JPH0667314B2 - 脂肪族塩素化合物の微生物分解方法及びその微生物 - Google Patents
脂肪族塩素化合物の微生物分解方法及びその微生物Info
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- JPH0667314B2 JPH0667314B2 JP2093884A JP9388490A JPH0667314B2 JP H0667314 B2 JPH0667314 B2 JP H0667314B2 JP 2093884 A JP2093884 A JP 2093884A JP 9388490 A JP9388490 A JP 9388490A JP H0667314 B2 JPH0667314 B2 JP H0667314B2
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- Biological Treatment Of Waste Water (AREA)
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- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
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Description
【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は特定の固定化微生物による飽和及び／又は不飽
和脂肪族塩素化合物の分解方法及びその方法に用いる新
規固定化微生物に関するものである。
和脂肪族塩素化合物の分解方法及びその方法に用いる新
規固定化微生物に関するものである。
更に詳しくは工場からの排水又は排ガス中、或いは土壌
中等に含まれるトリクロロエチレンのような揮発性脂肪
族塩素化合物の微生物による分解除去方法に関するもの
である。
中等に含まれるトリクロロエチレンのような揮発性脂肪
族塩素化合物の微生物による分解除去方法に関するもの
である。
［従来の技術］ 工場からの排水又は排ガス、或いは土壌中には各種有機
塩素化合物が混入されており、近時、環境汚染等の問題
から、これらの有効な除去が注目されるところとなって
いる。
塩素化合物が混入されており、近時、環境汚染等の問題
から、これらの有効な除去が注目されるところとなって
いる。
殊にトリクロロエチレン（TCE）は、IC産業等で用いら
れている難分解性化合物であり、発ガン性を有し、地下
水汚染物質として問題になっている。
れている難分解性化合物であり、発ガン性を有し、地下
水汚染物質として問題になっている。
従来、排水中或いは排ガス中から、トリクロロエチレン
のような有機塩素化合物を除去するには、活性炭による
吸着除去法等が行われてきたが、これらは多量の吸着剤
や特別の装置及び設備を必要とするものであり、必ずし
も効率的かつ経済的な除去手段とはなっていない。
のような有機塩素化合物を除去するには、活性炭による
吸着除去法等が行われてきたが、これらは多量の吸着剤
や特別の装置及び設備を必要とするものであり、必ずし
も効率的かつ経済的な除去手段とはなっていない。
一方、有機塩素系化合物の効率的かつ簡便な分解除去手
段として、微生物を用いる方法もいくつか試みられ報告
されている。
段として、微生物を用いる方法もいくつか試みられ報告
されている。
例えば、ロドトルラ属、クラドスポリウム属、キャンデ
イダ属、サッカロミセス属及びストレプトミセス属の微
生物等を用いてポリクロル化されたビフェニルのような
有機塩素化合物を分解除去する例（特開昭48−98085
号、特開昭48−98086号、特開昭49−6186号）、及びメ
チロシナス属、メチロシスチス属、メチロコッカス属及
びメチロバクテリウム属の細菌のようなメタン資化性細
菌を用いて、ｍ−クロルトルエンのようなハロゲン置換
ベンゼンを分解する例（特開昭55−127196号）が報告さ
れている。
イダ属、サッカロミセス属及びストレプトミセス属の微
生物等を用いてポリクロル化されたビフェニルのような
有機塩素化合物を分解除去する例（特開昭48−98085
号、特開昭48−98086号、特開昭49−6186号）、及びメ
チロシナス属、メチロシスチス属、メチロコッカス属及
びメチロバクテリウム属の細菌のようなメタン資化性細
菌を用いて、ｍ−クロルトルエンのようなハロゲン置換
ベンゼンを分解する例（特開昭55−127196号）が報告さ
れている。
しかしながらトリクロロエチレン及びその類縁化合物の
ような脂肪族塩素化合物を有効に分解除去する微生物に
ついてはほとんど報告されておらず、わずかに本出願人
による提案（特願昭63−239753号）があるのみである。
ような脂肪族塩素化合物を有効に分解除去する微生物に
ついてはほとんど報告されておらず、わずかに本出願人
による提案（特願昭63−239753号）があるのみである。
［発明が解決しようとする課題］ 本発明は、前期特願昭63−239753号において提案した脂
肪族塩素化合物の分解方法を工業的に一層有利に利用す
るための改善方法を提供すること、及びその方法に用い
る新規な固定化微生物を提供することを目的とするもの
である。
肪族塩素化合物の分解方法を工業的に一層有利に利用す
るための改善方法を提供すること、及びその方法に用い
る新規な固定化微生物を提供することを目的とするもの
である。
［課題を解決するための手段］ 本発明者は、前記の出願において開示した微生物の固定
化につき鋭意検討してきたが、ある種の担体が前記微生
物の固定化に特に有効であることを知見し、本発明に至
った。
化につき鋭意検討してきたが、ある種の担体が前記微生
物の固定化に特に有効であることを知見し、本発明に至
った。
すなわち、本発明は、 （１）メチロシナス属に属し、脂肪族塩素化合物分解能
を有する微生物を、アガロースゲル、κ−カラギーナン
ゲル、及び／又はアルギン酸カルシウムゲルで固定化
し、この固定化微生物を脂肪族塩素化合物又はその含有
物と接触させることを特徴とする脂肪属塩素化合物の分
解方法、及び（２）メタン及びメタノールを唯一炭素源
として生育し、トリクロロエチレンを分解するメタン資
化性菌であるメチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUB
Aをアガロースゲル、κ−カラギーナンゲル及び／又は
アルギン酸カルシウムゲルで固定化した固定化微生物か
らなるものである。
を有する微生物を、アガロースゲル、κ−カラギーナン
ゲル、及び／又はアルギン酸カルシウムゲルで固定化
し、この固定化微生物を脂肪族塩素化合物又はその含有
物と接触させることを特徴とする脂肪属塩素化合物の分
解方法、及び（２）メタン及びメタノールを唯一炭素源
として生育し、トリクロロエチレンを分解するメタン資
化性菌であるメチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUB
Aをアガロースゲル、κ−カラギーナンゲル及び／又は
アルギン酸カルシウムゲルで固定化した固定化微生物か
らなるものである。
本発明の微生物自体はすでに述べたように特願昭63−23
9753号に開示したものである。これは各種土壌に広く分
布しこれから採取し得られるが、その採取の方法として
は、例えば次のような方法を用いる。
9753号に開示したものである。これは各種土壌に広く分
布しこれから採取し得られるが、その採取の方法として
は、例えば次のような方法を用いる。
すなわち、培養はブチルゴム栓及びアルミシールで密閉
したバイアル瓶を用い、30℃にて振とうする。トリクロ
ロエチレン量はヘッドスペースより気相を一定量取り、
ガスクロマトグラフィーにより定量し、ヘンリーの法則
式より液相濃度を算出する。
したバイアル瓶を用い、30℃にて振とうする。トリクロ
ロエチレン量はヘッドスペースより気相を一定量取り、
ガスクロマトグラフィーにより定量し、ヘンリーの法則
式より液相濃度を算出する。
前記手段を用い、例えば採取した土壌を1ppmトリクロロ
エチレン及びメタンの存在下で集積培養を繰り返し、ト
リクロロエチレンをよく分解する混合微生物系を得る。
トリクロロエチレンの分解には酸素及びメタンが必須で
あることから、混合微生物系からメタノトローフの単離
を行う。
エチレン及びメタンの存在下で集積培養を繰り返し、ト
リクロロエチレンをよく分解する混合微生物系を得る。
トリクロロエチレンの分解には酸素及びメタンが必須で
あることから、混合微生物系からメタノトローフの単離
を行う。
本発明において単離された菌は、公知のメチロシナス・
トリコスポリウムに属するメチロシナス・トリコスポリ
ウム・TSUKUBAである。
トリコスポリウムに属するメチロシナス・トリコスポリ
ウム・TSUKUBAである。
この菌を顕微鏡で観察すると、巾0.6〜１μｍ、長さ１
〜５μｍの短桿菌で以下の表に示すような特性を有する
ものである。
〜５μｍの短桿菌で以下の表に示すような特性を有する
ものである。
