JPH07206668A - ヒト免疫不全ウイルス感染症治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 Ｖｉｒｇａｒｉａ属菌の発酵生産物であるＶ
ｉｎｉｇｒｏｌ（ＦＲ９００４７８）を有効成分とする
ヒト免疫不全ウイルス感染症の予防、治療剤。 【効果】 抗ヒト免疫不全ウイルス活性にすぐれている
だけでなく、毒性が低いという特徴を有する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ヴィニグロール（Ｖｉ
ｎｉｇｒｏｌ）及び／又はその薬理上許容される塩を有
効成分とすることを特徴とするヒト免疫不全ウイルス感
染症治療剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】ヒト免疫不全ウイルス感染症は、ヒト免
疫不全ウイルスが宿主の免疫能を著しく低下させるた
め、間接的に種々の病原菌による感染を引き起こし、患
者を死に至らしめる疾患である。

【０００３】そこで、ヒト免疫不全ウイルス感染症の予
防、治療剤の研究開発が行われており、現在まで、ヒト
免疫不全ウイルスの増殖を阻害する代表的な治療薬とし
てはアジドチミジン（ＡＺＴ）（Ｈ．Ｍｉｔｕｙａ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｐｒｏ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ，８２，７０９６−７１００（１９８５））が開発
されている。また、ヒト免疫不全ウイルスのターゲット
細胞への吸着を阻害する代表的な治療薬としては、デキ
トラン硫酸（Ｈ．Ｍｉｔｕｙａ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉ
ｅｎｃｅ，２４０，６４６−６４９（１９８８））およ
び可溶性ＣＤ４（Ｎ．Ｗａｔａｎａｂｅ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３７，２６７−２７０（１９８
９））などが開発されている。

【０００４】しかしながら、これら既知の治療薬は、一
定の効果は認められるものの、薬効面及び安全性の面に
おいて充分に満足できるものではなく、更にすぐれた治
療薬の開発が当業界において強く要請されている。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、後天的免疫
不全症候群（エイズ）患者の増大にともない、上記した
ようにすぐれた新規な治療薬の開発が更に強く要請され
ている技術の現状に鑑みてなされたものであって、従来
未知の新規なヒト免疫不全ウイルス感染症に対する予
防、治療剤を開発する目的でなされたものである。

【０００６】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に各種物質について鋭意研究した結果、ヴィニグロール
がヒト免疫不全ウイルスの感染を阻害することを見出
し、この新知見に基き更に研究を行い、本発明を完成す
るに至った。

【０００７】本発明における有効成分化合物であるヴィ
ニグロール（Ｖｉｎｉｇｒｏｌ）は、ＦＲ−９００４７
８物質とも称されるものであって、不完全菌ヴィルガリ
ア・ニグラＦ−５４０８（Ｖｉｒｇａｒｉａ ｎｉｇｒ
ａ Ｆ−５４０８，ＦＥＲＭＰ−８７５３）から製造さ
れる物質のひとつであることが、この発明の発明者らに
よって明らかにされている（特開昭６３−２１５６５
０）。

【０００８】本発明は、ヴィニグロール及び／又はその
薬学上許容される塩を有効成分とするものであるが、そ
のような塩としては、例えばナトリウム、カリウムのよ
うなアルカリ金属；リジン、アルギニンのような塩基性
アミノ酸；などとの塩をあげることができる。更に、本
発明のヴィニグロールは、薬理上許容される無毒性の酸
付加塩の形で使用することができる。そのような酸付加
塩としては、例えば塩酸、硫酸、硝酸、リン酸のような
無機酸；酢酸、コハク酸、マレイン酸、フマール酸、リ
ンゴ酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、ｐ−トルエン
スルホン酸、メタンスルホン酸のような有機酸；などと
の酸付加塩をあげることができる。

