JPH06505153A - 微生物油混合物およびその使用 - Google Patents

微生物油混合物およびその使用

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JPH06505153A JP4504606A JP50460692A JPH06505153A JP H06505153 A JPH06505153 A JP H06505153A JP 4504606 A JP4504606 A JP 4504606A JP 50460692 A JP50460692 A JP 50460692A JP H06505153 A JPH06505153 A JP H06505153A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】
微生物油混合物およびその使用 本発明は多不飽和脂肪酸含有微生物油のブレンドまたは混合物、およびその使用 に関する。特定の好ましい態様において、本発明はこのような油のヒトの食料用 の添加剤または補助剤、例えば調合具（１ｎｆａｎｔ　ｆｏｒｍｕｌａ）への添 加剤としての使用に関する。 長鎖の多不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）は特に急速な組織成長の期間中、ヒトの食事 に不可欠であることが長く知られているＣ５ａｎｄｅｒｓらのＡｍ、　Ｊ、　Ｃ ｌ１ｎ、　Ｎｕｔｒ、、　３１．８０５〜８１３（１９７８年）〕。これらのう ち、アラキドン酸（ＡＲＡ）のような特定の長鎖の酸はヒトの体内で新たに合成 できない。γ−リルン酸（ＧＬＡ）　、次いでＡＲＡに変換されるリルン酸（Ｌ ＯＡ）を代謝することによってのみ、ヒトの体はＡＲＡを生成することができる 。また、ＬＯＡは食事からだけ得ることのできる必須酸でる。さらに、食事中に 存在するエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）はＬＯＡのＡＲＡへ代謝変換を抑制す る（ＣａｒｌｓｏｎらのＩＮＦＯＲＭ、１，３０６（１９９０年））　ｏＡＲＡ およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）は筋肉、器官および血管組織の重要な要素 である。 幼児期はヒトの一生の中で急速に成長する最も重要な期間である。生れて１年の 間に幼児は体重が３倍以上になる。したがって、幼児は適当な組織および器官の 発育を確実にするのに十分な量のＰＵＦＡを摂取することが大事である。ヒトの 母乳はＡＲＡ対ＥＰＡの比が典型的には約２０：１であるＰＵＦＡを高レベルで 含有する。しかしながら、多（の母親は赤ん坊に、生れて１年の間ずっと、また は時々母乳を与えることを選択しない。 Ｃ１ａｎｄｉｎｉｎらの米国特許第４，６７０，２８５号（参考文献として本明 細書に組込まれる）で確認されているように、入手しうる調合具は長鎖（Ｃ７， およびＣ２２）のＰＵＦＡが不足している。 Ｃ１ａｎｄｉｎｉｎらはヒトの母乳に匹敵する総脂肪組成を与えることのできる 植物油、卵黄脂質および／または魚油のブレンドから製造された調合具を開示し ている。好ましい組成は７５〜９５重量部の卵黄および５〜２５重量部の植物油 である。この組成は調合具の全脂質成分であり、製造するのに経済的でない。さ らに、Ｃ１ａｎｄｉｎｉｎらにより開示された調合具はヒトの母乳中のＥＰＡ量 の１６倍のＥＰＡ量、および母乳中のＡＲＡ量の１７４にすぎないＡＲＡ量を有 する。 ＭｉｌｕｐａのＤＥ３６０３０００Ａｌは高級多不飽和酸脂肪混合物のコンピュ ータープロフィールを開示しており、またこのような混合物を使用して調合具を 製造することを示唆している。脂肪酸源の例としては、ある種のマクロ藻類（す なわち、海藻）魚油。 牛および豚の臓器脂肪および高精製卵黄油が挙げられる。魚油からのＤＨＡの他 に、ＤＨＡおよびＡＲＡの源は海藻類に限定されるマクロ藻類であると云われて いる。何れかの微生物、ましてや微生物油を使用することについては示唆されて いない。 微生物油の製造法は次の文献（それぞれ参考文献として本明細書に組込まれる） に開示されている。１９９０年３月２１日に出願された共同米国特許出願０７／ ４９６，５７２はエイコサベンクエン酸を含有する単細胞油（ＥＰＡＳＣＯ）の 製造を開示している。１９９０年２月１３日に出願された共同米国特許出願０７ ／４７９，１３５はドコサヘキサエン酸を含有する単細胞油（ＤＨＡＳＣＯ）の 製造を開示している。共同米国特許出願０７／６４５．４５４はアラキドン酸を 含有する単細胞油（ＡＲＡＳＣＯ）の製造に関する。ＥＰ３２２，２２７もまた 、微生物油の製造システムを開示している。これらの文献の何れも、非変性微生 物部を含有するブレンドの補助食としての使用、または調合具に母乳と同様の長 鎖ＰＵＦＡ組成を与えるための微生物油ブレンドの既存の調合具への添加剤とし ての使用を教示していない。 したがって、本発明の目的は市販の調合具に加えられるとその組成物がヒトの母 乳中のＰＵＦＡ量に匹敵する量の所望の長鎖ＰＵＦＡを与えるような、ＰＵＦＡ に富んだ補助剤を提供することである。 本発明の別の目的は上記組成物の経済的な製造法を提供することである。 これらの、および他の目的は本明細書に記載の本発明により達成される。 本発明は長鎖の多不飽和脂肪酸を含有する微生物部の使用に関する。さらに、種 々の態様において、魚油および／または植物油をこのような微生物部とブレンド して所望の組成物を生成することができる。本組成物は医薬および化粧品の用途 の他に補助金として、特に調合乳用添加剤として使用することができる。 本発明はまた、調合具および／または離乳食の長鎖多不飽和脂肪酸組成を変える ための経済的に実行できる方法に関する。好ましくは、変えられた組成はヒトの 母乳のものと似ている。 概して、本発明は非変性微生魚油を含有するブレンドまたは混合物に関する。本 明細書で使用される「非変性」なる用語は化学的に、または共有結合的に変化さ れないことを意味する。本明細書全体を通して、特に断りがなければ「微生物部 」または「油」なる用語は非変性油を意味することは理解されよう。「微生物部 」または「単細胞部」なる用語は微生物が生存中に自然に生成する油である。こ のような油は長鎖のＰＵＦＡを多量に含有しうる。 本発明者らはこれらのうち特定の油は他の微生物部、魚油、植物油またはこれら の組合せとブレンドされると食料、医薬または化粧品として有用な組成物を生成 することができることを見い出した。 