JPH06261741A - 微生物増殖方法 - Google Patents
微生物増殖方法Info
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- JPH06261741A JPH06261741A JP5050710A JP5071093A JPH06261741A JP H06261741 A JPH06261741 A JP H06261741A JP 5050710 A JP5050710 A JP 5050710A JP 5071093 A JP5071093 A JP 5071093A JP H06261741 A JPH06261741 A JP H06261741A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 流加の指標としてＤＯを採用して装置を簡素
化する。 【構成】 培地中の溶存酸素量が設定値以上となった際
に、培地にグルコース栄養液を添加する。培地のグルコ
ース濃度は一定範囲に保持されるので、増殖の効率が向
上する。ＤＯは検出が、迅速かつ簡単であり、装置は特
別なものとならず、複雑化しない。
化する。 【構成】 培地中の溶存酸素量が設定値以上となった際
に、培地にグルコース栄養液を添加する。培地のグルコ
ース濃度は一定範囲に保持されるので、増殖の効率が向
上する。ＤＯは検出が、迅速かつ簡単であり、装置は特
別なものとならず、複雑化しない。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、流加培養による微生物
の増殖方法に関する。
の増殖方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】微生物を増殖するにあたり、培地を貯留
する培養槽中へ培養時間の経過に応じて連続または間欠
的に栄養液を流加する流加培養が知られている。この流
加培養では、培地中の特定成分の濃度を任意に制御可能
であり、例えば糖濃度を培養する微生物に好適な一定範
囲に保持することができる。このため目的とする微生物
を効率よく増殖できることから広く採用されている。
する培養槽中へ培養時間の経過に応じて連続または間欠
的に栄養液を流加する流加培養が知られている。この流
加培養では、培地中の特定成分の濃度を任意に制御可能
であり、例えば糖濃度を培養する微生物に好適な一定範
囲に保持することができる。このため目的とする微生物
を効率よく増殖できることから広く採用されている。
【０００３】流加培養における栄養液の流加のタイミン
グを制御するに際して、１）糖濃度（特にグルコース濃
度）をバイオセンサ（グルコースセンサ）で検出して、
この検出値に応じて栄養液を流加する方法、２）溶存酸
素量を指標とする方法、３）ｐＨ値、４）酸化還元電
位、５）呼吸商（ＣＯ2ガス量とＯ2消費量との比）、
６）排気中のエタノール濃度および７）菌体濃度をそれ
ぞれ指標とする方法等が提案されている。
グを制御するに際して、１）糖濃度（特にグルコース濃
度）をバイオセンサ（グルコースセンサ）で検出して、
この検出値に応じて栄養液を流加する方法、２）溶存酸
素量を指標とする方法、３）ｐＨ値、４）酸化還元電
位、５）呼吸商（ＣＯ2ガス量とＯ2消費量との比）、
６）排気中のエタノール濃度および７）菌体濃度をそれ
ぞれ指標とする方法等が提案されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】上記の各方法中では、
１）のグルコースセンサによる方法が広く用いられてい
るが、この方法にはグルコースセンサの検出速度が迅速
ではないことや、装置が複雑化するなどの問題があっ
た。また、他の２）〜７）の方法においてもいまだ満足
するものはなかった。このため、指標の検出速度が迅速
で装置を簡素化できる方法が求められていた。
１）のグルコースセンサによる方法が広く用いられてい
るが、この方法にはグルコースセンサの検出速度が迅速
ではないことや、装置が複雑化するなどの問題があっ
た。また、他の２）〜７）の方法においてもいまだ満足
するものはなかった。このため、指標の検出速度が迅速
で装置を簡素化できる方法が求められていた。
【０００５】
【課題を解決するための手段および作用】発明者は、微
生物を培養している培地中のグルコース濃度の増減と溶
