JPS6213A - 血栓症予防及び治療用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ビタミンＡ又はそのエステルビタミンＣｉ有
効成分とする血栓症予防および治療用組成物に関する。

脳血管疾患及び心疾患、例えば脳出血、脳血栓、脳梗塞
、心不全及び心筋硬塞は、血液凝固、線溶系の低下によ
る血栓の形成と深い係りがある。従来、これらの血栓症
の予防及び治療には、凝固系全抑制させる薬剤としてヘ
パリン、クマリン誘導体が用いられ、線溶系を抗進させ
る薬剤としてウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ等の酵
素製剤が開発されているが、抗原性、発熱性、持続性が
短い等の問題がある。

本発明者は、血栓を構成するフィブリン？浴解するグラ
スミンは、血管内皮細胞から生成するプラスミノゲン賦
活物質がグラスミノゲンに作用して生成することに着目
し、プラスミノグン賦活物質の生成を促進する物質探索
した結果、ビタミンＡ又はそのエステルビタミンＣとを
併用すると、両者の相剰作用にエリ多量のグラスミノゲ
ン賦活物質が血管内皮細胞から放出されること七見い出
し、本発明をなした。

ビタミンＡ（レチノール）は夜盲症等の、またビタミン
Ｃ（Ｌ−アスコルビン酸）は壊血病等の医薬として用い
られているが、血栓症の予防・治療効果については却ら
れていない。

ビタミンＡのエステルとしては、アセテート、ラウレー
ト、ノぞルミテート、ステアレート等がアケられるが、
０１２〜ｃ、８の飽和脂肪酸とのエステルが好ましい。

本発明の血栓症予防及び治療剤は、ビタミンＡ又はその
エステルビタミンＣをそれ自体又は医業上許容される担
体と配合して経口又は非経口用の製剤として投与される
。経口用製剤には、散剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、
液剤、乳剤、シロラグ剤が含まれる。また非経口用製剤
には、注射剤、点滴剤、座剤等が例示できる。用いうる
賦形剤としては、例えば水、エタノール、乳糖、でんぷ
ん、デキストリン、燐酸カルシウム、炭酸カルシウム、
珪酸アルミニウム、酸化マグネシウム、ステアリン酸マ
グネシウム、乾燥水酸化アルミニウム等が用いられる。

投与量は，患者の年令、病状等により異なるが、成人に
ビタミンＡとして１万〜１０万ＩＵ／日及びビタミンＣ
５０〜ｘｏｏｏ＋Ｉｖ／日が用いられる。

以下に本発明の試験例を示し、説明する。

試験例１ 新鮮な生類動脈をと牧場から得、頚動脈を切開して内皮
細胞層上けずりとる方法で内皮細胞を得た。この血管内
皮細胞全１牛脂児血ｆｆｔ−１０チ、ストレプトマイシ
ン（５０■／、Ａ）及ヒペニシリン（５０単位／、Ａ）
ｔ−添加したイーグルの最小必須培地を入れたペトリ皿
内で３７℃で５％ＣＯ□恒温槽中で培養した。この培養
内皮細胞を、上記と同じ培地にエタノールに泪かした所
定量のビタミンＡ及びビタミン、Ｃ【添加した培地で、
ベトリ皿中で一世代培餐した。培養後、培地を除き、内
皮細胞全血清を含まないイーグルの最小必須培地で洗い
、次いで血清を含まない同じ培地で３７℃で８時間装置
して、内皮細胞から遊離されたグラスミノゲン賦活物質
七含む内皮細胞検体液ｔ−ｉＡ製し、−２０℃で保存し
た。

この検体液のグラスミノゲン賦活活性を測定するための
フィブリン懸濁液は次のようにして製造した。０．１−
の３０μＭフィブリン単量体溶液１ｐ８５．３の１Ｍ臭
化ナトリウム−０，０５Ｍ酢酸緩衝液中に溶かし、フィ
ブリン塊全形成させるため、２−の１００　？／Ａのア
ラビアゴム、３−の０．５Ｍイミダゾール緩衝ｉ（、ｐ
ｉ（７，５）及び２５艷の５　ｍＭす／酸−０，１５Ｍ
　ＮａＣＬ緩衝液（ｐＨ７，５）の混合液を加えた。こ
の液ｆ　２０　ｋＨｚで３０分超音波処理して微細粒子
のフィブリン懸濁液で製造し、４℃で保存した。

プラスミノゲン賦活活性は次の方法により測定した。上
記により製造した７００μＬのフィブリン懸濁液と１０
０μｔ　Ｏ）　０．７単位のプラスミノゲンの混液に、
前記の内皮細胞検体液２００μＬを加え、３７℃で保温
し、フィブリン懸濁液の濁度の減少を比濁計で測定した
。標準曲纏は、検体液の代りに０．００５−０．０８単
位のウロキナーゼを用いた以外は同様にして２Ｏ４濁度
が減少する嘆から作成した。検体液中のプラスミノゲン
賦活活性は、２Ｏ４濁度が減少する値上標準曲線と比較
し、１０８内皮細胞当りのウロキナーゼ換算単位で示し
た。

