JPH0565491B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

［産業上の利用分野］ 本発明は抗癌活性物質に関し、詳しくはワカメ
の胞子葉（芽株）の水抽出液に有機溶媒を加えて
生じた沈澱物を有効成分とする抗癌活性物質に関
する。 ［従来の技術、発明が解決しようとする課題］ 抗癌活性を有する物質はこれまでに数多く知ら
れており、その中には植物由来の多糖体も含まれ
ている。ところが、これらは製造工程が複雑で収
量が少ない、抗癌活性が低い、副作用があ等の問
題点があり、未だ十分に満足しうるものが得られ
ていない。従来、採集されたワカメは葉の部分の
みが食用として利用され、芽株の部分は廃棄され
ていた。 ［課題を解決するための手段］ そこで、本発明者等は植物体から抗癌活性物質
を見出すべく検討を重ね、上記ワカメの芽株は胞
子を多量に包含しており、この部分に抗癌活性物
質が存在するものと着眼し、研究した結果、ワカ
メの胞子葉（芽株）から得られる多糖体が抗癌活
性を有していることを見出し、かかる知見に基い
て本発明を完成した。 すなわち、本発明はワカメの胞子葉に水を加え
て抽出して得たエキスにメタノールまたはエタノ
ールを加えて生じた沈澱物を有効成分とする抗癌
活性物質を提供するものである。 抗癌活性物質である上記沈澱物はワカメの胞子
葉から例えば以下の方法によつて得ることができ
る。 ワカメの胞子葉を水に数時間乃至数十時間浸漬
して抽出液（エキス）を得、必要に応じ該エキス
を常法により粉末化する。エキスもしくは該エキ
ス粉末を蒸留水に溶解させ、遠心分離等の固液分
離を行つて得た上澄液にメタノールまたはエタノ
ールを加えると、直ちに白色糸状の沈澱物が生ず
る。次いで、この沈澱物を遠心分離等の固液分離
を行い上澄液と分離する。沈澱物はそのまま抗癌
活性物質として使用することも可能であるが、望
ましくは蒸留水に溶かしたのち再びメタノールま
たはエタノールを加え、低温にて所定時間放置
後、固液分離を行つて沈澱物を回収し、保温器等
により乾燥させる。 ワカメ胞子葉の水抽出には冷水から熱水まで使
用でき、水抽出によつて得られるエキスの主成分
は多糖体（約80％）であり、その他にタンパク質
（約７％）、脂質（約２％）やビタミン類（Ａ，
B₁，B₂，B₆），ミネラルを含んでいる。多糖体の
精製のために用いるメタノールまたはエタノール
の使用量は特に制限はないが、エキスと等量程度
が適当である。 メタノールまたはエタノールによつて部分精製
された多糖体は水溶性であり、分析試験の結果、
フコイジン0.05％，ウロン酸0.13％を含有してい
た。なお、フコイジンは1N硫酸で沸騰浴中2.5時
間加水分解後Gibbons法によりフコースを測定
し、その値に0.9を乗じたものであり、ウロン酸
はカルバゾール硫酸法によりグルクロン酸として
算出した。また、この多糖体はアンスロン・硫酸
法による糖質の安定試験は陽性であり、その赤外
線吸収スペクトルは第１図に示したとおりであ
る。本発明に係る多糖体は大喰細胞（マクロフア
ージ）を活性化する作用があり、ルイス肺癌や
AKR Ｔ−細胞性白血病等に対する抗癌活性を有
している。また、この抗癌活性は耐熱性であり、
多糖体水溶液を100℃まで加熱しても効力に変化
が認められない。さらに、多糖体の細胞毒性は試
験管内で260μg／mlの高濃度でも認められない。 ［実施例］ 次に、本発明を実施例により説明するが、本発
明はこれによつて制限されるものではない。 製造例 ワカメ胞子葉を約２〜10℃の温度の水中に浸漬
したのち抽出液を噴霧乾燥して得た粉末２ｇを蒸
留水50mlに溶解し、室温で撹拌後、遠心分離
（10000rpm，20分間）を行つて上澄液を得た。 この上澄液に95％エタノール50mlを加え、生じ
た白色糸状の沈澱物を遠心分離（10000rpm，30
分間）にて上澄液と分離した。この沈澱物（乾燥
重量として約0.26ｇ）を蒸留水25mlに溶解後、さ
らに95％エタノール25mlを加え、４℃で20時間放
置した。しかる後、遠心分離（10000rpm，30分
間）を行い上澄液と沈澱物に分離した。得られた
沈澱物を37℃の保温器中で２日間乾燥し、乾燥重
量として約0.2ｇの沈澱物（多糖体）を得た。 実施例 １ 米国国立癌研究所から入手し、発明者らによつ
て同種同系のマウス（C57BL／６系）により継
代保持されたルイス肺癌（固形癌）を10mlの
Hanks液内で細断し、No.80のスクリーンとNo.21
の注射針を通して細胞浮遊液を作つた。 該浮遊液0.2ml（２〜４×10⁵個の癌細胞）を同
種同系C57BL／６または同種異系DBA／２マウ
ス（平均体重20ｇ）の腹腔内に注入移植した。 癌細胞を移植した翌日より所定量の薬剤を毎日
もしくは１日置きに合計10回もしくは６回マウス
腹腔内に注入して平均生存日数，生存マウス数お
よび延命率を測定した。結果を標準の化学的免疫
強化剤の結果と共に第１表に示す。

