JPH06507601A - セスキテルペンラクトンの抽出方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 セスキテルペンラクトンの抽出方法 本発明は、植物タナセタム　バルセニウム（Ｔａｎａｃｅｔｕ■ｐａｒｔｈｅｎ ｌｕｉ）から、詳細には極性有機溶媒を用いてセスキテルペン　ラクトン（ｓｅ ｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅ　１ａｃｔｏｎｅｓ）を抽出する方法、及びこのような 抽出物の医薬品（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　）として の用途に関する。

以前にはクリサンセマム　パルセニウム（Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ　ｐａｒ ｔｈｅｎｌｕｍ）と呼ばれ、フランスギク（Ｍｉｄｓｕｍｍｅｒ　Ｄａｉｓｙ　 ）　、フェザ−ツユ−（Ｐｅａｔｈｅｒｆｅｗ）　、フェザ−ホイル（Ｐｅａｔ ｈｅｒｆｏ！ｌ　）　、フリットウォート（ｐＨｔｗｏｒｔ）及びヤグルマギク （Ｂａｃｈｅｌｏｒ’ｓ　Ｂｕｔｔｏｎｓ）としても知られている植物タナセタ ム　バルセニウム（ｒｅｖｅｒ４ｅｗ；ナッンロギク）は、種々の症状（ｃｏｎ ｄｉｔｉｏｎｓ）を治療することが伝統的に知られている。最も定期的に特許を 請求されている（ｃｌａｉｍｅｄ　）ものは、片頭痛（ｍｉｇｒａｉｎｅ）と関 節炎（ａｒｔｈｒｊｔｉｃ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　）症状である。

英国特許第２１２４４８６Ｂ号には、植物タナセタム　パルセニウムからのセス キテルペンラクトン含有抽出物を含む鎮痙的に活性な（ｓｐａｓｓｏｌｙｔｊｃ ａｌｌｙ　ａｃｔｌｗｅ）組成物の油性又は非極性溶媒抽出、及び片頭痛、喘息 （ａｓｔｈ■ａｔｌｃ　ｃｏｎｄｌｔｌ。

ｎ）、気管支炎（ｂｒｏｎｃｈｌａｌ　ｃｏｎｄｉｔｌｏｎ　）又は関節炎症状 の治療におけるその用途が記載されている。

現在、商業的に入手可能なナッシロギクの製剤（ｐｒｅｐａｒａｔ　ｔｏｎｓ） は、該植物の乾燥、粉末（ｐｏｗｄｅｒｅｄ）又は粉砕した（ｃｏ１■Ｉｎｕｔ ｅｄ）部分を含有する錠剤又はカプセル剤だけである。これらは、薬草製剤（ｈ ｅｒｂａｌ　ｍｅｄｌｃｌｎｅｓ）として薬局及びヘルスショップ（ｈｅａｌｔ ｈ　５ｈｏｐｓ）から入手することができる。しかしながら、これらや製剤にお いては、使用される植物の部分や所定のナッシロギク含量が異なっている。

粗製植物物質（ｃｒｕｄｅ　ｐｌａｎｔ■ａｔｅｒｌａｌ）は、当然のことなが ら、検討の対象となっている治療に有効でなく、また、副作用をもたらす可能性 を有する多くの物質を含んでいる。更に、粗製物質の投与量（ｄｏｓｅ）は限定 することが可能であるが、この活性物質が何であったとしても、上記投与量は恐 らく、活性物質の均一な投与量と等価ではないであろう。

