JPH06511468A

JPH06511468A - 改良したマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤

Info

Publication number: JPH06511468A
Application number: JP4501333A
Authority: JP
Inventors: ガラーディ，リチャード　イー．; グロベルニー，ダミアン; マッサー，ジョン　エイチ．
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1990-11-21
Filing date: 1991-11-21
Publication date: 1994-12-22
Anticipated expiration: 2010-08-30
Also published as: WO1992009563A1; CA2096225A1; EP0558635B1; EP0558635A1; DE69127630T2; JPH0780825B2; AU661289B2; DE69127630D1; ATE157963T1; US5239078A; EP0558635A4; AU9089791A; ES2109335T3

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】たマトリ・・クスメ　ロブロチアーゼ挟血公■ 本発明は、望ましくないコラゲナーゼ活性によって特徴づけられる疾病に対して有用な薬剤に関する。さらに詳細には、本発明は、融合または結合したビシクロアリール置換基を含有する置換または無置換のヒドロキシ尿素、およびリバースヒドロキサメートに関する。

！１艮亘構造タンパク質の分解を促進し、そして構造的にメタロプロテアーゼに関連した酵素が多数存在する。これらの酵素には、ヒト皮膚繊維芽細胞コラゲナーゼ、ヒト皮膚繊維芽細胞ゼラチナーゼ、ヒト痰コラゲナーゼおよびゼラチナーゼ、ならびにヒトストロメリシンが含まれる。これらは亜鉛含有メタロプロテアーゼであり、例えばアンジオテンシン変換酵素およびエンケファリナーゼである。

コラゲナーゼおよび関連酵素は、多数の疾病の症状を媒介するのに重要である。

この多数の疾病にはりウマチ様関節炎（Ｍｕｌｌｉｎｓ、Ｄ、Ｅ、ら、Ｂｉｏｃ旧ｖｒ　ｔｏ　ｈ　ｓ　Ａｃｔａ　（１９８３＞　６９５：１１７−２１４）；腫瘍細胞の転移（同誌、Ｂｒｏａｄｈｕｒｓｔ、　Ｍ、Ｊ、ら、ＥＰ出願第２７６４３６号（１９８７）、Ｒｅ１ｃｈ、　Ｒ，ら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ　（１９８８）　４８：３３０？−３３１２）：および種々の潰瘍の症状が含まれる。

潰瘍の症状は、アルカリ熱傷の結果として、または縁膜！Ｉ（ｈ剋止１東ａｓ　組■紅皿■）、アカントアメーバ（ｋ■且Ｕ坦韮）、単純ヘルペス（■■」口Ｌ ±虹）およびワクシニアウィルスによる感染の結果として角膜中に起こり得る。

その他の望ましくないマトリックスメタロプロテアーゼ活性によって特徴づけられる症状には、歯周病、表皮水庖症、および強膜炎が含まれる。

多数の疾病の症状におけるコラゲナーゼの関与に関して、この酵素の阻害剤を調製する試みがなされてきた。多数のこのような阻害剤が、Ｇ、Ｄ、　５ｅａｒｌｅによるＥＰ出願第１２６．９７４号（１９８４年公開）および第１５９．３９６号（１９８５年公開）に開示されている。これらの阻害剤は、アミノ窒素に結合した両方の置換基の２位にオキソ置換基を含有する２級アミンである。

本発明の化合物と、より関連のある化合物は、同じ＜Ｇ、Ｄ。

５ｅａｒｌｅによる、米国特許第４．５９９．３６１号および第４．７４３．５８７号に開示されている。これらの化合物は、化合物の一部として、チロシンまたは状溝体化したチロシン残基またはそれらの特定のアナログを含有する、ヒドロキシルアミンジペプチド誘導体である。

スルフヒドリル基と同時に、フェニルアラニンおよびトリプトファンのような芳香族アミノ酸である残基を含む他の化合物は、ＰＣＴ出願第願事３８１０６８９０号に開示されている。これらの化合物のいくつかのものは、ｌ−ブチル側鎖をも含む。

関連するプロテアーゼである、テルモリシンの阻害剤もまた開示されている。これらの阻害剤には、Ｎ１５ｈｉｎｏ、　Ｎ、ら、旦Ｂ泣■ｌ■」１（１９７９）　ｌ：４３４０−４３４７：　Ｎ１５ｈｉｎｏ、Ｎ、ら、ＬＡ１［虹■ｇ　（１９７ｇ）　ＬＺ：２８４６−２８５０に記載されているヒドロキサム化ペプチド誘導体が含まれる。トリプトファンもまた、種々の症状の治療剤として知られている。その症状のうちいくつかにはコラゲナーゼが関与し得る（例えば、ＪＰ第５７１０５８６２６号；米国特許第４．６９８．３４２号；第４．２９１．０４８号を参照）。さらに、細菌性コラゲナーゼの阻害剤は、米国特許第４．５５８，０３４号に開示されている。

現在、以下に記載した化合物が、マトリックスメタロプロテアーゼに対してより優れた阻害活性を有することがわかってきた。構造タンパク質を破壊し、本明細書中で「マトリックスメタロプロテアーゼ」と呼ばれるタンパク質のクラスによる望ましくない活性によって特徴づけられる症状および疾病の治療に利用できる試薬のレパートリ−に、本発明の化合物が加えられる。

ル匪囚皿丞本発明は、マトリックスメタロプロテアーゼの阻害剤として有用であり、そしてこれらの酵素の過剰な活性によって特徴づけられる症状の治療に効果的な新規化合物を提供する。

さらに、これらの化合物はマトリックスメタロプロテアーゼの精製、およびインビボでのマトリックスメタロプロテアーゼの増加レベルの検出に用い得る。これらの化合物は、置換または無置換のリバースヒドロキサメートまたはヒドロキシ尿素結合マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤中に、トリプトファンまたは他の融合したあるいは結合したビシクロ芳香族アミノ酸残基を取り込むことを利用する。

従って、１つの局面において、本発明は、下記式を有する化合物に関する：ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、モしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）である、あるいは隣接するＲ１およびＲ２はともにｐ＝３−５の−（ＣＨ２）ｒ−であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合、または、結合した無置換または置換のビシクロアリールメチレンであり；ｎは０．　１または２であり；ｍは０またはｌであり；そしてＸは、ｏＲ５またはＮＨＲ５であり１．：、、：テＲ５１１Ｈ，ｔり１１、置換または無置換のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはへテロ環状アミンの基であり；Ｙは、Ｒ’ＯＮＲ’Ｃ０ＮＲ’−１Ｒ’２ＮＣＯＮＯＲ７−１およびＲ’Ｃ０Ｎ０Ｒ７−からなる群から選択され、ここでそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７はＨｌ　低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基である。

さらに、本発明の範囲内には、−ＣＯＮＨ２−で示されるアミド結合が、−ＣＨ２ＮＲ３−１−ＣＨ２ＮＲ３−１−ＣＨ−ＣＲ３−１−ＣＯＣＨＲ３−１−ＣＨＯＨＣＨＲ３−１−ＮＲ３ＣＯ−１−ＣＦ−ＣＲ”−などのような改変された等配電子性の結合によって置き換えられる化合物が含まれる。

これらの化合物は少なくとも１つの哺乳類マトリックスメタロプロテアーゼを阻害する能力を有する。従って、他の局面において、本発明は、式１または２の化合物を含有する薬学的組成物、およびこれらの化合物またはその薬学的組成物を用いて、マトリックスメタロプロテアーゼ活性によって特徴づけられる疾病を治療する方法に関する。特に望ましくない場所にあるマトリックスメタロプロテアーゼは、本発明の化合物を、抗体またはそのフラグメントまたはレセプターリガンドのような、その場所のマーカーに特異的な標的用リガンドに結合させることによって、標的とされ得る。

本発明はまた、これらの化合物の独特の特性を利用する、種々の他の方法に関する。従って、もう１つの局面において、本発明は、固体支持体に結合した式ｌまたは２の化合物に関する。これらの結合体は、目的のマトリックスメタロプロテアーゼの精製のためのアフィニティー試薬として用いられ得る。

別の局面において、本発明は、標識に結合した式１または２の化合物に関する。

本発明の化合物は少なくとも１つのマトリックスメタロプロテアーゼと選択的に結合するため、イ゛ンビボまたはインビトロの細胞培養中の、異常に多量のマトリックスメタロプロテアーゼの存在を検出する際に、その標識が用いられ得る。

さらに、式１または２の化合物は担体と結合され得る。このことにより、これらの化合物を免疫プロトコルに使用し、本発明の化合物に特異的な免疫活性がある抗体を調製することができる。これらの抗体は、治療および阻害剤の投与量をモニターすることの両方に有用である。

さらに別の局面において、本発明は、式ｌまたは２の化合物をｇｇＡする方法、およびそれらの調製の新規な中間体に関する。

図面の簡単な説明図１は、クリニカルスコアリング法を用いた、本発明の阻害剤の角膜熱傷への影響を示すグラフである。

図２は、穿孔基準を用いた、本発明の化合物の角膜熱傷への対応する影響を示すグラフである。

Ｂ　るための≦ 本発明の化合物は、哺乳類のマトリックスメタロプロテアーゼの阻害剤である。

本明細書中の用語［＃乳類のマトリックスメタロプロテアーゼ」は、適当なアッセイ条件下において、コラーゲン、ゼラチン、またはプロテオグリカンの分解を触媒し得る、哺乳類源中に見られる任意の酵素を意味する。

適切なアッセイ条件は、例えば、Ｃａｖｓｔｏｎら、組紅」泣吐■（１９７９）　９９：３４０−３４５の手順に言及している米国特許第４，７４３゜５８７号に見られる。合成基質の使用は、Ｗｅｉｎｇａｒｔｅｎ、■、ら、旦匡吐惺１薗ね１ルｓ　Ｃｏ１ｎ　（１９８４）　１３９：１１８４−１１８７に記載されている。これらの構造タンパク質の分解を分析するために、もちろんすべての標準的な方法が用いられる。本発明の明細書中で言及されているマトリックスメタロプロテアーゼ酵素は、すべて亜鉛含有プロテアーゼであり、その構造は、例えばヒトストロメリシンまたは皮膚繊維芽細胞コラゲナーゼと類似している。

マトリックスメタロプロテアーゼ活性を阻害する候補化合物の能力は、もちろん前述のアッセイでテストされ得る。単離されたマトリックスメタロプロテアーゼ酵素は、本発明の化合物の阻害活性を確認するために利用され得る。あるいは組織分解をさせ得る複数の酵素を含有する粗抽出物が使用され得る。

本発明の化合物は、アミド結合または改変型アミド結合によって結合した２成分を含有すると考えられ得る。１つの成分は、ジカルボキシル酸の骨格の置換または無置換のヒドロキシ尿素またはリバースヒドロキサメート誘導体であり、ここでいずれかのカルボキシル基は、アミノ酸またはそのアナログとアミド結合または改変型アミド結合を形成する。このアミノ酸またはそのアナログは、トリプトファン残基またはナフチルアラニル残基のような、融合または結合したビシクロ芳香族環を含有する、アミノ酸またはアナログ残基である。

この残基はまた、アミド化され得るか、または１個あるいは２個の付加アミノ酸残基によって伸長され得る。従って、本発明の化合物は、以下に記載される反応によって調製され得る。

式１のジカルボキシル酸残基は、少なくとも１つ、あるいは、ある場合には２つ以上のキラル中心を有する。各キラル中心の両方の立体配置が本発明中に含まれる。各光学活性中心での２つの可能な立体配置を含む化合物の混合物などである。しかしながら、一般には、これらの各キラル中心で、特定の立体配置を取ることが好ましいことも知られている。同様に、式２の化合物では二重結合が、シス配置またはトランス配置のどちらかであり得る。この場合もまた、実施態様の特定のセットには、一方または他方の立体配置が好ましい。

両方の式において、Ｒ４が結合している炭素はキラルである。

本発明では両方の立体配置が含まれるが、Ｌ−アミノ酸に対応するものが好ましい。

式ｌおよび２の化合物において−ＣＯＮＲ３−で示されるアミド結合は、「改変された型の等配電子性の」型をとり得る。このような場合の本発明の化合物は、経口投与が望まれるときに好ましい。「改変された等配電子性の型」とは−ＣＯＮＨ２−官能基の代わりに、この化合物が−Ｃ８２ＮＲ’−１−ＣＨ−ＮＲ３、 −ＣＯＣＩＴＲ３−１−ＣＨ（ＯＨ）ＮＲ３、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＯＨ２−１−ＣＳＣ■Ｒ３−１−ＣＨ−ＣＲ３−１ＣＦ−ＣＲ３および−ＮＲ３ＣＯ−からなる群から選択されるような部分を代わりに有することを意味する。

