JPH06336488A - グアノシンモノナトリウム塩の2水和物と2.5水和物の選択的晶析方法 - Google Patents
グアノシンモノナトリウム塩の2水和物と2.5水和物の選択的晶析方法Info
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Abstract
和物を選択的に晶析する方法に関する。 【構成】 グアノシン含有溶液のpHを11〜14かつ
該溶液温度を40℃乃至90℃にせしめることを特徴と
するグアノシンモノナトリウム塩2水和物の選択的晶析
方法、又はグアノシン含有溶液のpHを11〜14、か
つ起晶時点の過飽和度を2乃至10にせしめることを特
徴とするグアノシンモノナトリウム塩2水和物の選択的
晶析方法。 【効果】 分離性に優れ、精製度の高いグアノシンモノ
ナトリウム塩2水和物が取得できるので工業的に有利な
グアニル酸の製造ができる。
Description
ウム塩2水和物とグアノシンモノナトリウム塩2.5水
和物の選択的晶析法に関するものである。その目的は調
味料や医薬品として有用な5’ーヌクレオチド化合物で
あるグアニル酸(グアノシン−5’−リン酸)の工業的
かつ経済的な製造における中間物質を提供することにあ
る。
和物とグアノシンモノナトリウム塩2.5水和物の存在
は既に知られている(特公昭51ー15039号公
報)。しかし、これはグアニンその他の不純物を含有す
る粗製グアノシンの精製法に関するものであり、グアノ
シンモノナトリウム塩2水和物とグアノシンモノナトリ
ウム塩2.5水和物を選択的に晶析する方法は知られて
いなかった。ただ、グアノシンモノナトリウム塩2水和
物はグアノシンモノナトリウム塩2.5水和物に比し、
準安定形であるとの記載がある。また、特公昭51ー1
5039号公報明細書の実施例1には、グアノシンモノ
ナトリウム塩2水和物と2.5水和物が、各々25℃、
5℃の冷却温度で取得されると記載されているが、過飽
和度等の記載はなく、過飽和度が変わると目的とは異な
った水和物が析出するものであった。
有用なグアニル酸を化学的合成法(例:オキシ塩化リン
等によるリン酸化法)によって得る際、その原料あるい
は中間原料の一つとなるグアノシンモノナトリウム塩に
は2水和物(結晶構造は斜方晶系)と2.5水和物(結
晶構造は三斜晶系)があることが知られているが、これ
らの結晶形の異なる2種類の塩を選択的に晶析、採取す
る方法は知られていない。
トリウム塩晶析での精製度は2水和物の方が非常に良好
である知見を得たので、グアノシン発酵液などの雑多の
不純物(菌体タンパク、グアニン、イノシン等)を含む
系に於いては、グアノシンモノナトリウム塩2水和物を
選択的に晶析し得る方法は工業上必要度が高いので、そ
の方法の開発を課題とする。
ンモノナトリウム塩2水和物とグアノシンモノナトリウ
ム塩2.5水和物を晶析分離するに際し、それら2種類
の塩の溶解度を測定した結果、低温側でグアノシンモノ
ナトリウム塩2.5水和物の溶解度が、その2水和物の
溶解度に比べ小さくなるのに対し、高温側でそれら2種
類の溶解度が逆転する現象を発見し、またその逆転する
温度は少なくとも30〜60℃の範囲においてpH、塩
濃度によって変化することを発見した(第1図参照)。
これら2つの事実に着目し、これまで準安定形とされて
いたグアノシンモノナトリウム塩2水和物にも安定な領
域があることを見いだし、これに基づき晶析を行ったと
ころ、グアノシンモノナトリウム塩2水和物が転移する
ことなく取得できた。また低温側においても、すなわ
ち、グアノシンモノナトリウム塩2.5水和物が安定な
領域でも充分な過飽和をかけて晶析を行うとグアノシン
モノナトリウム塩2水和物の取得が可能である知見を
得、これらの知見に基づき本発明を完成させるに至っ
た。
pHを11〜14かつ該溶液温度を40℃乃至90℃に