ナツシロギクからの実効成分（ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ　）及び主要な活性化合物（ ａｃｔｉｖｅ　ｃｏ＊ｐｏｕｎｄ　）を同定することが試みられてきた。Ｂｏｈ ｌｍａｎｎ及びＺｄｅｒｏ（Ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅ　Ｌａｃｔｏｎｅｓ　 ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｒｒｏｓ　Ｔａｎａｃｅｔｕ ＋ｇ　ｐａｒｔｈｅｎｉｕｉ　ＳＰ■凾狽盾モ■■高■ ｓｔｒｙ　１９８２；２１＋２５４３−４９）は、該植物の空中部分（ａｅｒｉ ａｌ　ｐａｒｔｓ）をガソリン抽出（ｐｅｔｒｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　） 　した後、同定した主成分がセスキテルペン　ラクトンパルテノリド（ｐａｒｔ ｈｅｎｏｌ　Ｉｄｅ）であることを報告している。英国特許第２１２４４８６Ｂ 号では、鎮痙作用を持つ主成分としてパルテノリドを同定している。１９８６年 には、Ｇｒｏｅｎｖｅｇｅｎ等（Ｊ、Ｐｈａｒｓ、　Ｐｈａｒｇ＋ａｃｏ１．１ ９１１８；３紅７０９−７１２）が、抗分泌作用軸ｎｔ１−ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ 　ａｃｔｉｖｉｔｙ　）に関してナッシロギク抽出液の成分を同定し、パルテノ リドが活性物質の２２％を示すことを報告している。

上記の研究は、タナセタム　バルセニウムの葉の中に見出だされる潜在的活性物 質が優勢（ｐｒｅｐｏｎｄｅｒｅｎｃｅ　）であることを示している。試験管内 における（ｉｎｖ　Ｉ　ｔ　ｒｏ）薬理作用の研究は、薬剤活性がセスキテルペ ン　ラクトン、特にバルテノリドとして知られている化合物により示されること を示唆している。

従って、ナッシロギクの活性成分の同定を更に研究し、ナッシロギク植物の薬剤 活性（■ｅｄｌｃｌｎａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ）を、現在市販されている製剤に 存在しているものより更に精製された形で保持する、薬学的に許容しうる生成物 （ｐｒｏｄｕｃｔ　）を開発することはを益なことである。

従って、本発明は、タナセタム　バルセニウムを極性有機溶媒で処理することを 含む、タナセタム　バルセニウムのセスキテルペン　ラクトン含有抽出物の調製 方法を提供する。

植物組織（ｐｌａｎｔ　ｔｉｓｓｕｅ）を極性有機溶媒（ｐｏｌａｒ　ｏｒｇａ ｎｉｃ　５ｏｌｖｅｎｔ　）　、例えば、アセトニトリル、メタノール、エタノ ール、イソプロパツール、エーテル、酢酸エチル、アセトン又はその混合物（ａ 　５ｌｘｔｕｒｅ　ｔｈｅｒｅｏｆ　）に接触させることを含む方法により、上 記セスキテルペン　ラクトンが、植物タナセタム　パルセニウムから誘導される 。残留物（ｒｅｓｉｄｕｅ　）が最終生成物に残る可能性を考慮すると、毒性が 最も小さいという点がら、エタノールが好ましい溶媒である。

一般的には、植物組織と極性有機溶媒との混合液を放置し、これにより抽出を行 わせる。また、ソックスレー（Ｓｏｘｈｌｅｔ　）装置等において、植物組織を 極性有機溶媒で徹底的に抽出してもよい。本発明の方法で抽出される植物組織は 、新鮮なものでも、凍結されたものでも、乾燥されたものでもよく、また粉砕さ れた形状（ｃｏｍｍｌｎｕｔｅｄ　ｆｏｒ−）のものでもよい。次いで、抽出物 ないし抽出液（ｅｘｔｒａｃｔ）は通常、植物組織から分離され、慣用的手法に より該溶媒抽出物から溶媒が除去される。溶媒を除去した後、残存している第一 抽出物を、更にカラムクロマトグラフィー及び／又は再結晶、及び／又は溶媒抽 出のような既知の手法により精製してもよい。残存している植物組織は、同−又 は別の溶媒を用いて更に抽出してもよい。

