JPH0650970A - 赤血球を球状体化する試薬混合物 - Google Patents

赤血球を球状体化する試薬混合物

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JPH0650970A
JPH0650970A JP2417972A JP41797290A JPH0650970A JP H0650970 A JPH0650970 A JP H0650970A JP 2417972 A JP2417972 A JP 2417972A JP 41797290 A JP41797290 A JP 41797290A JP H0650970 A JPH0650970 A JP H0650970A
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 正確で精密な細胞の体積測定を行うために、
体積変化を起させずに全血液の赤血球を球状体化するか
または球状体化し固定する方法を提供する。 【構成】 本試薬混合物は、等張性水溶液と、球状体化
剤と、球状体化剤と可逆的に結合するタンパク質とを含
み、タンパク質と球状体化剤との重量比を約２０：１〜
約７０：１とし、球状体化剤の濃度を試料中で約２ｍｇ
〜約１０ｍｇ／１００ｍｌとする。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般的に言えば、正確でそして精密な細胞の体
積測定を行うために、体積変化を起さないで全血液の赤
血球を球状体化するかまたは球状体化しそして固定する
方法に関する。さらに詳しく言えば、この方法は１連の
希釈工程を含んでいる。この工程により、外来性または
内因性のタンパク質と球状体化剤とをタンパク質／球状
体化剤の重量比が全試料の体積に基づいて約２０：１〜
約７０：１の量で添加し、そして最終試料中の球状体化
剤の濃度は約２ｍｇ／１００ｍｌ〜約１０ｍｇ／１００
ｍｌになる。個個の赤色細胞（赤血球）からの光散乱の
測定量を利用して赤色細胞（赤血球）の個個の体積およ
びその平均体積を決定する方法は、以下の２種類の誤差
の影響を受ける。
１． 生来の人間の赤血球は両凹の円板であるので、特
定の立体角内で散乱する光の量は入射光束に対する細胞
の方向に伴つて変動する。
２． 操作の間すなわち希釈しそしてポンプで送る間
に、細胞の形が１部には血液の採集時と測定時との間の
時間差により、そして１部には希釈された血液試料の組
成によつて変化することがある。
上記の点に関する詳細についてはＥｒｉｃ Ｐｏｎｄｅ
ｒ著『溶血反応および関連現象（Ｈｅｍｏｌｙｓｉｓ
ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｐｈｅｎｏｍｅｒａ）』第Ｉ
Ｉ章第１０〜４９頁（１９４８）およびＢｅｒｎａｒｄ
Ｄｅｕｔｉｃｋｅ『Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ
ａｎｄ Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｃｏｎｃ
ａｖｅ Ｓｈａｐｅ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｅｒｙｔｈｒ
ｏｃｙｔｅｓＩｎｄｕｃｅｄ ｂｙ Ａｍｐｈｉｐｈｉ
ｌｉｃ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ
Ｉｏｎｉｃ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ 』 Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｃａ Ｅｔ． Ｂｉｏｐｈｙ． Ａｃｔａ，第
４９４〜５００頁（１９６８）を参照されたい。本発明
はこれらの誤差の原因を両方とも取り除き、人間の赤血
球の体積測定の広く改善された方法を可能にするもので
ある。例えば上記のＰｏｎｄｅｒの文献に記載されてい
るとおり、赤血球を等張性溶液内でその体積を変えるこ
となく球状体化できることはよく知られている。完全に
球状体化した細胞から散乱する光は光束の方向に対して
は変化しないので、前記の第１の誤差は消去される。し
かしながらそのように調製したものが不安定であること
は周知である。すなわち赤血球は球状体化後のいろいろ
の段階（それは球状体化剤の選択および個個の血液試料
の性質によつて左右される）で溶解してしまう。本発明
者は、球状体化剤（代表的には洗浄剤の性質をもつた物
質）の絶対濃度およびタンパク質（これは等張性溶液中
の任意所望の希釈度の内因性のものまたは外から加えた
もののどちらでもよい）に対する球状体化剤の重量比を
制御することによつて、球状体化状態を長期に亘つて安
定に保つことができることを見い出した。前記の制御は
処理工程中の形状の一貫性を確保する助けとなりそして
前記の第２の誤差を最小にする。本発明方法は一般に以
