JPH06174721A - ル−プス抗凝血物質抗体の測定法及び測定試薬 - Google Patents
ル−プス抗凝血物質抗体の測定法及び測定試薬Info
- Publication number
- JPH06174721A JPH06174721A JP5223198A JP22319893A JPH06174721A JP H06174721 A JPH06174721 A JP H06174721A JP 5223198 A JP5223198 A JP 5223198A JP 22319893 A JP22319893 A JP 22319893A JP H06174721 A JPH06174721 A JP H06174721A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- antibody
- factor
- added
- measuring
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/745—Assays involving non-enzymic blood coagulation factors
- G01N2333/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C [AHF], factor VIII Ag [VWF]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
- G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
- G01N2333/96425—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals
- G01N2333/96427—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general
- G01N2333/9643—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general with EC number
- G01N2333/96433—Serine endopeptidases (3.4.21)
- G01N2333/96441—Serine endopeptidases (3.4.21) with definite EC number
- G01N2333/96461—Protein C (3.4.21.69)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
- G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
- G01N2333/96425—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals
- G01N2333/96427—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general
- G01N2333/9643—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general with EC number
- G01N2333/96433—Serine endopeptidases (3.4.21)
- G01N2333/96441—Serine endopeptidases (3.4.21) with definite EC number
- G01N2333/96463—Blood coagulation factors not provided for in a preceding group or according to more than one of the proceeding groups
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 本発明の目的はル−プス抗凝血物質抗体の測
定法及び測定試薬である。 【構成】 活性化蛋白質Ｃの血液凝固システムにおよぼ
す中和作用に対するル−プス抗凝血物質（ＬＡ）−抗体
による抑制を介して、血液−、血漿−、組織試料中のこ
のＬＡ−抗体を測定するために、この試料に一定量の活
性化蛋白質Ｃを添加し、恒温保持後、試料中の蛋白質Ｃ
の生理学的基質の残留量または蛋白質Ｓ−活性を自体公
知法で測定し、かつ存在するＬＡ−抗体の量をＬＡ−抗
体を含有しない標準と比較することにより算出する。本
発明方法は血栓生成性の体質または疾病に起因する血栓
生成の診断のために、並びに治療の経過観察のために適
用可能である。
定法及び測定試薬である。 【構成】 活性化蛋白質Ｃの血液凝固システムにおよぼ
す中和作用に対するル−プス抗凝血物質（ＬＡ）−抗体
による抑制を介して、血液−、血漿−、組織試料中のこ
のＬＡ−抗体を測定するために、この試料に一定量の活
性化蛋白質Ｃを添加し、恒温保持後、試料中の蛋白質Ｃ
の生理学的基質の残留量または蛋白質Ｓ−活性を自体公
知法で測定し、かつ存在するＬＡ−抗体の量をＬＡ−抗
体を含有しない標準と比較することにより算出する。本
発明方法は血栓生成性の体質または疾病に起因する血栓
生成の診断のために、並びに治療の経過観察のために適
用可能である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は活性化蛋白質Ｃ（ＡＰ
Ｃ）のリン脂質依存凝固抑制活性（抗凝血活性、ａｎｔ
ｉｃｏａｇｕｌａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ）の影響を介
して、血液、血漿、血漿フラクション及び組織抽出物中
のＬＡ−抗体（ル−プス抗凝血物質）を測定する方法に
関する。本発明方法は一定の体質または疾病を知るため
に、病気経過を観察するためにまたは治療をコントロ−
ルするために使用することができる。
Ｃ）のリン脂質依存凝固抑制活性（抗凝血活性、ａｎｔ
ｉｃｏａｇｕｌａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ）の影響を介
して、血液、血漿、血漿フラクション及び組織抽出物中
のＬＡ−抗体（ル−プス抗凝血物質）を測定する方法に
関する。本発明方法は一定の体質または疾病を知るため
に、病気経過を観察するためにまたは治療をコントロ−
ルするために使用することができる。
【０００２】
【従来の技術】抗リン脂質抗体（ａＰＬ）は動脈および
／または静脈の閉塞、血小板減少症および／または自然
流産と関連して個人において生じる自己抗体である（概
要：Ｌｅｃｈｎｅｒ，Ｋ．、Ｐａｂｉｎｇｅｒ−Ｆａｓ
ｃｈｉｎｇ，Ｉ．著、Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ １５
（１９８５）、２５４−２６２；Ｂｒａｎｃｈ，Ｄ．
Ｗ．等著、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ． ３１３ （１
９８５）、１３２２−１３２６；Ｅｘｎｅｒ，Ｔ．著、
Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔａｓ．５３（１９８
５）、１５−１８）。ａＰＬは種々の異なるテストによ
り、例えば抗原として種々のリン脂質を使用するエリザ
法によりまたは常用の凝集テストにより検出可能であ
る。凝固テストにより検出可能なａＰＬをＬＡ−抗体
（ル−プス抗凝血物質）と命名した。ＬＡ−抗体はリン
脂質依存凝固工程で干渉し、従って個々の凝固因子の活
性を抑制することなく、種々の異なるテストの凝固時間
を延長する。しかし、この抗体は十分に定義された抗原
に対する単一の自己抗体の群ではない。マリア等（Ｍａ
ｌｉａ等；Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈ
ａｅｍａｔｏｌｏｇｉｅ ７６（１９９０）、１０１−
１０７）は抗リン脂質−抗体と血栓生成の危険性との関
連についての可能性を述べている。この結果に導いた実
験は、患者血漿から単離したＩｇＧ−フラクションを用
いて、精製した活性化蛋白質Ｃ、並びに蛋白質Ｓ及びホ
スファチジルセリン及びホスファチジルコリンの添加下
に実施された。この際、活性化蛋白質Ｃと蛋白質Ｓから
なる複合体への抗リン脂質−抗体の抑制的効果が推量さ
れた。
／または静脈の閉塞、血小板減少症および／または自然
流産と関連して個人において生じる自己抗体である（概
要：Ｌｅｃｈｎｅｒ，Ｋ．、Ｐａｂｉｎｇｅｒ−Ｆａｓ
ｃｈｉｎｇ，Ｉ．著、Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ １５
（１９８５）、２５４−２６２；Ｂｒａｎｃｈ，Ｄ．
Ｗ．等著、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ． ３１３ （１
９８５）、１３２２−１３２６；Ｅｘｎｅｒ，Ｔ．著、
Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔａｓ．５３（１９８
５）、１５−１８）。ａＰＬは種々の異なるテストによ
り、例えば抗原として種々のリン脂質を使用するエリザ
法によりまたは常用の凝集テストにより検出可能であ
る。凝固テストにより検出可能なａＰＬをＬＡ−抗体
（ル−プス抗凝血物質）と命名した。ＬＡ−抗体はリン
脂質依存凝固工程で干渉し、従って個々の凝固因子の活
性を抑制することなく、種々の異なるテストの凝固時間
を延長する。しかし、この抗体は十分に定義された抗原
に対する単一の自己抗体の群ではない。マリア等（Ｍａ
ｌｉａ等；Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈ
ａｅｍａｔｏｌｏｇｉｅ ７６（１９９０）、１０１−
１０７）は抗リン脂質−抗体と血栓生成の危険性との関
連についての可能性を述べている。この結果に導いた実
験は、患者血漿から単離したＩｇＧ−フラクションを用
いて、精製した活性化蛋白質Ｃ、並びに蛋白質Ｓ及びホ
スファチジルセリン及びホスファチジルコリンの添加下
に実施された。この際、活性化蛋白質Ｃと蛋白質Ｓから
なる複合体への抗リン脂質−抗体の抑制的効果が推量さ
れた。
【０００３】しかしながら、検出されたａＰＬを有する
患者が実際に血栓生成の危険性にさらされているかどう
かを、従来提供されているテストにより、臨床適用に十
分な正確さと迅速性で予測することはできない（概要：
Ｔｒｉｐｌｅｔｔ，Ｄ．Ａ．著、Ｓｅｍ．Ｔｈｒｏｍ
ｂ．Ｈｅｍｏｓｔａｓ．１６（１９９０）、１８２−１
９２；Ｊｏｕｈｉｋａｉｎｅｎ，Ｔ．等著、Ｂｌｏｏｄ
Ｃｏａｇｕｌ．Ｆｉｂｒｉｎｏｌ．３（１９９２）４
０７−４１４）。
患者が実際に血栓生成の危険性にさらされているかどう
かを、従来提供されているテストにより、臨床適用に十
分な正確さと迅速性で予測することはできない（概要：
Ｔｒｉｐｌｅｔｔ，Ｄ．Ａ．著、Ｓｅｍ．Ｔｈｒｏｍ
ｂ．Ｈｅｍｏｓｔａｓ．１６（１９９０）、１８２−１
９２；Ｊｏｕｈｉｋａｉｎｅｎ，Ｔ．等著、Ｂｌｏｏｄ
Ｃｏａｇｕｌ．Ｆｉｂｒｉｎｏｌ．３（１９９２）４
０７−４１４）。
【０００４】多くのＬＡ−抗体の測定法が公知である： ａ． 再石灰化時間の測定（概要：Ｒｏｓｎｅｒ，Ｅ．
等著、Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔａｓ．５７（１９
８７）、１４４−１４７）。この方法は低い感度と特異
性を有する。
等著、Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔａｓ．５７（１９
８７）、１４４−１４７）。この方法は低い感度と特異
性を有する。
【０００５】ｂ． 種々異なる活性化物質及びリン脂質
を使用する活性化部分トロンボプラスチン時間の測定
（概要：Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ
ｏｆ ｔｈｅ “Ｓｏｃｉｅｔｅ Ｆｒａｎｃａｉｓｅ
ｄｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｅ Ｃｌｉｎｉｑｕｅ”、Ｔｈ
ｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．６６（１９９２）、３４９−３６
４）。このテストの感度及び特異性は非常に低い。
を使用する活性化部分トロンボプラスチン時間の測定
（概要：Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ
ｏｆ ｔｈｅ “Ｓｏｃｉｅｔｅ Ｆｒａｎｃａｉｓｅ
ｄｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｅ Ｃｌｉｎｉｑｕｅ”、Ｔｈ
ｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．６６（１９９２）、３４９−３６
４）。このテストの感度及び特異性は非常に低い。
【０００６】ｃ． カオリン−凝固時間もしくはカオリ
ン−凝固時間−インデックス（ＫＣＴ）の測定（概要：
Ｅｘｎｅｒ（１９８５）前記）。このテストは“ル−プ
ス抗凝血物質”の検出のためには比較的良好であること
が示されている。血栓生成とこのテストで検出されるべ
き“ル−プス抗凝血物質”プラスの結果との相関性は存
在しない。
ン−凝固時間−インデックス（ＫＣＴ）の測定（概要：
Ｅｘｎｅｒ（１９８５）前記）。このテストは“ル−プ
ス抗凝血物質”の検出のためには比較的良好であること
が示されている。血栓生成とこのテストで検出されるべ
き“ル−プス抗凝血物質”プラスの結果との相関性は存
在しない。
【０００７】ｄ． 希釈ラッセルのマムシ毒時間（Ｄｉ
ｌｕｔｅ Ｒａｓｓｅｌｌ’ｓ Ｖｉｐｅｒ Ｖｅｎｏ
ｍ Ｔｉｍｅ）による測定（概要：Ｈｅｍｏｓｔａｓｉ
ｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｏｃｉｅｔ
ｅ Ｆｒａｎｃａｉｓｅ ｄｅＢｉｏｌｏｇｉｅ Ｃｌ
ｉｎｉｑｕｅ（１９９２）前記；Ｊｏｕｈｉｋａｉｎｅ
ｎ等著（１９９２）前記）。このテストで“ル−プス抗
凝血物質”は比較的高い感度で検出されるが、プラスの
テスト結果と血栓生成の危険性との相関性はない。
ｌｕｔｅ Ｒａｓｓｅｌｌ’ｓ Ｖｉｐｅｒ Ｖｅｎｏ