また、上記第一抽出物は、最終医薬品（ｆｉｎｉｓｈｅｄ　ｐｈａｒｍａｃｅｕ ｔｌｃａｌ　ｐｒｅｐａｒａｔｌ。

ｎ）へ更に調製するための活性物質として使用することもできる。例えば、この 物質を、当該技術分野で知られているような錠剤用賦形剤（ｔａｂｌｅｔｔｉｎ ｇ　ｅｘｃｌｐｉｅｎｔ）と混合して、錠剤に加工することができる。このよう にして、かなり多量（ｒｅａｓｏｎａｂｌｙ　ｌａｒｇｅ　ｄｏｓｅｓ）のナツ シロギクを、比較的に小さな単位量製剤（ｕｎＩｔ　ｄｏｓｅ　ｐｒｅｐａｒａ ｔｉｏｎ　）中に含めることができることとなる。これらは、乾燥した粗製植物 物質（ｃｒｕｄｅ　ｖｅｇｅｔａｂｌｅ　ｇａｒｔｅｒ）を含む現在市販のもの より、優美で美味（ｅｌｅｇａｎｔ　ａｎｄ　ｐａｌａｔａｂｌｅ　）であると いう利点を有する。

驚くべきことに、本発明による抽出方法（ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｄ ｕｒｅ）を用いることにより、従来の研究で通常用いられた溶媒であると考えら れる石油スピリット（ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　５ｐｉｒｉｔ）を主要な抽出剤（ｐ ｒｉｍａｒｙ　ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ）として用いる場合に比べ、著しく多量の セスキテルペン　ラクトン　バルテノリドがタナセタムパルセニウムから抽出さ れることが見出された。加えて、溶媒としてエタノールを用いた場合、ナツシロ ギクのガソリン抽出物の主成分として以前に同定された樟脳（ｃａａｉｐｈｏｒ 　）が存在しないことも判明した。このことは、樟脳のエタノールに対する溶解 度が高いことを考えると極めて驚くべきことであり、医薬品における樟脳の刺激 性を考慮すれば、本発明の有利な特徴である。

ナツシロギクの使用に基づ〈従来の薬草治療法は、通常、該植物の葉を薬剤活性 のために用いることを勧めていた。従って、該植物の花のバルテノリド含量が、 葉のそれと同じか又は多い傾向があることを発見したことも、驚Ｘべきことであ った。反対に、該植物の茎組ＨＡ　（ｓｔａｌｋ　ｔｌｓｓｕｅ）がパルテノリ ドをほとんど含有しないことも見出された。

従って、セスキテルペン　ラクトン、特にパルテノリドの最大量を含むように計 画されたタナセタム　バルセニウムの第一抽出物は、出発材料として該植物の葉 と花を用いて調製することが好ましい。

タナセタム　バルセニウムの従来の抽出は、抗分泌活性及び鎮痙的に有効な活性 をもって存在する多くの化合物を同定した。セスキテルペン　ラクトン　バルセ ノリド（ゲルマフラノリド；　ｇｅｒｍａｃｒａｎｏｌ　Ｉｄｅ）は、タナセタ ム　パルセニウム中で最も多い凰を有する有効成分であると思われる。

バルテノリドの化学構造は、下記の通りである。

セスキテルペン　ラクトンを含む薬学的に活性な組成物は、タナセタム　バルセ ニウムから調製することができ、且つ植物エキス（ｐｌａｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔ 　）として単独で投与することができる。しかしながら、その薬学的効能及び通 俗性（ｐｏｐｕｌａｒａｙ）は、一般に、薬学的に許容しうる賦形剤（ｅｘｃｉ ｐｉｅｎｔ　）の添加により増大する。

第一抽出物、又は更に精製した抽出物に加えて、最終医薬組成物は、気管支拡張 剤ｂｒｏｎｃｈｏｄｉｌａｔｏｒｓ　（アドレナリン受容体刺激剤ａｄｒｅｎｏ ｃｅｐｔｏｒ　ｓｔｉｍｕｌａｎｔｓ。

