JPH0687882A - 新規アンチセンスオリゴヌクレオチド - Google Patents
新規アンチセンスオリゴヌクレオチドInfo
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 アンチセンスオリゴヌクレオチドが配置
２′Ｒまたは２′Ｓをもつ２′−デオキシ−２′−Ｃ−
ヒドロカルビルオリゴヌクレオチドであること、および
次の一般式（１）をもつという事実により特徴付けされ
るアンチセンスオリゴヌクレオチド： 【化１】 ここで、ｎは０から２００の間の整数であり、Ｒ１は
少なくとも一度は官能基により置換されるアルキル、ア
ルケニルおよびアラルキルのようなヒドロカルビル残基
を表し、Ｂは単核または多核ヘテロサイクリック塩基を
表し、Ｒ２およびＲ３は互いに独立に、任意に水素に結
合したヘテロ原子、水素または任意にヘテロ原子により
リンに結合したＲ１残基を表し、およびＲ８は任意に水
素に結合したヘテロ原子、水素またはヘテロ原子により
任意に炭素に結合したＲ１残基を表す。 【効果】 アンチセンスオリゴヌクレオチドは分子生物
学の基礎科学研究から治療および診断までの範囲の応用
に適合させる。
２′Ｒまたは２′Ｓをもつ２′−デオキシ−２′−Ｃ−
ヒドロカルビルオリゴヌクレオチドであること、および
次の一般式（１）をもつという事実により特徴付けされ
るアンチセンスオリゴヌクレオチド： 【化１】 ここで、ｎは０から２００の間の整数であり、Ｒ１は
少なくとも一度は官能基により置換されるアルキル、ア
ルケニルおよびアラルキルのようなヒドロカルビル残基
を表し、Ｂは単核または多核ヘテロサイクリック塩基を
表し、Ｒ２およびＲ３は互いに独立に、任意に水素に結
合したヘテロ原子、水素または任意にヘテロ原子により
リンに結合したＲ１残基を表し、およびＲ８は任意に水
素に結合したヘテロ原子、水素またはヘテロ原子により
任意に炭素に結合したＲ１残基を表す。 【効果】 アンチセンスオリゴヌクレオチドは分子生物
学の基礎科学研究から治療および診断までの範囲の応用
に適合させる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はその主題として新規の化
学修飾されたアンチセンスオリゴヌクレオチドを、およ
びより詳細には２′Ｒおよび２′Ｓの両配置をもつ２′
−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビル−オリゴヌクレ
オチドをもつ。
学修飾されたアンチセンスオリゴヌクレオチドを、およ
びより詳細には２′Ｒおよび２′Ｓの両配置をもつ２′
−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビル−オリゴヌクレ
オチドをもつ。
【従来の技術】既知のように、アンチセンスオリゴヌク
レオチドおよび標的配列の間の相補的な塩基の対合の特
異性はアンチセンスオリゴヌクレオチドを分子生物学的
の基礎科学研究から治療および診断までの範囲の応用に
適合させる。
レオチドおよび標的配列の間の相補的な塩基の対合の特
異性はアンチセンスオリゴヌクレオチドを分子生物学的
の基礎科学研究から治療および診断までの範囲の応用に
適合させる。
【発明が解決しようとする課題】しかし、これらの応用
において、生体内におけるオリゴヌクレオチドの安定性
の問題がある。事実、化学修飾されていないオリゴヌク
レオチドは極めて速い反応キネティクスをもつヌクレア
ーゼによる酵素的加水分解の標的となる。これらの分子
の応用に用いられる戦略がそのヌクレオチド配列に基づ
くものとしたら、この現象は望みの目的への使用を大い
に限定あるいは危うくしさえする。
において、生体内におけるオリゴヌクレオチドの安定性
の問題がある。事実、化学修飾されていないオリゴヌク
レオチドは極めて速い反応キネティクスをもつヌクレア
ーゼによる酵素的加水分解の標的となる。これらの分子
の応用に用いられる戦略がそのヌクレオチド配列に基づ
くものとしたら、この現象は望みの目的への使用を大い
に限定あるいは危うくしさえする。
【０００２】当然、導入される化学修飾は生体内での酵
素的加水分解速度を減少させるとともに、言及される応
用でそれらの機能を果たすためにオリゴヌクレオチドが
示すことが必要とされる他の重要な性質を損なわないよ
うにしなければならない。特に、次の性質、即ち …標的核酸とのハイブリダイゼーション能（特に、化学
修飾は塩基の水素結合能力を弱めてはならない。さら
に、ワトソン−クリックの塩基対の形成を破壊しないた
めに、作られるいずれの化学修飾はむしろ保存的である
ことが好ましい。） …細胞膜を通過し、細胞内の標的配列に到達する能力 …ハイブリダイズしたｍＲＮＡによりコードした遺伝子
の発現を阻害する能力および …選択的結合を実行する能力（非特異的結合はアンチセ
ンスオリゴヌクレオチドの濃度および潜在能力の減少を
避けるために最小にしなければならない。）を弱めては
ならない。 技術の状態は上述の目的のためのアンチセンス断片を化
学修飾するための多くの試みを記録している。この点に
関しては、糖環の２′−炭素の置換を与えるこれらの修
飾が特に興味深いことがわかる。注目すべき結果が２′
−Ｏ−アルキルオリゴヌクレオチドの使用により得られ
ている。これらの分子は非常に安定なハイブリッドを形
成し、非特異的結合を最小にするためにヌクレアーゼに
対する耐性度が増加することが示されている。しかし、
２′−Ｏ−アルキルオリゴヌクレオチドの使用は完全に
満足なものではない。これらの化学修飾されたオリゴヌ
クレオチドの使用について見いだされる欠点はそれらの
合成に必要な構築材料を準備するために必要な反応の複
雑さである。この複雑さの直接的な結果は工業レベルで
の関連する製造過程の実現に関係する設備面の複雑さで
ある。２′−Ｏ−アルキルオリゴヌクレオチドの使用上
の負の効果をもつそれ以上の欠点はその合成に必要なあ
る開始産物が高価格なことである。
素的加水分解速度を減少させるとともに、言及される応
用でそれらの機能を果たすためにオリゴヌクレオチドが
示すことが必要とされる他の重要な性質を損なわないよ
うにしなければならない。特に、次の性質、即ち …標的核酸とのハイブリダイゼーション能（特に、化学
修飾は塩基の水素結合能力を弱めてはならない。さら
に、ワトソン−クリックの塩基対の形成を破壊しないた
めに、作られるいずれの化学修飾はむしろ保存的である
ことが好ましい。） …細胞膜を通過し、細胞内の標的配列に到達する能力 …ハイブリダイズしたｍＲＮＡによりコードした遺伝子
の発現を阻害する能力および …選択的結合を実行する能力（非特異的結合はアンチセ
ンスオリゴヌクレオチドの濃度および潜在能力の減少を
避けるために最小にしなければならない。）を弱めては
ならない。 技術の状態は上述の目的のためのアンチセンス断片を化
学修飾するための多くの試みを記録している。この点に
関しては、糖環の２′−炭素の置換を与えるこれらの修
飾が特に興味深いことがわかる。注目すべき結果が２′
−Ｏ−アルキルオリゴヌクレオチドの使用により得られ
ている。これらの分子は非常に安定なハイブリッドを形
成し、非特異的結合を最小にするためにヌクレアーゼに
対する耐性度が増加することが示されている。しかし、
２′−Ｏ−アルキルオリゴヌクレオチドの使用は完全に
満足なものではない。これらの化学修飾されたオリゴヌ
クレオチドの使用について見いだされる欠点はそれらの
合成に必要な構築材料を準備するために必要な反応の複
雑さである。この複雑さの直接的な結果は工業レベルで
の関連する製造過程の実現に関係する設備面の複雑さで
ある。２′−Ｏ−アルキルオリゴヌクレオチドの使用上
の負の効果をもつそれ以上の欠点はその合成に必要なあ
る開始産物が高価格なことである。
【０００３】
【課題を解決するための手段】上述のすべての欠点に打
ち勝ち、さらに次に明らかにされる追加の利点を与える
新規の化学修飾オリゴヌクレオチドが現在見いだされて
いる。本発明に従ったオリゴヌクレオチドは、これらが
２′Ｒまたは２′Ｓの配置をもつ２′−デオキシ−２′
−Ｃ−ヒドロカルビルオリゴヌクレオチドであり、次の
一般式（１）をもつという事実により特徴付けされる：
ち勝ち、さらに次に明らかにされる追加の利点を与える
新規の化学修飾オリゴヌクレオチドが現在見いだされて
いる。本発明に従ったオリゴヌクレオチドは、これらが
２′Ｒまたは２′Ｓの配置をもつ２′−デオキシ−２′
−Ｃ−ヒドロカルビルオリゴヌクレオチドであり、次の
一般式（１）をもつという事実により特徴付けされる：
【化３】 ここで、ｎは０から２００の間の整数であり、Ｒ１は少
なくとも一度は官能基により置換されるアルキル、アル
ケニルおよびアラルキルのようなヒドロカルビル残基を
表し、Ｂは単核または多核ヘテロサイクリック塩基を表
し、Ｒ２及びＲ３は互いに独立に、任意に水素に結合し
たヘテロ原子、水素または任意にヘテロ原子によりリン
に結合したＲ１残基を表し、およびＲ８は任意に水素に
結合したヘテロ原子、水素またはヘテロ原子により任意
に炭素に結合したＲ１残基を表す。
なくとも一度は官能基により置換されるアルキル、アル
ケニルおよびアラルキルのようなヒドロカルビル残基を
表し、Ｂは単核または多核ヘテロサイクリック塩基を表
し、Ｒ２及びＲ３は互いに独立に、任意に水素に結合し
たヘテロ原子、水素または任意にヘテロ原子によりリン
に結合したＲ１残基を表し、およびＲ８は任意に水素に
結合したヘテロ原子、水素またはヘテロ原子により任意
に炭素に結合したＲ１残基を表す。
【０００４】Ｒ１残基は好ましくはメチル、エチル、プ
ロピル、アリルおよびベンジルからなる群から選択され
る。これらの残基は好ましくは−ＮＨ２、−ＯＨおよび
−ＣＯの中から選択される官能基で置換される。Ｂ残基
は好ましくはアデニン、ヒポキサンチンおよびグアニン
のようなプリン誘導体、またはシトシン、ウラシルおよ
びチミンのようなピリミジン誘導体を表す。Ｒ２および
Ｒ３により表されるヘテロ原子は好ましくは酸素および
硫黄からなる群から選択される。Ｒ１型の残基がリンに
結合しているヘテロ原子の中では、酸素原子がＲ２およ
びＲ３残基を表すために好まれる。本発明は２′−デオ
キシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビルオリゴヌクレオチドそ
のものに限定されず、治療および診断への使用のために
アンチセンス２′−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビ
ルオリゴヌクレオチドにまで拡大される。
ロピル、アリルおよびベンジルからなる群から選択され
る。これらの残基は好ましくは−ＮＨ２、−ＯＨおよび
−ＣＯの中から選択される官能基で置換される。Ｂ残基
は好ましくはアデニン、ヒポキサンチンおよびグアニン
のようなプリン誘導体、またはシトシン、ウラシルおよ
びチミンのようなピリミジン誘導体を表す。Ｒ２および
Ｒ３により表されるヘテロ原子は好ましくは酸素および
硫黄からなる群から選択される。Ｒ１型の残基がリンに
結合しているヘテロ原子の中では、酸素原子がＲ２およ
びＲ３残基を表すために好まれる。本発明は２′−デオ
キシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビルオリゴヌクレオチドそ
のものに限定されず、治療および診断への使用のために
アンチセンス２′−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビ
ルオリゴヌクレオチドにまで拡大される。
【０００５】本発明のもう一つの主題は、本発明に従っ
た化学修飾されたオリゴヌクレオチドの合成の開始産物
として使用される構築材料を表す化合物である。これら
は次の構造式（２）をもち：
た化学修飾されたオリゴヌクレオチドの合成の開始産物
として使用される構築材料を表す化合物である。これら
は次の構造式（２）をもち：
【化４】 ここで、Ｒ１は選択的に少なくとも一度は官能基により
置換されるアルキル、アルケニルおよびアラルキルのよ
うなヒドロカルビル残基を表し、Ｂは単核または多核ヘ
テロサイクリック含窒塩基を表し、Ｒ４、Ｒ５およびＲ
６がそれぞれ独立に、任意に水素に結合したヘテロ原
子、水素またはヘテロ原子によりリンに任意に結合する
Ｒ１残基を表し、任意にこれらの残基の一つを欠くもの
で、Ｒ７は水素または保護基を表し、およびＲ８が任意
に水素に結合するヘテロ原子、水素または任意にヘテロ
原子により炭素に結合するＲ１残基を表し、これらが
２′Ｒまたは２′Ｓ配置をもつことにより特徴付けされ
る化合物である。
置換されるアルキル、アルケニルおよびアラルキルのよ
うなヒドロカルビル残基を表し、Ｂは単核または多核ヘ
テロサイクリック含窒塩基を表し、Ｒ４、Ｒ５およびＲ
６がそれぞれ独立に、任意に水素に結合したヘテロ原
子、水素またはヘテロ原子によりリンに任意に結合する
Ｒ１残基を表し、任意にこれらの残基の一つを欠くもの
で、Ｒ７は水素または保護基を表し、およびＲ８が任意
に水素に結合するヘテロ原子、水素または任意にヘテロ
原子により炭素に結合するＲ１残基を表し、これらが
２′Ｒまたは２′Ｓ配置をもつことにより特徴付けされ
る化合物である。
【０００６】Ｒ１残基は好ましくはメチル、エチル、プ
ロピル、アリルおよびベンジルからなる群から選択され
る。これらの残基は好ましくは−ＮＨ２、−ＯＨおよび
−ＣＯの中から選択される官能基で置換される。Ｂは好
ましくはアデニン、ヒポキサンチンおよびグアニンのよ
うなプリン誘導体、またはシトシン、ウラシルおよびチ
ミンのようなピリミジン誘導体を表す。Ｒ４、Ｒ５およ
びＲ６により表されるヘテロ原子は好ましくは酸素およ
び硫黄からなる群から選択される。Ｒ１型の残基がリン
に結合しているヘテロ原子の中では、酸素原子がＲ４、
Ｒ５およびＲ６残基を表すために好まれる。構築材料の
Ｒ１およびＢ基は、例えばベンゾイルで保護される。Ｒ
７で表される保護基は好ましくは４、４′−ジメトキシ
トリフェニルメチルである。発明はまた前記構築材料か
らの前記２′−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビルオ
リゴヌクレオチドの合成過程に関するものである。ここ
までは、本発明の主題の一般的性質の記述がなされた。
発明の具体例の合成に関する次の例により、本発明の目
的、特徴および利点を明らかにすべく、より詳細な説明
がされる。例において、注釈（２′Ｒ）および（２′
Ｓ）はそれぞれ配置２′Ｒおよび２′Ｓを示す（配置
２′Ｓはハイブリダイゼーションに関してより有利であ
る。）図１および２はそれぞれ例１および３の構築材料
の合成の反応計画を表す。
ロピル、アリルおよびベンジルからなる群から選択され
る。これらの残基は好ましくは−ＮＨ２、−ＯＨおよび
−ＣＯの中から選択される官能基で置換される。Ｂは好
ましくはアデニン、ヒポキサンチンおよびグアニンのよ
うなプリン誘導体、またはシトシン、ウラシルおよびチ
ミンのようなピリミジン誘導体を表す。Ｒ４、Ｒ５およ
びＲ６により表されるヘテロ原子は好ましくは酸素およ
び硫黄からなる群から選択される。Ｒ１型の残基がリン
に結合しているヘテロ原子の中では、酸素原子がＲ４、
Ｒ５およびＲ６残基を表すために好まれる。構築材料の
Ｒ１およびＢ基は、例えばベンゾイルで保護される。Ｒ
７で表される保護基は好ましくは４、４′−ジメトキシ
トリフェニルメチルである。発明はまた前記構築材料か
らの前記２′−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビルオ
リゴヌクレオチドの合成過程に関するものである。ここ
までは、本発明の主題の一般的性質の記述がなされた。
発明の具体例の合成に関する次の例により、本発明の目
的、特徴および利点を明らかにすべく、より詳細な説明
がされる。例において、注釈（２′Ｒ）および（２′
Ｓ）はそれぞれ配置２′Ｒおよび２′Ｓを示す（配置
２′Ｓはハイブリダイゼーションに関してより有利であ
る。）図１および２はそれぞれ例１および３の構築材料
の合成の反応計画を表す。
【０００７】
【実施例】例１ （２′Ｒ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−アリルウリジ
ン構築材料の合成 合成は同封された唯一の図に示された反応計画の各段階
で得られる中間体に関して示される。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１、３−ジイル）−ウリジン（Ｉ） ウリジン（１４ｇ、５７ｍｍｏｌ）が無水ピリジン（１
００ｍｌ）に溶解され、１、３−ジクロロ−１、１、
３、３−テトライソプロピルジシロキサン（２０ｍｌ）
の１、２−ジクロロエタン（２０ｍｌ）溶液が０℃で滴
下された。反応液は室温で３時間攪拌された。メタノー
ル（１５ｍｌ）が添加され、混合液は透明な溶液が得ら
れるまで攪拌された。溶液は減圧濃縮され、残留物が酢
酸エチル（８００ｍｌ）および１Ｍ重炭酸ナトリウム水
溶液（５００ｍｌ）で抽出された。有機層は硫酸ナトリ
ウム上で乾燥、濾過され、泡として３２．７７ｇの産物
が得られるまで蒸発濃縮された。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１、３−ジイル）−２′−Ｏ−フェニルチオノフォルメ
ートウリジン（ＩＩ） （Ｉ）の攪拌溶液（３ｇ）および無水ピリジン（６０ｍ
ｌ）中のジメチルアミノピリジン（１２０ｍｇ）に対し
てＯ−フェニルクロロチオノフォルメート（１．２ｍ
ｌ）が添加された。反応液は室温で一晩攪拌された。溶
媒は減圧濃縮され、残留物がジクロロメタン（２００ｍ
ｌ）および水（２００ｍｌ）で抽出された。有機相は硫
酸ナトリウム上で乾燥、濾過され、蒸発濃縮された。得
られたシロップは純粋化合物（２．３４ｇ、７１％の収