本明細書の用語「アルキル」は、メチル、エチル、イソブチル、シクロヘキシル、ｔ−ブチルなどのような、直鎖、分枝鎖、または環状飽和炭化水素性基のような、従来の意味を有する。本発明のアルキル置換基は、記された炭素数を有し、１個または２個の置換基で置換され得る。置換基は一般に、ヒドロキシル、ｒＣＢＺＪアミノなどを含む、化合物の活性を妨害しないものである。アリールは、フェニル、ナフチル、ピリジル、キノリル、インドリルなどの芳香環システムを意味し；アリールアルキルは、示された位置でアルキル基と結合したアリール基を意味する。すべての場合において、アリールの部分は置換され得るかまたは置換され得ない。「アシル」は、式ＲＣＯ−の置換基を意味し、ここでＲは上記のように定義されたアルキルまたはアリールアルキルである。アシル基の炭素数は、一般に１−１５である；しかしながら、アシル置換基はインビボで容易に加水分解されるから、この基の性質は比較的重要でない。「環状アミン」は、ピペリジンのように、窒素かへテロ環の一部であるアミンを意味し、「ヘテロ環状アミン」は、モルフォリンのように、別のへテロ原子を含有するようなヘテロ環を意味する。

上記式１の化合物において、Ｒ１およびＲ２の好適な具体例は、Ｒ１がＨまたはＭｅであり、モしてＲ２が３−８０のアルキルであり、特にイソブチル、２−メチルブチル、またはイソプロピルである化合物を含む。イソブチルが特に好ましい。

式ｌおよび式２において、ｎ＝１またはｍ＝１である化合物もまた好ましい。

上記式１および式２の化合物の両方において、Ｒ３の好適な態様はＨおよびメチルであり、特にＨである。

Ｒ４は、メチレン基を介して分子と結合した、融合または結合したビシクロ芳香族システムである。「融合または結合したビシクロ芳香族システム」とは、８％　Ｎ１　またはＯのようなヘテロ原子を１個以上、さらに含有し得る、芳香族特性を有する２環システムの意味である。

Ｎのようなヘテロ原子が含まれる時、式（１）または（２）の一部を形成するシステムは、窒素に結合したアシル保護基（１−５Ｃ）を含み得る。代表的な融合した二環式芳香族システムには、ナフチル、インドリル、キノリニル、およびインキノリニルが含まれる。代表的な結合したシステムには、ビフェニル、４−フェニルピリミジル、３−フェニルピリジルなどが含まれる。すべての場合において、融合または結合した二環式システムの任意の位置が、メチレンを介する結合に用いられ得る。融合または結合した芳香族システムは、１個から２個のアルキル（１−４Ｃ）基および／またはヒドロキシによってさらに置換され得るか、または任意のリング窒素がアシル化され得る。好ましいアシル化はアセチ゛ル化である。

Ｒ１の好適な具体例には、１−（２−メチルナフチル）メチレン；１−キノリルメチレン：ｌ−ナフチルメチレン；２−ナフチルメチレン；ｌ−インキノリルメチレン：３−インキノリルメチレン；３−チオナフチニルメチレン；３−クマロニルメチレン；　３−　（５−メチルインドリル）メチレン；３−（５−ヒドロキシインドリル）メチレン：　３−　（２−ヒドロキシインドリル）メチレン；ビフェニルメチレン；および４−フェニルピリミジルメチレン；およびその置換した型が含まれる。

アミノ酸残基の一部として、これら置換基の多くは、ＧｒｅｅｎｓｔｅｉｎおよびＷｔｎｉｔｚ、　−Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａａ＋ｉｎｏ　Ａｃ１ｄｓ“（１９６１）　ｆｉ：２７３１−２７４１　（Ｊｏｈｎ　ＷＩｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ、　ＮＹ）に記載されている。

Ｒ４の特に好適な具体例は、３−インドリルメチレンまたはそのＮ−アシル化銹導体である。すなわち「Ｃ末端」のアミノ酸が、トリプトファン残基またはその保護された形である態様である。Ｒ４が結合する炭素の好ましい立体配置は、Ｌ −トリブトファンに対応する立体配置である。

Ｘの好ましい具体例は式ＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨ１置換されたまたは置換されていないアルキル（１−１２Ｃ）またはアリールアルキル（６−１２Ｃ）である。Ｒ５での特に好ましい置換は、ヒドロキシル基、またはフェニルメトキシカルバミル（ＣＢＺ）基である。さらに、この化合物は、Ｘが別アミノ酸残基、特にグリシル残基であり、これが上述のようにさらにアミド化され得る態様によって、伸長され得る。

Ｂの　ム　の°　での上記の背景のセフシラン中に示すように、多数の疾病が、過剰のまたは望ましくないマトリックスを破壊するメタロプロテアーゼ活性によって媒介されることが知られている。これらには、腫瘍転移、リウマチ様関節炎、皮膚の炎症、潰瘍、特に角膜の潰瘍、感染反応などが含まれる。従って、本発明の化合物は、この望ましくない活性を含む症状に関する治療に有用である。

従って、本発明の化合物は、これらの症状の治療または予防に用いられるために、薬学的組成物に処方され得る。標準の薬学的処方技術として、Ｒｅ１ｔｏ　’ Ｓ　ｈａ　ｍａｃｅｕ　’ｃａｌ　Ｓｃｉ■旦競、　Ｍａｃｋ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｅａｓｔｏｎ、　ＰＡ、最新版に開示されているような技術が用いられる。

全身的に治療することが目的であれば、化合物を注射することが好ましい。これらの症状には、リウマチ様関節炎および腫瘍転移が含まれる。この化合物は、生理食塩水、ハンクス液、リンゲル液などのような、注射剤にするための従来の賦形剤を用いて、注射剤に処方され得る。注射は、静脈注射、筋肉注射、腹腔注射、または皮下注射が可能である。投薬量のレベルは、被検体１ｋｇ当り０．　１ μｇから被検体１ｋｇ当り１ｍｇのオーダーであるが、もちろん、潰瘍の性質、被検体の性質、選択した本発明の化合物の特別な態様、そして処方の性質および投与経路による。

注射による投与の他に、本発明の化合物はまた、胆汁酸塩、フシジン酸誘導体、コリン酸などのような、組織の浸透に効果がある物質を含有させることによって経皮的にまたは経筋的に送達される組成物にも処方され得る。本発明の化合物はまた、治療される症状の性質によって、リポソームベースの送達システムにも用いられ得るし、局部的投与または経口投与の処方物にも用いられ得る。経口投与は、−ＣＯＮＲ’一部分が改変型等配電子型であるような化合物に、特に好都合である。これらの化合物は、消化系の加水分解作用に耐える。

経口製剤には、シロ・ノブ、タブレット、カプセルなどが含まれ、あるいは化合物は食物またはジュースに入れて投与され得る。

本発′明の阻害剤は、標的骨はリガンドを用いて、マトリックスメタロプロテアーゼが蓄積されている特定の場所を標的トシ得ル。例えば、腫瘍中に含まれるマトリックスメタロプロテアーゼに阻害剤を集中させるために、免疫毒の調製で一般に知られているように、阻害剤は、腫瘍マーカーと免疫反応性がある抗体またはそのフラグメントと結合される。標的骨はリガンドはまた、腫瘍上に存在するレセプターに適切なリガンドであり得る。目的の標的組織のマーカーと、特異的に反応するようなすべての標的骨はリガンドが用いられ得る。

本発明の化合物と標的骨はリガンドとを結合させる方法は公知であり、以下に述べる担体との結合方法に類似している。

結合物は、上述のように調合され、投与される。

局部的な症状には、局所的な投与が好ましい。例えば、潰瘍化角膜を治療するために、冒された眼に直接塗布するには、点眼剤またはエアロゾルのような製剤が使用され得る。角膜の治療には、本発明の化合物はまた、ゲルまたは外用剤としても処方され得、あるいはコラーゲンまたは親水性ポリマー保護膜に混合され得る。この物質はまた、コンタクトレンズまたは貯蔵容器として、あるいは結膜下型剤として挿入され得る。皮膚の炎症の治療には、局部的および局所的に、ゲル、ペースト、軟膏または外用剤の形で塗布される。治療の形態は、症状の性質を反映し、任意の選択した経路での適切な製剤が当該分野では利用される。

本発明の化合物を用いて治療されやすい、特に局所的な症状には、胃／ｌｌ瘍、任意のタイプの表面的創傷、表皮水庖症、皮膚癌の種々の形態、および天庖癒が含まれる。Ｈａｓａｂｅ、　Ｔ。

ら、Ｌ１■−は上ｎ　Ｍｅｄ　（１９８７）　１２：１８１−１９０：　０ｚａｋｉ、１．ら、５ｃａｎｄ　Ｇａ５ｔｏｅｎｔｅｏ　Ｓｕ　ｌ　Ｎｏｒｖａ　（１９８９）１６：１３８−１４１に記載されているように、コラゲナーゼは胃潰瘍の進行に関係することがよく知られている。コラゲナーゼはまた、Ｍｕｌｌｉｎｓ。

Ｄ、　Ｅ、ら、Ｂ’ｏｃｈ’ｍ　Ｂｉｏ　ｓ　Ａｃｔａ　（１９ｇ３＞　６９５＋１７７−２１４に総説されているような創傷周辺組織中にも見られる。そして、傷ついた創傷の治癒過程にある患者は、創傷組織中のコラゲナーゼ活性が増加することが知られている。例えば、Ｈｅｎｎｅｓｅｙ、　Ｐ、Ｊ、ら、ＬＬ±工ｔ　Ｓｕ■（１９９０）　２５ニア５−７８は、糖尿病の場合にそうなることを示し；　５ａｎｋ、　Ａ、ら、江」ｌ■（１９８９）　１０６：１１４１−１１４８は、対麻痺、慢性腎不全、およびクッシング病においてコラゲナーゼ活性が増大することを証明した。従って、本発明のコラゲナーゼ阻害剤は、例えば、褥瘉性潰瘍を含む任意の潰瘍性皮膚症状、または創傷治癒が遅い他の症状に有用である。本発明の化合物により治療されやすい他の症状には、角膜軟化症、ｍ±ｌ］ＪｊｉｌＫおよび結合組織病に関連した、角膜または強膜の溶解が含まれる。

これはまた内科療法の途中で受けた創傷に関する場合にも有用である。コラゲナーゼ阻害剤は、ラットの腸吻合における縫合線の強度および縫合の保持容量を増大させることが証明されている（Ｈｏｇｓｔｒｏｍ、　Ｈ，ら、■Ｌシカ上包（１９８５）　ｌｊｊ：４５１−４５５）。本発明のコラゲナーゼ阻害剤に応答する他の局所的な症状には、コラゲナーゼ活性が増大することが証明された表皮水庖症が含まれる（Ｐｅｒｅｚ−Ｔａ＋ｍａｙｏ、　Ｒ，、紐」」１」（１９７８）■：５０９−５６６、　ｐｐ、　５３９−５４１）。コラゲナーゼ活性が、基底細胞癌の周りの間質中で、および潰瘍化細胞癌の腫瘍間質を全般で増加することもまた知られている（Ｃｈｉｌｄｅｒ、　Ｓ、、　Ｊ、Ｗ。

ら、Ｊ　Ａｍ　Ａｃａｄ　Ｄｅｒｍａｔｏｌ　（１９８７）　１７：１０２５− １０３２＞。

さらに、本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤は、敗血症性ショックの治療および成人性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療に有用である。敗血症性シ茸ツクにおける血漿プロテアーゼの役割は、Ｃｏｌｍａｎ、　Ｒ，Ｃ，、ｈＬカエユＪ鯨（１９１１９）出：１２０７−１２１０に示されている。そして、敗血症性シラツクおよびＡＲＤＳの両方における好中球プロテアーゼの関与は、Ｉｄｅｌｌ、Ｓ、ら、　ｎｎ　Ｒｅｓ　Ｒｅｓ　’ｒ　Ｄｉｓ　（１９８５）　ｕｌ：１０９ｇ−１１０５に示されている。これらの症状の場合、本発明の化合物は、結合組織をマトリックスメタロプロテアーゼによる消化から直接保護し、そしてコラーゲンの分解を予防し、このようにしてフラーゲンフラグメントに対する好中球の既知の化学遊走を予防する（Ｖｅｒｂ、　Ｚ、、　−Ｔｅｘｔｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｒｈｅｕ＋＋ａｔｏｌｏｇｙ”において、Ｋｅｌｌｅｙ、　Ｗ、Ｎ、らｉｉ　（１９８９）　Ｗ、Ｂ、　５ａｕｎｄｅｒｓ、　Ｐｈ１ｌａｄｅｌｌ）ｈｉＪｌ、第３版、　ｐｐ、３００−３２０）。本発明の化合物はまた、マトリックスメタロプロテアーゼによって血漿プロテアーゼ阻害剤が不活性化することを予防する（Ｖｅｒｂ、　Ｚ、上記）。

