JPH07236495A - 新規セルロースの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含
むβ−１，４−グルカンおよびそれを微生物を用いて効
率よく安価に、しかも従来のＮ−アセチルグルコサミン
を含む培地で培養して製造したものと同程度の品質であ
る製造方法の提供。 【構成】 アセトバクター属またはグルコノバクター属
に属し、分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含む
β−１，４−グルカン生産能を有する微生物をグルコサ
ミンを含有する培地で培養し、分子中にＮ−アセチルグ
ルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンを該培地中
に生成蓄積させ、該分子中にＮ−アセチルグルコサミン
残基を含むβ−１，４−グルカンを採取することを特徴
とする分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ
−１，４−グルカンの製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は分子中にＮ−アセチルグ
ルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンの製造方法
に関する。詳しくは、アセトバクター属またはグルコノ
バクター属に属し、分子中にＮ−アセチルグルコサミン
残基を含むβ−１，４−グルカンの生産能を有する微生
物を培養する培地中にグルコサミンか、または炭素源と
してグルコースを含有し、かつ窒素源として無機窒素お
よび／またはグルタミン酸を含有させることを特徴とす
る該Ｎ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−
グルカンの製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】一般
にセルロースとは、グルコースのみを構成糖としてβ−
１，４結合で結合した多糖を指称するが、本発明でいう
新規セルロースとは、セルロース中のβ−１，４−グル
カン鎖中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含む高分子
化合物のことであり、このものは既に本発明者らにより
見出された新規物質であり、特許出願されている（特開
平４−２６８３０１号公報）。

【０００３】分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を
含むβ−１，４−グルカンの製造方法としては、セルロ
ース生産能を有する酢酸菌をＮ−アセチルグルコサミン
を含む培地で培養する方法がある。Ｎ−アセチルグルコ
サミンは、天然界にキチンの構成成分として比較的多量
に存在しており、工業的にキチンを加水分解して調製し
ている。しかし、培地成分として使用する場合には、微
生物の生育を阻害しないように精製することが必要なた
め、安価な原料ではない。しかも、キチンの資源量に限
りがあるため、Ｎ−アセチルグルコサミンを原料として
製造される分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含
むβ−１，４−グルカンも高価になり、そのため用途が
限定されたり、また生産量が制限されることがある。そ
こで、分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ
−１，４−グルカンを安価に、また資源的に制約を受け
ない原料を用いて製造する方法の開発が望まれている。

【０００４】本発明者らは上記目的を達成するために、
分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，
４−グルカンの生合成過程に着目した。そして、培地に
添加されたＮ−アセチルグルコサミンの殆どが脱アセチ
ルおよび脱アミノ反応を受け、一旦グルコースまで分解
され、その後代謝されて、最終的に再びアセトアミド基
が付加されることを見出した。このことから、グルコー
スにアセトアミド基が付加される代謝活性を高めるよう
な方法で培養すれば、培地にＮ−アセチルグルコサミン
を添加しなくとも、分子中にＮ−アセチルグルコサミン
残基を含むβ−１，４−グルカンが生産される可能性が
あると考えた。

【０００５】そこで本発明者らは、Ｎ−アセチルグルコ
サミンの代わりに、その脱アセチル化合物であるグルコ
サミンに着目した。グルコサミンは、グルコースから容
易に化学合成される化合物であり、純度の高いものが安
価に入手でき、また資源量に制約がない点でもすぐれて
いる。さらに、生合成的にはグルコサミンへのアセチル
基の付加のみでＮ−アセチルグルコサミンに変換される
ため、目的とする新規セルロースの製造方法の改良が可
能と思われる。一方、グルコースを炭素源とした場合で
も、アミノ基付加反応が高まるような培養条件を見出せ
れば、グルコースは容易にグルコサミンに変換され、さ
らに上記のアセチル基の付加反応が同時に起これば、最
終的にＮ−アセチルグルコサミンに変換されるものと期
待される。特に、分子中にＮ−アセチルグルコサミン残
基を含むβ−１，４−グルカンの高生産能を有している
アセトバクター属またはグルコノバクター属に属する微
生物、いわゆる酢酸菌はトランスアミナーゼ活性が強い
ことが知られており、上記のアイデアの実現に適してい
ると予想される。