【表】

【表】 実施例 ２ 実施例１において、マウスの腹腔内に癌細胞を
注入移植後に所定の薬剤を投与する代りに、癌細
胞を注入移植するに先立ち所定の薬剤を予めマウ
ス腹腔内に注入したこと以外は実施例１と同様に
行つた。結果を第２表に示す。

【表】 実施例 ３ 実施例１と同様にして同種同系マウス
C57BL／６，同種異系マウスDBA／２および
BALB／ｃの腹腔内にルイス肺癌細胞を注入移
植したのち、制癌剤シクロホスフアミドと共に本
発明の多糖体または標準の免疫強化剤を投与し、
免疫力の抑制されたマウス内におけるルイス肺癌
に対する多糖体の抗癌効果を調べた。すなわち、
シクロホスフアミドを減量して投与すると全く制
癌効果が無く、逆にルイス肺癌の増進を促進する
が、このような免疫力の抑制された状態で本発明
の多糖体を投与したところ、シクロホスフアミド
による癌増殖促進作用が抑制され、抗癌効果を有
することが確認された。しかし、イソプリノシン
には抗癌効果が認められなかつた。 実施例 ４ 実施例３において、シクロホスフアミドの代り
にマクロフアージに対し選択的に毒性を示す２−
クロロアデノシンを投与し、本発明の多糖体の抗
癌効果が影響を受けるか否か試験した。その結
果、２−クロロアデノシンの投与によつてマクロ
フアージの癌細胞殺傷力を消しておくと、本発明
の多糖体は最早や抗癌効果を示さなかつた。同様
に、イソプリノシンも抗癌効果を示さなかつた。 上記の結果より、本発明の多糖体やイソプリノ
シンは抗癌作用発揮のためには、宿主の正常な機
能を有するマクロフアージを必要とすることが判
明した。 実施例 ５ 臓機移植後に使用される強力な拒否反応抑制剤
として知られるサイクロスポリンはAKR Ｔ−細
胞性白血病の自然発生時期を早める作用を有して
いる。 ところが、サイクロスポリンと共に本発明の多
糖体を投力すると、サイクロスポリンの白血病促
進作用を打ち消す効果が認められた。一方、イソ
プリノシン，無水マレイン酸ジビニルエーテル共
重合体，レバミゾール，タイロロン等の免疫強化
剤はサイクロスポリンの作用を打ち消すことが出
来なかつた。このことから、本発明の多糖体のみ
が特異的にサイクロスポリンと拮抗してその発癌
作用を抑制することが明らかとなつた。 ［発明の効果］ 本発明の抗癌活性物質は宿主、マクロフアージ
を活性化して免疫力を増強し、ルイス肺癌，
AKR Ｔ−細胞性白血病等に対する抗癌作用を発
揮する。しかも、正常組織を破壊する等の副作用
がない。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明に係る多糖体（沈澱物−２）の
赤外線吸収スペクトル（KBr錠剤法）である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ ワカメの胞子葉（芽株）に水を加えて抽出し
   て得たエキスにメタノールまたはエタノールを加
   えて生じた沈澱物を有効成分とする抗癌活性物
   質。 ２ 抗癌活性物質が、宿主、マクロフアージを活
   性化して免疫力を増強し、ルイス肺癌やAKR Ｔ
   −細胞性白血病に対する抗癌活性を有するもので
   ある請求項１記載の抗癌活性物質。