上述のものすべてにおいて、もちろん、本発明の化合物は単独でまたは混合物として投与され得、そして組成物は、適用の際に適切な、付加的薬剤または賦形剤をさらに含み得る。

い（つかの本発明の化合物はまた、細菌性メタロプロテアーゼも阻害するが、一般に哺乳類メタロプロテアーゼに関して示されるよりもより低いレベルである。

いくつかの細菌性メタロプロテアーゼは、阻害剤の立体化学への依存性がより少ないようであるが、一方、哺乳類プロテアーゼを不活性化する能力において、ジアステレオマーの間に本質的な違いが見られる。従って、この活性のパターンは、哺乳類酵素と細菌性酵素とを区別するのに用いられ得る。

（以Ｔ−光白）の−　および本発明の化合物はまた、本発明の化合物に免疫特異的な抗血清を得るための免疫プロトフルに用いられ得る。本発明の化合物は比較的小さいハプテンであるから、それらは、従来用いられているキーホールリンベットヘモシアニン（ＫＬＨ）または血清アルブミン担体のような抗原的に中性の担体と都合よく結合される。

担体との結合は、当該分野において公知の方法によって行われ得る；本発明の化合物の−ＣＯＸ官能基は、これらの技術を適用する際に、特に都合のよい部位を提供する。例えば、ＣＯｘ基は還元されてアルデヒドとなり得、タンパク質ベースの担体の側鎖アミノ基との反応により、そしてその後必要に応じて、生成したイミノ結合の還元により、担体と結合され得る。

Ｘ＝ＯＨであるＣＯｘ基はまた、ジシクロへキンル力ルポジイミドまたは他のカルボジイミド脱水剤のような縮合剤を用いて、側鎖アミノ基とも反応し得る。リンカ−化合物はまた、結合を促進するためにも用いられ得る；ホモ三官能性リンカ−およびヘテロ三官能性リンカ−は両方ともＰｉｅｒｃｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬから入手可能である。以下の実施例に記載されている化合物３１〜３４は、適当なカップリング剤を用いて、それらのＣ末端のカルボキシル基（または化合物３２ではアミン基）を介して抗原性が中性の担体と結合するように設計されている。

その結果生じた免疫原性の複合体は、その後マウス、ラビブトなどのような適当な哺乳類被検体に注射され得る。適当なプロトコルには、血清中で抗体を生成させるスケジュールに従って、アジュバントの存在下で免疫原を繰り返し注射することが含まれる。免疫血清のタイターは、抗原として本発明の化合物を使用して、現在当該分野で標準的なイムノアッセイ手順を用いて、容易に測定され得る。

得られた抗血清は直接用いられ得るか、またはモノクローナル抗体が得られ得る。モノクローナル抗体は、末梢血リンパ球または免疫された動物の肺臓を採取してこの抗体生成細胞を不死化させ、次に標準イムノアッセイ技術を用いて、適当な抗体を産生ずるものを同定することによって得られる。

そしてポリクローナル調製物またはモノクローナル調製物は、本発明の化合物が関与する治療または予防計画をモニターするのに有用である。血液、血清、尿、または唾液に由来するような適当なサンプルは、本発明の抗体調製物を含む、標準イムノアッセイ技術を用いる治療プロトコルの間の様々な時間に、投与された阻害剤の存在についてテストされ得る。

本発明の化合物はまた、標準カップリング法を用いて、シンチレーシクン用標識、例えばテクネチウム９９または■−１３１のような標識とも結合され得る。標識された化合物は、被検体に投与され、インビボで１種以上の過剰量のマトリックスメタロプロテアーゼがある場所が決定される。従って阻害剤が選択的にマトリックスメタロプロテアーゼと結合する能力を、インサイチュでこれらの酵素の分布図を作ることに利用している。この技術はまた、もちろん組織学的操作にも使用され、標識された本発明の化合物は競合イムノアッセイに用いられ得る。

アフィニティー嘗ガントとしての本発明の化合物は、分離膜のような固体支持体、アガロース、セファロース、ポリアクリルアミドなどのようなりロマトグラフの支持体、またはマイクロタイタープレートと結合され得る。そして種々の哺乳類マトリックスメタロプロテアーゼの精製に有用なアフィニティー支持体が得られる。マトリックスメタロプロテアーゼと阻害剤リガンドとの選択的な結合により、目的の酵素の吸着、そしてそれに続く、例えば変化させたイオン強度および／またはｐＨ条件を用いた溶出が行われ得る。

Ｂの　４　の−１リバースヒドロキサメートおよびヒドロキシ尿素は、対応するヒドロキサメートそれ自身よりも生物学的に安定である。

このことは以下の文献によって確認されている：　Ｃａｒｔｅｒ、　Ｇ。

Ｗ、ら、Ｊ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　ＥＸコｈｅｒ　（１９９１）　２５６：９２９−９３７；　Ｊａｃｋｓｏｎ、ｗ、ｐ、ら、Ｊ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｗ　（１９８８）　３１：４９９−５００；　Ｙｏｕｎｇ、Ｐ、Ｒ，ら。

ＦＡＳＥＢ　Ｊ　（１９’Ｈ）　５：Ａ１２７３；　Ｈａｈｎ、　Ｒ，Ａ、ら、Ｊ　Ｐｈａｒ＋ｎａｃｏｌ　Ｅｘ匣（１９９１）　２５６：９４−１０２：　Ｔｒａｍｐｏｓｃｈ、　Ｋ、Ｍ、ら、口剥℃Ｌｋ■ｏ）３３　（１９９０）　３０：４４３−４５０：　Ａｒｇｅｎｔｉｅｒｉ、　Ｄ、Ｃ，ら；　Ｋｉｍｂａｌｌ、　Ｅ。

ら、５ｔｈ　Ｉｎｔ　Ｃａｎ　ｌｎｆ　ａｓｎａｔ’　ｎ　ｅｓｅａ　ｃ　５ｓｏｃ、、　Ｗｈｉｔｅｈａｖｅｎ、　ＰＡ、　５ｅｐｔｅｓ＋ｂｅｒ　２３−２７．１９９０．　Ａｂｓｔｒａｃｔ　１００；およびＨｕａｎｇ、Ｆ、ら、Ｊ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｗ　（１９８９）　３２：１８３６−１８４２゜従って、多少さらに合成が複雑になるが、これらのアナログにより、これらの化合物の治療への適用に優れた生理学的特徴が提供される。

本発明のリバースヒドロキサメートおよびヒドロキシ尿素は、合成有機化学の標準的な技術を用いると得られ得る（Ｃｈａｌｌｉｓ、Ｂ、Ｃ，ら、”Ａｍ１ｄｅｓ　ａｎｄ　Ｒｅ１ａｔｅｄ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”　ｉｎ　”Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ　Ｏｅｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”　Ｂａｒｔｏｎ、Ｄ、ら編　（１９７９）　ｉ：１０３６−１０４５）、　Ｐｅｒｇａ＋ａｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、　０ｘｆｏｒｄ、を参照のこと。詳細は以下に記載する。

開始物質に関して、−ＮＲ３−ＣＨＲ’ＣＯＸ部分を生成する化合物は、トリプトファン、およびそのエステルまたはアミドのアナログの場合は、容易に入手できる。上記で示したように、多（のアナログの融合ビシクロ芳香族アミノ酸は、ＧｒｅｅｎｓｔｅｉｎおよびＷｉｎｉｔｚ　（前記）に記載されている。当該分野では公知のように、Ｒ４が１−（２−メチルナフチル）メチレン；　１−キノリル−メチレン；ｌ−ナフチルメチレン；　ｌ−インキノリルメチレン；および３−インキ７リルメチレンであるものに対応するアミノ酸は、アミノ酸のアセトアミドマロン酸エステル合成を用いて、二環式芳香族メチレンハロゲン化物から調製され得る。メチレンハロゲン化物自身は、対応するカルボキシル酸を、水素化アルミニウムリチウムで還元し、生じたアルコールを臭化チオニルで臭素化して調製され得る。

Ｙで表された官能基によって、この部分が本発明の化合物に組み込まれる合成段階は変化する。

ＹがＲ’ＯＮＲ’Ｃ０ＮＲ’−であり、ここでｎｇｏ、１または２である実施態様において、その化合物は各々、α、βまたはγアミノ酸を、クロロギ酸のメチルまたはエチルエステルでアシル化し、生じるアミノ酸を−ＮＲ３ＣＨＲ’ＣＯＸ部分の保護した型と縮合させ、そして生じるカルボエトキシ「ジペプチド」と、ヒドロキシルアミンまたは置換したヒドロキシルアミンとを反応させることによって調製する。このことは、Ｆ１ａ５ｅｒ、　Ｌ、Ｆ、ら、−Ｒｅａｇｅｎｔｓ　ｆｏｒ　Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ”　（１９６７）　ｌ：４７９　（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ＆　５ｏｎｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）に記載されている。この一連の反応を、反応式１に示す。

（以下余白）反ｂ・Ｎ１あるいは、α、βまたはγアミノ酸を、例えば、カルボベンゾキンまたはｔ−ブチルオキシカルボニルを用いて一時的に保護し、それを、Ｒ４を含むカルボキシ末端を保護したアミノ酸部分に結合させる。そして保護基を適切な加水分解または酸分解によって除去し、脱保護されたα、βまたはγアミノ酸と、カルボニルジイミダゾールのような活性化カルボン酸とを反応させる。そして生じた生成物と、ヒドロキシルアミンまたは置換したヒドロキシルアミンとを反応させると目的の生成物が得られる。この一連の反応を、反応式２に要約する（式ｌｍ−Ｃｏ −１ｍにおいて、Ｉｌｌはイミダゾール残基を表す。）（以下余白）適当なα、βまたはγアミノ酸は、Ｊｏｎｅｓ、　Ｊ、Ｈ，ら、”Ａｉ＋ｉ口ｏ　Ａｃ１ｄｓ、”　ｐ、８３４　（Ｂａｒｔｏｎ、Ｄ、ら編）（”Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”　（１９７９）第２巻、Ｐｅｒｇａｍｏｎ　Ｐｒｅｓｓ）に示されているような一般的な方法によって調製される。このような方法には、例えば、対応するＮ−保護α−アミノ酸のＡｒｎｄｔ−ＥＩｓｔａｒｔ合成によるホモロゲーシｊン、およびさらに一般には、フタルイミドのような窒素親核基のα、β−不飽和エステル、酸またはニトリルへの付加が含まれる。

ヒドロキシ尿素の２番目のクラスにおいて、Ｙは式Ｒ’２ＮＣＯＮＯＲ７−を有し、ｎは０．１または２である。これらの化合物は、式Ｒ７０ＮＨ（ＣＨＲ’　＞ｎｃ［ＩＲ２ｃＯＯＨのα、βまたはγヒドロキシアミノ酸から調製される。

両方のＲ６がＨである場合、ＦｉｅｓｅｒおよびＦｉｅｓｅｒ、　−Ｒｅａｇｅｎｔｓ　ｆｏｒ　Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ”　（１９６ｇ）　ｌ：４７９　（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）に記載されている、シリコンテトライソシアネートとの反応によって、この中間体は所望のヒドロキシ尿素に変換される。この反応は　Ｒ７によって保護または置換されたヒドロキシル基を用いて行われる。

生じるヒドロキシ尿素を式ＨＮＲ３ＣＨＲ’ＣＯＸの成分に結合させると、目的の生成物が得られる。あるいは、アミドを最初に生成させ、Ｎ−ヒドロキシジペプチドを試薬で処理する。

あるいは、ＹがＲ６ＨＮＣＯ−ＮＯＲ７で、ここでＲ６がアルキルであル場合、前記の〇−保護α、βまたはγＮ−ヒドロキシアミノ酸を適切なアルキルイソシアネートＲ６ＮＣ０と反応させると、目的の生成物が生成する。

ＹがＲ８２ＮＣＯ−ＮＯＲ”−で、ここで両方のＲ６がアルキルである場合、α 、βまたはγＮ−ヒドロキシアミノ酸をカルボン酸の活性化型、例えば、カルボニルジイミダゾールまたはビス−ｐ−ニトロフェニルカーボネートと反応させ、次にＲ６がアルキル基であるジアミンＲ’２ＮＨと反応させる。所望ならば、この後に脱保護を行う。

前述の条件は、Ｎ１５ｈｉｎｏ、　Ｎ、ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ　（１９７９）　ｌｌｊ：４３４０−４３４６に記載されているトリペプチドの同様の調製物の記載中に認められ得る。