存酸素量の増減との間にきわめて密接な関係が存在する
ことから、グルコース濃度に代えて溶存酸素量を栄養液
添加の指標とするための研究を重ね、本発明を完成した
ものである。
生物を培養している培地中のグルコース濃度の増減と溶
存酸素量の増減との間にきわめて密接な関係が存在する
ことから、グルコース濃度に代えて溶存酸素量を栄養液
添加の指標とするための研究を重ね、本発明を完成した
ものである。
【０００６】上記課題を解決するためになされた本発明
の要旨は、流加培養による微生物増殖方法において、培
地中の溶存酸素量が増加した際に、前記培地に栄養液を
添加することを特徴とする微生物増殖方法にある。以
下、本発明についてさらに詳細に説明する。
の要旨は、流加培養による微生物増殖方法において、培
地中の溶存酸素量が増加した際に、前記培地に栄養液を
添加することを特徴とする微生物増殖方法にある。以
下、本発明についてさらに詳細に説明する。
【０００７】本発明における増殖の対象となる微生物の
種類に制限はなく、流加培養が可能な微生物であればよ
い。栄養液は、例えばグルコース、酵母エキス、リン酸
二水素カリウム（ＫＨ2ＰＯ4）等の一種または数種を含
有する、周知の栄養液を使用すればよく、特に制限はな
い。また、栄養液の濃度や添加量も、対象とされる微生
物に応じて適宜選択されればよい。例えば酵母を増殖す
る場合であれば、グルコースを含有する栄養液を、培地
中のグルコース濃度が０．５％以下程度となるように添
加するとよい。これは、培地のグルコース濃度が０．５
％を越えると、アルコールの生成量が増加して菌体の増
殖が抑制される傾向になるためである。したがって培地
の栄養濃度は、このような代謝産物の生成をできるだけ
抑制し、菌体を増殖させる濃度範囲とすることが好まし
い。さらに、培地、培養温度、空気供給量、培地の攪拌
などの諸条件も、対象とされる微生物の増殖条件に応じ
て設定されればよく、特に制限はない。
種類に制限はなく、流加培養が可能な微生物であればよ
い。栄養液は、例えばグルコース、酵母エキス、リン酸
二水素カリウム（ＫＨ2ＰＯ4）等の一種または数種を含
有する、周知の栄養液を使用すればよく、特に制限はな
い。また、栄養液の濃度や添加量も、対象とされる微生
物に応じて適宜選択されればよい。例えば酵母を増殖す
る場合であれば、グルコースを含有する栄養液を、培地
中のグルコース濃度が０．５％以下程度となるように添
加するとよい。これは、培地のグルコース濃度が０．５
％を越えると、アルコールの生成量が増加して菌体の増
殖が抑制される傾向になるためである。したがって培地
の栄養濃度は、このような代謝産物の生成をできるだけ
抑制し、菌体を増殖させる濃度範囲とすることが好まし
い。さらに、培地、培養温度、空気供給量、培地の攪拌
などの諸条件も、対象とされる微生物の増殖条件に応じ
て設定されればよく、特に制限はない。
【０００８】培地中の溶存酸素量（ＤＯ）の検出には、
周知のＤＯセンサを使用できる。培地中の微生物は、栄
養物、例えばグルコースを消費しつつ増殖するが、この
際、通常は空気として培地中に吐出、供給されている酸
素も消費される。培地中の栄養物が消費されて不足して
くると微生物の増殖は抑制されるので、酸素消費量も減
少する。したがって、酸素に余剰が生ずることになり培
地中のＤＯは増加する。このＤＯの増加に合わせて栄養
液を流加すれば、培地の栄養物濃度を増殖に好適な濃度
範囲に保持することができる。このため、微生物の増殖
は抑制されることはなく、増殖効率は向上する。
周知のＤＯセンサを使用できる。培地中の微生物は、栄
養物、例えばグルコースを消費しつつ増殖するが、この
際、通常は空気として培地中に吐出、供給されている酸
素も消費される。培地中の栄養物が消費されて不足して
くると微生物の増殖は抑制されるので、酸素消費量も減
少する。したがって、酸素に余剰が生ずることになり培
地中のＤＯは増加する。このＤＯの増加に合わせて栄養
液を流加すれば、培地の栄養物濃度を増殖に好適な濃度
範囲に保持することができる。このため、微生物の増殖
は抑制されることはなく、増殖効率は向上する。
【０００９】特に、栄養物不足の初期に栄養物を流加す
れば、栄養物不足の状態を短時間で解消できる。この栄
養物不足の初期にＤＯは急激に増加するが、この際のＤ
