JPH06179628A

JPH06179628A - 創傷治癒促進剤

Info

Publication number: JPH06179628A
Application number: JP18500993A
Authority: JP
Inventors: Kenji Saeki; 健二佐伯; Toshio Asano; 敏雄浅野
Original assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1992-08-26
Filing date: 1993-07-27
Publication date: 1994-06-28

Abstract

(57)【要約】【構成】一般式〔１〕（式中、ＲはＡｌａ−ＮＨ−、Ｓｅｒ−ＮＨ−、ＮＨ₂
またはＨ、ＹはＳまたはＣＨ₂、ＡはＡｓｐまたはＡｓ
ｎ、ＢはＧｌｙ、ＡｓｐまたはＧｌｕ、ＣはＬｅｕまた
はＰｈｅ、ＤはＶａｌまたはＭｅｔ、ＥはＶａｌまたは
Ｇｌｙ、ＦはＡｓｎ、ＳｅｒまたはＡｓｐ、ＧはＡｓｎ
またはＡｓｐ、ＩはＬｙｓまたはＧｌｕを示すが、Ｙが
Ｓ、ＡがＡｓｎ、ＢがＡｓｐ、ＣがＰｈｅ、ＤがＶａ
ｌ、ＥがＧｌｙ、ＦがＡｓｎ、ＧがＡｓｎ、ＩがＬｙｓ
のときは、ＲはＨではない）で示されるカルシトニン遺
伝子関連ペプチド誘導体またはその塩を有効成分として
含有することを特徴とする創傷治療剤である。【効果】受傷時に本有効成分を静脈内、筋肉内または
皮下に投与するか、あるいは外用剤により投与すること
により、創傷部の再上皮化、肉芽形成および血管新生の
増生が促進され、炎症性細胞湿潤の抑制が顕著であり、
創傷の治癒に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、例えば手術、交通事
故、長期間の寝たきり状態など何らかの原因で人体が受
傷した場合における創傷治癒促進剤に関するものであ
り、さらに詳しく言えば、後記一般式〔１〕で示される
カルシトニン遺伝子関連ペプチド（以下、「ＣＧＲＰ」
と称する）を有効成分とすることを特徴とする創傷治癒
促進剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】例えば、手術、交通事故、長期間の寝た
きり状態など何らかの原因で人体が受傷したり、褥瘡が
形成された場合、治療といえば、受傷部を消毒、縫合
し、生体の自然の回復力によって受傷部が治癒するのを
待つのが常法である。しかしながら、回復までに長時間
を要し、痛みを初めとした患者の苦痛は並み大抵のもの
でなく、また細菌感染による傷の悪化も懸念される。こ
のような症例では、傷の治癒を人為的に早めてやること
が望まれるが、現在の治療方法では、痛みに対しては鎮
痛剤を、感染の危険に対しては抗生物質を処方するとい
った対症療法に終始するばかりであり、傷の修復そのも
のを早める薬剤が切望されている。

【０００３】ヒトカルシトニン遺伝子関連ペプチド（以
下、「ｈ−ＣＧＲＰ」と称する）は骨代謝、中枢神経系
に作用するペプチドとして知られている〔Ｎａｔｕｒ
ｅ，３０８（１９），７４６−７４８（１９８４）、Ｆ
ＥＢＳＬｅｔｔｅｒｓ，１８３（２），４０３（１９
８５）、Ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅｓ，４，４２５−４
３４（１９８４）、Ｎａｔｕｒｅ，３１３（３），５４
−５６（１９８４）〕。また、ｈ−ＣＧＲＰなどのＣＧ
ＲＰは皮膚から吸収され、その血管拡張作用及び血流促
進作用により育毛剤として有用であるとの報告（特開平
３−４４３１３）がある。

【０００４】この血管拡張作用および血流促進作用によ
り血管柄付皮弁の生存率を上昇させるとの報告（Ｅｕｒ
ｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｏ
ｌｏｇｙ，１４２，３５５−３５８（１９８７）、Ｓｃ
ａｎｄｉｎａｖｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａ
ｓｔｉｃａｎｄＲｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅＳｕ
ｒｇｅｒｙ，２３，１１−１６（１９８９）、Ｂｒｉｔ
ｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｓｔｉｃＳｕ
ｒｇｅｒｙ，４３，４４７−４５１（１９９０）〕があ
る。

