JPH07215882A

JPH07215882A - 腫瘍の治療方法

Info

Publication number: JPH07215882A
Application number: JP6227568A
Authority: JP
Inventors: J Martin Brown; ブラウンジェイ．マーティン
Original assignee: Leland Stanford Junior University
Current assignee: Leland Stanford Junior University
Priority date: 1993-09-22
Filing date: 1994-09-22
Publication date: 1995-08-15
Also published as: CZ232694A3; KR950007853A; PT649658E; IL111025A; US5670502A; US6277835B1; DE69424915T2; SK282178B6; ES2147567T3; NO943524L; EP0972517A2; UA49787C2; EP0649658B1; PT972517E; AU7411794A; ATE193827T1; NZ264502A; CA2132578A1; GR3034360T3; DK0972517T3

Abstract

(57)【要約】（修正有）【目的】化学療法剤類および１，２，４−ベンゾトリ
アジンオキシド類を組み合わせた癌腫瘍の治療方法を提
供する。【構成】化学療法剤での治療に対して感受性である固
形腫瘍を有する哺乳動物に、前記化学療法剤を投与して
から約１時間から約２時間後に、または前記化学療法剤
を投与する約１／２時間から約２４時間前に、細胞毒性
増強量の式Ｉで示される化合物を投与すること、を含ん
でなる当該化学療法剤の細胞毒性を増強する方法。〔式中、ＸはＨ、ヒドロカルビル（１〜４Ｃ）、ハロゲ
ン、ＯＨ、アルコキシ（１〜４Ｃ）、ＮＨ_２、アルキル
アミノ（１〜４Ｃ）等であり；Ｙ_１，Ｙ_２はＨ，Ｎ
Ｏ_２，ＯＨ、アルコキシ（１〜４Ｃ）、アルキルチオ
（１〜４Ｃ）、ＮＨ_２、モノ（又はジ）アルキルアミノ
（１〜４Ｃ）、アルコキシカルボニル（１〜４Ｃ）、ハ
ロゲン等であり；ｎは０，１である〕

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、癌腫瘍の治療の分野に
関する。より詳細には、本発明は、化学療法剤類および
１，２，４−ベンゾトリアジンオキシド類を組み合わせ
た癌腫瘍の治療方法に関する。

【０００２】

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】最も
一般的に用いられる抗癌剤は、低酸素（hypoxic)腫瘍細
胞に対する細胞毒性よりも正常に酸素が送り込まれる
（normally oxygenated)腫瘍細胞に対する細胞毒性の方
が強い。低酸素細胞の放射線療法に対する耐性も広く知
られている。従って、腫瘍低酸素状態（tumor hypoxia)
および結果として生じる治療に対する耐性が癌治療法に
おいて懸念されている。

【０００３】固形癌腫瘍は、十分に酸素が送り込まれる
細胞ならびに様々な割合で不十分に酸素が送り込まれる
細胞あるいは低酸素細胞の両者を含む。低酸素状態は、
通常腫瘍細胞が血管から最も遠く離れているところで生
じる。またそのような細胞はより遅い増殖速度を有する
傾向がある。完全に解明されていないとはいえ、低酸素
細胞の抗癌剤に対する耐性は、低酸素細胞がより遅く成
長する傾向があるためか、あるいは薬剤を運搬する血管
からそれらまで距離があるために、低酸素細胞による薬
剤の摂取が不十分であることによると一般的には考えら
れている。従って、腫瘍中の低酸素細胞の相対割合は、
治療の成果に対して重要なものになりうる。放射線療法
もしくは薬剤治療で生き残る低酸素耐性細胞は、再度酸
素が送り込まれるようになる可能性があり、それによっ
て更なる治療に対する腫瘍の感受性が回復する。それに
もかかわらず、不確実な結果をあてにする代わりに、低
酸素腫瘍細胞を包含する癌腫瘍細胞が殺されるかまたは
治療が施されるときにより確実に不活性化されるような
癌治療を開発することが望まれている。

【０００４】1992年12月29日に発行された米国特許第
5,175,287号明細書には、腫瘍の治療のために放射線と
共に１，２，４−ベンゾチアジンオキシド類を使用する
ことが開示されている。１，２，４−ベンゾチアジンオ
キシド類は、腫瘍細胞を放射線に敏感にし、そしてそれ
らをこの治療モダリティにより従うようにする。Holden
ら（1992) "Enhancement of Alkylating Agent Activit
y by SR-4233 in the FSaIIC Murine Fibrosarcoma" JN
CI 84:187-193 には、抗腫瘍性アルキル化薬と組み合わ
せて、チラパザミン（tirapazamine) としても知られて
いるSR-4233 を使用することが開示されている。４種の
抗腫瘍アルキル化薬、シスプラチン、シクロホスファミ
ド、カルムスチンおよびメルファランについて、各々、
低酸素腫瘍細胞の抗腫瘍アルキル化薬に対する耐性を解
決するチラパザミンの能力を調べるための試験を行っ
た。チラパザミンを単独で、および様々な量の各抗腫瘍
アルキル化薬と組み合わせて試験した。シクロホスファ
ミド、カルムスチンもしくはメルファランで単一量（si
ngle-dose)治療する直前に SR-4233を投与したとき、注
目すべき用量増加により腫瘍細胞における相乗細胞毒性
効果が生じたことが認められた。しかしながら、シスプ
ラチンで単一量治療する直前に SR-4233を投与したとき
には、シスプラチンを最高用量レベルで投与したときを
除いて、用量増加により相加効果が生じた。

【０００５】ニトロイミダゾール低酸素細胞毒性薬は、
各種の抗癌剤と組み合わせて使用されてきた。そして、
これらの薬剤を各種の抗癌剤、特にアルキル化薬、シク
ロホスファミドおよびメルファランならびにニトロソ尿
素類、BCNUおよびCCNUと組み合わせたときに、治療利益
が達成できることが見出された。しかしながら、生じた
治療利益が、ニトロイミダゾール類による低酸素細胞の
選択的な殺害によるものではなく、ニトロイミダゾール
類の代謝によるアルキル化薬誘導ＤＮＡ架橋の可能性を
含むメカニズムによるものであることが明らかになった
ことが、後に見出された（Murrayら，（1983) Br. J. C
ancer 47: 195-203)。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、治療の必要な
哺乳動物に、有効量の次式で示される化合物、または医
薬的に許容される前記化合物の塩を投与すること、およ
び本明細書で定義される式Ｉの化合物を投与してから約
１／２時間から約２４時間後に有効量の腫瘍が影響を受
けやすい化学療法剤を投与することを含んでなる、癌腫
瘍、特に固形腫瘍の治療方法を提供する。

【化４】上式中、Ｘは、Ｈ；ヒドロカルビル（１〜４Ｃ）；Ｏ
Ｈ、ＮＨ₂、ＮＨＲもしくはＮＲＲで置換されたヒドロ
カルビル（１〜４Ｃ）；ハロゲン；ＯＨ；アルコキシ
（１〜４Ｃ）；ＮＨ₂；ＮＨＲまたはＮＲＲであり、こ
こで、それぞれＲ基は、独立して、低級アルキル（１〜
４Ｃ）および低級アシル（１〜４Ｃ）から選択されるも
のであり、そしてこれらのＲは、それら自身ＯＨ、ＮＨ
₂、アルキル（１〜４Ｃ）第２級およびジアルキル（１
〜４Ｃ）第３級アミノ基、アルコキシ（１〜４Ｃ）もし
くはハロゲンで置換されていてもよく、ＮＲＲの場合に
は、２つのＲが直接的にまたは橋酸素（bridge oxygen)
を介して一体になって、モルホリノ環、ピロリジノ環も
しくはピペリジノ環を形成し；ｎは、０もしくは１であ
り；そしてＹ¹およびＹ²は、独立して、Ｈ；ニトロ；
ハロゲン；ハロゲン、ヒドロキシ、エポキシ、アルコキ
シ（１〜４Ｃ）、アルキルチオ（１〜４Ｃ）、第１級ア
ミノ（ＮＨ₂）、アルキル（１〜４Ｃ）第２級アミノ、
ジアルキル（１〜４Ｃ）第３級アミノ、２つのアルキル
が一体になって結合してモルホリノ、ピロリジノもしく
はピペリジノを生成しているジアルキル（１〜４Ｃ）第
３級アミノ、アシルオキシ（１〜４Ｃ）、アシルアミド
（１〜４Ｃ）およびそれのチオ類似体、アセチルアミノ
アルキル（１〜４Ｃ）、カルボキシ、アルコキシカルボ
ニル（１〜４Ｃ）、カルバミル、アルキルカルバミル
（１〜４Ｃ）、アルキルスルホニル（１〜４Ｃ）もしく
はアルキルホスホニル（１〜４Ｃ）からなる群より選択
される１つもしくは２つの置換基で任意に置換された環
式および不飽和ヒドロカルビルを包含するヒドロカルビ
ル（１〜１４Ｃ）であり、ここで、ヒドロカルビルは単
一エーテル（−Ｏ−）結合により任意に中断されていて
もよく、またはＹ¹およびＹ²は、独立して、モルホリ
ノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ＮＨ₂、ＮＨＲ′、Ｎ
Ｒ′Ｒ′Ｏ（ＣＯ）Ｒ′、ＮＨ（ＣＯ）Ｒ′、Ｏ（Ｓ
Ｏ）Ｒ′もしくはＯ（ＰＯＲ′）Ｒ′，ここでＲ′は、
ＯＨ、ＮＨ₂、アルキル（１〜４Ｃ）第２級アミノ、ジ
アルキル（１〜４Ｃ）第３級アミノ、モルホリノ、ピロ
リジノ、ピペリジノ、アルコキシ（１〜４Ｃ）もしくは
ハロゲン置換基で置換されていてもよいヒドロカルビル
（１〜４Ｃ）である。

【０００７】また、本発明は、固形腫瘍に対する化学療
法剤の毒性を増強する方法を提供する。本発明のこの態
様では、化学療法剤を投与する約１／２時間から約２４
時間前に、または化学療法剤を投与してから約１時間か
ら約２時間後に、本明細書で先に定義された式Ｉの化合
物の細胞毒性増強量が、固形腫瘍を有しかつそのような
治療を必要とする哺乳動物に投与され、そして腫瘍は、
更に化学療法剤で治療される。別の態様では、本発明
は、化学療法剤を投与してから１〜２時間後に、本明細
書で定義される式Ｉの化合物を哺乳動物に投与すること
を含んでなる、哺乳類の癌腫瘍を治療する方法を提供す
る。

【０００８】本出願人らは、化学療法剤の投与前後に、
本明細書中で定義される式Ｉの化合物を投与すると、ど
ちらかの薬剤の単独投与または両薬剤の同時投与より
も、驚くべき程そして予期せぬ程遙に多くの腫瘍細胞が
殺害されることを発見した。シスプラチンを投与する２
４時間前にチラパザミンを投与したときに、チラパザミ
ンとシスプラチンを同時に投与したときに認められる腫
瘍細胞殺害量の10倍から1000倍上回る腫瘍細胞殺害量
を、本出願人らは認めた。この薬剤の組み合わせで得ら
れる最高の相乗効果は、シスプラチンを投与する約２．
５時間前にチラパザミンを投与したときに認められた。

【０００９】本出願人が特許請求した方法は、化学療法
剤の抗腫瘍効力（即ち、腫瘍細胞におけるその細胞毒性
効果）における並外れた増強を表すものである。更に、
シスプラチンの全身毒性（血清BUN および急性毒性）試
験では、腫瘍についての効力を最適に分離した組み合わ
せは、シスプラチン単独の場合と比べて全身毒性が小さ
いかまたは全く増加しないことを示した。従って、すべ
てではないが、ほとんどの更なる腫瘍細胞の細胞殺害効
力は、この組み合わせに関する治療利益と言い換えられ
る。また、腫瘍細胞殺害の顕著な増強が比較的低用量の
シスプラチンで得られため、チラパザミンとシスプラチ
ンとの間の相乗相互作用は十分である。

【００１０】本発明の更なる態様は、本明細書で先に定
義される式Ｉで示される癌腫瘍における治療効果を発揮
できる化合物、もしくは医薬的に許容されるその塩の用
途であって、化学療法剤でそのような腫瘍を治療する前
にそのような腫瘍を有する哺乳動物に治療的に投与する
ための医薬品の製造における用途を提供する。本発明
は、より詳細には添付した特許請求の範囲に示されてお
り、かつそれは下記のその好ましい態様に記載されてい
る。

【００１１】

【具体的な態様】本発明は、ヒト癌腫瘍、特に固形腫瘍
を包含する哺乳類の癌腫瘍を治療する方法を提供する。
本発明のこの態様では、有効量の本明細書中で定義され
る式Ｉで示される化合物が、有効量の腫瘍が影響を受け
やすい化学療法剤を哺乳動物に投与する約１／２時間か
ら約２４時間前に、癌腫瘍を有しかつ治療を必要とする
哺乳動物に投与される。

