JPH06247973A - ３−ビニルセファロスポリンの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】弱塩基を使用するWittig反応を用いる、式Ｉの
3-ビニルセファロスポリン化合物の製造法。 【化１】 ［式中、Ｒ₁及びＲ₂は同一でも異なっていてもよく、水
素または有機基を表す］ 【効果】反応を温和な条件下で実施し得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、式Ｉ：

【０００２】

【化７】

【０００３】［式中、Ｒ₁及びＲ₂は同一でも異なってい
てもよく、水素または有機基を表す］の3-ビニルセファ
ロスポリン化合物の経済的且つ簡単な製造法に関する。

【０００４】

【従来の技術】式Ｉの化合物が、価値の高い3-置換ビニ
ルセファロスポリン製造用の有用な出発物質であること
は公知である。

【０００５】置換基Ｒ₁及びＲ₂に於いて、有機基は、例
えば、場合により分枝のアルキル、アルケニル若しくは
アルキニル基；完全若しくは部分飽和シクロアルキル
基；または場合により置換したアリール基、アラルキル
基若しくは複素環であってもよい。シクロアルキル基、
アリール基、アラルキル基または複素環は、任意の位置
で、例えば、ハロゲン、窒素、硫黄、アルコキシ、アリ
ールオキシまたは官能基、例えば、カルバルコキシ若し
くはカルボキシアミド基により置換されていてもよい。
Ｒ₁及びＲ₂は、場合により置換された環系の一部も形成
し得る。

【０００６】本発明の好ましい態様に於いて、Ｒ₁及び
Ｒ₂の一方は水素であり、他方は； ｉ）水素、低級アルキル、低級アルケニル若しくは低級
アルキニル； ii）その環の各々が場合により、１〜３個の低級アルコ
キシ、低級アルキルチオ、ハロゲン、低級アルキル、ニ
トロ、ヒドロキシ、アシルオキシ、カルボキシ、カルバ
ルコキシ、低級アルキルカルボニル、低級アルキルスル
ホニル、低級アルコキシスルホニル、アミノ-(低級)-ア
ルキルアミノ若しくはアシルアミド基で置換されてい
る、低級シクロアルキル、低級シクロアルキル低級アル
キル、アリール、(アリール)-低級アルキル、複素環基
若しくは複素環-(低級)-アルキル；または iii）式-ＣＨ₂Ｚ［式中、Ｚは、ａ）ヒドロキシ、低級
アルコキシ、ホルミルオキシ、アセチルオキシ、低級ア
ルキルスルホニルオキシ、ハロゲン、N-モノ(低級)アル
キルカルバモイルオキシ若しくはN,N-ジ(低級)アルキル
カルバモイルオキシ；ｂ)複素環基；ｃ）式：-Ｓ(Ｏ)_m
Ｒ₉（但し、Ｒ₉は、脂肪族、芳香族脂肪族、脂環式、芳
香族若しくは複素環基であり、ｍは、０、１若しくは２
である）の基；またはｄ）非環式若しくは環式アンモニ
ウム基である］の基である。

【０００７】好適な複素環基としては、各環に４〜７
個、好ましくは５または６個の原子を有する単一または
縮合複素環が挙げられる。各環は、酸素、窒素及び硫黄
から選択される４個以下のヘテロ原子を有する。各複素
環は、(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルコキシ、ハ
ロゲン、トリハロ-(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、ヒドロキシ、
オキソ、メルカプト、アミノ、カルボキシル、カルバモ
イル、ジ-(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルアミノ、カルボキシメチ
ル、カルバモイルメチル、スルホメチル及びメトキシカ
ルボニルアミノから選択される１〜３個の任意の置換基
を有していてもよい。

【０００８】好適な複素環の例としては、未置換及び置
換のイミダゾリル、ジアゾリル、トリアゾリル、テトラ
ゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、チアトリアゾリ
ル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、ベンズイミダゾ
リル、ベンズオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、トリア
ゾリルピリジル、プリニル、ピリジル、ピリミジニル、
ピリダジニル、ピラゾリル及びトリアジニルが挙げられ
る。

【０００９】好適な複素環としては、未置換及び置換の
5-ヒドロキシ-4-ピリドン-2-イル、1,2,3-トリアゾリ
ル；1,2,4-トリアゾリル；テトラゾリル；オキサゾリ
ル；チアゾリル；1,3,4-オキサジアゾリル；1,3,4-チア
ジアゾリル及び1,2,3-チアジアゾリルが好ましい。好ま
しい複素環としては、1,5-ジヒドロキシ-4-ピリドン-2-
イル、5-ヒドロキシ-1-メチル-4-ピリドン-2-イル、5-
ヒドロキシ-4-ピリドン-2-イル、1-メチル-1H-テトラゾ
ル-5-イル-2-メチル-1,3,4-チアジアゾル-5-イル、1-カ
ルボキシメチル-1H-テトラゾル-5-イル、6-ヒドロキシ-
2-メチル-5-オキソ-2H-1,2,4-トリアジン-3-イル、1,2,
3-トリアゾル-5-イル、4-メチル-チアゾル-5-イルが挙
げられる。

【００１０】非環式アンモニウム基の例としては、(1-
カルバモイル-2-ヒドロキシエチル)-ジメチルアンモニ
ウム、(カルバモイルメチル)(エチル)-メチルアンモニ
ウムまたはトリメチルアンモニウムが挙げられる。

【００１１】環式アンモニウム基の例としては、アルキ
ル、カルバモイルアルキル、アミノアルキル若しくはカ
ルボキシアルキルでN-置換されているピロリジニウム；
アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシアミド、
アルコキシカルボニル、アミノ、モノアルキルアミノ若
しくはジアルキルアミノで一若しくは二置換され得るピ
リジニウムまたはシクロペンテノピリジニウムが挙げら
れる。

【００１２】他に記載しない限り、有機基は、炭素原子
10個以下を含むのが好ましく、「低級」とは、炭素原子
４個以下の基を表す。

【００１３】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】式Ｉの
化合物の製造法は公知であり、本明細書中参照として含
まれる欧州特許第0503453号に開示されている。しかし
欧州特許第0503453号に記載の如く、これらの公知方法
では、高価な保護基を使用しなければならず、また多く
の中間段階が必要である。欧州特許第0503453号に開示
の発明は、出発物質として7-アミノセファロスポラン酸
を使用するWittig反応に於いてシリル保護基を使用する
ことにより従来法の問題を処理した。

【００１４】欧州特許第0503453号に開示の方法では、
以下の反応： ｉ）式II：

【００１５】

【化８】

【００１６】［式中、Ｒはシリル保護基である］の化合
物を式：Ｐ(Ｒ₄)₃またはＰ(ＯＲ₄)₃の化合物と反応させ
て、式III：

【００１７】

【化９】

【００１８】［式中、Ｘは、-Ｐ(Ｒ₄)₃Ｉまたは-Ｐ(Ｏ)
(ＯＲ₄)₂であり、Ｒは上記定義通りであり、Ｒ₄は低級
アルキル基またはアリール基である］の化合物を製造
し； ii）式IIIの化合物と強塩基を反応させて、式IV：

【００１９】

【化１０】

【００２０】［式中、Ｘ⁺は、-Ｐ⁺(Ｒ₄)₃または-Ｐ(Ｏ)
(ＯＲ₄)₂Ｙであり、Ｒ₄及びＲは上記定義通りであり、
Ｙはアルカリカチオンまたは強い有機塩基のプロトン化
形である］の化合物を製造し；次いで iii）式IVの化合物と式Ｖ：

【００２１】

【化１１】

【００２２】［式中、Ｒ₁及びＲ₂は上記定義通りであ
る］の化合物と反応させて、式Ｉの化合物を製造する；
に従って進行する。得られた方法は、簡単、経済的であ
り且つ、単一反応容器で実施し得る。またこの方法は、
シリル保護基が、簡単な加水分解またはアルコリシスに
より除去可能という長所もある。