抗ムスカリン様気管支拡張剤ａｎｔｉ−ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ　ｂｒｏｎｃｈｏ ｄ！１ａｔｏｒｓ、テオフィリンｔｈｅｏｐｈｙ　ｌ　ｌ　！ｎｅ　又は気管支 拡張複合製剤ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｂｒｏｎｃｈｏｄｉｌａｔｏｒ　ｐｒｅｐａｒ ａｔｉｏｎＳ）、抗ヒスタミン剤ａｎｔｉ−ｈｉｓｔａｍｉｎｅｓ　（プロメタ シンｐｒｏａｅｔｂａｚｉｎｅ　、トリメプラシンｔｒ１ｇ＋ｅｐｒａｚｌｎｅ 　、シメンヒドリネートｄｉｍｅｎｈｙｄｒｉｎａｔｅ　％クロルフェニルアミ ンｃｈｌｏｒｐｈｅｎｉｒａｍｉｎｅ　、シフリジンｃｙｃｌ　１ｚｉｎｅ、メ キタジンｍｅｑｕｉｔａｚｉｎｅｂアクリバスチンａｃｒ！ｖａｓｔｉｎｃｓア ステミゾールａｓｔｅｍｌｚｏｌｅ　、シンナリジンｃＩｎｎａｒｌｚｌｎｅ、 ロラタジンｌ０ｒａｔａＺｉ　ｎｅ又はチルフェナジンｔｅｒｆｅｎａｚｌｎｅ ）　、又は抗感染剤ａｎｔｉ−１ｎｆｅｃｔｌνｅ　ａｇｅｎｔｓ　（抗真菌剤 、抗ウィルス剤又は抗菌剤）等の他の成分を含んでいてもよい。

片頭痛治療のためには、上記セスキテルペン　ラクトンに加えて、組成物は、既 知の抗片頭痛剤ａｎｔｉ−ｍｉｇｒａｉｎｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ　（ア スピリンａｓｐｉｒｉｎ、バラセタモルｐａｒａｃｅｔａｗｏｌ、エルゴシメン ｅｒｇｏｔａｍｉｎｅ　ｓジヒドロエルゴシメンｄｌｈｙｄｒｏｃｒｇｏｔａｍ ｌｎｅ、メトクロプラミドｍｅｔ、ｏｃｌｏｐｒａＩＩｌｄｅ　、粘液酸イソメ チブテンｉｓ。

５ｅｔｈｅｐｔｅｎｅ　５ｕｅａｔｅ　％クロニジン塩酸塩ｃｌｏｎｉｄｉｎｅ 　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｃ、メチセルギドｍｅｔｈｙｓｅｒｇｌｄｅ又はビ ゾチフエンｐｉｚｏｔｌｒｅｎ）　、他の鎮痛剤（非オピオイド（ｎｏｎ−ｏｐ ｏｌｄ　）鎮痛剤、オピオイド（ｏｐｏｌｄ　）鎮痛剤又は鎮痛複合製剤ｃｏｉ ｐｏｕｎｄ　ａｎａｌｇｅｓｉｃ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ）　、及び／又は 制吐剤（ヒオスシンｈｙｏｓｃｉｎｅ　、抗ヒスタミン剤、フェノチアジンｐｈ ｅｎｏｔｈｌａｚｌｎｅｓ　ｓメトクロプラミド又はクロムペリトンｃｌｏ園ｐ ｅｒｉｄｏｎｅ　）を含んでいてもよい。