【００１２】本明細書で用いられる、化学療法剤に対す
る腫瘍の感受性とは、化学療法剤が、例えば、腫瘍細胞
を殺害すること、細胞増殖を低減させること、または腫
瘍の大きさを低減させることを初めとする、いずれかの
メカニズムで腫瘍における治療効果を発揮できることを
意味する。また、本明細書で用いられる、有効量の本明
細書中で定義される式Ｉの化合物とは、腫瘍細胞を殺害
できるか、または化学療法剤を併用して腫瘍細胞を殺害
できる量を称する。有効量の化学療法剤とは、腫瘍細胞
を殺害できるか、または例えば、腫瘍の大きさを低減さ
せることもしくは腫瘍細胞の成長および増殖を遅延させ
ることにより治療効果を得ることができる量の化学療法
剤を称する。

【００１３】本発明の別の態様は、化学療法剤での治療
を受けやすい固形腫瘍に対する化学療法剤の細胞毒性を
増強する方法であって、化学療法剤を投与してから約１
時間〜約２時間後に、細胞毒性増強量の本明細書中に定
義される式Ｉの化合物を、そのような腫瘍を有する哺乳
動物に投与することを含んでなる方法を提供する。本明
細書で用いられる、細胞毒性増強量なる語は、細胞にお
ける化学療法剤の細胞毒性効果を増強できるような、本
明細書中に定義される式Ｉの化合物の量を称する。好ま
しくは、細胞毒性増強量が、相乗効果をもたらす程、即
ち、化学療法剤および式Ｉの化合物を単独で投与したと
きのそれぞれの効果の和よりも大きい。細胞毒性増強量
の式Ｉの化合物は、そのような化合物を化学療法剤と共
に、生体内および／または生体外実験腫瘍モデル、例え
ば、本明細書に後述するようなもの、または当該技術分
野で既知であるいずれか別の腫瘍モデルで試験すること
により評価できる。次いで生体内および／または生体外
実験腫瘍モデルにより決定した細胞毒性増強量は、腫瘍
を治療する際に哺乳動物に投与される２種の薬剤の量を
決定するための基準として使用される。

【００１４】本発明の別の更なる態様は、化学療法剤で
の治療を受けやすい固形腫瘍に対する化学療法剤の細胞
毒性を増強する方法であって、化学療法剤を投与してか
ら約１時間〜約２時間後に、細胞毒性増強量の本明細書
中に定義される式Ｉで示される化合物を、そのような腫
瘍を有する哺乳動物に投与することを含んでなる方法を
提供する。

【００１５】いずれかの作用の理論もしくは様式により
結合することを望むことなく、ここでは、低酸素癌細胞
に対して特異的な細胞毒性を有する本明細書で定義され
る式Ｉのベンゾトリアジン化学療法剤および正常に酸素
が送り込まれる癌細胞において最大の活性を有する化学
療法剤の組み合わせが、腫瘍細胞の殺害を増強するかま
たは相乗効果を提供する。本明細書中で定義される式Ｉ
のベンゾトリアジン類の酸化物類は、それらの効果を発
揮するために、正常な酸素濃度よりも低い酸素濃度を特
別に必要とする。低酸素状態についてのこの要件は重要
な利点であり、２種の薬物の間における腫瘍特異性相互
反応のベースを提供する。一般的には、正常な細胞の酸
素濃度は10〜15mmHgを越える濃度である。これらのおよ
び高酸素分圧で、チラパザミンにより得られる細胞毒性
は非常に低い。一方、多くの腫瘍は10mmHg未満の酸素濃
度の細胞を相当数有する。酸素濃度10mmHg未満という分
圧では、チラパザミンおよび式Ｉの別のベンゾトリアジ
ン類の細胞毒性種への代謝が著しく増強される。本明細
書で用いられる低酸素腫瘍細胞とは、酸素分圧が約10mm
Hg未満の分圧の腫瘍細胞を称する。

【００１６】本発明方法は、ヒトの癌腫瘍を包含する哺
乳動物の癌腫瘍、特に低酸素領域を有する固形癌を治療
するのに有用である。そのような腫瘍の具体例として
は、限定されるものではないが、腺癌類、神経膠芽（グ
リオ）細胞腫類（および別の脳腫瘍類）、乳房の、頚部
の、結腸直腸の、子宮内膜の、胃の、肝臓の、肺の（小
細胞および非小細胞の）腫瘍、リンパ腫（非ホジキン・
リンパ腫、バーキット・リンパ腫、拡散性大細胞リンパ
腫、濾胞性リンパ腫、拡散性ホジキン・リンパ腫を包含
する）、黒色腫（転移性）、神経芽細胞腫、骨原性肉
腫、卵巣腫瘍、網膜芽腫、軟組織肉腫、精巣腫瘍および
化学療法に応じる別の腫瘍が挙げられる。従って、本発
明方法は、ヒトを包含するいずれかの型の哺乳動物、常
用される実験動物、例えば、ラット、マウス、ウサギ、
イヌ、サルのような霊長類、ウマ、ネコならびに別の動
物における、実験的に誘導させた癌腫瘍を包含する癌腫
瘍の治療に使用できる。

【００１７】本発明方法は、いずれかの型の化学療法剤
と共に実施できる。本発明のいずれか特定の態様では、
化学療法剤は、癌腫瘍の型および関係する癌腫瘍を治療
するための化学療法剤の効力などの因子に関して選択さ
れるであろう。化学療法剤は、アルキル化薬、代謝拮抗
物質、天然物、ホルモンおよび拮抗物質ならびに別の型
の化合物から選択できるだろう。

【００１８】アルキル化薬の具体例としては、ナイトロ
ジェンマスタード類（即ち、２−クロロエチルアミン
類）、例えば、クロルメチン（chloromethine ）、クロ
ラムブシル（chlorambucil）、メルファラン（melphala
n ）、ウラムスチン（uramustine）、マンノムスチン
（mannomustine）、リン酸エキストラムスチン（extram
ustine phosphate）、メクロルタミンオキシド（mechlo
rthaminoxide）、シクロホスファミド（cyclophosphami
de）、イフォスアミド（ifosamide ）およびトリフォス
ファミド（trifosfamide）；置換アジリジン基を有する
アルキル化薬、例えば、トレタミン（tretamine ）、チ
オテパ（thiotepa）、トリアジキノン（triaziquone ）
およびマイトマイシン（mitomycin ）；アルキルスルホ
ネート型のアルキル化薬、例えば、ブスルファン（busu
lfan）およびピポスルファン（piposulfan）；アルキル
化Ｎ−アルキル−Ｎ−ニトロソウレア誘導体類、例え
ば、カルムスチン（carmustine）、ロムスチン（lomust
ine ）、セムスチン（semustine）もしくはストレプト
ゾトシン（streptozotocine ）；ミトブロニトール（mi
tobronitole ）、ダカルバジン（dacarbazine ）および
プロカルバジン（procarbazine）型のアルキル化薬；な
らびにプラチナ錯体類、例えば、シスプラチン（cispla
tin ）およびカルボプラチン（carboplatin ）が挙げら
れる。

【００１９】代謝拮抗薬の具体例としては、葉酸誘導体
類、例えば、メトトレキサート（methotrexate）、アミ
ノプテリン（aminopterin ）および３′−ジクロロメト
トレキサート（３′−dichloromethotrexate）；ピリミ
ジン誘導体類、例えば、５−フルオロウラシル（５−fl
uorouracil）、フロキシウリジン（floxuridine ）、テ
ガフール（tegafur ）、シタラビン（cytarabine）、イ
ドクスウリジン（idoxuridine ）およびフルシトシン
（flucytosine ）；プリン誘導体類、例えば、メルカプ
トプリン（mercaptopurine）、チオグアニン（thioguan
ine ）、アザチオプリン（azathioprine）、チアミプリ
ン（tiamiprine）、ビダラビン（vidarabine）、ペント
スタチン（pentostatin ）およびピューロマイシン（pu
romycin ）が挙げられる。

【００２０】天然物の具体例としては、ビンカアルカロ
イド類、例えば、ビンブラスチン（vinblastine ）およ
びビンクリスチン（vincristine ）；エピポドフィロト
キシン類（epipodophylotoxins）、例えば、エトポシド
（etoposide ）およびテニポシド（teniposide）；抗生
物質類、例えば、アドリマイシン（adriamycin）、ダウ
ノマイシン（daunomycin）、ダクチノマイシン（dactin
omycin）、ダウノルビシン（daunorubicin）、ドキソル
ビシン（doxorubicin ）、ミスラマイシン（mithramyci
n ）、ブレオマイシン（bleomycin ）およびマイトマイ
シン（mitomycin ）；酵素類、例えば、Ｌ−アスパラギ
ナーゼ（L-asparaginase）；生体応答調節物質類、例え
ば、アルファ−インターフェロン（alpha-interfero
n）；カンプトテシン（camptothecin）；タクゾル（tax
ol ）；ならびにレチノイド類、例えば、レチノイン酸
（retinoic acid ）が挙げられる。

【００２１】ホルモン類および拮抗物質類の具体例とし
ては、副腎皮質コルチコイド（adrenocorticoid ）類、
例えば、プレドニゾン（prednisone）；黄体ホルモン
（progestin ）類、例えば、酢酸ヒドロキシプロゲステ
ロン（hydroxyprogesterone acetate ）、酢酸メドロキ
シプロゲステロン（medroxyprogesterone acetate ）お
よび酢酸メゲストロール（megestrol acetate ）；卵胞
ホルモン（estrogen）類、例えば、ジエチルスチルベス
トロール（diethylstilbestrol）およびエチニルエスト
ラジオール（ethinyl estradiol ）；女性ホルモン拮抗
薬（antiestrogen）類、例えば、タモキシフェン（tamo
xifen ）；男性ホルモン（androgen）類、例えば、プロ
ピオン酸テストステロン（testosterone propionate ）
およびフルオキシメストロン（fluoxymestrone）；男性
ホルモン拮抗薬（antiandrogen）類、例えば、フルタミ
ド（flutamide ）；ならびに性腺刺激ホルモン放出ホル
モン（gonadotropin-releasing hormone）類似体類、例
えば、リュープロリド（leuprolide）が挙げられる。

【００２２】その他の薬剤の具体例としては、アントラ
センジオン類、例えば、マイトキサントロン（mitoxant
rone）；置換尿素類、例えば、ヒドロキシ尿素（hydrox
yurea ）；ならびに副腎皮質ホルモン抑制剤（adrenoco
rtical suppressant）類、例えば、マイトテイン（mito
tane）およびアミノグルテチミド（aminoglutethimide
）が挙げられる。さらに、化学療法剤は、免疫抑制
薬、例えば、シクロスポリン（cyclosporine）、アザチ
オプリン（azathioprine）、スルファサラジン（sulfas
alazine ）、メトズサレン（methozsalen ）およびサリ
ドマイド（thalidomide ）が挙げられる。

【００２３】本発明の実施に際して有用な化学療法剤
は、市販されているかまたは当該技術分野で既知である
方法により調製できる。化学療法剤を単独で、または１
種以上の化学療法剤を組み合わせて使用できる。例え
ば、３種の異なる化学療法剤と１種以上の式Ｉの化合物
（本明細書中で定義のとおり）の組み合わせを用いて、
本発明方法に従って投与することにより、癌腫瘍を治療
できる。

【００２４】

【化５】

【００２５】式Ｉの化合物では、Ｘは、水素；置換分枝
鎖もしくは直鎖ヒドロカルビル（１〜４Ｃ）、例えば、
メチル、エチル、ｓ−ブチルおよびイソプロピル；ヒド
ロキシ；アルコキシ（１〜４Ｃ）、例えば、メトキシ、
エトキシ、プロポキシおよびｔ−ブトキシ；第１級アミ
ノ（ＮＨ₂）；第２級アミノ（ＮＨＲ）（ここで、Ｒ
は、炭素原子数１〜４個のアルキルもしくはアシルであ
る，例えば、メチルアミノおよびエチルアミノ）；第３
級アミノ（ＮＲＲ）（ここで、Ｒ基は、炭素原子数１〜
４個のアルキルもしくはアシルである，例えば、ジエチ
ルアミノなど、または２つのＲが一体になってモルホリ
ノ、ピロリジノもしくはピペリジノ環を形成する）；で
ある。種々のアルキルおよびアシルＲ基の場合には、そ
れらはさらにＯＨ、ＮＨ₂、低級アルキル（１〜４Ｃ）
第２級アミノおよびジアルキル（１〜４Ｃ）第３級アミ
ノ、モルホリノ、ピロリジノ、ピペリジノ、アルコキシ
（１〜４Ｃ）もしくはハロゲン（フルオロ、クロロ、ブ
ロモもしくはヨード）置換基で置換されていてもよい。

【００２６】ヒドロカルビルＸ基は、さらにＯＨ、ＮＨ
₂、アルキル第２級アミノ、ジアルキル第３級アミノ、
アルコキシ（１〜４Ｃ）もしくはハロゲン（フルオロ、
クロロ、ブロモもしくはヨード）置換基で置換されてい
てもよい。より好ましいＸは、水素、第１級アミノ（Ｎ
Ｈ₂）、非置換分枝鎖もしくは直鎖ヒドロカルビル（１
〜４Ｃ）または置換分枝鎖もしくは直鎖ヒドロカルビル
（１〜４Ｃ）である。ｎは、０もしくは１であり、好ま
しくは１である。

