JPH0692989A

JPH0692989A - Δ２２−コレスタ−５，７，２２−トリエン−１α，３β，２４−トリオール化合物

Info

Publication number: JPH0692989A
Application number: JP5064683A
Authority: JP
Inventors: Hector F Deluca; エフ．デルーカヘクター; Nobuo Ikekawa; 信夫池川; Yoko Tanaka; 洋子田中
Original assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Current assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Priority date: 1984-05-31
Filing date: 1993-03-01
Publication date: 1994-04-05
Anticipated expiration: 2009-08-17
Also published as: JPH0576940B2; GB2159520B; GB2159520A; GB8513721D0; JPH0662664B2; WO1985005622A1; AU4063985A; DE3590232C2; FR2565227B1; DE3590232T; IE851284L; IE58286B1; BE902528A; JPS61502257A; US4588528A; FR2565227A1

Abstract

(57)【要約】【目的】１，２４−ジヒドロキシ−Δ²²−ビタミンＤ
₃ 化合物の合成中間体を提供する。【構成】一般式【化１】（式中Ｒ₁ およびＲ₂ は、Ｒ₁ が水素でありＲ₂ が水酸
基であるか、又はＲ₁ が水酸基でありＲ₂ が水素であ
り、Ｒ₃ およびＲ₄ はおのおの水素または１ないし４個
の炭素原子を有するアシル基である）で示される化合
物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はビタミンＤ₃ の新規な誘
導体の合成中間体に関するものである。さらに詳しく
は、本発明は１，２４−ジヒドロキシル化−Δ²²−ビタ
ミンＤ₃化合物の合成中間体であるΔ²²−コレスタ−
５，７，２２−トリエン−１α，３β，２４−トリオー
ル化合物に関するものである。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】腸のカ
ルシウム輸送、腸の燐酸塩輸送および骨のカルシウム流
通（mobilizatioin ）の刺激となるビタミンＤの活性ホ
ルモン形が１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃ （１，
２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ ）であることが発見されて以来、
この化合物の類似体の化学合成に対する関心が生物学的
活性の高い類似体または特定の器官での作用を目的とし
た類似体といういずれかの観点から相当に高まってき
た。現在までに作り出された類似化合物のうちで最も効
能高いものは２６，２６，２６，２７，２７，２７−ヘ
キサフルオロ−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ
₃（２６，２７−Ｆ₆ −１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ ）
（米国特許第４，３５８，４０６号明細書）および２
４，２４−ジフルオロ−１，２５−ジヒドロキシビタミ
ンＤ₃ （２４，２４−Ｆ₂ −１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ
₃ ）（米国特許第４，２０１，８８１号明細書）であ
る。これらの化合物は天然ホルモンの少なくとも１０倍
の活性を有している。側鎖を変えたその他の化合物のす
べてはΔ²²位に不飽和基と２４Ｓ位にメチル基をそれぞ
れ１個有するエルゴステロール側鎖を除いて生物学的活
性は低いと考えられる。この化合物はひなの腸のサイト
ゾルレセプター（receptor）と結合した場合および哺乳
類体内での生物学的活性は同等のようであるが、鳥類で
は１０分の１の活性になるようである。従って、種々の
類似化合物を調製し、それらを別々に試験することは興
味のあることである。また、１，２４−ジヒドロキシビ
タミンＤ₃ （１，２４−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ ）はひなの腸の
レセプターと結合した場合の１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃
と同等の活性であるが、ある生体内では１，２４Ｒ−
（ＯＨ）₂ Ｄ₃ が１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ の僅か１０
分の１の活性となり、１，２４Ｓ−異性体が１，２４Ｒ
−異性体より低活性であるという事実も興味のあること
である。

【０００３】

【課題を解決するための手段】２種の新規なビタミンＤ
誘導体を調製した。これらの化合物は１，２４−ジヒド
ロキシビタミンＤ₃ （１，２４−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ ）の２
２，２３−トランス異性体であり、１個の２重結合が２
２位に挿入されており、ヒドロキシル官能基が２４位の
炭素原子上のＳおよびＲ位に置換されたものである。そ
の化合物はそれぞれ（２２Ｅ，２４Ｓ）−１，２４−ジ
ヒドロキシ−Δ²²−ビタミンＤ₃ および（２２Ｅ，２４
Ｒ）−１，２４−ジヒドロキシ−Δ²²−ビタミンＤ₃ 、
及びそれらのアシル誘導体である。両化合物はともにビ
タミンＤ様の活性を示すが、２種のうちでは２４−Ｓ化
合物の方が活性が大きく、事実上１，２５−（ＯＨ）₂
Ｄ₂ に近い活性を示す。本発明の化合物は前記１，２４
−（ＯＨ）₂ −Δ²²−Ｄ₃ 化合物の合成中間体として好
適に用いられる、Δ²²−コレスタ−５，７，２２−トリ
エン−１α，３β，２４−トリオール化合物であり、ヒ
ドロキシル官能基が２４位の炭素原子上のＳおよびＲ位
に置換されたものである。