Chracteristics of methane−utilizing bacterium Gram stain Negative Cell shape Short rod Number of flagela ０ Motility − Growth on methane ＋ ethane − propane − ｎ−butane − dimethylether − methylamine − methanol ＋ ethanol − nutrient broth − Growth at 30℃ ＋ 37℃ ＋ 45℃ − Mol％ Ｇ＋Ｃ OF DNA 64.5 Major fatty acid Ｃ18:1（96.5％） Hydroxy fatty acid type ２−OH Quinone type Q8 以上の菌学的性質に基づき、本発明のメチロシナス菌株
の同定を行った。
の同定を行った。
本発明のメチロシナスの菌株は、菌の形態、グラム染色
などの顕微鏡的所見、生理学的諸性質などから、公知菌
メチロシナス・トリコスポリウムOP 3bの性状について
記載した文献（1.Journal of General Microbiology
61,205−218（1970）、2.Microbial Growth on C1
Compounds p.123〜133（1984）、3.Journal of Ge
neral Applied Microbiology 33,135〜165（198
7）］に記されているWhittenburyら、及び駒形らの分類
に基づき、メチロシナス・トリコスポリウムOB 3bに近
縁の株と同定された。
などの顕微鏡的所見、生理学的諸性質などから、公知菌
メチロシナス・トリコスポリウムOP 3bの性状について
記載した文献（1.Journal of General Microbiology
61,205−218（1970）、2.Microbial Growth on C1
Compounds p.123〜133（1984）、3.Journal of Ge
neral Applied Microbiology 33,135〜165（198
7）］に記されているWhittenburyら、及び駒形らの分類
に基づき、メチロシナス・トリコスポリウムOB 3bに近
縁の株と同定された。
しかしながら、鞭毛を有せずC19の飽和脂肪酸も有せ
ず、又、ロゼットを形成しない点で、メチロシナス・ト
リコスポリウムOB 3bとは明らかに相違し、新菌株と同
定され、メチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUBAと
命名された。
ず、又、ロゼットを形成しない点で、メチロシナス・ト
リコスポリウムOB 3bとは明らかに相違し、新菌株と同
定され、メチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUBAと
命名された。
本発明の菌は工業技術院微生物工業技術研究所に微工研
菌寄第10004号として寄託されている。
菌寄第10004号として寄託されている。
本発明の菌はトリクロロエチレン及びその各種類縁化合
物、すなわち、シス−1,2−ジクロロエチレン、トラン
ス−1,2−ジクロロエチレン、1,1−ジクロロエチレン、
1,1,2,2−テトラクロロエタン、1,1,2−トリクロロエタ
ン、1,2−ジクロロエタン、クロロホルムを分解する性
質を有し、10ppmの高濃度トリクロロエチレンを10日間
で約半分に分解する能力を持つ。
物、すなわち、シス−1,2−ジクロロエチレン、トラン
ス−1,2−ジクロロエチレン、1,1−ジクロロエチレン、
1,1,2,2−テトラクロロエタン、1,1,2−トリクロロエタ
ン、1,2−ジクロロエタン、クロロホルムを分解する性
質を有し、10ppmの高濃度トリクロロエチレンを10日間
で約半分に分解する能力を持つ。
本発明においては、上記のメチロシナス・トリコスポリ
ウム・TSUKUBAの反復利用を可能とし、又、反応系から
の分離を容易にして、この菌体を工業的に一層有利に利
用するため、この菌体を固定化する。
ウム・TSUKUBAの反復利用を可能とし、又、反応系から
の分離を容易にして、この菌体を工業的に一層有利に利
用するため、この菌体を固定化する。
本発明において用いる上記菌体には担体特異性があり、
その固定化のための担体の選択はきわめて重要である。
菌体の担体としてはポリウレタン、光硬化性樹脂、高分
子電解質なども知られているが、これらの担体は上記の
菌体の固定化のためには不適当である。これらを用いて
固定化した場合には、上記菌体が本来有するトリクロロ
エチレン等脂肪族塩素化合物を分解する特性が著しく減
殺されてしまう。
その固定化のための担体の選択はきわめて重要である。
菌体の担体としてはポリウレタン、光硬化性樹脂、高分
子電解質なども知られているが、これらの担体は上記の
菌体の固定化のためには不適当である。これらを用いて
固定化した場合には、上記菌体が本来有するトリクロロ
エチレン等脂肪族塩素化合物を分解する特性が著しく減
殺されてしまう。
本発明者の研究では上記菌体の固定化にはアガロースゲ
ル、アルギン酸カルシウムゲル及びκ−カラギーナンゲ
ルを担体として用いた場合だけが、菌体の有用な属性を
実質上損うことなく固定化することができる。
ル、アルギン酸カルシウムゲル及びκ−カラギーナンゲ
ルを担体として用いた場合だけが、菌体の有用な属性を
実質上損うことなく固定化することができる。
本発明の方法を実施するに当っては、本発明の固定化微
生物をトリクロロエチレン或いは該化合物を含有する排
水或いは排ガス等と溶液状態で接触させることによって
行われる。
生物をトリクロロエチレン或いは該化合物を含有する排
水或いは排ガス等と溶液状態で接触させることによって
行われる。
［実施例］ 以下に実施例を挙げて、本発明を更に詳細に説明する。
（固定化菌体の調製法） バイアル瓶（155ml）に以下の蒸留水に溶解した無機塩
培地30mlを入れ、メチロシナス・トリコスポリウム・TS
UKUBAを接種した後に1ppmのトリクロロエチレン及びメ
タンを加えて、ブチルゴム栓、及びアルミシールで完全
密封して30℃にて振とう培養を行った。
培地30mlを入れ、メチロシナス・トリコスポリウム・TS
UKUBAを接種した後に1ppmのトリクロロエチレン及びメ
タンを加えて、ブチルゴム栓、及びアルミシールで完全
密封して30℃にて振とう培養を行った。
KH2PO4 0.45g／ K2HPO4 1.17g／ NH4Cl 2.14g／ Ca（NO3）２・2H2O 4.8mg／ MgSO4・7H2O 121mg／ FeSO4・7H2O 28mg／ Trace metals D.W. pH7.2 CH4 20ml／bottle 又はCH3OH 0.3ml／bottle 培養液60mlを集菌したのち、10mMリン酸緩衝液（pH7.
0）2.5mlに懸濁し、４％アルギン酸ソーダ溶液2.5mlを
加え５％塩化カルシウム溶液中に滴下してアルギン酸カ
ルシウムゲル固定化菌体を調製した。又、前記菌体懸濁
液にそれぞれアガロースあるいはκ−カラギーナンを加
え、固化することにより、４％アガロース、２％κ−カ
ラギーナンゲル固定化菌体を調製した。又、比較のため
に光硬化性樹脂（関西ペイント株式会社製ENT−340
0）、高分子電解質（PDDA、KPVS）及びウレタンポリマ
ー（東洋ゴム工業株式会社製PU6）を担体として用いて
固定化した。
0）2.5mlに懸濁し、４％アルギン酸ソーダ溶液2.5mlを
加え５％塩化カルシウム溶液中に滴下してアルギン酸カ
ルシウムゲル固定化菌体を調製した。又、前記菌体懸濁
液にそれぞれアガロースあるいはκ−カラギーナンを加
え、固化することにより、４％アガロース、２％κ−カ
ラギーナンゲル固定化菌体を調製した。又、比較のため
に光硬化性樹脂（関西ペイント株式会社製ENT−340
0）、高分子電解質（PDDA、KPVS）及びウレタンポリマ
ー（東洋ゴム工業株式会社製PU6）を担体として用いて
固定化した。
実施例１ 上記で得た固定化菌体を、直径3mmのビーズ又はキュー
ブ状に成形して、前記無機塩培地の入ったバイアル瓶
（第１図）１本に入れ、トリクロロエチレンの分解実験
を行った。
ブ状に成形して、前記無機塩培地の入ったバイアル瓶
（第１図）１本に入れ、トリクロロエチレンの分解実験
を行った。
分解実験では実験結果の解析を容易にするために、生育
炭素源は加えずに休止菌体として行った。
炭素源は加えずに休止菌体として行った。
なお、固定化休止菌体を賦活化する場合にはメタンある
いはメタノールを前記の量だけ加えて、一定時間振とう
培養を行った。
いはメタノールを前記の量だけ加えて、一定時間振とう
培養を行った。
なお、トリクロロエチレンの減少量はヘッドスペース法
によりガスクロにて定量した。
によりガスクロにて定量した。
まず、各種固定化菌体の1ppmのトリクロロエチレンに対
する分解能を比較測定した。この結果を第２図に示す。
する分解能を比較測定した。この結果を第２図に示す。
縦軸には反応開始時のバイアル瓶内のトリクロロエチレ
ン量を100％とした時の残存率を示している。第２図か
ら明らかなように、オリウレタン、光硬化性樹脂ではほ
とんどトリクロロエチレンの減少はみられず、高分子電
解質で固定化した場合でも10％程度の減少しかみられな
い。一方、遊離の休止菌体では14時間後約60％の分解が
みられ、又、アガロースゲル、κ−カラギーナンゲルで
固定化した場合においてもほぼ同程度の減少がみられ、
アルギン酸カルシウムゲルで固定化した場合には遊離菌
よりも分解率がよく、14時間後に90％以上の減少がみら
れた。
ン量を100％とした時の残存率を示している。第２図か
ら明らかなように、オリウレタン、光硬化性樹脂ではほ
とんどトリクロロエチレンの減少はみられず、高分子電
解質で固定化した場合でも10％程度の減少しかみられな
い。一方、遊離の休止菌体では14時間後約60％の分解が
みられ、又、アガロースゲル、κ−カラギーナンゲルで
固定化した場合においてもほぼ同程度の減少がみられ、
アルギン酸カルシウムゲルで固定化した場合には遊離菌
よりも分解率がよく、14時間後に90％以上の減少がみら
れた。
実施例２ 次にトリクロロエチレンの減少が顕著に認められたアガ
ロースゲル、κ−カラギーナンゲル、及びアルギン酸カ
ルシウムゲルによる固定化菌体について、繰返し使用に
よる分解能の変化とゲルの耐久性について検討を加え
た。
ロースゲル、κ−カラギーナンゲル、及びアルギン酸カ
ルシウムゲルによる固定化菌体について、繰返し使用に
よる分解能の変化とゲルの耐久性について検討を加え
た。
ここでは５回の繰返し使用を行った。まずメタンを炭素
源としてメチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUBAを
調製して、固定化し、１回目を実験を行い、その後メタ
ン又はメタノールを加えて賦活化し、再び休止菌体とし
て分解実験を行った。２回目以降も同様に毎回賦活化し
て分解実験を繰返した。この結果を第１表に示す。表中
の数値は分解率をあらわし、１回目の減少量を100％と
して表わしている。又、ゲルの崩壊については、＋が正
常なゲル、±はゲルの一部が崩壊したとき、−は完全に
崩壊したことを示す。
源としてメチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUBAを
調製して、固定化し、１回目を実験を行い、その後メタ
ン又はメタノールを加えて賦活化し、再び休止菌体とし
て分解実験を行った。２回目以降も同様に毎回賦活化し
て分解実験を繰返した。この結果を第１表に示す。表中
の数値は分解率をあらわし、１回目の減少量を100％と
して表わしている。又、ゲルの崩壊については、＋が正
常なゲル、±はゲルの一部が崩壊したとき、−は完全に
崩壊したことを示す。
アルギン酸カルシウムゲルで固定化した場合、第２図に
おいては１回目で遊離菌よりも高い分解能がみられた
が、繰返し使うと３回目からゲルの崩壊が始まった。一
方、アガロースゲルでは５回の繰返し使用でもゲルの崩
壊はみられず、コンスタントな分解能の保持が観察され
た。κ−カラギーナンゲルでは４回目にゲルが壊れ始め
た。又、それぞれの固定化菌体をメタンあるいはメタノ
ールで賦活化した場合、１回目のメタノールでの賦活化
ではメタンでの賦活化よりも高い分解率が認められた
が、２回目以降では全般的にメタンでの賦活化の方が良
くなる傾向が認められた。
おいては１回目で遊離菌よりも高い分解能がみられた
が、繰返し使うと３回目からゲルの崩壊が始まった。一
方、アガロースゲルでは５回の繰返し使用でもゲルの崩
壊はみられず、コンスタントな分解能の保持が観察され
た。κ−カラギーナンゲルでは４回目にゲルが壊れ始め
た。又、それぞれの固定化菌体をメタンあるいはメタノ
ールで賦活化した場合、１回目のメタノールでの賦活化
ではメタンでの賦活化よりも高い分解率が認められた
が、２回目以降では全般的にメタンでの賦活化の方が良
くなる傾向が認められた。
実施例３ 次にアガロース固定化休止菌体が分解し得るトリクロロ
エチレン濃度の上限を検討した。第３図において縦軸は
バイアル瓶内の初発トリクロロエチレン量を100％とし
てその相対的な残存率をあらわしている。
エチレン濃度の上限を検討した。第３図において縦軸は
バイアル瓶内の初発トリクロロエチレン量を100％とし
てその相対的な残存率をあらわしている。
第３図から、液相濃度が100ppmではトリクロロエチレン
の減少は全くみられないが、35ppm以下の濃度ではそれ
ぞれ減少がみられ、かなり高い濃度でも分解されること
が明らかである。ここには示していないが、遊離菌にお
いてもほぼ同様の結果が得られた。次にここで得られた
結果をもとに、各濃度における分解速度を求め、トリク
ロロエチレン濃度との関係を調べてみた。
の減少は全くみられないが、35ppm以下の濃度ではそれ
ぞれ減少がみられ、かなり高い濃度でも分解されること
が明らかである。ここには示していないが、遊離菌にお
いてもほぼ同様の結果が得られた。次にここで得られた
結果をもとに、各濃度における分解速度を求め、トリク
ロロエチレン濃度との関係を調べてみた。
第４図は基質であるトリクロロエチレンの濃度とその分
解速度との関係を表した図である。縦軸には分解速度、
横軸にはトリクロロエチレンの濃度を示している。上が
固定化菌体、下が遊離の菌体の場合である。
解速度との関係を表した図である。縦軸には分解速度、
横軸にはトリクロロエチレンの濃度を示している。上が
固定化菌体、下が遊離の菌体の場合である。
この図からも明らかなようにアガロースに固定化した場
合のトリクロロエチレンの分解パターンはMichaelis−M
enten型であることがわかる。そこでLineweaver−Burk
の方法により、最大分解速度Vmaxと飽和定数Ksを求めて
みた。
合のトリクロロエチレンの分解パターンはMichaelis−M
enten型であることがわかる。そこでLineweaver−Burk
の方法により、最大分解速度Vmaxと飽和定数Ksを求めて
みた。
第５図はLineweaver−Burkのプロットである。
これからVmaxとksを求めると、固定化菌体のVmaxは3.15
μgTCE／mg cell／hrで、遊離菌体では2.62と求めら
れ、一方ksは固定化菌体では100μＭ、遊離菌体で66μ
Ｍであった。これらの数値より、固定化しても遊離菌と
比べて分解能が顕著に低下することは認められず、Vmax
は固定化した方が若干高くなる傾向がある。又、ksは固
定化菌体の方が大きく、基質であるトリクロロエチレン
との親和力が弱いことがわかる。基質との親和力が弱い
のは固定化担体であるアガロースゲルが菌体への基質の
拡散を阻害しているためだと考えられ、特に高濃度トリ
クロロエチレンの場合にはゲルが菌体を保護し有効であ
ると思われる。
μgTCE／mg cell／hrで、遊離菌体では2.62と求めら
れ、一方ksは固定化菌体では100μＭ、遊離菌体で66μ
Ｍであった。これらの数値より、固定化しても遊離菌と
比べて分解能が顕著に低下することは認められず、Vmax
は固定化した方が若干高くなる傾向がある。又、ksは固
定化菌体の方が大きく、基質であるトリクロロエチレン
との親和力が弱いことがわかる。基質との親和力が弱い
のは固定化担体であるアガロースゲルが菌体への基質の
拡散を阻害しているためだと考えられ、特に高濃度トリ
クロロエチレンの場合にはゲルが菌体を保護し有効であ
ると思われる。
ついで分解速度の温度による影響について検討を行っ
た。その結果を第６図に示す。縦軸の分解速度は0.10か
ら示してある。
た。その結果を第６図に示す。縦軸の分解速度は0.10か
ら示してある。
15℃と35℃では分解速度は急激に低下しているが、20℃
で最も高い分解速度を示した。又、20℃から30℃にかけ
ても比較的安定であることがわかった。
で最も高い分解速度を示した。又、20℃から30℃にかけ
ても比較的安定であることがわかった。
第７図は、分解速度に対するpHの影響について検討した
結果である。pH6から7.5の広い範囲において分解速度は
ほとんど一定であるがpH8では急激に分解速度が低下し
ていることがわかる。又、pH6で分解速度が若干大きく
なったことについては、酸性溶液なためにアガロースゲ
ルの強度が弱くなり、菌体が多少漏れ出し、そのため遊
離菌によるトリクロロエチレンの分解が進んだためと考
えられる。したがって、この固定化菌体ではアルカリ側
では分解活性は低下するが、中性ではそれほど大きな活
性の変化はないといえる。
結果である。pH6から7.5の広い範囲において分解速度は
ほとんど一定であるがpH8では急激に分解速度が低下し
ていることがわかる。又、pH6で分解速度が若干大きく
なったことについては、酸性溶液なためにアガロースゲ
ルの強度が弱くなり、菌体が多少漏れ出し、そのため遊
離菌によるトリクロロエチレンの分解が進んだためと考
えられる。したがって、この固定化菌体ではアルカリ側
では分解活性は低下するが、中性ではそれほど大きな活
性の変化はないといえる。
［発明の効果］ 以上説明したように、本発明により特定の担体を選択す
ることによりメチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUB
Aが有する脂肪族塩素化合物の分解特性を実質上低下さ
せることなく固定化することができ、この新規固定化微
生物を使用することにより、難分解性の汚染物質を効率
的に分解することができる。
ることによりメチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUB
Aが有する脂肪族塩素化合物の分解特性を実質上低下さ
せることなく固定化することができ、この新規固定化微
生物を使用することにより、難分解性の汚染物質を効率
的に分解することができる。
第１図は本発明実施例に供した試験装置の説明図、第２
図は各種担体に固定化した場合のトリクロロエチレンの
分解特性を説明する図、第３図はアガロースに固定した
菌体によるトリクロロエチレン分解特性のその濃度によ
る変化を説明する図、第４図は同菌体のトリクロロエチ
レンの分解速度に及ぼすその濃度の影響について説明す
る図、第５図は同菌体によるトリクロロエチレン分解の
Lineweaver−Burkプロットを表わす図、第６図は同菌体
によるトリクロロエチレン分解特性に及ぼす温度の影響
を説明する図、第７図は同菌体によるトリクロロエチレ
ン分解特性に及ぼすpHの影響を説明する図。
図は各種担体に固定化した場合のトリクロロエチレンの
分解特性を説明する図、第３図はアガロースに固定した
菌体によるトリクロロエチレン分解特性のその濃度によ
る変化を説明する図、第４図は同菌体のトリクロロエチ
レンの分解速度に及ぼすその濃度の影響について説明す
る図、第５図は同菌体によるトリクロロエチレン分解の
Lineweaver−Burkプロットを表わす図、第６図は同菌体
によるトリクロロエチレン分解特性に及ぼす温度の影響
を説明する図、第７図は同菌体によるトリクロロエチレ
ン分解特性に及ぼすpHの影響を説明する図。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０２Ｆ 3/34 ＺＡＢ Ｚ Ｃ１２Ｎ 11/10 //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01）
Claims (4)
- 【請求項１】メチロシナス（Methylosinus）属に属し、
脂肪族塩素化合物分解能を有する微生物を、アガロース
ゲル、カラギーナンゲル、及び／又はアルギン酸ゲルで
固定化し、この固定化微生物を脂肪族塩素化合物又はそ
の含有物と接触させることを特徴とする脂肪属塩素化合
物の分解方法。 - 【請求項２】微生物がトリクロロエチレンを分解するメ
タン資化性細菌である請求項（１）記載の方法。 - 【請求項３】微生物がメチロシナス・トリコスポリウム
・TSUKUBA（微工研菌寄No.10004）である請求項（１）
又は（２）に記載の方法。 - 【請求項４】メタン資化性であり、トリクロロエチレン
を分解するメチロシナス・トリコスポリウム・TSUKUBA
（微工研菌寄No.10004）をアガロースゲル、κ−カルギ
ーナンゲル及び／又はアルギン酸カルシウムゲルで固定
化した固定化微生物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2093884A JPH0667314B2 (ja) | 1990-04-11 | 1990-04-11 | 脂肪族塩素化合物の微生物分解方法及びその微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2093884A JPH0667314B2 (ja) | 1990-04-11 | 1990-04-11 | 脂肪族塩素化合物の微生物分解方法及びその微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03292970A JPH03292970A (ja) | 1991-12-24 |
| JPH0667314B2 true JPH0667314B2 (ja) | 1994-08-31 |
Family
ID=14094904
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2093884A Expired - Lifetime JPH0667314B2 (ja) | 1990-04-11 | 1990-04-11 | 脂肪族塩素化合物の微生物分解方法及びその微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0667314B2 (ja) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| US6096530A (en) * | 1992-04-22 | 2000-08-01 | Canon Kabushiki Kaisha | Pseudomonas cepacia strain isolated from termite intestines that degrades trichlorethylene and furan compounds |
| DE69514871T2 (de) * | 1994-05-30 | 2000-06-29 | Canon Kk | Corynebacterium sp. J1, Verfahren zum biologischen Abbau von aromatischen Verbindungen und/oder chlorierten organischen Verbindungen, und Verfahren zur Entgiftung der Umwelt damit |