ビタミンＡ及びビタミンｃｔそれぞれ単独で、あるいは
同時に添加して培養した内皮細胞ｔ１８時間評置装て得
られた検体液のグラスミノゲン賦活活性は、第１表に示
すとおりである。

第　　１　　表 添加量（μＭ）　　　　　ウロキナーゼ０　　　　　　
０　　　　　　　　　０．６２．５　　　　　０　　　
　　　　　　２．５７．５　　　　　０　　　　　　　
　　５．３１０　　　　　　０　　　　　　　　　４．
８１５　　　　　　０　　　　　　　　　５．３０　　
　　　１２．５　　　　　　　　０．６０　　　　　２
５　　　　　　　　　０．８０　　　　　５０　　　　
　　　　　１．００　　　　１００　　　　　　　　　
１．３０　　　　１５０　　　　　　　　　１．３２．
５　　＋　　　５０　　　　　　　　　８．１７．５　
　＋　　　５０　　　　　　　　１０．７１０　　　＋
　　　５０　　　　　　　　１４．８１５　　　＋　　
　５０　　　　　　　　１３．３１０　　　＋　　　１
２．５　　　　　　　１０．４１０　　　＋　　　２５
　　　　　　　　１４．５１０　　　　　＋　　　５０
　　　　　　　　　　　　　　１４．８１０　　　＋１
００　　　　　　　　１８．６１０　　　＋１５０　　
　　　　　　２０．０ビタミンＡのみをその添加量を変
えて培養した場合、ビタミンＡの添加量を増加させると
プラスミノゲン賦活活性が増加し、１０μＭ以上の高濃
度では無添加の約１０倍の高レベルで一定値を示した。

一方、ビタミンＣのみｔその添加量を変えて培養した場
合、ビタミンＣ約１００μＭ以上の添加により、グラス
ミノゲン賦活物質の放出量は、無添加の約２倍のレベル
で一定値を示した。

しかるに、ビタミンＡ“とビタミンＣとを同時に添加し
た場合、まずビタミンＣの添加量ｉ５０μＭ４Ｃ５０μ
、ビタミンへ〇量を変えて培養した場合、ビタミンＡの
添加量全増加させるとプラスミノゲン賦活活性はそれに
伴ない増加し、ビタミンＡＩＯμＭとビタミン０５０μ
Ｍを併用した場合では、ビタミン０５０μＭのみ添加し
た場合の約１５倍、また無添加の場合の約２５倍という
非常に高い活性値を示した。

また、ビタミンへの添加量１ｃ１０μＭに固定しビタ、
７ミンＣ１の量を変えて培養した場合、ビタミンＣの添
加量を増加させると、グラスミノゲン賦活活性はそれに
伴ない増加し、ビタミンＡＩＯμＭとビタミンＣ１５０
μＭｉ併用した場合では、ビタミンＡ１０μＭのみｔ添
加した場合の約４倍、また無添加の場合の約３３倍と、
グラスミノゲン賦活物質の放出量は飛躍的に増大した。

マタ、ビタミンＡ　パルミテート１０μＭとビタミン０
１５０μＭとの併用についても同様に試験し、第２表に
示す工うにグラスミノーゲン賦活物質の放出量は大巾に
増加した。

第　　２　　表 上記試験例１からビタミンＡ又はそのエステルとビタミ
ンＣの併用は明らかに相剰効果を示し、グラスミノゲン
賦活物Ｊｘｔ−多量に放出することがわかる。

試験例２ ビタミンＡｌ０ＵＵＩＵ及びビタミンＣ３０１Ｙｔ含む
エタノール１％浴液１ｄｋ体重約３時の雌うさぎの耳静
脈に注射した。経時的に２−ずつの血液を耳静脈より採
り、血清中のフイプリノゲン量とフィブリン分解産物で
あるＦＤＰ量ｔ量子１ぞれ分光学的方法（Ｃ１１ｍ、　
Ｃｈｅｍ、、　２４　＊　３５１　＋１９７８）及び市
販ＦＤＰキットを用いて定量した。

その結果、血中フイプリノゲン量は時間の経過と共に減
少し、一方ＦＤＰ量は逆に増加し、両者は逆の相関が成
立した。即ち、６時間後には、血中のフイブリノゲン量
は平常時から約３０チ減少し、ＦＤＰ量は平常時の１０
倍の１５μｆ／ＴｒＬｔの高い値を示した。

上記試験例から明らかな工うに１本発明の血栓症予防及
び治僚剤は、血管内皮細胞を刺激してプラスミノゲン賦
活物質を生産させ、これ全細胞外に放出して線溶系を活
性化することによって、血栓の形成を予防又はフィブリ
ン塊の融解を促進して治療する効果が顕著であり、従来
の酵素製剤と比べて抗原性の恐れもなく優れている。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ビタミンＡ又はそのエステルとビタミンＣを有効成分と
   する血栓症予防及び治療用組成物。