【０００４】次に本発明を詳細に説明する。本発明の化
合物は、以下に記載する同じ化合物を同じ番号で識別し
た図式および説明に従って合成することができる。ここ
で本発明の化合物は（１０）、（１１）で示される。以
下の説明の中に示す物理化学的測定値は次の如くして求
めた。融点は熱ステージ顕微鏡により測定し、未補正の
ままで示した。ＵＶスペクトルは島津ＵＶ−２００ダブ
ルビーム分光計を用いエタノール溶液中で測定した。¹H
-NMRスペクトルは日立Ｒ−２４Ａ分光計、ＪＥＯＬＰ
Ｓ−１００分光計又はＪＥＯＬＦＸ−４００分光計に
より求めた。NMR スペクトルはすべて内部基準としてテ
トラメチルシランを有するＤＣＤｌ₃ 溶液中で求めた。
質量スペクトルは島津ＬＫＢ９０００Ｓ分光計を用い７
０ｅＶで求めた。カラムクロマトグラフィーはシリカゲ
ル（メルク社、７０−２３０メッシュ）を用いて行っ
た。分取薄層クロマトグラフィーはシリカゲル（メル
ク、シリカゲル６０Ｆ₂₅₄ ）をプレコートしたプレート
上で行った。常法による仕上げとは水による希釈、有機
溶剤による抽出、中性になるまでの洗浄、硫酸マグネシ
ウムを用いる乾燥、ろ過および減圧下での溶剤の除去等
を指す。

【０００５】

【化２】

【０００６】

【化３】

【０００７】

【実施例】次に本発明を下記の実施例に基づきさらに詳
細に説明する。１．合成参考例１２２−ヒドロキシ−２３，２４−ジノルコル
−１，４，６−トリエン−３−オン（２）。３β−アセ
トキシジノルコレン酸（１）（７．０ｇ、１８．０４ミ
リモル）のＴＨＦ（２０ｍｌ）溶液中へリチウムアルミ
ニウムハイドライド（３．０ｇ，７８．９５ミリモル）
を添加した。この混合液を６０℃で１４時間撹拌した。
この反応混合物へ水と酢酸エチルを注意しながら添加し
た。ろ過後溶剤除去により残留物（５．２ｇ）が得られ
た。この残留物をジオキサン（１４０ｍｌ）中でジクロ
ロジシアノベンゾキノン（１１．７ｇ，５１．５４ミリ
モル）により還流冷却器つきで１４時間処理した。反応
混合物は室温まで冷却後ろ過し、ろ液を蒸発させた残留
物をアルミナカラム（２００ｇ）にかけた。ジクロロメ
タンを用いる溶離によってトリエノン（trienone）
（２）（２．８ｇ，４７％）を与えた。融点１５６−１
５７°（エーテル精製）。ＵＶλ_max ^{エタノール}nm（ε）:299
(13000), 252(9200), 224(12000), ¹H-NMR(CDCl₃) : 0.
80(3H, s, 18-H₃),1.04(3H, d, J=6Hz, 21-H₃), 1.21(3
H, s, 19-H₃), 3.10-3.80(3H, m, 22-H₂ およびOH), 5.
90-6.40(4H, m, 2-H, 4-H, 6-H,および7H), 7.05(1H,
d, J=10Hz, 1-H), MS m/z : 326(M⁺), 311, 308, 293,
267, 112。

【０００８】参考例２２２−テトラヒドロピラニルオ
キシ−２３，２４−ジノルコル−１α，２α−エポキシ
−４，６−ジエン−３−オン（３）。アルコール（２）
（２．７ｇ，８．２８ミリモル）をジクロロメタン（５
０ｍｌ）中でジヒドロピラン（１．５ｍｌ，１６．４２
ミリモル）およびｐ−トルエンスルホン酸（５０ｍｇ）
により室温で１時間処理した。常法による仕上げ（酢酸
エチル抽出）により粗生成物が得られた。これをメチル
アルコール（７０ｍｌ）に溶解して３０％のＨ₂Ｏ₂
（４．８ｍｌ）と１０％のＮａＯＨメチルアルコール溶
液（０．７４ｍｌ）を添加して、この混合物を室温で１
４時間撹拌した。常法による仕上げ（酢酸エチル抽出）
により得られた粗生成物をシリカゲル（５０ｇ）のカラ
ムにかけた。ベンゼン−酢酸エチル（１００：１）によ
る溶離がエポキシド（３）（１．４５ｇ，４１％）を与
えた。融点１１３−１１５°（ヘキサン）。ＵＶλ_max
^{エタノール}nm（ε）:290(22000), ¹H-NMR(CDCl₃) : 0.80(3H,
s, 18-H₃), 1.07(3H, d, J=6Hz, 21-H₃), 1.18(3H, s,
19-H₃), 3.38(1H, dd, J=4および1.5Hz, 1-H), 3.55(1
H, d, J=4Hz, 2-H), 3.30-4.10(4H, m, 22-H₂およびTH
P), 4.50(1H, m, THP), 5.58(1H, d, J=1.5Hz, 4-H),
6.02(2H, s, 6-Hおよび7-H), MS m/z : 342(M⁺-DHP), 3
24(M⁺-THPOH), 309, 283, 85 。