例えば種々の微生物部は例えば上記で引用した米国特許出願０７／４９６，５７ ２．　０７／４７９，１３５．　ＥＰ３２２゜２２７　（Ｙａｍａｄａら、５ｕ ｎｔｏｒｙ）または米国特許出願０７／６４５゜４５４に開示されている方法に より得ることができる。これらの開示は参考文献として本明細書に組込まれる。 ＡＲＡおよびＤＨＡのような少なくとも２種の所望のＰＵＦＡを含有する微生物 部の単独の使用を含有することは理解されよう。 しかしながら、本明細書で特定的に開示され、使用された油はそれぞれ１種の所 望のＰＵＦＡを含有する。 非毒性のＰＵＦＡ含有微含有微生魚油も本発明において使用することができる。 最も好ましい微生物部はω−３またはω−６ＰＵＦＡ、特にＤＨＡ、ＧＬＡまた はＡＲＡである。これらのＰＵＦＡは典型的に調合具または離乳食のような補助 食中において欠けているか、または不十分に存在する。本明細書で使用される「 調合具」なる用語はヒトの母乳の代わりに幼児に与えることができ、典型的には 水溶液中において所望の割合の炭水化物およびタンパク質と混合された所望の割 合の脂肪から構成される腸溶性の栄養物を意味する。しばしば、痕跡量の金属お よびビタミンのような微量養素または他の所望の添加剤が存在する。このような 微量養素および他の添加剤の例はＣ１ａｎｄｉｎｉｎらの米国特許第４，６７０ ．２８５号（参考文献として本明細書に組込まれる）に開示されている。 本発明において、種々の微生物から得られる油を一緒に混合して所望の組成物を 得ることができる。別法として、または追加的にＰＵＦＡ含有微含有微生魚油、 植物油またはこれらの混合物とブレンドして所望の組成物を得ることができる。 油を混合する目的は調合具に母乳中に存在するものと似た所望のω−３およびω −６ＰＵＦＡ組成を与える添加剤を得ることである。所望の脂肪酸の微生物油中 における割合は変えることができ、またこの割合は容易に決定することができ、 油の量を調整して所望量のＰＵＦＡを与えることができる。同様に、魚油または 植物油中における所望のＰＵＦＡの割合は容易に決定することができ、また加え る油の量を必要に応じて調整して所望の結果を達成することができる。 「魚油」は魚から得られる油である。このような油は典型的にＤＨＡを３％〜約 ２０％の量で含有する。しかしながら、典型的には魚油はまた、体内でのＡＲＡ の生成を抑制するＥＰＡを含有する。高レベルのＡＲＡを含有する微生物部の魚 油含有組成物への添加は実質的にこの問題を克服する。 「植物油」は長鎖のＰＵＦＡを含有する植物から得られる油のすべてを包含する 。典型的には、植物油は長鎖のＰＵＦＡ　（少なくとも２０個の炭素を有するＰ ＵＦＡ）を含有せず、そのため動物の臓器の油が一般にＰＵＦＡ源として特徴づ けられる。したがって、菜食主義者、特に菜食主義の母親は不十分な量のＰＵＦ Ａを含有する食事をとりうる。ＰＵＦＡを含有することが知られている植物油は ＧＬＡを含有しうる。ＧＬＡはＣ１８３ω−６ＰＵＦＡである。このような油に はクロッサスグリ種子油、ルリヂサ油およびサクラソウ油が含まれる。ＧＬＡは ＡＲＡの代謝プレカーサーであり、その変換プロセスは非常に遅く、酵素Δ６− デサチュラーゼの関与を必要とする。この酵素は非常に低レベルでヒトの体内に 存在するＣＢｕｒｒｅらのＬｉｐｉｄｓ、　２５．３５４〜３５６（１９９０年 ）〕。したがって、そのプレカーサーであるＧＬＡよりもＡＲＡを体に与えるこ とが好ましい。 植物油を単離する方法は当業者に知られており、本発明の一部を構成しない。さ らに、ある種の菌類はＰＵＦＡを含有する油を生成する。例えば、Ｍｕｃｏｒ種 はＧＬＡを含有する油を生成する。 本明細書でドコサヘキサエン酸を含有する単細胞部と定義されるＤＨＡＳＣＯは 例えば、上記で引用した米国特許出願ｏ７／４７９．１３５に開示されているＣ ｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ　ｃｏｈｎｉｉがら得ることができる。ＤＨＡは Ｃ２２：６　ω−３長鎖ＰＵＦＡである。 本明細書でエイコサペンクエン酸を含有する単細胞部と定義されるＥＰＡＳＣＯ は例えば、上記で引用した米国特許出願０７／４９６．５７２に開示されている Ｎ１ｔｘｓｃｈｉａ　ａｌｂａから得ることができる。ＥＰＡはＣ２０：５　ω −３長鎖ＰＵＦＡである。 本明細書でアラキドン酸を含有する単細胞部と定義されるＡＲＡＳＣＯは米国特 許出願０７／６４５，４５４に記載されているｐｙｔｈ＋ｕｍ　ｉｎｓｉｄｉｏ ｓｕｍまたはＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　ａｌｐｉｎａのような菌種から得ること ができる。ＡＲＡはＣ２０：４　ω−６長鎖ＰＵＦＡである。 本発明の別の局面は、商業的に入手しうる調合具のＰＵＦＡ組成をヒトの母乳に 典型的に含まれるものとより似かよったものにするために調合具に補足する、ま たはその組成を変える方法を開示する。ここで使用される「典型的」なる用語は 測定されるＰＵ□　ＦＡの平均量を意味する。本発明の利点の１つは、所望なら ば調合具に代えることを選択している乳飲み子の母親は母乳のＰＵＦＡ含有量に ついて分析してもらうことができる。次に、比較できる量のＰＵＦＡを供給する 商業的に入手しうる調合乳用の添加剤　ゞを特定的に設計することができる。少 なくとも２種の微生物から長鎖ＰＵＦＡを含有する微生物部を得、これらをブレ ンドして所望の組成を達成することができる。次に、ブレンドを調合具に加える ことができる。好ましくは、所望のＰＵＦＡの量を実質的にヒトの母乳中に存在 するものと似かよったものにするのに有効な量のブレンドを加える。 典型的には、ヒトの母乳はその脂肪酸含有量の約０．５〜０．６％のＡＲＡ、約 ０．１５〜約０．３６％のＤＨＡおよび約０．０３〜約０゜１３％のＥＰＡを含 有する。したがって、ＡＲＡ　：ＤＨＡ　：　ＥＰＡの好ましい比は約５：１： ｌ〜約２０：１０：１である。当業者はこれらの比のＰＵＦＡを与える油の量を 、さらに実験するこ・となく決定することができる。 好ましい態様において、微生物部はＡＲＡＳＣＯ，ＤＭＡ５ＣＯ，ＥＰＡＳＣＯ またはこれらの組合わせを含有する。また、ＭＯｒｔｉｅｒｅｌｌａ、　Ｐｙｔ ｈｉｕｍ、　Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ、およびＮ１ｔｘｓｃｈｉａ属の 微生物から得られる油またはこれらの組合わせを使用するのが好ましい。