ｍ Ｔｉｍｅ）による測定（概要：Ｈｅｍｏｓｔａｓｉ
ｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｏｃｉｅｔ
ｅ Ｆｒａｎｃａｉｓｅ ｄｅＢｉｏｌｏｇｉｅ Ｃｌ
ｉｎｉｑｕｅ（１９９２）前記；Ｊｏｕｈｉｋａｉｎｅ
ｎ等著（１９９２）前記）。このテストで“ル−プス抗
凝血物質”は比較的高い感度で検出されるが、プラスの
テスト結果と血栓生成の危険性との相関性はない。
【０００８】ｅ． 血小板−中和−テスト（概要：Ｈｅ
ｍｏｓｔａｓｉｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ
Ｓｏｃｉｅｔｅ Ｆｒａｎｃａｉｓｅ ｄｅ Ｂｉｏ
ｌｏｇｉｅ Ｃｌｉｎｉｑｕｅ（１９９２）前記；Ｌａ
ｚａｒｃｈｉｃｋ，Ｊ等著、Ａｒｃｈ．Ｐａｔｈｏｌ．
Ｌａｂ．Ｍｅｄ．１１３（１９８９）、１７７−１８
０）。このテストでは、試験管中でその凝固抑制活性が
血小板のリン脂質により中和されうる自己抗体だけが検
出される。“ル−プス抗凝血物質”のプラスの結果と血
栓生成の危険性との相関性はない。
ｍｏｓｔａｓｉｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ
Ｓｏｃｉｅｔｅ Ｆｒａｎｃａｉｓｅ ｄｅ Ｂｉｏ
ｌｏｇｉｅ Ｃｌｉｎｉｑｕｅ（１９９２）前記；Ｌａ
ｚａｒｃｈｉｃｋ，Ｊ等著、Ａｒｃｈ．Ｐａｔｈｏｌ．
Ｌａｂ．Ｍｅｄ．１１３（１９８９）、１７７−１８
０）。このテストでは、試験管中でその凝固抑制活性が
血小板のリン脂質により中和されうる自己抗体だけが検
出される。“ル−プス抗凝血物質”のプラスの結果と血
栓生成の危険性との相関性はない。
【０００９】前記のすべての方法は多少不正確であり、
特にＬＡ−抗体の一定の機能のみを検出するが、血栓生
成の危険性に関しては何も示さないと言う欠点を有して
いる。ＬＡ−抗体と血栓生成の危険性との間のマイナス
の相関性はＬＡ−抗体の生体内効果が知られていないと
いうことで説明される。可能な説明としては、繊維素溶
解活性の妨害（Ｔｓａｋｉｒｉｓ等著、Ｔｈｒｏｍｂ．
Ｈａｅｍｏｓｔａｓ．６１（１９８９）、１７５−１７
７；Ｎｉｌｓｓｏｎ，Ｔ．Ｋ、Ｌｏｅｆｖｅｎｂｅｒ
ｇ，Ｅ．著、Ｃｌｉｎ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．８（１９
８９）、５８−６３）、プロスタサイクリンの形成及び
遊離の遅延（Ｓｃｈｏｒｅｒ等著、Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍ
ａｔｏｌ．７１（１９８９）３９９−４０７）、フォン
ビルブラント因子の遊離の増加（Ｂｙｒｏｎ等著、Ａｎ
ｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．４６（１９８７）、７４１−
７４５）及び妨害された蛋白質Ｃの活性化（Ｔｓａｋｉ
ｒｉｓ等著、Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．１７（１９９
０）、７８５−７８９）が報告されている。これら全て
に対する可能な説明は内皮細胞表面へのＬＡ−抗体の第
１次結合であり、このことは内皮細胞の機能の妨害に導
く。しかしながら、多くの研究はこれらの挙げた病理生
理学的説明がＬＡ−抗体を有する患者の何人かには該当
するが、大部分の人には該当しない事を示している。
特にＬＡ−抗体の一定の機能のみを検出するが、血栓生
成の危険性に関しては何も示さないと言う欠点を有して
いる。ＬＡ−抗体と血栓生成の危険性との間のマイナス
の相関性はＬＡ−抗体の生体内効果が知られていないと
いうことで説明される。可能な説明としては、繊維素溶
解活性の妨害（Ｔｓａｋｉｒｉｓ等著、Ｔｈｒｏｍｂ．
Ｈａｅｍｏｓｔａｓ．６１（１９８９）、１７５−１７
７；Ｎｉｌｓｓｏｎ，Ｔ．Ｋ、Ｌｏｅｆｖｅｎｂｅｒ
ｇ，Ｅ．著、Ｃｌｉｎ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．８（１９
８９）、５８−６３）、プロスタサイクリンの形成及び
遊離の遅延（Ｓｃｈｏｒｅｒ等著、Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍ
ａｔｏｌ．７１（１９８９）３９９−４０７）、フォン
ビルブラント因子の遊離の増加（Ｂｙｒｏｎ等著、Ａｎ
ｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．４６（１９８７）、７４１−
７４５）及び妨害された蛋白質Ｃの活性化（Ｔｓａｋｉ
ｒｉｓ等著、Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．１７（１９９
０）、７８５−７８９）が報告されている。これら全て
に対する可能な説明は内皮細胞表面へのＬＡ−抗体の第
１次結合であり、このことは内皮細胞の機能の妨害に導
く。しかしながら、多くの研究はこれらの挙げた病理生
理学的説明がＬＡ−抗体を有する患者の何人かには該当
するが、大部分の人には該当しない事を示している。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の課題
は血栓生成の原因となるＬＡ−抗体を特異的かつ定量的
に測定するための方法を開発することである。このテス
トは簡単で、迅速に実施可能でなければならず、特に血
栓生成の危険性に関して高い特異性を示すべきである。
は血栓生成の原因となるＬＡ−抗体を特異的かつ定量的
に測定するための方法を開発することである。このテス
トは簡単で、迅速に実施可能でなければならず、特に血
栓生成の危険性に関して高い特異性を示すべきである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】この課題は本発明におい
て、活性化蛋白質Ｃの血液凝固システムにおよぼす中和
作用に対するル−プス抗凝血物質（ＬＡ）−抗体による
抑制を介して、血液−、血漿−、組織試料中のこのＬＡ
−抗体を測定するために、この試料に一定量の活性化蛋
白質Ｃを添加し、恒温保持後、試料中の蛋白質Ｃの生理
学的基質の残留量または蛋白質Ｓ−活性を自体公知法で
測定し、かつ存在するＬＡ−抗体の量をＬＡ−抗体を含
有しない標準と比較することにより算出するル−プス抗
凝血物質抗体の測定法により解決する。この方法は、活
性蛋白質Ｃをリン脂質、特に第ＶＩＩＩａ因子又は第Ｖ
ａ因子により蛋白分解するという公知反応に基づいてい
る。種々異なるテスト試料中の蛋白質Ｃの異なる濃度の
問題を回避するために、テスト試料に活性化蛋白質Ｃを
添加し、活性化蛋白質Ｃの抗凝血活性の抑制（中和）を
生理学的基質に関して抗リン脂質抗体の存在において測
定する。ＬＡ−抗体を検出された患者集団において、活
性化蛋白質Ｃ−活性の抑制（中和）の率は測定したＬＡ
−抗体の濃度と相関関係にはない。しかしながら、同じ
患者集団において蛋白質Ｃ−活性の抑制の率は血栓生成
の偶発的発現と良好な相関関係にある。
て、活性化蛋白質Ｃの血液凝固システムにおよぼす中和
作用に対するル−プス抗凝血物質（ＬＡ）−抗体による
抑制を介して、血液−、血漿−、組織試料中のこのＬＡ
−抗体を測定するために、この試料に一定量の活性化蛋