【０００９】参考例３２３，２４−ジノルコル−５−
エン−１α，３β，２２−トリオール−１，３−ジアセ
テート（４）。リチウム（３．２５ｇ）を−７８℃、ア
ルゴン雰囲気中で液体アンモニア（１３０ｍｌ）中へ少
量ずつ３０分かけて添加した。−７８℃で１時間撹拌
後、無水ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のエポキシド（３）
（１．３３ｇ，３．１２ミリモル）を−７８℃で３０分
かけて滴下添加した。この反応混合物へ無水ＮＨ₄ Ｃｌ
（４０ｇ）を−７８℃で１時間かけて少量ずつ添加し
た。１．５時間後、冷却バスを取除き、アルゴンの泡立
ちで大部分のアンモニアを除去した。常法による仕上げ
（酢酸エチルによる抽出）により粗生成物（１．２３
ｇ）を得た。この粗生成物を室温で無水酢酸（３ｍｌ）
とピリジン（４ｍｌ）で１４時間処理した。常法による
仕上げ（酢酸エチルによる抽出）により粗生成物（１．
３ｇ）を得た。これをメタノール（４ｍｌ）とＴＨＦ
（５ｍｌ）中へ入れ、２Ｍ−ＨＣｌの２滴を加え室温で
２時間処理した。常法による仕上げ（エーテル抽出）に
よる粗生成物（１．１ｇ）をシリカゲル（４０ｇ）カラ
ムにかけた。ベンゼン−酢酸エチル（１０：１）による
溶離が１．３−ジアセテート（４）（５７５ｍｇ，４２
％）を与えた。油状，¹H-NMR(CDCl₃) : 0.68(3H, s, 18
-H₃), 1.07(3H, s, 19-H₃), 1.99(3H, s, アセチル）,
2.02(3H, s, アセチル）,3.02-3.72(2H, m, 22-H₂), 4.
79(1H, m, 3-H), 4.98(1H, m, 1-H), 5.46(1H, m,6-H),
MS m/z : 372(M⁺-CH₃COOH), 313, 312, 297, 279, 25
3。

【００１０】参考例４１α，３β−ジアセトキシ−２
３，２４−ジノルコラン−２２−アール（５）。ジクロ
ロメタン（２０ｍｌ）中の２２−アルコール（４）（５
５０ｍｇ，１．２７ミリモル）を室温でクロロクロム酸
ピリジン（８３６ｍｇ，３．８５ミリモル）および酢酸
ナトリウム（１００ｍｇ）を用いて１時間処理した。こ
の反応混合物へエーテル（１００ｍｌ）を添加し、その
混合物を短いフロリシル（Florisil）カラムを通してろ
過した。ろ液を濃縮して得た残留物をシリカゲル（２０
ｇ）のカラムにかけた。ベンゼン−酢酸エチル（２０：
１）による溶離が２２−アルデヒド（５）（４４８ｍ
ｇ，８２％）を与えた。油状，¹H-NMR(CDCl₃):0.70(3H,
s, 18-H₃), 1.07(3H, s, 19-H₃), 1.09(3H, d, J=7Hz,
21-H₃), 1.99(3H, s,アセチル），2.02(3H, s, アセチ
ル），4.79(1H, m, 3-H), 4.98(1H, m, 1-H), 5.45(1H,
m, 6-H), 9.45(1H, d, J=4Hz, 22-H), MS m/z :310(M⁺
-2×CH₃COOH), 295, 253。

【００１１】参考例５（２２Ｅ）−１α，３β−ジア
セトキシ−コレスタ−５，２２−ジエン−２４−オン−
（６）。２２−アルデヒド（５）（４２０ｍｇ，０．９
７７ミリモル）のジメチルスルホキシド（３０ｍｌ）溶
液中へイソブチリルメチレントリフェニルホスホラン
（２．０３ｇ，５．８７ミリモル）を添加した。この混
合物を９５℃で７２時間撹拌した。常法による仕上げ
（エーテル抽出）により得た粗生成物をシリカゲルカラ
ム（１０ｇ）にかけた。ベンゼン−酢酸エチル（１０：
１）による溶離がエノン（enone ）（６）（３９２ｍ
ｇ，８１％）を与えた。油状，¹H-NMR(CDCl₃) : 0.71(3
H, s, 18-H₃), 1.08(3H, s, 19-H₃), 1.09(9H, d, J=7H
z, 21-H₃, 26-H₃,および27-H₃), 1.99(3H, s, アセチ
ル），2.02(3H, s,アセチル）, 4.79(1H, m, 3-H), 4.9
8(1H, m, 1-H), 5.45, (1H, m, 6-H), 5.96(1H, d, J=1
6Hz, 23-H), 6.65(1H, dd, J=16および8Hz, 22-H), MS
m/z : 438(M⁺-CH₃COOH), 378(M⁺-2×CH₃COOH), 363, 33
5, 307, 253, 43。