【００２３】段階ii)で使用する塩基は、強い有機塩基
であり、好適な例としては、グアニジン(例えば、テト
ラメチルグアニジン)、アミジン(例えば、1,8-ジアザビ
シクロ[5.4.0]ウンデク-7-エン及び1,5-ジアザビシクロ
[4.3.0]ノン-5-エン)、窒素含有化合物のアルカリ塩(例
えば、1,1,1,3,3,3-ヘキサメチルジシラザンのＬiまた
はＮa塩及びＬi-ジイソプロピルアミド)、ブチルリチウ
ム、アルカリ金属の水素化物及びイミノホスホランが挙
げられる。塩基は湿気を含んでいてはならず、生成物の
シリル化度を保持するためにシリル化し得る部分を全く
含んではいけないとも記載されている。

【００２４】

【課題を解決するための手段】驚くべきことに、今回、
欧州特許第0503453号に記載の方法は、弱塩基を用いて
実施し得ることが知見された。反応を温和な条件下で実
施し得るので、これは特に都合が良い。

【００２５】従って、本発明は、実質的に上記の如く、
段階ii)で弱塩基を使用することにより改良される式Ｉ
の化合物の製造法を提供する。

【００２６】Wittig反応で弱塩基を使用し得ることは実
に意外である。弱塩基を使用すると、β-ラクタム環が
開環する可能性が減少し、塩基とアルデヒド若しくはケ
トンとの不必要な縮合が回避または制限されるという長
所もある。

【００２７】その共役酸がシリル化可能な官能基を持つ
弱塩基であるのが好ましく、反応段階ii)をシリル化剤
の存在下で実施し、シリル化可能な官能基のシリル化を
実施するのが好ましい。意外にもこの反応は、非常に強
力なシリル化剤であり且つ容易に除去し得る7-アミノ基
上のシリル保護基が、塩基または共役酸により除去され
ずに進行する。シリル保護基を反応時に除去してしまう
と、アミノ基は自由に式Ｖのアルデヒドまたはケトンと
反応し、これにより反応が破壊されるだろう。

【００２８】弱塩基は、 ｉ）式：

【００２９】

【化１２】

【００３０】［式中、Ｒ₅は水素、アルキル若しくはア
リールであり、Ｒ₆及びＲ₇は同一でも異なっていてもよ
く、各々式：-ＣＯＯＲ₈、-ＣＮ、-ＳＯ₂Ｒ₈、-ＣＯＲ₈
若しくは-ＣＯＮ(Ｒ₈)₂の活性化基であるか；またはＲ₅
及びＲ₆は同一でも異なってもよく、各々アリールであ
り、Ｒ₇は、式：-ＣＯＯＲ₈、-ＣＮ、-ＳＯ₂Ｒ₈、-ＣＯ
Ｒ₈若しくは-ＣＯＮ(Ｒ₈)₂の活性化基であり；Ｗ⁺はカ
チオン(例えば、リチウム、ナトリウム若しくはカルシ
ウム)であり；及びＲ₈はアルキル、シクロアルキル若し
くはアリールである］を有する化合物；及び ii)式：Ｒ₁₀-ＣＯＯ^-Ｗ⁺［式中、Ｒ₁₀は、場合により分
枝のアルキル基または場合により置換したアリール基で
あり；Ｗ⁺は上記定義通りである］のカルボン酸の塩か
ら選択されるのが好ましい。

【００３１】特に好ましい弱塩基は、マロン酸ジエチル
エステル、アセト酢酸エステル、酢酸、ピバリン酸若し
くはエチルヘキサン酸のリチウム及びナトリウム塩また
は、安息香酸のリチウム塩である。

【００３２】シリル化剤は弱塩基の添加前または弱塩基
と同時に反応混合物に添加し得、両方の場合で、弱塩基
の共役酸のシリル化可能な官能基のシリル化が起きる。
N,O-ビス(トリメチルシリル)-アセトアミド及びビスシリ
ルウレアは、シリル化剤として特に好適であり、欧州特
許第0503453号に実施例が記載されている。

【００３３】本反応は、反応条件下で不活性である好適
な溶媒または溶媒混合物、例えば、不活性エーテル(例
えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、エチレ
ングリコールジアルキルエーテル若しくはｔ-ブチルメ
チルエーテル)、不活性アミド(例えば、ジメチルホルム
アミド、ジメチルアセトアミド若しくはN-メチルピロリ
ドン)、ウレア(例えば、テトラメチルウレア、1,3-ジメ
チル-3,4,5,6-テトラヒドロ−2(1H)-ピリミドン若しく
は1,3,2-イミダゾリジノン)、ニトリル(例えば、アセト
ニトリル)、またはハロゲン化炭化水素(例えば、ジクロ
ロメタン)中で実施可能である。