これら の属の特に好ましい菌種はＭ、ａｌｐｉｎａ、　Ｐ、ｉｎｓｉｄｉｏｓｕｍ。 Ｃ，ｃｏｈｎｉｉおよびＮ、ａｌｂａである。この好ましい態様は母乳を与えて いる。または妊娠している菜食主義の女性のような菜食主義者に受け入れられる 代替物を提供する。 所望ならば、魚油を何れかの組合わせの、もしくは単一の微生魚油とブレンドま たは混合して組成物を生成し、次いでこれを調合乳に加えてそのＰＵＦＡ成分を 所望するように変えることができる。このような組成物は完全な菜食主義者が摂 取するのに適していないであろう。好ましい魚油は典型的には約９％のＤ　ＨＡ を含有する特別に加工されたＭｅｎｈａｄｅｎ　０ｉｌ（Ｚａｐａｔａ　Ｈａｙ ｎｅ社製）である。当然、他の魚油もまた使用することができる。 Ｄ　ＨＡ　Ｓ　ＣＯがＡＲＡＳＣＯとブレンドされ、他のＰＵＦＡ含有油が使用 されない場合、約１〜約５部ＤＨＡに約２〜約１２部のＡＲＡを与えるのに十分 な量の油をブレンドすることが望ましい。最も好ましいＤＨＡ対ＡＲＡの比はｌ ：３である。 他の例として、−１−記のＭｅｎｈａｄｅｎ魚油は典型的に約９重量％のＤＨＡ を含有する。ＡＲＡＳＣＯは典型的に約２０〜４０重量％のＡＲＡを含有する。 Ｄ　ＨＡ　Ｓ　ＣＯは典型的に約２５〜４０重量％のＤＨＡを含有する。約９重 量％のＤＨＡを含有するＭｅｎｈａｄｅｎ油１部−約３３重量％のＡＲＡを含有 するＡＲＡＳＣＯｌ　０部および約３５重量％のＤ　ＨＡを含有するＤ　Ｍ　Ａ 　Ｓ　Ｃ０３部からなるブレンドは調合乳に加えられると、調合乳のＡＲＡおよ びＤＨＡの含有量をヒトの母乳とほぼ同じにすることがわかった。他の比は容易 に算出す゛ることができる。 本発明の他の態様において、Ｉ）　ＨＡ含有油をＧ　Ｔ−Ａ含有油とブレンドす ることを包含する。調合乳または離乳食用の補助剤を製造する方法が開示される ３、一般に、魚油を含んだまｌこは含まな（Ｘ何れの組合せのＧＬＡ−、ＥＰＡ −、ＡＲＡ−またはＤ　Ｉ−（Ａ−含有油も使用することができる。、Ｇ　１． 　Ａ源としＣはり１コフサスグ１〕まｉｓはルリヂサ油のような植物油、あるい は例えばＭｕｃｏｒ　ｊａｖｏｎｔｅｕｓまたはＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　１ｓ ａｈｅｌｌｉｎａから得らｔする油のような微生魚油が挙げらｔする。表１にこ のような油のＧ　Ｌ　Ａ組成を示す。 この態様の好ましい局面において、約９％のＤ　ＨＡを含有するＭｅｎｈａｄｅ ｎ油約１部、クロッサスグリ種子から得られる約１８％のＧＬ、八を含有するＧ ＬＡＳＣＯ約４部および約３３％のＤ　ＨＡを含有するＤＨΔＳＣＯ約１部が一 緒にブレンドされる。所望により他の比を選択することができる。 〔表１〕 表１　商業的に入手しうるＧ　Ｉ、　Ａ含有油の脂肪酸（ＬａｗｓｏｎおよびＩ ｌｕｇｈｅｓ（１９８８年）、並びに５ｕｚｕｋｉ（１９８９年参照）１４：０ 　１．０　０．７ １４：ｌ　Ｏ，１ １６：０　１８．６　２７．２　５．９　６．９　１０．７１６：１　１．０　 ０．９ １８：０　７．１　５．７　１．８　＋、３　３．０１８：ｌ　３９．９　４３ ．９　７．５　１０．８　１５．４１８：２　８．９　１２．０　７４．８　４ ６．７　３８．１ｙ−１８：３（ω６）　＋７．９　８．３　９．３　＋５．９ 　２４．８ａ−１８：３（ｍ３）−１３，０− １８：４（ｖ３）−２，９− ２０：０　−　０．６ ２０：Ｉ（ｄ）　−４，０ ２２：０　０．１ ２２：ｌ（＆１９）　−０，２−２，２２４：ＯＯ，６ 孝　Ｊ、＆　ロ、Ｓｔｕｒｇｅ　社製 ネ＊　ｌｄｅｗ＋１ｔｚｕ　Ｐｅｔｒｏ　Ｃｈｅｍｉｅａ１社製１、ａｗｓｏｎ −Ｌｉｐｉｄｓ　２３：３１３３１７（１９８８年）ＳｕｚｕｋトＲｉｏｔｅｅ ｈｎｏｌｏｇｙ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　Ｆａｔｓ　ａｎｄ　０ｉｌｓ　！ｒ＋ｄｕｓ ｌｒｙ。 ＋１０−１１６０．　Ａｍｅｒ　Ｏｉｌ　Ｃｂｃ１．　Ｓａｃ、　Ｐｌｅｓｓ（ １９１１９年）魚油および植物油の一方まｔ、・は両方を六んだ才だ（５（３才 ない何れかの組合せの十記４の微生魚油からなるブＩ／ン］・を含有する組成物 は本発明の別の局１ｎ１を措成ず・で１１、本組成物は伺おの比の油も′３白゛ するが、前記し２か比が６ｙま（−１い。 別の好″Ａ：　ｌ、、、、い態様（、。台い（−１本勺１成並１は栄就捕助削と ｌ、−ｉ−役にノニ−：）　、、典型的ｉ、＝　ｉ；ｔｌ、’ｌ　（７）　、ｌ 　’）な補助７’ｔ’ｌは例バばＬ声−Ｆ−Ｌ゛／　）ｒシー（ル’ｌ’　ｉ： ”ｍ　Ｎｆ　人Ａ　Ｉ’ｉ、　ｌｉ　＋、（’、’、−，’、、　（１）　、Ｊ 、’、：）　ｔ；　ｉ’ｉ　Ｔ７”　セル剤１堰@妊１ｋ　ｌ、Ｃイ二、　Ａ（ ｉｌ土かはツ１．飲イク子の）ｌ観５（ハような浦給ｔ））必要な人達６．′投 ↓ｊ−・するのに適（５だ形態Ｃ゛あイ）３．１、か１．ｙ　！＝がＩ−７、Ｊ ｉｍ経１−１的投り、も実行用催；　”’Ｃ＄戸）、１態様（、世誓いで、本社 １成ｒＭ　ｉ、Ｌ　１ｌＪｉ：　＄Ｖ′ｍ”］用栄養ｌ１１１　（ａ　ｔｏｔａ ｌ　ｐａｒｅｎｂｒｒａｌ　ｎｕｔｒｉｔｉｎｎａｌ　ｆｏｒ＋ｎｕｌａ）の脂 ＋ｌ／ｉ成分４構成Ｗｊる１１、−のよ゛うな栄曹削は知らオ自おり、商鼠的（ 、−人、干（う、で１１、本発明の組成物はｋｆ＆”ｍ　ｔ、、−ＣイるＩ、ｃ 　’ａ　＊　／、□−はツ１．飲み子〕Ｆｚ工ｇｊ　６）；’、、’：めの補助 食と！、、ｙ　−ｃ’　Ｑｌ　ｉ、−：有Ｉｌｌ　Ｙ−’ある１、特ｆ：　ｆｉ 　＊　＝＋ｇ　ｉ’Ｑ　ノ１！、ｆｉｔ買１買置多■A） １）ＨＡ↓ｉよびＡ　ＲΔを必ｙＪｊｉよ−・トるｈく１、−第１らの人−ｐｈ ＋つ１は動物ｔ、＝（；−であったため過去（Ｊは、“−オ；らを摂取する、二 とが（゛隆’＋（か）だ１１、−れま−Ｃ本発明を一般的に記＠）１７だが、次 の、ＩＩ限定的な実施、例を用いて本発明をさらに７．￥Ｉ、＜説明ずろ１、
【 実施例】