【００１２】参考例６（２２Ｅ）−１α，３β−ジア
セトキシ−５α，８α−（３，５−ジオキソ−４−フェ
ニル−１，２，４−トリアゾリジノ）−コレスタ−６，
２２−ジエン−２４−オン−（７）。エノン（６）（３
８５ｍｇ，０．７７３ミリモル）の四塩化炭素（２０ｍ
ｌ）溶液中へブロモこはく酸イミド（１９３ｍｇ，１．
４当量）を添加し、この混合物をアルゴン雰囲気中で２
５分間還流冷却器つきで処理した。０℃まで冷却後、得
られた沈殿物をろ別した。ろ液を４０℃以下で濃縮して
残留物を得た。これをＴＨＦ（１５ｍｌ）中で触媒量の
テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム臭化物を加えて室温で
５０分間処理した。その後、この反応混合物へテトラ−
ｎ−ブチル−アンモニウムフッ化物のＴＨＦ溶液（３．
５ｍｌ，３．５ミリモル）を添加し、この混合物を室温
で３０分間撹拌した。通常の仕上げ（酢酸エチル抽出）
により５，７−ジエン粗生成物（３８０ｍｇ）を得た。
これのクロロホルム（１５ｍｌ）溶液を１−フェニル−
１，２，４−トリアゾリン−３，５−ジオン（９５ｍ
ｇ，０．５４ミリモル）のクロロホルム（１０ｍｌ）溶
液で室温において１時間処理した。減圧下で溶媒を除去
して得た残留物をシリカゲル（１０ｇ）カラムにかけ
た。ベンゼン−酢酸エチル（５：１）による溶離により
トリアゾリンアダクト（７）（１９１ｍｇ，３７％）を
与えた。油状，¹H-NMR(CDCl₃) : 0.83(3H, s, 18-H₃),
1.01(3H, s, 10-H₃), 1.08(9H, d, J=7Hz, 21-H₃, 26-H
₃,および27-H₃), 1.97(3H, s, アセチル）, 1.98(3H,
s, アセチル）, 5.03(1H, m, 1-H), 5.84(1H, m, 3-H),
5.96(1H, d, J=16Hz, 23-H), 6.28(1H, d, J=8.5Hz, 6
-H または7-H), 6.41(1H, d, J=8.5Hz, 6-Hまたは7-H),
6.65(1H, dd, J=16 および8Hz, 22-H), 7.20-7.60(5H,
m, -ph), MC m/z : 436(M⁺-phC₂N₃O₂-CH₃COOH), 376(4
36-CH₃COOH), 333, 305, 251, 43 。

【００１３】参考例７（２２Ｅ，２４Ｒ）−および
（２２Ｅ，２４Ｓ）−１α，３β−ジアセトキシ−５
α，８α−（３，５−ジオキソ−４−フェニル−１，
２，４−トリアゾリジノ）−コレスタ−６，２２−ジエ
ン−２４−オール（９ａおよび８ａ）。エノン（７）
（１５０ｍｇ，０．２２４ミリモル）のＴＨＦ（６ｍ
ｌ）とメタノール（６ｍｌ）との溶液をホウ化水素ナト
リウム（１７ｍｇ，０．４４８ミリモル）を用い室温で
１０分間処理した。常法による仕上げ（エーテル抽出）
により得た粗生成物（１５０ｍｌ）を分取ＴＬＣ（ベン
ゼン−酢酸エチル＝３：１，７回展開）にかけた。Ｒｆ
値０．５３のバンド部分をかきとり酢酸エチルで溶離さ
せた。溶剤を減圧下で除去すると極性の小さい（２４
Ｓ）−２４−アルコール−（８ａ）（４３．２ｍｇ，２
８．７％）を得た。融点：１４２−１４４℃（エーテル
−ヘキサン），MS m/z : 438(M⁺-phC₂N₃O₂-CH₃COOH), 4
20, 378(438-CH₃COOH), 360, 363, 345, 335, 318, 10
9, 43。Ｒｆ値０．５０のバンド部分をかきとり酢酸エ
チルで溶離すると極性の大きい（２４Ｒ）−２４−アル
コール（９ａ）（６４．８ｍｇ，４３．１％）を得た。
融点：１４０−１４２℃（エーテル−ヘキサン）。（９
ａ）の質量スペクトルは（８ａ）のそれと同じであっ
た。

【００１４】参考例８（２２Ｅ，２４Ｓ）−１α，３
β−ジアセトキシ−５α，８α−（３，５−ジオキソ−
４−フェニル−１，２，４−トリアゾリジノ）−コレス
タ−６，２２−ジエン−２４−オール（＋）−ＭＴＰＡ
エステル（８ｂ）。２４アルコール（８ａ）（８．３ｍ
ｇ，０．０１２３ミリモル）をピリジン（１ｍｌ）中で
（＋）−ＭＴＰＡ−Ｃｌの３滴により室温で１時間処理
した。常法による仕上げ（酢酸エチル）によりＭＴＰＡ
エステル（８ｂ）（１０．４ｍｇ，９５％）を得た。¹H
-NMR(CDCl₃, 100 MHz) : 0.85(3H, s, 18-H₃), 0.88(3
H, d, J=7Hz, 26-H₃), 0.92(3H, d, J=7Hz, 27-H₃), 1.
04(3H, d, J=7Hz, 21-H₃), 1.08(3H, s, 19-H₃), 2.03
(3H, s, アセチル）, 2.06(3H, s, アセチル）, 3.27(1
H, m), 3.54(3H, s, -OCH ₃), 6.28(1H, d, J=8Hz, 6-H
または7-H), 6.41(1H, d, J=8Hz, 6-Hまたは7-H), 7.24
-7.56(5H, m, -ph) 。

【００１５】参考例９（２２Ｅ，２４Ｒ）−１α，３
β−ジアセトキシ−５α，８α−（３，５−ドキソ−４
−フェニル−１，２，４−トリアゾリジノ）−コレスタ
−６，２２−ジエン−２４−オール２４−（＋）−ＭＴ
ＰＡエステル（９ｂ）。２４アルコール（９ａ）（７．
９ｍｇ，０．０１１７ミリモル）を（８ｂ）で述べたの
と同様にしてＭＴＰＡエステル（９ｂ）（９．３ｍｇ，
８９％）に変えた。¹H-NMR(CDCl₃, 100 MHz): 0.83(3H,
s, 18-H₃), 0.88(6H, d, J=7Hz, 26-H₃および27-H₃),
1.04(3H, d, J=7Hz, 21-H₃), 1.08(3H, s, 19-H₃), 2.0
3(3H, s,アセチル）, 2.05(3H, s, アセチル）, 3.27(1
H, m), 3.54(3H, s, -OCH ₃), 6.28(1H, d,J=8Hz, 6-H
または7-H), 6.41(1H, d, J=8Hz, 6-Hまたは7-H), 7.24
-7.56(5H,m, -ph) 。参考例１０（２２Ｅ，２４Ｓ）−６β−メトキシ−３
α，５−シクロ−５α−コレスタ−２７−エン−２４−
オール２４−（＋）−ＭＴＰＡエステル（１４ｂ）。既
知の（２４Ｓ）−２４−アルコール（１４ａ）（１０．
１ｍｇ，０．０２４４ミリモル）を（８ｂ）で述べたの
と同様にして（２４Ｓ）−ＭＴＰＡエステル（１４ｂ）
（８．２ｍｇ，５４％）に変えた。¹H-NMR(CDCl₃, 100
MHz) : 0.72(3H, s, 18-H₃), 0.89(3H, d, J=7Hz, 26-H
₃), 0.93(3H, d, J=7Hz, 27-H₃), 1.02(3H, d, J=7Hz,
21-H₃), 1.04(3H, s, 19-H₃), 2.75(1H, m, 6-H), 3.33
(3H,s, -OCH ₃ ）, 3.54(3H, s, -OCH₃)。

【００１６】参考例１１（２２Ｅ，２４Ｒ）−６β−
メトキシ−３α，５−シクロ−５α−コレスタ−２２−
エン−２４−オール２４−（＋）ＭＴＰＡエステル（１
５ｂ）。既知の（２４Ｒ）−２４−アルコール（１５
ａ）（１１．０ｍｇ，０．０２６６ミリモル）を（８
ｂ）で述べたのと同様にして（２４Ｒ）−ＭＴＰＡエス
テル（１５ｂ）（９．４ｍｇ，５６％）に変えた。¹H-N
MR(CDCl₃, 100 MHz) : 0.76(3H, s, 18-H₃), 0.88(6H,
d, J=7Hz, 26-H₃ および27-H₃), 1.04(3H, d, J=7Hz,21
-H₃), 1.05(3H, s, 19-H₃), 2.77(1H, m, 6-H), 3.36(3
H, s, -OCH ₃), 3.57(3H, s, -OCH ₃)。

【００１７】実施例１（２２Ｅ，２４Ｒ）−コレスタ
−５，７，２２−トリエン−１α，３β，２４−トリオ
ール（１０）。トリアゾリン付加体（９ａ）（１５．０
ｍｇ，０．０２２３ミリモル）をＴＨＦ（５ｍｌ）中で
リチウムアルミニウムハイドライド（５ｍｇ，０．１３
２ミリモル）により還流冷却器つきで２時間処理した。
この反応混合物へ水を加えてろ過した。ろ液は減圧下で
残留物が得られるまで濃縮し、その残留物を分取ＴＬＣ
（ベンゼン−酢酸エチル、１：１，３回展開）にかけ
た。Ｒｆ値０．３５のバンド部分をかき取り、酢酸エチ
ルによって溶離させた。溶剤除去が５，７−ジエン（１
０）（３．３ｍｇ，３６％）を与えた。ＵＶ
λ_max ^{エタノール}：294, 282, 272, MS m/z : 414(M⁺), 396,
381, 378, 363, 353, 335, 317, 287, 269, 251, 127,
109 。実施例２（２２Ｅ，２４Ｓ）−コレスタ−５，７，２
２−トリエン−１α，３β，２４−トリオール（１
１）。トリアゾリン付加体（８ａ）（１６．５ｍｇ，
０．０２４５ミリモル）を（１０）で述べたのと同様に
して５，７−ジエン（１１）（３．５ｍｇ，３５％）に
変えた。（１１）のＵＶおよびＭＳスペクトルは（１
０）のそれと同じであった。

【００１８】参考例１２（２２Ｅ，２４Ｒ）−１α，
２４−ジヒドロキシ−Δ²²−ビタミンＤ₃ （１２）。
（２４Ｒ）−５，７−ジエン（１０）（３．３ｍｇ，
７．９７モル）のベンゼン（９０ｍｌ）、エタノール
（４０ｍｌ）溶液をアルゴン雰囲気中で氷冷却しながら
中圧水銀ランプ光をビコール（Vycor ）フィルターを通
して２．５分間照射した。その後、この反応混合物をア
ルゴン雰囲気中で１時間還流冷却器つきで処理した。減
圧下での溶剤除去が与えた粗生成物を分取ＴＬＣ（ベン
ゼン−酢酸エチル、１：１，３回展開）にかけた。Ｒｆ
値０．４０のバンド部分をかき取り、酢酸エチルによっ
て溶離させた。減圧下での溶剤除去がビタミンＤ₃ 類似
物（１２）（０．５９ｍｇ，１８％）を与えた。これは
さらに溶離剤として２％のメタノールを含むジクロロメ
タンを２ｍｌ／ｍｉｎの流出速度で流す高性能液体クロ
マトグラフィー（ＨＰＬＣ）にかけゾルバックス−シル
（Zorbax-SIL）カラム（４．６ｍｍ×１５ｃｍ）上で精
製した。（１２）の保持時間は５．２分であった。ＵＶ
λ_max ^{エタノール} 265 nm,λ_min ^{エタノール} 228 nm、 MS m/z : 414
(M⁺),396, 378, 363, 360, 345, 335, 317, 287, 269,
251, 249, 152, 135, 134, 109。¹H-NMR(CDCl₃, 400.5
MHz) : 0.57(3H, s, 18-H₃), 0.87(3H, d, J=6.7Hz,26-
H₃), 0.92(3H, d, J=6.7Hz, 27-H₃), 1.04(3H, d, J=6.
6Hz, 21-H₃), 2.32(1H, dd, J=13.7 および6.6Hz), 2.6
0(1H, dd, J=13.4 および3.4Hz), 2.83(1H, dd, J=12.6
および4.0Hz), 4.23(1H, m, 3-H), 4.43 (1H, m, 1-
H), 5.00(1H, bs, W_1/2=4.3Hz, 19-H), 5.33(1H, bs, W
_1/2=4.3Hz, 19-H), 5.39(1H, dd, J=15.2および7.1Hz,
22-H), 5.51(1H, dd, J=15.2 および8.3Hz, 23-H), 6.0
1(1H, d,J=11.4Hz, 6-H), 6.38(1H, d, J=11.4Hz, 7-
H)。

