JPH0657652B2

JPH0657652B2 - 皮膚老化防止化粧料

Info

Publication number: JPH0657652B2
Application number: JP60160456A
Authority: JP
Inventors: 忠丈小川; 隆安部
Original assignee: 鐘紡株式会社
Priority date: 1985-07-19
Filing date: 1985-07-19
Publication date: 1994-08-03
Anticipated expiration: 2009-08-03
Also published as: JPS6219511A

Description

【発明の詳細な説明】（発明の分野）本発明は皮膚老化防止化粧料（皮膚の老化防止に用いる
皮膚化粧料）に関する。

更に詳しくは、皮膚老化防止効果（荒れ肌改善効果、角
質改善効果、ターンオーバー速度を早くする効果、美肌
効果等）の優れた皮膚化粧料に関する。

（従来技術）老化皮膚とは、乾燥して滑らかさのない荒れ肌で、角質
細胞剥離現象が認められる皮膚である。そして老化皮膚
は、ターンオーバー速度が遅く、また皮膚に老化防止効
果が付与発現するとターンオーバー速度が早くなると言
われている。

本出願人は、先に、ビタミンＥオロチン酸エステル、並
びにγ−アミノ酪酸系化合物は、皮膚の末梢血管拡張作
用により皮膚機能を亢進し、老化防止効果を有すること
を見出し、提案した（特公昭５２−２９７９号および特
公昭５８−２６７２６号公報）。

また、ジイソプロピルアミンジクロロアセテートは、皮
膚組織賦活作用により皮膚機能を亢進し、同様に皮膚老
化防止効果を有することを見出し、提出した。（特開昭
５３−１９６５２８号公報）。

しかしながら、それらの効果はいずれも遅効性で、クリ
ームの場合では６ケ月後に、ローションの場合は３ケ月
後に効果が現われるというように、充分満足し得るもの
ではなく、改良の余地を残していた。

（発明の開示）本発明者等は、この難点を改良せんとして鋭意研究した
結果、皮膚化粧料基剤の中に、後記の上皮成長因子（Ep
idermal Growth Factor 、以下ＥＧＦと略記する）と、
γ−アミノ酪酸，ビタミンＥオロチン酸エステル，ジイ
ソプロピルアミンジクロロアセテートの中から選らばれ
た少なくとも１つの化合物とを配合する場合は、両者に
よる相乗効果によって、優れた皮膚老化防止効果（荒れ
肌改善効果、角質改善効果に優れ、ターンオーバー速度
を早くする効果）が、使用開始後１〜２ケ月目という極
く短時間に発現し、かつ持続する速効性の皮膚老化防止
化粧料が得られることを見出し、本発明を完成した。

（発明の目的）測ち、本発明は、優れた皮膚老化防止効果（荒れ肌改善
効果、角質改善効果に優れ、ターンオーバー速度を早く
する効果、美肌効果等）を有する皮膚老化防止化粧料を
提供するにある。

（発明の構成）本発明は、ＥＧＦと、γ−アミノ酪酸，ビタミンＥオロ
チン酸エステル，ジイソプロピルアミンジクロロアセテ
ートより選択された少なくとも１つの化合物とを皮膚化
粧料基剤に配合してなる皮膚老化防止化粧料である。

（構成の具体的な説明）本発明に係るＥＧＦは、ヒト，マウス，ラット，ウサ
ギ，ウマ，ウシ，ヒツジ等の哺乳動物の顎下腺，甲状
腺，膵，腎，血漿，唾液，尿等広範な器管或いは体液に
存在するが、特にマウスの顎下腺（０．３〜１μｇ／m
l）、ヒトの尿（２５〜２５０ｎｇ／ml）に高濃度に存
在するペプチドホルモンの一種である。〔「細胞の成長
因子」第２０〜３０頁、朝倉書店出版、１９８４年参
照〕ＥＧＦは上記のマウス顎下腺またはヒトの尿から抽出精
製して得られるが、近年では微生物（大腸菌等）による
醗酵生産物より抽出することも可能である。例えば、マ
ウスの顎下腺からＥＧＦを抽出精製して得る方法は下記
の実験例に示すごとくである。〔ジャーナルオブバ
イオロジカルケミストリー，第２３７巻，第１５５２〜
１５６２頁（Ｊ，Biol,Chem,Vol１２３７；１５５５〜
１５６２）参照〕（実験例−１）オス成熟マウス（体重２５ｇ以上）１５０匹より採
取した顎下腺２２ｇに蒸留水２００mlを加えてホモミキ
サーで粉砕処理した後、０〜３℃の温度で１０分間遠心
分離して抽出液を得る。

