JPH0686384B2 - 白血球の安定化 - Google Patents

白血球の安定化

Info

Publication number
JPH0686384B2
JPH0686384B2 JP61506071A JP50607186A JPH0686384B2 JP H0686384 B2 JPH0686384 B2 JP H0686384B2 JP 61506071 A JP61506071 A JP 61506071A JP 50607186 A JP50607186 A JP 50607186A JP H0686384 B2 JPH0686384 B2 JP H0686384B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
gelatin
plasma
granulocytes
storage
buffer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP61506071A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH01501469A (ja
Inventor
エム． バビオル，バーナード
Original Assignee
ニュー イングランド メディカル センター ホスピタルズ，インコーポレイテッド
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ニュー イングランド メディカル センター ホスピタルズ，インコーポレイテッド filed Critical ニュー イングランド メディカル センター ホスピタルズ，インコーポレイテッド
Publication of JPH01501469A publication Critical patent/JPH01501469A/ja
Publication of JPH0686384B2 publication Critical patent/JPH0686384B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/10—Preservation of living parts
    • A01N1/12—Chemical aspects of preservation
    • A01N1/122—Preservation or perfusion media

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • External Artificial Organs (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はヒト白血球、特に顆粒球の安定化若しくは保存
に関し、より詳細には血漿とゼラチンとを必須成分とし
て含有する無毒性の生理学上許容しうる培地にて凍結点
より高い温度でこの種の細胞を貯蔵することに関するも
のである。この種の培地に貯蔵した後、これら細胞は実
質的にその初期の生理学的性質を殆んど示しかつこれら
細胞の定性的若しくは定量的欠乏を特徴とする病気の処
置に使用することができる。
ヒト血液を採集しかつこれをたとえば赤血球、好中球を
含む白血球、血小板及び血清などの数種の異なる成分に
分離するため血液銀行の広範な開発も見られるが、これ
ら成分の最大の生理学的若しくは治療的使用は必要とさ
れるまで貯蔵可能でありかつ／又は必要とする場所まで
輸送しうる場合のみ可能となる。たとえば、赤血球及び
血清のような或る種の成分は或る種の条件下で凍結した
後に長期間にわたり貯蔵し、次いで使用するために再構
成することができる。血小板の制限された貯蔵も可能で
あるが、これらは凍結点よりも高い温度にて精々５日間
の貯蔵後にはその作用能力を喪失し、さらに貯蔵するた
めの血小板の凍結は可能であるが［コテルバーウィトコ
ウスカ等、トランスフュージョン、第22巻、第121頁以
降（1982）］高価であり、したがって殆んど使用されな
い技術である。他方、好中球は凍結点より高い温度にて
48時間程度の短い貯蔵期間後に凝結若しくは凝固を受
け、したがって作成してから２日間以内に使用せねばな
らない。凍結による好中球の貯蔵はまだ成功を収めてい
ない。
ツリス、ブラッド、第６巻、第772〜773頁（1951）には
EDTA、アスコルビン酸、酢酸ナトリウム及びフェノール
レッド指示薬と一緒にゼラチンを含有する等張緩衝液を
白血球用の貯蔵培地として用いることが提案されてい
る。クローレー等、トランスフュージョン、第14巻、第
574〜580頁（1974）は、全血−緩衝剤組成物に対し0.4
％のゼラチンを含有する緩衝液にて抜取られかつ各種の
補填物を添加して又は添加せずに４℃で貯蔵した全血か
ら白血球リッチな血漿をデカンテーションすることを記
載しているが、顆粒球の機能は１週間の貯蔵後に顕著に
低下した。コントレラス等、クリオバイオロジー、第17
巻、第243〜251頁（1980）］は、種々の血漿含有貯蔵培
地にて４℃で顆粒球を貯蔵することを記載しているが、
４日後に機能上の不満足な低下が生じた。コントレラス
等、トランスフュージョン、第18巻、第46〜53頁（197
8）］は、血漿若しくは酸改変ゼラチンを含有する培地
における４℃若しくは22℃での顆粒球の貯蔵を記載して
いるが、３日後には細胞の相当なロスを伴った。プライ
ス等、トランスフュージョン、第25巻、第238〜241頁
（1985）］は、顆粒球を回収する際に赤血球沈降剤とし
て酸改変された液体ゼラチンの使用することを記載して
いるが、顆粒球を貯蔵した後に試験を行なっていない。
シェール等、イミュノロジー、第31巻、第337〜341頁
