することも可能である。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の血液処理器の一実施例を示す
断面図であり、第２図は他の実施例の断面図であ
る。第３図は、本発明の過培養器の断面図であ
る。 １…容器、２…溶血剤および抗凝固剤の混合溶
液、３…ゴム栓、４…筒状体、５…押子、６…フ
イルタ、７…吸水体、８…容器本体、９…蓋、１
４…通気口。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ (イ) すくなくとも溶血剤および抗血液凝固剤
   を含む溶液を収容し、かつ血液収容空間を有す
   る容器と前記容器開口部に着脱可能でかつ密封
   可能に嵌挿された弾性を有するゴム栓体とを有
   し滅菌処理されている血液処理器と、 (ロ) 細菌を通さない大きさの孔を有するフイルタ
   とフイルタの裏面に接着された吸水体とをフイ
   ルタ側を上にして収容した容器本体と、容器本
   体の開口部を着脱自在に被う蓋とからなる過
   培養器 とからなる血中細菌分離培養器。 ２ 血液処理器に収容された溶液が培地を含んで
   いることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載
   の血中細菌分離培養器。 ３ 血液処理器の血液収容空間が減圧されている
   特許請求の範囲第１項または第２項記載の血中細
   菌分離培養器。 ４ 血液処理器の容器が筒状体と、前記筒状体の
   内壁を液密に摺動できるように配置した押子とか
   らなる特許請求の範囲第１項または第２項記載の
   血中細菌分離培養器。