前述の合成中の中間体として用いられるβ−Ｎ−ヒドロキシアミノ酸は、マロン酸エステル合成によって調製され得る。

このマロン酸エステル合成では、マロン酸ジエチルを２度、即ち、Ｒ２−Ｂｒで１度、次に例えば、Ｒ１がＨである場合は、ベンジルクロロメチルエーテルでアルキル化する。Ｋｏｒｔｙｌｅｖｉｃｚ、　Ｚ、Ｐ、ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ　（１９８４）　２３：２０８３−２０８７に記載されている類似アルデヒドの合成と同様の方法で、生成物をケン化、脱カルボキシル化、水素添加および酸化して、β−アルデヒドが得られる。次に目的のβ−ヒドロキシアミノ酸は、保護（またはＲ７がアルキルならば、アルキル化、またはＲ７がアシルならば、アシル化）ヒドロキシアミノ酸付加することによって得られる。Ｒ１がアルキルである、対応する化合物は、２度目のアルキル化にベンジル−０−ＣＨＲ’ＣＩを用いる同様の方法で調製され得る。類似のケトンは、Ｇａ１ａｒｄｙ、　Ｒ，Ｅ、ら、肛匹■虹麩葺（１９８５）　２４ニア６０７−７６１２に記載された。

最終的に、Ｙが式Ｒ’Ｃ０Ｎ０Ｒ７−である化合物、すなわち、リバースヒドロキサメートは、対応するα、βまたはγＮ−ヒドロキシジペプチドのアシル化によって調製され得る。あるいは、Ｎ−ヒドロキシアミノ酸をアシル化し、続いて縮合させ、本発明の化合物中にアミド結合を生成させる。アシル化法は、例えば、前にも引用した、Ｎ１５ｈｉｎｏ、　Ｎ、ら、肛匹■１扛■（１９７９）　１Ｂ＋４３４０−４３４６に記載されている。

あるいは、ｎ＝１およびＲ１がＨである化合物は、トリフェニルホスフィンと１．１−ジメトキシ−２−ブロモエタンとから調製されたイリド１，１−ジメトキシ−２−（トリフェニルホスホラニリデン）エタンと４−メチル−２−オキソペンタン酸とを縮合することによって調製され得る。次にこの生成物に水素添加して、４．４−ジメトキシ−２−イソブチルブタン酸が得られる。これを、Ｒ３ＮＨＣＨＲ’ＣＯＸ部分と結合して、４．４−ジｆｉ　トキシー２−イアブチルブタメイル−ＮＲ３ＣＨＲ’ＣＯＸが得られる。酸水溶液で処理すると、２−インブチル−４−オキソブタノイルーＮＲ３ＣＨＲ’　ＣＯＸのアルデヒド体が得られる。

この化合物のオキシムは、ヒドロキシルアミンと反応させることによって調製され、そして還元すると対応するＮ−置換ヒドロキシルアミンが得られる。ヒドロキサメ−ル酸素および窒素の両方をアシル化し、続いてＯ−アシル基の加水分解を行うと、Ｎ−アシルリバースヒドロキサメートが得られる。

（Ｓｕｍｍｅｒｓ、Ｊ、Ｂ、ら、Ｊ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｗ　（１９８８）　３１：１９６０−１９６４）。

−ＣＯＮＲ’−が改変された等配電子性の形態である化合物において、これらの形態は当該分野において周知の方法によって調製され得る。

以下の文献は、これらの、別の結合部分を含むペプチドアナログの調製を記載している：　５ｐａｔｏｌａ、　Ａ、Ｆ、、　ｎμ」匿■（１９８３年３月）、第１巻、３号、　−Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｂａｃｋｂｏｎｅ　Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ−（総説）；　５ｐａｔｏｌａ、　Ａ、Ｆ、、　−Ｃｈｅｍｔｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｃｈｅｗ＋１ｓｔｒｙ　ｏｆＡ＋５ｉｎｏ　Ａｃ１ｄｓ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　ａｎｄ　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ、−Ｂ、　Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ、編。

Ｍａｒｃｅｌ　Ｄｅｋｋｅｒ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　ｐ、２６７　（１９８３）　（総説）；　Ｍｏｒｌｅｙ。

Ｊ、Ｓ、、　Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍ　Ｓｅｔ　（１９８０）　ｐｐ、４６３ −４６８　（総説）；　１ｕｄｓ。

ｎ、Ｄ、ら、Ｉ　ｔ　Ｊ　ｅ　ｔ　Ｐｒｏｔ　Ｒｅｓ　（１９７９）　ロ：１７？−１８５（−ＣＨ２ＮＲ’−、−ＣＨ２ＣＨＲ’−）；　５ｐａｔｏｌａ、Ａ、Ｆ、ら、Ｕ工ｅ　Ｓｃｉ　（１９８６）　３８：１２４３−１２４９　（ＣＨ２−Ｓ）；　Ｈａｎｎ、　Ｍ、Ｍ、、　Ｊ　Ｃｈｅｗ　Ｓｏｃ　Ｐｅｒｋｉｎ　Ｔｒａｎｓ　＋（１９８２）　３０７−３１４　（−ＣＨ−ＣＲ３−、シス　および　トランス）；　Ａｌ＋ｇｑｕｉｓｔ、Ｒ，Ｇ、ら、Ｊ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｗ　（１９８０）　２３：１３９２−１３９８　（−ＣＯＣＨＲ’−）；　Ｊｅｎｎｉｎｇｓ−Ｗｈｉｔｅ、Ｃ，ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ　（１９８２）　２３：２５３３　（−ＣＯＣＨＲ’−）；　５ｚｅｌｋｅ、　Ｍ、ら、ヨーロッパ特許出願ＥＰ４５６６５号　（１９８２）　ＣＡ：９７＋３９４０５号　（１９８２）　（−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨＲ’−）；　Ｈｏ１ｌａｄａＬ　Ｍ、Ｗ、ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ　（１９８３）　２４＋４４０１− ４４０４　（−Ｃ（ＯＨ）ＣＨ２−）　：およびＨｒｕｂｙ、　Ｖ、Ｊ、、　註す」虹（１９８２）　３１：１８９−１９９　（−ＣＨ２−Ｓ−）。

以下の実施例により本発明を説明するが、本発明を限定するものではない。

支立興以下の実施例において、ＴＬＣの溶媒システムは以下の通りである＝　（Ａ）酢酸エチル／メタノール（９５：　５）：　（Ｂ）酢酸エチル／メタノール（２５：　５）；　（Ｃ）酢酸エチル；　（Ｄ）酢酸エチル／メタノール（３０：　５）？　（Ｅ）酢酸エチル／ヘキサン（１：　１）；　（Ｆ）クロロホルム／メタノール／酢酸（３０：　６：　２）；　（Ｇ）クロロホルム／メタノール／酢酸（８５：　１０：　１）。

支胤匠上Ｎ−Ｄ　Ｌ−２−インブチル−３−Ｎ’−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル）１ブトフアンメチルアミドの５ｇ　（０，０３３ｍｏｌ）の４−メチル−２−オキソペンタン酸のナトリウム塩と５．６５ｇ　（０，０３３ｍｏｌ）の臭化ベンジルの１０ｍ１無水ジメチルホルムアミド懸濁液を、室温で４日間攪拌した。溶媒を減圧下でエバボレートした後、残渣をヘキサンで１００ｍ１に希釈して水（３ｘ２０ｍｌ）および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒をエバボレートし、６．４ｇ（収率８８％）の４−メチル−２−オキソペンタン酸のベンジルエステル（上）を無色の油状物として得た。

６．４ｇ　（０，０２９ｍｏｌ）の（上）と９．７ｇ（０゜０２９ｍｏｌ）のメチル（トリフェニルホスホラニリデン）アセテートの混合物を、１００ｍＬ乾燥塩化メチレン中、室温で１２時間攪拌し、エバボレートし、乾固した。残渣をヘキサン（３Ｘ５０ｍＬ）で抽出した。このヘキサン溶液を１０％重炭酸ナトリウム（２ｘ３０ｍＬ）、水および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、そして無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒をエバポレートし、８．０１ｇ（収率１００％）の２−インブチル−３−（メトキシカルボニル）−プロピオン酸ベンジル（２）をＥ異性体とＺ異性体の混合物として得た。

５０ｍＬメタノール中の８．Ｏｌｇ　（０，０２９ｍｏｌ）の（２）とＩｇの１０％パラジウムカーボンの混合物を、室温で８時間、４気圧の水素ガス下で水素添加した。触媒を濾°過して除去した後、濾液を減圧下でエバポレートして乾固し、４．７ｇ（収率８６％）の２−インブチル−３−（メトキシカルボニル）− プロピオン酸（３）を無色の油状物として得た。

１０ｍＬ乾燥塩化メチレン中の０．８５ｇ　（４，５ｍｍ。

１）の（１）と０．５７ｇ　（４，５ｍｍｏｌ）の塩化オキザリルとの混合物に、０．１ｍＬの無水ジメチルホルムアミドを添加した。室温で１時間攪拌した後、溶媒を減圧下でエバポレートし、そして残渣を無水ジメチルホルムアミドで５ｍＬに希釈し、そして１．０６ｇ　（４，１ｍｍｏりのＬ−）リブヒフ１ジメチルア□ミドの塩酸塩（ＫｏｒｔｙｌｅｗｉｃｚおよびＧａＩａｒｄｙ、　しし虹儲り（１９９０）　３３：２６３−２７３）を添加し、次に一１０℃で１．３ｍＬ　（９，３ｍｍｏ　１）のトリエチルアミンを添加した。これを室温で７時間攪拌した後、減圧下、室温でエバポレートして乾固した。残渣を酢酸エチルで１５０ｍＬに希釈し、水（２ｘ１５ｍＬ）、１０％硫酸−水素カリウム（５ｘ２０ｍＬ）、１０％重炭酸ナトリウム（２ｘ２０ｍＬ）および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、そして溶媒をエバポレートし、１．６ｇ（収率８３％）のＮ−［Ｄ、Ｌ−２−インブチル−３−（メトキシカルボニル）−プロパノイル］−Ｌ−１リブトファンメチルアミド土をジアステレオマー工人および１旦の混合物として得た。

異性体１人および±旦をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル）によって分離した。

異性体１人：　ｍｐ＝１３４−１３７℃、Ｒｒ　（Ｃ）＝０．３７゜異性体１旦：　ｍｐ軍１５６−１５８℃、Ｒｒ（Ｃ）＝０．２゜あるいは、４Ａと４Ｂの混合物を、以下に記すように直接そのヒドロキサメートに変換した。その場合、５Ａを、５Ａと５Ｂの混合物から結晶化させた。

０．２２ｇ　（３，９６ｍｍｏｌ）の水酸化カリウムの１ｍＬメタノール温混合物を、Ｑ、１８４ｇ　（２，６５ｍｍｏｌ）のヒドロキシルアミン塩酸塩の温混合物に添加した。アルゴン雰囲気下で水中で冷却した後、塩化カリウムを濾別し、０゜５ｇ（１，３２ｍｍｏｌ）の（工人）を濾液に添加した。得られた混合物を室温で７時間攪拌した後、減圧下でエバポレートして乾固した。この残渣を１００ｍＬの酢酸エチルに懸濁し、そして１０ｍＬの１０％硫酸−水素カリウムおよび飽和塩化ナトリウムで洗浄し、そして無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧下でエバポレートして乾固した。残渣を酢酸エチルで結晶化し、０．２８ｇ（収率５６％）の純粋な１人を得た。

異性体１旦を、工人で記載したと同様に、対応するヒドロキサメート５Ｂ（収率７２％）に変換た。

異性体ｉ八：　ｍｐ＝１７６−１８２’Ｃ，Ｒｒ（Ｄ）＝０．４５゜異性体ｉ旦：　ｍｐｌ＋１５７−１６２°Ｃ，Ｒｒ（Ｃ）＝０．３９゜４Ａ７４Ｂ混合物を用いる場合には、前述のように、５Ａを残渣から直接結晶化し得る。

４−メチル−２−オキソペンタン酸、２−オキソペンクン酸、３−メチル−２− オキソ酪酸、２−オキソへ牛サン酸、５−メチル−２−オキソヘキサン酸、または２−デカン酸に置き換えるる以外は、上記と同じような方法で、式ｌの対応する化合物が調製される。ここでＲ１はＨであり、モしてＲ２は、それぞれｎ−プロピル、１−プロピル、ｎ−ブチル、２−メチルブチル、およびｎ−オクチルである。さらに、Ｗｉｔｔｉｇ反応によって得た中間体を水素添加する工程を省略する以外は、実施例１中に示した手順に従って、Ｒ１がＨであり、Ｒ２が上記と同じである式２に対応する化合物が得られた。

インドリル基がアシル化された型態を含有する化合物を合成するために、式３または４の中間体エステルを、ヒドロキサメートに変換する前に脱エステル化されてアシル化した。

例として、４Ａを、エタノール中の水酸化ナトリウムで脱エステル化し、そして酸性化し、Ｎ−（Ｌ−２−イソブチル−３−カルボキシプロパメイル）−Ｌ−トリプトファンメチルアミドを得、これをアルキル（１−４Ｃ）カルボキシル酸の酸無水物で処理し、Ｎ−（Ｌ−２−インブチル−３−カルボキシプロパノイル） −Ｌ−（（Ｎ−アシル）インドリル）−トリブトファンメチルアミドを得た。この中間体を次に塩化オキザリル、続いて低温でヒドロキシルアミンで処理し、対応するヒドロキサメートを得た。

Ｌ血五１Ｎ−［２−インブチル−３−（メトキシカルボニル）−プロパノイル］−Ｄ−トリプトファンメチルアミド６Ａ　Ｂ−の２つのジアステレオマーの混合物を、実施例１の４７へ−Ｊ−で記載したようにして調製した。この混合物を酢酸エチルで結晶化し、２回の再結晶後、０．２６ｇ（４９％）の純粋なジアステレオマー６８　（ｍｐ　１５５−１５７℃、Ｒｔ　（Ｃ）　＝０．３２）を得た。

６Ｂを、実施例１に記載の方法によって、ヒドロキサン酸り且に収率５０％（１１９ｍｇ）で変換した：　ｍｐ　１５７−１５９℃、Ｒｒ　（Ｄ）　＝０．３９゜実施例１のＬ−）リプトファンメチルアミドで記載しているようにして調製した、Ｎ−メチル−Ｌ−）リプトファンメチルアミドの１との反応を、土で記載したように行い、粗Ｎ−ＣＤ、Ｌ−２−インブチル−３−（メトキシカルボニル）− プロパノイル］−Ｎ−メチル−Ｌ−）リブトファンメチルアミドｌ−エを得、これを酢酸エチルで結晶化し、７６ｍｇ（収率１９％）（７）８Ａを得た：　ｍｐ　１７１−１７４℃、Ｒｒ　（Ｃ）ｌＩｏ、　４０Ａ１人を実施例１に記載の方法で変換し、１人を収率４５％（３４ｍｇ）で得た：　８ｐ１８０−１８３℃、Ｒｔ　（Ｄ）　＝０．５４゜支血匠土Ｎ−２−イソブチル−Ｌ＝　Ｎ−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル　−Ｌ−−２−ブチル　−アラニンメチルアミド　ＩＩＡ　の−１Ｎ−［Ｄ、Ｌ −イソブチル−３−（メトキシカルボニル）−プロパノイル］　−Ｌ−３−（２ −ナフチル）−アラエフ１１人を、実施例１に記載のように、Ｌ−３−（２−ナフチル）−アラニンメチルアミドと１とから調製した。粗生成物を６０ｇのシリカゲル上で、酢酸エチル：へ牛サン　１：ｌ中でクロマトグラフし、１２ｍｇ（収率５％）のＩＯＡを得た＝ｌｐ１５１−１５８°Ｃ，Ｒｒ（Ｃ）＝０．６９゜１０Ａを実施例１のように変換し、ヒドロキサメート１１八を収率３０％（３ｍｇ）で得た：　ｍｐ　１７９−１８１℃、Ｒ「（Ｄ）ｌｉｏ。

１７ｏ　ＭＳ−ＦＡＢ　（ｍ／Ｚ）　４００　（Ｍ’　＋Ｈ）。

支血史工１−インブチル−３−Ｎ′　−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル　 −Ｌ−）１プトフ　ン２−ヒドロキシエチルアミド　１３Ａ　の−主を室温で塩化メチレン中で２０分間１．　１’　−カルボニルジイミダゾールで活性化したことを除いては、実施例１のＬ−１リブトフアンメチルアミドの塩酸塩に関して記載したように、Ｌ−トリプトファン２−ヒドロキシエチルアミドの塩酸塩を調製し、そしてと結合した。粗生成物は、０．７ｇ（収率６７％）のジアステレオマー上１人、１の混合物であった：　Ｒｒ（Ｃ）　１ｉＡＯＪ８、Ｒｔ　（Ｃ）　１ｉ！１０．１９゜１２Ａを酢酸エチルで、収率３５％（０，１８ｇ）で結晶化した：曹ｐ　１６１−１６３℃、Ｒｔ　（Ｃ）ＩＩｏ、　３８゜１２Ａを実施例１のように変換しＮ−［２−インブチル−３−（Ｎ’−ヒドロキシカルボニルアミド）−プロパノイル］−Ｌ−トリプトファン２−ヒドロキシエチルアミド１３Ａを収率３５％（６２ｍｇ）で得た：　Ｒｔ　（Ｄ）＝０．１７、ｍｐ　１６２−１６３℃。

ＭＳ−ＦＡＢ　（１／Ｚ）　４１９　（Ｍ’　＋Ｈ）。

支胤史工１−イソブチル−３−Ｎ′　−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル　 −し一ト１プトフ７７アミルアミド　１５Ａ　の− Ｌ−）リブトファンアミルアミドの塩酸塩を、実施例１のＬ−トリプトファンメチルアミドで記載したように調製し、室温でジクロロメタン中で２０分間１．　１’　−カルボニルジイミダゾールで活性化したｌと反応させた。Ｎ−［Ｄ、Ｌ −２−インブチル−３−（メトキシカルボニル）−プロパノイル］−Ｌ−トリプトファンアミルアミドの２つのジアステレオマー混合物−１４Ａ　Ｂ（収率９０％）を、工人で記載したように、対応するヒドロキサメートに変換した。その酢酸エチル溶液をゆっくりとエバポレートし、１５Ａ、ユを０．　３４３ｇ（７１％）で得た：　ｍｐ　１６０−１６３℃、ＭＳ−ＦＡＢ　（１／Ｚ）　４４５（Ｍ”　＋Ｈ）。

支施五工］−インブチル−３−Ｎ′　−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル　 −し一ト１ブトファンビペ嘗ジンアミド　１７Ａ　Ｂ　の− Ｌ−トリプトファンピペリジンアミドを、実施例１のＬ−トリプトファンメチルアミドで行ったように１と反応させ、１．１４ｇ（収率８９％）のＮ−［Ｄ、Ｌ −２−インブチル−３−（メトキシカルボニル）−プロパノイル］−Ｌ−）リブトファンピベリジンアミド１６Ａ工ｌを、泡状で得た；Ｒ「（Ｃ）　（１）　０．７４、（１６Ｂ）　０．６７゜１６Ａ　Ｂを、実施例１の工人と同様に粗ＬＬ人、ｌに収率８８％（５７０ｍｇ）で変換した：　ｌｂ　（Ｄ＞　（１７Ａ）　０．４１、（１邦）０．３０゜粗−１７二ｋＢ−を１８０ｇのシリカゲル上で、１２％イソプロパツール含有酢酸エチル中でクロマトグラフを行い、酢酸エチルで結晶化後に１４０ｍｇ（収率２５％）の上ヱＪ−一」−を得た：　ｍｐ　１６９−１７０°Ｃ，ＭＳ−ＦＡＢ　（ｍ／ｚ）　４４３　（Ｍ’　＋Ｈ）。

文意■１Ｌ＝Ｊｊ−インブチル−３−Ｎ”　−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル　−し一ト１ブトファンドデシルアミド　１９Ａ　の− Ｌ−）リプトファンドデシルアミドの反応を、実施例１のＬ−トリプトファンメチルアミドで記載したのと類似の方法で調製した。このエステルを、実施例１に記載したように１と反応させ、粗Ｎ−［Ｄ、Ｌ−インブチル−３−（メトキシカルボニル）−プロパツール］−Ｌ−）リットファンドデシルアミド１８人、１を、異性体１９Ａおよび１９Ｂの混合物として収率９３％で得た。この混合物を１５０ｇのシリカゲル上で、酢酸エチル：ヘキサン、１：２中でクロマトグラフを行い、０．６２ｇの２つの異性体の混合物を得た：　Ｒｒ（Ｅ）１９Ａ　Ｏ，３７、Ｒｒ　（Ｅ）道０．２９゜ゆっくりエバボレートして酢酸エチルで結晶化し、ＴＬＣおよびＮＭＲ分析によって約１０％の１８Ｂが混入した０゜３８ｇの１８Ａを得た：　ｍｐ　１３３−１３５℃。１９Ａのカリウム塩をアルカリ性の反応混合物から結晶化した以外は、実施例１に記載されたように、１８Ａを対応するヒドロキサム酸に、収率８１％（２２２ｍｇ）で変換した。１９Ａのカリウム塩（５４ｍｇ）を２ｍＬの沸騰メタノールに溶解し、数滴の水を添加し、そしてその溶液を０．ＩＮ塩酸でｐＨ６まで酸性化し、そして水で希釈し、１９Ａを５０ｍｇ　（収率１００％）で得た：　ｍｐ　１５５−１５９°Ｃ，Ｒｒ　（Ｄ）＝０．４９゜ＭＳ−ＦＡＢ　（１／Ｚ）　５４３　（Ｍ”＋Ｈ）。

実１１町ｌＮ−２−イソブチル−３−Ｎ′　−ヒドロキシカルボニルアミド　プロパノイル　−Ｌ−ト１ブトファンＳ　−メチルベンジルアミド　２１Ａ　の−１Ｌ−トリプトファン（Ｓ）−メチルベンジルアミドと１との反応を、実施例１に記載したように行い、酢酸エチルで結晶化した後に３３０ｍｇ（収率５１％）のＮ−［２ −イソブチル−３−（メトキシカルボニル）−プロパノイル］　−Ｌ−トリプトファン（Ｓ）−メチルベンジルアミド　２０Ａを得た：　ｍｐ　１６０−１６２ ℃、Ｒｆ（Ｃ）−０，７７゜１１人を、実施例１中で用いたのと同じ方法によって変換し、ヒドロキサメート２１Ａを、収率３８％（７６ｍｇ）で得た：　ｍｐ　１６５−１６６’Ｃ，Ｒ＋（Ｄ）＝Ｏ，’＋３．　ＭＳ−ＦＡＢ　（ｍ／ｚ）　４７９　（Ｍ’　＋Ｈ）。

支立医上立Ｎ−Ｌ−２−イソブチル−Ｌ＝ｌ−Ｎ’　−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル　−Ｌ−）リブトファン　６−フエニルメドキシカルボニルアミノーへキシル−１アミド２７Ａ　の− １−アミ／−６−フエニルメドキシカルボニルアミノーへ牛サン（２３）を調製するために、１．　６−ジアミツヘキサンとベンズアルデヒドの当モル混合物（０，Ｏｌ　ｍｏ　１　）　’Ｅ：２５ｍＬｍ化塩化メチレン中室温で１．５ｇの無水硫酸マグネ７ウムの存在下５時間攪拌した。乾燥剤を濾過によって除去した後、濾液を減圧下でエバポレートして乾固し、２ｇ（収率１００％）の粗ｌ−アミノ−６−フエニルアミツーヘキサンユを、無色の油状物として得た；　ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）１．１−１．’９（ｍ、　１０［１，ヘキサンＣｔｈ−２，−３，−４，−５，Ｎ１３）；　２．６（ＩＩ。

２Ｈ，ＣＨ２−１）；　３．５１（■、２Ｈ，ヘキサンＣＨ２−６）；　７．１ −７．８（■、　５１１、芳香族）；　８．１６（ｓ、　１８．イミンＣｌ＞。

２ｇ（０，Ｏｌｍｏｆ）の２２および１．４ｍＬ　（０，Ｏｌｍｏｆ）のトリエチルアミン混合物を２０ｍＬの塩化メチレン溶液とした。次に１゜７８ｇ　（０，Ｏ１ｍｏ　Ｉ）のクロロギ酸ベンジルを一５℃で滴加した。得られた混合物を、０℃で０．５時間および室温で２時間攪拌し、次に塩化メチレンで５０ｍＬに希釈した。

そして、水（２０ｍｌ）、２％重炭酸ナトリウム（２０ｍｌ）、水、および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、そして無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下で溶媒をエバポレートした後、残渣を５ｍＬのエタノールに溶解し、そして１０ｍＬの２Ｎ塩酸を添加した。得られた混合物を室温で６時間攪拌し、次に減圧下でエバポレートして乾固した。残渣を水で５０ｍＬに希釈し、そしてエチルエーテル（２ｘ１５ｍｌ）で洗浄した。水層を減圧下でエバポレートし、そして少量の水で結晶化して精製し、収率４２％で生成物２３を得た；■ｐ１７５−１７８℃。

ジペプチドアナログ（Ｎ−（Ｌ−２−インブチル−３−メトキシカルボニル）− プロパノイル−Ｌ−トリプトファン（２５Ａ））を調製して２３と結合させるために：１．７５４ｇ　（９，３２ｍｍｏ　Ｉ）の２−インブチル−３−メトキシカルボニルプロピオン酸１が４ｍＬの５０％無水ＤＭＦ入り塩化メチレンに入った混合物に、１．６６ｇ（１０，２ｍｍ。

ｌ）のＮ、Ｎ’　−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を室温で添加した。室温で１５分間攪拌した後、３．０８ｇ（９゜３１ｍｍｏりのＬ−１−リブトファンのベンジルエステルの塩酸塩を添加した。得られた混合物を室温で一晩攪拌した後、酢酸エチルで６０ｍＬに希釈し、５％重炭酸ナトリウム（２ｘ１５ｍｌ）、水（２ｘ１５ｍｌ）、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、そして硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下でエバポレートし、４．３２ｇ（収率１００％）の１ ±、即ち２５のベンジルエステルが無色の泡状で得られ、これをさらに精製しないで次の工程に用いた。

１５ｍＬメタノール中の４．３２ｇ　（９，３１ｍｍｏｌ）の２４と０．５ｇの１０％パラジウムカーボンの混合物に、水素ガスを２時間バブリングした。この間、反応混合物の容量を一定に保つために、メタノールを添加した。触媒を濾別し、そして新しいメタノール（１５ｍｌ）で洗浄し・モして濾液を減圧下でエバポレートして乾固した。溶媒を減圧下でエバポレートし、そして残渣を真空下で乾燥し、３．０８ｇ（収率８８％）の酸２５Ａ　Ｂ−を２つのジアステレオマーの混合物として、無色のガラス状固体の形で得た。これをフラッシュクロマトグラフィーによって分離し、異性体２５Ａおよび２５Ｂを得た（シリカゲル；酢酸エチル；　Ｒｒ（Ｚ５Ａ）同、２４、Ｒｒ（ひＢ）＝０．１）。

以下のように、化合物２５ＡをＮ−［Ｌ−２−イソブチル−３−メト牛ジカルボニルプロパ／イル］−Ｌ−１−リプトファン（６−フエニルメドキシカルボニルアミノーへキシル−１）アミド（２６Ａ＞に変換した。０．５５ｇ（１，４７ｍｍｏｌ）の２５Ａと０．２４ｇ　（１，４８ｍｍｏ　１）のＣＤＩ混合物を１ｍＬの２％ジメチルホルムアミド入り塩化メチレン中で、室温で０．　５時間攪拌し、０．　４２ｇ　（１，４７ｍｍｏｆ）の■を添加した。室温で一晩攪拌した後、混合物をクロロホルムで５０ｍＬに希釈し、２％硫酸−水素カリウム（２ｘｌＯｍｌ）、水（１０ｍｌ）、５％重炭酸ナトリウム（２Ｘ１０ｍｌ）、水（２ｘ　１０ｍ１）および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、そして硫酸マグネシウムで乾燥した。

溶媒を減圧下でエバポレートし、０．８ｇの粗２６Ａを得、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製したくシリカゲル；酢酸エチル／へ牛サン　２５：５）：収率５６％；Ｒｒ　（Ｅ）　コ０．５７゜この生成物２６Ａを実施例１の１人に置き換えると、同じ工程で標記化合物２７Ａを得、融点は１０２−１００℃であり、収率は４６％であった；　Ｒｒ　（Ｄ）１１０．６３゜（卦＆Ｔ−佑ら）実ＪＬＬＬ上Ｎ−Ｌ−２−イソブチル−３−Ｎｏ　−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル　−Ｌ−ト１ブトファンシクロへキシルアミド　２８Ａ　の−１シクロヘキシルアミンを実施例１Ｏの２３に置き換えると、同じ工程で標記の化合物２８人が得られ、融点は１９９−２０３℃であり、収率は４９％であった＋　Ｒｒ　（Ｄ）ｌＩｏ、　５ｉ。

実ｍ工Ｎ−シス−２−Ｎｏ−ヒドロキシカルボニルアミド−シクロヘキシルカルボニル　−し一トープトフ　ジメチルアミド　２９Ａ　Ｂ　の−１２ｇ（０，０１３ｍｏｌ）のシス−１，２−シクロヘキサン−ジカルボン酸無水物を１５ｍＬメタノール中で、５時間還流し、次いで減圧下でエバポレートして乾固し、２．４１ｇ（収率ｔｏｏ％）のシス−２−メトキシカルボニル−シクロへ牛サンカルボン酸を得た。これを実施例１の主に置き換えると、同じ工程で標記化合物が得られ、融点は１４０−１４４°Ｃであり、収率は３６％であった；　Ｒｒ　（Ｄ）＝ＩＯ，５３，０，４７゜実１１乳１」− Ｎ−トランス−２−Ｎｏ−ヒドロキシカルボニルアミド−シクロヘキシルカルボニル　−し一トープトフ　ジメチルアミド　３０Ａ　Ｂ　の（±）トランス−１，２−シクロへ牛サンジカルボン酸無水物を、実施例１２のシス−１，２−シクロへ牛すンジカル１５ｍＬメタノール中の０．３９５ｇ　（６，６ｍｍｏｌ）ボン酸無水物に置き換えると、同じ工程で標記化合物３０Ａ工旦が得られ、融点は１６７−１７４℃であり、収率は３７％であった；Ｒｒ（Ｄ）＝Ｏ１５７゜実Ｊ１肚上」工Ｎ−２−イソブチル−３−Ｎｏ　−ヒドロキシカルボニルアミド　−プロパノイル　−Ｌ−）１プトフ　ンエユ」−とと１」」製実施例１中の１人の調製と同様の方法で、実施例１０の１１人から、３１Ａを収率７５％（１２８ｍｇ）で調製し、酢酸エチルから泡状で単離した：　Ｒｒ（Ｆ）□０．５５．　ＭＳ−ＦＡＢ　Ｉｓ／ｚ）　（Ｍ’　＋Ｈ）。酢酸エチルで再結晶し、３１Ａの少量の試料は１１６−１２０℃の融点であった。

１監性土工Ｎ−Ｄ　Ｌ−２−イソブチル−３−カルボキシプロパノイル　−Ｌ−ト１ブトファン　６−アミノヘキシル−ｌアミド　３２Ａ　の− ０，４ｍＬの２Ｎ水酸化カリウム中の０．　５ｇ　（８，２４ｍｍｏｌ）の２６Ａのメタノール溶液混合物を室温で一晩攪拌し、減圧下でエバポレートして乾固した。残渣を水で１５ｍＬに希釈し、ＩＮの塩酸でｐＨ＝２まで酸性化した。２６への粗遊離酸を酢酸エチル（３ｘ１５ｍｌ）に溶解して有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、エバポレートして乾固し、０．４５ｇ（収率９２％）の２６Ａを、無色の泡状で得た。

Ｎ−シス−２−カルボキシ−シクロへキシルカルボニルの、ＬＬ人の遊離酸の混合物に、０．１２ｇの１０％パラジウムカーボンの存在下で室温で２時間、水素ガスをバブリングＬｒ”／ｒ／＋’１ＴＩＶＪ４ｒＯＯｖ＋１０．５ｍＬｍメジメチルホルムアミド中、２８１ｇ（１゜９７、５ｓ＋ｇ（０，２５ｇｎｏｌ）の１人（実施例１）の０．５ｍｌジメチルホルムアミド溶液に、２５．５ｍｇ（０，２５ｍｍｏｌ）の酢酸無水物および３７Ｂ（０，２５ＩＩＩＩｏｌ）の１．８ −ジアザビシクロ［５，４，ＯＦ　ウンデカン−７−二ン（ＤＢＵ）を室温で添加した。−晩装置した後、ＤＭＦを高真空下でエバボレートし、残渣を、酢酸エチルと２％硫酸−水素カリウムとの等容量混合物に溶解した。酢酸エチル層を、２％硫酸−水素カリウム、水、および塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そしてエバボレートして固体を得た。この固体を温酢酸エチル：ヘキサンの１：１混合物に溶解し、室温で放置して７ｔ＋ｇ（収率６６％）の固体生成物３７Ａを得た：　ｍｐｇ１８４−１８６℃：　Ｒｆ（Ｇ）−０，６８゜実ａＮ＝　インブチル−３−Ｎ′−ベンズオキシカルボニルアミド　−プロパノイル　−Ｌ−ト１ブトファンメチルアミド　３８Ａ　の− ３０、５１１ｇ（０，２５ｍｍｏｌ）の安息香酸の１１テトラヒドロフラン溶液に、４０．５ｍｇ（０，２５■ｍｏｌ）のカルボニルジイミダゾールを添加した。１０分後、１ｍｌジメチルホルムアミド中の９７ｍｇ（０，２５＋ｌ１ｌＯ１）の実施例１で得られた化合物１人を添加した。１０分後、反応混合物を高真空下でエバボレートして乾固し、酢酸エチルと水との等容量混合物に溶解した。酢酸エチル層を、５％重炭酸ナトリウム、水、２％硫酸−水素カリウム、水、および塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル層を少容量になるまでエバボレートし、５０１ｇ（４１％）の樟記化合物、３８Ａを得た：　ｍｐ＝１８７−１８７．５°Ｃ：　Ｆｒ（Ｇ）！０．５４゜宜ＪＬＬＬ上上記に示す方法を応用して、以下の本発明の化合物を合成した。

Ｅヒ○ＮＨＣＯＮＭｅ−ＣＭ２ＣＨ（ｉＢｕ）−Ｃｏ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥセＥｅＣＯＮＯＨ−ＣＭ２ＣＨ（ｉＢｕ＞−Ｃｏ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥヒＨＯＮＨＣＯＮ）ＩＣＨ（ｉＢｕ　）　Ｃｏ　−Ｌ　−ＴｒｐＮＨＭｅＨ２ＮＣＯＮ（ＯＨ）ＣＨ（ｉＢｕ）ＣＯ−Ｌ　−ＴｒｐＮＨＭｅＣＭ３ＣＯＮ　（ＯＨ）　ＣＨ（ｉＢｕ）　ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ（以下余白）尖ｍ “　のアーセイＫｏｒｔｙｌｅｖｉｃｚ　＆　Ｇａ１ａｒｄｙ、　Ｌ肚り江聾（１９９０）　３３：２６３−２７３に記載された通りに、ｐＨ６，５で合成チオールエステル基質を用いて、阻害剤を、粗製または精製ヒト繊維芽細胞コラゲナーゼに対してアッセイした。コラゲナーゼの濃度は１〜２ｎＭとした。実施例１〜１８の化合物が、ヒト皮膚繊維芽細胞由来の粗コラゲナーゼおよびゼラチナーゼ、化膿性ヒト痰由来の粗コラゲナーゼおよびゼラチナーゼを阻害する能力をこのアッセイで試験した。粗酵素調製物に関する結果を表１に示す。精製ヒト皮膚コラゲナーゼに対する５Ａのに１は０．４ｎＭであった。ヒトストロメリシンの阻害に関するアッセイを、Ｔｅａｈａｎ、Ｊ、ら、　’ｏｃｈｅｍ’ｓｔｒ　（１９Ｂ９）　銭：８４９７−１１５０１に記載されたように行った。

（以下余白）実］ＬＬ上アルカ１　のラビート　の　゛　の本発明の化合物の潰瘍を予防する能力は、Ｇｒｅｇｏｒｙ　５ｃｈｕｌｔｚ、　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｆｌｏｒｉｄａ、　Ｇａ１ｎｅｓｖｉｌｌｅ、　ＦＬによって行われた角膜アッセイによって確かめられている。

２０個のラビットの眼球を、直径１０ｍｍになるまでＩＮのＮａＯＨで６０秒間焼いた。１０個のコントロールの眼球に、ＡＭ８時からＰＭ６時までの２時間おきに低張性緩衝液を２滴ずつ滴下して処置し、夕方に０．５ｍＬの緩衝液を結膜下注射をして処置した。実験用の眼球は全く同様に処置されたが、緩衝剤に１ｍＬ当り４００μｇの阻害剤を加えて治療された。眼球を、潰瘍がないＯから角膜の穿孔に相当する５まで臨床的にスコアをつけた。図１は、２６日間の平均クリニカルスコアを示す。化合物５Ａは、角膜を穿孔から顕著に保護する。図２は、２６日間で穿孔しなかった角膜のパーセントを示す；化合物５Ａは１００％の保護を示す。