Ｏの増加率は増加傾向にあり二次微分値は正である。し
たがって、ＤＯの増加率が増加傾向（＝二次微分値が
正）にある際に、栄養液を流加すれば栄養物濃度を一層
好適な範囲に保持することができる。
れば、栄養物不足の状態を短時間で解消できる。この栄
養物不足の初期にＤＯは急激に増加するが、この際のＤ
Ｏの増加率は増加傾向にあり二次微分値は正である。し
たがって、ＤＯの増加率が増加傾向（＝二次微分値が
正）にある際に、栄養液を流加すれば栄養物濃度を一層
好適な範囲に保持することができる。
【００１０】ＤＯセンサによるＤＯ値の検出は、ほぼリ
アルタイムで迅速になされる。また、ＤＯセンサによる
ＤＯの検出には特別な装置構成を必要としないので、例
えば検出値を指標として栄養液の流加をオンライン制御
する際にも、増殖装置が複雑化することはない。
アルタイムで迅速になされる。また、ＤＯセンサによる
ＤＯの検出には特別な装置構成を必要としないので、例
えば検出値を指標として栄養液の流加をオンライン制御
する際にも、増殖装置が複雑化することはない。
【００１１】
【実施例】次に、図面を参照して本発明の実施例を説明
する。図１に本実施例において使用した増殖装置１０を
示す。ステンレス製の培養槽１２の頭部１２ａ中央に
は、モータ１４にて駆動される攪拌機１６が設置されて
おり、培養槽１２の内部に挿通された攪拌軸１８に設け
られた複数の攪拌翼２０で、培養槽１２内容物を攪拌可
能である。また、頭部１２ａには、培養対象となる微生
物を植菌するための植菌口２２、培養槽１２内の発泡状
態を検出する泡センサ２４、培養槽１２から気体を排出
するためのベント２６およびスチーム配管２８が、それ
ぞれ接続されている。さらに、頭部１２ａに設けられた
流加ノズル３０には、ポンプ３２を介して栄養液槽３４
が接続されており、栄養液槽３４からの栄養液を培養槽
１２へ供給可能である。
する。図１に本実施例において使用した増殖装置１０を
示す。ステンレス製の培養槽１２の頭部１２ａ中央に
は、モータ１４にて駆動される攪拌機１６が設置されて
おり、培養槽１２の内部に挿通された攪拌軸１８に設け
られた複数の攪拌翼２０で、培養槽１２内容物を攪拌可
能である。また、頭部１２ａには、培養対象となる微生
物を植菌するための植菌口２２、培養槽１２内の発泡状
態を検出する泡センサ２４、培養槽１２から気体を排出
するためのベント２６およびスチーム配管２８が、それ
ぞれ接続されている。さらに、頭部１２ａに設けられた
流加ノズル３０には、ポンプ３２を介して栄養液槽３４
が接続されており、栄養液槽３４からの栄養液を培養槽
１２へ供給可能である。
【００１２】栄養液槽３４はボールバルブ３６を介して
アルカリ槽３８に接続されている。また、栄養液槽３４
およびアルカリ槽３８は電磁弁４０を介して、培養槽１
２の胴１２ｂ上部に設けられているアルカリノズル４２
に接続されており、栄養液、アルカリ液を個別または同
時に培養槽１２へ供給可能である。このアルカリノズル
４２の下方に設けられている消泡ノズル４４には、電磁
弁４６を介して消泡液槽４８が接続されており、培養槽
１２へ消泡液を供給可能となっている。
アルカリ槽３８に接続されている。また、栄養液槽３４
およびアルカリ槽３８は電磁弁４０を介して、培養槽１
２の胴１２ｂ上部に設けられているアルカリノズル４２
に接続されており、栄養液、アルカリ液を個別または同
時に培養槽１２へ供給可能である。このアルカリノズル
４２の下方に設けられている消泡ノズル４４には、電磁
弁４６を介して消泡液槽４８が接続されており、培養槽
１２へ消泡液を供給可能となっている。
【００１３】培養槽１２の胴１２ｂには、アルカリノズ
ル４２および消泡ノズル４４とほぼ同レベルに、一対の
空気ノズル５０、５２が設けられており、図示省略した
フィルタ機構にて無菌状態とされた無菌空気が供給され
る空気配管５４に接続されている。空気ノズル５２は、
さらに培養槽１２内に設置されているスパージャ５６に
接続されており、空気配管５４からの空気を培養槽１２
内に吐出可能となっている。
ル４２および消泡ノズル４４とほぼ同レベルに、一対の
空気ノズル５０、５２が設けられており、図示省略した
フィルタ機構にて無菌状態とされた無菌空気が供給され
る空気配管５４に接続されている。空気ノズル５２は、
さらに培養槽１２内に設置されているスパージャ５６に