せしめることを特徴とするグアノシンモノナトリウム塩
2水和物の選択的晶析方法、又はグアノシン含有溶液の
pHを11〜14、かつ起晶時点の過飽和度を2乃至1
0にせしめることを特徴とするグアノシンモノナトリウ
ム塩2水和物の選択的晶析方法に関する。更には、グア
ノシン含有溶液の塩濃度を5g/dl以下にした後、中
和晶析で得られたグアノシン結晶を請求項1又は2に記
載のグアノシン含有溶液に混合させる方法、グアノシン
含有溶液のpHが11〜14で該溶液温度を40℃乃至
90℃、又は、グアノシン含有溶液のpHが11〜14
で起晶時点の過飽和度を2乃至10、にせしめることに
より得られるグアノシンモノナトリウム塩2水和物を、
オキシ塩化リン等の酸化剤で化学的リン酸化に付するグ
アニル酸の製造方法に関する。
4、好ましくは11〜13に調整するのがよい。
アノシンモノナトリウム塩の2水和物と2.5水和物の
溶解度が逆転する温度、すなわち40℃乃至90℃、好
ましくは50℃以上で90℃までで、濃縮、冷却又は塩
析操作によりグアノシンモノナトリウム塩2水和物が選
択的に晶析される(第1図参照)。
水和物が安定に存在する上記の溶解度の逆転する温度以
下(40℃以下)でも、グアノシンモノナトリウム塩を
起晶させるときに与える過飽和度を2乃至10で起晶さ
せた場合、グアノシンモノナトリウム塩2水和物を取得
することができる。
起晶時における、グアノシンモノナトリウム塩2.5水
和物の飽和溶解度をグアノシンモノナトリウム塩2水和
物の飽和溶解度で割った値と定義する。
成法や発酵法などで生産されるグアノシンから由来する
ところの不純物であって、グアニン、ヒポキサンチン、
キサンチンなどの核酸塩基やイノシン、キサントシンな
どのヌクレオシドや色物質およびタンパク物質、菌体タ
ンパク等である。
グアノシンモノナトリウム塩2.5水和物に比べ、結晶
が大きく、不純物の取り込みが少なく、かつ、分離性に
も優れている(第2図参照)。
水和物、2.5水和物)は、グアノシンよりも水溶液中
の溶解度が高く、晶析率がグアノシンに比べ低くなる。
総じて、グアノシン類の晶析率を高めるためには、pH
をできるだけ低くし、また塩濃度をできるだけ高くする
ことが望ましいが、工業的には晶析母液等からのグアノ
シン回収を必要に応じて行うことができる。晶析母液等
からの回収率を高めるためには、溶解度の低いグアノシ
ンの形で回収するのが望ましい。
つpHが11乃至14のグアノシン含有溶液(例えば、
晶析母液)からの中和晶析では、グアノシンは結晶化せ
ず、無定形のゲル状態となり、分離の際に不純物を多く
含むことになる。ところが、上記液中の塩を脱塩し、溶
液中の塩濃度を5g/dl以下にすることで、グアノシ
ンは結晶化し、高純度・高回収率のグアノシンを得るこ
とができる(第3図)。
は、回収して、グアノシンモノナトリウム塩晶析系に添
加することによって、系全体のグアノシン類の回収率を
高めることができる。
トリウム塩2水和物は、オキシ塩化リン等を用いた公知
の化学的リン酸化法で、調味料や医薬品として有用なグ
アニル酸を得ることができる。
する。
加し、これに水酸化ナトリウムを加え、pHを12とし
全液量を100mlとした。次に、加熱により温度を6
0℃に保った状態(過飽和度0.5)で減圧条件下で濃
縮晶析を施し、全液量を50mlとした。晶析物はグア
ノシンモノナトリウム塩2水和物であり、収率は52%
であった。
加し、これに水酸化ナトリウムを加え、pHを13と
し、全液量を100mlとした。次に溶液温度を15℃
にして、全量溶解後、食塩を30g添加し(過飽和度
4)、上記温度で攪拌し塩析処理をした。生成結晶はグ
アノシンモノナトリウム塩2水和物であり、収率は75
%であった。
加し、更にグアニン、ピホキサンチン、イノシンを各
0.1gずつ入れ、塩化ナトリウムを20g加えた。次
に、水酸化ナトリウムを加え、pHを12.5とし、全
