JPH07206896A - Ｈｌａ結合性オリゴペプチドを含有する免疫抑制剤 - Google Patents
Ｈｌａ結合性オリゴペプチドを含有する免疫抑制剤Info
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- JPH07206896A JPH07206896A JP6004615A JP461594A JPH07206896A JP H07206896 A JPH07206896 A JP H07206896A JP 6004615 A JP6004615 A JP 6004615A JP 461594 A JP461594 A JP 461594A JP H07206896 A JPH07206896 A JP H07206896A
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- oligopeptide
- hla
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】 新規なＨＬＡ結合性オリゴペプチドを提供す
る。 【構成】 一般式Ｉ−ａのヒト主要組織適合抗原（ＨＬ
Ａ）ＨＬＡ―ＤＲＢ１* ０４０５結合性オリゴペプチ
ド、それを有効成分として含有する医薬組成物、及び治
療有効量の該ペプチドを有効成分として含有する免疫抑
制剤。 Ｘ１−Ｙ１−Ｙ２−Ｘ２−Ｙ３−Ｘ３ （Ｉ−ａ） 〔Ｘ１はＷ、Ｆ、Ｌ、Ｍ、Ｙ及びＩからなる群より選ば
れるアミノ酸を表わし、Ｘ２はＦ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、Ｗ、
Ｃ、Ｖ、Ｍ及びＡからなる群より選ばれるアミノ酸を表
わし、Ｘ３はＮ、Ｄ、Ｔ、Ｉ、Ｖ、Ｓ、Ｆ、Ｍ及びＷか
らなる群より選ばれるアミノ酸を表わし、Ｙ１、Ｙ２及
びＹ３はそれぞれ任意のＬ−アミノ酸を表わす。〕
る。 【構成】 一般式Ｉ−ａのヒト主要組織適合抗原（ＨＬ
Ａ）ＨＬＡ―ＤＲＢ１* ０４０５結合性オリゴペプチ
ド、それを有効成分として含有する医薬組成物、及び治
療有効量の該ペプチドを有効成分として含有する免疫抑
制剤。 Ｘ１−Ｙ１−Ｙ２−Ｘ２−Ｙ３−Ｘ３ （Ｉ−ａ） 〔Ｘ１はＷ、Ｆ、Ｌ、Ｍ、Ｙ及びＩからなる群より選ば
れるアミノ酸を表わし、Ｘ２はＦ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、Ｗ、
Ｃ、Ｖ、Ｍ及びＡからなる群より選ばれるアミノ酸を表
わし、Ｘ３はＮ、Ｄ、Ｔ、Ｉ、Ｖ、Ｓ、Ｆ、Ｍ及びＷか
らなる群より選ばれるアミノ酸を表わし、Ｙ１、Ｙ２及
びＹ３はそれぞれ任意のＬ−アミノ酸を表わす。〕
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ＨＬＡ結合性オリゴペ
プチド、それを有効成分として含有する医薬組成物、お
よびヒトならびに獣医薬へのそれらの用途に関するもの
である。
プチド、それを有効成分として含有する医薬組成物、お
よびヒトならびに獣医薬へのそれらの用途に関するもの
である。
【０００２】
【従来技術および発明が解決しようとする課題】ヒト主
要組織適合抗原（ＨＬＡ）遺伝子領域は、ヒト第６染色
体の短腕上にあり、クラスＩ（ＨＬＡ―Ａ、Ｂ、Ｃ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ）およびクラスII（ＨＬＡ―ＤＲ、ＤＱ、Ｄ
Ｐ）遺伝子に大別される。クラスII遺伝子はクラスII分
子（抗原）をコードする遺伝子からなる。クラスII分子
はα鎖とβ鎖より構成され、抗原提示細胞（マクロファ
ージ、樹状細胞など）、Ｂ細胞および活性化Ｔ細胞の細
胞膜表面に発現されている。クラスII分子は抗原ペプチ
ド（抗原提示細胞が細胞外液中より取り込んだ抗原を、
ライソソーム中に含まれる蛋白分解酵素で分解すること
により生じたペプチド）と結合し、細胞表面に発現して
ＣＤ４+ ヘルパーＴ細胞に提示する。抗原ペプチドとク
ラスII分子を共に認識して活性化されたヘルパーＴ細胞
は、種々のリンホカインを分泌してＢ細胞による抗体産
生を促す。
要組織適合抗原（ＨＬＡ）遺伝子領域は、ヒト第６染色
体の短腕上にあり、クラスＩ（ＨＬＡ―Ａ、Ｂ、Ｃ、
Ｅ、Ｆ、Ｇ）およびクラスII（ＨＬＡ―ＤＲ、ＤＱ、Ｄ
Ｐ）遺伝子に大別される。クラスII遺伝子はクラスII分
子（抗原）をコードする遺伝子からなる。クラスII分子
はα鎖とβ鎖より構成され、抗原提示細胞（マクロファ
ージ、樹状細胞など）、Ｂ細胞および活性化Ｔ細胞の細
胞膜表面に発現されている。クラスII分子は抗原ペプチ
ド（抗原提示細胞が細胞外液中より取り込んだ抗原を、
ライソソーム中に含まれる蛋白分解酵素で分解すること
により生じたペプチド）と結合し、細胞表面に発現して
ＣＤ４+ ヘルパーＴ細胞に提示する。抗原ペプチドとク
ラスII分子を共に認識して活性化されたヘルパーＴ細胞
は、種々のリンホカインを分泌してＢ細胞による抗体産
生を促す。
【０００３】ＨＬＡの特徴は、ヒト集団中に高度の個体
差（多型）が存在することである。Ｔ細胞はＨＬＡ分子
の個体差を認識して強い免疫応答を示すため、臓器移植
においてＨＬＡの一致は拒絶反応回避のための重要な要
因となっている。さらにＨＬＡの多型は、これと結合で
きる抗原ペプチドの種類を制限したり、Ｔ細胞の分化過
程に影響を与えることにより、特定の抗原ペプチドに対
する免疫応答の個体差をも決定する。
差（多型）が存在することである。Ｔ細胞はＨＬＡ分子
の個体差を認識して強い免疫応答を示すため、臓器移植
においてＨＬＡの一致は拒絶反応回避のための重要な要
因となっている。さらにＨＬＡの多型は、これと結合で
きる抗原ペプチドの種類を制限したり、Ｔ細胞の分化過
程に影響を与えることにより、特定の抗原ペプチドに対
する免疫応答の個体差をも決定する。
【０００４】疾病の病因には環境要因と遺伝要因があ
る。自己免疫疾患やアレルギーなどの免疫異常に起因す
る疾病は、おそらく複数の環境要因と遺伝要因とが複雑
に絡み合って発生する多因子疾患である。遺伝要因とし
て、多くの自己免疫疾患とＨＬＡとの相関が明らかにさ
れている。即ち、慢性関節リウマチでは、白人ではＤＲ
Ｂ１* ０４０１およびＤＲＢ１* ０４０４が、日本人で
はＤＲＢ１* ０４０５が正の相関を示す。また、インス
リン依存性糖尿病は、白人、黒人、日本人でＤＱＡ１*
０３０１―ＤＱＢ１* ０３０２およびＤＱＡ１* ０５０
１―ＤＱＢ１* ０２０１と正の相関を示す。さらに、グ
