JPH0586196B2 - - Google Patents
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- JPH0586196B2 JPH0586196B2 JP9803386A JP9803386A JPH0586196B2 JP H0586196 B2 JPH0586196 B2 JP H0586196B2 JP 9803386 A JP9803386 A JP 9803386A JP 9803386 A JP9803386 A JP 9803386A JP H0586196 B2 JPH0586196 B2 JP H0586196B2
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
．発明の背景
技術分野
本発明は微生物の硝酸塩還元能検査用培地組成
物に関する。 さらに詳しくは本発明はグルコース非発酵性グ
ラム陰性桿菌の硝酸塩還元能検査用培地組成物に
関するものである。 細菌感染症に対して適切な治療を施すためには
病原菌を同定し、感受性試験を行い、その病原菌
に有効な薬剤を決定することが重要である。この
ような病原菌の同定に際しては多項目にわたる生
化学的性状検査が行われ、その項目の１つとして
グルコース非発酵性グラム陰性桿菌について硝酸
塩還元能の検査が行われる。これは、上記菌が有
する硝酸塩還元能を利用し、菌の同定を行うもの
である。本発明の培地組成物はこのような試験に
好適に使用される。 先行技術およびその問題点 硝酸塩還元反応は培地中の硝酸塩を還元して亜
硝酸塩にする反応であり、従来下記の組成を有す
る硝酸塩ブイヨン培地が用いられている。 硝酸塩ブイヨン培地 肉 エ キ ス 3g ペ プ ト ン 5g 硝酸カリウム 1g 蒸 留 水 1000ml PH6.8 検査に際しては上記硝酸塩ブイヨン培地に検査
菌を接種し、30℃で20〜48時間培養する。 検査菌の硝酸塩還元能の有無は培養液に、スル
フアニル酸およびα−ナフチルアミンを添加し、
亜硝酸塩が存在すれば生成される赤色物質パラ−
スルホベンゼン−アゾ−α−ナフチルアミンを検
出することによつて判定される。 上記従来培地によれば、短時間の培養では判定
の信頼性が低く、正確な判定のためには長時間の
培養を必要とする。 細菌感染症の早期治療のためには、菌の同定は
できるだけ速やかに行うことが必要であり、より
短かい時間で菌の同定が可能な培地の出現が望ま
れていた。しかし、一方においては、検査作業の
都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない場合も
生じ、このような場合には培養期間が厳格に規制
されておらず、都合により培養時間を延長しても
反応過剰になつたりせず、正確な判定が可能な培
地が望ましい。 ．発明の目的 本発明は短時間の培養で同定が可能であるとと
もに長時間培養しても正確な同定が可能であるグ
ルコース非発酵性グラム陰性桿菌の硝酸塩還元能
の検査用培地組成物を提供することを目的とす
る。 かかる目的を達成するため、本発明は硝酸カリ
ウム1.0部（重量部、以下同じ）に対し、ペプト
ン3.125〜50部、酵母エキス0.625〜10部およびリ
ン酸一水素二アルカリ金属塩0.313〜５部の組成
よりなるグルコース非発酵性グラム陰性桿菌の硝
酸塩還元能検査用培地組成物からなる。 さらに本発明はリン酸一水素二アルカリ金属塩
がリン酸一水素二ナトリウム塩である硝酸塩還元
能検査用培地組成物からなる。 ．発明の具体的説明 本発明の培地組成物において硝酸カリウムは基
質であり、これが検査菌によつて分解されると培
養液中で亜照酸イオンを生成し、この変化によつ
て検査菌の硝酸塩還元能を判定する。ペプトンお
よび酵母エキスは養分として用いられる。リン酸
一水素二アルカリ金属塩はPH調整剤であり、菌の
発育に最適なPH6.9〜7.1になるような範囲に設定
されている。本発明の培地組成物にはさらに浸透
圧調整剤としてアルカリ金属塩1.25〜20部が使用
されるのが望ましく、塩化ナトリウム、塩化カリ
ウムのようなアルカリ金属塩化物が好適である。 本発明の培地組成物の前述した成分割合は臨界
的であり、硝酸カリウム1.0部に対し、ペプトン
3.125〜50部（好ましくは0.25〜25部）、酵母エキ
ス0.625〜10部（好ましくは1.25〜５部）および
リン酸一水素二アルカリ金属塩0.313〜５部（好
ましくは0.625〜2.5部）である。特にペプトン濃
度は重要であり、ペプトン濃度が低すぎると偽陽
性の判定となりやすく、逆に高すぎると偽陰性の
判定となりやすい。本発明の培地では、上述した
偽陽性や偽陰性の誤まつた判定を下す危険が少な
く、かつ、接種菌数を適宜選択することにより短
時間培養（４〜５時間）または一昼夜培養（18〜
22時間）のいずれによつても正しい判定が可能な
ようにペプトン濃度が設定されている。 本発明の培地組成物は常法に従つて硝酸カリウ
ム１部当り625〜2500部の滅菌蒸留水に溶解して
使用される。近年生化学的性状検査は多数の試験
を多穴プレート上で同時に行うのが普通であり、
このような場合には本発明培地組成物の水溶液を
試験用プレートのウエルに注入し、乾燥させて乾
燥培地とする。試験に際しては該ウエルに試験菌