【０００５】また、ｈ−ＣＧＲＰは培養血管内皮細胞増
殖作用〔ＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＰｅｐｔｉｄｅｓ，２
５，１−９（１９８９）、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏ
ｆＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙＳｃｉｅｎｃｅ
Ｕ．Ｓ．Ａ．，８７，３２９９−３３０３（１９９
０）、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｔｉｏｎａｌＣａ
ｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，２７（６），７８１−
７８５（１９９１）〕、血管新生作用〔Ｉｎｔｅｒｎａ
ｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＲａｄｉａｔｉ
ｏｎＢｉｏｌｏｇｙ，６０（１−２），７１−７２
（１９９１）〕があることが知られている。

【０００６】さらにまた、抗炎症作用〔Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｃａｌａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌＲｅｓｅ
ａｒｃｈＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１８０
（３），１４２９−１４３５（１９９１）〕、炎症増強
作用（ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａ
ｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１０３，１５１５−１５１９（１
９９１）、ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ，１４６，３４２４−３４３０（１９９
１〕）があるとの報告もある。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、血管柄
付皮弁の生存率を確認するモデルは皮弁につながる血管
の収縮による皮膚の虚血性壊死を抑制できるか否かを判
定するもので、血管の収縮抑制もしくは血管拡張作用を
有する薬物の効果を確認するモデルであり〔Ｓｃａｎｄ
ｉｎａｖｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｓｔｉ
ｃａｎｄＲｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅＳｕｒｇ
ｅｒｙ，１０，１６９−１７２（１９７６〕）であり、
前述のこのモデルでの報告はｈ−ＣＧＲＰの血流改善効
果を示したに過ぎず、創傷治療効果を期待したものでは
ない。血流改善効果だけでは創傷の悪化を防ぐ〔褥瘡の
治療と対策、医薬ジャ−ナル社、６３（１９９２）〕だ
けに過ぎない。

【０００８】また、薬理学者によると傷の修復には傷の
穴を埋める肉芽組織の形成と穴をふさぐ上皮の再生が必
要であり、そのためには血管の新生が必要とされてお
り、この能力の高い個体ほど回復も早いことが示唆され
ている。

【０００９】従って、血管新生をうながす薬剤では傷の
修復を早め、患者の病悩期間を軽減する創傷治療効果が
考えられる。しかし、血管新生をうながす薬剤の全てが
創傷治療を促進させるわけではなく、例えば、塩基性線
維芽細胞増殖因子はマウスを用いた創傷（皮膚欠損）モ
デルにおいて血管の新生および肉芽組織の形成を促進さ
せるが、上皮の再生は全く促進させないため〔Ｊｏｕｒ
ｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭｅｄｉｃ
ｉｎｅ，１７２，２４５−２５１（１９９０）〕、傷の
穴を早く埋めてふさぐという創傷治療剤の効果としては
満足できるものではない。

【００１０】また、この他に血管を新生させる物質とし
て、ガン細胞由来血管新生因子、ヒドロキシエイコサテ
トラエン酸、ロイコトリエンＤ₄なども知られている
が、これらは生体内微量成分で大量調製が難しいのみな
らず起炎性、気道収縮性などの副作用を有するため、や
はり創傷治療剤として満足すべきものではない。

【００１１】炎症は傷の修復初期に関与するとされてお
り、炎症の増強があると傷の修復が遅れるとされてい
る。また、抗炎症作用を有する薬剤も血管新生を抑制
し、肉芽組織形成を抑制することが知られ〔Ｂｒｉｔｉ
ｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇ
ｙ，２９，３７８（１９６７）〕、傷の修復が遅れると
されている。従って、生体の複雑な生理機構を考えれ
ば、基礎的に血管新生能や抗炎症作用を有する薬剤であ
っても、実際に創傷治療剤として有用であるかどうかに
ついては、後述の創傷モデルに対して効果を示さない限
り創傷治療剤としての有効性が示されるものではない。

【００１２】

【課題を解決するための手段】かかる現状において、本
発明者らは優れた創傷治療剤を開発すべく鋭意研究を重
ねた結果、下記一般式〔１〕で示されるＣＧＲＰが創傷
部に再上皮化、肉芽組織の形成および血管新生の増生が
促進され、炎症性細胞浸潤の抑制が顕著であり、創傷治
療剤として有効に使用し得ることを見出した。