レーブス病、ベーチェット病などについても疾患と正の
相関を示すＨＬＡが知られている。
る。自己免疫疾患やアレルギーなどの免疫異常に起因す
る疾病は、おそらく複数の環境要因と遺伝要因とが複雑
に絡み合って発生する多因子疾患である。遺伝要因とし
て、多くの自己免疫疾患とＨＬＡとの相関が明らかにさ
れている。即ち、慢性関節リウマチでは、白人ではＤＲ
Ｂ１* ０４０１およびＤＲＢ１* ０４０４が、日本人で
はＤＲＢ１* ０４０５が正の相関を示す。また、インス
リン依存性糖尿病は、白人、黒人、日本人でＤＱＡ１*
０３０１―ＤＱＢ１* ０３０２およびＤＱＡ１* ０５０
１―ＤＱＢ１* ０２０１と正の相関を示す。さらに、グ
レーブス病、ベーチェット病などについても疾患と正の
相関を示すＨＬＡが知られている。
【０００５】このようにＨＬＡが遺伝子要因として疾病
の発症に重要な役割を果たしていること、クラスII分子
に抗原ペプチドが結合して分離されることが知られてい
るものの（Buus, et al, Science ２４２，１０４５，
１９８８）、ＤＲＢ１* ０４０５との関係では何の記載
も示唆もなされておらず、その他のＨＬＡ結合性オリゴ
ペプチドの存在、当該物質の免疫反応に対する作用がわ
ずかに報告されているに過ぎない（Cottens, et al.,Ｗ
Ｏ９３／０５０１１、Chicz, et al., J. Exp.Med.,
１７８，２７，１９９３、Hammer, et al, Cell ７４，
１９７〜２０３，July １６，１９９３）。そこで本発
明者等は、株化ヒトＢ細胞よりＨＬＡ―オリゴペプチド
結合体を単離、精製し、さらにＨＬＡに結合したオリゴ
ペプチドを単離、精製し、ＨＬＡとの結合性を鋭意検討
した結果、驚くべきことにある種のアミノ酸配列を有す
るオリゴペプチドがＨＬＡ結合作用を有することを発見
し、本発明に到達したものである。
の発症に重要な役割を果たしていること、クラスII分子
に抗原ペプチドが結合して分離されることが知られてい
るものの（Buus, et al, Science ２４２，１０４５，
１９８８）、ＤＲＢ１* ０４０５との関係では何の記載
も示唆もなされておらず、その他のＨＬＡ結合性オリゴ
ペプチドの存在、当該物質の免疫反応に対する作用がわ
ずかに報告されているに過ぎない（Cottens, et al.,Ｗ
Ｏ９３／０５０１１、Chicz, et al., J. Exp.Med.,
１７８，２７，１９９３、Hammer, et al, Cell ７４，
１９７〜２０３，July １６，１９９３）。そこで本発
明者等は、株化ヒトＢ細胞よりＨＬＡ―オリゴペプチド
結合体を単離、精製し、さらにＨＬＡに結合したオリゴ
ペプチドを単離、精製し、ＨＬＡとの結合性を鋭意検討
した結果、驚くべきことにある種のアミノ酸配列を有す
るオリゴペプチドがＨＬＡ結合作用を有することを発見
し、本発明に到達したものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】即ち、本発明は下記式
（Ｉ―ａ） Ｘ1 ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｘ2 ―Ｙ3 ―Ｘ3 （Ｉ―ａ） ［式中、Ｘ1 はＷ、Ｆ、Ｌ、Ｍ、Ｙ及びＩからなる群よ
り選ばれるアミノ酸を表わし、Ｘ2 はＦ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、
Ｗ、Ｃ、Ｖ、Ｍ及びＡからなる群より選ばれるアミノ酸
を表わし、Ｘ3 はＮ、Ｄ、Ｔ、Ｉ、Ｖ、Ｓ、Ｆ、Ｍ及び
Ｗからなる群より選ばれるアミノ酸を表わし、Ｙ1 、Ｙ
2 及びＹ3 はそれぞれ任意のＬ―アミノ酸を表わす。］
で表わされるアミノ酸配列を有するヒト主要組織適合抗
原（ＨＬＡ）ＨＬＡ―ＤＲＢ１* ０４０５結合性オリゴ
ペプチドである。
（Ｉ―ａ） Ｘ1 ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｘ2 ―Ｙ3 ―Ｘ3 （Ｉ―ａ） ［式中、Ｘ1 はＷ、Ｆ、Ｌ、Ｍ、Ｙ及びＩからなる群よ
り選ばれるアミノ酸を表わし、Ｘ2 はＦ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、
Ｗ、Ｃ、Ｖ、Ｍ及びＡからなる群より選ばれるアミノ酸
を表わし、Ｘ3 はＮ、Ｄ、Ｔ、Ｉ、Ｖ、Ｓ、Ｆ、Ｍ及び
Ｗからなる群より選ばれるアミノ酸を表わし、Ｙ1 、Ｙ
2 及びＹ3 はそれぞれ任意のＬ―アミノ酸を表わす。］
で表わされるアミノ酸配列を有するヒト主要組織適合抗
原（ＨＬＡ）ＨＬＡ―ＤＲＢ１* ０４０５結合性オリゴ
ペプチドである。
【０００７】前記Ｘ1 のなかでもＸ1 がＷ、Ｆ、Ｍがこ
の順番でＤＲ分子との親和性が高いという理由で好まし
く、またＸ2 のなかでもＸ2 がＦ、Ｌ、Ｉがこの順番で
同様に好ましく、さらにまたＸ3 のなかでもＸ3 が好ま
しく、具体的にそのようなＮ、Ｘ1 、Ｘ2 、Ｘ3 の組合
せを有するオリゴペプチドとして、下記式 Ｗ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―１） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―２） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｆ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―３） Ｍ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―４） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｉ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―５） （式中、Ｙ1 、Ｙ2 及びＹ3 の定義は式（Ｉ―ａ）にお
けるものと同じ。）から選ばれるアミノ酸配列を有する
ものを挙げることができる。上記式（Ｉ―ａ―１）〜
（Ｉ―ａ―５）においてＹ1 、Ｙ2 及びＹ3 は前記式
（Ｉ―ａ）におけるものと同じであるが、なかでも
Ｙ1 、Ｙ2 、Ｙ3 が全てＡであるか、あるいはＹ1 ＝
Ｄ、Ｙ2 ＝Ｎ、Ｙ3 ＝Ｐであるものを好ましいものとし
て挙げることができる。
の順番でＤＲ分子との親和性が高いという理由で好まし
く、またＸ2 のなかでもＸ2 がＦ、Ｌ、Ｉがこの順番で
同様に好ましく、さらにまたＸ3 のなかでもＸ3 が好ま