上記した化合物のいずれかを含む組成物は、更に、他の抗関節炎剤（ａｎｔｌ− ａｒｔｈｒｌｔｌｃ　ａｇｅｎｔｓ　）　：非ステロイド系抗炎症剤（ａｎＨ− ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｄｒｕｇｓ　）　、例えば、ナプロキセン（ｎａｐ ｒｏｘｅｎ）　、フェンブフェン（ｒｅｎｂｕｆｅｎ）　、ケトプロフェン（ｋ ｅＬｏｐｒｏｆｅｎ）　、アスピリン及び他のサリチル酸塩ないしサリチル酸エ ステル（ｓａｌｉｃｙｌａｔｅｓ　）　；全身性コルチコステロイド（ｓｙｓｔ ｅｍｌｃ　ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄｓ）及びコルチコトロピン（ｃｏｒｔ ｌｃｏｔｒｏｐｈｌｎ）　、例えば、プレドニゾロン（ｐｒｅｄｎｌｓｏｌ。

ｎｅ）　；金（ｇｏｌｄ）　、ペニシラミン（ｐｅｎｌｃｌｌｌａｗｌｎｅ　） 　、抗マラリア剤（ａｎｔｉ−ｍａ１２ｒｉａｌｓ）　、免疫抑制剤（Ｉｍｓｕ ｎｏ−ｓｕｐｐｒｅｓｓａｎｔｓ　）及びスルファサラジン（ｓｕｌｐｈａｓａ ｌａｚｌｎｅ）を含んでいてもよい。

任意の形態のセスキテルペンラクトン含有抽出物は、経口的、直腸的、非経口的 （ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ　Ｉｙ）あるいは吸入（ｂｙ　１ｎｈａｌａｔｉｏｎ　 ）による投与のための錠剤、カプセル又は液体懸濁液（ｌｉｑｕｉｄ　５ｕｓｐ ｅｎｓｉｏｎ　）の形で調製することができる。

本発明の１つの一般的実施態様において、乾燥粉砕（ｃｏｍｍｌｎｕｔｅｄ）ナ ツシロギク１ｋｇの抽出は、エタノール５．３及び３リツトルの３種抽出液（ｔ ｈｒｅｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ）により達成することができる。次いで、合わせた 抽出液（ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　）は、パルテノリドがその溶解 度の限界を超えることなく少なくとも２０倍（ｔｗｅｎｔｙ　ｔｌｓｅ　）に該 抽出液を濃縮するために、蒸留することができる。

以下、具体的な実施例により本発明を更に詳細に説明する。

ナツシロギクｆｅｖｅｒｆｅｖ　（４９０ｇ）を、室温に維持されたウィンチェ スタボトル（Ｗｌｎｃｈｅｓｔｅｒ　ｂｏｔｔｌｅ　）中でエーテル２リツトル で５日間抽出した。温度を４０℃未満（ｂｅｌｏｗ　）に維持しながら、エーテ ル液を注ぎ出し、ろ過し、減圧下Ｏｎ　ｖａｃｕｏ）で蒸発させた。残留物を部 分的にカラムクロマトグラフィーにより精製してパルテノリド（２，７ｇ）を得 たが、これは薄層クロマトグラフィーによる分析で純粋ではなか７た。更に、４ ０−６０℃ガソリン（ｐｅｔｒｏｌ）−酢酸エチルの３＝２混合液で溶離するク ロマトグラフィーで、１．４５ｇの物質（薄層クロマトグラム上で実質的に１ス ポツト）を得た。この物質（１，４５ｇ）をエーテル（約２５ｍ１）に溶解し、 ろ過した後、その体積を１０ｍ１まで減量させた。この溶液を一晩冷却した後、 分離した結晶をろ別し、冷エーテル（約１０ｍ１）で洗浄した。バルテノリドの 収量は０．７４ｇ　（僅かに緑色）、■、ｐ、は１１２〜１１３℃（文献１１６ ．５〜１１７℃）であった。エーテル又は４０−６０℃ガソリン−酢酸エチルの ３；２混合液を用いたシルカゲルクロマトグラム上で、この試料のＲｆはバルテ ノリドと同一であった。