【００１３】本発明はかかる知見に基づき完成されたも
のである。すなわち、本発明は一般式〔１〕

【００１４】（式中、ＲはＡｌａ−ＮＨ−、Ｓｅｒ−Ｎ
Ｈ−、ＮＨ₂またはＨ、ＹはＳまたはＣＨ₂、ＡはＡｓ
ｐまたはＡｓｎ、ＢはＧｌｙ、ＡｓｐまたはＧｌｕ、Ｃ
はＬｅｕまたはＰｈｅ、ＤはＶａｌまたはＭｅｔ、Ｅは
ＶａｌまたはＧｌｙ、ＦはＡｓｎ、ＳｅｒまたはＡｓ
ｐ、ＧはＡｓｎまたはＡｓｐ、ＩはＬｙｓまたはＧｌｕ
を示すが、ＹがＳ、ＡがＡｓｎ、ＢがＡｓｐ、ＣがＰｈ
ｅ、ＤがＶａｌ、ＥがＧｌｙ、ＦがＡｓｎ、ＧがＡｓ
ｎ、ＩがＬｙｓのときは、ＲはＨではない）で示される
ＣＧＲＰまたはその塩を有効成分として含有することを
特徴とする創傷治癒促進剤である。

【００１５】本発明において、一般式〔１〕で示される
具体的な物質としては、例えば次のＣＧＲＰまたはその
誘導体を挙げることができる。

【００１６】

【表１】

【００１７】また、前記一般式〔１〕で示されるＣＧＲ
Ｐの塩としては、薬理学的に非毒性の塩が適宜使用され
る。例えば、塩酸、硫酸などの無機酸との塩、酢酸、酒
石酸、コハク酸、リンゴ酸などの有機酸との塩が挙げら
れる。

【００１８】本発明の一般式〔１〕で示されるＣＧＲＰ
としては、ｈ−ＣＧＲＰ、ニワトリＣＧＲＰ（ｃ−ＣＧ
ＲＰ）、それらの誘導体が挙げられるが、ペプチド合成
技術による公知の方法、例えば、特表昭６１−５００１
１９号公報、国際特許公開ＷＯ８５０２８４０号明細
書、特開昭６２−１２９２９７号公報、特開昭６３−１
２６８９４号公報、特開昭６３−２５８４９０号公報、
特開昭６４−２６５９８号公報、特開平２−１３８１９
６号公報などに記載されている方法により合成すること
ができる。

【００１９】一般式〔１〕で示されるＣＧＲＰまたはそ
の塩（以下、「本有効成分」と称する）を創傷治療剤と
して用いる場合、単独または薬剤として許容されうる担
体と複合して投与される。その組成は、投与経路や投与
計画等によって適宜決定される。

【００２０】本有効成分は、非経口的に投与するのが好
ましい。例えば、静脈内または筋肉内に投与することが
できる。また、外用剤とし経皮的に投与することもでき
る。投与量は、本有効成分の種類によって異なるが、通
常、非経口の場合、成人において１日約０．１μｇ〜２
００ｍｇが好ましい。さらに好ましくは１日約０．１μ
ｇ〜２０ｍｇである。

【００２１】本発明における製剤の形態としては、注射
剤が好ましいが、これに限定されるものではない。これ
らの製剤は、通常のそれぞれの製剤形態の適した剤型に
調製される。注射剤は、例えば、本有効成分を緩衝剤、
等張化剤、ｐＨ調整剤、安定化剤と適量に溶解した注射
用蒸留水に溶解し、除菌フィルターを通して無菌化した
ものをアンプルに分注するか、または本有効成分を増量
剤、安定化剤と共に注射用蒸留水に溶解し、除菌フィル
ターを通して無菌化したものをバイアル壜に分注し、凍
結乾燥することにより調製される。

【００２２】外用剤を製造するために必要な基剤原料と
しては、動植物油、鉱物油、エステル油、ワックス油、
高級アルコール類、脂肪酸類、シリコン油、界面活性
剤、リン脂質類、アルコール類、水溶性高分子類、ケイ
酸類などの粘土類、精製水などの公知の原料を組み合わ
せて用いることができる。また、本発明に係わる外用剤
は、角質溶解剤、保湿剤、サリチル酸、レゾルシン、ヘ
キサクロロフェンなどの殺菌剤、細胞賦活剤、ニコチン
酸、ビタミンＥ、ビタミンＡ、パントテン酸、エチニー
ルエストラジオール、ヒノキチオール、ビオチンなどの
ビタミン類、ホルモン類、グリチルレチン酸などのグル
チルリチン類、脂肪酸類、アミノ酸などの薬剤を必要に
応じて配合することが可能である。さらに必要に応じて
防腐剤、安定化剤、抗酸化剤、着色料、香料などを配合
することができる。

【００２３】本発明の外用剤は本有効成分が創傷部位に
浸潤してその効果を発揮するので、経皮吸収を促進する
作用を持つ公知の化合物を配合することができる。本発
明においては、本有効成分が配合される外用剤の剤形は
特に限定されない。例えば、トニック、ローション、ク
リーム、エアゾール、軟膏剤、貼付剤などに幅広く適応
し得る。