【実施例１１　Ｐ、　ｉｎｓｉｉｌｉｏｓｕｍ脂質の製造８０ｆ（総容積）の発 酵器の中で、５１ｊ？の水道水、１２１ζｇのり月１−　ス、２４０ｇの酸１Ｊ 抽出物および１５ｍｌのＭａｚｕ　２１０ｓ　（登録商標）消泡剤を混合した。 発酵器を１２１℃で４５分間滅菌した。滅菌上程中に、さらに５７！の凝縮水を 加えた。ｐＨを６．７　ｆｍ調整し、次いて約１ｒのＰｙｔｈｉｕｎ＋　１ｎｓ ｉｄｉｏｓｕｎ　ＣＡ　Ｔ　ＣＣ＃　２８２５１　）　（１）接種物（細胞密度 ５−１０ｇ／ｎ）を加えた３、撹拌速度を１２５ＲＰＭ（羽根先のスピ・−ド２ ５０ｃｍ／秒）に調整し、そして通風速度をＩｓｃＭＦ（標準立方フィート７分 ）に設定（，７た。操作開始後２４時間に、通風速度を３ＳＣＭＦまで増加さぜ た。２８時間に、さらに２ｐの５０％グルコースシロップ（Ｉ　ｋｇグル°−Ｊ −ス）を加え＋１７１．５０時間（、−発酵器か１）抹１し腰湿猥重殴で１１あ たり約２．２　ｋｇ　（、乾燥重量下約１５ｇ）を数紙し＋２．　、、採取し７ だバイ本マスを凍結乾燥する前（゛−吸引ろ、０（”、より絞り出（、で高い固 形分のり・−キ（５１１ｉ％固形分）とした、３乾燥したバイオマス拶乳鉢フ月 ′び７１．枠ろ゛用い“（粉砕Ｉ、７、そＬ”Ｔ’２時間連続撹什ｊ、なから室 １ｔ−ｒ　’ｆｔ’、］’　”（ｌｃ　、・”７．２００　ｇあｊ゛す１ｒ０） Ｉ＼ギ）；”ンをＪｆｌ　イ”ｒ油ｌ（冒、ｔ−１、次（１−２混合わｊ・λろ 過；１７、ろ液４部蒸発さ１１′丁乾燥バ１′４゛イ゛スｌ　００　ｇ　ｒＪＦ ｉ　ｆ、’、り約５・“・６ｇ１′７）粗製油イー・ｉｌ？ｒ、、バイオマスを 、Ｉ　ｌ′！−′１１：間Ｎｆｉ　Ｔ乾ｉ％ｙ＜　１４−？　ス２　Ｏｆ、：あ ｔ−リｉｐのＪクツ・−ルを用い１ロひ抽出Ｌ、７）過Ｉ２、Ｊｉ、Ｔ／８媒４ −５γ：発ンｊさ一貝−１′−屹太・ｂノ【イオマスｌ　ｆＪ　Ｏｇあた＃）Ｊ 加ノ２２　ｇ　ノｔｌｖｉ’［ｌ１４−得た３、第２　）−）　５クシ→゛／（ ｊ主、１−１ｌ、てり゛・脂質であ２）が、第１のツー７ノノシ＊、’／Ｉ：ｔ リン駈γ１お６）ひｌ・リグリセリトの混拾物夕含ん−Ｃいｆａｌｌ、　、、合 一（、たーノラクン−３゛、・は約３０・・３５　Ａの”ｊ−１−１−ド／酸） ＾含ｆｉ’　ｌ−１Ｅ　Ｐ　Ａが検出さイ］ない油を４成（、ｔ、−６、 （実施例２　）　Ｍ、　ａｌｐｉｎａ脂質の製造Ｍｎｒｔｉｅｌｅｌｌａ　ａｌ ｐｉｎａ　（ＡＴＣ，Ｃ，＃　４　？　４３０　）をｉｐの水道水および２０Ｉ −２のボテｌ−ｆヤーンミｌ−ｏ　−ス培地を３有ずろ２７７の娠と・）゛ノー ラスー１中で増殖した。フーンスコを一定のオービタル撹拌ドに置、き、ｒ日間 ２１〕て：に保持した。遠心分離による採取後、／くイオマスを凍結乾燥して約 ８ｇの脂質（こ富んだ菌糸体を得た１、実施例１のようにして・＼ギリンを用い て菌糸体を抽出して約２．４ｇの粗製油を得た０、この油は約２３９（ｉのアラ キドン酸を含有した。 【実施例３］　３０βの使用容積のＳＴＦ中に１７４強度の人工海水からなる培 地を入れた。６Ｆ！の■０を１８／の水道水と混合した。培地を含（ｆする発酵 器を滅菌し、２８℃まで冷却した。４００ｍ１の濃縮ＹＥ　（４５５ｇ／’ｌ） 　、９００−のグルコースシロ’７プ（４００ｇ／Ｒ）および１１の接種物［約 ２ＸｌＯ’細胞／ｒｎｌのＣ，ｃｏｈｎｉｉを含有する種子発酵器、または２０ ｇ／、＆の）くイオマス（約１０５細胞／−の最終濃度または約７００■／ｌの ７くイオマスを与える）から得られる〕を培地に加えた。ＭＫ８８４０と称する Ｃ、　ｃｏｈｎｉｉ細胞はＡｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ １１ｅｃｔｉｏｎからＡＴＣＣ４０７５０として入手した。撹拌速度を１２０ａ ｎ／秒（羽根先のスピード）に設定し、通風速度をＩＶＶＭ（３０Ｉ！／分）に 設定した。追加のグルコースシロップ（９００ｄ）を３０時間後に、さらに別の ４．２１をその後４２時間にわたって加えた。したがって、全部で６１のグルコ ースシロップを加えたことになる。濃縮ＹＥ溶液（４００ｍ／）を６時間後に、 さらに別の１、２１！をその後４８時間にわたって加えた。したがって、全部で ２、Ｏｌを加えたことになる。Ｄ、Ｏ，を２部％以上に維持するため、撹拌速度 （羽根先のスピード）を開始後２４時間に１５０ａ。 ７秒まで、４８時間に１６０ａｎ／秒まで増加させた。７２時間に羽根先のスピ ードを２００ａｎ／秒まで増加させ、培養物を最後に加えたグルコースを細胞の 油に変換するのに十分な時間増殖させた。次に、細胞ペレットを維持しながら、 培養物を遠心分離により採取した。採取した細胞ペレットを凍結乾燥して約４％ の水分とした。ヘキサン（２，８ｎ）を乾燥したバイオマスに加え、ガラス容器 中、５０℃で１．５時間撹拌した。回転蒸発器を使用してヘキサンを除去し、約 １７５ｇの粗製ＤＨＡ含有油を生成する。 【実施例４】　従来の３０ｆｉの撹拌タンク発酵器（ＳＴＦ）中に、ビタミン、 グルコースおよびケイ酸塩を除いて表Ａに記載のものからなる栄養培地を加えた 。発酵器はＲｕ５ｈｔｏｎ型タ一ビン撹拌機を備えている。ＳＴＦおよび培地を 滅菌した。培地を約３０”Ｃまで冷却した後、ビタミン、次いで十分な量の４０ ％グルコースシロップを加えて約８０　ｇ／Ｉ！のグルコース濃度とした。次に 、濃縮メタケイ酸ナトリウム５水和物（１００ｇ／Ｉりを加えて約２００ｍｇ／ ４１’の総ケイ酸塩濃度とした。Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ 　Ｃ。 １１ｅｃｔｉｏｎからＡＴＣＣ４０７７５として入手したＮ、　ａｌｂａ細胞の 接種量の培養物を発酵器の総容積の５％、例えば１．５ｆｆｉ／３０１にほぼ等 しい量で加えた。羽根先のスピードを８５〜９０ｃｍ／秒に設定して撹拌を開始 し、また通風をＩＶＶＭで始めた。約１６時間にわたって、追加の濃縮メタケイ 酸塩（０，５：Ｍ）を加え、撹拌スピードを１２６ａｎ／秒まで増加させた。そ の後、約２４時間にわたって、さらに濃縮ケイ酸塩（０，８３ｆ）を加えた。再 び、撹拌スピードを約１８０〜１８５ａｎ／秒まで増加させた。その後、約３時 間にわたって追加のｏ、　ｔ　ｓ　ｉ、の濃縮メタケイ酸塩を加えた。 したがって、加えたメタケイ酸塩の総量は約１５６ｇまたは約１゜６Ｉ！の濃縮 溶液である。開始後約４８時間に、追加のグルコース（約５ｆ）を加えた。した がって、加えた総グルコース量は約４゜８ｋｇまたは約１２ｆｆの４０％グルコ ースシロップである。撹拌スピードおよび通風速度を維持しながら、培養物をさ らに１６時間増殖させた。次に、５ｈａｒｐｌｅｓ連続フロ一遠心機を使用して 発酵器から採取し、約４５〜４８ｇ（乾燥型１ｎ）／ｌの密度のバイオマスを得 た。約２０〜３８％の固形分のペレットを取り出し、約−２０℃まで凍結した。 棚型真空乾燥機を使用してペレットから水分を除去した。次に、単細胞油のペレ ットをヘキサンで抽出した。 蒸留によりヘキサンを除去すると、抽出された単細胞油が残留した。 増殖培地組成 １９ｇ／／　Ｉ、０゜ ［Ｉ・・ｔ・・ｔ　Ｏｃ。・・（登録商標）］５５７０ｇ　６°６５１′″３ｇ ／ｌ　ＮａＮＯｓ　９０　ｇ　１．