JPH0623110B2

JPH0623110B2 - シスタノサイド類を有効成分とするストレスによる機能障害改善剤

Info

Publication number: JPH0623110B2
Application number: JP62029534A
Authority: JP
Inventors: ▲たかし▼ 佐藤; 弘美小林; 暁小島; 久美子小林
Original assignee: YOMEISHU SEIZO KK
Current assignee: YOMEISHU SEIZO KK
Priority date: 1987-02-13
Filing date: 1987-02-13
Publication date: 1994-03-30
Anticipated expiration: 2009-03-30
Also published as: JPS63198628A

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は医薬、殊に肉慫蓉から抽出されたシスタノサイ
ド類を有効成分とするストレスによる機能障害改善剤に
係る。

（従来の技術）肉慫蓉は中華人民共和国における最古の本草書である
「神農本草経」にも収載されているように、古来から利
用されてきた生薬の一つであり、補養、強壮生薬として
肉慫蓉丸、還少丹、慫蓉潤腸丸等の漢方処方に用いら
れ、又単独で或は他の生薬類と共に薬用酒に用いられて
きており、今日においても貴重な薬材とされている。

肉慫蓉とはハマウツボ科の寄生植物であって中華人民共
和国、モンゴル人民共和国及びシベリア地方に産するホ
ンオニク［"Cistanche salsa"(C.A.Mey.)G.Beck］の全
草を乾燥したものを本来指称するものであるが、その同
属植物である"Cistanche deserticola"Y.C.Ma、"Cistanc
he ambigua"(Bge.)G.Beck及び"Cistanche sinensis"G.B
eckも肉慫蓉の基源植物とされている［「中葯大辞典」
及び馬毓泉「内蒙古大学学報（自然科学）第69頁、1977
年］。一方、ハマウツボ科の他の寄生植物であるオニク
（"Boschniakia rossica"Fedtsch.et Flerov）は和産肉
慫蓉又は草慫蓉と称されており、これが肉慫蓉と同様の
目的に供されることもある。

肉慫蓉の薬理乃至生理作用については血圧降下作用（中
国医学科学院「1956年論文報告会論文摘要II」第70頁、
1956年］及び唾液分泌促進作用（「中葯研究文献摘要」
第259頁、1975年）が知られており、又肉慫蓉の構成成
分についてはアルカロイドや結晶性物質の存在が報告さ
れてきているが、その詳細は未だ不明の儘であり、充分
に解明されるに至っていない。

一方、本発明によるシスタノサイド類と化学構造的に近
縁の化合物としては、一般式にて示されるフェニルプロパノイド配糖体類がある。こ
のフェニルプロパノイド配糖体類に属する公知化合物と
してはモクセイ科植物のライラック、ネズミモチ及びキ
ンモクセイから並びにハマウツボ科植物のナンバンギセ
ル、ゴマノハグサ科のキリ等から単離されているアクテ
オサイド（R₃、R₄＝ハイドロキシル基、R₅、R₆＝水素原
子）を初めとして例えば下記の化合物がある。

エチナコサイド（R₃、R₄＝ハイドロキシル基、 R₅＝水素原子基、 R₆＝β-D-グルコピラノシル基）２′−アセチルアクテオサイド（R₃、R₄＝ハイドロキシル基、 R₅＝アセチル基、 R₆＝水素原子）、オスマンスサイドＢ（R₃、R₄、R₅、R₆＝水素原子）、フォルシソサイドＢ（R₃、R₄＝ハイドロキシル基、 R₅＝水素原子、 R₆＝β-D-アピオフラノシル基）これらのフェニルプロパノイド配糖体の薬理乃至生理作
用についてはエチナコサイド及びフォルシソサイドＢが
共に抗菌作用を有している旨報告されており（A.Stoll
等“Helv.Chim.Acta.”第238頁、1950年及び遠藤等「日
本生薬学会第28年会講演要旨集」第20頁、1981年）、又
アクテオサイドが抗パーキンソニズム作用及びβ−遮断
作用を有している旨報告され（西ドイツ国特許出願公開
第2609533号公報）、更に抗腫瘍作用を有している旨報
告されている（沼田等「第33回日本生薬学会近畿支部総
会講演要旨集」第76頁、1983年）。