しく、具体的にそのようなＮ、Ｘ1 、Ｘ2 、Ｘ3 の組合
せを有するオリゴペプチドとして、下記式 Ｗ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―１） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―２） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｆ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―３） Ｍ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―４） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｉ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―５） （式中、Ｙ1 、Ｙ2 及びＹ3 の定義は式（Ｉ―ａ）にお
けるものと同じ。）から選ばれるアミノ酸配列を有する
ものを挙げることができる。上記式（Ｉ―ａ―１）〜
（Ｉ―ａ―５）においてＹ1 、Ｙ2 及びＹ3 は前記式
（Ｉ―ａ）におけるものと同じであるが、なかでも
Ｙ1 、Ｙ2 、Ｙ3 が全てＡであるか、あるいはＹ1 ＝
Ｄ、Ｙ2 ＝Ｎ、Ｙ3 ＝Ｐであるものを好ましいものとし
て挙げることができる。
【０００８】なお、上記式（Ｉ―ａ―１）〜（Ｉ―ａ―
５）で表わされるオリゴペプチドのＮ端側及び／又はＣ
端側には、更に０〜１５個のアミノ酸残基が存在するこ
とができ、例えばＮ端側にＧＳＴＶ、ＡＡ及びＡＡＡＡ
から選ばれる２〜６個のアミノ酸残基、Ｃ端側にＰＥ又
はＡＡのアミノ酸残基が存在するものも好ましいものと
して挙げられる。
５）で表わされるオリゴペプチドのＮ端側及び／又はＣ
端側には、更に０〜１５個のアミノ酸残基が存在するこ
とができ、例えばＮ端側にＧＳＴＶ、ＡＡ及びＡＡＡＡ
から選ばれる２〜６個のアミノ酸残基、Ｃ端側にＰＥ又
はＡＡのアミノ酸残基が存在するものも好ましいものと
して挙げられる。
【０００９】また、上記Ｘ1 、Ｘ2 、Ｘ3 の組合せにお
いて、Ｘ1 がＷ又はＹで、Ｘ2 がＦ、Ｙ又はＷで、Ｘ3
がＤである場合のオリゴペプチドがＤＲＢ１* ０４０６
分子よりもＤＲ分子（ＤＲＢ１* ０４０５）により強い
親和性を持つという点で、好ましいものとして挙げられ
る。この場合のＹ1 、Ｙ2 、Ｙ3 としてはＹ1 〜Ｙ3が
全てＡであるかＹ1 ＝Ｄ、Ｙ2 ＝Ｎ、Ｙ3 ＝Ｐであるも
の、更にＮ端側及び／又はＣ端側に上記と同様のアミノ
酸残基が存在するものも好ましいものとして挙げられ
る。
いて、Ｘ1 がＷ又はＹで、Ｘ2 がＦ、Ｙ又はＷで、Ｘ3
がＤである場合のオリゴペプチドがＤＲＢ１* ０４０６
分子よりもＤＲ分子（ＤＲＢ１* ０４０５）により強い
親和性を持つという点で、好ましいものとして挙げられ
る。この場合のＹ1 、Ｙ2 、Ｙ3 としてはＹ1 〜Ｙ3が
全てＡであるかＹ1 ＝Ｄ、Ｙ2 ＝Ｎ、Ｙ3 ＝Ｐであるも
の、更にＮ端側及び／又はＣ端側に上記と同様のアミノ
酸残基が存在するものも好ましいものとして挙げられ
る。
【００１０】上記式（Ｉ―ａ）等において各アルファベ
ットは下記表１に示すようなＬ―アミノ酸に各々対応す
るアミノ酸の１文字略号を表わす。
ットは下記表１に示すようなＬ―アミノ酸に各々対応す
るアミノ酸の１文字略号を表わす。
【００１１】
【表１】
【００１２】本発明のオリゴペプチドには、本発明の目
的とするＨＬＡ結合性を有する限り、本発明のオリゴペ
プチドを構成するアミノ酸のうちの１または２以上のア
ミノ酸が欠失、他のアミノ酸で置換、あるいは他のアミ
ノ酸が挿入されて得られるオリゴペプチドも含まれる。
的とするＨＬＡ結合性を有する限り、本発明のオリゴペ
プチドを構成するアミノ酸のうちの１または２以上のア
ミノ酸が欠失、他のアミノ酸で置換、あるいは他のアミ
ノ酸が挿入されて得られるオリゴペプチドも含まれる。
【００１３】さらに本発明のＨＬＡ―ＤＲＢ１* ０４０
５結合性オリゴペプチドとしては、 Ｙ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―６） Ｙ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｖ―Ｙ3 ―Ｖ （Ｉ―ａ―７） Ｌ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｉ―Ｙ3 ―Ｓ （Ｉ―ａ―８） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｍ―Ｙ3 ―Ｓ （Ｉ―ａ―９） で表わされるアミノ酸配列を有するオリゴペプチドも好
ましいものとして挙げられる。
５結合性オリゴペプチドとしては、 Ｙ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―６） Ｙ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｖ―Ｙ3 ―Ｖ （Ｉ―ａ―７） Ｌ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｉ―Ｙ3 ―Ｓ （Ｉ―ａ―８） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｍ―Ｙ3 ―Ｓ （Ｉ―ａ―９） で表わされるアミノ酸配列を有するオリゴペプチドも好
ましいものとして挙げられる。
【００１４】本発明のオリゴペプチドは以下のようにし
て得ることができる。天然由来のものとしては、例えば
ＤＲＢ１* ０４０５を有する患者よりリンパ球を得、こ
のリンパ球をＥＢウイルスで株化して所定量のＢ細胞株
を得る。次いでこのＢ細胞株を緩衝液で処理して得られ
る全細胞分解液より抗ＤＲ抗体カラムを用いてＤＲ分子
―オリゴペプチド結合体を分取する。分取したＨＬＡ―
オリゴペプチド結合体を酸溶出、インキュベートして目
的オリゴペプチドを遊離させ、限外濾過・カラムクロマ
トグラフィーにより目的とするオリゴペプチドを単離・
精製することができる。あるいは、例えば前記式（Ｉ―
ａ―１）〜（Ｉ―ａ―９）で示されたアミノ酸配列を有
するオリゴペプチドを従来公知の方法でペプチドシンセ
サイザー等によって合成することによって得ることがで
きる。本発明のＨＬＡ結合性オリゴペプチドには、この
ように細胞から得られるオリゴペプチドおよびその手法