【００２４】

【実施例】次に、本発明の実施例について詳細に説明す
るが、本発明はこれのみに限定されるものではない。実施例１創傷治療効果試験（１）（１）実験方法山下らの方法〔応用薬理，３７，３１３−３２７（１９
８９）〕に準じ、ラットを用いて創傷治療効果を検討し
た。即ち、ペントバルビタール麻酔下、除毛したラット
右大腿部に固定台を乗せ、ディスポシリンジの低部（直
径１６．５ｍｍ）にて圧迫（１．５ｋｇ／ｃｍ²）を１
日８時間、５日間連続して加えた。大腿部とシリンジ低
部の間には１ｃｍ四方のアクリル板を入れた。

【００２５】薬物の評価は肉眼的および病理組織学的に
行った。肉眼的評価は褥瘡部が上皮形成を完了して治癒
するまでの日数を計測して行った。病理組織学的評価は
治癒完了日に褥瘡部位の皮膚を摘出して１０％中性緩衝
ホルマリン液で固定した後、常法に従いパラフィン切片
を作製してＨ．Ｅ．染色下で検鏡し再上皮化、肉芽組織
形成、血管新生の程度を３段階（±、＋、＋＋）にグレ
ード分けして行った。

【００２６】被験薬を０．１％ＢＳＡ生理食塩液にて溶
解し、１日当たり１×１０^-8ｍｏｌｅ／ｋｇをミニ浸透
圧ポンプ（Ａｌｚｅｔ社）を用いて持続的に投与し、ミ
ニ浸透圧ポンプは、褥瘡部位近傍の皮下に埋め込んだ。
被験薬として物質（１７）を０．１％ＢＳＡ生理食塩液
にて溶解した溶液を投与し（本有効成分投与群）、対照
群には０．１％ＢＳＡ生理食塩液を投与した。

【００２７】（２）実験結果肉眼的評価では対照群の治癒日数が２３日であったのに
対して、本有効成分投与群では２０日であって、３日間
の短縮が認められた。病理組織学的評価において表２に
示す通り本有効成分投与群は対照群に対して表皮突起の
伸展が顕著であり再上皮化の促進が認められ、肉芽組織
の形成も良好で線維芽細胞の浸潤も多数認められ、血管
新生の増生は特に顕著に認められた。

【００２８】

【表２】上記の結果から明らかな通り、本有効成分である物質
（１７）は強い創傷治療効果を有することを示してい
る。

【００２９】実施例２創傷治療効果試験（２）（１）実験方法山下らの方法〔応用薬理，３７，３１３−３２７（１９
８９）〕に準じ、ラットを用いて創傷治療効果を検討し
た。即ち、ペントバルビタール麻酔下、除毛したラット
右大腿部に固定台を乗せ、ディスポシリンジの低部（直
径１６．５ｍｍ）にて圧迫（１．５ｋｇ／ｃｍ²）を１
日８時間、５日間連続して加えた。大腿部とシリンジ低
部の間には１ｃｍ四方のアクリル板を入れた。

【００３０】薬物の評価は肉眼的および病理組織学的に
行った。肉眼的評価は褥瘡部が上皮形成を完了して治癒
するまでの日数を計測して行った。病理組織学的評価は
治癒完了日に褥瘡部位の皮膚を摘出して１０％中性緩衝
ホルマリン液で固定した後、常法に従いパラフィン切片
を作製してＨ．Ｅ．染色下で検鏡し再上皮化、肉芽形
成、血管新生、炎症性細胞浸潤の程度を３段階（±、
＋、＋＋）にグレード分けして行った。

【００３１】被験薬として物質（１７）を軟膏基剤（プ
ラスチベース）１ｇ当たり５０μｇ含有するように調製
して軟膏製剤を作製し、この軟膏製剤を１日当たり１０
０ｍｇを褥瘡部位に投与し（本有効成分投与群）、対照
群には軟膏基剤のみを投与した。尚、褥瘡部位の壊死組
織は外科的に取り除いた。

【００３２】（２）実験結果肉眼的評価では対照群の治癒日数が２２日であったのに
対して、本有効成分投与群では１７日であって、５日間
の短縮が認められた。病理組織学的評価において表３に
示す通り本有効成分投与群は対照群に対して表皮突起の
伸展が顕著であり、再上皮化の促進が認められ、肉芽組
織の形成も良好で線維芽細胞の浸潤も多数認められ、血
管新生の増生および炎症性細胞浸潤の抑制が特に顕著に
認められた。