【００２７】Ｙ¹およびＹ²は、独立して、水素；ニト
ロ；ハロゲン（例えば、フルオロ、クロロ、ブロモもし
くはヨード）；またはヒドロカルビル（１〜１４Ｃ）で
ある。ヒドロカルビルである場合には、Ｙ¹およびＹ²
は、置換もしくは非置換で、環式もしくは非環式であっ
てもよく、そして単一エーテル結合により任意に中断さ
れていてもよい。従って、Ｙ¹およびＹ²の非置換ヒド
ロカルビル型は、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピ
ル、ｓ−ブチル、ｎ−ヘキシル、２−メチル−ｎ−ペン
チル、２−エトキシエチル、３−（ｎ−プロポキシ）−
ｎ−プロピル、４−メトキシブチル、シクロヘキシル、
テトラヒドロフルフリル、フルフリル、シクロヘキセニ
ル、３−（ｎ−デシルオキシ）−ｎ−プロピル、４−メ
チルオクチルおよび４，７−ジメチルオクチルでありう
る。

【００２８】ヒドロカルビルＹ¹およびＹ²基は、ハロ
ゲン、例えば、フルオロ、クロロ、ブロモもしくはヨー
ド；ヒドロキシ；エポキシ；アルコキシ（１〜４Ｃ）、
例えば、メトキシ、ｎ−プロポキシおよびｔ−ブトキ
シ；アルキルチオ（１〜４Ｃ）；第１級アミノ（Ｎ
Ｈ₂）；モルホリノ；ピロリジノ；ピペリジノ；第２級
アミノ（ＮＨＲ′）（ここで、Ｒ′は、１〜４Ｃアルキ
ルである）、例えば、メチルアミノ、プロピルアミノな
ど；第３級アミノ（ＮＲ′Ｒ′）；Ｒ′ＣＯＯ−および
Ｒ′ＣＯＮＨ−でそれぞれ表されるアシルオキシおよび
アシルアミド基ならびにＲ′ＣＳＯ−およびＲ′ＣＳＮ
Ｈ−でそれぞれ表されるそれらのチオ類似体；カルボキ
シ（−Ｃ（Ｏ）ＣＨ）；アルコキシカルボニル（−Ｃ
（Ｏ）ＯＲ′）；カルバミル（−Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂）；ア
ルキルカルバミル（１〜４Ｃ）（−Ｃ（Ｏ）ＮＨ
Ｒ′）；、アルキルスルホニル（１〜４Ｃ）（Ｒ′ＳＯ
₂−）；ならびにアルキルホスホニル（１〜４Ｃ）
（Ｒ′Ｐ（ＯＲ′）Ｏ−）から選択される１〜２個の置
換基で任意に置換されうる。

【００２９】さらにヒドロカルビルＹ¹およびＹ²は、
各々独立して、−ＮＨ₂、−ＮＨＲ′、−ＮＲ′Ｒ′、
−ＯＣＯＲ′、−ＮＨ（ＣＯ）Ｒ′、−Ｏ（ＳＯ）Ｒ′
もしくは−Ｏ（ＲＯＲ′）Ｒ″（ここで、種々のＲ′基
は、低級アルキル（１〜４Ｃ）である）であってもよ
く、それら自体、ＯＨ、ＮＨ₂、アルキル第２級および
第３級アミノ、ピロリジノ、ピペリジノ、アルコキシ
（１〜４Ｃ）もしくはハロゲン置換基で置換されていて
もよい。

【００３０】より好ましくは、Ｙ¹およびＹ²が、各々
独立して、Ｈ、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボ
ニル、アルキルスルホニルもしくは−ＮＨＲ′（ここ
で、Ｒ′は、−ＣＨ₂−（ＣＨ₂）_m−ＣＨ₂−ＮＲ₁
Ｒ₂であり、Ｒ₁およびＲ₂は、独立して、水素、低級
アルキルからなる群より選択されるか、またはＲ₁およ
びＲ₂基は連結してピペリジノもしくはピロリジノ環を
形成し、そしてｍは０〜４、好ましくは１〜２の整数で
ある）である。

【００３１】本発明の使用に際して特に好ましい式Ｉの
化合物としては、１，２，４−ベンゾトリアジン１，
４−ジオキシド（式中、Ｘが水素であり、Ｙ¹およびＹ
²が各々水素であり、そしてｎが１である）；３−アミ
ノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシ
ド（即ち、チラパザミン、SR-4233 、式中、ＸがＮＨ ₂
であり、Ｙ¹およびＹ²が各々水素であり、そしてｎが
１である）；３−エチル−１，２，４−ベンゾトリアジ
ン１，４−ジオキシド（式中、Ｘがエチルであり、Ｙ
¹およびＹ²が各々水素であり、そしてｎが１であ
る）；３−プロピル−１，２，４−ベンゾトリアジン
１，４−ジオキシド（式中、Ｘがプロピルであり、Ｙ¹
およびＹ²が各々水素であり、そしてｎが１である）；
ならびに３−（１−ヒドロキシエチル）−１，２，４−
ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド（式中、Ｘが１
−ヒドロキシエチルであり、Ｙ¹およびＹ²が各々水素
であり、そしてｎが１である）が挙げられ、最も好まし
いものは３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン
１，４−ジオキシドである。

【００３２】本明細書中に定義される式Ｉの化合物の医
薬的に許容される塩としては、無機酸、例えば、塩酸、
臭化水素酸もしくはリン酸；有機酸、例えば、酢酸、ピ
ルビン酸、琥珀酸、マンデル酸およびｐ−トルエンスル
ホン酸；より形成される塩、ならびに無機塩基、例え
ば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムもしくは水酸化
カルシウムまたは有機塩基、例えば、カフェイン、エチ
ルアミンもしくはリシンより形成される塩が挙げられ
る。

【００３３】本明細書中に定義される式Ｉの化合物は、
経口的にまたは非経口的に（静脈内、皮下、筋肉内、髄
腔内、腹腔内などに）投与できる。非経口投与の場合に
は、通常化合物は、医薬的に許容される賦形剤を用いて
一回量の注射可能な剤形（水剤、懸濁剤、乳剤）に製剤
されるであろう。そのような賦形剤は、典型的には非毒
性であり、非治療用である。そのような賦形剤の具体例
としては、水、水性賦形剤、例えば、塩類、リンゲル
液、デキストロース液およびハンクス溶液ならびに非水
性賦形剤、例えば、固定油（例えば、トウモロコシ油、
綿実油、落花生油および胡麻油）、オレイン酸エチルな
らびにミリスチン酸イソプロピルが挙げられる。滅菌塩
類が好ましい賦形剤である。賦形剤は、少量の添加剤、
例えば、溶解性、等張性および化学安定性を増強する物
質、例えば、酸化防止剤、緩衝剤および保存剤を含有し
てもよい。経口投与（もしくは直腸投与）の場合には、
化合物は、通常一回量の剤形、例えば、錠剤、カプセル
剤、坐剤もしくはカシェ剤の形に製剤されるだろう。典
型的には、そのような製剤は、固形、半固形もしくは液
状の担体または希釈剤を含む。具体的な希釈剤および賦
形剤としては、乳糖、デキストロース、ショ糖、ソルビ
トール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン
酸カルシウム、鉱油、ココアバター、カカオ脂、アルギ
ネート、トラガント、ゼラチン、メチルセルロース、ポ
リオキシエチレン、モノラウリン酸ソルビタン、ヒドロ
キシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タ
ルクおよびステアリン酸マグネシウムが挙げられる。

【００３４】化学療法剤は、個々の化学療法剤に適当な
従来の経路により哺乳動物に投与される。化学療法剤お
よび本明細書中に定義される式Ｉの化合物は、本明細書
中に定義される式Ｉの化合物および化学療法剤の組み合
わせそれぞれに関して、同様の経路でまたは異なる経路
で投与できる。本明細書中に定義される式Ｉの化合物
は、単独で、または１つ以上の本明細書中に定義される
別の式Ｉの化合物と組み合わせて、哺乳動物に投与でき
る。低酸素腫瘍細胞を殺害するかまたはそれに細胞毒性
効果を与えるのに有効な量の本明細書中に定義される式
Ｉの化合物が、哺乳動物に投与される。投与される化合
物の量は、癌腫瘍の型、哺乳動物の年齢および健康状
態、化学療法剤および式Ｉの化合物の最大耐量および／
または致死量、ならびに化学療法剤と式Ｉの化合物の相
互作用のような因子に依存するであろう。この本発明の
好ましい態様では、チラパザミンが、約10mg/m²〜約 4
50mg/m²、より好ましくは約20mg/m²〜約 350mg/m²、
最も好ましくは約30mg/m²〜約 250mg/m²の量で投与さ
れる。哺乳動物に分割量の式Ｉの化合物が投与される場
合には、化合物の最大耐量および化学療法剤と化合物の
相互作用に依存して、より低い用量範囲が好ましいであ
ろう。

【００３５】感受性腫瘍を治療するのに有効な量の化学
療法剤が、哺乳動物に投与される。そのような量は当該
技術分野で周知であり、化学療法剤もしくは科学文献の
供給者により提供される生成物についての文献により確
認できる。本発明の好ましい態様では、化学療法剤およ
び式Ｉの化合物が腫瘍において相乗相互作用を有してお
り、そして化学療法剤が単独で投与されるときに有効で
あると認められる用量よりも低い用量で化学療法剤を投
与することが可能になるであろう。化学療法剤が投与さ
れる哺乳動物に化学療法剤が過酷な副作用を与える場合
には、このようなより低い用量が所望されるかもしれな
い。分割量の化学療法剤が哺乳動物に投与される場合に
は、初回量の化学療法剤が投与される前かまたは各分割
量の化学療法剤が投与される前に、２種の薬剤の組み合
わせの相乗効果が維持されるのに十分な量の本明細書中
に定義される式Ｉの化合物が哺乳動物に投与される。ま
た本発明方法は、別の型の癌治療法、例えば、放射線療
法および腫瘍の外科的除去と連結して使用することがで
きる。

【００３６】式Ｉの化合物は、化学療法剤を投与する約
１／２時間から約２４時間前に哺乳動物に投与される。
あるいは、式Ｉの化合物は、化学療法剤を投与してから
約１時間から約２時間後に哺乳動物に投与される。化学
療法剤と式Ｉの化合物の組み合わせの幾つかについて
は、本発明方法の利点を保持したまま、化学療法剤を投
与する２４時間前よりも前に式Ｉの化合物を投与するこ
とが可能であるだろう。細胞毒性における最も有利な増
強を提供する時間差は、式Ｉの化合物と化学療法剤の組
み合わせを生体内および／または生体外実験的腫瘍モデ
ル、例えば、本明細書で先に述べたものもしくはいずれ
か別の腫瘍モデルで試験することにより決定できる。次
いでそのようなモデルで決定された時間差を哺乳動物に
おける腫瘍の治療の基準として用いて、必要であれば治
療中に調節を行った。本出願人らは、チラパザミンとシ
スプラチンの組み合わせについて、シスプラチンを投与
する約１時間から３時間前の期間にチラパザミンを投与
したとき、２種の薬剤の間にかなりの相互作用が認めら
れ、シスプラチンを投与する約２．５時間前にチラパザ
ミンを投与したとき、細胞死が大幅に増大したことを見
出した。シスプラチンを投与してから１〜２時間後にチ
ラパザミンを投与したときは、細胞毒性効果の増強は認
められたが、しかしながら増強はそれほど大きくなかっ
た。本発明の幾つかの態様では、化学療法剤と同時に式
Ｉの化合物を投与することが望ましいかもしれない。

【００３７】また、本発明は、少なくとも１つの化学療
法剤および少なくとも１つの本明細書中に定義される式
Ｉの化合物を含んでなる、哺乳動物の腫瘍を治療するた
めの試験キットを提供する。本明細書中に定義される式
Ｉの化合物は、好ましくは細胞毒性増強量もしくは用量
が前記キット中に供給される。本明細書中に定義される
式Ｉの化合物の適当な剤形は、本明細書中に開示されて
いる。化学療法剤および本明細書中に定義される式Ｉの
化合物のそれぞれの剤形は、治療しようとする癌腫瘍の
型、好ましい投与経路および化学療法剤の型により決定
されるであろう。化学療法剤および本明細書中に定義さ
れる式Ｉの化合物は、好ましくは本発明方法に従って異
なる時間における化学療法剤および式Ｉの化合物の投与
を容易にする別個の容器で供給される。

【００３８】さらに本発明は、本明細書で先に定義され
る式Ｉで示される癌腫瘍における治療効果を発揮できる
化合物、もしくはその化合物の医薬的に許容される塩の
用途であって、化学療法剤でそのような腫瘍を治療する
前にそのような腫瘍を有する哺乳動物に治療的に投与す
るための医薬品の製造における用途を提供する。本発明
の実施に際して有用な式Ｉの化合物は、1992年12月29日
に発行された米国特許第 5,175,287号明細書に開示され
る方法に従って調製できる。前記明細書の開示は、引用
することにより本明細書中に組み入れられる。幾つかの
３−アミノ誘導体を調製するための一般法は、例えば、
Ley ら，米国特許第 3,980,779号明細書に見出すことが
できる。