下の２つの方法で実施することができる。
Ａ．球状体化剤（洗浄剤）とアルブミンとを所要濃度で
含有する等張性溶液中に血清試料を（代表的には約１／
１０００に）希釈するか、または Ｂ．血液試科そのものからの内因性の血清アルブミン
（血漿タンパク質）に対する球状体化剤の割合が正しい
割合となる希釈度が与えられたときに、球状体化が起こ
るのにちようど充分な濃度で球状体化剤を含んでいる等
張性溶液のある量で血清試料を希釈する。次に、得られ
る試料を、固定剤の等張性溶液を添加することによつて
同時におよび（または）連続的に固定しそしてさらに希
釈して球状体化細胞を硬化し、そしてもし前記の処理を
行わなければ球状体化細胞についてその形状または大き
さを変化させまたはそれらに含まれているヘモグロビン
を溶解して失なわせるような工程に対しても完全に不活
性なものにしてしまう。本発明は前記特許請求の範囲に
も記載してあるとおり、試料中の哺乳類の赤血球を処理
し、赤血球の体積を測定するにあたつて電気光学的に有
効に測定することのできる試料を提供する方法に関する
ものであり、この方法は抗凝固性の全血液試料を球状体
化剤含有等張性溶液と結合し、そしてこうして得られる
試料のアリコート（部分試料）をタンパク質−球状体化
剤含有等張性溶液で希釈することから成る。最終試料中
のタンパク質／球状体化剤の重量比は約２０：１〜約７
０：１好ましくは約５０：１であり、そして球状体化剤
の濃度は約２ｍｇ／１００ｍｌ〜約１０ｍｇ／１００ｍ
ｌ好ましくは約３ｍｇ／１００ｍｌである。全血液試料
は希釈剤としての塩類で試料の約５０容量％希釈度に予
備希釈し、粘度を減少しておくことが好ましい。血液試
料の粘度変動から起きる、ポンプ操作による体積的な誤
差の減少が保証されるからである。その次の希釈工程に
よつて体積比で約１：１０００の最終希釈となるが、こ
の希釈度は１個より多い細胞が電気光学式検出器の入射
光束を通過し、検出器の測定時間内に窓を通る確率の非
常に低いものである。本発明方法に使う洗浄剤は硫酸ア
ルキル（このアルキル基は炭素原子１０〜１６個を含
む）のアルカリ金属塩が好ましく、ラウリル硫酸ナトリ
ウムが最も好ましい。本発明方法に使うタンパク質は好
ましくは血清アルブミンであり、それは外部から加え
る。本発明のその他の好ましい方法は、タンパク質／球
状体化剤による希釈工程の代りに、アリコート試料を固
定剤溶液好ましくは等張性のグルタルアルデヒド含有塩
類溶液で処理すること以外は上記に記載した方法と同様
に行うものである。この方法において必要なタンパク質
は試料中において内因性的に血漿タンパク質として提供
される。本発明の別の好ましい態様は、前記特許請求の
範囲にも記載されている通り、試料中の赤血球を球状体
化するための試薬である。すなわちタンパク質の球状体
化剤に対する重量比が約２０：１〜約７０：１であり、
混成試料中における球状体化剤の全濃度が約２ｍｇ／１
００ｍｌ〜約１０ｍｇ／１００ｍｌであるタンパク質−
球状体化剤混合物から成る、試料中の赤血球の球状体化
剤である。本発明を更に詳細に説明すれば、本発明は抗
凝固性全血液試料中の哺乳動物の赤血球を球状体化する
方法を目的としている。この方法はタンパク質と球状体
化剤とを特定の重量比でそしてある最終の球状体化剤濃
度で使うことを含んでいる。タンパク質が不在の場合に
は、球状体化剤添加後の溶液中の遊離の球状体化剤の量
は赤血球の濃度に依存することになる（上記Ｐｏｎｄｅ
ｒの文献参照）。従つて、正常な血液カウントに対して
決定した最適の球状体化剤濃度をもつ試薬を使うと、球
状体化の度合いは、溶液の単位体積当りの赤血球カウン
トが高い血液においては不完全となり、または非常に低
い赤血球カウントのものにおいては溶解に導くこともあ
る。タンパク質例えば血清アルブミンは球状体化剤と可
逆的に結合しそしてそれゆえに赤血球カウントにかかわ
りなく、球状体化剤の最適範囲における有効濃度を緩衝
するのに使うことができる。球状体化剤の好ましい濃度
は、試料をある特定の希釈状態においてタンパク質例え
ばアルブミンまたは血漿タンパク質で緩衝したときに丁
度球状体化を起こすのに充分な量である。このタンパク
アルブミンは次の２つの方法のいずれかによつて供給す
ることができる。血清試料中において血漿タンパク質と
して内因性的に供給するかまたは外部から添加するかで
ある。本発明の好ましい態様においては、この方法は予
備希釈した血液試料を等張性球状体化剤−塩類溶液と結
合し、それから次にそのアリコートをタンパク質−球状
体化剤塩類溶液で処理することを含んでいる。予備希釈
工程は好ましくは適当な等張性希釈剤例えば塩類溶液で
血清試料を約５０容積％に希釈することによつて実施す
る。生成する予備希釈された試料は球状体化剤（本明細
書においてはこれを洗浄剤と呼ぶことがある）を含む等
張性溶液と結合する。代表的な第１の希釈は試料の５
０：１希釈液を作るものである。上記試料のアリコート
をタンパク質−球状体化剤溶液で処理することによつて