白質Ｃを添加し、恒温保持後、試料中の蛋白質Ｃの生理
学的基質の残留量または蛋白質Ｓ−活性を自体公知法で
測定し、かつ存在するＬＡ−抗体の量をＬＡ−抗体を含
有しない標準と比較することにより算出するル−プス抗
凝血物質抗体の測定法により解決する。この方法は、活
性蛋白質Ｃをリン脂質、特に第ＶＩＩＩａ因子又は第Ｖ
ａ因子により蛋白分解するという公知反応に基づいてい
る。種々異なるテスト試料中の蛋白質Ｃの異なる濃度の
問題を回避するために、テスト試料に活性化蛋白質Ｃを
添加し、活性化蛋白質Ｃの抗凝血活性の抑制（中和）を
生理学的基質に関して抗リン脂質抗体の存在において測
定する。ＬＡ−抗体を検出された患者集団において、活
性化蛋白質Ｃ−活性の抑制（中和）の率は測定したＬＡ
−抗体の濃度と相関関係にはない。しかしながら、同じ
患者集団において蛋白質Ｃ−活性の抑制の率は血栓生成
の偶発的発現と良好な相関関係にある。
【００１２】活性化蛋白質Ｃの基質としては本発明にお
いては活性化蛋白質Ｃの全ての生理学的基質、すなわち
特に第ＶＩＩＩａ因子及び第Ｖａ因子を使用することが
できる。ＬＡ−抗体作用は蛋白質Ｓ−活性の測定のため
のシステムによっても検出される。第ＶＩＩＩａ因子お
よび第Ｖａ因子への活性化蛋白質Ｃの蛋白溶解作用の検
出には、特に凝固テスト、有利に色原体基質を使用する
凝固テスト、およびモノ特異的抗体が好適である。
いては活性化蛋白質Ｃの全ての生理学的基質、すなわち
特に第ＶＩＩＩａ因子及び第Ｖａ因子を使用することが
できる。ＬＡ−抗体作用は蛋白質Ｓ−活性の測定のため
のシステムによっても検出される。第ＶＩＩＩａ因子お
よび第Ｖａ因子への活性化蛋白質Ｃの蛋白溶解作用の検
出には、特に凝固テスト、有利に色原体基質を使用する
凝固テスト、およびモノ特異的抗体が好適である。
【００１３】このテストにおいて活性化蛋白質Ｃの活性
の検出を活性化第ＶＩＩＩａ因子の蛋白溶解により実施
することは、このことが本発明の主要なことではなく、
活性化蛋白質、蛋白質Ｓおよび生理学的基質の間でのリ
ン脂質依存反応の抑制を把握することだけが問題である
にもかかわらず、特に有利である。すなわち、本発明方
法の範囲においては、活性化蛋白質Ｃの酵素作用はＬＡ
−抗体に依存して測定される。
の検出を活性化第ＶＩＩＩａ因子の蛋白溶解により実施
することは、このことが本発明の主要なことではなく、
活性化蛋白質、蛋白質Ｓおよび生理学的基質の間でのリ
ン脂質依存反応の抑制を把握することだけが問題である
にもかかわらず、特に有利である。すなわち、本発明方
法の範囲においては、活性化蛋白質Ｃの酵素作用はＬＡ
−抗体に依存して測定される。
【００１４】本発明においては有利に精製した蛋白質
Ｃ、すなわち特に組替えにより製造した蛋白質Ｃを使用
する。
Ｃ、すなわち特に組替えにより製造した蛋白質Ｃを使用
する。
【００１５】本発明方法においては、蛋白質Ｃの活性化
は有利にトロンビン又はヘビ毒により行い、特に固層に
結合したトロンビン又はヘビ毒により行う。この際、Ｃ
ＮＢｒ−活性化セファロ−ス４Ｂへの結合は、製造業者
がだしているパンフレットにより行った：親和クロマト
グラフィ−中“ＣＮＢｒ−活性化セファロ−ス４Ｂへの
結合法”、原理および方法（Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＬＫ
Ｂ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｕｐｐｓａｌａ、Ｓ
ｗｅｄｅｎ、Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓｂｒｏｓｃｈｕ
ｅｒｅ）。
は有利にトロンビン又はヘビ毒により行い、特に固層に
結合したトロンビン又はヘビ毒により行う。この際、Ｃ
ＮＢｒ−活性化セファロ−ス４Ｂへの結合は、製造業者
がだしているパンフレットにより行った：親和クロマト
グラフィ−中“ＣＮＢｒ−活性化セファロ−ス４Ｂへの
結合法”、原理および方法（Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＬＫ
Ｂ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｕｐｐｓａｌａ、Ｓ
ｗｅｄｅｎ、Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓｂｒｏｓｃｈｕ
ｅｒｅ）。
【００１６】活性化蛋白質Ｃの基質の低い活性で血漿フ
ラクション、もしくは細胞抽出物又は穿刺液中の血栓生
成を引き起こすＬＡ−抗体を測定するためには、試料の
前処置が必要であることがある。その際には、蛋白質Ｃ
のための生理学的基質、特に第ＶＩＩＩａ因子又は第Ｖ
ａ因子を患者血漿に添加する。
ラクション、もしくは細胞抽出物又は穿刺液中の血栓生
成を引き起こすＬＡ−抗体を測定するためには、試料の
前処置が必要であることがある。その際には、蛋白質Ｃ
のための生理学的基質、特に第ＶＩＩＩａ因子又は第Ｖ
ａ因子を患者血漿に添加する。
【００１７】この際、標識付け、特に色素、例えば、蛍
光色素で標識付けした基質、特に第Ｖａ因子、第ＶＩＩ
Ｉａ因子を添加するのが、特に有利である。
光色素で標識付けした基質、特に第Ｖａ因子、第ＶＩＩ
Ｉａ因子を添加するのが、特に有利である。
【００１８】活性化蛋白質Ｃと共に蛋白質Ｓを試料に添
加することは十分な複合体を確実にするので、有利であ
る。
加することは十分な複合体を確実にするので、有利であ
る。
【００１９】特に有利な実施形ににおいては、テストす
べき血漿を活性化蛋白質Ｃと共に恒温保持し、引き続
き、それぞれ測定すべき基質により相応する欠乏血漿、
すなわち第ＶＩＩＩａ因子−または第Ｖａ因子−欠乏血
漿を残留第ＶＩＩＩａ因子の活性測定のために凝固テス
トに添加する。
べき血漿を活性化蛋白質Ｃと共に恒温保持し、引き続
き、それぞれ測定すべき基質により相応する欠乏血漿、
すなわち第ＶＩＩＩａ因子−または第Ｖａ因子−欠乏血
漿を残留第ＶＩＩＩａ因子の活性測定のために凝固テス
トに添加する。
【００２０】本発明により簡単で、迅速に実施可能なＡ
ＰＣの抗凝血活性の中和活性の測定が可能となり、これ
は疾病の診断および治療に有利に適用することができ
る。ＬＡ−抗体の形成との関連において、これは血栓生
成性の体質の診断法、または疾病により引き起こされる
血栓生成の危険性の診断法、または治療の観察を提供
し、このことも本発明の更なる課題である。本発明方法
はＬＡ−抗体の測定を血漿から抗体を単離することなく
実施することを可能にする。この測定は直接患者の血
液、血漿または穿刺液中で実施することができ、これに
相応して迅速であり、かつ他のテスト方法に比較して安
い。
ＰＣの抗凝血活性の中和活性の測定が可能となり、これ
は疾病の診断および治療に有利に適用することができ
る。ＬＡ−抗体の形成との関連において、これは血栓生
成性の体質の診断法、または疾病により引き起こされる
血栓生成の危険性の診断法、または治療の観察を提供
し、このことも本発明の更なる課題である。本発明方法
はＬＡ−抗体の測定を血漿から抗体を単離することなく
実施することを可能にする。この測定は直接患者の血
液、血漿または穿刺液中で実施することができ、これに