【００３９】これらの化合物は、次式のベンゾフロキサ
ンから、シアナミドの塩と反応させ、続いて反応混合物
を酸性化することにより調製される。

【化６】ベンゾフロキサン出発物質は、その５位および６位（こ
れは、得られた３−アミノベンゾトリアジンオキシドの
６位および７位である）に関して対称ではなかった。従
って、６−および７−置換物質の混合物が得られるだろ
う。所望であれば、従来の手段を用いてこの混合物を６
位もしくは７位のいずれかに置換基を有する別個の成分
に分離することができる。

【００４０】また、過酸酸化（Robbins ら，J. Chem. S
oc. 3186 (1957) およびMason ら，J. Chem. Soc. B911
(1970) 参照）により、親の一酸化物もしくは１，２，
４−ベンゾトリアジンから、二酸化物が調製されるかも
しれない。さらに、一酸化物は、以下の方法により調製
してもよい。（１）Ｈ₂ＮＣＮ・２ＨＣｌを用いる１−ニトロ−２−
アミノベンゼン化合物の環化；（２）次式により表される親化合物の酸化；または

【化７】（３）対応する二酸化物の制御された還元（Mason, sup
ra およびWolfら，J.Am. Chem. Soc. 76:355 (1954)
を参照されたい）。

【００４１】１，２，４−ベンゾトリアジン類は、ＢＦ
₃／ＡｃＯＨを用いるホルマザン前駆体の環化（スキー
ムＩおよびAtallah およびNazer, Tetrahedron 38:1793
(1982) ）により調製してもよい。３−アミノ−１，
２，４−ベンゾトリアジン類は、親化合物の環化（スキ
ームIIおよびArndt., Chem. Ber. 3522 (1913)）または
前記のような一酸化物もしくは二酸化物の還元により調
製してもよい。３−ヒドロキシ−１，２，４−ベンゾト
リアジンオキシド類は、過酸およびタングステン酸ナト
リウムを用いて（スキームIII ）、３−ヒドロキシ−
１，４−ジオキシド化合物を製造するための新規合成方
法を用いて、または濃硫酸および亜硝酸ナトリウムを用
いて（スキームIV）調製してもよい。

【００４２】

【化８】

【００４３】

【化９】

【００４４】

【化１０】

【００４５】

【化１１】

【００４６】３位で置換されていない１，２，４−ベン
ゾトリアジンオキシド類（本明細書では時々「３−デサ
ミノ（3-desamino）化合物と称されることもある）は、
以下の方法により調製してもよい。この方法は、式Ｉの
１，２，４−ベンゾトリアジンオキシド（式中、ＸはＮ
Ｈ₂である）を還元的脱アミノ化条件下で低級アルキル
ニトリット（亜硝酸エステル）で処理することを含む。
「還元的脱アミノ化条件」とは、少なくとも約10％の、
好ましくは少なくとも約50％の所望の３−非置換反応生
成物を生じさせる反応条件を意味する。前記方法で使用
するのに好ましい低級アルキルニトリットは、亜硝酸ｔ
−ブチルである。具体的な還元的脱アミノ化条件は、相
溶性溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド中、少なくと
も約60℃の温度で、典型的には60℃〜65℃の範囲内の温
度で行う反応を含む。この反応は、一般的にはスキーム
Ｖで具体的に示される。

【００４７】

【化１２】

【００４８】

【実施例】本発明方法は、以下の実施例により例示され
るが、それらに限定されるものではない。実施例１〜１
８は、本明細書中に定義される式Ｉの化合物の合成に関
するものである。実施例１９は、チラパザミンおよびシ
スプラチンの生体外および生体内試験に関するものであ
る。

【００４９】実施例１３−ヒドロキシ−１，２，４−
ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドの調製

【化１３】

【００５０】３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジ
ン１−オキシド（１）1.50ｇ（9.25ミリモル（mmo
l））、酸 100.0mLおよび30％過酸化水素30.0mLの攪拌
した混合物を、Ｎａ₂ＷＯ₄・２Ｈ₂Ｏ（3.05ｇ，9.25
mmol）で処理した。その混合物を油浴中60℃で４日間攪
拌した。黄色がかった橙色の混合物を約30℃に冷却し、
濾過して明黄色非ＵＶ吸収性固体を除去した。酢酸中に
過酸化水素を含む橙色の溶液を、水および酢酸を数回添
加しながら注意深く蒸発させて半乾燥状態にし、ほとん
どの過酸化物を取り除いた。濃縮した溶液を室温で放置
すると、橙色の固体の収穫物を４つ、0.87ｇ（２のナト
リウム塩の収率42％）が得られた。ＵＶ：λ _max（20％
ＣＨ₃ＯＨ／Ｈ₂Ｏ）： 262.2（ε 39,460 ）； 477
（ε 7,030）。ＩＲ（neat）：3530m, 3150m, 2650m, 2
180m および1635m 。Ｃ₇Ｈ₄Ｎ₃Ｏ₃Ｎａ・1.25Ｈ₂
Ｏ（223.64）についての分析計算値（ナトリウム塩に
ついて計算した）：Ｃ，37.6；Ｈ，2.93；Ｎ，18.79 。
実験値：Ｃ，37.8；Ｈ，2.75；Ｎ，18.65 。

【００５１】

【化１４】

【００５２】実施例２３−アミノ−７−トリフルオロ
メチル−１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキシド
の調製

【化１５】

【００５３】４−クロロ−３−ニトロベンゾトリフルオ
リド（Aldrich, 2.70 ｇ，12.9mmol）およびシアナミド
２塩酸塩（2.75ｇ，24mmole ）（シアナミドのエーテル
溶液をＨＣｌガスで処理して沈殿した固体を採取するこ
とにより予め調製した）の混合物を 140℃で１時間加熱
した。残留物を２ＮＮａＯＨ（45mL）で処理し、さら
に５分間加熱し、次いで冷却した。沈殿を採取し、Ｈ₂
Ｏで洗浄し、乾燥し、そしてアセトン−トルエンを用い
て磨り潰すと、1.32ｇ（45％）の明黄色の固体（m.p. 3
01〜302 ℃）として３が得られた。ＴＬＣＲ_f0.60
（塩化メチレン：メタノール９：１，シリカゲルプレ
ート上）。ＭＳ：m/z （相対強度（relative intensit
y）） 230（ 100, Ｍ⁺）。

【００５４】実施例３３−アミノ−７−デシル−１，
２，４−ベンゾトリアジンの調製

【化１６】

【００５５】４−（１−デシル）−２−ニトロアニリン
の調製：無水酢酸（ 400mL）を、30分間かけてヘキサン
（2.4L）中に４−デシルアニリン（Aldrich, 80 ｇ, 0.
34モル（mole））を含む攪拌した溶液に添加した。１時
間攪拌した後、混合物を冷却し、そして30分間５〜10℃
で、70％亜硝酸（34mL）で処理した。５〜10℃で１時間
攪拌を続け、そして25℃で16時間攪拌を続けた。混合物
をＨ₂Ｏ（1L）で希釈し、５時間攪拌し、開放皿に注ぎ
入れ、そして16時間放置した。さらにＨ₂Ｏ（1.5L）で
希釈した後、固体を採取し、そして85％エタノール溶液
（水溶液）から再結晶すると、92ｇ（84％）の中間体が
橙色の固体，m.p.64℃，として得られた。

【００５６】85％ＫＯＨ（19ｇ， 0.288mole）の水溶液
（ 100mL）を、メタノール（ 900mL）中に先に調製した
４−（１−デシル）−２−ニトロアニリン（89ｇ，0.28
mole）を含む懸濁液と合わせた。混合物を６時間攪拌
し、濃ＨＣｌでpH７〜８に中和し、そしてほぼ乾燥状態
になるまで真空中で蒸発させた。Ｈ₂Ｏ（ 400mL）で希
釈した後、固体を採取し、そして風乾すると、77ｇ（ 1
00％）の中間体が橙色固体，m.p.59℃として得られた。
シアナミド塩酸塩 1.0ｇ（ 8.7mmole ）（使用するため
に、シアナミドの溶液をＨＣｌガスで処理して沈殿した
固体を採取することにより予め調製した）を、前工程で
調製した４−（１−デシル）−２−ニトロアニリン（ 5
00mg， 1.8mmole ）の予め加熱した溶融体（ 190℃）
に、10分間かけて少しずつ添加した。反応混合物を 190
℃で５分間加熱し、25℃に冷却し、６ＮＫＯＨ（10m
L）で処理し、そして90〜95℃で１時間加熱した。25℃
に冷却した後、固体を採取し、Ｈ₂Ｏおよびエタノール
で洗浄し、そして風乾すると、0.25ｇ（46％）の化合物
４が明黄色固体，m.p. 177℃（分解）として得られた。
ＭＳ：m/z （相対強度） 285（100, Ｍ⁺）, 302 (1
3)。

【００５７】実施例４３−アミノ−７−カルバミル−
１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキシドの調製

【化１７】

【００５８】４−クロロ−３−ニトロベンズアミドの調
製：20.2ｇ（ 0.1mole）の４−クロロ−３−ニトロ安息
香酸（Aldrich ）および塩化チオニル（20mL）を合わせ
て16時間放置し、そして４時間還流すると透明な赤色溶
液が得られた。その溶液を真空中で蒸発させ、そしてベ
ンゼンと共に共沸させた。残渣をアセトニトリル（20m
L）に溶解し、そして30分間かけて冷（−10℃）濃水酸
化アンモニウム（ 100mL）に添加した。−10℃で３時間
放置し、そして25℃で16時間放置した後、混合物を開放
皿に注ぎ入れ、そして乾燥状態になるまで蒸発させた。
残渣をＨ₂Ｏ中でスラリーにし、そして固体を採取して
風乾すると、19.8ｇ（98％）の中間体が明黄色固体，m.
p. 153℃として得られた。

【００５９】エタノール（75mL）中にＮａ（3.45ｇ，0.
15mole）を含む溶液を、エタノール（75mL）中にグアニ
ジン塩酸塩（15.8ｇ， 0.165mole）を含む溶液に添加し
た。１時間後、混合物を濾過し、そしてエタノール（50
mL）中に先に調製した４−クロロ−３−ニトロベンズア
ミド（10ｇ，0.05mole）を含む懸濁液と濾液を合わせ
た。混合物を攪拌し、そして16時間還流し、０〜５℃に
冷却し、濃ＨＣｌ（８mL）で酸性化した。採取した固体
をＫ₂ＣＯ₃（28ｇ， 0.2mole）およびＨ₂Ｏ（40mL）
と合わせ、そして混合物を 100℃で８時間加熱攪拌し
た。25℃に冷却した後、固体を採取し、Ｈ₂Ｏで洗浄
し、そして風乾した。固体を沸騰酢酸エチル中で懸濁
し、採取し、そして熱酢酸エチルで洗浄した。固体を繰
り返し沸騰ジオキサン中に懸濁し、そして採取した（６
× 100mL）。合わせた濾液を真空中で蒸発させて固体を
得た。固体を95％エタノール中に懸濁し、採取し、そし
て風乾すると、0.44ｇ（ 4.3％）の化合物５が明黄色固
体，m.p. 300℃として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f＝0.23
（塩化メチレン：アセトン２：１，シリカゲルプレー
ト）。ＭＳ：m/z （相対強度） 205（ 100, Ｍ⁺）。

【００６０】実施例５７−アセチル−３−アミノ−
１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキシドオキシ
ムの調製

【化１８】

【００６１】７−アセチル−３−アミノ−１，２，４−
ベンゾトリアジン１−オキシド（実施例５で調製；50
mg，0.25mmole ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（ 200m
g，2.88mmole ）、ピリジン（１mL）およびエタノール
（１mL）を合わせた混合物を、90〜95℃で１時間加熱
し、次いで25℃に冷却した。混合物を95％エタノール
（５mL）で希釈し、そして固体を採取し、そして風乾す
ると、30mg（56％）の化合物６が明黄色固体，m.p. 278
℃（分解）として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f＝0.60（塩化
メチレン：メタノール９：１）。ＭＳ：m/z （相対強
度） 219（ 100, Ｍ⁺）。

【００６２】実施例６３−アミノ−６（７）−デシル
−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドの
調製

【化１９】

【００６３】５−（１−デシル）−ベンゾフロキサン：
４−（１−デシル）−２−ニトロアニリン（77ｇ，0.28
モル）、5.25％ＮａＯＣｌ水溶液（ 476ｇ，0.34mol
e）、85％ＫＯＨ（20.3ｇ，0.31モル）、ｎＢｕ₄ＮＨ
ＳＯ₄（ 4.7ｇ， 0.014mole）およびＣＨ₂Ｃｌ₂（2.
28 L）を合わせた混合物を６時間急速に攪拌し、そして
Ｈ ₂Ｏ（ 500mL）およびＣＨ₂Ｃｌ₂（１L ）で希釈し
た。分離した有機相を１ＮＨＣｌ（１L ）およびブライ
ン（２×１L ）で続けて洗浄し、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）
し、そして真空中で濃縮すると、赤色油状物，70ｇ（92
％）が得られた。上記のように調製した５−（１−デシ
ル）−ベンゾフロキサン（10ｇ， 0.036mole）およびベ
ンジルトリエチルアンモニウムクロリド（0.36ｇ，0.00
16mole）をＤＭＳＯ（ 180mL）中に含む溶液を、数時間
かけてシアナミド（13.0ｇ，0.31mole）およびＫ₂ＣＯ
₃（36.8ｇ，0.27mole）で徐々に（gradually ）処理し
た。混合物を48時間攪拌し、そして濾過した。濾液をＨ
₂Ｏ（６L ）および氷酢酸（40mL）で希釈し、そしてＣ
Ｈ₂Ｃｌ₂（４× 500mL）で抽出した。合わせた有機溶
液を５％ＮａＨＣＯ₃溶液（１× 500mL）およびブライ
ン（２× 500mL）で続けて洗浄し、乾燥（Ｎａ₂Ｓ
Ｏ₄）し、そして真空中で蒸発させて乾燥状態にした。
ＣＨ₂Ｃｌ₂：メタノール（98.2）を用いてシリカゲル
でのクロマトグラフィーにより粗生成物を精製すると、
1.8ｇ（16％）の化合物７が赤色固体，m.p. 155℃（分
解）として得られた。ＭＳ：m/z （相対強度） 318（
4, Ｍ⁺），285（ 100）。

【００６４】実施例７１，２，４−ベンゾトリアジン
ジオキシドの調製

【化２０】

【００６５】1.80ｇ（ 13.73mmole ）の90％Ｈ₂Ｏ
₂（９mL）、無水トリフルオロ酢酸（13.5mL）およびＮ
ａ₂ＷＯ₄・２Ｈ₂Ｏ（ 12.50ｇ，38mmole ）をＣＨＣ
ｌ₃（ 170mL）中に含む混合物を、室温で５日間攪拌し
た。反応混合物をＨ₂Ｏ（ 100mL）で希釈し、そしてＣ
ＨＣｌ₃（ 100mL）で抽出した。有機相をＨ₂Ｏ（50m
L）で洗浄し、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、そして真空中
で溶媒を除去した。ＥｔＯＡｃ：ＣＨ₂Ｃｌ₂（１：
１）を用いたシリカゲルでのクロマトグラフィーに残渣
をかけると、0.30ｇ（13.4％）の化合物９が黄色油状
物，m.p. 204〜205 ℃として得られた。Ｃ₇Ｈ₅Ｎ₃Ｏ
₂（163.13）についての分析計算値：Ｃ，51.5；Ｈ，
3.09；Ｎ，25.76 。実験値：Ｃ，51.6；Ｈ，3.36；Ｎ，
26.01 。ＭＳ：m/z（相対強度） 163（ 100, Ｍ⁺），
147（50）。ＴＬＣ：Ｒ_f＝0.27（ＥｔＯＡｃ：ＣＨ₂
Ｃｌ₂１：１，シリカゲルプレート）。ＩＲ（nujol
）：1600μ，1460μ，1300μ、ＵＶ：λ_max（Ｈ
₂Ｏ）： 227（ε 22,900 ）； 252（ε12,950）：392
（ε 4,080）。

【００６６】実施例８７−クロロ−３−ヒドロキシ−
１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドの
調製

【化２１】

【００６７】酢酸 100mL中に1.50ｇ（7.63mmole ）の10
を含む混合物を、2.52ｇ（7.63mmole ）のＮａ₂ＷＯ₄
・２Ｈ₂Ｏおよび30mLの30％Ｈ₂Ｏ₂で処理した。混合
物を50℃で６日間加熱攪拌し、次いでゆっくりと蒸発さ
せて乾燥状態にしてＨ₂Ｏ₂を除去した。残渣をＨ₂Ｏ
（ 250mL）中で沸騰させ、そして濾過して約25mgの出発
物質10を除去した。次いで水性溶液を 250mLずつの酢酸
エチルで２回抽出した。暗赤色結晶物質（これは、ＴＬ
Ｃおよび質量分析により12と確認された）が上記分配混
合物中に形成し、そしてそれを濾取すると、60.0mgの黄
色がかった橙色の固体（収率 3.7％）（以下のように12
として確認された）が得られ、それは熱イソプロピルア
ルコールおよび水の混合物への良好な溶解性を示した。
質量分析：Ｍ⁺＝212 (q＝100)（化合物10）；ＴＬＣ：
Ｒ_f＝0.34（アセトン，シリカゲルプレート）。

【００６８】12を濾過により除去した後にＨ₂Ｏ層から
分離した前記酢酸エチル溶液を、蒸発させて乾燥状態に
した。次いで残渣を室温でイソプロピルアルコールで処
理すると、曇った橙色の固体，0.41ｇ（収率25％）とし
て11が得られた。質量分析：Ｍ⁺＝213 (q＝70) ；ＴＬ
Ｃ：Ｒ_f＝0.22（アセトン，シリカゲルプレート）。化
合物11を、次のとおり、アンモニウム塩，Ｃ₇Ｈ₄Ｃｌ
Ｎ₃Ｏ₃ＮＨ₃，m.w.230.61 として確認した。遊離酸1
1を濃ＮＨ₄ＯＨに溶解し、次いで氷中で冷却し、そし
て痕跡量の不溶性12をを除去した。赤色濾液および洗浄
液を蒸発させて乾燥状態にすると、赤みがかった橙色の
固体が残った。その固体を50mLの沸騰した１，２−ジメ
トキシエタンで処理してフィルター上に採取し、そして
さらに25mLの１，２−ジメチルエーテルで洗浄した。固
体をＰ₂Ｏ₅上、56℃，1 ／1.0mm で乾燥すると、 0.2
44ｇ（87％）の13が残った。

【００６９】

【化２２】

【００７０】Ｃ₇Ｈ₄ＣｌＮ₃Ｏ₃ＮＨ₃（230.61）に
ついての分析計算値：Ｃ，36.5；Ｈ，3.06；Ｎ，24.3
0 。実験値：Ｃ，36.5；Ｈ，3.07；Ｎ，23.94 。ＵＶ：
λ_max（Ｈ₂Ｏ）： 219（ε 12,580 ）； 265.4（ε40,
000）：4830486 （ε 6,640）。

【００７１】実施例９７−ニトロ−３−アミノ−１，
２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドの調製

【化２３】

【００７２】７−ニトロ−３−トリフルオロアセトアミ
ド−１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキシド（1
5）：７−ニトロ−３−アミノ−１，２，４−ベンゾト
リアジン１−オキシド（14）（4.00ｇ，19.3mmole ；
Parish Chemical Co. ）、ＣＨＣｌ₃（ 125mL）および
無水トリフルオロ酢酸（12.0mL，85.0mmole ）の溶液
を、室温で44時間攪拌した。得られた明黄色固体を濾過
し、ＣＨＣｌ₃（50mL）で洗浄し、そして乾燥すると、
5.35ｇ（収率91％）の生成物が黄色固体として得られ
た。Ｃ₉Ｈ₄Ｆ₃Ｎ₅Ｏ₄についての分析計算値：
Ｃ，35.7；Ｈ，1.33；Ｎ，23.10 。実験値：Ｃ，35.7；
Ｈ，1.23；Ｎ，23.06 。

【００７３】７−ニトロ−３−アミノ−１，２，４−ベ
ンゾトリアジン１，４−ジオキシド（16）：先に調製
した７−ニトロ−３−トリフルオロアセトアミド−１，
２，４−ベンゾトリアジン１−オキシド（15）（2.50
ｇ，8.25mmole ）をＣＨＣｌ ₃（ 200mL）中に含む攪拌
した溶液に、Ｎａ₂ＷＯ₄・２Ｈ₂Ｏ（90mg， 0.273mm
ole ）を添加し、続いて70％Ｈ₂Ｏ₂（10mL）を添加し
た。15分後、溶液を無水トリフルオロ酢酸（ 8.0mL，5
6.7mmole ）で処理し、そして室温で64時間攪拌を続け
た。反応混合物をクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ，20
％ＭｅＯＨ／アセトン，そして最後に20％ＤＭＦ／アセ
トン）にかけ、次いでアセトンから再結晶すると、1.20
ｇ（収率65％）の生成物（16）が橙色の固体，m.p. 286
〜288 ℃（分解）として得られた。ＵＶ：λ_max 259,
300, 345, 387, 472。Ｃ₇Ｈ₅Ｎ₅Ｏ₄についての分析
計算値：Ｃ，37.70 ；Ｈ，2.26；Ｎ，31.39 。実験
値：Ｃ，37.70 Ｈ，2.13；Ｎ，30.94 。

【００７４】実施例１０３−（３−Ｎ，Ｎ−ジエチル
アミノプロピルアミノ）−１，２，４−ベンゾトリアジ
ン１，４−ジオキシドの調製

【化２４】

【００７５】３−（３−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノプロピ
ルアミノ）−１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキ
シド（18）：３−クロロ−１，２，４−ベンゾトリアジ
ン１−オキシド（17）（ 3.0ｇ，16.5mmole ）（Sasse
ら，米国特許第 4,289,771号明細書の方法により製造）
をＣＨ₂Ｃｌ₂（ 100mL）中に含む溶液を、Ｎ，Ｎ−ジ
エチルアミノプロピルアミン（ 9.5mL，88.3mmole ）で
処理した。室温で20時間放置した後、混合物を１，２−
ジクロロエタン（50mL）で希釈し、Ｎａ₂ＣＯ₃および
Ｈ₂Ｏで続けて洗浄した。黄色溶液を乾燥（Ｎａ₂ＳＯ
₄）し、濾過し、そして真空中で蒸発させると、3.93ｇ
（収率87％）の生成物が黄色固体として得られた。再結
晶（エーテル／石油エーテル）すると、純粋な物質，m.
p.47〜48℃が得られた。Ｃ₁₄Ｈ₂₁Ｎ₅Ｏ（18）について
の分析計算値：Ｃ，61.10 ；Ｈ，7.69；Ｎ，25.44 。
実験値：Ｃ，61.30 Ｈ，7.80；Ｎ，25.61 。

【００７６】３−（３−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノプロピ
ルアミノ）−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−
ジオキシド（18a ）：先に調製した３−（３−Ｎ，Ｎ−
ジエチルアミノプロピルアミノ）−１，２，４−ベンゾ
トリアジン１−オキシド（18）（1.60ｇ，6.10mmole
）をＣＨＣｌ₃（50mL）中に含む攪拌した溶液に、無
水トリフルオロ酢酸（22.0mL）を添加した。15分後、混
合物を−10℃まで冷却し、70％Ｈ₂Ｏ₂（10mL）を添加
し、次いで室温で20日間攪拌した。反応混合物を乾燥
（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾過し、そして蒸発させて乾燥状
態にした。残渣を飽和ＮａＨＣＯ₃溶液（50mL）に溶解
し、そしてＣＨ₂Ｃｌ₂（３× 150mL）で抽出した。有
機層を乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾過し、そして蒸発さ
せると、生成物(18a）0.51ｇ（収率29％）が赤色固体，
m.p.92〜94℃として得られた。ＮＭＲ：δ（ 400ＭＨ
ｚ，ＣＤＣｌ₃）1.11（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝7.1 Ｈｚ，ＣＨ
₃），1.84〜1.90（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２′），2.48〜2.64
（４Ｈ，ｍ，ＮＣＨ₂ＣＨ₃，およびＨ−３′），3.68
（２Ｈ，br t, Ｊ＝5.5 Ｈｚ，Ｈ−１′），7.46（１
Ｈ，ddd,Ｊ＝7.1, 7.0および 1.2Ｈｚ，Ｈ−６），7.8
4，ddd,Ｊ＝7.0, 6.9および 1.2Ｈｚ，Ｈ−７），8.31
（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５および８），8.80（１Ｈ，br s, Ｎ
Ｈ）、ＵＶ：λ_max 220, 270, 476。Ｃ₁₄Ｈ₂₁Ｎ₅Ｏ₂
（１／３Ｈ₂Ｏ）についての分析計算値：Ｃ，56.50
；Ｈ，7.34；Ｎ，23.55 。実験値：Ｃ，56.90 Ｈ，7.1
5；Ｎ，23.40 。

【００７７】実施例１１７−ニトロ−３−（２−Ｎ，
Ｎ−ジエチルアミノエチルアミノ）−１，２，４−ベン
ゾトリアジン１，４−ジオキシドの調製

【化２５】

【００７８】

【化２６】

【００７９】７−ニトロ−３−（２−Ｎ，Ｎ−ジエチル
アミノエチルアミノ）−１，２，４−ベンゾトリアジン
１−オキシド塩酸塩（20）：７−ニトロ−３−クロロ
−１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキシド（19）
（1.60ｇ，7.06mmole ）（Sasse ら，米国特許第 4,28
9,771号明細書に大体示されているように、（ａ）Ｎａ
ＮＯ₂およびＨ₂ＳＯ₄を40℃で用いて、続いて（ｂ）
ＰＯＣｌ₃を用いて 106℃で塩素化して製造した）をＣ
Ｈ₂Ｃｌ₂（50mL）中に含む溶液を、Ｎ，Ｎ−ジエチル
エチレンジアミン（ 6.0mL，42.7mmole ）で処理した。
室温で６時間放置した後、混合物を高真空下60℃で乾燥
状態になるまで蒸発させた。黄色固体を20％ｉＰｒＯＨ
／エーテル（ 150mL）中に添加して５時間攪拌し、濾過
し、ｉＰｒＯＨで洗浄し、次いで石油エーテルで洗浄
し、そして乾燥（80℃／ 1.0mmHg）すると、1.80ｇ（収
率74％）の生成物（20）が黄色針状結晶として得られ
た。ＮＭＲ：δ（90ＭＨｚ，ｄ₆−ＤＭＳＯ／ｄ₄−Ｍ
ｅＯＨ）1.25（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝6.0 Ｈｚ，ＣＨ₃），3.
25（６Ｈ，ｍ，ＮＣＨ₂），3.82（２Ｈ，ｍ，Ｈ−
１′），7.74（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝7.0 Ｈｚ，Ｈ−５），8.
25（１Ｈ，dd，Ｊ＝7.0 および2.0 Ｈｚ，Ｈ−６），8.
91（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝2.0 Ｈｚ，Ｈ−８）。