更に希釈し、試料の約１０００：１の希釈液を得る。生
成する試料は光散乱測定に対して適当な濃度で、球状体
化しそして安定化した赤血球を含有している。流動式血
球計数器（ｆｌｏｗ ｃｅｌｌ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ）
を使つてこのような光散乱測定を行う場合には、個個の
細胞体積ならびに細胞の数を決定することができる。従
つてその平均体積も計算することができる。本発明方法
において臨界的な意味をもつ特徴としては、タンパク質
／球状体化剤の重量比および球状体化剤の濃度が含まれ
る。これらのパラメーターをある限度内に規制すること
によつて、球状体化工程は効果的に完遂されそして分析
結果は高い信頼性をもつ。本明細書に開示した方法にお
いて、タンパク質／球状体化剤の重量比は好ましくは約
２０：１〜約７０：１最も好ましくは５０：１の比率で
あることがわかつた。球状体化剤の最終濃度は、約２ｍ
ｇ／１００ｍｌ〜約１０ｍｇ／１００ｍｌの濃度が非常
に好適であり、特に３ｍｇ／１００ｍｌの濃度は最も好
ましい。外部から供給するタンパク質は好ましくは血清
アルブミンである。その他の使用可能なタンパク質には
牛、人および卵のアルブミンが含まれる。本発明の第２
の方法においては、タンパク質／球状体化剤の第２希釈
工程を等張性の固定剤溶液による処理工程と取替える。
この系では、第１の希釈に対するタンパク質は血清試料
中において内因性的形で血漿タンパク質として供給され
る。球状体化剤の等張性溶液は、内因性血漿タンパク質
／球状体化剤の比率および球状体化剤の濃度を好ましい
範囲内にもたらすのに充分な体積で加える。好ましい固
定剤はグルタルアルデヒドであり、それは最終のグルタ
ルアルデヒドの濃度が０．１重量％〜０．４重量％を与
えるような量で使う。等張性の固定剤溶液は塩類または
塩類−球状体化剤混合物とから適当に調製する。グルタ
ルアルデヒドは赤血球を非常に速やかに固定するので、
固定剤添加工程より先では球状体化剤濃度を最適に緩衝
することはほとんど臨界的意味をもたないものと考えら
れる。含有される赤血球が固定されるや否や、それは完
全に臨界的意味をもつところではなくなる。前記のいず
れの方法に使われるにしろ、球状体化剤として適当なも
のは、そのアルキル基が炭素原子１０〜１６個を含む硫
酸アルキルのアルカリ金属（ナトリウム、カリウム、リ
チウム、セシウムまたはルビジウム）塩である。ラウリ
ル硫酸アルカリ金属塩が好ましく、そしてラウリル硫酸
ナトリウム塩が最も好ましいものである。その他のこれ
らの方法に使うことができる適当な球状体化剤は脂肪
酸、りん脂質等を含む。なお、通常『球状体化剤』と称
されているもの（例えば粗製の卵レシチン：上記Ｐｏｎ
ｄｅｒの文献参照）の中には、実際には少量の不純物と
して球状体化剤を含んでいるに過ぎないものがあること
に注意されたい。例えば純粋なレシチンは球状体化剤で
はない。論議されている重量濃度は任意の不純『球状体
化剤』における活性原理についてであり、粗製の重量濃
度ではないことを理解されたい。前記の両方の方法は自
動化された系におけるように連続的にかまたは不連続な
または各個別の方法で行うことができる。次に添付図面
を参照しながら、本発明に従つて処理した抗凝固性血液
試料中の個個の赤血球の体積を測定する非連続系を説明
する。しかしながら、例えば米国特許第３，７４０，１
４３号（テクニコン、インストルメンツ、コーポレーシ
ョンに譲渡された）明細書に記載されているような連続
法に基いて、連続的な抗凝固性血液試料中の赤血球の体
積を測定することは可能であり、その測定法も本発明の
範囲内に含まれる。前記の系はポンプ管３，５，７，９
および１０を含むぜん動ポンプ１から成る。容易に理解
できるように、前記ポンプ管の内径の比はこの系に導入
する試料と各反応剤との割合を決定する。アスピレーシ
ョン・プルーブ〔Ｐｒｏｂｅ〕１３は導管１４に沿つて
ポンプ管５の入口に連結し、ポンプ管５の出口は接合部
１５に連結している。プルーブ１３は、試料容器１９に
含まれる抗凝固性血液試料１７中に浸すことかできるよ
うにしてある。プルーブ１３は米国特許第３，７４０，
１４３号明細書に記載されているように、連続法に基い
て、連続試料の赤血球体積の測定を行うために、順次に
連続的試料容器中へ浸すことができるようにしてあるこ
とができる。またポンプ管３の入口端は、試料１７の第
１希釈を行うための適当な希釈剤の源２１に連結してい
る。ポンプ１を操作すると、希釈剤がポンプ管３を通つ
て導管１４中の接合部２３に運ばれ、プルーブ１３から
くる試料と混合されそして試料を希釈する。『エアバー
（ａｉｒ−ｂａｒ）』構造２６〔これは例えばテクニコ
ン、インストルメンツ、コーポレーションに譲渡されて
いる米国特許第３，３０６，２２９号明細書に記載のも
のであり、その操作は第１図中の破線によつて示すよう
にポンプ１の位相に同調している〕はエアライン２５を