このろ液から溶媒を除去すると残留物０．６０ｇが残った。

ナツシロギク（４９６ｇ）を、アセトニトリル２リツトルで実施例１で記載した ように抽出した。溶媒を除去すると残留物３０．０ｇが残った。これを、溶離剤 として４０−６０℃ガソリン−酢酸エチルの３：２混合液を用いてクロマトグラ フイー処理した。生成物（１，７ｇ）をエーテル（１５ｍｌ）から結晶化して、 僅かに着色したパルテノリド（１，０２ｇ）を得た。エーテル（１５ｍｌ）から の再結晶により、無色の結晶（０，７２ｇ）を得た。■、ｐ、は１１３〜１１４ ℃であった。

実施例３ 乾燥・粉砕したナツシロギクの葉の試料から種々の溶媒を用いて抽出したバルテ ノリドの量を、高感度（ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　）高圧液体クロマトグラフィー分 を斤手順（ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）を用いてめた。

結果を下記の表１に示す。

ナツシロギクの種々の組織（ｔｉｓｓｕｅ）部分（１ｇ）のメタノール抽出液の パルテノリド含量を、高感度高圧液体クロマトグラフィー分析手順を用いて評砺 した。

結果を下記の表２に示す。

轟Ｚ ナツシロギクの種々の組織部分１ｇからメタノールに抽出されたパルテノリド量 補正書の写しく翻訳文）提出書 （特許法第１８４条の７第１項） 平成５年７月８日

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. １．タナセタム　パルセニウムのセスキテルペン　ラクトン含有抽出物の調製方 法であって、タナセタム　パルセニウムを極性有機溶媒で処理することを含む方 法。
2. ２．前記極性有機溶媒が、アセトニトリル、メタノール、イソプロパノール、エ ーテル、酢酸エチル、アセトン又はこれらの混合液である請求項１記載の方法。
3. ３．前記極性有機溶媒がエタノールである請求項１記載の方法。
4. ４．前記セスキテルベンラクトンが、微分抽出（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｅ ｘｔｒａｃｔｉｏｎ）により精製される前記請求項（ａｎｙ　ｐｒｅｃｅｄｉｎ ｇ　ｃｌａｉｍ）のいずれかに記載の方法。
5. ５．処理されるタナセタム　パルセニウム組織が、花、葉、又はこれらの組み合 わせ（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）である請求項１ないし４のいずれかに記載の方 法。
6. ６．抽出されたセスキテルペンラクトンが、パルテノリドである前記請求項のい ずれか（ａｎｙ　ｐｒｅｃｅｄｉｎｇ　ｃｌａｉｍ）に記載の方法。
7. ７．前記請求項のいずれか（ａｎｙ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｅｃｅｄｉｎ ｇ　ｃｌａｉｍｓ）に記載の方法により調製された、タナセタム　バルセニウム のセスキテルペン　ラクトン含有抽出物。
8. ８．請求項７記載の植物タナセタム　パルセニウムからのセスキテルベン　ラク トン含有抽出物を含む薬学的に活性な組成物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌ ｙ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）。
9. ９．薬学的に許容しうる賦形剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）を更に含有する請求項８ 記載の組成物。
10. １０．既知の気管支拡張剤、抗ヒスタミン剤又は抗感染剤の少なくとも１種を更 に含有する請求項８又は請求項９記載の組成物。
11. １１．既知の抗片頭痛成分、鎮痛剤又は制吐剤の少なくとも１種を更に含有する 請求項８ないし１０のいずれかに記載の組成物。
12. １２．抗関節炎剤の少なくとも１種を更に含有する請求項８ないし１１のいずれ かに記載の組成物。
13. １３．錠剤、カプセル又は液体の溶液もしくは懸濁液の剤形である請求項８ない し１２のいずれかに記載の組成物。
14. １４．経口的、直腸的、非経口的又は吸入による投与に適した請求項８ないし１ ２のいずれかに記載の組成物。
15. １５．実質的に実施例のいずれかについて前述された、タナセクム　バルセニウ ムのセスキテルペン　ラクトン含有抽出物の製造方法。