０５　ｋｇｏ、５ｇ＃　ＮａＨ，ＰＯ，・Ｈ ｔｏ　１５　ｇ　１７５　ｇｏ、２ｇ／ｌ　ＮａｚＳｉＯｓ５Ｈｚ０　６　ｇ　 ７０　ｇ６ｍｇ＃　ｆ／２　ＴＭ（微量金属）　１８０ｍ／　２．１Ａ６０■／ Ｉ　ＨｚＢＯｓ　１．８　ｇ　２１　ｇ６ｗ／Ｉ　ＨａｔＳｅＯｓ　１８０　ｍ ｇ　２．１　ｇ］Ｏｍｇ／７　ＮａＦ　３００　ｍｇ　３．５　ｇ４０■／ｌ　 ５ｒＣ１ｚ”６Ｈｚ０　１．２　ｇ　１４　ｇ１５０ｍｇ、＃　ＫＢｒ　４．５ 　ｇ　５２．５　ｇｏ、５ｇ／ｌ　ＫＣＩ　１５　ｇ　、１７５　ｇ、２ｔｄ／ ｌ　Ｂ８ＴＭ　（微量金属）　’６０ｍ／　７００ｍｊ滅菌後 ０、　Ｉｙｄ／ｌの０．１■／ｍｌ　Ｂ＋ｔ　３Ｊ　３５ｍ１０．１ｒｄ／１の ０．１ｍｇ／−ビチオン　３ｎ１１３５ｍ／２ｙｄ／１０）　Ｉ　ｒｎｇ／ｍｌ チアミンＨＣＩ　６０　ｙｎｌ　７００　ｍｌグルコース（１１８０ｇ＃　６１ ！　７０１（４０％ストック溶液）を用いて開始する（２）別の４０ｇ／Ｉ　１ および２３Ａ　３５Ａ（２日後に追加の６１りを加える ケイ酸塩　４８時間にわたッテ６０ｍ１／１　１．８　ｊ７２１　（！の＋００ ｇ＃ストッタスト および追加量のストッ ク溶液を加える
【実施例５］　油混合物ｌの製造および調合乳への添加最初の混合物はすべて植 物源のアラキドン酸およびドコサヘキサエン酸補助剤である。この補助剤は菜食 に制限された人達に受け入れられると思われる。５ａｎｄｅｒＳら（Ａｍｅｒ、 　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｎｕｔｒ、　３１：　８０５．１９７８年）は菜食主義の 母親の母乳中のＤＨＡレベルは低下していると報告している。ＤＨＡ単細単細胞 上びＡＲＡ単細胞油のブレンドからなる腸溶性補助剤は乳清、したがって母乳中 のＤＨＡレベルを何でも食べる母親のものと同程度まで高める。このブレンドは 約３５％のＤＨＡを含有するＤＨＡＳＣＯ（実施例３記載のＣｒｙｐｔｈｅｃｏ ｄｉｎｉｕｍ　ｃｏｈｎｉｉから得られる）１部を約３３％のＡＲＡを含有する ＡＲＡＳＣＯ（実施例１記載のＰｙｔｈｉｕｍｉｎｓｉｄｉｏｓｕｍから得られ る）３部と混合することにより製造される。 得られる混合物またはブレンドは表２に示される脂肪酸組成を有する。ブレンド は１部のブレンド対４０部の調合乳用部の比で、典型的には１００ｒｎｌの調合 乳あたり２．８〜３．０ｇの割合で混合される。５１ｍ１ｌａｃ　（登録商標） 調合乳ｌｌあたり３０ｇの脂肪からなる通常の脂肪含有量において、これは調合 乳ＩＩ！あたり７５０■の添加に相当する。この補助剤はヒトの母乳と同等のＡ ＲＡおよびＤＨＡレベルを与える。 〔表２〕 表２．１：３の重量比のＤＨＡ油およびＡＲＡ油からなるブレンドの組成 促竺信　油混合物１　畏企四　調合乳＋混合物Ｉ　リ８：ｌ＋ｌＯ：Ｏｏ、ｏｏ 　４１．８　４０．７８　１．７４１２：０＋１４：０　１３．６３　２０．７ 　２０．５３　１４．９５１６：０　１７．０５　６．８　７．０５　１９．８ ２＋６：ｌ　７．８８　０．２　０．３９　３．２０１．８：Ｏｏ、ｏｏ　２． ３　２．２４　５．９１１８：ｌ　７．４８　１０．０　９．９４　３４．８２ ＋８：２　ｎ６　７．２０　１７．４　１７．１５　１６．００１８：３　ｎ３ 　２．２５　０．９　０．９３　０．６２１８：３　ｎ６　４．５０　−−　０ ．１１　０．００２０：４　口６　２４．７５−０．６０　０．５９【実施例６ 】　油混合物２の製造および調合孔への添加この混合物はすべて植物源の長鎖Ｐ ＵＦＡであり、菜食に制限された人達に受け入れられると思われる。このブレン ドは約３５％のＤＨＡを含有するＤＨＡＳＣＯ（実施例３記載のＣｒｙｐｔｈｅ ｃ。 ｄｉｎｉｕｍ　ｃｏｈｎｉｉがら得られる）３部を約３３％のＡＲＡを含有する ＡＲＡＳＣＯ（実施例１記載のＰｙｔｈｉｕｍ　１ｎｓｉｄｉｏｓｕｎがら得ら れる）１０部および約５％のＥＰＡを含有するＥＰＡＳＣＯ（実施例４記載のＮ 、ａｌｂａから得られる）５部と混合することにより製造される。得られる混合 物またはブレンドは表３に示される脂肪酸組成を有する。ブレンドは１部のブレ ンド対３０部の調合孔用油の比で混合される。５１ｍ１ｌａｃ　（登録商標）調 合孔１１あたり３０ｇの脂肪からなる通常の脂肪含有量において、これは調合孔 １１あたりＩｇの添加に相当する。この補助剤はヒトの母乳と同等のＡＲＡ、Ｄ ＨＡおよびＥＰＡレベルを与える。 〔表３〕 表３．　３　：１．０：　５の重量比のＤＨＡ油、ＡＲＡ油およびＥＰＡ油から なるブレンドの組成壁級！　醇澄勿１　シ企Ｌ　邑介り十混合物２−　見−界８ ：ｌ＋ｌＯ：Ｏｏ、ｏｏ　４１．８　４０．４５　＋、７４１２：０＋１４：０ 　１６．６４　２０．７　２０．５７　１４．９５１６：０　２１．．６１　６ ．８　７．２８　１９．８２１．６：Ｉ　６．５５　０．２　０．４０　３．２ ０１８：０　０．２８　２．３　２．２３　５．９１１８：ｌ　１２．９１　１ ０．０　１０．０９　３４．８２１８：２　ｎ６　５．８７　１７．４　１７． ０３　１６．００＋８：３　ｎ３　１．８８　０．９　０．９３　０．６２１８ ：３　ｎ６　３．４８　０．１１　０．００２０：Ｉ　−０，１０，１０１，， １０２０：２　ｎ６　０．００　０．６１ ２０：３　ロ６　０．１９　０゜０１　０．４２２０：４　ｎ６　１８．５２　 ０．６０　０．５９２０：５　ｎ３　０．７６　０．０２　０．０３２２：ｌ　 ｏ、ｏｏ　ｏ、ｔ。 ２２：４　ｎ６　０．　ｉｌ　Ｏ，０００，２１２２：５　ｎ６　−−　０．０ ０　０．２２２２二６ｎ３６．２４−−０．２００．１９
【実施例７】　油混合 物３の製造および調合孔への添加この混合物はＡＲＡＳＣＯと魚油のブレンドで ある。油混合物３は約９％のＤＨＡを含有する特別に加工されたＭｅｎｈａｄｅ ｎ油（ｚａｐａｔａ　Ｈａｙｎｅ社製）１部を、約３３％のＡＲＡを含有する前 記のＰｙｔｈｉｕｍ　ｉｎｓｉｄｉｏｓｕｍから得られるＡＲＡＳＣＯ１部に加 えることにより製造される。得られる脂肪酸組成を表４に示す。このブレンドは １部のブレンド対３０部の調合孔用油の比で混合される。 調合孔ｌｌあたり３０ｇの脂肪からなる通常の脂肪含有量において、これは調合 孔ｌｌあたりＩｇの添加に相当する。この補助剤はヒトの母乳と同等のＡＲＡお よびＤ　ＨＡレベルを与えるが、ＥＰＡレヘレベ母乳中のものより約８倍高い。 〔表４〕 表４．１：１の重量比のＳＰＭＯ”およびＡＲＡ油からなるブレンドの組成 １級！　油混合物３　孔今Ｌ　調合乳＋混合物３　仇−Ｌ８：ｌ＋１０：Ｏｏ、 ｏ　４１．８　４０．４５　１．７４１２：０＋１４：０　１０．２　２０．７ 　２０．３６　１４．９５１６・０　１５．５　６．８　７．０８　’　１９． ８０１６：ｌ　１１．５　０．２　０．５６　３．２０１８：０　１．４１　２ ．３　２．２７　５．９１１８：１　８．７９　１０．０　９．９６　３４．８ ２１８＋２　ｎ６　５．５７　１７．４　１？、０２　１６．００１８：３　ｎ ３　２．３１　０．９　０．９５　０．６２１８：３　ｎ６　３．００　−−　 ０．１０　０．００２０：１．　０．７８　０．１　０．１２　１．１０２０： ２　ｎ６　０．００　−−　０．００　０．６１２０：３　ｎ６　０．００　− −　０．００　０．４２２０：４　ｎ６　１７．５２−０．５７　０．５９２０ ５　ロ３　７．７６−０．２５　０．０３２２：Ｉ　ｏ、ｏｏ−０，０００，１ ０２２：４　ｎ６　０．００　−−　０．００　０．２１２２：５　ｎ６　１． ２＋　−−０，０４０，２２２２：６　ｎ３　４．５７　−−　０．１５　０． １９＊　特別に加工されたＭｅｎｈａｄｅｎ油