この抽出液に抗生物質であるストレプトマイシンを
添加し、ＰＨ値を６．８〜７．１に調整した後、０℃の
温度で一夜放置し、次いで、５分間遠心分離して抽出液
を得る。

この抽出液に１００ｇの固体硫酸アンモニウムを加
え、０℃の温度で３０分間静置した後、遠心分離して沈
殿物を得る。

この沈殿物を１５mlの蒸留水に懸濁させた溶液を蒸
留水中で透析（２４時間で２の蒸留水を５回交換）し
た後、沸騰水浴中に５分間静置し、次いで冷却して１０
分間遠心分離処理して抽出液を得る。

この抽出液を上記項と同様に２４時間透析した
後、カルボキシメチルセルロースカラムを用い、ＰＨ値
４．２の０．０１モル濃度の酢酸ナトリウム緩衝液を流
出液として、２８０ｎｍにおける吸光度が高い分画を集
める。次いで上記項と同様に２４時間透析した後、減
圧乾燥して目的とするマウスのＥＧＦ６．５mgを得た。

上記（実験例−１）で得られたマウスＥＧＦは下式に示
すごとく、両末端がアスパラギンとアルギニンである５
３個のアミノ酸からなるペプチドであり、分子量は６．
０４５、等電点（ＰＩ）は４．６、吸光係数（ＥＣ）は
３０．９であった。また、分子内に３ケ所のＳ−Ｓ結合
が存在することが確認された。

（マウスＥＧＦアミノ酸一次構造） Asn−Ser−Tyr−Pro−Gly−Cys−Pro−Ser−Ser−Tyr−
Asp−Gly−Tyr−Cys−Leu−Asn−Gly−Gly−Val−Cys−
Met−His−Ile−Glu−Ser−Leu−Asp−Ser−Tyr−Thr−
Cys−Asn−Cys−Val−Ile−Gly−Tyr−Ser−Gly−Asp−
Arg−Cys−Gln−Thr−Arg−Asp−Leu−Arg−Trp−Trp−
Glu−Leu−Arg 尚、式中の３文字は第２表に示す通りアミノ酸の略号で
ある。

（実験例−２）ヒトの尿１０Klを濃縮したものより、通常の方法でアセ
トンを溶媒として抽出して尿蛋白１００ｇを得た。

この尿蛋白１００ｇを蒸留水４００ml中に懸濁させた懸
濁液を得て、この懸濁液を（実験例−１）の項で得た
抽出液に替える他は（実験例−１）の〜の項の工程
と同様にして、ヒトＥＧＦ５．５mgを得た。

上記（実験例−２）で得られたヒトＥＧＦは下式に示す
ごとく、マウスＥＧＦと同様に、両末端がアスパラギン
とアルギニンである５３個のアミノ酸からなるペプチド
であり、分子量は、６，２０１等電点（ＰＩ）は４．
５、また、分子内に３ケ所のＳ−Ｓ結合が存在すること
も確認された。

（ヒトＥＧＦアミノ酸一次構造） Asn−Ser−Asp−Ser−Glu−Cys−Pro−Leu−Ser−His−
Asp−Gly−Tyr−Cys−Leu−His−Asp−Gly−Val−Cys−
Met−Tyr−Ile−Glu−Ala−Leu−Asp−Lys−Tyr−Ala−
Cys−Asn−Cys−Val−Val−Gly−Tyr−Ile−Gly−Glu−
Arg−Cys−Gln−Tyr−Arg−Asp−Leu−Lys−Trp−Trp−
GLu−Leu−Arg 尚、式中の３文字に関しては、第２表に示す他に、Lys
はリジン、Ala はアラニンである。

本発明者等は、ＥＧＦは、組織培養を用いた実験によっ
て１ｎｇ程度のごとく微量でも多彩な細胞に対して増殖
と分化を促進することが知られている〔前記「細胞の成
長因子」参照〕ことに注意し、マウス及びヒトＥＧＦの
１μｇ／ml水溶液の各々を荒肌を訴える女性３０名の上
腕部に朝夕２回連続３ケ月間塗布した結果、改善効果が
認められた。