自体は従来公知のペプチド合成によって製造されるもの
が含まれる。
て得ることができる。天然由来のものとしては、例えば
ＤＲＢ１* ０４０５を有する患者よりリンパ球を得、こ
のリンパ球をＥＢウイルスで株化して所定量のＢ細胞株
を得る。次いでこのＢ細胞株を緩衝液で処理して得られ
る全細胞分解液より抗ＤＲ抗体カラムを用いてＤＲ分子
―オリゴペプチド結合体を分取する。分取したＨＬＡ―
オリゴペプチド結合体を酸溶出、インキュベートして目
的オリゴペプチドを遊離させ、限外濾過・カラムクロマ
トグラフィーにより目的とするオリゴペプチドを単離・
精製することができる。あるいは、例えば前記式（Ｉ―
ａ―１）〜（Ｉ―ａ―９）で示されたアミノ酸配列を有
するオリゴペプチドを従来公知の方法でペプチドシンセ
サイザー等によって合成することによって得ることがで
きる。本発明のＨＬＡ結合性オリゴペプチドには、この
ように細胞から得られるオリゴペプチドおよびその手法
自体は従来公知のペプチド合成によって製造されるもの
が含まれる。
【００１５】このようにして得られたペプチドの活性を
最大限に維持するために本発明のオリゴペプチドは新鮮
であるか、４℃で保存する場合には、保存後約５日以内
のものが好ましい。あるいは、本発明のオリゴペプチド
は、凍結乾燥して凍結保存することもできる。さらにま
た、本発明のオリゴペプチドの溶液を凍結させたものと
することもできる。
最大限に維持するために本発明のオリゴペプチドは新鮮
であるか、４℃で保存する場合には、保存後約５日以内
のものが好ましい。あるいは、本発明のオリゴペプチド
は、凍結乾燥して凍結保存することもできる。さらにま
た、本発明のオリゴペプチドの溶液を凍結させたものと
することもできる。
【００１６】本発明はまた、前記式（Ｉ―ａ）で表わさ
れるアミノ酸配列を有するＨＬＡ―ＤＲＢ１* ０４０５
結合性オリゴペプチドを有効成分として含有する医薬組
成物および治療有効量の該オリゴペプチドを有効成分と
して含有する免疫抑制剤である。
れるアミノ酸配列を有するＨＬＡ―ＤＲＢ１* ０４０５
結合性オリゴペプチドを有効成分として含有する医薬組
成物および治療有効量の該オリゴペプチドを有効成分と
して含有する免疫抑制剤である。
【００１７】本発明の医薬組成物は、通常使用される充
填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、
滑沢剤などの稀釈剤あるいは賦形剤を用いて調製するこ
とができ、例えば錠剤、散剤、液剤、カプセル剤、坐
剤、注射剤等の経口投与用製剤、または非経口投与用製
剤とすることができる。かかる製剤における賦形剤、稀
釈剤等としては、従来公知のものを使用することがで
き、例えば錠剤の場合には乳糖、でんぷん、ブドウ糖、
結晶セルロース等、注射剤の場合には水、プロピレング
リコール等を挙げることができ、必要に応じて吸収促進
剤、保存剤、着色剤、溶解補助剤、干渉剤、無痛化剤を
含有せしめることができる。
填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、
滑沢剤などの稀釈剤あるいは賦形剤を用いて調製するこ
とができ、例えば錠剤、散剤、液剤、カプセル剤、坐
剤、注射剤等の経口投与用製剤、または非経口投与用製
剤とすることができる。かかる製剤における賦形剤、稀
釈剤等としては、従来公知のものを使用することがで
き、例えば錠剤の場合には乳糖、でんぷん、ブドウ糖、
結晶セルロース等、注射剤の場合には水、プロピレング
リコール等を挙げることができ、必要に応じて吸収促進
剤、保存剤、着色剤、溶解補助剤、干渉剤、無痛化剤を
含有せしめることができる。
【００１８】本発明では、かかる有効成分としてペプチ
ドと、公知の適当な賦形剤を組み合わせ、公知の方法で
本発明の免疫抑制剤とすることができる。好ましくは本
発明の免疫抑制剤は、非経口投与製剤、中でも点滴もし
くは単回大量（ボラス）の静脈投与製剤もしくは局所投
与製剤として投与される。静脈投与製剤の場合、例えば
患者の症状に応じて生理食塩水、５％デキストリン含有
水、リンゲル液、他の市販の静注還流生理緩衝液などを
挙げることができる。
ドと、公知の適当な賦形剤を組み合わせ、公知の方法で
本発明の免疫抑制剤とすることができる。好ましくは本
発明の免疫抑制剤は、非経口投与製剤、中でも点滴もし
くは単回大量（ボラス）の静脈投与製剤もしくは局所投
与製剤として投与される。静脈投与製剤の場合、例えば
患者の症状に応じて生理食塩水、５％デキストリン含有
水、リンゲル液、他の市販の静注還流生理緩衝液などを
挙げることができる。
【００１９】ヒトまたは動物における本発明のＨＬＡ結
合性オリゴペプチドの有効量は、例えば投与対象者の年
齢および体重、症状および重症度、投与形態、用いるオ
リゴペプチドの形態および効力などによって変動するも
のであり、また、最終的には医師もしくは獣医師の意図
により変動するものである。本発明のオリゴペプチドの
有効量は、例えば約１〜１００ｍｇ／体重ｋｇ／日、好
ましくは約５〜２０ｍｇ／体重ｋｇ／日で静脈内、筋肉
内、腹腔内または関節内等の局所注射で投与される。
合性オリゴペプチドの有効量は、例えば投与対象者の年
齢および体重、症状および重症度、投与形態、用いるオ
リゴペプチドの形態および効力などによって変動するも
のであり、また、最終的には医師もしくは獣医師の意図
により変動するものである。本発明のオリゴペプチドの
有効量は、例えば約１〜１００ｍｇ／体重ｋｇ／日、好
ましくは約５〜２０ｍｇ／体重ｋｇ／日で静脈内、筋肉
内、腹腔内または関節内等の局所注射で投与される。
【００２０】かくして本発明のＨＬＡ結合性オリゴペプ
チド及びこれを有効成分として含有する医薬組成物等を
得ることができるが、本発明におけるＨＬＡ結合性オリ
ゴペプチドは、抗原提示細胞により抗原ペプチドが処理
されクラスII分子と結合して細胞膜上に発現される過程
で、抗原ペプチドと置換し、抗原提示細胞とヘルパーＴ
細胞との情報伝達を阻害もしくは修飾し、ひいては抗体
産生、遅延型アレルギー反応等を抑制するものである。
チド及びこれを有効成分として含有する医薬組成物等を
得ることができるが、本発明におけるＨＬＡ結合性オリ
ゴペプチドは、抗原提示細胞により抗原ペプチドが処理
されクラスII分子と結合して細胞膜上に発現される過程
で、抗原ペプチドと置換し、抗原提示細胞とヘルパーＴ
細胞との情報伝達を阻害もしくは修飾し、ひいては抗体
産生、遅延型アレルギー反応等を抑制するものである。