【０００９】しかしながら、本発明の薬理上許容される
塩はこれらに限定されるものではない。

【００１０】本発明において使用するヴィニグロール
は、卓越した抗ヒト免疫不全ウイルス性を示す。その活
性測定は、Ｒ．Ｐａｕｗｅｌらの方法に従って測定でき
る（Ｒ．Ｐａｕｗｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ
ｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄ，２０，３０９−３２１
（１９８８））。すなわち、検体化合物添加のヒト免疫
不全ウイルス感染ＭＴ−４細胞（ヒトリンパ球系細胞、
以下同様）および検体化合物添加のヒト免疫不全ウイル
ス非感染ＭＴ−４細胞をそれぞれ培養する。同様に、検
体化合物無添加のヒト免疫不全ウイルス感染ＭＴ−４細
胞および検体化合物無添加のヒト免疫不全ウイルス非感
染ＭＴ−４細胞をそれぞれ培養する。次いで、ＭＴＴ法
（Ｌ．Ｍ．Ｇｒｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏ．Ｍｅｔｈｏｄ，７０，２５７−２６８（１９８
４））に従って生細胞を測定してヒト免疫不全ウイルス
による細胞障害活性を求める。これにより検体化合物の
抗ヒト免疫不全ウイルス活性を測定することができる。

【００１１】ヴィニグロール（塩）は、種々の形態で投
与される。その投与形態としては例えば錠剤、カプセル
剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与または
注射剤（静脈内、筋肉内、皮下）、点滴剤、座剤等によ
る非経口投与をあげることができる。これらの各種製剤
は、常法に従って主薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢
剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤
などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知
の補助剤を用いて製剤化することができる。その使用量
は症状、年令、体重、投与方法および剤形等によって異
なるが、通常は成人に対して１回約０．１ｍｇ乃至１，
０００ｍｇを投与することができる。

【００１２】本発明の有効成分化合物は、後記する実施
例からも明らかなようにすぐれた抗ヒト免疫不全ウイル
ス（抗ＨＩＶ）活性を示す。その作用メカニズムの詳細
は今後の研究にまたねばならないが、現時点では、本化
合物はＨＩＶに直接作用するものと想定される。

【００１３】本発明の有効成分化合物は、すぐれた抗Ｈ
ＩＶ活性を有するだけでなく、ｄｄＹマウスを用いた急
性毒性試験においてＬＤ₅₀が２３ｍｇ／ｋｇ（ｉ．
ｐ．）を示し、また、ｐ．ｏ．の場合はＬＤ₅₀が＞１０
０ｍｇ／ｋｇであって、安全性においてもすぐれている
ことが確認された。

【００１４】以下、本発明の実施例について詳述する。

【００１５】

【実施例１】抗ヒト免疫不全ウイルス活性測定は常法に
従って測定した（Ｒ．Ｐａｕｗｅｌｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄ，２０，３０９
−３２１（１９８８））。

【００１６】すなわち、対数増殖期にあるＭＴ−４細胞
を１５０×ｇで５分間遠心し、得られたセルペレットに
ヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＴＬＶ−IIIｂ株）をＭ
ＯＩ：０．０１の濃度で３７℃で１時間感染させた。そ
の後、牛胎児血清１０％添加ＲＰＭＩ−１６４０培地
（以下、「血清培地」と称する）で遠心し、洗浄するこ
とによりヒト免疫不全ウイルス感染ＭＴ−４細胞を得
た。ヒト免疫不全ウイルス感染ＭＴ−４細胞およびヒト
免疫不全ウイルス非感染ＭＴ−４細胞をそれぞれ２．５
×１０⁵細胞／ｍｌになるように血清培地に懸濁した。

【００１７】９６穴プラスチックマイクロタイタープレ
ート中に、あらかじめ段階稀釈した検体化合物溶液（血
清培地に懸濁したもの）を各ウエルに１００μｌづつ入
れ、次いでこの各ウエルに上記細胞を各々１００μｌづ
つ添加し、５％の炭酸ガスの存在下で３７℃で５日間静
置培養した。検体化合物は、純濃度１０００、２００、
４０、８、１．６、０．３２、０．０６４、０．０１２
８、０．００２６μＭで試験を行った。

【００１８】同様にして、検体化合物無添加のヒト免疫
不全ウイルス感染ＭＴ−４細胞および検体化合物無添加
のヒト免疫不全ウイルス非感染ＭＴ−４細胞について、
ＣＯ₂インキュベーターで３７℃５日間培養した。