【００３３】

【表３】上記の結果から明らかな通り、本有効成分である物質
（１７）は強い創傷治療効果を有することが示されてい
る。

【００３４】上記の試験１および２の結果から明らかな
通り、本有効成分が従来知られていなかった創傷治療作
用を有することが本発明により初めて見出されたもので
あり、本有効成分が創傷治療剤として臨床治験上大いに
期待されるものである。

【００３５】実施例３毒性試験（１）実験方法被験薬を０．１％ＢＳＡ生理食塩水にて溶解し、１日当
たり１×１０^-7ｍｏｌｅ／ｋｇ（総投与量１０．５ｍｇ
／ｋｇ／４週）をミニ浸透圧ポンプ（Ａｌｚｅｔ社）を
用いてラットに持続的に投与した。ミニ浸透圧ポンプ
は、ラット大腿部外側の皮下に埋め込んだ。ミニ浸透圧
ポンプ埋め込み、４週間後の生死を判定した。

【００３６】（２）実験結果物質（１７）投与による死亡例は認められなかった。ま
た、一般症状観察においても副作用は認められなかっ
た。以上の通り、本有効成分は安全性に優れていること
が示されている。

【００３７】実施例４注射用製剤の調製物質（１７）１００ｍｇをマンニツト１０ｇおよび安定
化剤適量と共に注射用蒸留水２Ｌに溶解し、次いで除菌
フィルターに通じた後、１バイアル２ｍｌづつ充填し、
凍結乾燥して物質（１７）１００μｇ／バイアルの注射
剤を得た。本製剤は、用時生理食塩水で溶解して投与さ
れる。

【００３８】実施例５注射剤の調製物質（１７）６０ｍｇ、緩衝液、等張液、ｐＨ調製剤、
安定化剤を適量溶解した注射用蒸留水６l に溶解し、次
いで除菌フィルターに通じた後、１バイアル１ｍｌづつ
充填し、アンプルを密封溶融して物質（１７）１０μｇ
／バイアルの注射剤を得た。

【００３９】実施例６軟膏製剤の調製物質（１７）８０．０ｍｇスクワラン１０．０ｇ白色ワセリン８．０ｇセトステアリルアルコール８．０ｇグリセリンモノステアレート２．０ｇポリオキシエチレンモノステアレート１．０ｇパラオキシ安息香酸メチル０．２ｇパラオキシ安息香酸プロピル０．１ｇ１，３−ブチレングリコール２．５ｇ精製水適量 ────────────────────────── 全量１００．０ｇ

【００４０】油相としてスクワラン、白色ワセリン、セ
トステアリルアルコール、グリセリンモノステアレー
ト、ポリオキシエチレンモノステアレートを７５℃に加
温し溶解した。水相としてパラオキシ安息香酸メチル、
パラオキシ安息香酸プロピル、１，３−ブチレングリコ
ール、物質（１７）、精製水を６０℃に加温溶解した。
上記で得た油相を６０℃に冷却し、これを上記で得た水
相に添加し、ホモミキサーで撹拌乳化した後、撹拌下室
温まで冷却して、上記組成の軟膏製剤を得た。

【００４１】

【発明の効果】上記の通り、本有効成分は、創傷の中で
も最も難治性とされる褥瘡のモデルに対して静脈内、筋
肉内または皮下に投与するか、あるいは外用剤として投
与することにより、創傷部の再上皮化、肉芽組織形成を
促進し、炎症性細胞浸潤を顕著に抑制していながら血管
新生の増生をも促進して治癒日数を短縮させることがで
きるので、創傷治療剤として極めて有用である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式〔１〕（式中、ＲはＡｌａ−ＮＨ−、Ｓｅｒ−ＮＨ−、ＮＨ₂
またはＨ、ＹはＳまたはＣＨ₂、ＡはＡｓｐまたはＡｓ
ｎ、ＢはＧｌｙ、ＡｓｐまたはＧｌｕ、ＣはＬｅｕまた
はＰｈｅ、ＤはＶａｌまたはＭｅｔ、ＥはＶａｌまたは
Ｇｌｙ、ＦはＡｓｎ、ＳｅｒまたはＡｓｐ、ＧはＡｓｎ
またはＡｓｐ、ＩはＬｙｓまたはＧｌｕを示すが、Ｙが
Ｓ、ＡがＡｓｎ、ＢがＡｓｐ、ＣがＰｈｅ、ＤがＶａ
ｌ、ＥがＧｌｙ、ＦがＡｓｎ、ＧがＡｓｎ、ＩがＬｙｓ
のときは、ＲはＨではない）で示されるカルシトニン遺
伝子関連ペプチドまたはその塩を有効成分として含有す
ることを特徴とする創傷治癒促進剤。