相応して迅速であり、かつ他のテスト方法に比較して安
い。
【００２１】本発明の更なる課題は血栓生成の原因とな
るＬＡ−抗体の測定に好適な試薬であり、これは活性化
蛋白質Ｃを凝固テスト、有利には第ＶＩＩＩａ因子−活
性テストの成分と組み合わせて含有する。
るＬＡ−抗体の測定に好適な試薬であり、これは活性化
蛋白質Ｃを凝固テスト、有利には第ＶＩＩＩａ因子−活
性テストの成分と組み合わせて含有する。
【００２２】
【実施例】次に、本発明を実施例、及び図面につき詳細
に説明する。
に説明する。
【００２３】図１は第ＶＩＩＩ因子活性テストの凝固時
間を活性化蛋白質Ｃの濃度に対して示したグラフ図であ
る。
間を活性化蛋白質Ｃの濃度に対して示したグラフ図であ
る。
【００２４】図２は患者の血漿から単離した、免疫グロ
ブリンのＡＰＣ抗凝血物質−中和活性（ＡＰＣ−ＡＮ
Ａ）を正常な免疫グロブリンに対し比較したグラフ図で
ある。測定した凝固時間と相当するＡＰＣ−ＡＮＡ値を
示す。例１に記載した方法により測定した中和活性を免
疫グロブリン濃度に対して示した。
ブリンのＡＰＣ抗凝血物質−中和活性（ＡＰＣ−ＡＮ
Ａ）を正常な免疫グロブリンに対し比較したグラフ図で
ある。測定した凝固時間と相当するＡＰＣ−ＡＮＡ値を
示す。例１に記載した方法により測定した中和活性を免
疫グロブリン濃度に対して示した。
【００２５】実施例１： 正常血漿中のＡＰＣ−誘発第ＶＩＩＩ因子不活性化の測
定 Ａ） 試薬中の標準化酵素としての活性化蛋白質Ｃの製
造 セファロ−スに結合したトロンビンを精製した蛋白質Ｃ
と共に３７℃で１時間恒温保持する。トロンビン対蛋白
質Ｃの比は１：３０（ｍｏｌ／ｍｏｌ）である。使用し
た蛋白質Ｃが完全に活性化したことを確認するために、
生じた活性化蛋白質Ｃ（ＡＰＣ）の量を蛋白質Ｃ活性テ
ストで測定する。蛋白質Ｃ活性は色原体基質を使用して
実証される。ＡＰＣはテストに使用するまで凍結乾燥し
て保存することができる。
定 Ａ） 試薬中の標準化酵素としての活性化蛋白質Ｃの製
造 セファロ−スに結合したトロンビンを精製した蛋白質Ｃ
と共に３７℃で１時間恒温保持する。トロンビン対蛋白
質Ｃの比は１：３０（ｍｏｌ／ｍｏｌ）である。使用し
た蛋白質Ｃが完全に活性化したことを確認するために、
生じた活性化蛋白質Ｃ（ＡＰＣ）の量を蛋白質Ｃ活性テ
ストで測定する。蛋白質Ｃ活性は色原体基質を使用して
実証される。ＡＰＣはテストに使用するまで凍結乾燥し
て保存することができる。
【００２６】Ｂ） テストの実施 １．） ２工程テスト 混合物中のＡＰＣの最終濃度が０．１から１．５μＭに
なるように、試料溶液５０μｌをＡＰＣ２００μｌに添
加する。ＡＰＣおよび試料溶液を混合し、かつ２分間３
７℃で恒温保持する。引き続き混合物１００μｌを第Ｖ
ＩＩＩａ因子欠乏血漿１００μｌおよび部分トロンボプ
ラスチン時間測定用試薬１００μｌと混合する。第ＶＩ
ＩＩａ因子−活性の測定に関して前記のように再度恒温
保持時間を取った後、塩化カルシウム１００μｌ（２５
ｍＭ）を添加することにより開始する。塩化カルシウム
溶液の添加の開始から凝固物の発現迄の時間は可視で、
又は自動装置を使用して記録する。
なるように、試料溶液５０μｌをＡＰＣ２００μｌに添
加する。ＡＰＣおよび試料溶液を混合し、かつ２分間３
７℃で恒温保持する。引き続き混合物１００μｌを第Ｖ
ＩＩＩａ因子欠乏血漿１００μｌおよび部分トロンボプ
ラスチン時間測定用試薬１００μｌと混合する。第ＶＩ
ＩＩａ因子−活性の測定に関して前記のように再度恒温
保持時間を取った後、塩化カルシウム１００μｌ（２５
ｍＭ）を添加することにより開始する。塩化カルシウム
溶液の添加の開始から凝固物の発現迄の時間は可視で、
又は自動装置を使用して記録する。
【００２７】２．） １工程テスト 混合物中のＡＰＣ及び試料の最終濃度が０．０１から
１．５μＭになるように、試料溶液２０μｌをＡＰＣ８
０μｌに添加する。ＡＰＣおよび試料溶液を混合し、か
つ２分間３７℃で恒温保持する。引き続き反応混合物１
００μｌに第ＶＩＩＩａ因子欠乏血漿１００μｌおよび
部分トロンボプラスチン時間測定用試薬１００μｌを添
加し、かつ混合する。第ＶＩＩＩ因子−活性の測定に関
して前記のように再度恒温保持時間を取った後、塩化カ
ルシウム１００μｌ（２５ｍＭ）を添加することにより
開始する。塩化カルシウム溶液の添加の開始から凝固物
の発現迄の時間は可視で、又は自動装置を使用して記録
する。
１．５μＭになるように、試料溶液２０μｌをＡＰＣ８
０μｌに添加する。ＡＰＣおよび試料溶液を混合し、か
つ２分間３７℃で恒温保持する。引き続き反応混合物１
００μｌに第ＶＩＩＩａ因子欠乏血漿１００μｌおよび
部分トロンボプラスチン時間測定用試薬１００μｌを添
加し、かつ混合する。第ＶＩＩＩ因子−活性の測定に関
して前記のように再度恒温保持時間を取った後、塩化カ
ルシウム１００μｌ（２５ｍＭ）を添加することにより
開始する。塩化カルシウム溶液の添加の開始から凝固物
の発現迄の時間は可視で、又は自動装置を使用して記録
する。
【００２８】実施例２ 人患者血漿から単離した免疫グロブリンのＡＰＣ抗凝血
物質−中和活性（ＡＰＣ−ＡＮＡ）の測定。
物質−中和活性（ＡＰＣ−ＡＮＡ）の測定。
【００２９】テストの特異性を明示するために患者血漿
から免疫グロブリンフラクションを単離し、前記テスト
における免疫グロブリンの効果を投与量−作用曲線で決
定する。患者血漿からの免疫グロブリンと正常免疫グロ
ブリンをＡＰＣと共に３７℃で５分間恒温保持した。引
き続き、第ＶＩＩＩ因子−欠乏血漿、部分トロンボプラ
スチン時間測定用試薬を、かつ再度の恒温保持時間の
後、塩化カルシウムを添加する。図２は患者−ＩｇＧの
ＩｇＧ−濃度の上昇と共にＡＰＣ−抗凝血活性の抑制
（中和）が増大する。中和活性０％が活性化第ＶＩＩＩ
ａ因子の最大蛋白分解を示す。このテストにおいて凝固
時間約１４０秒が測定される（図１参照）。中和活性１
００％はＡＰＣ−抗凝血活性の１００％中和を示し、こ
れは活性化蛋白質Ｃの変わりに非活性化蛋白質Ｃまたは
生理食塩水をテスト配合物中に使用した場合の凝固時間
に相当する（図１）。
から免疫グロブリンフラクションを単離し、前記テスト
における免疫グロブリンの効果を投与量−作用曲線で決
定する。患者血漿からの免疫グロブリンと正常免疫グロ
ブリンをＡＰＣと共に３７℃で５分間恒温保持した。引
き続き、第ＶＩＩＩ因子−欠乏血漿、部分トロンボプラ
スチン時間測定用試薬を、かつ再度の恒温保持時間の
後、塩化カルシウムを添加する。図２は患者−ＩｇＧの
ＩｇＧ−濃度の上昇と共にＡＰＣ−抗凝血活性の抑制
（中和）が増大する。中和活性０％が活性化第ＶＩＩＩ
ａ因子の最大蛋白分解を示す。このテストにおいて凝固
時間約１４０秒が測定される（図１参照）。中和活性１
００％はＡＰＣ−抗凝血活性の１００％中和を示し、こ
れは活性化蛋白質Ｃの変わりに非活性化蛋白質Ｃまたは
生理食塩水をテスト配合物中に使用した場合の凝固時間
に相当する（図１）。
【００３０】実施例３ 人血漿試料中のＡＰＣ−抗凝血物質−中和活性の測定。
【００３１】正常血漿（健康な献血者約２０人の血漿を
プールしたもの）中の及び患者血漿中の中和活性を測定
するために、実施例１中で記載した実験配合物中に試料
溶液としてプール血漿または患者血漿を使用する。テス