接続されており、空気配管５４からの空気を培養槽１２
内に吐出可能となっている。
【００１４】培養槽１２は、胴１２ｂから底部１２ｃに
かけてジャケット５８が設けられており、図示省略した
ヒータ、ポンプ等を備えた温調ユニット６０から温水配
管６２を介して供給される温水によって温度調節可能で
ある。また、ジャケット５８へは水配管６４から水を、
スチーム配管２８からスチームを供給して冷却または加
熱可能である。また培養槽１２の胴１２ｂには、ジャケ
ット５８を貫通して温度計６６、ＤＯセンサ６８（イン
ゴールド社製）およびｐＨ計７０が設置されており、そ
れぞれ培養槽１２内の温度、溶存酸素量およびｐＨを測
定して出力可能である。さらに胴１２ｂには同様に、サ
ンプリングノズル７２が設置されており、培養槽１２内
からサンプリング可能である。他方、培養槽１２の底部
１２ｃには、ジャケット５８を外れて吐出ノズル７４が
設置されており、培養槽１２の内容物を排出可能であ
る。
かけてジャケット５８が設けられており、図示省略した
ヒータ、ポンプ等を備えた温調ユニット６０から温水配
管６２を介して供給される温水によって温度調節可能で
ある。また、ジャケット５８へは水配管６４から水を、
スチーム配管２８からスチームを供給して冷却または加
熱可能である。また培養槽１２の胴１２ｂには、ジャケ
ット５８を貫通して温度計６６、ＤＯセンサ６８（イン
ゴールド社製）およびｐＨ計７０が設置されており、そ
れぞれ培養槽１２内の温度、溶存酸素量およびｐＨを測
定して出力可能である。さらに胴１２ｂには同様に、サ
ンプリングノズル７２が設置されており、培養槽１２内
からサンプリング可能である。他方、培養槽１２の底部
１２ｃには、ジャケット５８を外れて吐出ノズル７４が
設置されており、培養槽１２の内容物を排出可能であ
る。
【００１５】なお、図示を省略したが、培養槽１２には
マンホール、ハンドホール、レベルゲージ、プレッシャ
ーゲージなどが備えられており、同様に他の槽や各配管
にはゲージ類、ベント、ドレン、スチームトラップ等が
備えられている。図２に示すように、増殖装置１０に
は、制御機構８０、オートプロッタ８２他を備えた操作
パネル８４が設けられている。この制御機構８０は周知
のマイクロコンピュータ（図示略）を備えており、キー
８６やスイッチ８８等を介して各種の指示の入力が可能
である。制御機構８０は、これらキー８６等を介しての
入力や泡センサ２４、温度計６６、ＤＯセンサ６８、ｐ
Ｈ計７０をはじめとする計装機器類の検出値等が入力さ
れると、予め記憶しているプログラムに従って演算処理
し、該入力に応じてポンプ３２、電磁弁４０、４６、温
調ユニット６０等の作動を制御可能である。また、前記
温度計６６他の出力値は制御機構８０を介してオートプ
ロッタ８２に送信され、記録紙にプロットされる。
マンホール、ハンドホール、レベルゲージ、プレッシャ
ーゲージなどが備えられており、同様に他の槽や各配管
にはゲージ類、ベント、ドレン、スチームトラップ等が
備えられている。図２に示すように、増殖装置１０に
は、制御機構８０、オートプロッタ８２他を備えた操作
パネル８４が設けられている。この制御機構８０は周知
のマイクロコンピュータ（図示略）を備えており、キー
８６やスイッチ８８等を介して各種の指示の入力が可能
である。制御機構８０は、これらキー８６等を介しての
入力や泡センサ２４、温度計６６、ＤＯセンサ６８、ｐ
Ｈ計７０をはじめとする計装機器類の検出値等が入力さ
れると、予め記憶しているプログラムに従って演算処理
し、該入力に応じてポンプ３２、電磁弁４０、４６、温
調ユニット６０等の作動を制御可能である。また、前記
温度計６６他の出力値は制御機構８０を介してオートプ
ロッタ８２に送信され、記録紙にプロットされる。
【００１６】次に、上記構成の増殖装置１０を用いて微
生物を増殖する際の操作について説明する。まず培養槽
１２内に培地および栄養液を注入し、攪拌、通気して所
定のグルコース濃度の培地とする。なお、培地は増殖期
間を通じて攪拌および通気が継続される。培地温度、ｐ
Ｈ値を調整後、培養槽１２に微生物を植菌する。
生物を増殖する際の操作について説明する。まず培養槽
１２内に培地および栄養液を注入し、攪拌、通気して所
定のグルコース濃度の培地とする。なお、培地は増殖期
間を通じて攪拌および通気が継続される。培地温度、ｐ