【実施例８】　油混合物４の製造 および調合孔への添加油混合物４はアラキドン酸の代わりにＧＬＡを使用するた め開発された。このブレンドは約９％のＤＨＡを含有する特別に加工されたＭｅ ｎｈａｄｅｎ油（Ｚａｐａｔａ　Ｈａｙｎｅ社製）１部を、約１８％のＧＬＡを 含有するクロッサスグリ種子油４部および約３５％のＤＦ■Ａを含有するＤＨＡ ＳＣＯ１部と混合することにより製造した。 得られる脂肪酸組成を表５に示す。このブレンドは１部のブレンド対４０部の調 合孔用油の比で混合される。ＩＩ！あたり３０ｇの脂肪からなる通常の脂肪含有 量において、これは調合孔１ｆｆｉあたり７５０■の添加に相当する。この補助 剤はヒトの母乳と同等のＥＰＡおよびＤＨＡレベルを与える。ＡＲＡレベルはヒ トの母乳中のものの約１７１Ｏである。しかしながら、Ｇ　Ｌ　Ａレベルは典型 的には微量である母乳中のＧＬＡレベルより２０〜５０倍高い。 〔表５〕 表５．１：４：ｌの重量比のＳＰＭＯ，ＢＣＯおよびＤＨＡ油からなるブレンド の組成粧塾糟　油混合物４　乳合Ｌ　調合乳＋混合物４　見−Ｌ８：ｌ＋ｌＯ： Ｏｏ、ｏ　４１．８　４０．７８　１．７４１２：０＋１４：０　４゜８３　２ ０．７　２０．３１　１４．９５＋６：０　１１．８６　６．８　６．９２　１ ９．８０１６：ｌ　２．０９　０．２　０．２５　３．２０１８：０　１．３４ 　２．３　２．２８　５．９１１８：ｌ　１０．９８　１０．０　１０．０２　 ３４．８２１８：２　ｎ６　３１．３９　１７．４　１７．７４　１６．００１ ８：３　ｎ３　８．９４　０．９　１．１０　０．６２１８＋３　ｎ６　１０． ６０　−−　０．２６　０．００２０：Ｉ　Ｏ，２６０，１０，１０１，１０２ ０：２　ｎ６　−−　−−　０．００　０．６１２０：３　ｎ６　−−　−−　 ０．００　０．４２２０：４　ｎ６　０．３４　−−　０．０６　０．５９２０ ：５　ｎ３　２．５９−−０．００　０．０３２２：ｌ　−−−−０，０００， １０ ２２：４　ｎ６　−−　−−　０．００　０．２１２２：５　ｎ６　０．４０　 −−　０．０１　０．２２２２：６　ｎ３　７．５１　０．１８　０．１９
【実 施例９】　油混合物５の製造および調合乳への添加油混合物５はヒトの母乳のＤ ＨＡ、ＡＲＡおよびＥＰＡの組成に最も良く近づけるため開発された。この油ブ レンドは約９％のＤＨＡを含有する特別に加工されたＭｅｎｈａｄｅｎ油（Ｚａ ｐａｔａ　Ｈａｙｎｅ社製）１部を、約３３％（７）ＡＲＡを含有するＡＲＡＳ ＣＯＩ　０部および約３５％のＤＨＡを含有するＤＨＡＳＣ０３部と混合するこ とにより製造した。得られる脂肪酸組成を表６に示す。このブレンドは１部のブ レンド対４０部の調合乳用油の比で混合される。 調合乳Ｉｆあたり３０ｇの脂肪からなる通常の脂肪含有量において、これは調合 乳１’あたり７５０■の添加に相当する。この補助剤は実質的にヒトの母乳中の ものと同等のＥＰＡ、ＤＨＡおよびＡＲＡレベルを与える。 〔表６〕 表６．１：１０：３の重量比のＳＰＭＯ，ＡＲＡ油およびＤＨＡ油からなるブレ ンドの組成壁塾！　油混合物５　裏金Ｌ　調合乳＋混合物５ｆｆｉＲ８：ｌ＋ｌ Ｏ：Ｏｏ、ｏｏ　４１．８　４０．７８　１．７４１２：０＋１４：０　１３． １４　２０．７　２０．５２　１４．９５１６：０　１６．８３　６．８　７． ０４　１９．８０１６：ｌ　８．３９　０．２　０．４０　３．２０１８：０　 ０．２０　２．３　２．２５　５．９１＋８：１　７．６６　１０．０　９．９ ４　３４．８２１８：２ｎ６　６．９７　１７．４　１？、１５　１６．００１ ８：３　ｎ３　２．２６　０．９　０．９３　０．６２１８：３　ｎ６　０．２ ５　−−　０．０１　０．００２０：１　０．１１　０．１　０．１０　１．１ ０２０：２　ｎ６　−−　−−　０．００　０．６１２０：３　ｎ６　０．００ 　０．４２ ２０：４　ｎ６　２３．７２　０．５８　０．５９２０：５　ｎ３　１．１１　 ０．０３　０．０３２２：ｌ　ｏ、ｏｏ　Ｏ，１０ ２２：４　ｎ６　−−　−−　０．００　０．２１２２：５　ｎ６　０．１７　 −−　０．００　０．２２２２：６　ｎ３　８．３５　−−　０．２０　０．１ ９【実施例１０１　油混合物６の製造および調合乳への添加この混合物はすべて 植物源のアラキドン酸およびドコサヘキサエン酸補助剤である。この補助剤は菜 食に制限された人達に受け入れられると思われる。５ａｎｄｅｒｓら（Ａｍｅｒ 、　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｎｕｔｒ、　３１；８０５　、１９７８年）は菜食主義 の母親の母乳中のＤＨＡレベルは低下していると報告している。ブレンドの腸溶 性補助剤は乳清、したがって母乳中のＤＨＡレベルを何でも食べる母親のものと 同程度まで高める。このブレンドは１部のＤＨＡ油（実施例３記載のＣｒｙｐｔ ｈｅＣＯｄｉｎｉｕｍ　ｃｏｈｎｉｉから得られる）を５部のＡＲＡ油（実施例 ２記載のＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　ａｌｐｉｎａから得られる）と混合すること により製造される。得られる混合物は図７に示される脂肪酸組成を有する。この ブレンドは１部のブレンド対３５部の調合乳用油の比で混合される。ＩＩ！あた り３５ｇの脂肪からなる通常の脂肪含有量において、これは調合乳Ｉｆあたり１ ｇの添加に相当する。 この補助剤はヒトの母乳と同等のＡＲＡおよびＤＨＡレベルを与える。 〔表７〕 表７．１：５の重量比のＤＨＡ油およびＡＲＡ油からなるブレンドの組成 阻竺重　油混合物６　！皇ユ　調合乳＋混合物６ｉＫ８：ｌ＋１０：Ｏｏ、ｏ　 ４１．