ト結果としては正常プール血漿に関して濃度１μＭで活
性化蛋白質Ｃを使用する際約１４０秒の凝固時間が測定
される（図１及び第１表）。正常血漿の変わりに患者血
漿を使用すると、凝固時間は約７０秒になる（第１
表）。同じ患者血漿を非活性蛋白質Ｃと恒温保持する
と、患者血漿を生理食塩溶液と恒温保持することにより
得られた値と同じ凝固時間が得られた（第１表）。この
凝固時間は、場合により正常血漿におけるよりわずかに
長い、それというのもＬＡ−抗体はＡＰＣ−中和活性を
示すだけでなく、凝固テストにおいて更なる工程で反応
するためである。この理由からＡＰＣ−抗凝血物質−中
和活性の測定のために、患者血漿をＡＰＣと恒温保持す
る値と、患者血漿を非活性化蛋白質Ｃと恒温保持する値
との差を選ぶ（第１表）。
プールしたもの）中の及び患者血漿中の中和活性を測定
するために、実施例１中で記載した実験配合物中に試料
溶液としてプール血漿または患者血漿を使用する。テス
ト結果としては正常プール血漿に関して濃度１μＭで活
性化蛋白質Ｃを使用する際約１４０秒の凝固時間が測定
される（図１及び第１表）。正常血漿の変わりに患者血
漿を使用すると、凝固時間は約７０秒になる（第１
表）。同じ患者血漿を非活性蛋白質Ｃと恒温保持する
と、患者血漿を生理食塩溶液と恒温保持することにより
得られた値と同じ凝固時間が得られた（第１表）。この
凝固時間は、場合により正常血漿におけるよりわずかに
長い、それというのもＬＡ−抗体はＡＰＣ−中和活性を
示すだけでなく、凝固テストにおいて更なる工程で反応
するためである。この理由からＡＰＣ−抗凝血物質−中
和活性の測定のために、患者血漿をＡＰＣと恒温保持す
る値と、患者血漿を非活性化蛋白質Ｃと恒温保持する値
との差を選ぶ（第１表）。
【００３２】
【表１】
【図１】第ＶＩＩＩ因子活性テストの凝固時間を活性化
蛋白質Ｃの濃度に対して示したグラフ図である。
蛋白質Ｃの濃度に対して示したグラフ図である。
【図２】患者の血漿から単離した、免疫グロブリンのＡ
ＰＣ抗凝血物質−中和活性（ＡＰＣ−ＡＮＡ）を正常な
免疫グロブリンに対し比較したグラフ図である。
ＰＣ抗凝血物質−中和活性（ＡＰＣ−ＡＮＡ）を正常な
免疫グロブリンに対し比較したグラフ図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 クリストフ ゼーリヒ ドイツ連邦共和国 アスラー エレオノー レンシュトラーセ 25
Claims (14)
- 【請求項１】 活性化蛋白質Ｃの血液凝固システムにお
よぼす中和作用に対するル−プス抗凝血物質（ＬＡ）−
抗体による抑制を介して、血液−、血漿−、組織試料中
のこのＬＡ−抗体を測定するために、この試料に一定量
の活性化蛋白質Ｃを添加し、恒温保持後、試料中の蛋白
質Ｃの生理学的基質の残留量または蛋白質Ｓ−活性を自
体公知法で測定し、かつ存在するＬＡ−抗体の量をＬＡ
−抗体を含有しない標準と比較することにより算出する
事を特徴とするル−プス抗凝血物質抗体の測定法。 - 【請求項２】 精製した蛋白質Ｃを使用する請求項１記
載の方法。 - 【請求項３】 組み替えにより製造された蛋白質Ｃを使
用する請求項１または２記載の方法。 - 【請求項４】 トロンビンまたはヘビ毒により活性化さ
れた蛋白質Ｃを使用する請求項１から３のいずれか１項
記載の方法。 - 【請求項５】 活性化のために固層に結合したトロンビ
ンまたはヘビ毒を使用する請求項４記載の方法。 - 【請求項６】 蛋白質Ｃ−基質として第Ｖａ因子または
第ＶＩＩＩａ因子を使用する請求項１から５のいずれか
１項記載の方法。 - 【請求項７】 第Ｖａ因子または第ＶＩＩＩａ因子の残
留量を凝固テストにより測定する請求項６記載の方法。 - 【請求項８】 凝固テストにおいて色原体基質またはモ
ノ特異的抗体を使用する請求項７記載の方法。 - 【請求項９】 試料に蛋白質Ｃの生理学的基質を添加す
る請求項１から８のいずれか１項記載の方法。 - 【請求項１０】 標識付けした第Ｖａ因子及び第ＶＩＩ
Ｉａ因子を添加する請求項９記載の方法。 - 【請求項１１】 生理学的基質の残留量または蛋白質Ｓ
−活性の測定の際に第Ｖａ因子−、第ＶＩＩＩａ因子−
もしくは蛋白質Ｓ−欠乏血漿を使用する請求項１から１
０までのいずれか１項記載の方法。 - 【請求項１２】 活性化蛋白質Ｃと蛋白質Ｓとからなる
複合体を試料に添加する請求項１から１１までのいずれ
か１項記載の方法。 - 【請求項１３】 活性化蛋白質Ｃを０．１から１．５μ
Ｍまでの量で添加する請求項１から１２までのいずれか
１項記載の方法。 - 【請求項１４】 血液−、血漿−、組織試料中のル−プ
ス抗凝血物質抗体を測定するための試薬において、常用
の血液凝固テストの成分および活性化蛋白質Ｃを含有す
ることを特徴とするル−プス抗凝血物質抗体の測定試
薬。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4229933A DE4229933A1 (de) | 1992-09-08 | 1992-09-08 | Verfahren zur Bestimmung von Thrombose verursachenden Lupus-anticoagulant-Antikörpern |
| DE4229933.0 | 1992-09-08 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06174721A true JPH06174721A (ja) | 1994-06-24 |
| JP3461871B2 JP3461871B2 (ja) | 2003-10-27 |
Family
ID=6467450
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22319893A Expired - Fee Related JP3461871B2 (ja) | 1992-09-08 | 1993-09-08 | ル−プス抗凝血物質抗体の測定法及び測定試薬 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5610024A (ja) |
| EP (1) | EP0587090B1 (ja) |
| JP (1) | JP3461871B2 (ja) |
| AT (1) | ATE148233T1 (ja) |
| AU (1) | AU674149B2 (ja) |
| CA (1) | CA2105606C (ja) |
| DE (2) | DE4229933A1 (ja) |
| DK (1) | DK0587090T3 (ja) |
| ES (1) | ES2099876T3 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013178245A (ja) * | 2012-02-28 | 2013-09-09 | Siemens Healthcare Diagnostics Products Gmbh | 抗リン脂質抗体を有する試料を見出すためのスクリーニング方法 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996003655A1 (en) * | 1994-07-23 | 1996-02-08 | Boehringer Mannheim Gmbh | Method for the determination of the prethrombotic state |
