JPH06104073B2 - 体液成分検査用試験片の製造方法 - Google Patents
体液成分検査用試験片の製造方法Info
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- JPH06104073B2 JPH06104073B2 JP3280689A JP3280689A JPH06104073B2 JP H06104073 B2 JPH06104073 B2 JP H06104073B2 JP 3280689 A JP3280689 A JP 3280689A JP 3280689 A JP3280689 A JP 3280689A JP H06104073 B2 JPH06104073 B2 JP H06104073B2
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Description
学の分野で広く利用可能な,体液成分検査用試験片の製
造方法に関する。
は,強酸,強アルカリなどの強い試薬を使用せず,比較
的おだやかな条件下で体液中の病理学的成分を測定する
ことができるため,酵素,ホルモン,抗原―抗体反応ま
たはハプテン抗体反応に関与する能力のある物質,凝固
因子などの生物学的活性たんぱく質を用いる測定法が,
特公昭45−1878号公報記載のぶどう糖検出用品などをは
じめとして広く用いられている。
料に検査薬組成物を含浸させ乾燥させたものを小片に裁
断し,この小片をプラスチックフィルムなどの機械的強
度の高い基材に接着剤などを用いて貼付して製造する
か,基材に,検査薬組成物を印刷して製造されてい
る。しかしながら,上記の方法は,製造工程がきわめ
て煩雑であり,コストが高くなるという欠点があった。
酵素を用い,検査薬を水性組成物として基材に印刷する
方法(特公昭44−25953号公報など参照)や,検査薬を
水―アルコール性組成物として基材に印刷する方法(実
開昭57−79767号公報など参照)があるが,いずれも検
査薬組成物が多量の水を含むため,印刷後,常温あるい
は常温に低い低温で長時間かけて乾燥しなければなら
ず,作業性や生産性に劣る,短時間で乾燥しようとし
て,加熱乾燥すると酵素が失活してしまうという欠点が
あった。より低温短時間で乾燥させるために,酵素をn
−ブタノールなどの非水性溶媒に分散させた組成物を検
出薬として基材に印刷する方法(特開昭58−209995号公
報,特開昭60−178358号公報,特開昭61−284661号公報
など参照)も提案されているが,低温短時間とはいえ,
耐熱性の低い酵素を加熱するため,検査薬組成物中の酵
素の大部分が失活し,有効酵素量が減少するので,高価
な酵素を多量に用いなければならないという欠点があっ
た。
組成物中の酵素などの生物学的活性たんぱく質が失活す
ることなく,高価な生物学的活性たんぱく質を所要量使
用するだけですみ,作業性および生産性の良好な,体液
成分検査用試験片の製造方法を提供するものである。
および放射線硬化性化合物からなる印刷インキ組成物を
印刷し,印刷された印刷インキ組成物を活性放射線照射
により硬化することを特徴とする体液成分検査用試験片
の製造方法である。
紙,合成紙,不織布,織布,プラスチックフィルム,発
泡プラスチックシート,金属箔,あるいはこれらの積層
体などが用いられる。
性または動物性の活性たんぱく質,あるいはこれらに架
橋剤などの化学物質をグラフトさせた形の変性体が用い
られる。このような生物学的活性たんぱく質としては,
酵素,ホルモン,抗原―抗体反応またはハプテン抗体反
応をおこす生物学的たんぱく質,凝固因子などがあり,
酵素としては,生体内とりわけ血液などの体液中,ある
いは尿中に含有される病理学的成分,例えば,カルシウ
ム,マグネシウムなどの無機質成分,グルコースなどの
グリコース,コレステロール,尿素,尿酸,クレアチニ
ン,中性脂肪,りん脂質,アンモニア,乳酸,ピルビン
酸,シアル酸,GPT,GOT,コリンエステラーゼ,ロイシン
アミノペプチターゼ,アミラーゼ,LCAT,クレアチンホス
ホキナーゼなどと反応し,指示薬の色調変化をおこすも
の,あるいは前記反応によって生成した物質がさらに他
の酵素と反応して指示薬の色調変化をおこすもの,ある
いは,これらの反応の結果,発光し,またはスペクトル
変化をおこし,可視紫外線吸収スペクトル,蛍光スペク
トルなどの分光光度計によって分析できるものが用いら
れる。また,抗原―抗体反応あるいはハプテン抗体反応
をおこす生物学的活性たんぱく質としては,特に制限は
なく,たんぱく質などの高分子物質に結合すると免疫応
答を示す物質していのハプテンや免疫グロブリンと総称
される抗体などであり,ヒト,サル,マウス,ラット,
イヌ,ウサギ,ウシ,ウマ,鳥類,爬虫類,両棲類,魚
類,円口類などから得られる免疫グロブリンを用いるこ
とができるが,これらに限定されるものではない。
光したり,発色したり,色変化を示したり,スペクトル
変化をおこしたりする化合物(一成分系指示薬),ある
いは酸化還元反応により生成した化合物がさらに他の化
合物(カプラー)と結合して発光したり,発色したり,
色変化を示したり,スペクトル変化をおこしたりするよ
うな化合物(顕色剤)である。一成分系指示薬として
は,o−トルイジン,3,3′,5,5′−テトラメチルベンジ
ン,グアヤク脂,p−アニシジン,N,N−ジメチルp−フェ
ニレンジアミン,2,7−ジアミノフルオレン,2,2′−ジア
ノビス(3−エチルベンゾチアゾリン−6−スルホン
酸),2,6−ジクロロフェノール,α−ナフトール,よう
化カリウムなどがある。顕色剤としては,4−アミノアン
チピリン,3−メチル−2−ベンゾチアゾリノンヒドラゾ
ン,テトラメチルベンジジン,N,N−ジメチル−p−フェ
ニレンジアミンなどがある。カプラーとしては,1,7−ジ
ヒドロキシナフタレン,1,8−ジヒドロキシ−3,6−ジス
ルホン酸ナフタレン,8−アミノ−1,1−ナフトール−3,6
−ジスルホン酸スフタレンなどのナフトール類,ジメル
アニリン,ジエチルアニリン,N−メチル−N−ヒドロキ
シエチルアニリン,N−メチル−N−ヒドロキシエチル−
m−トルイジン,N,N−ジメチル−m−アニジンなどのア
ニリン類,フェノール,p−クロロフェノール,2,6−ジク
ロロフェノール,グアヤコール,ピロガロール,o−フェ
ニルフェノールなどのフェノール類,1−ナフトール−3,
6−ジスルホン酸,1−アミノナフタレン−5−スルホン
酸,1−アミノナフタレン−6−スルホン酸などのスルホ
ン酸,あるいはこれらのスルホン酸と高級アルキルアミ
ンとの塩類などがある。
アクリル酸,(メタ)アクリル酸塩類,(メタ)アクリ
ル酸アルキルエステル類,(メタ)アクリル酸グリシジ
ルエステル,(メタ)アクリル酸ヒドロキシアルキルエ
ステル類,(メタ)アクリロニトリル,(メタ)アクリ
ルアミド,スチレン,α−アルキルスチレン類,酢酸ビ
ニル,塩化ビニリデン,ビニルエーテル類,アリルアル
コールなど,あるいはこれらの置換体,ジ(メタ)アク
リレート類,トリ(メタ)アクリレート類などのポリ
(メタ)アクリレート類,ジ(メタ)アクリルアミド
類,ジアリル(イソ)フタレート,ジアリル(イソ)フ
タレートオリゴマー,ジビニルベンゼン,トリアリル化
合物など,あるいはこれらの混合物がある。
は,上記生物学的活性たんぱく質,指示薬,および放射
線硬化性化合物の他,本発明の体液成分検査用試験片の
性能を阻害しない範囲で,必要に応じて,吸液性および
保液性の向上のためのシリカ,カオリンなどの無機質充
填剤,pH緩衝剤,界面活性剤,酸化防止剤,吸液性およ
び保液性向上のためのカルボキシメチルセルロースナト
リウム塩,メチルセロルース,寒天,アルギン酸ナトリ
ウム,ポリアクリル酸ナトリウム,ゼラチン,でん粉な
どの水溶性ポリマー類,染顔料,重合禁止剤,光重合開
始剤,光重合促進剤,滑剤,熱可塑性樹脂,少量の水や
有機溶剤,少量の熱硬化性樹脂などの添加剤を加え,十
分混合しまたは混練することによって得られる。このよ
うにして得られた印刷インキ組成物中の指示薬の量は0.
1〜5重量%であることが好ましい。
組成物は,単独であるいは適宜組合せて前記基材に,あ
るいは単独または組合わせたもの2種以上を前記基材の
異なった部分に,凸版印刷,平版印刷,グラビア印刷,
フレキソ印刷,スクリーン印刷などの基材の種類と印刷
インキ組成物の種類により選ばれる適切な印刷方式によ
り印刷され,基材の印刷部分に,紫外線,電子線,X−線
などの活性放射線を照射して,これを硬化させて,必要
に応じて適当な大きさに裁断して,本発明の体液成分検
査用試験片が得られる。活性放射線が紫外線である場合
には,硬化性の面から,印刷インキ組成物中に光重合開
始剤および必要に応じて光重合促進剤を含むことが好ま
しい。また,基材が活性放射線透過性を有する場合に
は,基材の印刷面と反対側から活性放射線を照射して,
印刷部分を硬化させることもできる。
て,生体内とりわけ血液などの体液中,あるいは尿中に
含有される病理学的成分,例えば,カルシウム,マグネ
シウム,などの無機質成分,グルコースなどのグリコー
ス,コレステロール,尿素,尿酸,クレアチニン,中性
脂肪,りん脂質,アンモニア,乳酸,ピルビン酸,シア
ル酸,GPT,GOT,コリンエステラーゼ,ロイシンアミノペ
プチターゼ,アミラーゼ,LCAT,クレアチンホスホキナー
ゼなどを検査することができる。
量部を表す。
白色の緩衝剤分散液Aを得た。
吸水性ゼル)「スミカゲルSP520」(住友化学工業
(株)製,商品名) 8部 ポリウチレングリコール6000 1部 ポリビニルピロリドン 7部 グリセリンジグリシジルエーテルジアクリレート 1部 グアヤク脂 0.8部 上記組成の混合物を,ホモジナイザーを用いて混合分散
し,分散液Bを得た。
ダーゼ,パーオキシダーゼおよびポリエチレングリコー
ルをこの順に溶解させ,やや濁りのある茶褐色の粘稠な
酵素分散液Cを得た。
え,ホモジナイザーで10分間攪拌分散させ,次いで,2−
ヒドロキシ−2−メチルプロピオフェノン0.5部を加
え,さらに5分間攪拌し,印刷インキ組成物Dを得た。
ロエチレン製スクリーンを用いて,厚さ200μmの透明
ポリスチレンフィルムの片面に,1cm幅,印刷膜厚35μm
となるように,スクリーン印刷し,印刷物を得た。得ら
れた印刷物を,80W/cm紫外線ランプ下,6.5m/分の速度で
4回通過させることによって,フィルムの印刷側から紫
外線を照射し,印刷部分を硬化させた。この際の紫外線
の総照射量は200mJ/cm2であった。また,印刷硬化部分
にはタックはなく,印刷硬化部分のポリスチレンフィル
ム基材への密着性も良好であった。
に,得られた印刷硬化フィルムを裁断して試験片を得,
得られた試験片を,種々の濃度のグルコース水溶液に3
秒間浸漬し,取出した後,1分経過後の発色を,シアン色
側光用フィルターを用いて,反射濃度計「B−318G」
(X−Rite,Inc.製,商品名)により測定した。測定結
果を表1に示す。なお,反射濃度の数値は,それが大で
あるほど色が濃いことを示す。また,グリコース濃度0
〜500mg/dlの範囲では,反射濃度の大きな変化がみら
れ,標準色と比較して目視により明確にグルコース濃度
を測定することができる。
表でも同様である。
波長λ1=480nm,λ2=610nmおよびλ=740nmそれぞれに
おける吸光度Eλ1,Eλ2,およびEλ3を求め,λ2にお
ける,ベースラインに相当する吸光度を差引いた実質的
な吸光度Eλ2,sを, 式 Eλ2,s=Eλ2−(Eλ1+Eλ2)/2 に基づいて算出した。表2に算出結果を示す。
な関係はないが,可視吸収スペクトルの吸光度を用いた
体液成分の濃度決定が可能であることがわかる。
ブチル化ヒドロキシアニソールを用い,2−ヒドロキシ−
2−メチルプロピオフェノンを用いなかった以外は,実
施例1と同様にして,印刷インキ組成物Eを得た。得ら
れた印刷インキ組成物Eを,実施例1と同様にして,透
明ポリスチレンフィルム基材に印刷し,カーテン方式電
子線照射装置(エナジーサイエンス社製)を用いて,ち
っ素雰囲気中,160kv,5mAで,線量7Mradの電子線を照射
し,印刷部分を硬化させた。この際,印刷硬化部分には
タックはなく,印刷硬化部分のポリスチレンフィルム基
材への密着性も良好であった。
試験片を得,得られた試験片を用いて,種々のグルコー
ス濃度における反射濃度を測定した。測定した結果を表
3に示す。
も明瞭に区別できるものであり,グルコースの定量が可
能であった。
ブチル化ヒドロキシアニソールを,グアヤク脂0.8部の
代わりに4−アミノアンチピリン0.4部およびサリチル
アニリド0.4部を,それぞれ用いた以外は実施例1と同
様にして,印刷インキ組成物Fを得た。実施例1と同様
にして,透明ポリスチレンフィルムに印刷し,紫外線照
射によって硬化させ,試験片を得,シアン色側光用フィ
ルターを用い,種々のグルコース濃度における反射濃度
を測定した。測定した結果を表4に示す。
それほど大きくなくとも,目視では十分区別できるもの
であり,実施例3においても,目視でも十分グルコース
濃度の差を判定できた。
かった以外は,実施例3と同様にして,印刷インキ組成
物Gを得た。得られた印刷インキ組成物Gを,実施例2
と同様にいて,基材に印刷し,電子線照射によって硬化
させ,試験片を得,実施例3と同様にして測定した。測
定した結果を表5に示す。
化によって得られた試験片の方が,紫外線硬化によって
得られたそれより,発色の差が明確であることがわか
る。これは,電子線硬化と紫外線硬化とでは,得られる
硬化物の架橋度が異なるためと考えられる。
せると,発色は抑制されることもわかった。
ステル「イソバン#10」 (クラレイソプリンケミカル(株)製,商品名) 2.5部 D,L−α−トコフェロール 0.1部 ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート 1.2部 微結晶セルロース「アビセルSF」 (旭化成工業(株)製,商品名) 30.0部 n−ブタノール 47.0部 あらかじめ乳鉢で微粉砕したくえん酸無水物 3.2部 くえん酸ナトリウム無水物 12.0部 上記組成の混合物を十分にホモミキサーで微細分散させ
た後,グルコースオキシダーゼ(Grade II,東洋紡績
(株)製)0.5部およびパーオキシダーゼ(Grade III,
東洋紡績(株)製)0.1部を加え,さにホモミキサーで
微細分散させて,印刷インキ組成物Hを得た。得られた
印刷インキ組成物Hを実施例1と同様にして乾燥膜厚12
0μmとなるように透明ポリスチレンフィルムに印刷し,
65℃で30分間加熱乾燥し,実施例1と同様にして,試験
片を得,得られた試験片を種々の濃度のグルコース溶液
に浸漬したときの発色試験を行なった。反射濃度計を用
いて測定した平均の反射濃度は実施例1の場合とほぼ同
等であったが,グルコース濃度50mg/dlを超える領域で
は,点状の濃青緑色に発色する部分と発色のうすい部分
とがあらわれ,グルコース濃度が高くなるにつれこの傾
向が強くなることが観察され,目視判定が困難であっ
た。
製)0.5部およびパーオキシダーゼ(Grade III,東洋紡
績(株)製)0.1部の代わりに,グルコースオキシダー
ゼ(タイプII,シグマ社製)0.2部およびパーオキシダー
ゼ(タイプII,シグマ社製)0.03部を用いた以外は,比
較例1と同様にいて,印刷インキ組成表Iを得,印刷
し,加熱乾燥し,試験片を得,得られた試験片を用いて
発色試験を行なったが,発色濃度が低く,目視でのグル
コース濃度の判定が困難であった。
査薬組成物中の酵素などの生物学的活性たんぱく質が失
活することなく,高価な生物学的活性たんぱく質を所要
量使用するだけで,簡便に,また,作業性および生産性
よく,体液成分検査用試験片を製造することができるよ
うになった。また,本発明により製造された体液成分検
査用試験片は,機器によるだけでなく,目視によって
も,正確な検査が可能なものである。
Claims (1)
- 【請求項1】基材上に,生物学的活性たんぱく質,指示
薬および放射線硬化性化合物からなる印刷インキ組成物
を印刷し,印刷された印刷インキ組成物を活性放射線照
射により硬化することを特徴とする体液成分検査用試験
片の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3280689A JPH06104073B2 (ja) | 1989-02-14 | 1989-02-14 | 体液成分検査用試験片の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3280689A JPH06104073B2 (ja) | 1989-02-14 | 1989-02-14 | 体液成分検査用試験片の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02211897A JPH02211897A (ja) | 1990-08-23 |
| JPH06104073B2 true JPH06104073B2 (ja) | 1994-12-21 |
Family
ID=12369079
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3280689A Expired - Lifetime JPH06104073B2 (ja) | 1989-02-14 | 1989-02-14 | 体液成分検査用試験片の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06104073B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
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|---|---|---|---|---|
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| EP2399127A4 (en) * | 2009-02-18 | 2018-01-24 | Stratec Consumables GmbH | Printing bio-reactive materials |
| JP2013244611A (ja) * | 2012-05-23 | 2013-12-09 | Dainippon Printing Co Ltd | 生体分子インキ印刷物、及びその製造方法 |
| JP2016052799A (ja) * | 2016-01-21 | 2016-04-14 | 大日本印刷株式会社 | 生体分子印刷物、及びその製造方法 |
-
1989
- 1989-02-14 JP JP3280689A patent/JPH06104073B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH02211897A (ja) | 1990-08-23 |
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