の懸濁水を所定量分注し、30℃で所定時間培養す
る。４〜５時間の培養で判定することが望まれる
場合は、液体培地50μ当り約7.5×107個の菌を
接種し、18〜22時間培養後の判定が望まれる場合
は約1.5×107個の菌を接種するのが好ましい。こ
のように接種菌数を調整することにより、短時間
でもまた翌日でも検査が行える。 次に本発明の培地組成物を使用して細菌の硝酸
塩還元能を検査した実施例を示す。 実施例 表１に記載の組成を有する本発明培地組成物を
常法に従つて蒸留水１に溶解し、菌同定用培地
１〜３を得た。
物に関する。 さらに詳しくは本発明はグルコース非発酵性グ
ラム陰性桿菌の硝酸塩還元能検査用培地組成物に
関するものである。 細菌感染症に対して適切な治療を施すためには
病原菌を同定し、感受性試験を行い、その病原菌
に有効な薬剤を決定することが重要である。この
ような病原菌の同定に際しては多項目にわたる生
化学的性状検査が行われ、その項目の１つとして
グルコース非発酵性グラム陰性桿菌について硝酸
塩還元能の検査が行われる。これは、上記菌が有
する硝酸塩還元能を利用し、菌の同定を行うもの
である。本発明の培地組成物はこのような試験に
好適に使用される。 先行技術およびその問題点 硝酸塩還元反応は培地中の硝酸塩を還元して亜
硝酸塩にする反応であり、従来下記の組成を有す
る硝酸塩ブイヨン培地が用いられている。 硝酸塩ブイヨン培地 肉 エ キ ス 3g ペ プ ト ン 5g 硝酸カリウム 1g 蒸 留 水 1000ml PH6.8 検査に際しては上記硝酸塩ブイヨン培地に検査
菌を接種し、30℃で20〜48時間培養する。 検査菌の硝酸塩還元能の有無は培養液に、スル
フアニル酸およびα−ナフチルアミンを添加し、
亜硝酸塩が存在すれば生成される赤色物質パラ−
スルホベンゼン−アゾ−α−ナフチルアミンを検
出することによつて判定される。 上記従来培地によれば、短時間の培養では判定
の信頼性が低く、正確な判定のためには長時間の
培養を必要とする。 細菌感染症の早期治療のためには、菌の同定は
できるだけ速やかに行うことが必要であり、より
短かい時間で菌の同定が可能な培地の出現が望ま
れていた。しかし、一方においては、検査作業の
都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない場合も
生じ、このような場合には培養期間が厳格に規制
されておらず、都合により培養時間を延長しても
反応過剰になつたりせず、正確な判定が可能な培
地が望ましい。 ．発明の目的 本発明は短時間の培養で同定が可能であるとと
もに長時間培養しても正確な同定が可能であるグ
ルコース非発酵性グラム陰性桿菌の硝酸塩還元能
の検査用培地組成物を提供することを目的とす
る。 かかる目的を達成するため、本発明は硝酸カリ
ウム1.0部（重量部、以下同じ）に対し、ペプト
ン3.125〜50部、酵母エキス0.625〜10部およびリ
ン酸一水素二アルカリ金属塩0.313〜５部の組成
よりなるグルコース非発酵性グラム陰性桿菌の硝
酸塩還元能検査用培地組成物からなる。 さらに本発明はリン酸一水素二アルカリ金属塩
がリン酸一水素二ナトリウム塩である硝酸塩還元
能検査用培地組成物からなる。 ．発明の具体的説明 本発明の培地組成物において硝酸カリウムは基
質であり、これが検査菌によつて分解されると培
養液中で亜照酸イオンを生成し、この変化によつ
て検査菌の硝酸塩還元能を判定する。ペプトンお
よび酵母エキスは養分として用いられる。リン酸
一水素二アルカリ金属塩はPH調整剤であり、菌の
発育に最適なPH6.9〜7.1になるような範囲に設定
されている。本発明の培地組成物にはさらに浸透
圧調整剤としてアルカリ金属塩1.25〜20部が使用
されるのが望ましく、塩化ナトリウム、塩化カリ
ウムのようなアルカリ金属塩化物が好適である。 本発明の培地組成物の前述した成分割合は臨界
的であり、硝酸カリウム1.0部に対し、ペプトン
3.125〜50部（好ましくは0.25〜25部）、酵母エキ
ス0.625〜10部（好ましくは1.25〜５部）および
リン酸一水素二アルカリ金属塩0.313〜５部（好
ましくは0.625〜2.5部）である。特にペプトン濃
度は重要であり、ペプトン濃度が低すぎると偽陽
性の判定となりやすく、逆に高すぎると偽陰性の
判定となりやすい。本発明の培地では、上述した
偽陽性や偽陰性の誤まつた判定を下す危険が少な
く、かつ、接種菌数を適宜選択することにより短
時間培養（４〜５時間）または一昼夜培養（18〜
22時間）のいずれによつても正しい判定が可能な
ようにペプトン濃度が設定されている。 本発明の培地組成物は常法に従つて硝酸カリウ
ム１部当り625〜2500部の滅菌蒸留水に溶解して
使用される。近年生化学的性状検査は多数の試験
を多穴プレート上で同時に行うのが普通であり、
このような場合には本発明培地組成物の水溶液を
試験用プレートのウエルに注入し、乾燥させて乾
燥培地とする。試験に際しては該ウエルに試験菌
の懸濁水を所定量分注し、30℃で所定時間培養す
る。４〜５時間の培養で判定することが望まれる
場合は、液体培地50μ当り約7.5×107個の菌を
接種し、18〜22時間培養後の判定が望まれる場合
は約1.5×107個の菌を接種するのが好ましい。こ
のように接種菌数を調整することにより、短時間