| DE19749197A1 (de) * | 1997-11-07 | 1999-05-12 | Dade Behring Marburg Gmbh | Verfahren zur Bestimmung des antikoagulatorischen Potentials einer Probe |
| RU2181203C2 (ru) * | 1999-03-23 | 2002-04-10 | Алтайский государственный медицинский университет | Способ определения волчаночного антикоагулянта |
| US6777193B1 (en) * | 2000-08-04 | 2004-08-17 | Escuela Nacional De Ciencias Biologicas, Del Instituto Politecnico Nacional | Methods for diagnostic and/or treatment of antiphospholipids antibodies-related diseases, and devices |
| RU2239197C1 (ru) * | 2003-01-23 | 2004-10-27 | Межрегиональная благотворительная общественная организация инвалидов "Общество больных гемофилией" | Способ определения волчаночного антикоагулянта |
| CN114740211A (zh) * | 2022-03-11 | 2022-07-12 | 武汉亚洲心脏病医院 | 新型抗凝药中和试管 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US505135A (en) | 1893-09-19 | Rail-heating device | ||
| US4959318A (en) * | 1985-06-27 | 1990-09-25 | Zymogenetics, Inc. | Expression of protein C |
| US4908314A (en) * | 1987-07-02 | 1990-03-13 | American National Red Cross | Protein C activator |
| SE464135B (sv) * | 1989-07-14 | 1991-03-11 | Kabivitrum Ab | Foerfarande foer bestaemning av funktionell aktivitet av fritt protein s eller protein c i ett plasmaprov |
| US5051357A (en) * | 1989-07-14 | 1991-09-24 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Method and assay using inactivation of factors Va and VIIIa by activated Protein C to diagnose thrombic disease or assay for Protein C and kit therefor |
| AU648775B2 (en) * | 1990-12-07 | 1994-05-05 | Liposome Company, Inc., The | Lipid-dependent diagnostic assays |
| JP2562000B2 (ja) * | 1991-11-13 | 1996-12-11 | ダールベツク，ビヨルン | 血液凝固疾患の診断方法 |
| JPH05180835A (ja) * | 1991-12-27 | 1993-07-23 | S R L:Kk | ループスアンチコアグラントの測定方法 |
| US5472852A (en) * | 1993-09-15 | 1995-12-05 | Oklahoma Medical Research Foundation | Assay for detection of selective Protein C inhibition by patients |
-
1992
- 1992-09-08 DE DE4229933A patent/DE4229933A1/de not_active Withdrawn
-
1993
- 1993-08-25 AU AU44845/93A patent/AU674149B2/en not_active Ceased
- 1993-09-06 EP EP93114270A patent/EP0587090B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-06 DK DK93114270.7T patent/DK0587090T3/da active
- 1993-09-06 AT AT93114270T patent/ATE148233T1/de active
- 1993-09-06 DE DE59305225T patent/DE59305225D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-06 ES ES93114270T patent/ES2099876T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-07 CA CA002105606A patent/CA2105606C/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-09-08 JP JP22319893A patent/JP3461871B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1995
- 1995-03-29 US US08/412,854 patent/US5610024A/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013178245A (ja) * | 2012-02-28 | 2013-09-09 | Siemens Healthcare Diagnostics Products Gmbh | 抗リン脂質抗体を有する試料を見出すためのスクリーニング方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0587090B1 (de) | 1997-01-22 |
| DK0587090T3 (da) | 1997-07-07 |
| ES2099876T3 (es) | 1997-06-01 |
| CA2105606C (en) | 2004-07-06 |