本発明に係る皮膚賦活成分であるγ−アミノ酪酸、ビタ
ミンＥオロテート及びジイソプロピルアミンジクロロア
セテートに公知の化合物であって、各々に関しては前記
公報に詳細に記載されている。

本発明の化粧料は、前記ＥＧＦとγ−アミノ酪酸，ビタ
ミンＥオロチン酸エステル，ジイソプロピルアミンジク
ロロアセテートの少くとも１つをクリーム，乳液，ロー
ション等の基剤に直接添加するか、またはそれらの化合
物を油相成分，水相成分，アルコール等の溶剤等に溶解
して配合し、乳化、混合、分散、溶解、可溶化などの処
理を行なうことによって調製される。化粧料中に配合さ
れた前記のγ−アミノ酪酸，ビタミンＥオロチン酸エス
テル，ジイソプロピルアミンジクロロアセテートは、安
定で皮膚に吸収されて末梢血管拡張作用により皮膚機能
を亢進し、肌の皺を防止し、肌理（きめ）こまかなかつ
しっとりした皮膚にすると共に、優れた皮膚老化防止効
果（荒れ肌改善効果、角質改善効果に優れ、ターンオー
バー速度を早める効果）をＥＧＦと相乗的にかつ短時間
に発現し、持続する等、顕著な効果を奏し得る。

ＥＧＦの配合量は、本発明の化粧料の総量を基準として
0.0001〜０．１重量％（以下ｗｔ％と略記する）、γ−
アミノ酪酸の配合量は同様に0.01〜１ｗｔ％、ビタミン
Ｅオロテートの配合量は０．０１〜１ｗｔ％、ジイソプ
ロピルアミンジクロロアセテートの配合量は０．０１〜
１．０ｗｔ％であればよい。これらの各々の配合量の上
限を超えても、その超えた配合量に見合った効果は期待
出来ず、また、下限未満の配合量では本発明の目的を達
成することができない。

尚、本発明の皮膚化粧料には上記の他に色素、香料、防
腐剤、界面活性剤、顔料、抗酸化剤等を本発明の目的を
達成する範囲内で適宜配合することができる。

以下、実施例について説明する。

尚、実施例に記載の角質層のターンオーバー速度測定方
法、荒れ肌改善効果の測定試験法、角質改善効果の測定
試験法、官能テストは下記の通りである。

(1) 角質層のターンオーバー速度測定方法螢光色礎のダンシルクロライドを白色ワセリン中に５ｗ
ｔ％配合した軟膏を作り、被検者の前腕部の皮膚に２４
時間閉塞貼布し、角質層にダンシルクロライドを浸透結
合させる。その後同じ部位に１日２回（朝、夕）被検試
料を塗布し、毎日ダンシルクロライドの螢光をしらべ、
その螢光が消滅するまでの日数を皮膚角質層のターンオ
ーバー速度とした。なお、通常の皮膚角質層のターンオ
ーバー速度は、１４〜１６日であるが、老化した皮膚に
おいては１８日前後にのびる。それに対して老化防止効
果が現れると１２日前後にまで短縮される。

(2) 荒れ肌改善効果の測定試験法下脚に荒れ肌を有する中高年被験者２０名を対象として
４週間連続塗布効果を調べた。被験者の左側下脚試験部
位に１日２回約１ｇのクリームを塗布し、試験開始前お
よび終了後の皮膚の状態を第３表の基準により測定し
た。右側下脚は試料を塗布せず対照とした。

第３表皮膚乾燥度の判定基準 − ：正常 ± ：軽微乾燥、落屑なし＋：乾燥、落屑軽度＋＋：乾燥、落屑中等度＋＋＋：乾燥、落屑顕著試験前後の試験部位と対照部位の判定結果を比較し、皮
膚乾燥度が２段階以上改善された場合（例えば＋→−、
＋＋→±）を「有効」、１段階改善された場合を「やや
有効」、変化がなかった場合を「無効」とした。判定結
果は「有効」、「やや有効」となった被験者の人数で示
した。

(3) 角質改善（角質細胞の抗剥離性増大）効果の測定
試験法前述の荒れ肌改善測定試験開始前および終了後の被験部
皮膚にスコッチテープ（ニチバンメンディングテープ）
を接着し、これを剥離した時テープに付着した角質細胞
の状態を走査型電子顕微鏡によって詳細に調べ、第４表
の基準によって皮膚角質細胞抗剥離性を分離し、角質改
善効果を求めた。