通じて周期的に作動して分節（ｏｃｃｌｕｄｉｎｇ）空
気セグメントを導管１４へ導入する。このような『試料
内』空気セグメントの存在は、前記の参考特許明細書に
記載されているように、試料と反応剤との系中での適当
な比率（および連続的な試料の間の効果的な洗浄）を確
保する。同時に、球状体化剤を含む等張性溶液をその源
２７からポンプ管７に沿つて接合部１５に通し、ここで
前記溶液は、ポンプ管５に沿つて運ばれる希釈された試
料と混合し、試料１７の第２の希釈を行う。この試料を
接合部１５から混合コイル２９に通して充分に混合し、
そして次に導管３１に沿つてリサンプリング管継手３３
に流す。管継手３３は廃液出口３５とリサンプリング出
口３７とを含み、後者はポンプ管９の入口に連結してい
る。試料は出口３７からポンプ管９に沿つて接合部３９
に到る。管継手３３中に導入された過剰の試料および
『試料内』空気セグメントは廃液出口３５から捨てる。
第２の『エアバー』構造３８は『試料内』空気セグメン
トをエアライン３６から、希釈された試料の流れの中へ
再導入する。ポンプ管１０の入口は固定剤の源４１に連
結している。ポンプ管１０の出口は接合部３９に連結し
ており、そこで固定剤と２回希釈された試料とを混合
し、そして混合コイル４３に通す。混合コイル４３の出
口はリサンプリング管継手４５に連結しており、この管
継手４５は廃液出口４７およびリサンプリング出口４９
を含み、この後者は第２のぜん動ポンプ５１の単一ポン
プ管の入口に連結している。試料は出口４９からポンプ
５１を経由して上記の米国特許第３，７４０，１４３号
明細書に記載の型のシース流（ｓｈｅａｔｈ−ｓｔｒｅ
ａｍ）粒子計数器５３に到る。過剰の試料および『試料
内』空気セグメントは廃液出口４７に沿つて廃液に送
る。計数器４５においては、処理された血液試料中の赤
血球は、連続的に制御しながら流し、個別に計数しそし
てその体積を測定する。処理された血液試料はその後廃
液へ送る。本発明による赤血球の球状体化により、体積
の測定値は計数器５３を通つて赤血球が進行する時の赤
血球の方位に無関係であることを保証する。先行技術に
おいては、赤血球を適当に球状体化していないので、粒
子計数器を通して進行する赤血球のランダムな方位がし
ばしば不精確な体積測定結果を生じた。次に実施例を示
して本発明をさらに具体的に説明する。
例 １ 抗凝固性の全血液試料（０．３７ｍｌ）を等張性の塩類
溶液（０．２３ｍｌ）で予備希釈する。得られた試料の
アリコート（０．１６ｍｌ）を、ラウリル硫酸ナトリウ
ム（３ｍｇ／１００ｍｌ）を含む等張性塩類溶液（４．
２ｍｌ）と結合する。次に、こうして得られた希釈され
た試料のアリコート（０．１６ｍｌ）を、牛の血清のア
ルブミン（０．１％）およびラウリル硫酸ナトリウム
（３ｍｇ／１００ｍｌ）を含む等張性の塩類溶液４．０
ｍｌで処理する。最終試料を流動セル（ｆｌｏｗ ｃｅ
ｌｌ）中におきそして電気光学的に測定する。赤血球の
計数値と赤血球の体積を記録する。
例 ２ 抗凝固性全血液試料（０．３７ｍｌ）を等張性の塩類溶
液（０．２３ｍｌ）で予備希釈する。得られる試料のア
リコート（０．１６ｍｌ）を、ラウリル硫酸ナトリウム
（３ｍｇ／１００ｍｌ）を含む等張性塩類溶液４．２ｍ
ｌと結合する。こうして得られる希釈試科のアリコート
（０．１６ｍｌ）を次にグルタルアルデヒド（０．２
％）とラウリル硫酸ナトリウム（１ｍｇ／１００ｍｌ）
とを含む等張性の塩類溶液４．０ｍｌで処理する。この
最終試料を流動セル中におき、そして電気光学的に測定
する。赤血球の計数値と赤血球の体積を記録する。本明
細書中に記載しそしてその特許請求の範囲中に定義した
本発明の精神と範囲とを逸脱しないかぎり、種種の発明
の変形が可能なことは、当業者には理解されるべきとこ
ろである。
【図面の簡単な説明】
第１図は、本発明の１つの具体例により、血清試料を処
理して最終的に電気光学的に測定する連続系または装置
のフローシートである。

Claims (31)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】等張性水溶液と、球状体化剤と、球状体化
    剤と可逆的に結合するタンパク質とを含んで成り、タン
    パク質と球状体化剤との重量比が約２０：１〜約７０：
    １であり、球状体化剤の濃度が試料中で約２ｍｇ〜約１
    ０ｍｇ／１００ｍｌである、全血液試料中の赤血球を球
    状体化する試薬混合物。
  2. 【請求項２】球状体化剤として洗浄剤を含む請求項１に
    記載の試薬混合物。
  3. 【請求項３】球状体化剤としてリン脂質を含む請求項１
    に記載の試薬混合物。
  4. 【請求項４】球状体化剤として脂肪酸を含む請求項１に
    記載の試薬混合物。
  5. 【請求項５】固定剤をさらに含む請求項１〜４のいずれ
    かに記載の試薬混合物。
  6. 【請求項６】（イ）全血試料のアリコートと、 （ロ）（ｉ）等張水溶液と、（ｉｉ）洗浄剤、リン脂質