でもまた翌日でも検査が行える。 次に本発明の培地組成物を使用して細菌の硝酸
塩還元能を検査した実施例を示す。 実施例 表１に記載の組成を有する本発明培地組成物を
常法に従つて蒸留水１に溶解し、菌同定用培地
１〜３を得た。
【表】
上記培地１〜３を多穴プレート各ウエルに50μ
ずつ分注し、40℃で乾燥した。次に寒天培地上
で各種検査細菌を30℃で18〜24時間培養し、1.0
mlの滅菌蒸留水中に培養時間が４時間の場合は
1.5×109個／mlまた20時間の場合３×108個／ml
となるように懸濁し各ウエルに50μずつ接種
し、30℃で所定時間培養した。比較試験として、
前出の硝酸塩ブイヨン培地を用いる従来法により
培養を行なつた。 所定時間培養したのち、各培地について亜硝酸
塩の検出試験を行うことにより硝酸塩還元能の有
無を判定した。結果を表２に示す。
ずつ分注し、40℃で乾燥した。次に寒天培地上
で各種検査細菌を30℃で18〜24時間培養し、1.0
mlの滅菌蒸留水中に培養時間が４時間の場合は
1.5×109個／mlまた20時間の場合３×108個／ml
となるように懸濁し各ウエルに50μずつ接種
し、30℃で所定時間培養した。比較試験として、
前出の硝酸塩ブイヨン培地を用いる従来法により
培養を行なつた。 所定時間培養したのち、各培地について亜硝酸
塩の検出試験を行うことにより硝酸塩還元能の有
無を判定した。結果を表２に示す。
【表】
．発明の具体的作用および効果
表２から明らかなように、グルコース非発酵性
グラム陰性桿菌の硝酸塩還元能検査において、本
発明の培地を使用すると、培養時間の長短を問わ
ず正しい菌の同定が可能である。従つて検査作業
の都合により即日同定、翌日同定のいずれも選択
することができる。これに対して対照培地は少く
とも20時間の培養が必要であり、即日判定は不可
能である。例えば、シユードモナス・アエルギノ
ーザATCC10145、シユードモナス・セパシア
ATCC27515、シユードモナス・スタツチエリ
ATCC17588およびシユードモナス・アンドボラ
ンスATCC15688は対照培地では５時間培養では
陰性であり、22時間培養で陽性になる。これに対
して本発明の培地を使用すると５時間培養で正し
い判定が可能である。
グラム陰性桿菌の硝酸塩還元能検査において、本
発明の培地を使用すると、培養時間の長短を問わ
ず正しい菌の同定が可能である。従つて検査作業
の都合により即日同定、翌日同定のいずれも選択
することができる。これに対して対照培地は少く
とも20時間の培養が必要であり、即日判定は不可
能である。例えば、シユードモナス・アエルギノ
ーザATCC10145、シユードモナス・セパシア
ATCC27515、シユードモナス・スタツチエリ
ATCC17588およびシユードモナス・アンドボラ
ンスATCC15688は対照培地では５時間培養では
陰性であり、22時間培養で陽性になる。これに対
して本発明の培地を使用すると５時間培養で正し
い判定が可能である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 硝酸カリウム1.0部（重量部、以下同じ）に
対し、ペプトン3.125〜50部、酵母エキス0.625〜
10部およびリン酸一水素二アルカリ金属塩0.313
〜５部の組成よりなるグルコース非発酵性グラム
陰性桿菌の硝酸塩還元能検査用培地組成物。 ２ リン酸一水素二アルカリ金属塩がリン酸一水
素二ナトリウム塩である特許請求の範囲第１項記
載の培地組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9803386A JPS62257399A (ja) | 1986-04-30 | 1986-04-30 | 硝酸塩還元能検査用培地組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9803386A JPS62257399A (ja) | 1986-04-30 | 1986-04-30 | 硝酸塩還元能検査用培地組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62257399A JPS62257399A (ja) | 1987-11-09 |
| JPH0586196B2 true JPH0586196B2 (ja) | 1993-12-10 |
Family
ID=14208706
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9803386A Granted JPS62257399A (ja) | 1986-04-30 | 1986-04-30 | 硝酸塩還元能検査用培地組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62257399A (ja) |
-
1986
- 1986-04-30 JP JP9803386A patent/JPS62257399A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS62257399A (ja) | 1987-11-09 |
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