【００８０】７−ニトロ−３−（２−Ｎ，Ｎ−ジエチル
アミノエチルアミノ）−１，２，４−ベンゾトリアジン
１，４−ジオキシド塩酸塩（21）：７−ニトロ−３−
（２−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノエチルアミノ）−１，
２，４−ベンゾトリアジン１−オキシド（20；上記の
ように調製した）（0.50ｇ，1.46mmole ）をＣＨＣｌ₃
（50mL）中に含む０℃で攪拌した溶液に、無水トリフル
オロ酢酸（ 9.0mL）を添加した。30分後、70％Ｈ₂Ｏ₂
（ 4.0mL）を添加し、混合物を室温で３日間攪拌し、次
いで乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾過し、そして真空中で
蒸発させて乾燥状態にすると、トリフルオロ酢酸塩0.67
ｇ（収率45％）が得られた。この生成物を飽和ＮａＨＣ
Ｏ₃溶液（30mL）に溶解し、そしてＣＨ₂Ｃｌ₂（３×
30mL）で抽出した。ジクロロメタンをＨ₂Ｏで洗浄し、
乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾過し、ＨＣｌガスで飽和さ
せ、そして蒸発させて乾燥状態にすると、0.35ｇ（収率
63％，全収率28％）の生成物を赤色固体，m.p. 194〜19
5 ℃として得られた。ＵＶ：λ_max 260, 306, 388, 47
9 。Ｃ₁₃Ｈ₁₈Ｎ₆Ｏ₄ＨＣｌについての分析計算値：
Ｃ，43.50 ；Ｈ，5.34；Ｎ，23.43 。実験値：Ｃ，43.2
0 Ｈ，5.37；Ｎ，23.11 。

【００８１】以下の実施例１２〜１５は、３位で置換さ
れていない式（Ｉ）の化合物、即ち、置換基「Ｘ」が水
素である式（Ｉ）の化合物を製造する際の還元的脱アミ
ノ化反応に向けられている。実施例１２３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジ
ン１，４−ジオキシドの還元的脱アミノ化による１，
２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドの調製

【化２７】

【００８２】亜硝酸ｔ−ブチル（ 867mg， 1.0mL，8.41
mmole ）をＤＭＦ（20mL）中に含む60〜65℃で急速に攪
拌した溶液に、３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリア
ジン１，４−ジオキシド（「SR 4233 」）（ 500mg，2.
81mmole ）（Sengら，Anqew. Chem. Internat. Edit. 1
1 (1972)の方法により調製した）を少しずつ５分間かけ
て添加した。添加および同時に生じた発泡が鎮静してか
ら（約５分間）、溶液を採取し、そして高真空下で濃縮
すると、暗色蝋状固体が得られた。フラッシュ・クロマ
トグラフィー（30％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂）にかけ
ると、黄色固体，m.p. 188〜189.5 ℃（分解）が得ら
れ、それをエタノールから再結晶すると195mg（収率43
％）の生成物９が明黄色小板，m.p. 192〜194 ℃（分
解）として得られた。ＮＭＲ：（ 400ＭＨｚ，ｄ₆−ア
セトン）8.04（１Ｈ， ddd，Ｊ＝8.5, 7, 1.5 Ｈｚ），
8.15（１Ｈ， ddd，Ｊ＝8.5, 7, 1.5 Ｈｚ），8.42（１
Ｈ，dd，Ｊ＝8.5,1.5 Ｈｚ），8.43（１Ｈ，dd，Ｊ＝8.
5,1.5 Ｈｚ），9.05（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３）。ＵＶ：λ
_max 405, 300, 225。ＭＳ：m/z （相対強度） 147(1
3), 136(19),（相対強度） 164(9), 163（ 100,
Ｍ⁺）， 147（13), 136(19), 90(7), 78(27), 76(26),
75(8), 64(9), 63(10), 52(12), 51(48), 50(28), 38
(8), 37(5), 30(18), 28(6), 27(7) 。Ｃ₇Ｈ₅Ｎ₃Ｏ
₂についての分析計算値：Ｃ，51.54 ；Ｈ，3.09；
Ｎ，25.76 。実験値：Ｃ，51.42 Ｈ，3.02；Ｎ，25.6
6。

【００８３】実施例１３還元的脱アミノ化を経る７−
アリルオキシ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４
−ジオキシドの調製

【化２８】

【００８４】７−アリルオキシ−１，２，４−ベンゾト
リアジン１，４−ジオキシド（24）：亜硝酸ｔ−ブチ
ル（ 271mg， 0.312mL，2.63mmole ）をＤＭＦ（15mL）
中に含む60〜65℃で攪拌した溶液に、７−アリルオキシ
−３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４
−ジオキシド（23）（ 205mg， 0.875mmole ）を少しず
つ５分間かけて添加した。30分後、さらに亜硝酸ｔ−ブ
チル（ 271mg， 0.312mL，2.63mmole ）を添加すると、
そのすぐ後に濃赤色の溶液が発泡し、そして数分間の間
に色彩がはっきりと相当明るくなった。さらに30分後、
得られた橙色溶液を真空下で濃縮すると褐色固体が得ら
れ、続いてそれをフラッシュ・クロマトグラフィー（10
％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂）にかけ、そして結晶化
（ＣＨ₂Ｃｌ₂／石油エーテル）すると、72mg（収率38
％）の生成物（24）が明橙色結晶，m.p. 147〜148 ℃と
して得られた。

【外１】ＵＶ：λ_max 425, 410, 365, 355, 320, 245, 200。Ｍ
Ｓ：m/z （相対強度） 220(4), 219（34, Ｍ⁺）， 103
(4), 77(4), 75(4), 63(13), 62(4), 42(3), 41(100),
39(16)。Ｃ₁₀Ｈ₉Ｎ₃Ｏ₃についての分析計算値：
Ｃ，54.79 ；Ｈ，4.14；Ｎ，19.17 。実験値：Ｃ，54.7
3 Ｈ，4.16；Ｎ，19.15 。

【００８５】実施例１４還元的脱アミノ化を経る７−
（３−Ｎ−エチルアセトアミド−２−アセトキシプロポ
キシ）−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオ
キシドの調製

【化２９】

【００８６】亜硝酸ｔ−ブチル（9185mg，1.79mmole ）
をＤＭＦ（５mL）中に含む60℃で攪拌した溶液に、７−
（３−Ｎ−エチルアセトアミド−２−アセトキシプロポ
キシ）−３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン
１，４−ジオキシド（25）（125mg， 0.329mmole ）を
ＤＭＦ（５mL）中に含む溶液をシリンジを介して１分間
かけて添加した。５分後、さらに亜硝酸ｔ−ブチル（ 2
17mg，2.10mmole ）を添加すると、ガスの発生により証
明されるように即座に反応が起こり、そして溶液の色が
赤色から明橙色に変化した。さらに10分後、溶液をスト
リッピングして黄色／褐色固体を得て、そしてシリカゲ
ルを介して５％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂で溶出させ、Ｃ
Ｈ₂Ｃｌ₂／リグロインで溶出させると、90mg（収率75
％）の黄色固体，m.p. 179〜180.5 ℃が得られた。ＮＭ
Ｒ：δ（ 400ＭＨｚ，ｄ₄−メタノール，ロタマー（ro
tamer)の混合物，比率約２：１）1.12, 1.22（t's,１：
２，３Ｈ total, Ｊ＝７Ｈｚ），2.0-6, 2.07 （s's,
２：１，３Ｈ total），2.11, 4.34-4.48 （ｍ，２
Ｈ），5.48-5.58 （ｍ，１Ｈ），7.76-7.86 （ｍ，２
Ｈ），8.36-8.42 （ｍ，１Ｈ），9.04, 9.06 （s's,
２：１，１Ｈ total）。ＵＶ：λ_max 420, 405, 365,
350, 315, 240, 200。ＭＳ：m/z （相対強度） 365(0.
5), 364（1.4,Ｍ⁺）， 349(0.5), 348(1.1), 347(0.
5), 332(1.2), 331(3.6), 187(7), 186(66), 102(6), 1
00(21), 84(30), 63(6), 58(100), 56(8), 43(65), 42
(9), 41(9), 41(5), 30(14), 29(5), 28(8) 。

【００８７】実施例１５還元的脱アミノ化を経る７−
ニトロ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオ
キシドの調製

【化３０】

【００８８】亜硝酸ｔ−ブチル（ 988mg，0.85mmole ）
をＤＭＦ（５mL）中に含む60℃で攪拌した溶液に、７−
ニトロ−３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン
１，４−ジオキシド（14）（38mg，0.17mmole ）を添加
した。30分後、さらに亜硝酸ｔ−ブチル（ 175mg，1.70
mmole ）を暗赤色のスラリーに添加すると、即座に色が
変化し発泡した。さらに10分後、橙色溶液を真空下で濃
縮すると赤色固体が得られ、それを１％ＡｃＯＨ／ＣＨ
₂Ｃｌ₂を用いてクロマトグラフィーにかけると、３mg
の生成物（27）が黄色固体（収率10％）として得られ
た。ＮＭＲ：δ（90ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチルスルホキシ
ド）7.68（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝9.2 Ｈｚ），7.92（dd，１
Ｈ，Ｊ＝9.2, 2.2Ｈｚ），8.10（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝2.2 Ｈ
ｚ），8.65（ｓ，１Ｈ）。ＵＶ：λ_max 420, 310, 24
0, 205 。ＭＳ：m/z （相対強度） 209(9), 208(100,
Ｍ⁺）， 192(54), 181(14), 162(16), 105(9), 77(2
8), 75(52), 74(27), 63(21), 62(16), 30(77), 18(2
6)。

【００８９】実施例１６３−エチル−１，２，４−ベ
ンゼントリアジン１，４−ジオキシド（31)

【化３１】

【００９０】プロピオンアルデヒドおよびフェニルヒド
ラジンの縮合により形成されたヒドラゾン（28）を、酢
酸、亜硝酸ナトリウムおよびＨＣｌの混合物中でベンゼ
ンジアゾニウムクロリドと反応させると、ホルマザン
（29）が得られた。ＢＦ₃−ＡｃＯＨ（三フッ化ホウ素
−酢酸）を用いて90〜95℃で環化すると、３−エチル−
１，２，４−ベンゼントリアジン（30）が油状物として
得られ、それを蒸留により精製した。70％過酸化水素お
よびＣＨ₂Ｃｌ₂中の無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ
Ａ）で酸化すると、３−エチル−１，２，４−ベンゼン
トリアジン１，４−ジオキシド（31) が得られた。タ
イトルの化合物（31) を、順相カラムクロマトグラフィ
ーおよび水性エタノールからの再結晶により精製する
と、純度99.8％の物質が得られた。31の融点（m.p.）は
141〜142 ℃であった。

【００９１】実施例１７３−プロピル−１，２，４−
ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド（32) ベンゼンジアゾニウムとの反応に、プロピオンアルデヒ
ドおよびフェニルヒドラジンの縮合により形成されたヒ
ドラゾンを用いる代わりにブチルアルデヒドおよびフェ
ニルヒドラジンの縮合により形成されたヒドラゾンを用
いたことを除いて、実施例１６の方法（３−エチル−
１，２，４−ベンゼントリアジン１，４−ジオキシド
の調製）に従って、３−プロピル−１，２，４−ベンゾ
トリアジン１，４−ジオキシド（32) を調製して精製し
た。32の融点（m.p.）は 114〜116 ℃であった。

【００９２】実施例１８３−（１−ヒドロキシエチ
ル）−１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキシド

【化３２】

【００９３】パラジウムII触媒作用（酢酸ＰｄII）を用
いて封管中 100℃で48時間、アセトニトリル、トリトル
イルホスゲンおよびトリエチルアミンの混合物中で、３
−クロロ−１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキシ
ドをわずかに過剰のトリ−Ｎ−ブチルビニルチンで処理
した。溶媒を除去し、そしてカラムクロマトグラフィー
により精製すると、３−ビニル−１，２，４−ベンゾト
リアジン１−オキシド（33) が得られた。９−ボラビ
シクロ〔３．３．１〕ノナン（９−ＢＢＮ）で還元し、
続いて水酸化ナトリウムおよび過酸化水素で酸化する
と、タイトルの化合物３−（１−ヒドロキシエチル）−
１，２，４−ベンゾトリアジン１−オキシド（34) が
得られた。

【００９４】実施例１９チラパザミンおよびシスプラチンを生体内ＲＩＦ−１腫
瘍モデルで試験した。また、チラパザミンおよびシスプ
ラチンを、低酸素および有酸素（aerobic)条件下のＲＩ
Ｆ−１細胞を用いて生体外アッセイで試験した。動物および腫瘍：以前に発行されたプロトコール（Twen
tyman, supra) に従って、一定のフローラ（叢，flora
）条件下で生育したＣ３Ｈ／Ｋｍマウス（Stanford Un
iversity Medical SchoolのRadiation Biology Divisio
nで繁殖および継代されている）におけるＲＩＦ−１線
維肉腫（Dr. Martin Brownの研究所で発見され継代（ma
intain) されている, 放射腫瘍学部門（Department of
RadiationOncology), Stanford University, Stanford,
CA; Twentyman ら，J. Nat'l Cancer Inst. 64: 595-6
04)を、交代に生体内および生体外で継代した。腫瘍細
胞単層を、15％ウシ胎児血清を補足したウエイマウス培
地（Waymouth's medium ）で生育し、それを0.05％トリ
プシンで採収した。この懸濁液から、培地0.05mL中に２
×10⁵個の細胞（cell）をそれぞれのマウスの背中の尾
の約２cm上部の皮内に接種した。２週間後に実験を開始
したときは、平均腫瘍体積が約 200mm³であった。

【００９５】薬剤：チラパザミン（SR 4233 ）は、Ster
ling Drug Inc. (New York）より入手した。動物実験で
は、薬剤を正常食塩水に１mg/mL の濃度で溶解して、薬
剤を体重１kgあたりのmmole 量（mmole/kg）を基準とし
て腹腔内（i.p.）注射した。Bristol Laboratories (Pr
inceton, New Jersey)からのシスプラチン（c-DDP ）を
滅菌水に溶解し、そして体重１グラムあたり0.01mLの濃
度（0.01mL/gm ）でi.p.注射した。細胞生存率：動物実験では、生体内／生体外切除アッセ
イに従ってＲＩＦ−１細胞生存率を評価した。この実験
の終了期頃に、シスプラチン治療の24時間後にマウスを
殺害し、腫瘍を摘出（切除）し、細かく切り刻み（ミン
スし）、そして酵素カクテル（Twentyman, supra) を用
いて解離させ、そしてクローン生成アッセイのために細
胞を培養した。得られた腫瘍細胞コロニーをクリスタル
バイオレットで染色し、そして37℃、５％ＣＯ₂湿潤雰
囲気下で２週間インキュベーションした後カウントし
た。培養効率、ならびに同時にアッセイした対照の治療
していない腫瘍についての腫瘍細胞収量に相対的な治療
した腫瘍についての腫瘍細胞収量の結果として腫瘍あた
りの相対クローン生成細胞を計算した。

【００９６】生体外での細胞を用いた実験では、15％ウ
シ胎児血清を補足したウエイマウス培地中ペトリ皿あた
り２×10⁴cellの濃度で、ＲＩＦ−１細胞を60mmガラス
ペトリ皿にまいた。４〜５日後に実験を行った。処理
（治療）時にはペトリ皿あたり約10⁶cellであった。次
いで生育培地（growth medium)を、２または４μg/mLの
濃度でチラパザミンを含有する血清を含まない培地２mL
に取り替えた。各実験には、チラパザミンおよびシスプ
ラチンでの処理を両方とも同時に行った群と、２種の薬
剤の処理時の間に間隔をあけた群を含めた。これらの群
でチラパザミンに対して暴露した直後の間には、細胞を
２回すすいで（リンスして）、培地を第２処理（シスプ
ラチンでの処理）時間まですべて生育培地に取り替え
た。前記第２処理も血清を含まない培地で行った。チラ
パザミンに対する暴露およびシスプラチンに対する暴露
の両方を、低酸素条件下で１時間行った。低酸素条件を
達成させるために、特製の予熱したアルミニウム・ガス
供給チャンバー（gassing chambers) に入れた。前記ガ
ス供給チャンバーは振動テーブルに置かれ、そして空気
もしくは窒素（＋５％ＣＯ₂）の真空出口ライン（排気
管線）および入口ライン（送込管線）を含んでなるガス
供給マニホールドに接続されたものであった。２〜３分
間 0.1気圧まで排気し続けて窒素（＋５％ＣＯ₂）を供
給することを交互に５回行って、アルミニウム・チャン
バー中の低酸素条件を達成させた。ガス供給後、チャン
バーを密閉し、そして１時間37℃でインキュベーション
した。クラーク（Clarke）電極を用いた培地中の酸素レ
ベルの測定では、低酸素条件が速やかに（酸素濃度 200
ppm 未満という１時間暴露中の平均Ｏ₂圧力レベルが約
10分間で）達成されたことを示した。シスプラチン処理
直後に、細胞をトリプシン処理し、カウントし、そして
プラスチック・ペトリ皿中の15％ウシ胎児血清を補足し
たウエイマウス培地で培養しなおして、５％ＣＯ₂湿潤
雰囲気下37℃で14日間インキュベートし、その後コロニ
ーをクリスタルバイオレットで染色してカウントした。

【００９７】正常細胞：チラパザミンおよびシスプラチ
ンに対する正常細胞の応答を、腎臓および骨髄流通血液
尿素窒素（ＢＵＮ）アッセイおよび末梢白色細胞（peri
pheral white cell ）カウントで評価した。血液試料
を、尾静脈からまたは心臓穿刺により採取した。血液凝
固阻止薬は全く使用しなかった。個々のマウスの末梢白
色細胞カウントは、３％酢酸 0.280mLで希釈した全血20
μＬを用いて測定した。血清ＢＵＮアッセイでは、２匹
のマウス由来の血液をプールし、凝固させ、ボルテック
スを用いて攪拌し、そして 830ｇで15分間遠心分離し
た。血清を吸引した後、商業的な臨床獣医学研究所によ
りＢＵＮ値を測定した。また、30日までの生存率を別の
実験で記録した。

【００９８】結果：（ａ）生体内における腫瘍についての結果図１は、２つの実験のプールした結果を示している。前
記２つの実験では、８mg/kg のシスプラチンの投与３時
間前から投与２時間後の期間における様々な時間に、0.
35mmole/kgのチラパザミン（63mg/kg ）を腫瘍所有マウ
スに投与した。ｘ軸は腫瘍あたりのクローン生成細胞の
相対数を示す。ｙ軸は、シスプラチンの投与時に対する
チラパザミンの投与時間を示している（−２時間は、シ
スプラチンを注射する２時間前にチラパザミンを注射し
たマウスから得られたデータを表している）。○は、チ
ラパザミン単独を表し、□はシスプラチン単独を表し、
△はチラパザミンおよびシスプラチンを表す。図１で示
されるように、シスプラチンを投与する３時間前または
１〜２時間後の期間にチラパザミンを投与した場合に
は、腫瘍あたりのクローン生成細胞の相対数は約10^-4か
ら約10^-7に減少する。これらの図面は、シスプラチンと
同時にチラパザミンを投与した場合の腫瘍あたりのクロ
ーン生成細胞の数と比較して、腫瘍あたりのクローン生
成細胞の数が10倍〜1000倍減少することを表している。
チラパザミンとシスプラチンの相乗効果は、シスプラチ
ンを投与する約３時間〜１時間前にチラパザミンを投与
したときが最高であると判定した。最も大きな相互作用
効果が、シスプラチンを投与する約 2.5時間前に認めら
れた。

【００９９】図１の最下点で大量の細胞殺害が認められ
たので（それはクローン生成アッセイの限界の境界であ
った）、実験におけるチラパザミンの用量を0.35mmole
から0.27mmole/kg（48.6mg/kg ）に減らして、実験を繰
り返した。この実験では、チラパザミンとシスプラチン
の投与時間の間隔を24時間に延長した。この実験の結果
を図２に示す。ｘ軸およびｙ軸は図１についてと同様で
ある。○は、チラパザミン単独を表し、□はシスプラチ
ン単独を表し、△はチラパザミンおよびシスプラチンを
表す。図２で示されるように、シスプラチンを投与する
24時間前までにチラパザミンを投与したときに、チラパ
ザミンとシスプラチンの相互作用の増強が存在した。

【０１００】第２組の実験では投与したチラパザミンの
量を減らしたにもかかわらず、３つの実験由来のデータ
は同じ結果：薬剤を一緒に投与した場合の実質的な相加
毒性、および別個の時間に薬剤を投与した場合の大きな
細胞毒性相互作用、さらにシスプラチン処理の約 2.5時
間前にチラパザミン処理をした場合の腫瘍あたりのクロ
ーン生成細胞の数の最も大幅な低減、を示した。４また
は８mg/kg のシスプラチンを投与する 2.5時間前に様々
な用量のチラパザミンを投与する、さらなる実験を行っ
た。シスプラチンの両方の用量で、チラパザミンの用量
の増加に伴う腫瘍細胞生存率におけるほぼ指数関数的な
低減が認められた。

【０１０１】（ｂ）正常組織についての結果：Ｃ３Ｈマ
ウスを用いた予備実験は、白色細胞カウントがチラパザ
ミンおよびシスプラチンで処理後３日目に最下点に到達
し、次いで５日目に対照レベル付近まで再び上昇したこ
とを示した。従って用量検討は、シスプラチン単独投与
およびチラパザミンとシスプラチンの投与後３日目に行
った。チラパザミンとシスプラチンを投与した場合で
は、シスプラチンを投与する所定の 2.5時間前にチラパ
ザミン（用量0.35mmole/kg）を投与した。シスプラチン
は、３種の異なる用量レベル、10、14および18mg/kg で
投与した。チラパザミンおよびシスプラチンの両方が軽
い白血球減少症を引き起こし、そしてそれらの組み合わ
せは、個々の薬剤に対する反応を加算することにより予
測したものと等しい影響を及ぼした。

【０１０２】高用量のシスプラチンに従いＢＵＮの増加
が最大となる時間の予備調査に基づいて、血清ＢＵＮの
アッセイを、チラパザミンおよびシスプラチンの注射後
６日目に行った。Ｃ３ＨマウスにおけるＢＵＮを、チラ
パザミン（0.27mmole/kg）、シスプラチン（10、14およ
び18mg/kg ）の単独注射又は２種の薬剤の併用（シスプ
ラチンを注射する 2.5時間前にチラパザミンを注射）に
ついて測定した。10および14mg/kg の用量でシスプラチ
ン単独で注射したときのＢＵＮレベルは、治療をしてい
ないマウスについてのＢＵＮレベルと同様であった（約
30mg/dL ）。しかしながら、18mg/kg のシスプラチンを
単独で注射したときは、ＢＵＮレベルが約80mg/dL であ
った。対照的に、各用量の薬剤の組み合わせでは、治療
したマウスのＢＵＮレベルは治療していないマウスのＢ
ＵＮレベルよりも低かった。

【０１０３】これらの結果は、シスプラチンと組み合わ
せたチラパザミンの用量はシスプラチン腎毒性を増加さ
せないこと、そして最高の用量で試験した場合では防御
さえしている可能性があることを示している。チラパザ
ミンがシスプラチンの全身毒性を増強しているかどうか
についての更なる試験として、ＬＤ₅₀実験をシスプラチ
ン単独およびシスプラチン注射 2.5時間前にチラパザミ
ンで治療した場合について行った。0.35mmole/kgのチラ
パザミンとシスプラチンで治療したマウスについてのＬ
Ｄ₅₀は17.7mg/kg （95％信頼限界：16.8〜18.7mg/kg ）
であった。シスプラチン単独についてのものと比較する
と、それは17.8mg/kg （17.1〜18.5mg/kg ）であった。

【０１０４】（ｃ）生体外実験の結果低酸素条件下でチラパザミン（２または４μg/mL）に対
して１時間細胞を暴露し、そしてまたより遅い時間の作
用としてシスプラチン（２μg/mL）に対して１時間暴露
した。チラパザミン（２または４μg/mLのとき、それぞ
れ 0.3および 0.009）ならびにシスプラチン（ 3.5×10
^-3）について、生体内でＲＩＦ−１腫瘍を用いたときと
同レベルの細胞殺害を低酸素細胞について起こすよう
に、各薬剤の濃度を選択した。各実験は、２種の薬剤の
暴露の時期間が全く離れていない群（即ち、チラパザミ
ンおよびシスプラチンを低酸素条件下で同時に１時間適
用した群）、ならびに２種の暴露を１〜４時間離した群
を含むものであった。同時に薬剤を適用した場合に得ら
れた結果は、２種の薬剤を別個に適用した場合の生存率
の結果と有意に異なるものではなっかたが（即ち、相加
効果と一致する）、それに対して薬剤を離して適用した
場合には10²までの力価分だけ細胞殺害効力が増強し
た。２種の薬剤を分割する効果の絶対的な程度は生体内
実験で認められたものよりも低いとはいえ、生体内実験
の結果で認められた細胞殺害効力の増強動態と同程度の
ものが存在する。２種の薬剤間の相互作用が低酸素状態
に依存したことを調査するために、有酸素条件下でチラ
パザミンに対して細胞を暴露してから低酸素条件下でシ
スプラチンに対して細胞を暴露するまでの間を３時間に
設定して実験を繰り返した。これらの実験では、チラパ
ザミンによる細胞毒性は全く存在せず、そして同じ実験
でシスプラチン単独で得られる細胞殺害効果と比較し
て、細胞殺害効果の増強も全く存在しなかった。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、シスプラチンに対するチラパザミンの
投与時間（−３から＋２時間）に対する実験ＲＩＦ−１
腫瘍に存在する腫瘍あたりの相対クローン生成細胞の数
のグラフを示すものである。