上記の公知フェニルプロパノイド配糖体が有しているこ
れらの薬理乃至生理作用並びに肉慫蓉に関して従来報告
されてきた既述の薬理乃至生理作用である血圧降下作用
及び唾液分泌促進作用は、肉慫蓉の伝承的効能即ち「五
労七傷」とはニュアンスを異にしているものと考えられ
る。蓋し、「五労七傷」とは各種のストレスに基因して
生じる生体臓器の機能低下や精神的疲労により生じる諸
症状を緩和し、延いては治癒させることを指称するもの
と解されるからである。

現代は、社会機構が複雑化し技術革新も極めて急速に進
行しつつあり、従ってこのような環境条件下に生活する
人々には知らず知らずの内に多大なストレスが掛かり且
つ蓄積されるのが実情である。このような現代におい
て、社会生活を健全に営んで行くためには抗ストレス作
用物質が極めて有用である。

本発明者等は肉慫蓉の上記の伝承的効能に着目して従来
から肉慫蓉について研究を重ねて来たが、その結果肉慫
蓉には２′−アセチルアクテオサイド、オスマンスサイ
ドＢ、アクテオサイド、エチナコサイド等の各種フェニ
ルプロパノイド配糖体の他に下記のフェニルプロパノイ
ド配糖体（シスタノサイド類）が含有されていることを
見出し、これを報告すると共にそれらの単離法について
特許出願をなし（小林等「Chem.Pharm.Bull.」第32巻、
第3009及び3880頁、1984年及び特願昭60-29335）、更に
これらのシスタノサイド類がストレスによる機能障害の
改善剤として有効であることを見出して関連特許出願を
なした（特願昭60-1839533）。

シスタノサイドＡ（前記の一般式IIにおいてR₃：ハイドロキシル基、R₄：
メトキシル基、 R₅：水素原子、Ｒ_６：β-D-グルコピラノシル基）シスタノサイドＢ（前記の一般式IIにおいてR₃、R₄：メトキシル基、R₅：
水素原子、 R₆：β-D-グルコピラノシル基）シスタノサイドＣ（前記一般式IIにおいてR₃：ハイドロキシル基、R₄：メ
トキシル基、 R₅，R₆：水素原子）シスタノサイドＤ（前記の一般式IIにおいてR₃，R₄：メトキシル基、R₅，R₆：水素原子）本発明者等は肉慫蓉の構成成分について更に研究を続け
た結果、肉慫蓉には一般式（式中R₁は水素原子又はハイドロキシル基を意味し、R₂
はα-L-ラムノピラノシル-(1→3)-D-グリコピラノース-
4-イル基を意味する）に示されるシスタノサイド類も含有されていることが判
明した。

鋭意研究の結果、これらのシスタノサイド類即ちシスタノサイドＦ（R₁：ハイドロキシル基）及びシスタノサイドＩ（R₁：水素原子）は抗ストレス作用を有していることが見出されて本発明
が完成されるに至った。

（発明の目的）従って、本発明の目的は生薬殊に肉慫蓉から得られた物
質を有効成分とする抗ストレス剤を提供し、これによっ
てストレスによる機能障害の改善を図ることにある。

（目的を達成するための手段及び作用）本発明によれば、上記の目的は一般式（式中R₁及びR₂は前記の意味を有する）にて示されるシ
スタノサイド類の少なくとも一種を有効成分として含有
していることを特徴とする、ストレスによる機能障害改
善剤により達成される。

尚、これらの有効成分としては単離精製されたものが好
ましいが、これらの少なくとも一方を含有する画分の状
態であっても使用することが可能である。

（剤型及び投与量）本発明によるストレスによる機能障害改善剤の剤型に格
別の制限はなく、従って肉慫蓉から抽出された上記の一
般式Ｉにて示される化合物又は該化合物を含有する画分
をその儘投与することも、或は製剤化して投与すること
もできる。製剤化に際しては、粉末剤、細粒剤、顆粒
剤、錠剤、カプセル剤、液剤、シロップ剤等の経口投与
剤とすることも、或は注射剤、腸注剤等の非経口投与剤
とすることもできる。

投与量は有効成分の種類、剤型、患者の年齢、体重、症
状等に依存するが、一般に、成人に対して経口投与する
場合には、有効成分化合物として0.05−５ｇ／日を１−
３回に分けて服用するのが好ましい。

（発明の効果）本発明による剤を投与すればストレスに基因して生じる
諸機能の障害殊に性機能障害、健忘症を軽減乃至治癒さ
せることができ、更には心身症の予防や治療を行うこと
ができる。