８　４０．６　１．７４１２：０＋１４：０　４．０　２０．７　２０． ２　１４．９５１６：０　１６．８　６．８　７．１　１９．８２１６：ｌ　ｏ 、ｓ　Ｏ，２０，２３，２１８＋０　１１．０　２．３　２．５　５．９１１８ ：１　１７．８　１０．０　１０．０　３４．８２１８：２ｎ６　１１．１　１ ？、４　１７．２　１６．００１８：３　ｎ３　５．２　０．９　０．９　０． ６２１８：３　ｎ６　４．５　−−−　０．１　０．００２０：ｌ　−−−０， １０，１１，＋０２０：２　ｎ６　−−−　−−−　０．０　０．６１２０：３ 　ｎ６　６．０　−−−　０．１７　０．４２２０：４　ｎ６　２０．１−−− ０．５７　０．５９２０：５　ｎ３　０．１　−−−　０．０１　０．０３２２ ：ｌ　−−−−−−０，０００，１０２２：４　ｎ６　２．０　−−−　０．０ ６　０．２１２２：５　ｎ６　−−−　−一−０，０００，２２２２：６　ｎ３ 　６．１　−−−　０．１８　０．１９国際調査報告 一計背−Ｐ−＾−”””””’　ｆｆｆｌ／ＵＳ９２１００５２２フロｌ／へ− ジの続き （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。 ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＳＥ）、０Ａ（ＢＦ 、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、Ｇ、Ｎ、ＭＬ、ＭＲ，ＳＮ、ＴＤ、Ｔ Ｇ）、ＡＴ、　ＡＵ、ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＣＨ，ＤＥ、　ＤＫ。 ＥＳ、　ＦＩ、　ＧＢ、　ＨＵ、ＪＰ、　ＫＰ、　ＫＲ，ＬＫ、　ＬＵ、ＭＧ、 ＭＷ、ＮＬ、Ｎｏ、ＰＬ、ＲＯ，ＲＵ、ＳＤ、ＳＥ

Claims (67)

    【特許請求の範囲】
  1. １．（ａ）少なくとも２種の異なる微生物源から少なくとも２種の異なる長鎖多 不飽和脂肪酸を含有する微生物油を得、そして（ｂ）この油を調合乳に加えるこ とを包含する、調合乳を補足するための方法。
  2. ２．油がω−３およびω−６脂肪酸から選択される請求の範囲第１項記載の方法 。
  3. ３．（ａ）少なくとも２種の微生物から多不飽和脂肪酸を含有する微生物油を得 、 （ｂ）この油を一緒にブレンドし、そして（ｃ）この油のブレンドを調合乳にヒ トの母乳中の量と実質的に同じ量の多不飽和脂肪酸を与えるのに有効な量で調合 乳に加えることを包含する、調合乳中のω−３およびω−６多不飽和脂肪酸の相 対量がヒトの母乳中に含まれるこの多不飽和脂肪酸の量と実質的に同じになるよ うに調合乳の組成を変える方法。
  4. ４．油がＡＲＡＳＣＯおよびＤＨＡＳＣＯである請求の範囲第３項記載の方法。
  5. ５．ＤＨＡＳＣＯはＡＲＡＳＣＯとブレンドの重量に基づいて約１〜約５部のＤ ＨＡＳＣＯ対約２〜約１２部のＡＲＡＳＣＯの比でブレンドされる請求の範囲第 ４項記載の方法。
  6. ６．ＤＨＡＳＣＯ対ＡＲＡＳＣＯの比は約１：３である請求の範囲第５項記載の 方法。
  7. ７．微生物種は菌類および藻類から選択される請求の範囲第４項記載の方法。
  8. ８．菌類はＰｙｔｈｉｕｍまたはＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａである請求の範囲第７ 項記載の方法。
  9. ９．藻類はＣｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍである請求の範囲第８項記載の方法 。
  10. １０．菌類はＰｙｔｈｉｕｍまたはＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａであり、そして藻類 はＣｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍである請求の範囲第７項記載の方法。
  11. １１．ＰｙｔｈｉｕｍはＰ．ｉｎｓｉｄｉｏｓｕｍであり、Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌ ｌａはＭ．ａｌｐｉｎａであり、そしてＣｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍはＣ． ｃｏｈｎｉｌである請求の範囲第１０項記載の方法。
  12. １２．油はさらにＥＰＡＳＣＯを含有する請求の範囲第４項記載の方法。
  13. １３．徴生物種は菌類および藻類から選択される請求の範囲第１２項記載の方法 。
  14. １４．菌類はＰｙｔｈｉｕｍまたはＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａである請求の範囲第 １３項記載の方法。
  15. １５．藻類はＣｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍおよびＮｉｔｚｓｃｈｉａである 請求の範囲第１３項記載の方法。
  16. １６．菌類はＰｙｔｈｉｕｍおよびＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａであり、そして藻類 はＣｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍおよびＮｉｔｚｓｃｈｉａである請求の範囲 第１３項記載の方法。
  17. １７．ＰｙｔｈｉｕｍはＰ．ｉｎｓｉｄｉｏｓｕｍであり、Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏ ｄｉｎｉｕｍはＣ．ｃｏｈｎｉｌであり、ＮｉｔｚｓｃｈｉａはＮ．ａｌｂａで あり、そしてＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａはＭ．ａｌｐｉｎａである請求の範囲第１ ６項記載の方法。
  18. １８．さらにブレンドを調合乳に加える前に微生物油を魚油とブレンドすること を包含する請求の範囲第３項記載の方法。
  19. １９．ブレンドの重量に基づいて魚油は１部であり、そして微生物油は約１〜約 １５部である請求の範囲第１８項記載の方法。
  20. ２０．微生物油はＤＨＡＳＣＯおよびＡＲＡＳＣＯから選択され、そしてこの油 の比は約１部の魚油対１０部のＡＲＡＳＣＯ対３部のＤＨＡＳＣＯである請求の 範囲第１９項記載の方法。