    及び脂肪酸から成る群から選んだ球状体化剤と、（ｉｉ
    ｉ）球状体化剤と可逆的に結合するタンパク質とを含ん
    で成る試薬と、を含んで成り、タンパク質と球状体化剤
    との重量比が約２０：１〜約７０：１であり、球状体化
    剤の濃度がアリコート中で約２ｍｇ〜約１０ｍｇ／ｍｌ
    である。サイトメータに使用するための組成物。
  7. 【請求項７】固定剤をさらに含む請求項６に記載の組成
    物。
  8. 【請求項８】固定剤として最終グルタルアルデヒド濃度
    ０．１〜０．４重量％となる量のグルタルアルデヒドを
    含む請求項７に記載の組成物。
  9. 【請求項９】タンパク質として血清アルブミンを含む請
    求項６に記載の組成物。
  10. 【請求項１０】球状体化剤として硫酸アルキルのアルカ
    リ金属塩を含む請求項６に記載の組成物。
  11. 【請求項１１】アルカリ金属塩としてラウリル硫酸のア
    ルカリ金属塩を含む請求項１０に記載の組成物。
  12. 【請求項１２】ラウリル硫酸のアルカリ金属塩としてラ
    ウリル硫酸ナトリウムを含む請求項１１に記載の組成
    物。
  13. 【請求項１３】球状体化剤としてアルキル基が炭素原子
    １０〜１６個を含む硫酸アルキルのアルカリ金属塩を含
    む請求項６に記載の組成物。
  14. 【請求項１４】硫酸アルキル塩としてラウリル硫酸のア
    ルカリ金属塩を含む請求項１３に記載の組成物。
  15. 【請求項１５】ラウリル硫酸アルカリ金属塩としてラウ
    リル硫酸ナトリウムを含む請求項１４に記載の組成物。
  16. 【請求項１６】球状体化剤の濃度が約３ｍｇ／１００ｍ
    ｌである請求項６に記載の組成物。
  17. 【請求項１７】タンパク質と球状体化剤とをタンパク質
    ／球状体化剤重量比約５０：１の量で含む請求項６に記
    載の組成物。
  18. 【請求項１８】タンパク質としてウシ血清アルブミン、
    ヒトアルブミン及び卵アルブミンから成る群から選んだ
    ものを含む請求項６に記載の組成物。
  19. 【請求項１９】タンパク質として全血試料中の内因性の
    ものを含む請求項６に記載の組成物。
  20. 【請求項２０】タンパク質として血清アルブミンを含む
    請求項１に記載の試薬混合物。
  21. 【請求項２１】球状体化剤として硫酸アルキルのアルカ
    リ金属塩を含む請求項１に記載の試薬混合物。
  22. 【請求項２２】球状体化剤としてアルキル基が炭素原子
    １０〜１６個を含む硫酸アルキルのアルカリ金属塩を含
    む請求項１に記載の試薬混合物。
  23. 【請求項２３】球状体化剤の濃度が約３ｍｇ／１００ｍ
    ｌである請求項１に記載の試薬混合物。
  24. 【請求項２４】タンパク質と球状体化剤とをタンパク質
    ／球状体化剤重量比約５０：１の量で含む請求項１に記
    載の試薬混合物。
  25. 【請求項２５】タンパク質としてウシ血清アルブミン、
    ヒトアルブミン及び卵アルブミンから成る群から選んだ
    ものを含む請求項１に記載の試薬混合物。
  26. 【請求項２６】固定剤として最終グルタルアルデヒド濃
    度０．１〜０．４重量％となる量のグルタルアルデヒド
    を含む請求項５に記載の試薬混合物。
  27. 【請求項２７】タンパク質として全血試料中の内因性の
    ものを含む請求項１に記載の試薬混合物。
  28. 【請求項２８】硫酸アルキル塩としてラウリル硫酸のア
    ルカリ金属塩を含む請求項２１に記載の試薬混合物。
  29. 【請求項２９】ラウリル硫酸のアルカリ金属塩としてラ
    ウリル硫酸ナトリウムを含む請求項２８に記載の試薬混
    合物。
  30. 【請求項３０】硫酸アルキル塩としてラウリル硫酸のア
    ルカリ金属塩を含む請求項２２に記載の試薬混合物。
  31. 【請求項３１】ラウリル硫酸のアルカリ金属塩としてラ
    ウリル硫酸ナトリウムを含む請求項３０に記載の試薬混
    合物。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5845954A (en) * 1996-06-25 1998-12-08 Toyota Technical Center, U.S.A., Inc. Glove box assembly including glove box that is positionable in a partially open position

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4412004A (en) * 1981-06-26 1983-10-25 Technicon Instruments Corporation Method for treating red blood cells to effect sphering and reagent therefor