【００１９】培養終了後、ＭＴＴ（３−（４，５−ｄｉ
ｍｅｔｈｙｔｈｉａｚｏｌ−２−ｙｌ）−２，５−ｄｉ
ｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄ
ｅ）法に基づき生細胞を測定した（Ｌ．Ｍ．Ｇｒｅｅｎ
ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏ．Ｍｅｔｈｏ
ｄ，７０，２５７−２６８（１９８４））。

【００２０】抗ウイルス活性は、ＨＩＶ感染による細胞
障害を５０％抑制防御する濃度（ＥＣ₅₀：５０％ Ｅｆ
ｆｅｃｔｉｖｅ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）として
示した。すなわち、検体化合物無添加のヒト免疫不全ウ
イルス感染ＭＴ−４細胞の細胞障害活性を１００％と
し、検体化合物無添加のヒト免疫不全ウイルス非感染Ｍ
Ｔ−４細胞の細胞障害活性を０％として、ヒト免疫不全
ウイルス感染ＭＴ−４細胞の細胞障害活性を５０％抑制
する検体の濃度（ＥＣ₅₀）を求め、この濃度で示した。

【００２１】また、検体化合物の細胞毒性活性は、ヒト
免疫不全ウイルス非感染ＭＴ−４細胞の増殖を５０％抑
制する濃度、つまり検体化合物による５０％細胞障害濃
度（ＣＣ₅₀：５０％ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｃｏｎｃｅ
ｎｔｒａｔｉｏｎ）で示した。

【００２２】更にまた、ヒト免疫不全ウイルス活性の選
択係数（ＳＩ：ＳｅｌｅｃｔｉｖｅＩｎｄｅｘ）はＣＣ
₅₀／ＥＣ₅₀値として計算した。

【００２３】上記によって得た測定結果を下記表１に示
し、ＥＣ₅₀、ＥＣ₉₀、ＣＣ₅₀、ＳＩ値を下記表２に示
す。

【００２４】

【表１】

【００２５】

【表２】

【００２６】ヴィニグロールのすぐれた抗ＨＩＶ活性を
示すために、従来から用いられている抗ＨＩＶ剤である
デキストラン硫酸及びアジドチミジン（ＡＺＴ）による
効果の比較を下記表３に示す。

【００２７】

【表３】

【００２８】これらの結果から、次のことが明らかとな
った。先ず、コントロールのヒト免疫不全ウイルス感染
ＭＴ−４細胞はヒト免疫不全ウイルスによりすべて死滅
したが、ヴィニグロールはその濃度に依存してヒト免疫
不全ウイルス感染細胞の生存率を高めた。すなわち、表
のＥＣ₅₀値から明らかなように、著明な抗ヒト免疫不全
ウイルス活性を示した。

【００２９】更に、ヴィニグロールのヒト免疫不全ウイ
ルス非感染ＭＴ−４細胞に対する細胞毒性活性（Ｃ
Ｃ₅₀）は弱かった。

【００３０】また、上記した既知の抗ＨＩＶ剤との比較
データから明らかなように、逆転写酵素阻害剤のアジド
チミジンおよびヒト免疫不全ウイルス吸着阻害剤のデキ
ストラン硫酸と比べて、ヴィニグロールは、抗ヒト免疫
不全ウイルス活性においてアジドチミジンより弱いが、
デキストラン硫酸よりも強かった。しかし、細胞毒性活
性（ＣＣ₅₀）は、アジドチミジンより弱かった。

【００３１】以上の結果より、ヴィニグロールはデキス
トラン硫酸以上の強い抗ヒト免疫不全ウイルス活性を示
し、かつ高い選択係数を有することが明らかになった。

【００３２】

【発明の効果】本発明の有効成分化合物であるヴィニグ
ロールは、ＨＩＶ感染症に対してすぐれた治療効果を示
すだけでなく、急性毒性及び細胞毒性が低いという大き
な特徴を有するものである。

【００３３】したがって本発明は、ＨＩＶ感染症の治療
及び予防に格別の副作用を心配することなく有利に使用
することができる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ヴィニグロール（Ｖｉｎｉｇｒｏｌ）及
   び／又はその薬理上許容される塩を有効成分とすること
   を特徴とするヒト免疫不全ウイルス感染症治療剤。