尚、本発明による剤の有効成分として用いられるシスタ
ノサイド類は毒性が極めて低く、従って本発明による剤
は使用安全性に優れている。

（製剤例等）次に、本発明による剤に用いられる有効成分の製造例、
薬効薬理試験例及び製剤例に関連して本発明を更に詳細
に説明する。

参考例（製造例）肉慫蓉（中国産市場品）10Kgを細切し、メタノール36リ
ットルを添加し、攪拌下に還流加熱した。これを２時間
宛２回繰り返し、得られた抽出液を合併して減圧濃縮
し、粗エキス4.5Kgを得た。この粗エキスを水1.5リット
ルに懸濁させ、酢酸エチルエステル３リットル宛で２回
洗浄し、水性層をｎ−ブタノール３リットル宛で２回抽
出し、ｎ−ブタノール抽出液を合併して減圧濃縮し、ｎ
−ブタノール可溶部300gを得た。これを水５リットルに
溶解させ、ダイヤイオンHP-20を２リットル充填したカ
ラムに通導し、水２０リットルで洗浄し、メタノール10
リットルで溶出させてダイヤイオン吸着部75gを得た。
このダイヤイオン吸着部を水500mlに溶解させ、ポリア
ミドC-200を１Kg充填したカラムに通導し、水３リット
ルで洗浄し、メタノール５リットルで溶出させて粗シス
タノサイド40g（以下「画分１」と称する）を得た。こ
の画分１を、ワコーゲルC-300を500g充填したカラムに
よるクロマトグラフィーに付し、添付図面に示される通
りのTLCグラム［薄層板：シリカゲル60 F₂₅₄（メルク社
製）、展開溶タノール／水（６：４：１）、発色：20％
硫酸溶液の噴霧後に105℃で加熱］を指標としてクロロ
ホルム／メタノール／水（６：４：１）で繰り返し精製
した後に、セファデックスLH-20を100g充填したカラム
によるクロマトグラフィーに付し、上記TLCグラムを指
標として水／メタノール（１：１）で分画溶出させるこ
とによりシスタノサイドＦ（150mg）とシスタノサイド
Ｉ（120mg）を得た。

これらのシスタノサイド類の物理化学的性質は下記の通
りであった。

シスタノサイドＦ旋光度（MeOH）：［α］^２５ _Ｄ−83.5°（ｃ＝0.9） IRスペクトル： 3430,1698,1634,1606,1520 FD-MSスペクトル（m/z）：５１１（Ｍ＋Na）^＋ ^１ H-NMRスペクトル（メタノール−ｄ_４） δppm： 1.11 （3H,d,J＝６Hz，ラムノースのCH₃） 4.57 （1H,d,J＝８Hz，グルコースのH-1） 5.15 （1H,brs,＝ラムノースのH-1） 6.28 （1H,d,J＝１６Hz，Ar-CH＝CH-）６，７−7.2 （3H,Ar-H） 7.60 （1H,d,J＝16Hz,Ar-CH＝CH-）^１３ C-NMRケミカルシフト（メタノール-d₄）：カフェー酸１；127.8 ２；114.9 ３；149.6 ４；146.7 ５；116.6 ６；123.1 α；168.3 β；115.4 γ；147.8 グルコース１α；94.0 β；98.1 ２α；71.2 β；74.7 ３α；79.2 β；81.6 ４α；70.3 β；70.3 ５α；76.1 β；77.4 ６α；62.5 β；62.5 ラムノース１；102.9 ２；72.2 ３；72.3 ４；73.9 ５；70.9 ６；18.4 シスタノサイドＩ旋光度(MeOH)： ▲［α］^２０ _Ｄ▼−82.2°（ｃ＝1.5） IRスペクトル： 3430,1698,1634,1606,1518^１ H-NMRスペクトル（メタノール−d₄） δppm： 1.10 （3H,d,J＝6Hz，ラムノースのCH₃） 4.60 （1H,d,J＝8Hz，グルコースのH-1） 5.18 （1H,brs，ラムノースのH-1） 6.36 （1H,d,J＝16Hz，Ar-CH＝CH-） 6.84 （2H,d,J＝9Hz，p-クマル酸のH-3,5） 7.51 （2H,d,J＝9Hz，p-クマル酸のH-2,6） 7.70 （1H,d,J＝16Hz，Ar-CH＝CH-）^１３ C-NMRケミカルシフト（メタノール-d4）：ｐ−クマル酸１；127.2 ２；116.9 ３；131.3 ４；161.3 ５；131.3 ６；116.9 α；168.3 β；115.0 γ；147.6 グルコース１α；94.1 β；98.2 ２α；71.2 β；74.7 ３α；79.2 β；81.7 ４α；70.4 β；70.4 ５α；76.1 β；77.4 ６α；62.4 β；62.5 ラムノース１；103.0 ２；72.1 ３；72.3 ４；73.8 ５；70.9 ６；18.4 元素分析（C₂₁H₂₈O₁₂・1/2H₂O）：理論：C,52.54；Ｈ，6.02 実測：C,52.39；Ｈ，6.07 薬効薬理試験例１ (1)目的斉藤等の方法（「第16回和漢薬シンポジゥム講演要旨
集」第66頁、1983年）に従い、ストレス負荷後に生じる
実験動物の性行動障害及び学習記憶障害に対して、本発
明による剤の有効成分が及ぼす影響を調べる。

(2)実験動物９週令以上であって性行動の正常なIV-CS系の雄性マウ
ス（体重２８−３２ｇ）を選び、１週間にわたり温度２
３±１℃、湿度５５±５％の条件下で予備飼育した。

この場合の「性行動が正常」とは、個室ケージで飼育し
た雄性マウスを、エストラジオール１０μg/Kgの連日皮
下投与による発情状態になされている雌性マウス１０匹
と毎日１０分間同居させる場合に、１週間に５回以上イ
ントロミッションに成功することを指称する。

(3)ストレス負荷実験動物である雄性マウスを宙吊り状態で且つ鼻先が水
面に接触する程度の高さレベル位置に固定させ、この状
態を試験初日は３０分間維持させ、２日目以降は宙吊り
時間を徐々に延長して試験最終日の１５日目では２時間
にわたり宙吊り状態に維持させてストレスを負荷した。
このようにして１５日間の試験期間にわたり連日ストレ
スを負荷させても、対照のストレス非負荷群と比較して
体重減少は認められず、又運動協調性障害、筋緊張度低
下、自発運動の低下及び探索運動の低下は認められなか
ったが、性行動と学習記憶行動に低下が認められた。

(4)実験方法と被験薬物の効果判定方法上記のストレス負荷は毎日規定の時刻（午後１時）から
行い、試験群についてはストレス負荷後に被験薬物を経
口投与し、翌朝の９時から学習（記憶）行動を調べ、こ
れを１５日間にわたり繰り返し、被験薬物の及ぼす影響
乃至効果を検討する。

(a)性行動の判定エストラジオールが１０μg/Kgの用量で連日皮下投与さ
れた各雌性マウス１０匹が入れられたケージ（30×40×
20cm）内に実験動物である雄性マウス１匹を１日１回１
０分間同居させ、その間にリッキング、マウンティング
及びイントロミッションの各性行動を行った回数及び行
動を起こす迄の時間を測定した。この場合に一群１０匹
とし、群間の有意差検定には分散分析法を採用した。

(b)学習（記憶）行動の判定電流（DC 36V,0.1mA）が流れている床にゴム栓（直径５
cm、高さ５cm）を載置し、実験動物である雄性マウスに
５分間はこのゴム栓上から降りないように学習させてお
く。この学習処置を施した雄性マウスを上記のゴム栓の
上に乗せ、５分間以内に誤ってゴム栓上から降りた回数
を測定した。この場合の群間の有意差検定には分散分析
法を採用した。

(5)結果及び解析 (a)性行動についてｉ）結果ストレス負荷による性行動の低下及び各被験薬物の投与
によるその回復程度を調べた結果は下記の表に示される
通りであった。

ii）解析雄性マウスの性行動はリッキング、マウンティング、イ
ントロミッション、射精の経過を辿る。従って、或る処
置を施した雄性マウスが発情状態の雌性マウスと同居し
た時にその性行動に如何なる変化が生じるかを調べるこ
とにより当該処置の影響乃至効果を判定することができ
る。即ち、一定時間内に一群１０匹中それぞれの性行動
をとる回数が多い程、及び性行動を起こす迄の時間が短
い程性行動が活発であると判断することができる。

前記の表から明らかなように、ストレスの負荷された雄
性マウスの性行動は全般的に低下する。ストレスを負荷
させた被験群とストレスを負荷させなかった対照群とを
比較する場合に初期の性行動であるリッキングよりも後
期の性行動になる程顕著な差異が認められる。尚、各性
行動を起こす回数及び開始迄の所要時間について述べれ
ば、ストレス負荷は個々のマウスが性行動をとる回数を
減少させ且つ性行動を開始する迄に要する時間に遅れが
認められた。