【００２１】
【実施例】以下の参考例、実施例により本発明を詳細に
説明するが、これら実施例は本発明の範囲を限定するも
のではない。
説明するが、これら実施例は本発明の範囲を限定するも
のではない。
【００２２】［参考例１］Buusらの方法（Science ２４
２，１０４５，１９８８）に従ってＤＲＢ１* ０４０５
を有する患者より得たリンパ球をＥＢウイルスで株化し
てＢ細胞株を樹立し細胞数が約１０10個になるまで増殖
させた。次いでこの株化したＢ細胞株を緩衝液（１％ノ
ニデットＰ―４０、５ｍＭ Ｎａ―オルソバナデート、
２５ｍＭヨードアセトアミド、１ｍＭ ＰＭＳＦ（フェ
ニルメタンスルホニルフルオリド）含有リン酸緩衝液ｐ
Ｈ７．２）で処理して全細胞溶解液を得た。この全細胞
溶解液を遠心（１０，０００ｒｐｍ、１時間）し、上清
を０．４５μｍメンブレンフィルター（ミリポア社製）
に通した後、マウスγグロブリン―セファロース（ファ
ルマシア社製）およびプロテインＡ―セファロースカラ
ム（ピアス社製）で処理した。この様に処理して得られ
た溶出液を抗ＤＲ抗体固定化カラム（抗ＤＲモノクロー
ナル抗体ＨＵ―４（参考文献：Hirayama, K. et el. １
９８６，J.Immunol.１３７，９２４〜）を固定化したピ
アス社製カラム）を用いてＤＲＢ１*０４０５分子―オ
リゴペプチド結合体を分取した（洗浄：０．１％ＳＤ
Ｓ、０．５％ＮＰ―４０含有リン酸緩衝液ｐＨ７．２、
１％ｎ―オクチルグルコシド含有リン酸緩衝液ｐＨ７．
２、溶出：１％ｎ―オクチルグルコシド含有緩衝液ｐＨ
１０．５）。さらに７５％アセトニトリルで生成される
沈殿物を２．５Ｍ酢酸に溶解し、３７℃、３０分間イン
キュベートしてオリゴペプチドを遊離させ、限外濾過
（分画分子量、１０ｋＤａ）し、素通り分画を濃縮し目
的オリゴペプチドを得た。濾過残分を遊離ＤＲＢ１* ０
４０５分子（遊離ＤＲ分子）として保存し、参考例２の
結合実験に用いた。得られたオリゴペプチドをＨＰＬＣ
（Ｃ１８カラムWaters製；Bondasphere ５μｍ、１００
Ａ、２．１×１５０ｍｍ）を用いて分離した（流速：
０．２５ｍｌ／ｍｉｎ、溶出条件：０．０６％ＴＦＡ水
溶液と０．０５２％ＴＦＡアセトニトリル溶液を用いる
１２０分間グラディエント溶出）（図１）。各ピークを
エドマン分解を用いたペプチドシークエンサーにかけて
得られた結果を基にホモロジー検索を実施して各ピーク
のアミノ酸配列を決定した。
２，１０４５，１９８８）に従ってＤＲＢ１* ０４０５
を有する患者より得たリンパ球をＥＢウイルスで株化し
てＢ細胞株を樹立し細胞数が約１０10個になるまで増殖
させた。次いでこの株化したＢ細胞株を緩衝液（１％ノ
ニデットＰ―４０、５ｍＭ Ｎａ―オルソバナデート、
２５ｍＭヨードアセトアミド、１ｍＭ ＰＭＳＦ（フェ
ニルメタンスルホニルフルオリド）含有リン酸緩衝液ｐ
Ｈ７．２）で処理して全細胞溶解液を得た。この全細胞
溶解液を遠心（１０，０００ｒｐｍ、１時間）し、上清
を０．４５μｍメンブレンフィルター（ミリポア社製）
に通した後、マウスγグロブリン―セファロース（ファ
ルマシア社製）およびプロテインＡ―セファロースカラ
ム（ピアス社製）で処理した。この様に処理して得られ
た溶出液を抗ＤＲ抗体固定化カラム（抗ＤＲモノクロー
ナル抗体ＨＵ―４（参考文献：Hirayama, K. et el. １
９８６，J.Immunol.１３７，９２４〜）を固定化したピ
アス社製カラム）を用いてＤＲＢ１*０４０５分子―オ
リゴペプチド結合体を分取した（洗浄：０．１％ＳＤ
Ｓ、０．５％ＮＰ―４０含有リン酸緩衝液ｐＨ７．２、
１％ｎ―オクチルグルコシド含有リン酸緩衝液ｐＨ７．
２、溶出：１％ｎ―オクチルグルコシド含有緩衝液ｐＨ
１０．５）。さらに７５％アセトニトリルで生成される
沈殿物を２．５Ｍ酢酸に溶解し、３７℃、３０分間イン
キュベートしてオリゴペプチドを遊離させ、限外濾過
（分画分子量、１０ｋＤａ）し、素通り分画を濃縮し目
的オリゴペプチドを得た。濾過残分を遊離ＤＲＢ１* ０
４０５分子（遊離ＤＲ分子）として保存し、参考例２の
結合実験に用いた。得られたオリゴペプチドをＨＰＬＣ
（Ｃ１８カラムWaters製；Bondasphere ５μｍ、１００
Ａ、２．１×１５０ｍｍ）を用いて分離した（流速：
０．２５ｍｌ／ｍｉｎ、溶出条件：０．０６％ＴＦＡ水
溶液と０．０５２％ＴＦＡアセトニトリル溶液を用いる
１２０分間グラディエント溶出）（図１）。各ピークを
エドマン分解を用いたペプチドシークエンサーにかけて
得られた結果を基にホモロジー検索を実施して各ピーク
のアミノ酸配列を決定した。
【００２３】表２には、ＨＬＡ―オリゴペプチド結合体
より酸溶出したオリゴペプチドの各ＨＰＬＣピークに相
当するアミノ酸配列とホモロジーの関係を示す。
より酸溶出したオリゴペプチドの各ＨＰＬＣピークに相
当するアミノ酸配列とホモロジーの関係を示す。
【００２４】
【表２】
【００２５】これらのホモロジー情報をもとに表３に記
載するアミノ酸配列を有するオリゴペプチド（Ｉ）〜
（VII ）をＨＬＡ結合性オリゴペプチドとして想定し
た。
載するアミノ酸配列を有するオリゴペプチド（Ｉ）〜
（VII ）をＨＬＡ結合性オリゴペプチドとして想定し
た。
【００２６】これら（Ｉ）〜（VII ）のオリゴペプチド
を３文字略号を用いて表示した場合を後記配列表の配列
番号：１〜７に示す。
を３文字略号を用いて表示した場合を後記配列表の配列
番号：１〜７に示す。
【００２７】
【表３】
【００２８】以下、参考例、実施例において、表３に記
載のこれらピーク番号２９５．１７等のオリゴペプチド
を例えば「２９５．１７オリゴペプチド」と略記する。
載のこれらピーク番号２９５．１７等のオリゴペプチド
を例えば「２９５．１７オリゴペプチド」と略記する。
【００２９】［参考例２］ （１）表３に示された２９５．３６オリゴペプチド等を
ペプチドシンセサイザーにより合成した。得られた合成
オリゴペプチドが各々表３記載のアミノ酸配列を有する
ことを確認し、以下の実施例はこれら合成オリゴペプチ
ドを用いて実施した。
ペプチドシンセサイザーにより合成した。得られた合成
オリゴペプチドが各々表３記載のアミノ酸配列を有する
ことを確認し、以下の実施例はこれら合成オリゴペプチ
ドを用いて実施した。
【００３０】（２） 参考例１で得た遊離ＤＲ分子の溶
媒を１ｍＭ ＰＭＳＦ、０．０５％ＮＰ４０、５％ＤＭ
ＳＯ、０．１％ＮａＮ3 含有リン酸塩緩衝液（ｐＨ７．
０）に交換後、プロテアーゼ阻害剤（最終濃度：１．３
ｍＭ １，１０―フェナンスロリン、７３μＭペプスタ
チンＡ、８ｍＭ ＥＤＴＡ、６ｍＭ Ｎ―エチルマレイ
ミド、２００μＭ Ｎ，α―ｐ―トシル―Ｌ―リジンク
ロロメチルケトン）を添加した。ＤＲ分子１μＭにヨー
ド１２５標識した合成オリゴペプチド１０ｎＭ（表３記
載の２９５．３６、２９５．２４、２９５．１７オリゴ
ペプチドを標識した）を加え、４８時間室温にて静置し
反応させた。
媒を１ｍＭ ＰＭＳＦ、０．０５％ＮＰ４０、５％ＤＭ
ＳＯ、０．１％ＮａＮ3 含有リン酸塩緩衝液（ｐＨ７．
０）に交換後、プロテアーゼ阻害剤（最終濃度：１．３
ｍＭ １，１０―フェナンスロリン、７３μＭペプスタ
チンＡ、８ｍＭ ＥＤＴＡ、６ｍＭ Ｎ―エチルマレイ
ミド、２００μＭ Ｎ，α―ｐ―トシル―Ｌ―リジンク
ロロメチルケトン）を添加した。ＤＲ分子１μＭにヨー
ド１２５標識した合成オリゴペプチド１０ｎＭ（表３記
載の２９５．３６、２９５．２４、２９５．１７オリゴ
ペプチドを標識した）を加え、４８時間室温にて静置し
反応させた。
【００３１】なお、陰性対照としてirrelevantＭ１２ペ
プチド（ＹＮＥＬＳＧＥＡＨＫＤＡＬＧＫＬＧＩＤＮ）
を用いて、同様に反応させた。次いでセファデックスＧ
―５０カラム（ファルマシア製、４×１２０ｍｍ）で分
離してガンマーカウンターを用いて計数し、（ＤＲ分子
に結合した放射能量／総放射能量）×１００を求め結合
率（％）とした。
プチド（ＹＮＥＬＳＧＥＡＨＫＤＡＬＧＫＬＧＩＤＮ）
を用いて、同様に反応させた。次いでセファデックスＧ
―５０カラム（ファルマシア製、４×１２０ｍｍ）で分
離してガンマーカウンターを用いて計数し、（ＤＲ分子
に結合した放射能量／総放射能量）×１００を求め結合
率（％）とした。
【００３２】表４には、ＤＲ分子に対する標識合成オリ
ゴペプチドの結合率を示す。
ゴペプチドの結合率を示す。
【００３３】
【表４】
【００３４】表４から２９５．３６オリゴペプチドおよ
び２９５．２４オリゴペプチドおよび２９５．１７オリ
ゴペプチドの標識体は、遊離ＤＲ分子と、それぞれ７．
５、１２．７および８．２％結合した。これに対して、
陰性対照は０．７％結合したに過ぎなかった。
び２９５．２４オリゴペプチドおよび２９５．１７オリ
ゴペプチドの標識体は、遊離ＤＲ分子と、それぞれ７．
５、１２．７および８．２％結合した。これに対して、
陰性対照は０．７％結合したに過ぎなかった。
【００３５】［参考例３］参考例２の結合反応時に非標
識合成オリゴペプチドをモル濃度比で１０〜１，０００
倍量添加して結合阻害率（％）を求めた。なお、この
際、陰性対照として、ＤＲ分子に結合しないオリゴペプ
チド（irrelevantＭ１２peptide ）を大過剰量添加して
陰性対照とした。
識合成オリゴペプチドをモル濃度比で１０〜１，０００
倍量添加して結合阻害率（％）を求めた。なお、この
際、陰性対照として、ＤＲ分子に結合しないオリゴペプ
チド（irrelevantＭ１２peptide ）を大過剰量添加して
陰性対照とした。
【００３６】図２には、標識２９５．２４オリゴペプチ
ドと遊離ＤＲ分子との結合に対する各モル比の非標識２
９５．２４オリゴペプチドの阻害作用を示す。
ドと遊離ＤＲ分子との結合に対する各モル比の非標識２
９５．２４オリゴペプチドの阻害作用を示す。
【００３７】図２から非標識２９５．２４オリゴペプチ
ドは、標識２９５．２４オリゴペプチドと遊離ＤＲ分子
との結合を濃度依存的に阻害したことが判る。
ドは、標識２９５．２４オリゴペプチドと遊離ＤＲ分子
との結合を濃度依存的に阻害したことが判る。
【００３８】表５には、標識２９５．２４オリゴペプチ
ドと遊離ＤＲ（ＤＲＢ１* ０４０５）分子との結合に対
する表３記載の種々の非標識オリゴペプチドの阻害作用
を示す。
ドと遊離ＤＲ（ＤＲＢ１* ０４０５）分子との結合に対
する表３記載の種々の非標識オリゴペプチドの阻害作用
を示す。
【００３９】２９５．２４、２９５．３６、２９５．１
７、２９５．２９、２９５．２６、２９５．３２および
２９５．２１オリゴペプチドは、１０００倍の濃度にお
いて、標識２９５．２４オリゴペプチドと遊離ＤＲ分子
との結合を阻害した。これに対して、陰性対照（irrele
vantＭ１２ peptide）は影響を示さなかった。
７、２９５．２９、２９５．２６、２９５．３２および
２９５．２１オリゴペプチドは、１０００倍の濃度にお
いて、標識２９５．２４オリゴペプチドと遊離ＤＲ分子
との結合を阻害した。これに対して、陰性対照（irrele
vantＭ１２ peptide）は影響を示さなかった。
【００４０】
【表５】
【００４１】［実施例１］ （１）図３に示されているようなピーク番号２９５．２
４の親水性アミノ酸残基をアラニンに、また疎水性アミ
ノ酸残基をセリンに置換した１５種類のペプチドを合成
して、２９５．２４の 125Ｉ標識体と遊離ＤＲ分子との
結合に対する影響を検討し、結果を図３に示した。
４の親水性アミノ酸残基をアラニンに、また疎水性アミ
ノ酸残基をセリンに置換した１５種類のペプチドを合成
して、２９５．２４の 125Ｉ標識体と遊離ＤＲ分子との
結合に対する影響を検討し、結果を図３に示した。
【００４２】図３から２９５．２４のＮ末端より５、
８、１０位のアミノ酸の置換により、標識２９５．２４
と遊離ＤＲ分子との結合阻害作用が減弱したことが判
る。その結果、----Ｆ--Ｌ- Ｎ--で表わされるモチーフ
（- は任意のアミノ酸が存在することを示す）がＤＲ分
子との結合に重要なモチーフであることが推察された。
８、１０位のアミノ酸の置換により、標識２９５．２４
と遊離ＤＲ分子との結合阻害作用が減弱したことが判
る。その結果、----Ｆ--Ｌ- Ｎ--で表わされるモチーフ
（- は任意のアミノ酸が存在することを示す）がＤＲ分
子との結合に重要なモチーフであることが推察された。
【００４３】（２）（１）で推察されたモチーフより、
２９５．２４オリゴペプチドのアラニン置換体であるＡ
ＡＦＡＡＬＡＮＡＡおよび、このペプチドのＦ、Ｌ、Ｎ
を逐次他のアミノ酸残基に置換したペプチドを合成し、
参考例２と同様にして遊離ＤＲ分子との親和性を検討し
た。なお、参考例１と同様の方法で、ＥＢウイルス株化
ＤＲＢ１* ０４０６陽性Ｂ細胞より遊離ＤＲＢ１* ０４
０６分子を取得し、対照として結合実験に用いた。
２９５．２４オリゴペプチドのアラニン置換体であるＡ
ＡＦＡＡＬＡＮＡＡおよび、このペプチドのＦ、Ｌ、Ｎ
を逐次他のアミノ酸残基に置換したペプチドを合成し、
参考例２と同様にして遊離ＤＲ分子との親和性を検討し
た。なお、参考例１と同様の方法で、ＥＢウイルス株化
ＤＲＢ１* ０４０６陽性Ｂ細胞より遊離ＤＲＢ１* ０４
０６分子を取得し、対照として結合実験に用いた。
【００４４】その結果を図４―（ａ）、（ｂ）、（ｃ）
に示した。
に示した。
【００４５】図４―（ａ）は、２９５．２４オリゴペプ
チドのアラニン置換体及び更にこのうちのＦを図４―
（ａ）の横軸に記載した各種アミノ酸に置換して得られ
るアラニン置換体を用いた結合実験の結果を示してい
る。
チドのアラニン置換体及び更にこのうちのＦを図４―
（ａ）の横軸に記載した各種アミノ酸に置換して得られ
るアラニン置換体を用いた結合実験の結果を示してい
る。
【００４６】また図４―（ｂ）、図４―（ｃ）は、それ
ぞれＬ、Ｎを両図の横軸に記載した各種アミノ酸に置換
して得られるアラニン置換体を用いた結合実験の結果を
示している。
ぞれＬ、Ｎを両図の横軸に記載した各種アミノ酸に置換
して得られるアラニン置換体を用いた結合実験の結果を
示している。
【００４７】図４から、オリゴペプチドＡＡＦＡＡＬＡ
ＮＡＡは、標識２９５．２４オリゴペプチドとＤＲ分子
およびＤＲＢ１* ０４０６分子との結合を阻害し、それ
ぞれに親和性を有することが示された。特にＮ末端より
３位にＷ、Ｆ、Ｍ、Ｙ、Ｉが、６位にＦ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、
Ｗ、Ｃ、Ｖ、Ｍ、Ａが、８位にＮ、Ｄ、Ｔ、Ｉ、Ｖ、
Ｓ、Ｆ、Ｍ、Ｗが存在するときに、ＤＲ分子に対して高
い親和性を有することが示された。なかでも３位がＷ、
Ｆ又はＭで、６位がＬ、Ｆ又はＩで、８位がＮの組合せ
のものが親和性に優れていることが判る。ＤＲＢ１* ０
４０６分子に対しては、３位はＦ、Ｉ、Ｍ、Ｗが、６位
はＬ、Ｉ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｔが、８位はＳ、Ｎ、Ｉ、
Ｑが特に高い親和性を示した。また、３位をＷ、Ｙ、６
位をＦ、Ｙ、Ｗ、８位にＤに置換したときＤＲ分子に対
してより強い親和性が認められた。
ＮＡＡは、標識２９５．２４オリゴペプチドとＤＲ分子
およびＤＲＢ１* ０４０６分子との結合を阻害し、それ
ぞれに親和性を有することが示された。特にＮ末端より
３位にＷ、Ｆ、Ｍ、Ｙ、Ｉが、６位にＦ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、
Ｗ、Ｃ、Ｖ、Ｍ、Ａが、８位にＮ、Ｄ、Ｔ、Ｉ、Ｖ、
Ｓ、Ｆ、Ｍ、Ｗが存在するときに、ＤＲ分子に対して高
い親和性を有することが示された。なかでも３位がＷ、
Ｆ又はＭで、６位がＬ、Ｆ又はＩで、８位がＮの組合せ
のものが親和性に優れていることが判る。ＤＲＢ１* ０
４０６分子に対しては、３位はＦ、Ｉ、Ｍ、Ｗが、６位
はＬ、Ｉ、Ｍ、Ｖ、Ｆ、Ａ、Ｔが、８位はＳ、Ｎ、Ｉ、
Ｑが特に高い親和性を示した。また、３位をＷ、Ｙ、６
位をＦ、Ｙ、Ｗ、８位にＤに置換したときＤＲ分子に対
してより強い親和性が認められた。
【００４８】（３）これらの結果より、参考例１で合成
したＨＬＡ結合性オリゴペプチド（（Ｉ）、（II）、
（IV）、（VII ）等）についても表６に示すように、３
点で結合する可能性が示唆された。
したＨＬＡ結合性オリゴペプチド（（Ｉ）、（II）、
（IV）、（VII ）等）についても表６に示すように、３
点で結合する可能性が示唆された。
【００４９】
【表６】
【００５０】以上より、これら実施例で得られたモチー
フは、慢性関節リウマチ（ＲＡ）等の自己免疫疾患にお
ける自己抗原の同定に重要な情報を提供するものと考え
られ、このモチーフを有するペプチドは免疫抑制剤とし
て有用であると考えられる。
フは、慢性関節リウマチ（ＲＡ）等の自己免疫疾患にお
ける自己抗原の同定に重要な情報を提供するものと考え
られ、このモチーフを有するペプチドは免疫抑制剤とし
て有用であると考えられる。
【００５１】［実施例２］注射剤の製造 １ｍｌ中に実施例１（１）のモチーフ（オリゴペプチ
ド）を０．３ｍｇ含有する注射用溶液を下記の処方によ
り製造した。
ド）を０．３ｍｇ含有する注射用溶液を下記の処方によ
り製造した。
【００５２】 実施例１（１）のモチーフ ３０ｍｇ 食塩 ９００ｍｇ 注射用蒸留水 １００ｍｌ
【００５３】
【００５４】配列番号：１ 配列の長さ：１５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列： Val Pro Ile Gln Arg Ala Val Tyr Gln Asn Val Val Val Asn Asn 1 5 10 15
【００５５】配列番号：２ 配列の長さ：１２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列： Ser Pro Gly Thr Gly Ala Tyr Tyr Val Leu Leu Asn 1 5 10
【００５６】配列番号：３ 配列の長さ：２０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列： Gly Ser Thr Val Phe Asp Asn Leu Pro Asn Pro Glu Ile Asp Gly Asp 1 5 10 15 Tyr Tyr Gly Trp 20
【００５７】配列番号：４ 配列の長さ：２０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列： Glu Gly Gln Leu Val Ser Ile His Ser Pro Glu Glu Gln Asp Phe Leu 1 5 10 15 Thr Lys His Ala 20
【００５８】配列番号：５ 配列の長さ：２０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド Gly Pro Lys Pro Leu Phe Arg Arg Met Ser Ser Leu Val Gly Pro Thr 1 5 10 15 Gln Ser Phe Phe 20
【００５９】配列番号：６ 配列の長さ：２０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列： Gly Lys Pro Pro Gln Tyr Ile Ala Val His Val Val Pro Asp Gln Leu 1 5 10 15 Met Ala Phe Gly 20