【図２】図２は、シスプラチンに対するチラパザミンの
投与時間（−２４から０時間）に対する実験ＲＩＦ−１
腫瘍に存在する腫瘍あたりの相対クローン生成細胞の数
のグラフを示すものである。

フロントページの続き (72)発明者ジェイ．マーティンブラウンアメリカ合衆国，カリフォルニア 94061, レッドウッドシティ，アブライアンウェイ 2010

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】化学療法剤での治療に対して感受性であ
る、固形腫瘍に対する化学療法剤の細胞毒性を増強する
方法であって、そのような腫瘍を有する哺乳動物に、前記化学療法剤を
投与してから約１時間から約２時間後に、または前記化
学療法剤を投与する約１／２時間から約２４時間前に、
細胞毒性増強量の次式【化１】（上式中、Ｘは、Ｈ；ヒドロカルビル（１〜４Ｃ）；ＯＨ、Ｎ
Ｈ₂、ＮＨＲもしくはＮＲＲで置換されたヒドロカルビ
ル（１〜４Ｃ）；ハロゲン；ＯＨ；アルコキシ（１〜４
Ｃ）；ＮＨ₂；ＮＨＲまたはＮＲＲであり；ここで、そ
れぞれＲ基は、独立して、低級アルキル（１〜４Ｃ）お
よび低級アシル（１〜４Ｃ）、ならびにＯＨ、ＮＨ₂、
アルキル（１〜４Ｃ）第２級およびジアルキル（１〜４
Ｃ）第３級アミノ基、アルコキシ（１〜４Ｃ）もしくは
ハロゲンで置換された低級アルキル（１〜４Ｃ）および
低級アシル（１〜４Ｃ）から選択され；そしてＸがＮＲ
Ｒの場合には、２つのＲが直接的にまたは橋酸素（brid
ge oxygen)を介して一体になって、モルホリノ環、ピロ
リジノ環もしくはピペリジノ環を形成し；ｎは、０もし
くは１であり；そしてＹ¹およびＹ²は、独立して、
Ｈ；ニトロ；ハロゲン；ハロゲン、ヒドロキシ、エポキ
シ、アルコキシ（１〜４Ｃ）、アルキルチオ（１〜４
Ｃ）、第１級アミノ（ＮＨ₂）、アルキル（１〜４Ｃ）
第２級アミノ、ジアルキル（１〜４Ｃ）第３級アミノ、
２つのアルキルが一体になって結合してモルホリノ、ピ
ロリジノもしくはピペリジノを生成しているジアルキル
（１〜４Ｃ）第３級アミノ、アシルオキシ（１〜４
Ｃ）、アシルアミド（１〜４Ｃ）およびそれのチオ類似
体、アセチルアミノアルキル（１〜４Ｃ）、カルボキ
シ、アルコキシカルボニル（１〜４Ｃ）、カルバミル、
アルキルカルバミル（１〜４Ｃ）、アルキルスルホニル
（１〜４Ｃ）もしくはアルキルホスホニル（１〜４Ｃ）
からなる群より選択される１つもしくは２つの置換基で
任意に置換された環式および不飽和ヒドロカルビルを包
含するヒドロカルビル（１〜１４Ｃ）であり、ここで、
ヒドロカルビルは単一エーテル（−Ｏ−）結合により任
意に中断されていてもよく、またはＹ¹およびＹ²は、
独立して、モルホリノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ＮＨ
₂、ＮＨＲ′、ＮＲ′Ｒ′Ｏ（ＣＯ）Ｒ′、ＮＨ（Ｃ
Ｏ）Ｒ′、Ｏ（ＳＯ）Ｒ′もしくはＯ（ＰＯＲ′）
Ｒ′，ここでＲ′は、ＯＨ、ＮＨ₂、アルキル（１〜４
Ｃ）第２級アミノ、ジアルキル（１〜４Ｃ）第３級アミ
ノ、モルホリノ、ピロリジノ、ピペリジノ、アルコキシ
（１〜４Ｃ）もしくはハロゲン置換基で置換されていて
もよいヒドロカルビル（１〜４Ｃ）である）で示される
化合物、または医薬的に許容される前記化合物の塩を投
与すること、を含んでなる化学療法剤の細胞毒性を増強
する方法。
【請求項２】前記化合物が、１，２，４−ベンゾトリ
アジン１，４−ジオキシド、３−アミノ−１，２，４
−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド、３−エチル
−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシ
ド、３−プロピル−１，２，４−ベンゾトリアジン
１，４−ジオキシドおよび３−（１−ヒドロキシエチ
ル）−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキ
シドからなる群より選択される請求項１に記載の方法。
【請求項３】前記化合物が３−アミノ−１，２，４−
ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドである、請求項２
に記載の方法。
【請求項４】前記化学療法剤がＤＮＡアルキル化化学
療法剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】前記ＤＮＡアルキル化化学療法剤がシス
プラチンである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】前記化合物が前記化学療法剤を投与する
約１時間から約１８時間前に投与される、請求項１に記
載の方法。
【請求項７】前記化合物が化学療法剤を投与する約２
時間から約５．５時間前に投与される、請求項６に記載
の方法。
【請求項８】化学療法剤、および細胞毒性増強量の次
式【化２】（上式中、Ｘは、Ｈ；ヒドロカルビル（１〜４Ｃ）；ＯＨ、Ｎ
Ｈ₂、ＮＨＲもしくはＮＲＲで置換されたヒドロカルビ
ル（１〜４Ｃ）；ハロゲン；ＯＨ；アルコキシ（１〜４
Ｃ）；ＮＨ₂；ＮＨＲまたはＮＲＲであり；ここで、そ
れぞれＲ基は、独立して、低級アルキル（１〜４Ｃ）お
よび低級アシル（１〜４Ｃ）、ならびにＯＨ、ＮＨ₂、
アルキル（１〜４Ｃ）第２級およびジアルキル（１〜４
Ｃ）第３級アミノ基、アルコキシ（１〜４Ｃ）もしくは
ハロゲンで置換された低級アルキル（１〜４Ｃ）および
低級アシル（１〜４Ｃ）から選択され；そしてＸがＮＲ
Ｒの場合には、２つのＲが直接的にまたは橋酸素（brid
ge oxygen)を介して一体になって、モルホリノ環、ピロ
リジノ環もしくはピペリジノ環を形成し；ｎは、０もし
くは１であり；そしてＹ¹およびＹ²は、独立して、
Ｈ；ニトロ；ハロゲン；ハロゲン、ヒドロキシ、エポキ
シ、アルコキシ（１〜４Ｃ）、アルキルチオ（１〜４
Ｃ）、第１級アミノ（ＮＨ₂）、アルキル（１〜４Ｃ）
第２級アミノ、ジアルキル（１〜４Ｃ）第３級アミノ、
２つのアルキルが一体になって結合してモルホリノ、ピ
ロリジノもしくはピペリジノを生成しているジアルキル
（１〜４Ｃ）第３級アミノ、アシルオキシ（１〜４
Ｃ）、アシルアミド（１〜４Ｃ）およびそれのチオ類似
体、アセチルアミノアルキル（１〜４Ｃ）、カルボキ
シ、アルコキシカルボニル（１〜４Ｃ）、カルバミル、
アルキルカルバミル（１〜４Ｃ）、アルキルスルホニル
（１〜４Ｃ）もしくはアルキルホスホニル（１〜４Ｃ）
からなる群より選択される１つもしくは２つの置換基で
任意に置換された環式および不飽和ヒドロカルビルを包
含するヒドロカルビル（１〜１４Ｃ）であり、ここで、
ヒドロカルビルは単一エーテル（−Ｏ−）結合により任
意に中断されていてもよく、またはＹ¹およびＹ²は、
独立して、モルホリノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ＮＨ
₂、ＮＨＲ′、ＮＲ′Ｒ′Ｏ（ＣＯ）Ｒ′、ＮＨ（Ｃ
Ｏ）Ｒ′、Ｏ（ＳＯ）Ｒ′もしくはＯ（ＰＯＲ′）
Ｒ′，ここでＲ′は、ＯＨ、ＮＨ₂、アルキル（１〜４
Ｃ）第２級アミノ、ジアルキル（１〜４Ｃ）第３級アミ
ノ、モルホリノ、ピロリジノ、ピペリジノ、アルコキシ
（１〜４Ｃ）もしくはハロゲン置換基で置換されていて
もよいヒドロカルビル（１〜４Ｃ）である）で示される
化合物、または医薬的に許容される前記化合物の塩、を
含んでなる哺乳動物の腫瘍を治療するためのキット。
【請求項９】次式【化３】（上式中、Ｘは、Ｈ；ヒドロカルビル（１〜４Ｃ）；ＯＨ、Ｎ
Ｈ₂、ＮＨＲもしくはＮＲＲで置換されたヒドロカルビ
ル（１〜４Ｃ）；ハロゲン；ＯＨ；アルコキシ（１〜４
Ｃ）；ＮＨ₂；ＮＨＲまたはＮＲＲであり；ここで、そ
れぞれＲ基は、独立して、低級アルキル（１〜４Ｃ）お
よび低級アシル（１〜４Ｃ）、ならびにＯＨ、ＮＨ₂、
アルキル（１〜４Ｃ）第２級およびジアルキル（１〜４
Ｃ）第３級アミノ基、アルコキシ（１〜４Ｃ）もしくは
ハロゲンで置換された低級アルキル（１〜４Ｃ）および
低級アシル（１〜４Ｃ）から選択され；そしてＸがＮＲ
Ｒの場合には、２つのＲが直接的にまたは橋酸素（brid
ge oxygen)を介して一体になって、モルホリノ環、ピロ
リジノ環もしくはピペリジノ環を形成し；ｎは、０もし
くは１であり；そしてＹ¹およびＹ²は、独立して、
Ｈ；ニトロ；ハロゲン；ハロゲン、ヒドロキシ、エポキ
シ、アルコキシ（１〜４Ｃ）、アルキルチオ（１〜４
Ｃ）、第１級アミノ（ＮＨ₂）、アルキル（１〜４Ｃ）
第２級アミノ、ジアルキル（１〜４Ｃ）第３級アミノ、
２つのアルキルが一体になって結合してモルホリノ、ピ
ロリジノもしくはピペリジノを生成しているジアルキル
（１〜４Ｃ）第３級アミノ、アシルオキシ（１〜４
Ｃ）、アシルアミド（１〜４Ｃ）およびそれのチオ類似
体、アセチルアミノアルキル（１〜４Ｃ）、カルボキ
シ、アルコキシカルボニル（１〜４Ｃ）、カルバミル、
アルキルカルバミル（１〜４Ｃ）、アルキルスルホニル
（１〜４Ｃ）もしくはアルキルホスホニル（１〜４Ｃ）
からなる群より選択される１つもしくは２つの置換基で
任意に置換された環式および不飽和ヒドロカルビルを包
含するヒドロカルビル（１〜１４Ｃ）であり、ここで、
ヒドロカルビルは単一エーテル（−Ｏ−）結合により任
意に中断されていてもよく、またはＹ¹およびＹ²は、
独立して、モルホリノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ＮＨ
₂、ＮＨＲ′、ＮＲ′Ｒ′Ｏ（ＣＯ）Ｒ′、ＮＨ（Ｃ
Ｏ）Ｒ′、Ｏ（ＳＯ）Ｒ′もしくはＯ（ＰＯＲ′）
Ｒ′，ここでＲ′は、ＯＨ、ＮＨ₂、アルキル（１〜４
Ｃ）第２級アミノ、ジアルキル（１〜４Ｃ）第３級アミ
ノ、モルホリノ、ピロリジノ、ピペリジノ、アルコキシ
（１〜４Ｃ）もしくはハロゲン置換基で置換されていて
もよいヒドロカルビル（１〜４Ｃ）である）で示され
る、癌腫瘍における治療効果を発揮できる化合物、また
は医薬的に許容される前記化合物の塩の用途であって、
化学療法剤でそのような腫瘍を治療する前にそのような
腫瘍を有する哺乳動物に治療的に投与するための医薬品
の製造における用途。
【請求項１０】前記化合物が、１，２，４−ベンゾト
リアジン１，４−ジオキシド、３−アミノ−１，２，
４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシド、３−エチ
ル−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシ
ド、３−プロピル−１，２，４−ベンゾトリアジン
１，４−ジオキシドおよび３−（１−ヒドロキシエチ
ル）−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキ
シドからなる群より選択される請求項９に記載の用途。
【請求項１１】前記化合物が３−アミノ−１，２，４
−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドである、請求項
１０に記載の用途。
【請求項１２】前記化学療法剤がＤＮＡアルキル化化
学療法剤である、請求項９に記載の用途。
【請求項１３】前記ＤＮＡアルキル化化学療法剤がシ
スプラチンである、請求項１２に記載の用途。
【請求項１４】前記化合物が前記化学療法剤を投与す
る約１時間から約１８時間前に投与される、請求項９に
記載の用途。
【請求項１５】前記化合物が化学療法剤を投与する約
２時間から約５．５時間前に投与される、請求項１４に
記載の用途。