| JP3478619B2 (ja) * | 1994-12-02 | 2003-12-15 | キヤノン株式会社 | 新規微生物ｋｂ２及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 |
| US6004772A (en) * | 1995-02-28 | 1999-12-21 | Canon Kabushiki Kaisha | Oxygenase expressing microorganism strain JM1 (FERM BP-5352) for degrading organic compounds without an inducer |
| WO1997033836A1 (fr) * | 1996-03-12 | 1997-09-18 | Ebara Research Co., Ltd. | Procede et appareil pour traiter l'eau |
| JP3083077B2 (ja) * | 1996-04-11 | 2000-09-04 | キヤノン株式会社 | 有機化合物の生分解方法及び環境修復方法 |
| DE69709213T2 (de) * | 1996-04-12 | 2002-06-13 | Canon K.K., Tokio/Tokyo | Verfahren und Vorrichtung zur Sanierung von Böden |
| JP3347596B2 (ja) * | 1996-08-01 | 2002-11-20 | キヤノン株式会社 | 新規微生物、芳香族化合物及び／或いは有機塩素化合物の生分解方法、及び媒体の浄化方法 |
| JP3323746B2 (ja) * | 1996-08-01 | 2002-09-09 | キヤノン株式会社 | 新規微生物、有機化合物の生分解方法及び環境修復方法 |
| US6171844B1 (en) | 1996-08-19 | 2001-01-09 | Toyota Jidosha Kabushiki Kaisha | Microorganism and method for environmental purification using the same |
| JP3673640B2 (ja) | 1997-05-15 | 2005-07-20 | キヤノン株式会社 | 汚染媒体の浄化方法およびそれに用いる浄化装置 |
| DE69813474T2 (de) * | 1997-12-11 | 2003-12-24 | Canon K.K., Tokio/Tokyo | Verfahren zur Sanierung von kontaminierten Böden |
| US6864074B2 (en) | 1998-10-30 | 2005-03-08 | Canon Kabushiki Kaisha | Dna fragment carrying toluene monooxygenase gene, recombinant plasmid, transformed microorganism, method for degrading chlorinated aliphatic hydrocarbon compounds and aromatic compounds, and method for environmental remediation |
| US6472191B1 (en) | 1998-12-03 | 2002-10-29 | Canon Kabushiki Kaisha | Dna fragment carrying toluene monooxygenase gene, recombinant plasmid, transformed microorganism, method for degrading chlorinated aliphatic hydrocarbon compounds and aromatic compounds, and method for environmental remediation |
| KR100363209B1 (ko) * | 2000-02-16 | 2002-12-05 | 장덕진 | 염소계 유기화합물 폐수의 탈염소화 방법 및 장치 |
-
1990
- 1990-04-11 JP JP2093884A patent/JPH0667314B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH03292970A (ja) | 1991-12-24 |
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|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |