JPH07107969A - 海藻抽出物を含有する細胞あるいは微生物の増殖促進剤 - Google Patents
海藻抽出物を含有する細胞あるいは微生物の増殖促進剤Info
- Publication number
- JPH07107969A JPH07107969A JP5287197A JP28719793A JPH07107969A JP H07107969 A JPH07107969 A JP H07107969A JP 5287197 A JP5287197 A JP 5287197A JP 28719793 A JP28719793 A JP 28719793A JP H07107969 A JPH07107969 A JP H07107969A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 海藻からの抽出物を細胞あるいは微生物の増
殖促進剤として応用すること。 【構成】 海藻の水および/またはエタノール抽出物を
含有する、またはその70%エタノール可溶画分を含有
する、細胞あるいは微生物の増殖促進剤。海藻は好まし
くは海産緑藻ボウアオノリである。 【効果】 細胞の大量培養に寄与することが期待される
海藻細胞の増殖因子を提供することができる。
殖促進剤として応用すること。 【構成】 海藻の水および/またはエタノール抽出物を
含有する、またはその70%エタノール可溶画分を含有
する、細胞あるいは微生物の増殖促進剤。海藻は好まし
くは海産緑藻ボウアオノリである。 【効果】 細胞の大量培養に寄与することが期待される
海藻細胞の増殖因子を提供することができる。
Description
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、海藻から水および/ま
たはエタノールで抽出した抽出物を細胞あるいは微生物
の増殖促進剤として応用することに関する。本発明は、
海産緑藻ボウアオノリ培養細胞の水および/またはエタ
ノール抽出物を細胞あるいは微生物の増殖促進剤として
応用することに関する。
たはエタノールで抽出した抽出物を細胞あるいは微生物
の増殖促進剤として応用することに関する。本発明は、
海産緑藻ボウアオノリ培養細胞の水および/またはエタ
ノール抽出物を細胞あるいは微生物の増殖促進剤として
応用することに関する。
【0002】
【従来の技術】植物由来の有用物質はきわめて多岐にわ
たっているが、そのなかでも海藻は多糖類をはじめとし
て数多くの物質が知られている。しかし、海藻の大量培
養技術があまり確立されておらず、海面養殖、あるいは
海面漁業に頼っている現状にあり、海藻からの有用物質
の利用の対象が限定されている。
たっているが、そのなかでも海藻は多糖類をはじめとし
て数多くの物質が知られている。しかし、海藻の大量培
養技術があまり確立されておらず、海面養殖、あるいは
海面漁業に頼っている現状にあり、海藻からの有用物質
の利用の対象が限定されている。
【0003】海藻の培養による有用物質生産について、
気候、季節、天候に生産条件が左右されない、閉鎖系で
生産できる、病害の影響を排除できる、底性動物や魚介
類による食害ならびに有害藻による被害を防ぐことがで
きる、収穫までの時間を短縮できる、対象とする物質の
回収が容易である、分化に伴う目的有用物質の生産能の
低下の影響が小さいことなどがあげられが、藻類の植え
継ぎや保存に手間がかかるという問題点もあり、付加価
値の高い物質を生産する海藻の大量培養法から実用化さ
れていくことが予測される。
気候、季節、天候に生産条件が左右されない、閉鎖系で
生産できる、病害の影響を排除できる、底性動物や魚介
類による食害ならびに有害藻による被害を防ぐことがで
きる、収穫までの時間を短縮できる、対象とする物質の
回収が容易である、分化に伴う目的有用物質の生産能の
低下の影響が小さいことなどがあげられが、藻類の植え
継ぎや保存に手間がかかるという問題点もあり、付加価
値の高い物質を生産する海藻の大量培養法から実用化さ
れていくことが予測される。
【0004】細胞の大量培養に関し、陸上植物細胞の増
殖因子については植物ホルモン以外に最近Condit
ioning Factorといわれるものが報告され
(D.BELLINCAMPI等、Plant Sci
ence,51(1987)83−91)、注目されて
いる。海藻の分野では増殖因子についてはまだ余り研究
が進んでいないが、アスコファイラムやLaminar
ia類などの海藻抽出物(水または炭酸ナトリウムによ
る抽出)にサイトカイニン活性があることがBlund
enにより報告されている(NATO Conf Se
r 4,337−334(1976))。
殖因子については植物ホルモン以外に最近Condit
ioning Factorといわれるものが報告され
(D.BELLINCAMPI等、Plant Sci
ence,51(1987)83−91)、注目されて
いる。海藻の分野では増殖因子についてはまだ余り研究
が進んでいないが、アスコファイラムやLaminar
ia類などの海藻抽出物(水または炭酸ナトリウムによ
る抽出)にサイトカイニン活性があることがBlund
enにより報告されている(NATO Conf Se
r 4,337−334(1976))。
【0005】この海藻抽出物を植物あるいは土壌に添加
することにより収穫量の増大、種の発芽の改善、霜、
菌、昆虫耐性の増強、無機物質の吸収量の増大、果実の
保存性の向上が報告されている。しかし、海藻、微細藻
類、微生物等に対する海藻類抽出物の効果に関する研究
は進んでいない。
することにより収穫量の増大、種の発芽の改善、霜、
菌、昆虫耐性の増強、無機物質の吸収量の増大、果実の
保存性の向上が報告されている。しかし、海藻、微細藻
類、微生物等に対する海藻類抽出物の効果に関する研究
は進んでいない。
【0006】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、細胞の大量
培養に寄与することが期待される海藻の抽出物を含有す
る細胞あるいは微生物の増殖促進剤を提供することを目
的とする。
培養に寄与することが期待される海藻の抽出物を含有す
る細胞あるいは微生物の増殖促進剤を提供することを目
的とする。
【0007】
【課題を解決するための手段】細胞培養では、プロトプ
ラストでの培養が一般的である。プロトプラストの単離
方法には、機械的方法と酸素的方法があり、大量にプロ
トプラストを得る際には酵素的方法が採用される。海藻
の細胞壁分解酵素源としては、細胞壁分解酵素を産生す
る細菌類や、海藻食性動物の消化腺を使用する。最近報
告されているアメーバや渦鞭毛藻も使用することができ
る。これまでプロトプラストからの藻体の再分化は、膜
状海藻であるヒトエグサ、スジアオノリ、ボウアオノ
リ、ウスバアオノリ、アサクサノリ、スサビノリの5種
類では好適な培養条件下で安定して確認されているが、
それ以外の体構造の複雑な海藻では成功していない。数
細胞あるいはカルス状態でとまってしまう。
ラストでの培養が一般的である。プロトプラストの単離
方法には、機械的方法と酸素的方法があり、大量にプロ
トプラストを得る際には酵素的方法が採用される。海藻
の細胞壁分解酵素源としては、細胞壁分解酵素を産生す
る細菌類や、海藻食性動物の消化腺を使用する。最近報
告されているアメーバや渦鞭毛藻も使用することができ
る。これまでプロトプラストからの藻体の再分化は、膜
状海藻であるヒトエグサ、スジアオノリ、ボウアオノ
リ、ウスバアオノリ、アサクサノリ、スサビノリの5種
類では好適な培養条件下で安定して確認されているが、
それ以外の体構造の複雑な海藻では成功していない。数
細胞あるいはカルス状態でとまってしまう。
【0008】一方、細胞壁が破壊されて海水中に放出さ
れた原形質の小塊が容易に再生することは、最近にハネ
モについてTatewaki&Nagata、つづいて
マガタマモについてEnomoto&Hiroseがみ
つけだした。この強力な再生能は、種によって強弱はあ
るもののこの植物群には共通して認められる。自然環境
での巨大細胞の傷害を考えると、適応戦略として有効に
機能してきたことが想像される。
れた原形質の小塊が容易に再生することは、最近にハネ
モについてTatewaki&Nagata、つづいて