【００３４】式Ｖのアルデヒドまたはケトンの置換基
が、容易にシリル化し得る官能基を含む場合には、置換
基を反応前に好適なシリル化剤で一時的にブロックしな
ければならない。式Ｖの化合物の量は、式IVの化合物の
量をベースとして化学量論量または過剰であってもよ
い。

【００３５】反応は、広範囲の温度で実施可能であり、
−70℃〜＋70℃が好ましい。

【００３６】式Ｉの化合物は、慣用法で単離し得る。シ
リル保護基は、簡単な加水分解またはアルコリシスで除
去し得る。これは、脱シリル化剤を反応混合物に添加す
るか、または分離可能な水性相に生成物を抽出し、(ア
ルカリ性または酸性条件下で)水を添加し、ｐＨ値を等
電点に調節し、次いで場合により有機溶媒を添加して沈
殿させることにより実施し得る。

【００３７】式IIの化合物は公知であり、欧州特許第05
03453号に記載通りに製造し得る。

【００３８】式Ｉの化合物は、価値の高いセファロスポ
リン抗生物質の製造用の重要な出発物質である。3-位で
ビニル-置換されているセファロスポリンは経口で吸収
分解されるか、または非経口で投与され、その広範な活
性スペクトルにより特徴づけられる。以下の化合物、例
えば、

【００３９】

【化１３】

【００４０】

【化１４】

【００４１】を製造し得る。

【００４２】

【実施例】本発明をより詳細に説明するが、その範囲は
限定しない以下の実施例に於いて、温度は全て摂氏で表
される。

【００４３】実施例１：7-アミノ-3-(3-アセトキシ-1-
プロペニル)-3-セフェム-4-カルボン酸 N,O-ビス(トリメチルシリル)アセトアミド(7.5ml)を氷
上の7-トリメチルシリルアミノ-3-トリフェニル-ホスホ
ニウムメチル-3-セフェム-4-カルボン酸トリメチルシリ
ルエステル-ヨーダイド(6g)を含むジクロロメタン溶液
(25ml)に添加した。５〜10℃の、ナトリウムアセト酢酸
エチルエステル(2.35g)を含むN-メチルピロリドン溶液
(25ml)を滴下添加した。次いで濃赤色溶液を２℃に冷却
し、アセトキシアルデヒド(5.16ｇ)を滴下添加した。反
応混合物を10℃で2時間撹拌し、次いで酢酸(100ml)及び
水(100ml)の混合物に添加した。水性相のpHをアンモニ
アで７に調整し、有機相を分離した。１:１に希釈した
濃塩酸を添加してpHを3.5に調整すると、表記化合物が
沈殿した。懸濁液を５℃で30分撹拌し、表記化合物を濾
別し、アセトン中で洗浄して乾燥した。

【００４４】実施例２：7-アミノ-3-(プロプ-1-エニル)
-3-セフェム-4-カルボン酸 N,O-ビス(トリメチルシリル)アセトアミド(5ml)を氷上
の7-トリメチルシリルアミノ-3-トリフェニル-ホスホニ
ウムメチル-3-セフェム-4-カルボン酸トリメチルシリル
エステルヨーダイド(6g)を含むジクロロメタン溶液(25m
l)に添加した。５〜10℃の、ナトリウムマロン酸ジエチ
ルエステル(2.35g)を含むN-メチルピロリドン溶液(25m
l)を滴下添加した。その後、この溶液を−10℃に冷却
し、ジクロロメタン(10ml)中に溶解したアセトアルデヒ
ド(1.32ｇ)を添加した。アセトアルデヒドを添加後、反
応混合物を０℃で48時間撹拌した。その後、反応を実施
例１の記載通りに実施した。

【００４５】実施例３：7-アミノ-3-(プロプ-1-エニル)
-3-セフェム-4-カルボン酸 N,O-ビス(トリメチルシリル)アセトアミド(36.5ml)を7-
トリメチルシリルアミノ-3-トリフェニル-ホスホニウム
メチル-3-セフェム-4-カルボン酸トリメチルシリルエス
テル-ヨーダイド(24g)を含むジクロロメタン溶液(500m
l)に−10℃で添加した。N-メチルピロリドン(75ml)中の
リチウムベンゾエート(12.8g)の懸濁液を添加した。ア
セトアルデヒド(9g)を添加し、反応混合物を0℃で２日
間撹拌した。余分のアセトアルデヒド及び殆どのジクロ
ロメタンをロータリーエバポレーターで除去した。次い
で、残渣を水(1500ml)中で撹拌し、濾過した。残渣をア
ンモニア水(200ml)に溶解し、水性相をジクロロメタン
(100ml)を使用して２回抽出した。有機相を除去後、１:
１に希釈した濃塩酸を水性相に添加して、pHを3.5に調
節すると、表記化合物が沈殿した。懸濁液を５℃で30分
撹拌し、表記化合物を濾別し、アセトン中で洗浄して乾
燥した。

【００４６】実施例４：7-アミノ-3-(3-アセトキシ-1-
プロペン-1-イル)-3-セフェム-4-カルボン酸 N,O-ビス(トリメチルシリル)アセトアミド(7.5ml)を氷
上の7-トリメチルシリルアミノ-3-トリフェニル-ホスホ
ニウムメチル-3-セフェム-4-カルボン酸トリメチルシリ
ルエステルヨーダイド(６ｇ)を含むジクロロメタン溶液
(25ml)に添加した。ナトリウム-エチルヘキサノエート
(2.5g)を含むN-メチルピロリドン溶液(15ml)を０〜５℃
で滴下添加した。アセトキシ-アセトアルデヒド(5ml)を
滴下添加した。反応混合物を０℃で一晩撹拌し、実施例
１の記載通りに実施した。

【００４７】実施例５：7-アミノ-3-[2-(4-メチル-5-チ
アゾリル)ビニル]-3-セフェム-4-カルボン酸 7-トリメチルシリルアミノ-3-トリフェニル-ホスホニウ
ムメチル-3-セフェム-4-カルボン酸トリメチルシリルエ
ステル-ヨーダイド(10.2g)を含むジクロロメタン溶液(2
5g)を−10℃に冷却した。N,O-ビス(トリメチルシリル)
アセトアミド(4.7ml)、ジメチルホルムアミド(11ml)及
びリチウムアセテート(1.1g)を添加し、混合物を0〜5℃
で30分撹拌した。次いで、ジクロロメタン(5ml)中の4-
メチル-チアゾール-5-カルボキシアルデヒド(2g)の溶液
を滴下添加した。次いで、混合物を30℃で10時間撹拌
し、10℃に冷却し、10℃でさらに１時間撹拌した。表記
化合物を吸引漏斗を使用して分離し、メタノールで洗浄
し、真空乾燥した。

【００４８】実施例６：7-アミノ-3-(プロプ-1-エニル)
-3-セフェム-4-カルボン酸 7-トリメチルシリルアミノ-3-トリフェニル-ホスホニウ
ムメチル-3-セフェム-4-カルボン酸トリメチルシリルエ
ステル−ヨーダイド(68.7g)を含むジクロロメタン溶液
(220.7g)を-10℃に冷却した。N,O-ビス(トリメチルシリ
ル)アセトアミド(58.4ml)及びN,N-ジメチルアセトアミ
ド(81ml)を撹拌しながら添加した。リチウムピバレート
(14.05g)溶液を添加し、混合物を−10℃で30分撹拌し
た。アセトアルデヒド(17.2ml)を添加し、反応混合物を
-10℃で90分、次いで0℃で一晩撹拌した。余分のアセト
アルデヒド及びジクロロメタンをいくらか真空下、20℃
でロータリーエバポレーターで除去した。次いで残渣を
氷冷した水(500ml)及びジクロロメタン(100ml)中で撹拌
した。pH値をアンモニア水で8.5に調節した。次いで相
分離し、水性相をジクロロメタン(100ml)で洗浄し、ア
セトン(200ml)と混合した。pHを30℃で１:１に希釈した
濃塩酸で3.5に調節し、表記化合物を沈殿させた。懸濁
液を撹拌しながら氷浴中で２時間保持し、吸引漏斗を使
用して表記化合物を単離した。表記化合物を水(100ml)
とアセトン(50ml)の混合物で洗浄し、次いでアセトン(5
0ml)で再洗浄した。次いで、表記化合物を40℃の乾燥チ
ャンバ内で真空乾燥した。

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式Ｉ： 【化１】 ［式中、Ｒ₁及びＲ₂は同一でも異なっていてもよく、水
   素または有機基を表す］の３−ビニルセファロスポリン
   化合物を、 ｉ）式II： 【化２】 ［式中、Ｒはシリル保護基である］の化合物を、式：Ｐ
   (Ｒ₄)₃またはＰ(ＯＲ₄)₃の化合物と反応させて、式II
   I： 【化３】 ［式中、Ｘは、-Ｐ(Ｒ₄)₃Ｉまたは-Ｐ(Ｏ)(ＯＲ₄)₂であ
   り、Ｒは上記定義通りであり、Ｒ₄は低級アルキル基ま
   たはアリール基である］の化合物を製造し； ii）式IIIの化合物と塩基を反応させて、式IV： 【化４】 ［式中、Ｘ⁺は、-Ｐ⁺(Ｒ₄)₃または-Ｐ(Ｏ)(ＯＲ₄)₂Ｙで
   あり、Ｒ₄及びＲは上記定義通りであり、Ｙはアルカリ
   カチオンまたは塩基のプロトン化形である］の化合物を
   製造し；次いで iii）式IVの化合物と式Ｖ： 【化５】 ［式中、Ｒ₁及びＲ₂は上記定義通りである］の化合物と
   反応させて製造する方法に於いて、段階ii)で式IIIの化
   合物を弱塩基と反応させることを特徴とする前記方法。
2. 【請求項２】 弱塩基の共役酸が容易にシリル化し得る
   官能基を有し、反応をシリル化剤の存在下で実施するこ
   とを特徴とする請求項１に記載の方法。
3. 【請求項３】 弱塩基が、 ｉ)式： 【化６】 ［式中、Ｒ₅は水素、アルキル若しくはアリールであ
   り、Ｒ₆及びＲ₇は同一でも異なっていてもよく、各々
   式：-ＣＯＯＲ₈、-ＣＮ、-ＳＯ₂Ｒ₈、-ＣＯＲ₈若しくは
   -ＣＯＮ(Ｒ₈)₂の活性化基であるか；またはＲ₅及びＲ₆
   は同一でも異なってもよく、各々アリールであり、Ｒ₇
   は、式：-ＣＯＯＲ₈、-ＣＮ、-ＳＯ₂Ｒ₈、-ＣＯＲ₈若し
   くは-ＣＯＮ(Ｒ₈)₂の活性化基であり；Ｗ⁺はカチオンで
   あり；及びＲ₈はアルキル、シクロアルキル若しくはア
   リールである］を有する化合物；及び ii)式：Ｒ₁₀-ＣＯＯ^-Ｗ⁺［式中、Ｒ₁₀は、場合により分
   枝のアルキル基若しくは場合により置換されたアリール
   基であり；及びＷ⁺は上記定義通りである］のカルボン
   酸の塩から選択されることを特徴とする請求項２に記載
   の方法。
4. 【請求項４】 弱塩基がマロン酸ジエチルエステル、ア
   セト酢酸エステル、酢酸、ピバリン酸若しくはエチルヘ
   キサン酸のリチウム若しくはナトリウム塩であるか、安
   息香酸のリチウム塩であることを特徴とする請求項３に
   記載の方法。
5. 【請求項５】 シリル化剤を弱塩基の添加前に反応混合
   物に添加することを特徴とする請求項２に記載の方法。
6. 【請求項６】 シリル化剤を弱塩基と同時に反応混合物
   に添加することを特徴とする請求項２に記載の方法。
7. 【請求項７】 シリル化剤がN,O-ビス(トリメチルシリ
   ル)アセトアミドまたはビスシリルウレアであることを
   特徴とする請求項２に記載の方法。