第４表角質改善効果（角質細胞抗剥離性増大）の判定
基準評価点１：スケールを認めず〃２：小スケール点在〃３：小〜中スケール顕著〃４：大スケール顕著第２表は４週間連続塗布後の試験部位の評価点と対照部
位のそれとの差が２点以上の場合を「有効」、１点の場
合を「やや有効」、０点の場合を「無効」とした。判定
結果は「有効」、「やや有効」となった被験者の人数で
示した。

(4) 官能テスト（美肌効果試験）荒れ肌、小じわ、乾燥肌等を訴える女子被試験者（３５
〜５５才）２０人に試料を１日２回（朝夕）連続３ケ月
間塗布して、１，２，３ケ月後の効果を評価した。評価
結果は、皮膚の湿潤性、平滑性、弾力性の各項目に対し
て、「皮膚に潤いが生じた」，「皮膚が滑らかになっ
た」，「皮膚に張りが生じた」と回答した人数で示し
た。

実施例１〜６，比較例１〜５〔スキンクリーム〕前記実験例−１，−２で得たマウス及びヒトＥＧＦと、
皮膚賦活成分であるγ−アミノ酪酸，ビタミンＥオロテ
ート，ジイソプロピルアミンジクロロアセテートを第５
表に記載の通りに配合して各々のスキンクリームを調製
し、前記の諸試験を実施した。

尚、γ−アミノ酪酸はＧＡＢＡ，ビタミンＥオロテート
はＶＥＯＴ，ジイソプロピルアミンジクロロアセテート
はＤＡＤＡと略記する。

(1) 組成 (2) 調製法 (A)成分及び(B)成分を各々８０℃に加熱溶解した後混合
して、攪拌しつつ３０℃迄冷却して各スキンクリームを
調製した。尚(C)成分のγ−アミノ酪酸及びジイソプロ
ピルアミンジクロロアセテートは(B)成分中に溶解し、
ビタミンＥオロテートは(A)成分中に溶解した。

(3) 特性各スキンクリームの諸試験を実施した結果を第５表に記
載した。

第５表に示すごとく、比較例１−５のＥＧＦ或いは皮膚
賦活成分のみを配合したスキンクリームは諸特性に於い
て充分なる効果は得られず、本発明の実施例１〜６のＥ
ＧＦとＧＡＢＡ，ＶＥＯＴ，ＤＡＤＡの少くとも１つを
配合したスキンクリームは諸特性に於いて顕著な効果が
見られ、官能テストでは試料塗布後１〜２ケ月で優れた
美肌効果を示した。

実施例７〜１０，比較例６〔スキンローション〕実施例１と同様に、下記の原料成分を用いて各々のスキ
ンローションを調製し諸特性の結果を第６表に記載し
た。

原料成分である、エタノール１０ｗｔ％、グリセリン５
ｗｔ％、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート
（可溶化剤）０．２ｗｔ％、防腐剤０．０１ｗｔ％、香
料０．０１ｗｔ％、および着色剤適量に精製水を残量と
して加えて総量を１００ｗｔ％とし、常法に従ってスキ
ンローションとした（比較例６）。次に、この比較例２
のスキンローションと同一の原料成分に第６表の通りの
原料成分を添加し、精製水を残量として加えて総量を１
００ｗｔ％に調整し、同じく常法に従ってスキンローシ
ョンを調製した（実施例７〜１０）。

第６表に示すごとく本発明の実施例７〜１０のスキンロ
ーションは諸特性に於いて優れた効果を示し、ＥＧＦの
配合量は0.0001〜０．１ｗｔ％の範囲で本発明の目的を
達成し得る。

（発明の効果）以上記載のごとく、本発明は、荒れ肌改善効果、角質改
善効果、ターンオーバー速度を早くする効果に優れると
共に、顕著な美肌効果を有する皮膚老化防止化粧料を提
供することは明らかである。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】上皮成長因子と、γ−アミノ酪酸，ビタミ
ンＥオロチン酸エステル，ジイソプロピルアミンジクロ
ロアセテートより選択された少なくとも１つの化合物と
を皮膚化粧料基剤に配合してなる皮膚老化防止化粧料。