【００６０】配列番号：７ 配列の長さ：１９ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列： Ser Asp Pro Ile Leu Tyr Arg Pro Val Ala Val Ala Leu Asp Thr Lys 1 5 10 15 Gly Pro Glu
【図１】図１は参考例１におけるＨＰＬＣの結果を示
す。
す。
【図２】図２は参考例３におけるオリゴペプチド（標識
されたもの）と遊離ＤＲ分子との結合に対する非標識オ
リゴペプチドの阻害作用を示す。
されたもの）と遊離ＤＲ分子との結合に対する非標識オ
リゴペプチドの阻害作用を示す。
【図３】図３は実施例１（１）における標識２９５．２
４オリゴペプチドとＤＲ分子との結合に対する本発明の
オリゴペプチドの阻害作用を示す。
４オリゴペプチドとＤＲ分子との結合に対する本発明の
オリゴペプチドの阻害作用を示す。
【図４】図４は実施例１（２）における、本発明のオリ
ゴペプチドとＤＲ分子の親和性スペクトラムを示す。図
中、（ａ）はＡＡＦＡＡＬＡＮＡＡポリアラニンペプチ
ドおよびＦを他のアミノ酸残基に置換した１残基置換ポ
リアラニンペプチド、（ｂ）は同様にＬの１残基置換ポ
リアラニンペプチド、（ｃ）は同様にＮの１残基置換ポ
リアラニンペプチドを用いた場合を示す。
ゴペプチドとＤＲ分子の親和性スペクトラムを示す。図
中、（ａ）はＡＡＦＡＡＬＡＮＡＡポリアラニンペプチ
ドおよびＦを他のアミノ酸残基に置換した１残基置換ポ
リアラニンペプチド、（ｂ）は同様にＬの１残基置換ポ
リアラニンペプチド、（ｃ）は同様にＮの１残基置換ポ
リアラニンペプチドを用いた場合を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 小森谷 恵司 東京都日野市旭が丘４丁目３番２号 帝人 株式会社東京研究センター内
Claims (4)
- 【請求項１】 下記式（Ｉ―ａ） Ｘ1 ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｘ2 ―Ｙ3 ―Ｘ3 （Ｉ―ａ） ［式中、Ｘ1 はＷ、Ｆ、Ｌ、Ｍ、Ｙ及びＩからなる群よ
り選ばれるアミノ酸を表わし、Ｘ2 はＦ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、
Ｗ、Ｃ、Ｖ、Ｍ及びＡからなる群より選ばれるアミノ酸
を表わし、Ｘ3 はＮ、Ｄ、Ｔ、Ｉ、Ｖ、Ｓ、Ｆ、Ｍ及び
Ｗからなる群より選ばれるアミノ酸を表わし、Ｙ1 、Ｙ
2 及びＹ3 はそれぞれ任意のＬ―アミノ酸を表わす。］
で表わされるアミノ酸配列を有するヒト主要組織適合抗
原（ＨＬＡ）ＨＬＡ―ＤＲＢ１* ０４０５結合性オリゴ
ペプチド。 - 【請求項２】 下記式（Ｉ―ａ―１）〜（Ｉ―ａ―５） Ｗ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―１） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―２） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｆ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―３） Ｍ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｌ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―４） Ｆ―Ｙ1 ―Ｙ2 ―Ｉ―Ｙ3 ―Ｎ （Ｉ―ａ―５） （式中、Ｙ1 、Ｙ2 及びＹ3 の定義は式（Ｉ―ａ）にお
けるものと同じ。）のいずれかで表わされるアミノ酸配
列を有する請求項１記載のオリゴペプチド。 - 【請求項３】 請求項１記載のオリゴペプチドを有効成
分として含有する医薬組成物。 - 【請求項４】 治療有効量の請求項１記載のオリゴペプ
チドを有効成分として含有する免疫抑制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6004615A JPH07206896A (ja) | 1994-01-20 | 1994-01-20 | Ｈｌａ結合性オリゴペプチドを含有する免疫抑制剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6004615A JPH07206896A (ja) | 1994-01-20 | 1994-01-20 | Ｈｌａ結合性オリゴペプチドを含有する免疫抑制剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07206896A true JPH07206896A (ja) | 1995-08-08 |
Family
ID=11588971
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6004615A Pending JPH07206896A (ja) | 1994-01-20 | 1994-01-20 | Ｈｌａ結合性オリゴペプチドを含有する免疫抑制剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07206896A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110165185A1 (en) * | 2003-07-03 | 2011-07-07 | Rush University Medical Center | Immunogenic peptides |
-
1994
- 1994-01-20 JP JP6004615A patent/JPH07206896A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110165185A1 (en) * | 2003-07-03 | 2011-07-07 | Rush University Medical Center | Immunogenic peptides |
| US9289479B2 (en) * | 2003-07-03 | 2016-03-22 | Rush University Medical Center | Immunogenic peptides |
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