量）を得るためにペトロール／酢酸エチオール（４：１
ｖ／ｖ）で溶出するシリカゲルのカラムクロマトグラ
フィにより精製された。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１、３−ジイル）−（２′Ｒ）−２′−デオキシ−２′
ーＣ−アリルウリジン（ＩＩＩ） 化合物（ＩＩ）（１．３１ｇ）の無水トルエン（２．１
ｍｌ）溶液は脱気され、ＡＩＢＮ（５２ｍｇ）およびア
リルトリブチルチン（１．３ｍｌ）で処理された。反応
液は８０℃で５時間攪拌された。溶媒が真空下で除去さ
れ、残留物が溶出液としてペトロール／酢酸エチル
（５：１ｖ／ｖ）を用いたシリカゲルのカラムクロマト
グラフィにより精製された。化合物（ＩＩＩ）（０．５
３ｇ、４９％の収量）が固体泡として得られた。
ン構築材料の合成 合成は同封された唯一の図に示された反応計画の各段階
で得られる中間体に関して示される。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１、３−ジイル）−ウリジン（Ｉ） ウリジン（１４ｇ、５７ｍｍｏｌ）が無水ピリジン（１
００ｍｌ）に溶解され、１、３−ジクロロ−１、１、
３、３−テトライソプロピルジシロキサン（２０ｍｌ）
の１、２−ジクロロエタン（２０ｍｌ）溶液が０℃で滴
下された。反応液は室温で３時間攪拌された。メタノー
ル（１５ｍｌ）が添加され、混合液は透明な溶液が得ら
れるまで攪拌された。溶液は減圧濃縮され、残留物が酢
酸エチル（８００ｍｌ）および１Ｍ重炭酸ナトリウム水
溶液（５００ｍｌ）で抽出された。有機層は硫酸ナトリ
ウム上で乾燥、濾過され、泡として３２．７７ｇの産物
が得られるまで蒸発濃縮された。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１、３−ジイル）−２′−Ｏ−フェニルチオノフォルメ
ートウリジン（ＩＩ） （Ｉ）の攪拌溶液（３ｇ）および無水ピリジン（６０ｍ
ｌ）中のジメチルアミノピリジン（１２０ｍｇ）に対し
てＯ−フェニルクロロチオノフォルメート（１．２ｍ
ｌ）が添加された。反応液は室温で一晩攪拌された。溶
媒は減圧濃縮され、残留物がジクロロメタン（２００ｍ
ｌ）および水（２００ｍｌ）で抽出された。有機相は硫
酸ナトリウム上で乾燥、濾過され、蒸発濃縮された。得
られたシロップは純粋化合物（２．３４ｇ、７１％の収
量）を得るためにペトロール／酢酸エチオール（４：１
ｖ／ｖ）で溶出するシリカゲルのカラムクロマトグラ
フィにより精製された。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１、３−ジイル）−（２′Ｒ）−２′−デオキシ−２′
ーＣ−アリルウリジン（ＩＩＩ） 化合物（ＩＩ）（１．３１ｇ）の無水トルエン（２．１
ｍｌ）溶液は脱気され、ＡＩＢＮ（５２ｍｇ）およびア
リルトリブチルチン（１．３ｍｌ）で処理された。反応
液は８０℃で５時間攪拌された。溶媒が真空下で除去さ
れ、残留物が溶出液としてペトロール／酢酸エチル
（５：１ｖ／ｖ）を用いたシリカゲルのカラムクロマト
グラフィにより精製された。化合物（ＩＩＩ）（０．５
３ｇ、４９％の収量）が固体泡として得られた。
【０００８】（２′Ｒ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−
アリルウリジン（ＩＶ） テトラブチルアンモニウムフルオリドのＴＨＥ（１Ｍ、
４ｍｌ）溶液が化合物（ＩＩＩ）のＴＨＦ溶液（３０ｍ
ｌ）に添加された。溶液は室温で攪拌され、５分後に反
応はピリジン／メタノール／水（３：３：１ ｖ／ｖ／
ｖ、０．６ｍｌ）で止められた。この溶液をピリジニウ
ム型のＤｏｗｅｘ ５０Ｗｘ４−２００樹脂へ注ぐこと
により得られる懸濁液は１０分間攪拌され、樹脂は濾過
により除去され、メタノールで洗浄された。濾液および
洗浄液は一緒に集められシロップが得られるまで真空下
で蒸発濃縮された。ジクロロメタン／メタノール（９：
１ｖ／ｖ）に溶出するシリカゲルのカラムクロマトグラ
フィによるこの残留物の精製により純粋化合物（０．４
９ｇ、９８％の収量）が得られた。５′−Ｏ−ジメトキシトリチル−（２′Ｒ）−２′−デ
オキシ−２′−Ｃ−アリルウリジン（Ｖ） 化合物（ＩＶ）（０．４８ｇ）が無水ピリジン（１７ｍ
ｌ）に溶解され、塩化ジメトキシトリチル（０．７４
ｇ）、トリエチルアミン（０．３５ｍｌ）および４−ジ
メチルアミノピリジン（１０ｍｇ）で処理された。得ら
れた溶液は一晩室温で攪拌された。シリカゲルの薄層ク
ロマトグラフィは完全な反応を示した。水（５０ｍｌ）
が添加され、混合液はジクロロメタン（２ｘ１００ｍ
ｌ）で抽出された。合わされた有機層は硫酸ナトリウム
上で乾燥、濾過され、減圧濃縮された。得られたシロッ
プは純粋化合物（０．７７ｇ、７５％の収量）を得るた
めに、溶出液としてジクロロメタン／メタノール（９
９：１ ｖ／ｖ）を用いたシリカゲルのカラムクロマト
グラフィで精製された。５′−Ｏ−ジメトキシトリチル−（２′Ｒ）−２′−デ
オキシ−２′−Ｃ−アリルウリジン−３′−Ｏ−（２−
シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルホスフォアミダ
イト）（ＶＩ） 化合物（Ｖ）（０．７７ｇ）およびＮ、Ｎ−ジイソプロ
ピルエチルアミン（２．２ｍｌ）の１、２−ジクロロエ
タン（２０ｍｌ）溶液に対して、アルゴン下で２−シア
ノエトキシ−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルアミノクロロホス
フィン（０．５ｍｌ）が滴下された。反応液は一晩室温
で攪拌され、メタノール（０．２ｍｌ）の添加により反
応が止められた。５分後、ジクロロメタン（１００ｍ
ｌ）が添加され、溶液は飽和塩化ナトリウム（２ｘ１０
０ｍｌ）で洗浄された。有機層は硫酸ナトリウム上で乾
燥、濾過され、真空下で乾燥濃縮された。残留物は１％
のトリエチルアミンを含むジクロロメタン中で０から２
％のメタノールの濃度勾配で溶出するシリカゲルのカラ
ムクロマトグラフィにより精製された。純粋化合物
（０．５７ｇ、５５％の収量）は固体の白色泡として得
られた。上記の合成は従来の合成よりも非常に簡単で、
より安価である。例えば、構築材料２′−Ｏ−アリル−
グアノシンの合成は、既知のように非常に高価な産物で
ある６−クロログアノシンから開始される１２の反応段
階が必要である。
アリルウリジン（ＩＶ） テトラブチルアンモニウムフルオリドのＴＨＥ（１Ｍ、
４ｍｌ）溶液が化合物（ＩＩＩ）のＴＨＦ溶液（３０ｍ
ｌ）に添加された。溶液は室温で攪拌され、５分後に反
応はピリジン／メタノール／水（３：３：１ ｖ／ｖ／
ｖ、０．６ｍｌ）で止められた。この溶液をピリジニウ
ム型のＤｏｗｅｘ ５０Ｗｘ４−２００樹脂へ注ぐこと
により得られる懸濁液は１０分間攪拌され、樹脂は濾過
により除去され、メタノールで洗浄された。濾液および
洗浄液は一緒に集められシロップが得られるまで真空下
で蒸発濃縮された。ジクロロメタン／メタノール（９：
１ｖ／ｖ）に溶出するシリカゲルのカラムクロマトグラ
フィによるこの残留物の精製により純粋化合物（０．４
９ｇ、９８％の収量）が得られた。５′−Ｏ−ジメトキシトリチル−（２′Ｒ）−２′−デ
オキシ−２′−Ｃ−アリルウリジン（Ｖ） 化合物（ＩＶ）（０．４８ｇ）が無水ピリジン（１７ｍ
ｌ）に溶解され、塩化ジメトキシトリチル（０．７４
ｇ）、トリエチルアミン（０．３５ｍｌ）および４−ジ
メチルアミノピリジン（１０ｍｇ）で処理された。得ら
れた溶液は一晩室温で攪拌された。シリカゲルの薄層ク
ロマトグラフィは完全な反応を示した。水（５０ｍｌ）
が添加され、混合液はジクロロメタン（２ｘ１００ｍ
ｌ）で抽出された。合わされた有機層は硫酸ナトリウム
上で乾燥、濾過され、減圧濃縮された。得られたシロッ
プは純粋化合物（０．７７ｇ、７５％の収量）を得るた
めに、溶出液としてジクロロメタン／メタノール（９
９：１ ｖ／ｖ）を用いたシリカゲルのカラムクロマト
グラフィで精製された。５′−Ｏ−ジメトキシトリチル−（２′Ｒ）−２′−デ
オキシ−２′−Ｃ−アリルウリジン−３′−Ｏ−（２−
シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルホスフォアミダ
イト）（ＶＩ） 化合物（Ｖ）（０．７７ｇ）およびＮ、Ｎ−ジイソプロ
ピルエチルアミン（２．２ｍｌ）の１、２−ジクロロエ
タン（２０ｍｌ）溶液に対して、アルゴン下で２−シア
ノエトキシ−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルアミノクロロホス
フィン（０．５ｍｌ）が滴下された。反応液は一晩室温
で攪拌され、メタノール（０．２ｍｌ）の添加により反
応が止められた。５分後、ジクロロメタン（１００ｍ
ｌ）が添加され、溶液は飽和塩化ナトリウム（２ｘ１０
０ｍｌ）で洗浄された。有機層は硫酸ナトリウム上で乾
燥、濾過され、真空下で乾燥濃縮された。残留物は１％
のトリエチルアミンを含むジクロロメタン中で０から２
％のメタノールの濃度勾配で溶出するシリカゲルのカラ
ムクロマトグラフィにより精製された。純粋化合物
（０．５７ｇ、５５％の収量）は固体の白色泡として得
られた。上記の合成は従来の合成よりも非常に簡単で、
より安価である。例えば、構築材料２′−Ｏ−アリル−
グアノシンの合成は、既知のように非常に高価な産物で
ある６−クロログアノシンから開始される１２の反応段
階が必要である。
【０００９】例２ ２−Ｃ−アリルオリゴデオキシヌクレオチドの合成 ２′−Ｃ−アリルウリジンの２０量体ホモポリマーがＡ
ｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍの合成機で標準条件
を用いて合成された。構築材料およびアクチベータであ
る、５−（４−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾルの
濃度はそれぞれ０．１Ｍおよび０．１５Ｍであった。濃
縮待機時間が７分に増加された。全体の共役反応の収量
は７８％（共役反応あたり９９％）であった。
ｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍの合成機で標準条件
を用いて合成された。構築材料およびアクチベータであ
る、５−（４−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾルの
濃度はそれぞれ０．１Ｍおよび０．１５Ｍであった。濃
縮待機時間が７分に増加された。全体の共役反応の収量
は７８％（共役反応あたり９９％）であった。
【００１０】例３ ５′−Ｏ−ジメトキシトリチル−（２′Ｓ）−２′−デ
オキシ−２′−Ｃ−メチルウリジン−３′−Ｏ−（２−
シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピル−ホスフォアミ
ダイト）〔（２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−メ
チルウリジン構築材料〕の合成 合成は図２に示された反応計画の各段階で得られる中間
体に関して説明される。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１，３−ジイル）−２′−ケトウリジン（ＩＩ′） １００ｍｌの１，２−ジクロロメタン中のＣｒＯ３／ピ
リジン／無水酢酸（分子比（１：２：１）（６３ｇ）の
予め形成された複合体の氷冷攪拌懸濁液に対して、複合
体（Ｉ）（２９ｇ）が添加された。反応液は０℃で１５
分間攪拌され、暗褐色の溶液が、溶出液として酢酸エチ
ルを用いた濾過のためにシリカゲルカラムに充填され
た。真空下で溶媒を除去した後、望みの産物が白色固体
として得られた（２２ｇ、７５％）。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１，３−ジイル）−２′−デオキシ−２′−メチリデン
ウリジン（ＩＩＩ′） ６０ｍｌの無水ＴＨＦ中のメチルトリフェニルホスフォ
ニウムプロミド（１１ｇ）の氷冷した懸濁液に対して、
無水条件下で１−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６
Ｍ；３１．２ｍｌ）溶液が添加された。０℃で１時間の
攪拌の後、３０ｍｌの無水ＴＨＦ中の３′、５′−Ｏ−
（テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル
−）−２′−ケトウリジン（１０ｇ）が１５分以上かけ
て添加された。得られた反応液は室温で３時間攪拌され
た。反応完了後、１Ｍ塩化アンモニウム水溶液２０ｍｌ
が添加され、反応液はさらに１０分間攪拌された。反応
液は３００ｍｌの酢酸エチルで希釈され、水で洗浄され
た。有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥、濾過され、真空
下で濃縮された。得られた暗赤色のシロップは溶出液と
してペトロール／酢酸エチル（３：１ ｖ／ｖ）を用い
たシリカゲルクロマトグラフィにより精製された。表記
の純粋化合物は白色固体として得られた（１１．１０
ｇ、５５．５％）。（２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−メチルウリジ
ン（ＩＶ′） ３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１，３−ジイル）−２′−デオキシ−２′−メチリデン
ウリジン（１．６１ｇ）および酢酸エチル（１００ｍ
ｌ）中炭酸カルシウムの５％Ｐｄ（０．５ｇ）は水素大
気（６気圧）下で一晩室温で攪拌された。反応液はセラ
イトを通して濾過され、濾液は表記化合物の混合液が３
／１の比（１．６ｇ）で得られるまで乾燥濃縮された。
オキシ−２′−Ｃ−メチルウリジン−３′−Ｏ−（２−
シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピル−ホスフォアミ
ダイト）〔（２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−メ
チルウリジン構築材料〕の合成 合成は図２に示された反応計画の各段階で得られる中間
体に関して説明される。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１，３−ジイル）−２′−ケトウリジン（ＩＩ′） １００ｍｌの１，２−ジクロロメタン中のＣｒＯ３／ピ
リジン／無水酢酸（分子比（１：２：１）（６３ｇ）の
予め形成された複合体の氷冷攪拌懸濁液に対して、複合
体（Ｉ）（２９ｇ）が添加された。反応液は０℃で１５
分間攪拌され、暗褐色の溶液が、溶出液として酢酸エチ
ルを用いた濾過のためにシリカゲルカラムに充填され
た。真空下で溶媒を除去した後、望みの産物が白色固体
として得られた（２２ｇ、７５％）。３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１，３−ジイル）−２′−デオキシ−２′−メチリデン
ウリジン（ＩＩＩ′） ６０ｍｌの無水ＴＨＦ中のメチルトリフェニルホスフォ
ニウムプロミド（１１ｇ）の氷冷した懸濁液に対して、
無水条件下で１−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６
Ｍ；３１．２ｍｌ）溶液が添加された。０℃で１時間の
攪拌の後、３０ｍｌの無水ＴＨＦ中の３′、５′−Ｏ−
（テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル
−）−２′−ケトウリジン（１０ｇ）が１５分以上かけ
て添加された。得られた反応液は室温で３時間攪拌され
た。反応完了後、１Ｍ塩化アンモニウム水溶液２０ｍｌ
が添加され、反応液はさらに１０分間攪拌された。反応
液は３００ｍｌの酢酸エチルで希釈され、水で洗浄され
た。有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥、濾過され、真空
下で濃縮された。得られた暗赤色のシロップは溶出液と
してペトロール／酢酸エチル（３：１ ｖ／ｖ）を用い
たシリカゲルクロマトグラフィにより精製された。表記
の純粋化合物は白色固体として得られた（１１．１０
ｇ、５５．５％）。（２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−メチルウリジ
ン（ＩＶ′） ３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１，３−ジイル）−２′−デオキシ−２′−メチリデン
ウリジン（１．６１ｇ）および酢酸エチル（１００ｍ
ｌ）中炭酸カルシウムの５％Ｐｄ（０．５ｇ）は水素大
気（６気圧）下で一晩室温で攪拌された。反応液はセラ
イトを通して濾過され、濾液は表記化合物の混合液が３
／１の比（１．６ｇ）で得られるまで乾燥濃縮された。
【００１１】（２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−
メチルウリジン（Ｖ′） ３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１，３−ジイル）−（２′Ｒ）および（２′Ｓ）−２′
−デオキシ−２′−Ｃ−メチルウリジン（１．４ｇ、１
／３）の混合液が化合物（ＩＶ）で示されたように処理
された。粗産物は塩化メチレン：メタノール１０：１で
溶出されるシリカゲルのカラムクロマトグラフィにより
精製された。（２′Ｒ）および（２′Ｓ）−２′−デオ
キシ−２′−Ｃ−メチレンウリジンの純粋混合物は８５
％の収量（０．７２ｇ）で得られた。この混合物は表記
の純粋化合物を得るために、（塩化メチレン：メタノー
ル１５：１で溶出する）カラムクロマトグラフィにより
分離された。５′−Ｏ−ジメトキシトリチル−（２′Ｓ）−２′−デ
オキシ−２′−Ｃ−メチルウリジン−３′−Ｏ−（２−
シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピル−ホスフォアミ
ダイト）（ＶＩ′） （２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−メチルウリジ
ンは、化合物（Ｖ）および（ＶＩ）で前述のようにそれ
ぞれジメトキシトリチル化およびホスフィチル化され
た。
メチルウリジン（Ｖ′） ３′、５′−Ｏ−（テトライソプロピルジシロキサン−
１，３−ジイル）−（２′Ｒ）および（２′Ｓ）−２′
−デオキシ−２′−Ｃ−メチルウリジン（１．４ｇ、１
／３）の混合液が化合物（ＩＶ）で示されたように処理
された。粗産物は塩化メチレン：メタノール１０：１で
溶出されるシリカゲルのカラムクロマトグラフィにより
精製された。（２′Ｒ）および（２′Ｓ）−２′−デオ
キシ−２′−Ｃ−メチレンウリジンの純粋混合物は８５
％の収量（０．７２ｇ）で得られた。この混合物は表記
の純粋化合物を得るために、（塩化メチレン：メタノー
ル１５：１で溶出する）カラムクロマトグラフィにより
分離された。５′−Ｏ−ジメトキシトリチル−（２′Ｓ）−２′−デ
オキシ−２′−Ｃ−メチルウリジン−３′−Ｏ−（２−
シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピル−ホスフォアミ
ダイト）（ＶＩ′） （２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ−メチルウリジ
ンは、化合物（Ｖ）および（ＶＩ）で前述のようにそれ
ぞれジメトキシトリチル化およびホスフィチル化され
た。
【００１２】例４ 本発明による修飾オリゴヌクレオチドのハイブリダイゼ
ーションとヌクレアーゼに対する安定性 新規なアンチセンス断片が満たさなければならない基本
的要件は、良好なハイブリダイゼーション特性を有して
いることである。それゆえ、これらの断片と相補的ＤＮ
Ａ配列との間の結合の親和性を試験した。３′端を除く
すべての位置に（２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ
−メチルヌクレオチドを有する以下のオリゴヌクレオチ
ド： ｄＣ（ＣＣＵＣＵＣＣＵＵＣＵＣＣＣＵＣＣＵ）２′Ｓ を、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍの合成機モデ
ル３８０Ｂで標準的な合成プロトコルに従って、β−シ
アノエチルフォスフォアミダイトの化学によって合成し
た。共役時間は７分にまで増加された。この修飾オリゴ
ヌクレオチド（３μＭ）及びその相補的ＤＮＡ配列の、
０．１Ｍ塩化ナトリウム溶液中の等モル混合物の融点を
２６０ｎｍで測定した。同様の実験を同様の非修飾ＤＮ
Ａ配列を用いて行った。修飾オリゴヌクレオチドと天然
のＤＮＡ断片とは、それぞれ融点が３８．６℃、３５．
５℃なので、前者の方が後者よりもより安定なハイブリ
ッドを形成するということが、得られた結果からわかっ
た。アンチセンス断片の第２の重要な性質はヌクレアー
ゼに対する安定性である。これに関しては、３種の異な
るヌクレアーゼが試験された。即ち、Ｐｌ，Ｂａｌ３１
及びムングビーン（Ｍｕｎｇ Ｂｅａｎ）である。配列
と修飾は前述と同様にした。（２′Ｓ）−２′−デオキ
シ−２′−Ｃ−メチルオリゴヌクレオチドはこれらのヌ
クレアーゼに対して抵抗性であることが示された。非修
飾配列の完全な分解をひき起こしたのと同じ濃度でも修
飾した配列には影響を与えなかったからである。
ーションとヌクレアーゼに対する安定性 新規なアンチセンス断片が満たさなければならない基本
的要件は、良好なハイブリダイゼーション特性を有して
いることである。それゆえ、これらの断片と相補的ＤＮ
Ａ配列との間の結合の親和性を試験した。３′端を除く
すべての位置に（２′Ｓ）−２′−デオキシ−２′−Ｃ
−メチルヌクレオチドを有する以下のオリゴヌクレオチ
ド： ｄＣ（ＣＣＵＣＵＣＣＵＵＣＵＣＣＣＵＣＣＵ）２′Ｓ を、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍの合成機モデ
ル３８０Ｂで標準的な合成プロトコルに従って、β−シ
アノエチルフォスフォアミダイトの化学によって合成し
た。共役時間は７分にまで増加された。この修飾オリゴ
ヌクレオチド（３μＭ）及びその相補的ＤＮＡ配列の、
０．１Ｍ塩化ナトリウム溶液中の等モル混合物の融点を
２６０ｎｍで測定した。同様の実験を同様の非修飾ＤＮ
Ａ配列を用いて行った。修飾オリゴヌクレオチドと天然
のＤＮＡ断片とは、それぞれ融点が３８．６℃、３５．
５℃なので、前者の方が後者よりもより安定なハイブリ
ッドを形成するということが、得られた結果からわかっ
た。アンチセンス断片の第２の重要な性質はヌクレアー
ゼに対する安定性である。これに関しては、３種の異な
るヌクレアーゼが試験された。即ち、Ｐｌ，Ｂａｌ３１
及びムングビーン（Ｍｕｎｇ Ｂｅａｎ）である。配列
と修飾は前述と同様にした。（２′Ｓ）−２′−デオキ
シ−２′−Ｃ−メチルオリゴヌクレオチドはこれらのヌ
クレアーゼに対して抵抗性であることが示された。非修
飾配列の完全な分解をひき起こしたのと同じ濃度でも修
飾した配列には影響を与えなかったからである。
【図１】例１の構築材料の合成の反応計画。
【図２】例３の構築材料の合成の反応計画。
Claims (23)
- 【請求項１】 オリゴヌクレチオドが配置２′Ｒまたは
２′Ｓをもつ２′−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビ
ルオリゴヌクレオチドであること、および次の一般式
（１）をもつという事実により特徴付けされるオリゴヌ
クレオチド： 【化１】 ここで、ｎは０から２００の間の整数であり、Ｒ１は少
なくとも一度は官能基により置換されるアルキル、アル
ケニルおよびアラルキルのようなヒドロカルビル残基を
表し、Ｂは単核または多核ヘテロサイクリック塩基を表
し、Ｒ２およびＲ３は互いに独立に、任意に水素に結合
したヘテロ原子、水素または任意にヘテロ原子によりリ
ンに結合したＲ１残基を表し、およびＲ８は任意に水素
に結合したヘテロ原子、水素またはヘテロ原子により任
意に炭素に結合したＲ１残基を表すオリゴヌクレオチ
ド。 - 【請求項２】 請求の範囲第１項に従ったオリゴヌクレ
オチドで、Ｒ１残基が好ましくはメチル、エチル、プロ
ピル、アリルおよびベンジルからなる群から選択される
オリゴヌクレオチド。 - 【請求項３】 請求の範囲第１項または第２項に従った
オリゴヌクレオチドで、Ｒ１ヒドロカルビル基が−ＮＨ
２、−ＯＨおよび−ＣＯの中から選択される官能基で置
換されるオリゴヌクレオチド。 - 【請求項４】 前述の請求の範囲のいずれか一つの項に
従ったオリゴヌクレオチドで、Ｂがプリン誘導体を表す
オリゴヌクレオチド。 - 【請求項５】 請求の範囲第４項に従ったオリゴヌクレ
オチドで、プリン誘導体がアデニン、ヒポキサンチンお
よびグアニンからなる群から選択されるオリゴヌクレオ
チド。 - 【請求項６】 請求の範囲第１項から第３項のいずれか
一つの項に従ったオリゴヌクレオチドで、Ｂがピリミジ
ン誘導体を表すオリゴヌクレオチド。 - 【請求項７】 請求の範囲第６項に従ったオリゴヌクレ
オチドで、ピリミジン誘導体がシトシン、ウラシルおよ
びチミンからなる群から選択されるオリゴヌクレオチ
ド。 - 【請求項８】 前述の請求の範囲のいずれか一つの項に
従ったオリゴヌクレオチドで、Ｒ２およびＲ３により表
されるヘテロ原子が好ましくは酸素および硫黄からなる
群から選択されるオリゴヌクレオチド。 - 【請求項９】 前述の請求の範囲のいずれか一つの項に
従ったオリゴヌクレオチドで、Ｒ１型の残基がリンに結
合するヘテロ原子の中で酸素原子がＲ２およびＲ３残基
を表すことを好むオリゴヌクレオチド。 - 【請求項１０】 治療および診断への使用のためのアン
チセンスオリゴヌクレオチドで、請求の範囲第１項から
第９項に従った２′−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカル
ビルオリゴヌクレオチドであるように特徴付けされるア
ンチセンスオリゴヌクレオチド。 - 【請求項１１】 化合物が次の構造式（２）をもつ化合
物： 【化２】 ここで、Ｒ１は選択的に少なくとも一度は官能基により
置換されるアルキル、アルケニルおよびアラルキルのよ
うなヒドロカルビル残基を表し、Ｂはモノまたはポリヌ
クレアヘテロサイクリック含窒塩基を表し、Ｒ４、Ｒ５
およびＲ６がそれぞれ独立に、選択的に水素に結合した
ヘテロ原子、水素またはヘテロ原子によりリンに選択的
に結合するＲ１残基を表し、これらの残基の一つを欠く
もので、Ｒ７は水素または保護基を表し、およびＲ８が
選択的に水素に結合するヘテロ原子、水素または選択的
にヘテロ原子により炭素に結合するＲ１残基を表す化合
物で、これらが２′Ｒまたは２′Ｓ配置をもち、請求の
範囲第１項から第１０項の２′−デオキシ−２′−ヒド
ロカルビルオリゴヌクレオチドの合成の開始産物として
使用されることにより特徴付けされる化合物。 - 【請求項１２】 請求の範囲第１１項に従った化合物
で、Ｒ１残基が好ましくはメチル、エチル、プロピル、
アリルおよびベンジルからなる群から選択される化合
物。 - 【請求項１３】 請求の範囲第１１項または第１２項に
従った化合物で、Ｒ１残基が−ＮＨ２、−ＯＨおよび−
ＣＯの間から選択される官能基で置換される化合物。 - 【請求項１４】 請求の範囲第１１項から第１３項のい
ずれか一つの項に従った化合物で、Ｂがプリン誘導体を
表す化合物。 - 【請求項１５】 請求の範囲第１４項に従った化合物
で、プリン誘導体がアデニン、ヒポキサンチンおよびグ
アニンからなる群から選択される化合物。 - 【請求項１６】 請求の範囲第１１項から第１３項のい
ずれか一つの項に従った化合物で、Ｂがピリミジン誘導
体である化合物。 - 【請求項１７】 請求の範囲第１６項に従った化合物
で、ピリミジン誘導体がシトシン、ウラシルおよびチミ
ンからなる群から選択される化合物。 - 【請求項１８】 請求の範囲第１１項から第１７項のい
ずれか一つの項に従った化合物で、Ｒ４、Ｒ５およびＲ
６により表されるヘテロ原子がそれぞれ独立に酸素およ
び硫黄からなる群から選択される化合物。 - 【請求項１９】 請求の範囲第１１項から第１８項のい
ずれか一つの項に従った化合物で、Ｒ１型の残基がリン
に結合するヘテロ原子の中で、酸素原子がＲ４、Ｒ５お
よびＲ６残基をむしろ表す化合物。 - 【請求項２０】 請求の範囲第１１項から第１９項のい
ずれか一つの項に従った化合物で、Ｒ１およびＢの基が
保護されている化合物。 - 【請求項２１】 請求の範囲第２０項に従った化合物
で、保護基がベンゾイルである化合物。 - 【請求項２２】 請求の範囲第１１項から第２０項のい
ずれか一つの項に従った化合物で、Ｒ７により表される
保護基が４、４′−ジメトキシトリフェニルメチルであ
る化合物。 - 【請求項２３】 請求の範囲第１１項から第２２項に従
った化合物から開始される、請求の範囲第１項から第１
０項に従った２′−デオキシ−２′−Ｃ−ヒドロカルビ
ルオリゴヌクレオチドの合成の過程。
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| ITRM910890A IT1249732B (it) | 1991-11-26 | 1991-11-26 | Oligonucleotidi antisenso. |
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