マガタマモについてEnomoto&Hiroseがみ
つけだした。この強力な再生能は、種によって強弱はあ
るもののこの植物群には共通して認められる。自然環境
での巨大細胞の傷害を考えると、適応戦略として有効に
機能してきたことが想像される。
【0009】本発明においては、具体的には、ボウアオ
ノリから嵯峨等の方法(月刊組織培養 vol.16
(5)1990 ニューサイエンス社p2〜8)を参考
にして市販セルラーゼ及びアメフラシ中腸腺より抽出し
た粗酵素によりプロトプラストを分離した。このプロト
プラストから得られた細胞をESS培地で継代培養し
た。ボウアオノリプロトプラストをESS培地で培養す
ることによって継代可能な生殖細胞を得た。
ノリから嵯峨等の方法(月刊組織培養 vol.16
(5)1990 ニューサイエンス社p2〜8)を参考
にして市販セルラーゼ及びアメフラシ中腸腺より抽出し
た粗酵素によりプロトプラストを分離した。このプロト
プラストから得られた細胞をESS培地で継代培養し
た。ボウアオノリプロトプラストをESS培地で培養す
ることによって継代可能な生殖細胞を得た。
【0010】増殖活性を持つ抽出物の調製源としては、
各種の海藻、例えば、緑藻(ボウアオノリ、アナアオ
サ、ヒラアオノリ、スジアオノリなど)、紅藻(ウップ
イノリ等)、褐藻(ヒジキ、ワカメ、昆布など)が利用
できる。
各種の海藻、例えば、緑藻(ボウアオノリ、アナアオ
サ、ヒラアオノリ、スジアオノリなど)、紅藻(ウップ
イノリ等)、褐藻(ヒジキ、ワカメ、昆布など)が利用
できる。
【0011】増殖活性を持つ抽出物の調製法としては、
海藻を磨砕後、3倍量の水で2回抽出し、濃縮後エーテ
ルで脱色、70%エタノール可溶性画分を集め、次いで
セファデックスG−25で分画した。または、磨砕した
海藻に3倍量の99%エタノールを添加して抽出、減圧
濃縮、少量の水に溶解、エーテルで脱色、減圧濃縮等で
も調製できる。
海藻を磨砕後、3倍量の水で2回抽出し、濃縮後エーテ
ルで脱色、70%エタノール可溶性画分を集め、次いで
セファデックスG−25で分画した。または、磨砕した
海藻に3倍量の99%エタノールを添加して抽出、減圧
濃縮、少量の水に溶解、エーテルで脱色、減圧濃縮等で
も調製できる。
【0012】また、調製の各段階の試料にも増殖因子と
しての作用が認められるので、用途、目的により精製の
程度を選ぶことが出来る。また、エタノール濃度も精製
に効果の見られる濃度を示したものであり、任意の濃度
で抽出することが出来る。また、エタノール以外の有機
溶剤、例えば、メタノール、ヘキサン等も利用可能であ
る。
しての作用が認められるので、用途、目的により精製の
程度を選ぶことが出来る。また、エタノール濃度も精製
に効果の見られる濃度を示したものであり、任意の濃度
で抽出することが出来る。また、エタノール以外の有機
溶剤、例えば、メタノール、ヘキサン等も利用可能であ
る。
【0013】増殖促進活性の測定 ESS培地または同寒天培地に細胞及び資料を混釈し、
20℃、2000lux(明:暗;14:10)の条件
下で数日〜2週間培養後の細胞数を計測、比較した。
20℃、2000lux(明:暗;14:10)の条件
下で数日〜2週間培養後の細胞数を計測、比較した。
【0014】ボウアオノリプロトプラストをESS培地
で培養することによって継代可能な生殖細胞を得た。ま
た、数種の海藻抽出液にボウアオノリ培養細胞に対する
高い増殖促進活性が見られた。本抽出液の増殖促進活性
成分のセファデックスG−25による部分精製段階では
分子量約2000でニンヒドリン反応及びフェノールー
硫酸反応に陽性であった。
で培養することによって継代可能な生殖細胞を得た。ま
た、数種の海藻抽出液にボウアオノリ培養細胞に対する
高い増殖促進活性が見られた。本抽出液の増殖促進活性
成分のセファデックスG−25による部分精製段階では
分子量約2000でニンヒドリン反応及びフェノールー
硫酸反応に陽性であった。
【0015】
【実施例】本発明を実施例で詳しく説明する。本発明は
実施例によって何ら限定されない。 実施例1 海藻抽出液調整法 下記に示す操作順序で海藻抽出液を調製した。ボウアオ
ノリ(緑藻類)を200gを磨砕し、3倍量の水で抽出
する。同じ抽出を繰り返す。遠心分離(10000g2
0分)し、上清を取る。得られた上清を減圧濃縮し、濃
縮物を少量の水に溶解し、エーテルで脱色し、さらに減
圧濃縮しまた少量の水に溶解する。水抽出液に70%エ
タノールを加え、遠心分離をして上清をとった。この上
清も減圧濃縮し、少量の水に溶解し、抽出物を得た。
実施例によって何ら限定されない。 実施例1 海藻抽出液調整法 下記に示す操作順序で海藻抽出液を調製した。ボウアオ
ノリ(緑藻類)を200gを磨砕し、3倍量の水で抽出
する。同じ抽出を繰り返す。遠心分離(10000g2
0分)し、上清を取る。得られた上清を減圧濃縮し、濃
縮物を少量の水に溶解し、エーテルで脱色し、さらに減
圧濃縮しまた少量の水に溶解する。水抽出液に70%エ
タノールを加え、遠心分離をして上清をとった。この上
清も減圧濃縮し、少量の水に溶解し、抽出物を得た。
【0016】実施例2 海藻抽出液調整法 下記に示す操作順序で海藻抽出液を調製した。ボウアオ
ノリ(緑藻類)を200gを磨砕し、3倍量の99%エ
チルアルコールでで抽出する。同じ抽出を繰り返す。遠
心分離(10000g20分)し、上清を取る。得られ
た上清を減圧濃縮し、濃縮物を少量の水に溶解し、エー
テルで脱色し、さらに減圧濃縮しまた少量の水に溶解し
たものをエチルアルコール抽出物として得た。
ノリ(緑藻類)を200gを磨砕し、3倍量の99%エ
チルアルコールでで抽出する。同じ抽出を繰り返す。遠
心分離(10000g20分)し、上清を取る。得られ
た上清を減圧濃縮し、濃縮物を少量の水に溶解し、エー
テルで脱色し、さらに減圧濃縮しまた少量の水に溶解し
たものをエチルアルコール抽出物として得た。
【0017】実施例3 得られた抽出物は、まだ、粗精製段階であるが特徴は以
下の通りである。 1.ニンヒドリン陽性を示す。 2.カルバゾール硫酸法で糖含有を示す。 3.セファデックスG−25により分子量分画をした。
その結果を図1に示す。実線はゲル濾過溶出液の280
nmの吸光値、破線が増殖活性を有する溶出画分を表し
ている。分子量約2000の溶出位置に増殖活性が認め
られる。 4.オートクレイブ処理により増殖促進作用は失活しな
い。 5.図2に示すとおり、ESS培地に生育する海藻由来
単細胞に対しては著しい増殖促進作用がある。図中、濃
度は細胞培養液5mlに対して添加した抽出物のml数
を表している。細胞増殖活性は抽出物濃度依存性を示し
た。図3に示すとおり、細胞増殖速度を無添加系と比較
した。実施例1で調製したボウアオノリ抽出物を添加す
ることにより細胞増殖速度は著しく増大した。
下の通りである。 1.ニンヒドリン陽性を示す。 2.カルバゾール硫酸法で糖含有を示す。 3.セファデックスG−25により分子量分画をした。
その結果を図1に示す。実線はゲル濾過溶出液の280
nmの吸光値、破線が増殖活性を有する溶出画分を表し
ている。分子量約2000の溶出位置に増殖活性が認め
られる。 4.オートクレイブ処理により増殖促進作用は失活しな
い。 5.図2に示すとおり、ESS培地に生育する海藻由来
単細胞に対しては著しい増殖促進作用がある。図中、濃
度は細胞培養液5mlに対して添加した抽出物のml数
を表している。細胞増殖活性は抽出物濃度依存性を示し
た。図3に示すとおり、細胞増殖速度を無添加系と比較
した。実施例1で調製したボウアオノリ抽出物を添加す
ることにより細胞増殖速度は著しく増大した。
【0018】
【発明の効果】細胞の大量培養に寄与することが期待さ
れる海藻細胞の増殖因子を提供することができる。
れる海藻細胞の増殖因子を提供することができる。
【図1】ボウアオノリ水抽出物のセファデックス G−
25カラムクロマトグラフィー溶出曲線を示す説明図で
ある。
25カラムクロマトグラフィー溶出曲線を示す説明図で
ある。
【図2】実施例1で調製したボウアオノリ抽出物の細胞
増殖活性を示す説明図である。
増殖活性を示す説明図である。
【図3】実施例1で調製したボウアオノリ抽出物及び無
添加の系の細胞増殖速度を示す説明図である。
添加の系の細胞増殖速度を示す説明図である。
Claims (3)
- 【請求項1】 海藻の水および/またはエタノール抽出
物を含有する細胞あるいは微生物の増殖促進剤。 - 【請求項2】 海藻の水および/またはエタノール抽出
物の70%エタノール可溶画分を含有する細胞あるいは
微生物の増殖促進剤。 - 【請求項3】 海藻が海産緑藻ボウアオノリである請求
項1又は請求項2記載の細胞あるいは微生物の増殖促進
剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5287197A JPH07107969A (ja) | 1993-10-13 | 1993-10-13 | 海藻抽出物を含有する細胞あるいは微生物の増殖促進剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5287197A JPH07107969A (ja) | 1993-10-13 | 1993-10-13 | 海藻抽出物を含有する細胞あるいは微生物の増殖促進剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07107969A true JPH07107969A (ja) | 1995-04-25 |
Family
ID=17714330
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5287197A Withdrawn JPH07107969A (ja) | 1993-10-13 | 1993-10-13 | 海藻抽出物を含有する細胞あるいは微生物の増殖促進剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07107969A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1726296A1 (de) * | 2005-05-25 | 2006-11-29 | ROVI GmbH & Co. Kosmetische Rohstoffe KG | Kosmetisches oder therapeutisches Kombinationspräparat mit Theanin |
| JP2016144442A (ja) * | 2009-11-11 | 2016-08-12 | アクゾ ノーベル サーフィス ケミストリー エルエルシー | ストレス誘導性光合成生物由来の生物活性画分ならびにその製造方法および使用方法 |
| JP2018029492A (ja) * | 2016-08-22 | 2018-03-01 | 国立大学法人徳島大学 | アオサ目またはヒビミドロ目に属する緑藻類の種苗生産方法及び当該種苗を利用した緑藻類の養殖方法 |
-
1993
- 1993-10-13 JP JP5287197A patent/JPH07107969A/ja not_active Withdrawn
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1726296A1 (de) * | 2005-05-25 | 2006-11-29 | ROVI GmbH & Co. Kosmetische Rohstoffe KG | Kosmetisches oder therapeutisches Kombinationspräparat mit Theanin |
| JP2016144442A (ja) * | 2009-11-11 | 2016-08-12 | アクゾ ノーベル サーフィス ケミストリー エルエルシー | ストレス誘導性光合成生物由来の生物活性画分ならびにその製造方法および使用方法 |
| JP2018029492A (ja) * | 2016-08-22 | 2018-03-01 | 国立大学法人徳島大学 | アオサ目またはヒビミドロ目に属する緑藻類の種苗生産方法及び当該種苗を利用した緑藻類の養殖方法 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20001226 |