| AU4484593A (en) | 1994-03-17 |
| AU674149B2 (en) | 1996-12-12 |
| DE59305225D1 (de) | 1997-03-06 |
| DE4229933A1 (de) | 1994-03-10 |
| ATE148233T1 (de) | 1997-02-15 |
| CA2105606A1 (en) | 1994-03-09 |
| US5610024A (en) | 1997-03-11 |
| JP3461871B2 (ja) | 2003-10-27 |
| EP0587090A1 (de) | 1994-03-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wisløff et al. | Laboratory diagnosis of the antiphospholipid syndrome | |
| Dahlbaeck et al. | Binding of anticoagulant vitamin K-dependent protein S to platelet-derived microparticles | |
| Kurantsin‐Mills et al. | Plasma factor VII and thrombin–antithrombin III levels indicate increased tissue factor activity in sickle cell patients | |
| Amiral et al. | Application of enzyme immunoassays to coagulation testing. | |
| US6027904A (en) | Platelet count assay using thrombospondin or β-thromboglobulin | |
| US5051357A (en) | Method and assay using inactivation of factors Va and VIIIa by activated Protein C to diagnose thrombic disease or assay for Protein C and kit therefor | |
| US20110201017A1 (en) | Lupus anticoagulent testing | |
| CA2333890A1 (en) | Corn trysin inhibitor stabilizes blood-derived plasma and improves sensitivity of plasma clotting assays | |
| Urbanus et al. | Antiphospholipid antibodies—we are not quite there yet | |
| US5766869A (en) | Factor V ratio blood test for susceptibility to thromboembolism | |
| CA2155503C (en) | A method for detecting defects in protein c/protein s mediated blood clotting | |
| Passam et al. | Laboratory tests for the antiphospholipid syndrome: current concepts | |
| JP3461871B2 (ja) | ル−プス抗凝血物質抗体の測定法及び測定試薬 | |
| Bardin et al. | Does the anti-prothrombin antibodies measurement provide additional information in patients with thrombosis? | |
| Lopes et al. | Abnormal degradation of von Willebrand factor main subunit in pulmonary hypertension | |
| US5308756A (en) | Protein S chromogenic assay | |
| Laffan et al. | 17 Investigation of a thrombotic tendency | |
| Mackie et al. | Lupus anticoagulant measurement | |
| CA2757585C (en) | Enhanced cleavage of von willebrand factor by adamts13 | |
| Falanga et al. | Hemostatic system activation in patients with lupus anticoagulant and essential thrombocythemia | |
| US5840499A (en) | Method and kit for detection of thrombin receptor activation of platelets and other cells | |
| EP1920068A1 (en) | Lupus anticoagulant testing | |
| US5529905A (en) | Method of assaying plasma proteins with prothrombin fragments | |
| Grypiotis et al. | Use of a new silica clotting time for diagnosing lupus anticoagulant in patients who meet the clinical criteria for antiphospholipid syndrome | |
| WO1995027209A1 (en) | Method and kit for detection of thrombin receptor activation of platelets and other cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080815 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090815 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100815 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110815 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110815 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120815 Year of fee payment: 9 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |