JPH06192109A - 抗腫瘍効果増強剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン、もしくは、その塩類
を有効成分とすることを特徴とする薬剤であって、生体
内に投与された薬剤による腎毒性を軽減するための腎毒
性軽減剤であり、また、白金錯休化合物による抗腫瘍活
性を増強する抗腫瘍効果増強剤が提供される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、Ｓ−アデノシル−Ｌ−
メチオニン類またはその塩類を有効成分とする薬剤に関
する。さらに詳しく言えば、本発明は、生体内に投与さ
れた薬剤により引き起こされる腎毒性を軽減し得るＳ−
アデノシル−Ｌ−メチオニンもしくはその塩類（以下Ｓ
ＡＭｅと記す）を有効成分とする腎毒性軽減剤に関する
ものであり、さらにまた、白金錯体化合物による抗腫瘍
活性を増強し得るＳＡＭｅを有効成分とする抗腫瘍効果
増強剤に関する。

【０００２】

【背景技術】最近各種悪性腫瘍に対し種々の薬剤が使用
されている。中でもシスプラチン（シス−ジアミン−ジ
クロロプラチナム：ＣＤＤＰ）は、延命が期待できる優
れた薬物であり、特に睾丸腫瘍、膀胱癌、尿管腫瘍およ
び卵巣癌の治療において顕著な延命効果が示されてい
る。しかしながらＣＤＤＰは優れた抗腫瘍作用を有する
反面、重篤な毒性をも現わすものであり、中でも腎毒性
が用量規制因子とされている。この毒性を軽減するため
にＣＤＤＰを投与する場合に利尿剤を併用する方法やハ
イドレーション（ｈｙｄｒａｔｉｏｎ）等が行われては
いるが、これらによる毒性軽減効果は、患者によっては
十分なものではない。特にＣＤＤＰがくり返し投与され
る場合には、その蓄積毒性が大きくなり、腎毒性の発現
した患者によっては用量を減らしたり、或は他の薬剤に
変更を余儀なくされ、その結果として延命の可能性が失
われることになる。他の例で言えば、卵巣癌の治療にお
いて、ＣＤＤＰの用量を増やしできるだけ休薬期間を短
くしてドーズ・インテンシティ（ｄｏｓｅｉｎｔｅｎｓ
ｉｔｙ）を高めるという治療法においても腎毒性は大き
な問題とされている。このような問題に対し、従来、Ｃ
ＤＤＰの腎毒性を軽減し得る化合物を探索する試みが多
くなされ、例えばチオ硫酸ナトリウム、アセタゾラミ
ド、二酸化セレン、セレン酸ナトリウム、システイン、
３−アミノベンズアミド、ホスホマイシン或いは次硝酸
ビスマス等が腎毒性を軽減する作用を示すことが報告さ
れているが、これらの化合物は現在臨床上実用化される
までには至っていない。また近年、グルタチオンがイタ
リアで許可され、アミホスチン（ａｍｉｆｏｓｔｉｎ）
がアメリカにおいて申請され、ウリナスタチンが日本に
おいて臨床研究がなされている等、腎毒性軽減作用を有
する薬剤の開発が行われている。

【０００３】一方、ＣＤＤＰの投与に際し、腎毒性など
の副作用を抑えるために、前述の毒性軽減剤等を併用す
るとＣＤＤＰそのものの抗腫瘍活性が抑制されることが
知られている。このため抗腫瘍作用を低下させることな
く効果の増強を図ることがこの分野での技術的課題とさ
れている。

【０００４】

【発明の目的】本発明は生体内に投与された薬剤により
引き起こされる腎毒性を軽減するための薬剤として、Ｓ
−アデノシル−Ｌ−メチオニン（ＳＡＭｅ）を有効成分
とする腎毒性の軽減剤を提供し、さらに、白金錯体化合
物による薬剤の抗腫瘍効果を増強し得るＳＡＭｅを有効
成分とする抗腫瘍効果増強剤を提供することを目的とす
るものである。

【０００５】

【発明の開示】本発明者らは、上記の目的を達成するた
めに、生体内で生成されるグルタチオン等のＳＨ化合物
が生体内の活性酸素や化学的に反応性のある毒物と反応
することにより無毒化することに着目し、ＳＡＭｅにつ
いて鋭意研究した結果本発明により、その目的が達成し
得ることを見出した。

【０００６】ＳＡＭｅはあらゆる生物の細胞中に存在
し、生体内でメチル基の供与体として多くの重要な生体
内反応に関与している化合物であることが知られてい
る。しかしながらＳＡＭｅは非常に不安定な化合物であ
り、その薬理効果を調べるために純粋に大量に得ること
は困難であったが、近年（１９８０年代）ＳＡＭｅがそ
の安定な塩として取り出されるようになり、ＳＡＭｅに
ついての各種薬理作用またはその生化学的挙動の研究を
行うことが容易になった。この安定なＳＡＭｅの塩を用
いる種々の薬理効果の探索の結果、肝障害、うつ病、骨
関節症に対し（特公昭５６−１０９２０号公報参照）、
急性期の脳障害に対し（特公平２−７２９３号公報参
照）、パーキンソン病またはエイズの免疫能低下に対し
効果を発現すること、あるいは、ある種の癌細胞に対し
細胞毒性を示すこと等が報告され、肝障害、うつ病、骨
関節症に対しては既にイタリア、ドイツ等では医薬品と
して臨床の場に供されている。

【０００７】本発明者らは、上記ＳＡＭｅにつき、更に
新しい薬効を発見すべくＳＡＭｅの投与後の吸収分布代
謝排泄を検討したところ、驚くべきことにＳＡＭｅは静
脈内投与後、特異的に腎組織に集まり、そこで速やかに
トランスメチレーションのプロセスを経て、Ｓ−アデノ
シルホモシステイン（以下、ＳＡＨと記す）に変換され
た後、ホモシステイン、システイン、グルタチオン等の
ＳＨ化合物に変換されることを見い出した。しかもこれ
らのＳＨ化合物の血中濃度はＳＡＭｅ投与後上昇するこ
とはなかった。

【０００８】本発明者らは、さらに研究を重ねたとこ
ろ、ＳＡＭｅがセファロリジン等の抗生物質、免疫抑制
剤であるサイクロスポリン等により引き起こされる腎組
織障害の改善作用を有することを見い出した。さらにま
た、本発明者らはＳＡＭｅがＣＤＤＰの抗腫瘍作用を減
弱することなく、腫瘍の種類に応じては著しく抗腫瘍効
果を増強する作用を示すことをも見い出した。すなわ
ち、本発明は生体内に投与された薬剤による腎毒性を軽
減するための腎毒性軽減剤であって、Ｓ−アデノシル−
Ｌ−メチオニン、もしくは、その塩類を有効成分とする
ことを特徴とする腎毒性軽減剤および前記の生体内に投
与された薬剤がシスプラチンである腎毒性軽減剤を提供
するものである。

【０００９】ＳＡＭｅは、ラットを用いた急性毒性試験
によれば、そのＬＤ_５０値（腹腔内投与）は、２，００
０〜２，５００ｍｇ／ｋｇであって、極めて安全な化合
物であることが知られている。ＳＡＭｅ類は公知の化合
物でありこれらは公知の方法に従ってあるいは公知の常
用手段に準じて製造することができる。ＳＡＭｅは、分
子内にスルホニウム陽イオンが存在するため、常にアニ
オンとの塩の形態で存在すると同時に、その分子内にア
ミノ基または塩基性のＮ原子を有しているためそれらの
部分についても各種の塩が形成された状態で存在する。

【００１０】従って、本発明の薬剤の形態としては、通
常、ＳＡＭｅをそのままで用いるか、または、ＳＡＭｅ
を有効成分として含む組成物の形態で使用される。本発
明の薬剤において用いることができるＳＡＭｅの安定な
塩の例としては、硫酸、塩酸、ｐ−トルエンスルホン
酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、コンドロイ
チン硫酸または一般式、ＨＯ_３Ｓ（ＣＨ_２）_ｍＳＯ_３Ｈ
（式中、ｍは３〜１２）で表されるジスルホン酸等の塩
類、あるいはこれらの一種または二種以上からなる複合
塩類などが挙げられる。

【００１１】上記のジスルホン酸の例としては、例えば
１，２−エタンジスルホン酸、１，３−プロパンジスル
ホン酸、１，４−ブタンジスルホン酸、１，５−ペンタ
ンジスルホン酸、１，６−ヘキサンジスルホン酸、１，
８−オクタンジスルホン酸または１，１０−デカンジス
ルホン酸等を挙げることができる。

【００１２】上記複合塩の具体例としては、硫酸トシル
酸アデノシル−Ｌ−メチオニン（ＳＡＭｅ、硫酸、ｐ−
トルエンスルホン酸のモル比が１：２：１）などを挙げ
ることができる。

【００１３】上述の白金錯体化合物類とは、シスプラチ
ン（シス−ジクロロ−ジアミン−プラチナ；ＣＤＤ
Ｐ）、カルボプラチン、ジクロロ−エチレンジアミン−
プラチナ（ＩＩ）、１，２−ジアミノ−サイクロヘキシ
ル−プラチナ（ＩＩ）−マロネートまたはサルフェー
ト、ジイソプロピルアミノ−トランス−ジヒドロキシ−
シス−ジクロロ−プラチナ（ＩＶ）、（−）−（Ｒ）−
２−アミノメチルピロリジン（１，１−シクロブタンジ
カルボキシレート）プラチナ（ＩＩ）−モノハイドレー
ト、シス−ジアミングリコレートプラチナなどを挙げる
ことができる。

【００１４】本発明の抗腫瘍効果増強剤においては、そ
の薬剤中に白金錯体化合物類を含有させておくことがで
きる。その使用量は、該抗腫瘍剤の種類により異なり特
定はされないが実際の臨床用量および基礎的効力実験か
ら１日当たり通常０．５〜５０ｍｇ／ｋｇとするのが好
ましい。

【００１５】本発明の腎毒性減剤あるいは抗腫瘍効果増
強剤においては、抗腫瘍薬剤としての白金錯体化合物類
を含有させておくことができ、その際、その化合物とＳ
ＡＭｅ類との使用割合は白金錯体化合物の種類およびＳ
ＡＭｅ類に応じて異なるが、一般的には前者１モルに対
して後者を０．０２〜１５０倍モル、好ましくは１０〜
１００倍モル用いるのがよい。

【００１６】また、ＳＡＭｅの使用量は、その種類と投
与法によって異なるが、たとえば、ＳＡＭｅ、硫酸、ｐ
−トルエンスルホン酸のモル比が１：２：１のものを用
いる場合には、ＳＡＭｅとして１日当たり１００〜２，
０００ｍｇの範囲が好ましい。

【００１７】本発明の薬剤においては、前記ＳＡＭｅを
常法に従って各種の投与単位形態に製剤したものと各種
投与単位形態に製剤した白金錯体化合物類を含む抗腫瘍
活性薬剤とを、同時にあるいは別々にあるいは引き続い
て使用することができる。そのために、これらの組み合
わせによる配合剤の形態としておくことができる。ＳＡ
Ｍｅを先に投与した後、白金錯体化合物類を投与しても
よく、あるいは、その逆に白金錯体化合物類を先に投与
した後、ＳＡＭｅを投与してもよい。投与の順序には特
に制限はない。

【００１８】本発明の薬剤の剤形としては、治療目的に
応じて各種の形態を選択することができる。たとえば、
経口剤としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
散剤または腸溶性製剤等、あるいは非経口用剤として
は、注射剤、坐剤等を挙げることができる。上記の各剤
形の製剤は、常法に従って製造される。

【００１９】たとえば、注射用薬剤としては注射用粉末
製剤の形態とするためには、適当な水溶性賦形剤、たと
えば、マンニトール、蔗糖、乳糖、マルトース、ブドウ
糖およびフルクトースなどの一種または二種以上を使用
して水溶液とし、バイアルまたはアンプルに注入したの
ち凍結乾燥し、密封して製剤とすることができる。

【００２０】上記の注射用粉末製剤は、一般的には、使
用に際して、各種塩基物質を用いて、たとえば、水酸化
カリウム、水酸化ナトリウム等、またはこれらの重炭酸
塩、炭酸塩等を用いてｐＨを７付近に調整して用いるこ
とができる。経口用製剤の例としては、たとえば、錠
剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤または腸溶性の
製剤等をあげることができる。

【００２１】腸溶性の製剤としては、マンニトール、蔗
糖、乳糖、マルトース、デンプン、リン酸カルシウムな
どの賦形剤、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、
カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ゼラ
チン、アラビアゴムなどの結合剤、カルボキシメチルセ
ルロースカルシウムなどの崩壊剤などを適宜選択して用
いて、常法により、錠剤、顆粒剤、細粒剤などの形態に
調製したのち、セルロースアセテートフタレート、ヒド
ロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ポリビニ
ルアルコールフタレート、スチレン・マレイン酸共重合
体、スチレン・無水マレイン酸共重合体、アクリル酸メ
チル・メタクリル酸共重合体、メタクリル酸メチル・メ
タクリル酸共重合体などの腸溶性基剤の一種または二種
以上を用いてコーチングを行うことにより製造すること
ができる。

【００２２】また、さらに上記の如き腸溶性の顆粒剤ま
たは細粒剤をカプセルに充填しカプセル剤とすることも
できる。カプセル剤に対し、腸溶性基剤でコーチングを
施し、あるいは、前記の腸溶性基剤単独またはこれにゼ
ラチンを混合して調製したカプセルを用いて腸溶性カプ
セル剤とすることも可能である。

【００２３】坐剤の例としては、たとえばカカオ脂肪酸
トリグリセライドに脂肪酸モノグリセライド、脂肪酸ジ
グリセライドを種々の割合で混合した坐剤基剤（半合成
グリセリド）などの親油性基剤とポリエチレングリコー
ル、グリセロゼラチンなどの親水性基剤とを加温溶融し
たものを用いて均一に混和し、型に入れて成形したもの
があげられる。以下に、本発明の薬剤の実施例を記載す
る。

【００２４】

【実施例】

実施例１ ＳＡＭｅ、硫酸、Ｐ−トルエンスルホン酸のモル比が
１：２：１であるＳＡＭｅの複合塩３８４ｇとマンニト
ール２４０ｇとを注射用蒸留水を用いて全量３，０００
ｍｌの水溶液とする。これをミリポアフィルター（０．
２２ミクロン）を用いて無菌ろ過し、容量５ｍｌのバイ
アルに１．５ｍｌずつ分注したのち、凍結乾燥し、直ち
に密栓して注射用粉末製剤を調製した。

【００２５】実施例２ 実施例１と同じＳＡＭｅの複合塩５７６ｇとマンニトー
ル３６０ｇとを含有する粉末９３６ｇに注射用蒸留水を
加えて全量２，２５０ｍｌの水溶液とする。これをミリ
ポアフィルター（０．２２ミクロン）を用いて無菌ろ過
し、容量１５ｍｌのバイアルに４．５ｍｌずつ分注した
のち、凍結乾燥し、直ちに密栓することにより注射用粉
末製剤を調製した。

【００２６】実施例３ 実施例１と同じＳＡＭｅの複合塩５７６ｇ、マンニトー
ル１１４ｇ、トウモロコシデンプン１５０ｇ、ステアリ
ン酸マグネシウム１０ｇを均一に混和し、常法により顆
粒を調製した。別に、ヒドロキシプロピルメチルセルロ
ースフタレート１０８ｇ、セラック２８ｇおよびグリセ
リン脂肪酸エステル１４ｇを、塩化メチレン４６２ｇ、
イソプロピルアルコール９２２ｇ、水４６２ｇの混液中
に分散させておき、この分散液を用いて先に得た上記の
顆粒をコーチングしたのち、得られたコーチング物５０
０ｍｇずつを１カプセル中に充填しカプセル剤を調製し
た。

【００２７】実施例４ 実施例１と同じＳＡＭｅの複合塩５７６ｇを脂肪酸のト
リグリセライドを主成分とする坐剤基剤、１，４２４ｇ
中に加えて、均一に分散させた後、１個当たり２．０ｇ
の坐剤を調製した

【００２８】以下に、本発明の薬剤と白金錯体化合物類
を併用した場合の副作用の軽減および／または抗腫瘍効
果の増強作用について述べる。以下の例中、ＣＤＤＰと
しては、シスプラチン注射液（ブリプラチン注^（Ｒ）ブ
リストルマイヤー社製）を使用し、ＳＡＭｅとしては、
前記実施例１で調製した注射用粉末製剤につき、４Ｎ−
水酸化ナトリウムを用いて、そのｐＨを７に調整して用
いた。

【００２９】本発明の薬剤を静脈内投与した後、ＳＡＭ
ｅが特異的に腎組織に集まること、そして、ホモシステ
イン、システイン、グルタチオン等のＳＨ化合物の血中
（血漿）における濃度はＳＡＭｅ投与後上昇しないこと
が下記の実験により確認された。試験方法：ＳＤ系のラ
ット（６週令）にＳＡＭｅの生理食塩液（３０ｍｇ／ｋ
ｇ，ｐＨ６）を静脈内投与し、３０、６０、１２０分後
に血液、腎組織中のＳＨ基を有する化合物の濃度を測定
する〔ジャーナルオブ ファルマコロジカルイクスペリ
メンタルセラピー（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．
Ｔｈｅｒ．）、Ｎ．Ｋａｐｌｏｗｉｔｓ等、１９７７、
２００、２７９〜２８６）〕。試験結果を下記表に示
す。

【００３０】

【表１】

【００３１】次に、ＳＡＭｅによるＣＤＤＰの腎毒性の
軽減作用を測定した試験について述べる。 試験例１（ＳＡＭｅによるＣＤＤＰの腎毒性の軽減作
用） ＣＤＦ１マウス（雄性；体重２５．０〜２７．６ｇ）を
一群４匹とし、４群に対し、ＣＤＤＰと前記実施例１で
得られたＳＡＭｅの複合塩とを表２中に示した各用量
（以下、ＳＡＭｅの用量はＳＡＭｅ複合塩中に含まれる
ＳＡＭｅ含量で表示する。）で第１群と第２群の各マウ
スに腹腔内に投与し、６日後に採血し、血清尿素窒素
（ＢＵＮ）およびクレアニン量を測定した。対比のため
に第３群にはＣＤＤＰを単独投与し、第４群には、生理
食塩水のみを投与し対照群とした。その結果を下記表に
示す。

【００３２】

【表２】

【００３３】上記の試験結果から、明かなようにＣＤＤ
Ｐ投与に際し、本発明の薬剤を併用すると、用量依存的
にＢＵＮおよびクレアチニン量の増加を抑え、腎毒性の
著しい軽減が見られた。

【００３４】試験例２〔ＣＤＤＰ単回投与後の犬腎毒性
に対するＳＡＭｅの効果（ＢＵＮ）〕 ビーグル犬（体重１０．２〜１４．５ｋｇ、２４〜３６
月齢）９頭を３頭ずつ３群に分け、１群にはＣＤＤＰ
４ｍｇ／８ｍｌ／ｋｇを静脈内投与し、第２群にはＣＤ
ＤＰ ４ｍｇ／８ｍｌ／ｋｇおよび実施例１のＳＡＭｅ
塩（以下単にＳＡＭｅ塩という）をＳＡＭｅとして３０
ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇを静脈内投与した
（ＳＡＭｅ塩はｐＨ５に調整し、ＣＤＤＰの投与直前に
静脈内投与した）。対照群には、ＣＤＤＰおよび生理食
塩水を投与した。投与後２日毎にＢＵＮ値を測定し、比
較した。その結果を、下記表に示す。

【００３５】

【表３】

【００３６】対照群は７日目までに全例が死亡し、ＳＡ
Ｍｅ３０ｍｇ／ｋｇ投与群は７日目までに３例中２例が
死亡したが、１００ｍｇ／ｋｇ投与群は全例が生存し
た。

【００３７】試験例３〔ＣＤＤＰ多回投与後の犬腎毒性
に対するＳＡＭｅの効果（ＢＵＮ）〕 ビーグル犬（体重８．３〜９．２ｋｇ、８〜９月齢）１
２匹を４群に分けた。第１群にはＣＤＤＰ ２ｍｇ／４
ｍｌ／ｋｇと生理食塩水を３回（第１日目、第１１日
目、第２１日目）静脈内投与し、対照群とした。第２群
にはＣＤＤＰ ２ｍｇ／４ｍｌ／ｋｇとＳＡＭｅとして
２５ｍｇ／ｋｇのＳＡＭｅ塩とを３回（第１日目、第１
１日目、第２１日目）静脈内投与した。ＳＡＭｅ塩はｐ
Ｈ５に調整し、ＣＤＤＰ投与直前に静脈内投与した。第
３群にはＣＤＤＰ ２ｍｇ／４ｍｌ／ｋｇとＳＡＭｅと
して５０ｍｇ／ｋｇのＳＡＭｅ塩とを３回（第１日目、
第１１日目、第２１日目）静脈内投与した。ＳＡＭｅ塩
はｐＨ５に調整し、ＣＤＤＰ投与直前に静脈内投与し
た。第４群にはＣＤＤＰ ２ｍｇ／４ｍｌ／ｋｇとＳＡ
Ｍｅとして１００ｍｇ／ｋｇのＳＡＭｅ塩とを３回（第
１日目、第１１日目、第２１日目）静脈内投与した。Ｓ
ＡＭｅ塩はｐＨ５に調整し、ＣＤＤＰ投与直前に静脈内
投与した。上記各投与（第１日目、第１１日目、第２１
日目）後２日目毎にＢＵＮ値を定した。上記測定により
得られたＢＵＮ値を、第１日目のＢＵＮ値を１００とし
てその相対値として表した。その第３日目、第１３日目
と第２３日目の結果を下記表に示した。

【００３８】

【表４】

【００３９】試験例４〔（ＣＤＤＰ単回投与後のラット
腎毒性に対するＳＡＭｅの効果（ＢＵＮ、ＣＲＥ）〕 ラット（休重約１８０ｇ）を３群に分け、第１群にはＣ
ＤＤＰ ５ｍｇ／１０ｍｌ／ｋｇ、第２群にはＣＤＤＰ
５ｍｇ／１０ｍｌ／ｋｇおよびＳＡＭｅとして１０ｍ
ｇ／ｋｇのＳＡＭｅ塩を１回静脈内投与した（ＳＡＭｅ
塩はｐＨ５に調整し、ＣＤＤＰの投与直前に静脈内投与
した）。対照群にはＳＡＭｅ塩の代わりに生理食塩液を
投与した。投与７日目にＢＵＮ、クレアチニン（ＣＲ
Ｅ）値を測定した。その結果を下記表に示す。

【００４０】

【表５】

【００４１】試験例５〔ＣＤＤＰ多回投与後のラット腎
毒性に対するＳＡＭｅの効果（ＢＵＮ）〕 ラット（約１８０ｇ）を３群に分け、第１群にはＣＤＤ
Ｐ ３ｍｇ／１０ｍｌ／ｋｇ、第２群にはＣＤＤＰ ３
ｍｇ／５ｍｌ／ｋｇおよびＳＡＭｅ塩をＳＡＭｅとして
１０ｍｇ／ｋｇ５日毎に３回静脈内投与（ＳＡＭｅ塩は
ｐＨ５に調整し、ＣＤＤＰの投与直前に静脈内投与）し
た。対照群にはＳＡＭｅ塩の代わりに生理食塩水を投与
した。ＢＵＮ値を経日的に測定した。その結果を表６に
示す。

【００４２】

【表６】

【００４３】試験例６〔ＣＤＤＰ多回投与後のマウス腎
毒性に対するＳＡＭｅの効果（ＢＵＮ）〕 マウス（体重約２４〜２８ｇ）を３群に分け、第１群に
はＣＤＤＰ ８ｍｇ／８ｍｌ／ｋｇ、第２群にはＣＤＤ
Ｐ ８ｍｇ／８ｍｌ／ｋｇおよびＳＡＭｅ塩をＳＡＭｅ
として３０ｍｇ／ｋｇ、第３群にはＣＤＤＰ ８ｍｇ／
８ｍｌおよびＳＡＭｅ塩９０ｍｇ／ｋｇを、それぞれ、
５日間隔で２回静脈内投与した（ＳＡＭｅ塩はＣＤＤＰ
の投与直前にＳＡＭｅ塩をｐＨ５に調整し、ＣＤＤＰ投
与時とその３０分後と６０分後に１０ｍｇ／ｋｇまたは
３０ｍｇ／ｋｇずつ３回に分け静脈内投与した）。対照
群には生理食塩水を投与した。投与後ＢＵＮ値を経日的
に測定した。その結果を下記表に示す。

【００４４】

【表７】

【００４５】試験例７（ＳＡＭｅ類によるＣＤＤＰの抗
腫瘍効果増強作用（ｉｖ ｖｉｔｒｏ）） マウス白血病細胞Ｌ１２１０およびＰ３８８をＲＰＭＩ
１６４０培養液で１０^４細胞数／ｍｌとし、その２ｍｌ
を培養試験管（Ｆａｌｃｏｎ Ｎｏ．２０５４）に分注
し、炭酸ガスインキュベータ中、５％炭酸ガス存在下、
３７℃で５時間培養した後、ＣＤＤＰおよび／またはＳ
ＡＭｅ類を各培養試験管に加え、さらに１時間培養し
た。次いで１，６００ｒｐｍで５分間遠心し、培養液を
吸引除去した後、ＲＰＭＩ１６４０を２ｍｌ加え、上記
と同じ条件で７２時間培養した後、培養液中の細胞数を
コールター・カウンター（Ｍｏｄｅｌ ＺＢ）で計測し
た。その結果を表８に示す。

【００４６】

【００４７】抗腫瘍効果をＩＣ^５０値（ＣＤＤＰ無添加
時のＬ１２１０細胞の増殖を５０％抑制するＣＤＤＰの
濃度）で表すと、ＣＤＤＰを単独で用いた場合には、Ｉ
Ｃ_５０値が１６．２μＭであった。これに対してＣＤＤ
Ｐと本発明の実施例１の製法で得られた薬剤をＣＤＤＰ
に対しモル比で１０倍量、１００倍量併用したときの各
々のＩＣ_５０値は、６．６および１．７μＭであった。
一方、上記の本発明の薬剤を単独で用いたときのＩＣ
_５０値は、１，０００μＭ＜であった。

【００４８】試験例８（ＳＡＭｅ類によるＣＤＤＰの抗
腫瘍効果増強作用（ｉｎ ｖｉｖｏ）） １群６匹の８週令のＣＤＦ１マウス（雄性；体重２４〜
２８ｇ）を用い、その腹腔内にマウス白血病細胞Ｌ１２
１０を１０^５個移植（ｄａｙ０）した。１日後（ｄａｙ
１）および５日後（ｄａｙ５）にＣＤＤＰおよび／また
は実施例１記載の製法で得られた薬剤を各群の腹腔内に
投与した。

【００４９】ＣＤＤＰおよびＣＤＤＰと上記薬剤の併用
時のＬ１２１０に対する抗腫瘍効果を下記の式によって
求められる生命延長率（ＩＬＳ）で示した。 ＩＬＳ（％）＝（Ｔ／Ｃ−１）×１００ 式中、Ｔは、ＣＤＤＰ投与群のマウスの平均生存日数を
表し、Ｃは、ＣＤＤＰ非投与群（対照群）のマウスの平
均生存日数を表す。なお、３０日以上生存した場合の生
存日数は３０日として計算した。

【００５０】なお、投与方法は、ｉｐ−ｉＰ（ｄａｙ
１、５）であり、表９中の被検薬の用量（ｍｇ／ｋｇ）
については、たとえば、番号１では、ＣＤＤＰとＳＡＭ
ｅ塩をＳＡＭｅとして各々４ｍｇ、４００ｍｇを併用し
たことを示している。また、体重変化は各群のｄａｙ１
とｄａｙ７での平均体重の差（ｄａｙ７の平均体重−ｄ
ａｙ１の平均体重）を示している。その結果を下記表に
示す。

【００５１】

【表９】

【００５２】上記の試験結果から、ＣＤＤＰ（４または
６ｍｇ／ｋｇ）と本発明の実施例１記載のＳＡＭｅの複
合塩（ＳＡＭｅとして４００ｍｇ／ｋｇ）を併用したと
き、３０日以上生存するマウスが多く現れ、本発明の薬
剤がＣＤＤＰの抗腫瘍効果を著しく増強していることが
わかる。一方、本発明の薬剤とＣＤＤＰとを併用したと
きの体重の減少は、ＣＤＤＰを単独投与した場合と同様
であった。

【００５３】試験例９ マウス結腸腫瘍細胞Ｃｏｌｏｎ２６をＭＥＭ培養液で５
×１０^３細胞／ｍｌとし、その２ｍｌを培養ペトリ皿に
分注した。５％ＣＯ_２下３７°で２４時間培養した後、
各濃度のＣＤＤＰまたはＣＤＤＰの１０倍〜１００倍モ
ル量のＳＡＭｅ共存下１時間培養した。その後培地を吸
引しコールド（ｃｏｌｄ）ＰＢＳ（−）で１回洗浄後新
しい培地を２ｍｌ加え、さらに７２時間培養した。細胞
をトリプシン処理し、希釈後、細胞数をコールターカウ
ンターで計測した。ＣＤＤＰの抗腫瘍活性はトリプリケ
ートの値より算出し、ＩＣ_５０値で示した（表１０）。

【００５４】試験例１０ ヒト腫瘍に対する抗腫瘍効果増強作用 下記のヒト腫瘍細胞をＲＰＭＩ１６４０培地（註１）ま
たはＭＥＭ培地（註２）で５×１０^３〜２×１０^４細胞
／ｍｌとし、その２ｍｌを培養ペトリ皿に分注した。５
％ＣＯ_２下３７℃で２４時間培養した後、各濃度のＣＤ
ＤＰまたはその１０倍〜１００倍モル量のＳＡＭｅ共存
下１時間培養した。その後培地を吸引し、コールドＰＢ
Ｓ（−）で１回洗浄後、新しい培地を２ｍｌ加え、さら
に７２時間培養した。細胞をトリプシン処理し、希釈
後、細胞数をコールターカウンターで計測した。ＣＤＤ
Ｐの抗腫瘍活性はトリプリケートの値より算出し、ＩＣ
_５０値で示した（表１１、１２）。 註１： ＲＰＭＩ １６４０培地：１０％牛胎児血清、２０μＭ
２−メルカプトエタール、カナマイシン（１００μｇ
／ｍｌ）。 註２： ＭＥＭ培地：１０％牛胎児血清、カナマイシン（６０μ
ｇ／ｍｌ）。

【００５５】使用したヒト腫瘍細胞： Ａ５４９：肺腺癌、ＬＵ６５：肺癌、ＭＫＮ２８：胃腺
癌、ＭＫＮ４５：胃腺癌、ＤＬＤ−１：結腸腺癌、Ｗｉ
Ｄｒ：結腸腺癌、ＰＡ−１：卵巣奇形腫、ＭＣＡＳ：卵
巣嚢胞腺癌、ＡＣＨＮ：腎腺癌。その結果を表１０、１
１および表１２に示した。各表中、化合物欄の表示は以
下の意味を表わす。 １） ＣＤＤＰに対して１０倍量のＳＡＭｅを併用 ２） ＣＤＤＰに対して１００倍量のＳＡＭｅを併用

【００５６】

【表１０】

【００５７】

【表１１】

【００５８】

【表１２】

【００５９】上記表に示された試験結果から、マウスお
よびヒト腫瘍細胞に対するＣＤＤＰの抗腫瘍活性は、Ｉ
Ｃ_５０値で表すとマウス腫瘍に対しては３．５〜４１．
７μＭ、ヒト腫瘍に対しては４．１〜１４９．９μＭで
あった。一方、ＣＤＤＰの１０倍モル量あるいは１００
倍モル量のＳＡＭｅを共存させるといずれの腫瘍細胞に
対してもＣＤＤＰの抗腫瘍活性は増強され、ＩＣ_５０値
で比較すると増強の割合は１．１〜９．５倍であった。
また、ＳＡＭｅの各腫瘍細胞に対するＩＣ_５０値はいず
れにおいても１，０００μＭ以上であった。

【００６０】試験例１１（ＳＡＭｅ塩によるマウス腫瘍
に対する抗腫瘍効果増強作用（腹腔内または静脈内投
与）） １群６匹の８〜９週令（体重２４〜２８ｇ）の雄性ＣＤ
Ｆ１マウスを用い、その腹腔内にマウス白血病細胞Ｌ１
２１０（１０^５個）を移植した（ｄａｙ０）。次いでｄ
ａｙ１およびｄａｙ５にＣＤＤＰあるいはＣＤＤＰとＳ
ＡＭｅを同時に腹腔内もしくは静脈内（ｉｖ）投与し
た。ＣＤＤＰおよびＣＤＤＰとＳＡＭｅを併用した時の
抗腫瘍効果はＩＬＳで求めた。

【００６１】

【表１３】

【００６２】上記表に示すように、ＣＤＤＰ（４または
６ｍｇ／ｋｇ）とＳＡＭｅ（１００〜４００ｍｇ／ｋ
ｇ）を同時に腹腔内投与した時、ＣＤＤＰのみを投与し
た場合に比べ抗腫瘍効果が著しく増強し、３０日以上生
存するマウスが多く現れた。

【００６３】

【表１４】

【００６４】ＣＤＤＰ（４ｍｇ／ｋｇ）とＳＡＭｅ（１
０〜９０ｍｇ／ｋｇ）を同時に静脈内投与したとき、Ｃ
ＤＤＰのみを投与したときに比べ抗腫瘍効果は投与した
ＳＡＭｅの用量に依存して増強された。また同量のＳＡ
Ｍｅを分割して投与したときの方が大きな抗腫瘍効果が
得られた。

【００６５】ヒト腫瘍に対する抗腫瘍効果増強作用 １群３〜４匹の６〜８週令（体重２４〜２８ｇ）のＢＡ
ＬＢ／ｃ雌性ヌードマウスを用い、下記のヒト腫瘍（１
０^６〜１０^７個）を皮下（ｓｃ）に移植した。腫瘍体積
が一定の大きさ（２００〜３００ｍｍ^３）に達した日
（ｄａｙ１）からＣＤＤＰあるいはＣＤＤＰとＳＡＭｅ
（４００ｍｇ／ｋｇ）を同時に腹腔内（ｉｐ）もしくは
静脈内（ｉｖ）投与した。腫瘍の長径、短径およびその
高さを各々ａ、ｂ、ｈ（ｍｍ）とし、腫瘍体積を下記の
式で算出した。 腫瘍体積 （ｍｍ^３）＝１／２×ａ×ｂ×ｈ

【００６６】抗腫瘍効果は、個々のマウスにおける腫瘍
体積増殖率（ｄａｙ１に対するｄａｙ ｎの腫瘍体積
比）にて求めた。使用したヒト腫瘍細胞は、Ａ５４９：
肺腺癌、ＬＵ６５：肺癌、ＭＫＮ２８：胃腺癌、ＭＫＮ
４５：胃腺癌、ＤＬＤ−１：結腸腺癌、ＷｉＤｒ：結腸
腺癌、ＰＡ−１：卵巣奇形腫、ＭＣＡＳ：卵巣嚢胞腺癌
およびＡＣＨＮ：腎腺癌（Ｒｅｎａｌ、ａｄｅｎｏｃａ
ｒｃｉｎｏｍａ）等である。

【００６７】試験例１２ ヒト肺癌（Ｌｕ６５）を有するマウスにＣＤＤＰ（６ｍ
ｇ／ｋｇ）とＳＡＭｅ（４００ｍｇ／ｋｇ）をｄａｙ１
およびｄａｙ５に腹腔内投与した。その結果ＣＤＤＰと
ＳＡＭｅを併用した場合には、ＣＤＤＰのみを投与した
場合に比べ強い抗腫瘍効果を示し、腫瘍の増殖が強く抑
制された。さらにＣＤＤＰとＳＡＭｅ併用群中、腫瘍が
縮小するものも現れた。また、試験した他のヒト癌に対
してもＣＤＤＰとＳＡＭｅを併用した場合、ＣＤＤＰの
みを投与した場合に比べ同等あるいはそれより強い腫瘍
増殖抑制効果を示した。

【００６８】本発明により、白金錯体化合物類を本発明
の薬剤と一緒に投与すると腎毒性および神経毒性のよう
な、該抗腫瘍剤を単独投与するときに観察される副作用
の著しい軽減ばかりでなく、生存日数の延長など該抗腫
瘍剤の抗腫瘍効果の著しい増強が見られた。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 生体内に投与された薬剤による腎毒性を
   軽減するための腎毒性軽減剤であって、Ｓ−アデノシル
   −Ｌ−メチオニン、もしくは、その塩類を有効成分とす
   ることを特徴とする腎毒性軽減剤。
2. 【請求項２】 前記の生体内に投与された薬剤がシスプ
   ラチンである請求項１記載の腎毒性軽減剤。
3. 【請求項３】 白金錯体化合物による抗腫瘍活性を増強
   する薬剤であって、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを
   有効成分とすることを特徴とする抗腫瘍効果増強剤。
4. 【請求項４】 前記の白金錯体化合物がシスプラチンで
   ある請求項３記載の抗腫瘍効果増強剤。