このように、ストレス負荷により性行動の低下した雄性
マウスに被験薬物を投与することにより性行動に明らか
な改善が認められた。このことは、被験薬物が、ストレ
スに基因する性機能の低下を有効に改善する効果を有し
ていることを示すものである。

(b)学習（記憶）行動についてｉ）結果試験結果は第２及び３図に示される通りであった。

ii）解析５分間の試験時間内に誤ってゴム栓上から降りてしまっ
た１５日間の試験期間内における平均回数が、ストレス
非負荷の対照群に対して、ストレスの負荷された被験群
においては有意に増加し、これからストレス負荷により
学習行動において有意の低下が生じることが判る。

ストレス負荷により学習行動がこのように低下した雄性
マウスに被験薬物を投与することにより、誤ってゴム栓
上から降りてしまう回数は明らかに減少する傾向が見ら
れた。

これらの事実は、ストレスに基因する記憶能力減退改善
効果を被験薬物が有していることを示すものである。

薬効薬理試験例２（急性毒性試験） ddY系マウス（体重25-30g）を温度２３±１℃、湿度５
５±５％の室内で自由給餌、自由給水の条件下で１週間
予備飼育して健康状態の良好な個体を選び、１群５匹と
した。次いで１８時間絶食させた後に被験薬物（シスタ
ノサイドＦ及びＩ）を各500mg/Kgの用量で経口投与し
た。

何れの被験薬物に関しても投与３０分後から体温降下が
認められたが、約３時間に回復し、この間に弱いながら
鎮静化の発現が認められた。死亡例は全くなかった。そ
の後、１週間にわたって体温の測定及び一般症状の観察
を行ったが、対照群との間に有意差は認められず、又剖
検によっても異常は何等認められなかった。

このことは、本発明による剤の有効成分である被験薬物
の毒性が極めて低いことを示しており、従って本発明に
よる剤は使用安全性において優れていることを示唆して
いる。

製剤例１（顆粒剤）参考例の途次で得た画分１（シスタノサイドＦとＩとに
未だ分画されていないもの）２０ｇに澱粉９５ｇおよび
乳糖８０ｇを添加して均一に混合し、次いでヒドロキシ
プロピルセルロース（5g）エタノール溶液を用いて常法
により湿式製粒し、乾燥させ、整粒して顆粒剤を得た。
この顆粒剤を、ラミネート紙により１ｇ宛分包する。こ
の顆粒剤の服用量は１日３回、各１包宛である。

製剤例２（カプセル剤）シスタノサイドＦ１ｇに乳糖１０ｇ及び澱粉8.5gを添加
して均一に混合し、次いでヒドロキシプロピルセルロー
ス（0.5g）エタノール溶液を用いて常法により湿式製粒
し、乾燥させ、整粒し、１カプセル当たり200mg充填し
てカプセル剤を得た。カプセル剤を得た。このカプセル
剤の服用量は１日３回、各２カプセル宛である。

製剤例３（内服用液剤）シスタノサイドＦ１ｇと、ブドウ糖10gと、適宜量の香
料とを14％エタノール水溶液に溶解させ全量を200mlと
なして内服用液剤を得た。この液剤の服用量は１日２
回、各10ml宛である。

【図面の簡単な説明】

第１図は肉慫蓉から抽出されたシスタノサイドＦ及びＩ
のTLCグラムであり、第２及び３図はストレスがマウス
の学習記憶行動に及ぼす低下作用及び本発明による剤の
内でシスタノサイドＦおよび画分１がそれぞれ及ぼすそ
の改善作用を示すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者小林久美子長野県上伊那郡箕輪町中箕輪2132−37 養命酒製造株式会社中央研究所内 (56)参考文献・Ｃｈｅｍｉｃａｌ＆ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ，33巻４号1452−７頁（1985年) ・薬学雑誌， 106巻７号562−６頁（1986年)

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（式中R₁は水素原子又はハイドロキシル基を意味し、R₂
はα-L-ラムノピラノシル-(1→3)-D-グルコピラノース-
4-イル基を意味する）にて示されるシスタノサイド類の
少なくとも一種を有効成分として含有していることを特
徴とする、ストレスによる機能障害改善剤。