  21. ２１．（ａ）ＤＨＡを含有する微生物油を得、そして（ｂ）この油をγ−リノレ ン酸を含有する油とブレンドし、それにより補助剤を生成することを包含する、 調合乳用補助剤の製造法。
  22. ２２．リノレン酸を含有する油はサクラソウ油、ルリヂサ油またはクロフサスグ リ種子油である請求の範囲第２１項記載の方法。
  23. ２３．リノレン酸を含有する油は微生物油である請求の範囲第２１項記載の方法 。
  24. ２４．さらにＭｕｃｏｒ　ｊａｖｏｎｉｃｕｓまたはＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　 ｉｓａｂｅｌｌｉｎａからリノレン酸を含有する油を得ることを包含する請求の 範囲第２３項記載の方法。
  25. ２５．さらにＤＨＡを含有する微生物油およびリノレン酸を含有する油をＥＰＡ を含有する油とブレンドすることを包含する請求の範囲第２１項記載の方法。
  26. ２６．ＥＰＡを含有する油は魚油である請求の範囲第２５項記載の方法。
  27. ２７．ブレンドの重量に基づいて魚油は約１部であり、リノレン酸を含有する油 は約４部であり、そしてＤＨＡを含有する油は約１部である請求の範囲第２６項 記載の方法。
  28. ２８．ブレンドの重量に基づいて魚油は約１部であり、リノレン酸を含有する油 は約４部であり、そしてＤＨＡを含有する油は約１部である請求の範囲第２６項 記載の方法。
  29. ２９．少なくとも２種の長鎖多不飽和脂肪酸を含有する微生物油のブレンドを包 含する組成物。
  30. ３０．油がＡＲＡＳＣＯおよびＤＨＡＳＣＯから選択される請求の範囲第２９項 記載の組成物。
  31. ３１．ＤＨＡＳＣＯはＡＲＡＳＣＯとブレンドの重量に基づいて約１〜約５部の ＤＨＡおよび約２〜約１２部のＡＲＡの比が得られるようにブレンドされる請求 の範囲第３０項記載の組成物。
  32. ３２．ＤＨＡ対ＡＲＡの比は約１：３である請求の範囲第３１項記載の組成物。
  33. ３３．油はさらにＥＰＡＳＣＯを含有する請求の範囲第３０項記載の組成物。
  34. ３４．組成物はさらに魚油を包含する請求の範囲第２９項記載の組成物。
  35. ３５．ブレンドの重量に基づいて魚油は約１部であり、微生物油は約１〜約１５ 部である請求の範囲第３４項記載の組成物。
  36. ３６．ＤＨＡを含有する微生物油およびγ−リノレン酸のブレンドを含有する油 を包含する組成物。
  37. ３７．リノレン酸を含有する油はサクラソウ油、ルリヂサ油またはクロフサスグ リ種子油である請求の範囲第３６項記載の組成物。
  38. ３８．リノレン酸を含有する油は微生物から得られる油である請求の範囲第３６ 項記載の組成物。
  39. ３９．微生物はＭｕｃｏｒ　ｊａｖｏｎｉｃｕｓまたはＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ 　ｉｓａｂｅｌｌｉｎａである請求の範囲第３８項記載の組成物。
  40. ４０．さらにＥＰＡを含有する油を包含する請求の範囲第３６項記載の組成物。
  41. ４１．ＥＰＡを含有する油は魚油である請求の範囲第４０項記載の組成物。
  42. ４２．ブレンドの重量に基づいて魚油は約１部であり、リノレン酸を含有する油 は約４部であり、そしてＤＨＡを含有する油は約１部である請求の範囲第４１項 記載の組成物。
  43. ４３．多不飽和脂肪酸を含有する微生物油の混合物を包含する栄養補助剤。
  44. ４４．ＤＨＡＳＣＯおよびγ−リノレン酸を含有する油の混合物を包含する栄養 補助剤。
  45. ４５．ＡＲＡＳＣＯおよび魚油の混合物を包含する栄養補助剤。
  46. ４６．さらに魚油を包含する請求の範囲第４３項記載の補助剤。
  47. ４７．補助剤の重量に基づいて魚油は約１部であり、そして微生物油は約１〜約 １５部である請求の範囲第４６項記載の補助剤。
  48. ４８．微生物油はＤＨＡＳＣＯおよびＡＲＡＳＣＯであり、そしてこの油の比は 約１部の魚油対１０部のＡＲＡＳＣＯ対３部のＤＨＡＳＣＯである請求の範囲第 ４７項記載の補助剤。
  49. ４９．混合物はＡＲＡＳＣＯおよびＤＨＡＳＣＯを含有する請求の範囲第４３項 記載の補助剤。
  50. ５０．ＤＨＡＳＣＯはＡＲＡＳＣＯと補助剤の重量に基づいて約１〜約５部のＤ ＨＡ対約２〜約１２部のＡＲＡの比でブレンドされる請求の範囲第４９項記載の 補助剤。
  51. ５１．ＤＨＡ対ＡＲＡの比は約１：３である請求の範囲第５０項記載の補助剤。
  52. ５２．リルン酸を含有する油はサクラソウ油、ルリヂサ油またはクロフサスグリ 種子油である請求の範囲第４４項記載の補助剤。
  53. ５３．リルン酸を含有する油は微生物から得られる請求の範囲第４４項記載の補 助剤。
  54. ５４．微生物はＭｕｃｏｒ　ｊａｖｏｎｉｃｕｓまたはＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ 　ｉｓａｂｅｌｌｉｎａである請求の範囲第５３項記載の補助剤。
  55. ５５．さらにＥＰＡを含有する油を包含する請求の範囲第４４項記載の補助剤。
  56. ５６．ＥＰＡを含有する油は魚油である請求の範囲第５５項記載の補助剤。
  57. ５７．ブレンドの重量に基づいて魚油は約１部であり、リルン酸を含有する油は 約４部であり、そしてＤＨＡを含有する油は約１部である請求の範囲第５６項記 載の補助剤。
  58. ５８．補助剤はヒトの栄養補助剤である請求の範囲第４３項記載の補助剤。
  59. ５９．ヒトは乳児である請求の範囲第５８項記載の補助剤。
  60. ６０．ヒトは妊娠している女性または乳飲み子の母親である請求の範囲第５８項 記載の補助剤。
  61. ６１．組成物は調合乳を補足するための添加剤である請求の範囲第２９項記載の 組成物。
  62. ６２．組成物は非経口用栄養剤である生気希有の範囲第２９項記載の組成物。
  63. ６３．組成物は調合乳を補足するための添加剤である請求の範囲第３４項記載の 組成物。
  64. ６４．組成物は非経口用栄養剤である請求の範囲第３４項記載の組成物。
  65. ６５．組成物は調合乳を補足するための添加剤である請求の範囲第３６項記載の 組成物。
  66. ６６．組成物は非経口用栄養剤である請求の範囲第３６項記載の組成物。
  67. ６７．組成物は調合乳を補足するための添加剤である請求の範囲第４５項記載の 組成物。
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