治療した角膜および治療していない角膜の組織学的試験によって以下のことがわかった。

ラビットの角膜の垂直切片を、以下の激しいアルカリ損傷後２８日間試験した。

アルカリ損傷は、麻酔したラビットの角膜を直径１２．５ｍｍのウェルで、６０秒間２Ｎの水酸化ナトリウムにさらして行われた。損傷の後、ラビットに、ＡＭ８時からＰＭ６時までの２時間おきに、２滴ずつ滴下して局部的に処置し、０．５ｍＬの式５Ａのコラゲナーゼ阻害剤または溶媒（５０ｍＭヘペス、抗生物質）を結膜下注射をして処置した。

コラゲナーゼ阻害剤で治療したラビットの角膜は、おそらく損傷していない周縁の角膜および強膜から移動した角膜実質細胞で再増殖し始めたラメラを示す。間質はまた、炎症細胞、おそらく損傷した角膜に移動したマクロファージも含有する。間質のラメラの細胞外マトリックスが破壊する証拠はほとんどな（、充分な細胞外マトリックスの破壊の証拠はない。この切片の上皮が角膜の表面を新たに覆っている。しかし下にある間質から上皮の切片が分離されたことによって証明されるように、この上皮は薄く付着している。角膜のこの部分の血管新生化の証拠はない。濁った角膜においては、内皮表面は再生せず、デスメ（Ｄｅｓｃｅ諷ｅｔ）膜は間質から分離している。この濁った角膜は、上皮の持続的で完全な再生が欠如し、そして充分な間質潰瘍も欠如している。

溶媒だけで処置した角膜は、間質マトリックスの広範囲の分解が主に出現し、そして大量の浸潤した炎症細胞の存在を示す。これらの炎症細胞はおそらくマクロファージおよび好中球である。間質ラメラは、この切片では支質の全深の約３分の２まで消化され、隣接する切片では、侵食がデスメ膜に起こる。間質は、浸潤した炎症細胞が最も多い端において、すり切れた外観を有するようである。間質を通る割断線は、細胞外マトリックスの一般的な弱化を示唆する。角膜のこの切片においては、血管新生化、上皮細胞、または内皮細胞の証拠はない。内皮細胞の断片は、前眼房液中のデスメ膜上に炎症細胞とともに存在している。角膜実質細胞が間質中で同定されることはほとんどない。この極微な切片は、細隙灯（Ｓｌｉｔ　ｌａｍｐ　ｍ１ｃｒｏｓｃｏｐｙ）顕微鏡検査の結果と大体一致している。

この検査では、角膜が広範囲の潰瘍および辺縁の血管新生化を有することが示された。

結局、これらの２切片の組織病理学により、潰瘍を予防する際のコラゲナーゼ阻害剤のおもな効果は、アルカリ損傷角膜中への浸潤性炎症細胞を減少させることにあることが示唆される。さらに、この切片により、コラゲナーゼ阻害剤で治療した角膜中の間質の再増殖が始まり、そして一過性の不完全な上皮の再生が、上皮の表面上に内皮の再生をともなわずに始まることが示唆される。

アＩＬ／力゛）苧へｆへ′緒のｅ軟ＦＩＧ。１ＦＩＧ、　２手続補正書１、事件の表示ＰＣＴ／ＵＳ９１１０８７２２２、発明の名称改良したマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤３、補正をする者事件との関係　特許出願人住所　アメリカ合衆国　カリフォルニア９４５０１、アラミーダ、アトランティックアベニュー　８６０名称　ブライコメラド　インコーホレイテッド（ほか２名）４、代理人住所　〒５４０大阪府大阪市中央区域見５、補正の対象明細書の実施例の欄および請求の範囲の欄６、補正の内容（１）明細書第５０頁第１行目の火痰匹旦をに１凰Ｕとする。

（２）請求の範囲を別紙のとおり補正する。

逍連匡ｌ【匝１、少なくとも１つの哺乳類マトリックスメタロプロテアーゼを阻害する化合物であって、次式を有する、化合物：またはここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）Ｄ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置損性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０１　ｌまたは２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨｌまたは、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはへテロ環状アミンの残基であり；Ｙは、Ｒ７０ＮＲ６ＣＯＮＲ６−１Ｒ６２ＮＣＯＮＯＲ７−１およびＲ６Ｃ０Ｎ０Ｒ７−からなる群から選択され、ここでそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり、Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＨ２−は、必要に応じて改変型異性体形態である。

２、請求項１に記載の化合物であって、Ｒ３はＨであり、および／またはすべてのＲ６はＨであり、およびＲ７はＨまたはアシルであり、および／またはＲ１はＨであり、および／またはＲ２はアルキル（３−８Ｃ）であり、および／またはＸはＮ）ＩＲ５または環状アミンまたはへテロ環状アミンの残基であり；および／またはＲ４は、１−（２−メチルナフチル）メチレン；１−キノリル　メチレン；１−ナフチルメチレン；２−ナフチル　メチレン；１−インキノリル　メチレン；３−イソキノリル　メチレン；３−チオナフチニル　メチレン；３−クマロニル　メチレン；　３−（５−メチルインドリル）メチレン；　３−（５−ヒドロキシインドリル）メチレン：　３−（２−ヒドロキシインドリル）メチレン；ビフェニル　メチレン；（３−インドリル）メチレン；および４−フェニルピリミジル　メチレン；およびその置換された型からなる群から選択され、および／またはｎ＝１である、化合物。

３、請求項２に記載の化合物であって、Ｒ２はイソブチル、２−メチルブチル、またはイソプロピルであり、および／またはＸはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はアルキル（１−４Ｃ）；置換されたアルキル（１つのヒドロキシル基で置換された１−４Ｃ）；アリールアルキル；または置換されたアルキル（フェニルメトキシカルボニルアミドで置換された２　−７Ｃ’）であり、および／またはＲ４は（３−インドリル）メチレンまたはそのＮ−アシル化された（１−５Ｃ）置換された型である、化合物。

４、以下からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：Ｅｔ−ＯＮＨＣＯＮＭｅ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−Ｃｏ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥヒＥｃＮＨＣＯＮＯＭｅ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−Ｃｏ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔｎ −ＰｒＣＯＮＯＥｌニーＣＭ２ＣＭ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ（２−−１７チ７し　）−ＮＨＥヒニヒＮＨＣＯＮＯＭｅ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ −Ａｌａ（２−ｊ７４）（７）−ＮＨＥｊＭｅＮＨＣＯＮＯＨ−Ｃ）（２ＣＨ（ｉＢｕ）−Ｃｏ−Ｌ−Ａｌａ（２−ブ７　ケ（Ｖ）−ＮＨＥヒＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ，ＣＨ（ｉＢｕ　）　−Ｃｏ　−Ｌ　−ＴｒｐＮＨＭｅ　；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）　−ＣＯ−Ｌ　−ＴｒｐＮＨＭｅ　；ＨＯＮＩＣＯＮＨＣＨ（ｉＢｕ　）　Ｃｏ　−Ｌ　−ＴｒｐＮＨＭｅ　；Ｈ２ＮＣ０Ｎ（ＯＨ）ＣＨ（ｉＢｕ）Ｃｏ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；Ｎ（ＣＨ）　ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）　Ｃｏ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；Ｈ２ＮＣ０Ｎ　（ＯＨ）　ＣＨ２ＣＨ２Ｃ）（（ｉＢｕ）　ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ　；ＣＨ３Ｃ０Ｎ　（ＯＨ）　ＣＩ（（ｉＢｕ）　ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮｌ（Ｍｅ　；ＣＨ３Ｃ０Ｎ（ＯＨ）　ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）　Ｃｏ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；　、ｆｉ・ｒ−Ｎ’ＣＢ５Ｃ０Ｎ　（ＣＨ）　ＣＨ２ＣＨ２ＣＭ　（ｉＢｕ）　ＣＯ−Ｌ　−ＴｒｐＮＨＭｅ。

５、放射性標識、抗原的に中性の担体、標的付はリガンド、または固体支持体である部分と結合した、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。

６、望ましくないマトリックスメタロプロテアーゼ活性によって特徴づけられる症状を治療するのに有効な薬学的組成物であって、薬学的に許容され得る賦形剤との混合物として、該マトリ・ｙクスメタロプロテアーゼ活性を阻害するの１こ有効な量の請求項１から４のいずれかに記載の化合物を含有する、組成物。

７、Ｉ昔　゛が　・　、なシヨ・・りおよびＡＲＤＳか゛なる　か゛される　−６艮工ｌ四Ｉ幻友惣。

８．インビトロまたは細胞培養でマトリックスメタロプロテアーゼ活性を阻害する方法であって、阻害されるマトリックスメタロプロテアーゼを、有効な量の請求項１から４のいずれかに記載の化合物と接触させることを包含する、方法。

９、請求項１から４のいずれかに記載の化合物に特異的に免疫活性がある抗体調製物。

１０、生物学的試料中にある請求項１から４のいずれかに記載の化合物の量を評価する方法であって、存在するなら抗体が化合物と腹合する条件下で、該試料を、請求項１から４のいずれかに記載の化合物に特異的に免疫活性がある抗体調製物と接触させる工程、および複合体があるかないかを検出する工程を包含する、方法。

１１、次式を有する化合物を調製する方法であって：ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、モしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）。−であり、ここでｐ＝＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０．１または２であり；ｍは、Ｏまたはｌであり；そしてｘ　＋ｔ、０Ｒ５ｔた１ｔＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨｌまたは、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；Ｒ７は低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり、またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはへテロ環状アミンの残基であり；Ｙは、Ｒ７０ＮＲ６ＣＯＮＲ６−であり、ここでそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＨ２−は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式３の化合物から式ｌの化合物を生成させ、そして式４の化合物から式２の化合物を生成させる条件下で、次式ここでＲはＨまたはアルキルであり、残りの置換基は上で定義された通りである：を有する化合物を、次式の化合物と反応させる工程を包含する：Ｒ７ｏＮＲ６Ｈ。

ここでＲ７およびＲ６は、上で定義された通りである。

１２、次式を有する化合物を調製する方法であって：ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、モしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）。−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０．　１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＲ５または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはへテロ環状アミンの残基であり；Ｙは、Ｒ７０ＮＲ６ＣＯＮＲ６−であり、ここでそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり、Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＨ２−は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式５の化合物から式ｌの化合物を生成させそして式６の化合物から式２の化合物を生成させる条件下で、次式を有する化合物（ここで指示された置換基は上で定義された通りである）をカルボニル化剤と反応させる工程：または続いて次式の化合物と反応させる工程、を包含する：Ｒ７０ＮＲ６Ｈ。

ここでＲ７およびＲ６は、上で定義された通りである。

１３、次式を有する化合物を調製する方法であまたはここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８°Ｃ）であり、モしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）Ｄ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０．１または２であり；ｍは、０またはｌであり；そしてｘは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨｌまたは、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（５−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはへテロ環状アミンの残基であり；そしてそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり、Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＨ２ −は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式１の化合物が式７の化合物から得られるか、または式２の化合物が式８の化合物から得られる条件下において、次式を有する化合物をテトライソシアン酸ケイ素と反応させる工程を包含する：またはここで指示された置換基は上で定義された通りである。

１４、次式を有する化合物を調製する方法であここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、モしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに＝（ＣＲ２）。−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０．１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ’であり、ここでＲ５はＨｌ　または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはへテロ環状アミンの残基であり；それぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり、Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＨ２ −は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式１の化合物が式９の化合物から得られるか、または式２の化合物が式１ｏの化合物から得られる条件下において、次式を有する化合物（ここで指示された置換基は上で定義された通または次式を有する化合物と、反応させる工程を包含する：Ｒ６Ｃ０−Ｌ、ここでＬは脱離基であり、Ｒ６は上で定義された通りである。

１５、次式を有する化合物を調製する方法であつて：ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）Ｄ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０、ｌまたは２であり；ｍは、０またはｌであり；そしてＸｌｉ、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨｌまたは、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはへテロ環状アミンの残基であり：そしてＲ６は低級アルキル（１−４Ｃ）であり、Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−〇〇ＮＲ３−は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式ｌの化合物が式７の化合物から得られるか、または式２の化合物が弐８の化合物から得られる条件下において、次式を有する化合物（ここで指示された置換基は上で定義された通り）を：次式を有する化合物と反応させる工程を包含するここで、Ｒ６はアルキル（１− ４Ｃ’）である。

１６、次式を有する化合物を調製する方法であまたはここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、モしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）Ｄ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０．　１または２であり；ｍは、０またはｌであり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ’であり、ここでＲ５はＨｌまたは、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり：またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはへテロ環状アミンの残基であり；そしてそれぞれのＲ６は独立して、低級アルキル（１−４Ｃ）であり、Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＲ’−は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式１の化合物が式７の化合物から得られるか、または式２の化合物が式８の化合物から得られる条件下において、次式を有する化合物（ここで指示された置換基は上で定義された通り）をカルボン酸の活性化型と反応させる工程二またはそして次式を有する化合物と反応させる工程、を包含する：Ｒ６２ＮＨ。