Ｈ値を調整後、培養槽１２に微生物を植菌する。
【００１７】この後、微生物は培地中の栄養物、例えば
グルコースを消費して増殖する。消費によって低下する
グルコース濃度を適正範囲に保持するために、グルコー
スを含有する栄養液が流加される。栄養液流加のタイミ
ングは、ＤＯセンサ６８によって検出されて制御機構８
０へ入力されるＤＯ値を指標として決定される。図３に
流加ルーチンを示すが、制御機構８０は、所定の時間を
経過する毎に流加ルーチンを繰り返し実行する。
グルコースを消費して増殖する。消費によって低下する
グルコース濃度を適正範囲に保持するために、グルコー
スを含有する栄養液が流加される。栄養液流加のタイミ
ングは、ＤＯセンサ６８によって検出されて制御機構８
０へ入力されるＤＯ値を指標として決定される。図３に
流加ルーチンを示すが、制御機構８０は、所定の時間を
経過する毎に流加ルーチンを繰り返し実行する。
【００１８】まずＤＯセンサ６８の検出値（ＤK）が入
力されると、制御機構８０は、ＤＯセンサ６８の検出値
（ＤK）とＤＯの設定値（ＤS）とを比較し（ステップ２
００）、ＤKがＤS以上であれば次のステップ３００へ進
み、ＤKがＤS未満であればリターンへ抜けて所定の時間
経過を待つ。ステップ３００では、制御機構８０は、ポ
ンプ３２を予め設定された時間だけ稼働させて、設定量
の栄養液を培養槽１２へ流加させる。その後リターンへ
抜けて、所定の時間を経過する毎に流加ルーチンを繰り
返し実行する。このように設定値以上にＤＯが増加した
際にグルコースを流加すればグルコース濃度を適切な範
囲に保持できる。この場合のＤＯとグルコース濃度の変
化を図４に示す。
力されると、制御機構８０は、ＤＯセンサ６８の検出値
（ＤK）とＤＯの設定値（ＤS）とを比較し（ステップ２
００）、ＤKがＤS以上であれば次のステップ３００へ進
み、ＤKがＤS未満であればリターンへ抜けて所定の時間
経過を待つ。ステップ３００では、制御機構８０は、ポ
ンプ３２を予め設定された時間だけ稼働させて、設定量
の栄養液を培養槽１２へ流加させる。その後リターンへ
抜けて、所定の時間を経過する毎に流加ルーチンを繰り
返し実行する。このように設定値以上にＤＯが増加した
際にグルコースを流加すればグルコース濃度を適切な範
囲に保持できる。この場合のＤＯとグルコース濃度の変
化を図４に示す。
【００１９】また、１）ＤＯセンサ６８の検出値ＤKの
単位時間当りの増加率を算出して、これが設定値以上と
なった際にグルコースを流加したり、２）ＤKの単位時
間当りの増加率と直前の同増加率とを比較して、これが
設定比率以上に増加した際にグルコースを流加する等の
グルコース流加制御も可能である。
単位時間当りの増加率を算出して、これが設定値以上と
なった際にグルコースを流加したり、２）ＤKの単位時
間当りの増加率と直前の同増加率とを比較して、これが
設定比率以上に増加した際にグルコースを流加する等の
グルコース流加制御も可能である。
【００２０】次に、上記構成の増殖装置１０を用いた微
生物増殖の実施例を、比較例と共に示す。なお、実施
例、比較例ともに、培地は次の組成によった。 培地組成 本醸醤油 １０％ 食塩 １０％ 滅菌水 残余 （実施例１） 微生物種類：酵母（Z.rouxii(S-012)） 初発菌体数：４．０ｘ１０6cells/ml 培地量：５０l（植菌時グルコース濃度０．５％） 培地温度：３０℃ 培地ｐＨ：５．２ 通気量：３０l/min 攪拌：２００rpm 栄養液：グルコース濃度５０％、培地に対して０．３％
となる分量で流加 増殖時間：４３時間 最終菌体数：２．７ｘ１０9cells/ml （比較例１）比較例１は、バッチ培養による増殖実験の
例であり、培養中のグルコースの追加はない。
生物増殖の実施例を、比較例と共に示す。なお、実施
例、比較例ともに、培地は次の組成によった。 培地組成 本醸醤油 １０％ 食塩 １０％ 滅菌水 残余 （実施例１） 微生物種類：酵母（Z.rouxii(S-012)） 初発菌体数：４．０ｘ１０6cells/ml 培地量：５０l（植菌時グルコース濃度０．５％） 培地温度：３０℃ 培地ｐＨ：５．２ 通気量：３０l/min 攪拌：２００rpm 栄養液：グルコース濃度５０％、培地に対して０．３％
となる分量で流加 増殖時間：４３時間 最終菌体数：２．７ｘ１０9cells/ml （比較例１）比較例１は、バッチ培養による増殖実験の
例であり、培養中のグルコースの追加はない。
【００２１】微生物種類：酵母（Z.rouxii(S-012)） 初発菌体数：２．５ｘ１０6cells/ml 培地量：５０l（植菌時グルコース濃度２．６％） 培地温度：３０℃ 培地ｐＨ：５．２ 通気量：３０l/min 攪拌：１００rpm 増殖時間：４３時間 最高菌体数：２．８ｘ１０8cells/ml（開始後１８時
間） （比較例２）比較例２は、比較例１と同様、バッチ培養
による増殖実験の例であり、培養中のグルコースの追加
はないが、攪拌数を変化させてＤＯを一定（３ppm)に保
持した。
間） （比較例２）比較例２は、比較例１と同様、バッチ培養
による増殖実験の例であり、培養中のグルコースの追加
はないが、攪拌数を変化させてＤＯを一定（３ppm)に保
持した。
【００２２】微生物種類：酵母（Z.rouxii(S-012)） 初発菌体数：３．８ｘ１０6cells/ml 培地量：５０l（植菌時グルコース濃度２．６％） 培地温度：３０℃ 培地ｐＨ：５．２ 通気量：３０l/min 攪拌：１００〜４００rpm 増殖時間：４３時間 最終菌体数：５．５ｘ１０8cells/ml 図５は、上記実施例１、比較例１および２における培地
の濁度、菌体数（生菌）およびアルコール濃度を経過時
間毎にプロットしたグラフである。実施例１の菌体数
は、比較例１、２の菌体数がほぼ頭打ちとなる２４時間
経過後においても増加し、最終菌体数においては比較例
１、２の約５〜１０倍となっている。また、実施例１で
は、アルコール濃度の増加がほとんどなく、グルコース
が菌体増殖に有効に消費されていることがわかる。
の濁度、菌体数（生菌）およびアルコール濃度を経過時
間毎にプロットしたグラフである。実施例１の菌体数
は、比較例１、２の菌体数がほぼ頭打ちとなる２４時間
経過後においても増加し、最終菌体数においては比較例
１、２の約５〜１０倍となっている。また、実施例１で
は、アルコール濃度の増加がほとんどなく、グルコース
が菌体増殖に有効に消費されていることがわかる。
【００２３】次に、培地量を１０００ｌとした場合の微
生物増殖の例（実施例２および比較例３）を示す。 （実施例２） 微生物種類：酵母（Z.rouxii(S-012)） 初発菌体数：６．０ｘ１０6cells/ml 培地量：１０００l（植菌時グルコース濃度０．５％） 培地温度：３０℃ 培地ｐＨ：５．２ 通気量：５００l/min 攪拌：１１０rpm 栄養液：グルコース濃度５０％、培地に対して０．２５
％となる分量で流加、ただし、総流加糖量は培地に対し
て３．０％となる量 増殖時間：６０時間 最終菌体数：３．５ｘ１０8cells/ml （比較例３）比較例３は、バッチ培養による増殖実験の
例であり、培養中のグルコースの追加はない。
生物増殖の例（実施例２および比較例３）を示す。 （実施例２） 微生物種類：酵母（Z.rouxii(S-012)） 初発菌体数：６．０ｘ１０6cells/ml 培地量：１０００l（植菌時グルコース濃度０．５％） 培地温度：３０℃ 培地ｐＨ：５．２ 通気量：５００l/min 攪拌：１１０rpm 栄養液：グルコース濃度５０％、培地に対して０．２５
％となる分量で流加、ただし、総流加糖量は培地に対し
て３．０％となる量 増殖時間：６０時間 最終菌体数：３．５ｘ１０8cells/ml （比較例３）比較例３は、バッチ培養による増殖実験の
例であり、培養中のグルコースの追加はない。
【００２４】微生物種類：酵母（Z.rouxii(S-012)） 初発菌体数：５．９ｘ１０6cells/ml 培地量：１０００l（植菌時グルコース濃度３．５％） 培地温度：３０℃ 培地ｐＨ：５．２ 通気量：５００l/min 攪拌：１１０rpm 増殖時間：６０時間 最終菌体数：１．５ｘ１０8cells/ml 図６〜８は、上記実施例２および比較例３における培地
の濁度、菌体数（生菌）およびグルコース濃度を、それ
ぞれ経過時間毎にプロットしたグラフである。実施例２
の最終菌体数は、比較例３の約２．３倍となっており、
実施例２は、微生物増殖の効率が優れている。
の濁度、菌体数（生菌）およびグルコース濃度を、それ
ぞれ経過時間毎にプロットしたグラフである。実施例２
の最終菌体数は、比較例３の約２．３倍となっており、
実施例２は、微生物増殖の効率が優れている。
【００２５】以上、実施例に従って本発明の微生物増殖
方法を説明したが、本発明はこのような実施例に限定さ
れるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲でさ
まざまに実施できる。
方法を説明したが、本発明はこのような実施例に限定さ
れるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲でさ
まざまに実施できる。
【００２６】
【発明の効果】本発明の微生物増殖方法においては、流
加のタイミングを決定する指標として溶存酸素量（Ｄ
Ｏ）を採用しているので、検出速度は迅速でありしかも
装置を簡素化できる。
加のタイミングを決定する指標として溶存酸素量（Ｄ
Ｏ）を採用しているので、検出速度は迅速でありしかも
装置を簡素化できる。
【図１】 実施例の増殖装置の構成を示すフロー図であ
る。
る。
【図２】 実施例の増殖装置の操作パネルの説明図であ
る。
る。
【図３】 実施例の増殖装置の制御機構における流加制
御のフローチャートである。
御のフローチャートである。
【図４】 実施例の増殖装置を用いた微生物の増殖にお
けるグルコースの流加とＤＯの変化、グルコース濃度の
変化との関係を表すグラフである。
けるグルコースの流加とＤＯの変化、グルコース濃度の
変化との関係を表すグラフである。
【図５】 実施例１および比較例１、２の酵母増殖にお
ける経時変化を表すグラフであり、（ａ）は培地の濁
度、（ｂ）は菌体数、（ｃ）は培地のアルコール濃度を
表す。
ける経時変化を表すグラフであり、（ａ）は培地の濁
度、（ｂ）は菌体数、（ｃ）は培地のアルコール濃度を
表す。
【図６】 実施例２および比較例３の酵母増殖における
培地の濁度の経時変化を表すグラフである。
培地の濁度の経時変化を表すグラフである。
【図７】 実施例２および比較例３の酵母増殖における
菌体数の経時変化を表すグラフである。
菌体数の経時変化を表すグラフである。
【図８】 実施例２および比較例３の酵母増殖における
培地のグルコース濃度の経時変化を表すグラフである。
培地のグルコース濃度の経時変化を表すグラフである。
【符号の説明】 １０・・・増殖装置、１２・・・培養槽、２２・・・植
菌口、３０・・・流加ノズル、３２・・・ポンプ、３４
・・・栄養液槽、６８・・・ＤＯセンサ。
菌口、３０・・・流加ノズル、３２・・・ポンプ、３４
・・・栄養液槽、６８・・・ＤＯセンサ。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 吉田 尊彦 愛知県名古屋市熱田区三本松町１番１号 日本車輌製造株式会社内 (72)発明者 小澤 一広 愛知県宝飯郡小坂井町大字篠束字若宮53番 地 サンビシ株式会社内 (72)発明者 佐々木 勝史 愛知県宝飯郡小坂井町大字篠束字若宮53番 地 サンビシ株式会社内
Claims (4)
- 【請求項１】 流加培養による微生物増殖方法におい
て、 培地中の溶存酸素量が増加した際に、前記培地に栄養液
を添加することを特徴とする微生物増殖方法。 - 【請求項２】 前記溶存酸素量の単位時間当りの増加率
が増加傾向にある際に前記培地に栄養液を添加すること
を特徴とする請求項１記載の微生物増殖方法。 - 【請求項３】 微生物が酵母であることを特徴とする請
求項１または２記載の微生物増殖方法。 - 【請求項４】 微生物が乳酸菌であることを特徴とする
請求項１または２記載の微生物増殖方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5050710A JPH06261741A (ja) | 1993-03-11 | 1993-03-11 | 微生物増殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5050710A JPH06261741A (ja) | 1993-03-11 | 1993-03-11 | 微生物増殖方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06261741A true JPH06261741A (ja) | 1994-09-20 |
Family
ID=12866457
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5050710A Pending JPH06261741A (ja) | 1993-03-11 | 1993-03-11 | 微生物増殖方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06261741A (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3824058C1 (ja) * | 1988-07-15 | 1989-11-30 | Maschinenfabrik Mueller-Weingarten Ag, 7987 Weingarten, De | |
| DE3905073A1 (de) * | 1989-02-18 | 1990-08-23 | Schuler Gmbh L | Umsetzeinrichtung in einer transferpresse o. dgl. umformmaschine |
| DE3905068A1 (de) * | 1989-02-18 | 1990-08-23 | Schuler Gmbh L | Umsetzeinrichtung in einer transferpresse o. dgl. umformmaschine |
| JPH0838166A (ja) * | 1994-08-01 | 1996-02-13 | Tabai Espec Corp | 培養方法及び培養装置 |
| JP2010527579A (ja) * | 2006-09-11 | 2010-08-19 | レール・リキード−ソシエテ・アノニム・プール・レテュード・エ・レクスプロワタシオン・デ・プロセデ・ジョルジュ・クロード | 発酵の生産性および経済性を増大させるための溶存酸素プロフィール |
| JP2012519474A (ja) * | 2009-03-05 | 2012-08-30 | バイオシルタ オサケユキテュア | 液体培養における酵素に基づく流加回分培養技術 |
| JP2020503888A (ja) * | 2016-11-04 | 2020-02-06 | 中国科学院天津工業生物技術研究所 | 組換え酵母及びその使用 |
| WO2020115993A1 (ja) * | 2018-12-05 | 2020-06-11 | アサヒグループ食品株式会社 | コク味付与物質含有酵母の製造方法及びコク味付与物質含有酵母エキスの製造方法 |
-
1993
- 1993-03-11 JP JP5050710A patent/JPH06261741A/ja active Pending
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| DE3905068C2 (de) * | 1989-02-18 | 1999-07-22 | Schuler Pressen Gmbh & Co | Umsetzeinrichtung in einer Transferpresse o. dg. Umformmaschine |
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| US11421199B2 (en) | 2016-11-04 | 2022-08-23 | Tianjin Institute Of Industrial Biotechnology, Chinese Academy Of Sciences | Recombinant yeast and use thereof |
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| US12116567B2 (en) | 2018-12-05 | 2024-10-15 | Asahi Group Foods, Ltd. | Method for producing yeast containing rich-taste-imparting substance and method for producing yeast extract containing rich-taste-imparting substance |
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