【００１９】参考例１３（２２Ｅ，２４Ｓ）−１α，
２４−ジヒドロキシ−Δ²²−ビタミンＤ₃ （１３）。
（２４Ｓ）−５，７−ジエン（１１）（３．５ｍｇ，
８．４５モル）を（１２）で述べたと同様にしてビタミ
ンＤ₃ 形（１３）（０．５６ｍｇ，１６％）に変形し
た。上述のＨＰＬＣ条件下の（１３）の保持時間は４．
７分であった。（１３）のＵＶおよびＭＳのスペクトル
は（１２）のそれと同じであった。¹H-NMR(CDCl₃, 400.
5 MHz) : 0.57(3H, s, 18-H₃), 0.87(3H, d, J=6.7Hz,2
6-H₃), 0.92(3H, d, J=6.7Hz, 27-H₃), 1.05(3H, d, J=
6.6Hz, 21-H₃), 2.32(1H, dd, J=13.7 および6.6Hz),
2.60(1H, dd, J=13.4 および3.4Hz), 2.83(1H, dd, J=1
2.6 および4.0Hz), 4.23(1H, m, 3-H), 4.43 (1H, m, 1
-H), 5.00(1H, bs, W_1/2=4.3Hz, 19-H), 5.33(1H, bs,
W_1/2=4.3Hz, 19-H), 5.37(1H, dd, J=15.4および7.5Hz,
22-H), 5.46(1H, dd, J=15.4 および8.3Hz, 23-H), 6.
01(1H, d,J=11.4Hz, 6-H), 6.38(1H, d, J=11.4Hz, 7-
H)。２４−アルコール−８ａおよび９ａのＣ−２４位におけ
る原子団配置を明確にするため、それぞれを（＋）−Ｍ
ＴＰＡエステル８ｂおよび９ｂに変えた。８ｂおよび９
ｂの¹H-NMRを既知の（２４Ｓ）−２４−アルコール１４
ａとその（２４Ｒ）−異性体１５ａからそれぞれ誘導し
た（＋）−ＭＴＰＡエステル１４ｂおよび１５ｂのそれ
と比較した。８ｂ，９ｂ，１４ｂおよび１５ｂのメチル
基の¹H-NMRデータを表１に示す。表２に示すように、
（２４Ｒ）−ビタミンＤ₃ 類似体１２および既知の（２
４Ｓ）−異性体１３のＣ−２２およびＣ−２３の陽子の
¹H-NMRデータはそれぞれ既知の（２４Ｒ）−アリルアル
コール１５ａおよびその（２４Ｓ）−異性体１４ａのそ
れらとよく一致した。これら¹H-NMRのデータ（表１およ
び表２記載）は合成ビタミンＤ₃ 類似体１２および１３
の指定を確証した。

【００２０】

【表１】

【００２１】

【表２】

【００２２】２．生物学的活性本発明の化合物から合成されるビタミンＤ₃ 誘導体
（１，２４−（ＯＨ）₂ −Δ²²−Ｄ₃ ）の生物学的活性
は以下に示すような周知の方法に従って測定した。ラット乳離れした雄のラットをホルツマン（ウィスコ
ンシン州マジソン）から購入し、タナカとデルカの報告
（Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA (1974) 71, 1040)と同
じ低燐酸塩（０．１％）、高カルシウム（１．２％）ビ
タミンＤ欠乏食餌（表３）またはスダらの報告（J. Nut
rition (1970) 100, 1049)と同じ低カルシウム（０．０
２％）、適量燐酸塩（０．３％）ビタミンＤ欠乏食餌
（表４）のどちらかをそれぞれ３週間与えた。血清カルシウムおよび無機燐酸塩の定量血清カルシウ
ムは０．１％塩化ランタン中に希釈した試料を用い、原
子吸光光度計法により定量した。使用した装置はパーキ
ンエルマー（Perkin-Elmer）原子吸光光度計４０３型で
ある。血清無機燐酸塩はチエンらの方法（Anal. Chem.
(1956) 28.1756 ）により定量した。

【００２３】骨灰分の測定骨灰分の測定は大腿骨につ
いて行った。結合組織を除去した大腿骨はソックスレー
抽出装置を用い、１００％エタノールで２４時間、続い
て１００％ジメチルエーテルで２４時間抽出した。この
脂肪分除去骨は２４時間乾燥後、６５０°のマッフル炉
で２４時間かけて灰化した。腸内カルシウム輸送活性の測定腸内カルシウム輸送は
マーチンとデルカの報告（Am. J. Physiol.(1969) 216,
1351 ）による裏がえし十二指腸のう（everted duoden
al sac）法を用いて測定した。各化合物によるひなの腸内サイドゾルレセプター蛋白質
からの１，２５−（ＯＨ）₂ −［２６，２７− ³Ｈ］Ｄ
₃ の置換ひなの腸内レセプターからの１，２５−（Ｏ
Ｈ）₂ −［２６，２７− ³Ｈ］Ｄ₃ の置換は、シェパー
ドらの方法（Biochem. J. (1979) 182. 55-69 ）に従っ
て定量した。以上の測定により得られた結果は図１、表
３および表４に示す。

【００２４】

【表３】

【００２５】乳離れした雄ラットに３週間くる病的（ra
chitogenic）食餌を与え、その後、９５％エタノール／
プロピレングリコール（５／９５）の０．１ｍｌ混合液
に溶解したそれぞれの化合物を毎日３２．５ρモル／日
の割合で７日間与えた。コントロールグループのラット
にはビヒクルのみを与えた。各グループには６−７匹の
ラットが含まれていた。＊平均値の標準偏差有意差：ｂ）からａ） ρ＜０．００１ｃ） ρ＜０．０２５ｄ） ρ＜０．００５ｆ）およびｇ）からｅ） ρ＜０．００１ｇ）からｆ） ρ＜０．０５

【００２６】

【表４】

【００２７】乳離れした雄ラットに低カルシウム−ビタ
ミンＤ欠乏食餌を３週間与え、その後、９５％エタノー
ル／プロピレングリコール（５／９５）の０．１ｍｌ混
合液に溶解したそれぞれの化合物を毎日３２．５ρモル
／日の割合で７日間与えた。コントロールグループのラ
ットにはビヒクルのみを与えた。各グループには６−７
匹のラットが含まれていた。＊平均値の標準偏差有意差：ｂ）およびｄ）からａ） ρ＜０．００１ｃ）からａ） ρ＜０．００５ｃ）およびｄ）からｂ） ρ＜０．００１ｆ）からｅ） ρ＜０．００５

【００２８】図１は２種の合成１，２４−（ＯＨ）₂ Ｄ
₃ 異性体のひなラット腸内レセプターからの放射性ラベ
ルをつけた１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ を置換する能力を
示す。その結果は２４Ｓ−異性体のレセプターからラベ
ルをつけた１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ を置換する能力が
ラベルをつけない１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ のそれと同
等に強いことを表わしている。２４Ｒ−異性体の活性は
１，２５−（ＯＨ）₂Ｄ₃ またはＳ−異性体の約１０分
の１であることが証明された。低カルシウムビタミンＤ
欠乏食餌におけるラットの腸内カルシウム輸送の刺激に
おいて、その能力は両異性体とも１，２５−（ＯＨ）₂
Ｄ₃ に等しくないが、両異性体とも有効な活性を有する
ことは明らかである（表４）。このことはひなの腸内レ
セプターについて得られたＳ−異性体のレセプターから
放射性ラベルをつけた１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ を置換
する能力が１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ のそれと同等であ
るという結果と対照的である。どちらの異性体も投与し
た量では低カルシウム食餌でのラットの血清カルシウム
増量によって表わされる骨のカルシウム流通応答を誘引
することはできなかった（表４）。これとは対照的に、
１，２４−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ はこの投与量でこの応答を最
小限度まで刺激した。

【００２９】表３は異性体のくる病ラットの大腿骨のミ
ネラル化能力を示している。１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃
を用いた食餌は７日間で十分くる病大腿骨をミネラル化
することができた。これに反して、Ｒ−異性体はこの投
与量レベルでは骨を有意な程度ミネラル化しなかった
が、２４Ｓ−化合物は、１，２５−（ＯＨ）₂ Ｄ₃ より
も低活性ではあるが明らかに有効な能力を有していた。
低燐酸塩食餌での動物の血清無機燐酸塩濃度の上昇は骨
のミネラル化の臨界的な応答である。３種の形のビタミ
ンＤはすべて血清無機燐酸塩レベルを刺激したことは明
らかであるが、どちらの異性体もこの能力で１，２５−
（ＯＨ）₂ Ｄ₃と等しくはなかった（表３）。

【００３０】本発明の化合物から合成される前記１，２
４−（ＯＨ）₂ −Δ²²−Ｄ₃ 化合物の生物学的活性測定
結果は、これら化合物のビタミンＤ様の活性が必要とさ
れる生理学的な事態での用途を指示している。事実、
１，２４Ｓ−異性体の方は骨の流通とは反対に腸および
骨のミネラル化での選択的な効果が整然としているよう
な用途が見出されるビタミンＤの非常に強力な１−ヒド
ロキシル化形とみなすことができる。又、１，２４Ｒ−
異性体は腸内カルシウム輸送及び血清無機燐酸塩濃度の
上昇を選択的に刺激するビタミンＤの１−ヒドロキシル
化形とみなすことができる。

【００３１】前記１，２４−（ＯＨ）₂ −Δ²²−Ｄ₃ 化
合物、またはそれらの他のビタミンＤ誘導体または治療
薬との組合わせは注射または静脈用の無菌消化管外溶
液、または経口投与形式の消化管用、または皮膚用、ま
たは座薬用として容易に使用することができる。前記
１，２４−（ＯＨ）₂ −Δ²²−Ｄ₃ 化合物を実用するに
は、前記化合物それ自体または他のビタミンＤ誘導体と
の組合わせにおける１日当たり約０．５μｇから約２５
μｇの量が一般に有効であるが、組合わせた場合の各化
合物の割合は目標とする病気の状態および所望とする骨
のミネラル化および／または骨の流通の程度に応じる。
使用される化合物の実際的な量は臨界的ではないけれど
も、すべての場合、骨のミネラル化を誘引するのに十分
な化合物を使用すべきである。化合物単独、または骨の
流通を誘引するビタミンＤ誘導体との組合わせにおける
化合物約２５μｇ／日以上の投与は所望の結果を達成す
るには一般に不必要であり、経済的に健全な使用法では
ないであろう。実際上は、ある病状に対する治療的な処
置が所望の目的である場合には多い投与量が用いられ、
他方予防のためには一般に少ない投与量が用いられ、あ
る与えられたケースに投与される量は、当業者周知のよ
うに、投与する化合物、処置すべき病気、患者の状態お
よびその他薬品の活性または患者の応答を変えるかも知
れない薬学的関連事実などに応じて調整されるであろう
ことを理解すべきである。

【００３２】化合物の投与形態は、当業者周知のよう
に、毒性がなく薬学的に許容される担体と組合わせて調
製することができる。そのような担体は固体、液体のど
ちらでもよく、例えば、コーンスターチ、乳糖、しょ
糖、ピーナッツ油、オリーブ油およびプロピレングリコ
ールなどがある。もし固体の担体が使用されるならば、
化合物の投与形態はタブレット、カプセル、粉末、トロ
ーチまたは錠剤となろう。もし液体の担体が使用される
ならば、柔らかいゼラチンカプセルまたはシロップまた
は懸濁液、乳濁液または溶液が投与形態となろう。ま
た、投与形態には防腐剤、安定剤、湿潤剤、または乳化
剤、溶解助剤などの佐薬が含まれることもあろう。ま
た、その他の治療学的に有効な物質が含まれることがあ
ろう。化合物１２および１３で述べたようにあるアシル
化物は生体内でヒドロキシ誘導体への変換が達成され医
薬品として許容されるので、化合物１０，１１，１２お
よび１３が下記式に包含されるものであってもよい。

【００３３】

【化４】

【００３４】ここに、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、Ｒ₁ が水素であ
りＲ₂ が水酸基であるか、又はＲ₁が水酸基でありＲ₂
が水素であり、Ｒ₃ およびＲ₄ はおのおの水素または１
ないし４個の炭素原子を有するアシル基である。前記ア
シル誘導体は、それ自体よく知られている方法によって
得ることができ、例えば前記遊離ヒドロキシ誘導体（１
２，１３）を１ないし４個の炭素原子を有する塩化アシ
ル又は酸無水物試薬と反応させることによって得ること
ができる。また、もし所望ならば、前記１，２４−（Ｏ
Ｈ）₂ −Δ²²−Ｄ₃ 化合物及び本発明の化合物は、例え
ばメタノール−エーテル、メタノール−ヘキサンの如き
適切な溶剤または溶剤系に溶解し、蒸発または他の周知
の手段により溶剤を除去することによって結晶形として
得られることもあろう。

【００３５】

【発明の効果】本発明の化合物、Δ²²−コレスタ−５，
７，２２−トリエン−１α，３β，２４−トリオール化
合物は、１，２４−ジヒドロキシ−Δ²²−ビタミンＤ₃
化合物の合成中間体として好適である。

【図面の簡単な説明】

【図１】２４Ｓ及び２４Ｒ−１，２４−（ＯＨ）_２Ｄ_３
異性体のひなラット腸内レセプターからの放射性ラベル
をつけた１，２５−（ＯＨ）_２Ｄ_３を置換する能力を示
すグラフである。

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成５年７月１２日

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３５

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３５】

【発明の効果】本発明の化合物、Δ^２２−コレスタ−
５，７，２２−トリエン−１α，３β，２４−トリオー
ル化合物は、１，２４−ジヒドロキシ−Δ^２２−ビタミ
ンＤ_３化合物の合成中間体として好適である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者池川信夫日本国東京都武蔵野市吉祥寺東町２−21− ５ (72)発明者田中洋子アメリカ合衆国 12054 ニューヨークデルマーパックスウッドロード 72

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式【化１】（式中Ｒ₁ およびＲ₂ は、Ｒ₁ が水素でありＲ₂ が水酸
基であるか、又はＲ₁ が水酸基でありＲ₂ が水素であ
り、Ｒ₃ およびＲ₄ はおのおの水素または１ないし４個
の炭素原子を有するアシル基である）で示される化合
物。
【請求項２】（２２Ｅ，２４Ｒ）−コレスタ−５，
７，２２−トリエン−１α，３β，２４−トリオールで
ある請求項１記載の化合物。
【請求項３】（２２Ｅ，２４Ｓ）−コレスタ−５，
７，２２−トリエン−１α，３β，２４−トリオールで
ある請求項１記載の化合物。