ここで、それぞれのＲ８は独立して、アルキル（１−４Ｃ）である。

国際調査報告ＰＣ？／Ｕ３９１１０８７２２ＰＣＴ／υ！９９１１０１１７２２フロントページの続き（５１）Ｉｎｔ、Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３９／３９５　Ｄ　９２８４−４ＣＣ０７Ｃ２７１１０６Ｃ０７Ｄ　２０９／２０　９２８４−４Ｃ４０１／１２　２０９　７６０２−４Ｃ（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＴ、ＬＵ、ＮＬ、ＳＥ）、０Ａ（ＢＦ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、ＧＮ、ＭＬ、ＭＲ，ＳＮ、ＴＤ、ＴＧ）、ＡＴ、ＡＵ、ＢＢ、ＢＧ、ＢＲ，ＣＡ、ＣＨ，Ｃ３，ＤＥ、ＤＫ。

ＥＳ、ＦＩ、ＧＢ、ＨＵ、ＪＰ、ＫＰ、ＫＲ，ＬＫ、ＬＵ、ＭＣ，ＭＧ、ＭＮ、ＭＷ、ＮＬ、Ｎｏ、ＰＬ、ＲＯ、ＳＤ、ＳＥ、ＳＵＦＩ（７２）発明者　ガラ−ディ、リチャード　イー。

アメリカ合衆国　コネチカット　０６４３７ギルフオード、フォーフナ−ドライブ（７２）発明者　グロベルニー、ダミアンオーストラリア国　ビクトリア　３０８４　ロザンナ、ブラッシー　アベニュー　４３（７２）発明者　マッサー、ジョン　エイチ。

オーストラリア国　３０８５　マクリオド　ウェスト、ビクトリア　アベニュー　１０

Claims

【特許請求の範囲】

１．少なくとも１つの哺乳類マトリックスメタロプロテアーゼを阻害する化合物であって、次式を有する、化合物：▲数式、化学式、表等があります▼（１）または ▲数式、化学式、表等があります▼（２）ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）ｐ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ピシクロアリールメチレンであり；ｎは、０、１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨ、または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基であり；Ｙは、Ｒ７ＯＮＲ６ＣＯＮＲ６−、Ｒ６２ＮＣＯＮＯＲ７−、およびＲ６ＣＯＮＯＲ７−からなる群から選択され、ここでそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＲ３−は、必要に応じて改変型異性体形態である。
２．請求項１に記載の化合物であって、Ｒ３はＨであり、および／またはすべてのＲ６はＨであり、およびＲ７はＨまたはアシルであり、および／またはＲ１はＨであり、および／またはＲ２はアルキル（３−８Ｃ）であり、および／またはＸはＮＨＲ５または環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基であり；および／またはＲ４は、１−（２−メチルナフチル）メチレン；１−キノリル　メチレン；１−ナフチル　メチレン；２−ナフチル　メチレン；１−イソキノリル　メチレン；３−イソキノリル　メチレン；３−チオナフテニル　メチレン；３−クマロニル　メチレン；３−（５−メチルインドリル）メチレン；３−（５−ヒドロキシインドリル）メチレン；３−（２−ヒドロキシインドリル）メチレン；ビフェニル　メチレン；（３−インドリル）メチレン；および４−フェニルピリミジル　メチレン；およびその置換された型からなる群から選択され、および／またはｎ＝１である、化合物。
３．請求項２に記載の化合物であって、Ｒ２はイソブチル、２−メチルブチル、またはイソプロピルであり、および／またはＸはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はアルキル（１−４Ｃ）；置換されたアルキル（１つのヒドロキシル基で置換された１−４Ｃ）；アリールアルキル；または置換されたアルキル（フェニルメトキシカルボニルアミドで置換された２−７Ｃ）であり、および／またはＲ４は（３ −インドリル）メチレンまたはそのＮ−アシル化された（１−５Ｃ）置換された型である、化合物。
４．以下からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：ＥｔＯＮＨＣＯＮＭｅ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔＥｔＣＯＮＯＨ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−ＲＲｐ−ＮＨｔｎ−ＰｒＣＯＮＯＥｔ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨｅＥｔＥｔＮＨＣＯＮＯＭｅ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔＭｅＮＨＣＯＮＯＨ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔＥｔＯＮＨＣＯＮＭｅ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−ＬＡｌａ（２−ナフチル）−ＮＨＥｔＥｔＣＯＮＯＨ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ（２−ナフチル）−ＮＨＥｔｎ−ＰｒＣＯＮＯｔ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ（２−ナフチル）−ＮＨＥｔＥｔＮＨＣＯＮＯＭｅ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ａｌａ（２−ナフチル）−ＮＨＥｔＭｅＮＨＣＯＮＯＨ−ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ− Ｌ−Ａｌａ（２−ナフチル）−ＮＨＥｔＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ） −ＣＯ−Ｌ−ＴｒＰＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）− ＣＯ−Ｌ−ＴｒＰＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ（ｉＢｕ）ＣＯ−Ｌ−ＴｒＰＮＨＭｅ；Ｈ２ＮＣＯＮ（ＯＨ）ＣＨ（ｉＢｕ）ＣＯ−Ｌ−ＴｒＰＮＨＭｅ；Ｎ（ＯＨ）ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；Ｈ２ＮＣＯＮ（ＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；ＣＨ３ＣＯＮ（ＯＨ）ＣＨ（ｉＢｕ）ＣＯ−Ｌ−ＴｒＰＮＨＭｅ；ＣＨ３ＣＯＮ（ＯＨ）ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）ＣＯ−Ｌ−ＴｒＰＮＨＭｅ；およびＣＨ３ＣＯＮ（ＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ｉＢｕ）ＣＯ−Ｌ−ＴｒＰＮＨＭｅ。
５．放射性標識、抗原的に中性の担体、標的付けリガンド、または固体支持体である部分と結合した、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。
６．望ましくないマトリックスメタロプロテアーゼ活性によって特徴づけられる症状を治療するのに有効な薬学的組成物であって、薬学的に許容され得る賦形剤との混合物として、該マトリックスメタロプロテアーゼ活性を阻害するのに有効な量の請求項１から４のいずれかに記載の化合物を含有する、組成物。
７．望ましくないマトリックスメタロプロテアーゼ活性によって特徴づけられる症状を治療するための、請求項１から４のいずれかに記載の化合物またはその薬学的組成物の使用であって、ここで該症状が胃潰瘍、表面的な創傷、表皮水疱症、皮膚癌、天庖瘡、敗血症性ショックおよびＡＲＤＳからなる群から選択される、使用。
８．インビトロまたは細胞培養でマトリックスメタロプロテアーゼ活性を阻害する方法であって、阻害されるマトリックスメタロプロテアーゼを、有効な量の請求項１から４のいずれかに記載の化合物と接触させることを包含する、方法。
９．請求項１から４のいずれかに記載の化合物に特異的に免疫活性がある抗体調製物。
１０．生物学的試料中にある請求項１から４のいずれかに記載の化合物の量を評価する方法であって、存在するなら抗体が化合物と複合する条件下で、該試料を、請求項１から４のいずれかに記載の化合物に特異的に免疫活性がある抗体調製物と接触させる工程、および複合体があるかないかを検出する工程を包含する、方法。
１１．次式を有する化合物を調製する方法であって：▲数式、化学式、表等があります▼（１）または ▲数式、化学式、表等があります▼（２）ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）ｐ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０、１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨ、または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；Ｒ７は低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり、またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基であり；Ｙは、Ｒ７ＯＮＲ６ＣＯＮＲ６−であり、ここでそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＲ３ −は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式３の化合物から式１の化合物を生成させ、そして式４の化合物から式２の化合物を生成させる条件下で、次式 ▲数式、化学式、表等があります▼（３）または ▲数式、化学式、表等があります▼（４）ここでＲはＨまたはアルキルであり、残りの置換基は上で定義された通りである；を有する化合物を、次式の化合物と反応させる工程を包含する：Ｒ７ＯＮＲ６Ｈ、ここでＲ７およびＲ６は、上で定義された通りである。
１２．次式を有する化合物を調製する方法であって；▲数式、化学式、表等があります▼（１）または ▲数式、化学式、表等があります▼（２）ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）ｐ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ピシクロアリールメチレンであり；ｎは、０、１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨ、または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基であり；Ｙは、Ｒ７ＯＮＲ６ＣＯＮＲ６−であり、ここでそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＲ３ −は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式５の化合物から式１の化合物を生成させそして式６の化合物から式２の化合物を生成させる条件下で、次式を有する化合物（ここで指示された置換基は上で定義された通りである）をカルボニル化剤と反応させる工程：▲数式、化学式、表等があります▼（５）または ▲数式、化学式、表等があります▼（６）続いて次式の化合物と反応させる工程、を包含する：Ｒ７ＯＮＲ６Ｈ、ここでＲ７およびＲ６は、上で定義された通りである。
１３．次式を有する化合物を調製する方法であって：▲数式、化学式、表等があります▼（１）または ▲数式、化学式、表等があります▼（２）ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）ｐ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ピシクロアリールメチレンであり；ｎは、０、１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨ、または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基であり；そしてそれぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＲ３−は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式１の化合物が式７の化合物から得られるか、または式２の化合物が式８の化合物から得られる条件下において、次式を有する化合物をテトライソシアン酸ケイ素と反応させる工程を包含する： ▲数式、化学式、表等があります▼（７）または ▲数式、化学式、表等があります▼（８）ここで指示された置換基は上で定義された通りである。
１４．次式を有する化合物を調製する方法であって：▲数式、化学式、表等があります▼（１）または ▲数式、化学式、表等があります▼（２）ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）ｐ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ビシクロアリールメチレンであり；ｎは、０、１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨ、または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基であり；それぞれのＲ６は独立して、Ｈまたは低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＲ３−は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式１の化合物が式９の化合物から得られるか、または式２の化合物が式１０の化合物から得られる条件下において、次式を有する化合物（ここで指示された置換基は上で定義された通り）を、 ▲数式、化学式、表等があります▼（９）または ▲数式、化学式、表等があります▼（１０）次式を有する化合物と、反応させる工程を包含する：Ｒ６ＣＯ−Ｌ、ここでＬは脱離基であり、Ｒ６は上で定義された通りである。
１５．次式を有する化合物を調製する方法であって：▲数式、化学式、表等があります▼（１）または ▲数式、化学式、表等があります▼（２）ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）ｐ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ピシクロアリールメチレンであり；ｎは、０、１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨ、または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基であり；そしてＲ６は低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＲ３−は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式１の化合物が式７の化合物から得られるか、または式２の化合物が式８の化合物から得られる条件下において、次式を有する化合物（ここで指示された置換基は上で定義された通り）を： ▲数式、化学式、表等があります▼（７）または ▲数式、化学式、表等があります▼（８）次式を有する化合物と反応させる工程を包含する：Ｒ６ＮＣＯ、ここで、Ｒ６はアルキル（１−４Ｃ）である。
１６．次式を有する化合物を調製する方法であって：▲数式、化学式、表等があります▼（１）または ▲数式、化学式、表等があります▼（２）ここでそれぞれのＲ１は独立して、Ｈまたはアルキル（１−８Ｃ）であり、そしてＲ２はアルキル（１−８Ｃ）であり、またはここで隣接するＲ１およびＲ２はともに−（ＣＨ２）ｐ−であり、ここでｐ＝３−５であり；Ｒ３は、Ｈまたはアルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ４は、融合または結合した、無置換性または置換性ピシクロアリールメチレンであり；ｎは、０、１または２であり；ｍは、０または１であり；そしてＸは、ＯＲ５またはＮＨＲ５であり、ここでＲ５はＨ、または、置換性または無置換性のアルキル（１−１２Ｃ）、アリール（６−１２Ｃ）、アリールアルキル（６−１６Ｃ）であり；またはＸは、アミノ酸残基またはそのアミドであり；またはＸは、環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基であり；そしてそれぞれのＲ６は独立して、低級アルキル（１−４Ｃ）であり；Ｒ７は、低級アルキル（１−４Ｃ）またはアシル基であり；そしてここで−ＣＯＮＲ３−は、必要に応じて改変型異性体形態であり、該方法は、式１の化合物が式７の化合物から得られるか、または式２の化合物が式８の化合物から得られる条件下において、次式を有する化合物（ここで指示された置換基は上で定義された通り）をカルボン酸の活性化型と反応させる工程： ▲数式、化学式、表等があります▼（７）または ▲数式、化学式、表等があります▼（８）そして次式を有する化合物と反応させる工程、を包含する：Ｒ６２ＮＨ、ここで、それぞれのＲ６は独立して、アルキル（１−４Ｃ）である。