US4528274A (en) * 1982-07-06 1985-07-09 Coulter Electronics, Inc. Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes
US4579824A (en) * 1983-05-18 1986-04-01 Louderback Allan Lee Hematology control
US4545391A (en) * 1983-05-26 1985-10-08 Brown & Williamson Tobacco Corporation Cigarette filter
US4575490A (en) * 1984-02-29 1986-03-11 Technicon Instruments Corporation One step method for sphering and fixing whole blood erythrocytes
US4847204A (en) * 1984-05-24 1989-07-11 Southeast Vetlab, Inc. Calibrator composition and method of producing and using same for veterinary applications
JPS638233Y2 (ja) * 1985-09-17 1988-03-11
US4731330A (en) * 1986-07-01 1988-03-15 Biotrack, Inc. Whole blood control sample
US5008201A (en) * 1990-05-24 1991-04-16 Streck Laboratories, Inc. Simulated human platelets from red blood cells
US5194909A (en) * 1990-12-04 1993-03-16 Tycko Daniel H Apparatus and method for measuring volume and hemoglobin concentration of red blood cells
AU680143B2 (en) * 1991-12-05 1997-07-17 Bayer Corporation Methods and reagent compositions for use in the identification and characterization of reticulocytes in whole blood
US5284771A (en) * 1991-12-05 1994-02-08 Miles Inc. Reagent compositions and their use in sphering cells
US5350695A (en) * 1991-12-05 1994-09-27 Miles Inc. Methods for the identification and characterization of reticulocytes in whole blood
US5360739A (en) * 1991-12-05 1994-11-01 Miles Inc. Methods for the identification and characterization of reticulocytes in whole blood
WO1994027146A1 (en) * 1993-05-14 1994-11-24 Coulter Corporation Reticulocyte analyzing method and apparatus utilizing light scatter techniques
US5733784A (en) * 1995-11-20 1998-03-31 Abbott Laboratories Reagent system and method for the differentiation and identification of reticulocytes
US5817519A (en) 1995-12-28 1998-10-06 Bayer Corporation Automated method and device for identifying and quantifying platelets and for determining platelet activation state using whole blood samples
US5830764A (en) * 1996-11-12 1998-11-03 Bayer Corporation Methods and reagent compositions for the determination of membrane surface area and sphericity of erythrocytes and reticulocytes for the diagnosis of red blood cell disorders
US6114173A (en) * 1997-04-03 2000-09-05 Bayer Corporation Fully automated method and reagent composition therefor for rapid identification and characterization of reticulocytes erythrocytes and platelets in whole blood
CA2428740A1 (en) 2002-05-20 2003-11-20 Bayer Corporation Automated method and reagent therefor for assaying body fluid samples such as cerebrospinal fluid (csf)
US7390662B2 (en) * 2005-11-09 2008-06-24 Beckman Coulter, Inc. Method and apparatus for performing platelet measurement
EP1875200A1 (en) 2005-04-29 2008-01-09 Honeywell International Inc. Cytometer cell counting and size measurement method
FR2917842A1 (fr) * 2007-06-19 2008-12-26 Commissariat Energie Atomique Dispositif et methode de comptage de particules elementaires emises par un fluide dans un conduit.
KR101651876B1 (ko) * 2014-03-06 2016-08-29 김상배 맨홀 뚜껑 지지틀 조립체
FR3121577B1 (fr) 2021-04-12 2024-03-08 Elitech Microbio Composition stabilisante, procédé utilisant ladite composition pour la fabrication de produits de contrôle d’analyses de prélèvements biologiques chez les mammifères, et produits de contrôle issus de la mise en œuvre dudit procédé

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE790042A (nl) * 1971-10-14 1973-04-13 Coulter Electronics Werkwijze voor het classifiseren van deeltjes
FR2195907A5 (ja) * 1972-08-10 1974-03-08 Meric Jean Paul
US3873467A (en) * 1974-02-01 1975-03-25 United Medical Lab Inc Hematologic reference control
US4160644A (en) * 1977-06-13 1979-07-10 Streck Laboratories, Inc. Platelet reference control and method of preparation
US4322313A (en) * 1980-10-02 1982-03-30 J. T. Baker Chemicals B.V. Stabilized multi-purpose blood diluent
US4412004A (en) * 1981-06-26 1983-10-25 Technicon Instruments Corporation Method for treating red blood cells to effect sphering and reagent therefor

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5845954A (en) * 1996-06-25 1998-12-08 Toyota Technical Center, U.S.A., Inc. Glove box assembly including glove box that is positionable in a partially open position

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