（1976）］は、顆粒球を回収する際に赤血球沈降助剤と
してゼラチンを使用することを記載しているが、ゼラチ
ンは殆んど貯蔵せずにインキュベーション培地中に懸濁
される前に顆粒球から洗浄除去された。
今回、顆粒球はこれらを適当な緩衝液、すなわち無毒性
かつ生理学上許容できかつゼラチンを学友すると共にそ
こに溶解したヒト血漿を含有する緩衝液に懸濁させれ
ば、少なくとも５日間若しくは７日間又はそれ以上の長
時間にわたり25℃未満、好ましくは８℃未満の温度で貯
蔵するのに効果的に安定化されうることが判明した。貯
蔵後、顆粒球は、40℃以下の温度まで加温して存在する
ゲルを液化する以外には、他の処理を必要とせずに輸血
することができる。或いは、これら顆粒球は、単にゼラ
チンと血漿とを貯蔵用に使用した緩衝液と同一若しくは
異なるものとしうる緩衝剤で洗浄除去しただけで、また
はゼラチン含有の緩衝剤を遠心分離により除去し次いで
顆粒球を所望の緩衝液若しくは培地に再懸濁させるだけ
で、使用するために再構成することができる。
用いる緩衝剤は、所望の範囲のpHを与える任意慣用の無
毒緩衝剤とすることができる。緩衝剤のpHは広範囲でた
とえば約pH6.1〜8.5の範囲で変化することができ、好ま
しくはpHは中性点近傍たとえば約6.5〜約7.5に維持され
て、最適にその機能を保持する。最良の結果を得るに
は、血漿及びゼラチン含有の緩衝剤における顆粒球及び
血小板はたとえば８℃未満の低温度で貯蔵すべきである
が、これらは満足しうる結果をもって少なくとも12時間
にわたり約25℃までの高温度で貯蔵することができる。
本発明を実施するには、任意通常の市販原料からのゼラ
チンを使用することができる。ゼラチンの量は、部分的
に所望の貯蔵長さに応じて、広範囲に変化することがで
きる。全緩衝剤−血漿組成物の全重量に対し1.0重量％
程度の少量が短い貯蔵には有効である。使用量の臨界的
上限は存在しないが、ただし貯蔵後のゼラチンの除去を
容易化するには40℃以下の温度にて組成物がゲルでなく
液体となるのに充分な少量とせねばならない。
緩衝液における顆粒球の濃度若しくは個数は所定範囲に
わたり、すなわち1ml当り107〜109、好ましくは1ml当り
１×108〜５×108の範囲で変化することができる。
用いる血漿は正常なヒト血漿又は自己血漿とすることが
できる。血漿の量は全組成物に対し25重量％〜90重量％
程度で変化することができる。
たとえばリドカインのような局部麻酔が、高レベルにお
ける細胞数を維持するのに役立つ任意の添加剤である。
使用しうる他の局部麻酔はプロカイン、メピバカイン、
ブピバカイン等を包含する。
試験が示したところでは、本発明にしたがって５日間若
しくは７日間又はそれ以上にわたり貯蔵されかつ次いで
ゼラチン及び血相の25倍希釈により再構成された顆粒粒
は、主として所望の生理学的性質を全て保持しかつ実質
的に凝集若しくは凝固を引起こさない。特に、これらは
オプソニン処理された微生物を取込みかつ死滅させるこ
とができる。
以下、本発明の範囲を限定するものでないが、特定実施
例により本発明を一層詳細に説明する。
以下の各実施例において、顆粒粒は15〜18容量％の酸性
かつ高張性緩衝液、すなわちクエン酸ナトリウムとクエ
ン酸とを含有する水溶液（クエン酸塩及びクエン酸0.38
M並びに20mg/mlのグルコース、pH4.8）（ACD）の添加に
よって凝固防止された新たに抜取った人血から作成し
た。これら顆粒球を、カーヌッテ等、ジャーナル・クリ
ニカル・インベスチゲーション、第53巻、第1662〜1672
頁（1974）に記載されたように、デキストラン沈降及び
遠心分離によって分離した。次いでこれらを、カルシウ
ム若しくはマグネシウムを含まないダルベッコの燐酸塩
緩衝塩水（PBS）で洗浄し、かつ低張性溶解によって赤
血球を除去しなかった。
次いで、顆粒球を貯蔵倍地として使用された中性のヒス
チジン緩衝液、すなわち0.1Mクエン酸ナトリウム、0.05
Mヒスチジン、0.1Mグルコース、0.05Mピルビン酸ナトリ
ウム及び１μＭリドカイン［pH7.4に調節］（HCP）に懸
濁させた。
自己ヒト血漿を同じHCP緩衝液で抜取り、10mlの血液を
1.4mlの緩衝液と混合しかつ順次にそれぞれ1500rpm及び
2000rpmにて10分間遠心分離し、各遠心分離後に血漿フ
ラクションを分離した。
次いで、下記の組成物を作成し、ここでゼラチン及び血
漿の割合は全体に対する重量％として表わす： それぞれの場合、顆粒球の濃度は1ml当り２×108とし、
かつpHは室温にて7.4とした。
各組成物の５種の試料を４℃にて冷凍機中で貯蔵した。
４℃にて７日間貯蔵した後、各試料を室温まで加温し
た。４℃にてゲルであったこれらの試料は加温に際し液
化した。これらの試料をダルベッコのカルシウム及びマ
グネシウムを含まない燐酸塩緩衝塩水で10倍希釈した。
次いで、顆粒球の機能を測定した。顆粒球の生存は細胞
カウントによって測定し、これを貯蔵前の初期細胞カン
ウトの％として表わした。生存率は、カルシウム及びマ
グネシウムを含まないPBS緩衝液に0.4重量％で懸濁させ
た際トリパンブルーを排除した細胞の％として決定し
た。バビオール等、ロイコサイト・ファクション（クラ
イン編）、第１〜38頁（NY1981）に記載されたと実質的
に同じ方法を用いてS.アウレウスに関し、細菌死滅の能
力を測定した。
これらの結果は次の通りであった（５個の試料の平
均）： 上記結果から明らかなように、細胞カウント数と生存率
と細菌死滅能力とは全て、ゼラチンと血漿とを組合せて
含有する組成物においてずっと大きい程度に保持された
のに対し、これら成分の一方若しくは両方が省略される
と２つの機能又は全て３種の機能が著しく低下する。

Claims (7)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】ヒト白血球を凍結することなく貯蔵用とし
    て安定化するに際し、 ａ）無毒性の緩衝混合液中に懸濁した白血球を供給し、 ｂ）該混合液は、下記の量で存在するゼラチンを含有す
    る： １）全混合液に対し少なくとも１重量％でありかつ ２）40℃若しくはそれ以上にて混合液をゲルまで固化さ
    せるのに要する量より少ない ことを特徴とする安定化方法。
  2. 【請求項２】25℃未満の温度にて少なくとも５日間にわ
    たり、凍結することなく前記懸濁液を貯蔵する工程をさ
    らに含む請求の範囲第１項記載の方法。
  3. 【請求項３】貯蔵を８℃未満の温度で行なう請求の範囲
    第２項記載の方法。
  4. 【請求項４】緩衝剤のpHが6.1〜8.0であり、貯蔵を８℃
    未満の温度で行ない、かつ前記懸濁液における顆粒球の
    個数が1ml当り１×107〜２×108である請求の範囲第２
    項記載の方法。
  5. 【請求項５】前記の混合液が、更に、全混合液の25〜90
    重量％で存在する血漿を含む、請求の範囲第１項に記載
    の方法。
  6. 【請求項６】前記の白血球が顆粒球である、請求の範囲
    第１項に記載の方法。
  7. 【請求項７】ゼラチンと血漿とを含有するpH6.1〜8.0の
    無毒性の緩衝液に懸濁された顆粒球からなり、前記ゼラ
    チンの量が全組成物に対し少なくとも１重量％でありか
    つ40℃若しくはそれ以上にて前記組成物をゲルまで固化
    させるのに要する量よりも少なく、さらに前記血漿の量
    が全組成物の25〜90重量％であることを特徴とする組成
    物。
JP61506071A 1984-11-29 1986-10-22 白血球の安定化 Expired - Fee Related JPH0686384B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US67607184A 1984-11-29 1984-11-29
US06/758,514 US4639373A (en) 1984-11-29 1985-07-24 Stabilization of granulocytes
PCT/US1986/002275 WO1988003028A1 (en) 1984-11-29 1986-10-22 Stabilization of leukocytes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH01501469A JPH01501469A (ja) 1989-05-25
JPH0686384B2 true JPH0686384B2 (ja) 1994-11-02

Family

ID=27101470

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP61506071A Expired - Fee Related JPH0686384B2 (ja) 1984-11-29 1986-10-22 白血球の安定化

Country Status (10)

Country Link
US (1) US4639373A (ja)
EP (1) EP0288467B1 (ja)
JP (1) JPH0686384B2 (ja)
AT (1) ATE79758T1 (ja)
AU (1) AU589237B2 (ja)
DE (1) DE3686584T2 (ja)
DK (1) DK338888A (ja)
FI (1) FI91362C (ja)
NO (1) NO175517C (ja)
WO (1) WO1988003028A1 (ja)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4639373A (en) * 1984-11-29 1987-01-27 New England Medical Center Hospitals, Inc. Stabilization of granulocytes
US4936963A (en) * 1987-05-27 1990-06-26 Abbott Laboratories Polycationic buffers and method for gel electrophoresis of nucleic acids
IT1217938B (it) * 1988-06-28 1990-03-30 Girolamo Sirchia Procedimento per la preparazione e la conservazione di concentrati eritrocitari e piastrinici
US4923797A (en) * 1988-11-29 1990-05-08 President & Fellows Of Harvard College Stabilization of leukocytes
US5211960A (en) * 1988-11-29 1993-05-18 Scripps Clinic And Research Foundation Stabilization of leukocytes
GB8830197D0 (en) * 1988-12-23 1989-02-22 Univ Dundee Tissue preservation medium
WO1996014740A1 (en) 1992-03-02 1996-05-23 Cerus Corporation Synthetic media for blood components
US5459030A (en) * 1992-03-02 1995-10-17 Steritech, Inc. Synthetic media compositions for inactivating bacteria and viruses in blood preparations with 8-methoxypsoralen
FI946077L (fi) * 1992-06-25 1995-01-26 David Scheer Kantasolu- ja lymfosyyttivarastointi
CA2141803C (en) * 1992-08-07 2003-06-17 Lily Lin Methods for inactivating bacteria in blood preparations with 8-methoxypsoralen
US6413713B1 (en) * 1998-10-30 2002-07-02 Hyperbaric Systems Method for preserving blood platelets
US7112576B1 (en) 1999-12-10 2006-09-26 Regents Of The University Of Minnesota Compositions and methods for cryopreservation of peripheral blood lymphocytes
US20030158507A1 (en) * 2001-06-26 2003-08-21 Vladimir Serebrennikov Preservation of blood platelets at cold temperatures
JP2006524260A (ja) * 2003-04-23 2006-10-26 ヒューマン バイオシステムズ ドナー臓器の貯蔵用の改良された方法及び溶液

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4390619A (en) * 1981-09-28 1983-06-28 James Clifford Haight Leukocyte or platelet storage using ion-exchange resins
US4639373A (en) * 1984-11-29 1987-01-27 New England Medical Center Hospitals, Inc. Stabilization of granulocytes

Also Published As

Publication number Publication date
EP0288467B1 (en) 1992-08-26
WO1988003028A1 (en) 1988-05-05
AU6627986A (en) 1988-05-25
NO175517B (no) 1994-07-18
JPH01501469A (ja) 1989-05-25
EP0288467A4 (en) 1990-01-08
FI91362C (fi) 1994-06-27
NO175517C (no) 1994-10-26
US4639373A (en) 1987-01-27
ATE79758T1 (de) 1992-09-15
DE3686584D1 (de) 1992-10-01
EP0288467A1 (en) 1988-11-02
DE3686584T2 (de) 1993-03-04
FI882944A0 (fi) 1988-06-20
AU589237B2 (en) 1989-10-05
NO882731L (no) 1988-08-19
FI882944L (fi) 1988-06-20
DK338888D0 (da) 1988-06-21
FI91362B (fi) 1994-03-15
DK338888A (da) 1988-06-21
NO882731D0 (no) 1988-06-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kunicki et al. A study of variables affecting the quality of platelets stored at “room temperature”
EP0108588B1 (en) Plasma-free medium for platelet storage and its production
Veale et al. Effect of additive solutions on red blood cell (RBC) membrane properties of stored RBCs prepared from whole blood held for 24 hours at room temperature
US4994367A (en) Extended shelf life platelet preparations and process for preparing the same
Wright et al. Functional abnormalities of human neutrophils collected by continuous flow filtration leukopheresis
JP2000516963A (ja) 酸素除去・添加剤使用による赤血球長期保存法
AU589237B2 (en) Granulocytes in buffer with gelatin and plasma
JPH07121841B2 (ja) 合成の、血漿不含有で輸血可能な血小板貯蔵用媒質
Lazarus et al. Therapeutic effectiveness of frozen platelet concentrates for transfusion
US5211960A (en) Stabilization of leukocytes
JP4927282B2 (ja) 血小板の保存のための組成物
Zapata-Sirvent et al. Cytotoxicity to human leukocytes by topical antimicrobial agents used for burn care
AU668582B2 (en) Stem cell and lymphocyte storage
US5369001A (en) Stabilization of leukocytes
White et al. Platelet spherocytosis: a new bleeding disorder
Lionetti et al. Factors affecting the stability of cryogenically preserved granulocytes
CA1270446A (en) Stabilization of leukocytes
Hardeman The effect of continuous dialysis on platelet preservation
Richman Prolonged cryopreservation of human granulocytes
Chien et al. Rheologic properties of erythrocytes preserved in liquid nitrogen
Ley et al. Dimethyl sulfoxide intrauterine therapy in the mare: effect upon uterine-derived neutrophil function
HK1029514A (en) Stem cell and lymphocyte storage
Pegelow et al. Sunny Dzik, Marion E. Reid, and John J. Freedman, Abstract Editors
Chahal Improvement of platelet quality in stored platelet concentrates by inhibition of complement activation
Seidel et al. Leukocytes in Transfusion Medicine—An Overview of Functions and Clinical Implications

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Cancellation because of no payment of annual fees