液量を100mlとし溶解させた。溶液温度を40℃に
設定して(過飽和度3)から、そのまま4時間攪拌後、
生成した結晶を分離した。得られた結晶はグアノシンモ
ノナトリウム塩2水和物であり、収率は70%であっ
た。尚、結晶中には不純物として0.1%のグアニンの
みが含まれていた。
加し、これに水酸化ナトリウムを加え、pHを12とし
全液量を100mlとした。次に、加熱により温度を6
0℃に保った状態で減圧下で濃縮晶析を施し、全液量を
50mlとした。生成結晶を分離して、晶析母液を得
た。該晶析母液20mlを10mlずつ2つに小分け
し、各々75℃に昇温した。次に、各々の母液に食塩を
加え、食塩濃度が5g/dlと10g/dlになるよう
にし、上記温度に保ったまま、3時間かけて35%塩酸
を滴下してpH7とし、10℃まで冷却したところ、食
塩濃度が5g/dlの方はグアノシンが結晶化し、10
g/dlの方はグアノシンがゲル化した。
れ、更にグアニン、ピホキサンチン、イノシンを各0.
1gずつ入れ、水酸化ナトリウムを加えてpHを12.
5とし、全液量を100mlとした。そして、溶液温度
を30℃にし、全量溶解後、125時間かけて5℃まで
冷却し、得られた結晶を分離した。生成結晶はグアノシ
ンモノナトリウム塩2.5水和物であり、収率は38%
であった。尚、結晶中には2%のグアニン、0.5%の
ピホキサンチン、イノシンが含まれていた。
ウム塩の2水和物と2.5水和物を選択的に晶析で分離
でき、晶析時の過飽和度を特定すれば、分離性等の操作
性に優れ、精製度の高いグアノシンモノナトリウム塩2
水和物が取得できる。
ウム塩も、塩濃度を調整した晶析母液から精製度の高い
グアノシン結晶を回収することができ、結果としてグア
ノシン類の回収率を高めることができる。
2水和物とグアノシンモノナトリウム塩2.5水和物の
温度に対する溶解度、及び塩化ナトリウム濃度を変化さ
せたときの溶解度を表わす。
物を、(b)はグアノシンモノナトリウム塩2.5水和
物の結晶写真を表わす。拡大倍率は40倍である。2水
和物の方が結晶性がよく、不純物淘汰能に優れているこ
とがわかる。
アノシンを回収するために、塩濃度を変えたときの中和
晶析により得られたグアノシンの結晶写真を示す。
(a)は塩化ナトリウム濃度5g/dlの場合、(b)
は塩化ナトリウム濃度10g/dlの場合の例である。
グアノシンは、塩化ナトリウム濃度5g/dlの場合に
結晶化し、塩化ナトリウム濃度10g/dlの場合はゲ
ル化していた。
Claims (4)
- 【請求項1】 グアノシン含有溶液のpHを11〜1
4、かつ該溶液温度を40℃乃至90℃にせしめること
を特徴とするグアノシンモノナトリウム塩2水和物の選
択的晶析方法。 - 【請求項2】 グアノシン含有溶液のpHを11〜1
4、かつ起晶時点の過飽和度を2乃至10にせしめるこ
とを特徴とするグアノシンモノナトリウム塩2水和物の
選択的晶析方法。 - 【請求項3】 グアノシン含有溶液の塩濃度を5g/d
l以下にした後、中和晶析で得られたグアノシン結晶を
請求項1又は2に記載のグアノシン含有溶液に混合させ
る方法。 - 【請求項4】 グアノシン含有溶液のpHが11〜14
で該溶液温度を40℃乃至90℃、又は、グアノシン含
有溶液のpHが11〜14で起晶時点の過飽和度を2乃
至10、にせしめることにより得られるグアノシンモノ
ナトリウム塩2水和物を、オキシ塩化リン等の酸化剤で
化学的リン酸化に付するグアニル酸の製造方法。
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Cited By (2)
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1993
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