【０００６】本発明者らは、上記の考えに基づき、分子
中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−
グルカンを生産する培地組成について鋭意検討を重ね
た。その結果、新規セルロース生産能を有する微生物を
培養する培地としてグルコサミンまたは炭素源とし
てグルコースと窒素源として無機窒素および／またはグ
ルタミン酸を添加した培地を用いて培養することによ
り、従来の製造方法より安価に分子中にＮ−アセチルグ
ルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンが生産でき
ることを見出し、本発明を完成した。

【０００７】

【課題を解決するための手段】すなわち、本発明はアセ
トバクター属またはグルコノバクター属に属し、分子中
にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グ
ルカン生産能を有する微生物をグルコサミンを含有する
培地で培養し、分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基
を含むβ−１，４−グルカンを該培地中に生成蓄積さ
せ、該分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ
−１，４−グルカンを採取することを特徴とする分子中
にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グ
ルカンの製造方法に関するものである。さらに、本発明
は上記新規セルロース生産能を有する微生物を炭素源と
してグルコースならびに窒素源として無機窒素および／
またはグルタミン酸を含む培地で培養することを特徴と
する分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−
１，４−グルカンの製造方法並びに該新規セルロース生
産能を有する微生物として、該微生物を上記グルコサミ
ンを含有する培地または炭素源としてグルコースならび
に窒素源として無機窒素および／またはグルタミン酸を
含む培地で継代培養したものを使用することを特徴とす
る分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−
１，４−グルカンの製造方法に関する。

【０００８】以下に本発明を詳細に説明する。本発明に
おいて使用される微生物は、アセトバクター属またはグ
ルコノバクター属に属し、分子中にＮ−アセチルグルコ
サミン残基を含むβ−１，４−グルカン生産能を有する
ものであれば、特に限定はない。具体的には、アセトバ
クター・キシリナムＡＴＣＣ１０２４５株、同ＩＦＯ１
３７７２株、同１０５１株（ＦＥＲＭ Ｐ−１２００
０）、グルコノバクター・サブオキシダンスＩＦＯ３２
５６株などが挙げられる。なお、これら微生物から誘導
された変異株であっても前記した新規セルロースの生産
能を有する限り、本発明に使用することができる。さら
に、これら微生物を上記グルコサミンを含有する培地ま
たは炭素源としてグルコースならびに窒素源として無機
窒素および／またはグルタミン酸を含む培地で継代培養
することにより、分子中にＮ−アセチルグルコサミン残
基を含むβ−１，４−グルカン生産能を向上させた菌株
は、一層好適に使用できる。

【０００９】分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を
含むβ−１，４−グルカンを生産させる培地としては、
グルコサミンを単独で、もしくは他の炭素源と組み合わ
せて添加した培地が使用できる。グルコサミンの培地へ
の添加濃度は、微生物の培養に影響がない範囲で決定す
ればよく、通常は0.１〜５％の範囲が望ましく、好まし
くは0.５〜2.０％が良い。グルコサミンの添加濃度や添
加方法を変えることにより、生産物中のグルコース残基
に対するＮ−アセチルグルコサミン残基の割合を制御す
ることができる。培地へは、炭素源以外に、窒素源、無
機塩類、さらには必要に応じてアミノ酸、ビタミンなど
を添加してもよい。

【００１０】また、別の態様として、培地の炭素源とし
てグルコースを単独で使用する場合には、窒素源として
無機窒素および／またはグルタミン酸を同時に培地に添
加する必要がある。この場合も必要に応じて、酵母エキ
ス、ペプトン、無機塩類、アミノ酸、ビタミンなどを添
加してもよい。無機窒素としては硫酸アンモニウム、塩
化アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウ
ムなどのアンモニウム塩が使用される。グルコースなら
びに無機窒素および／またはグルタミン酸の培地への添
加濃度は、グルコサミンと同様に微生物の培養に影響を
与えない範囲で決定すればよく、通常グルコースは、0.
１〜５％、無機窒素は0.０１〜0.５％、グルタミン酸は
0.０１〜0.５％の範囲が望ましい。なお、グルタミン酸
はナトリウム塩、カリウム塩などの形で培地に添加して
もよい。

【００１１】培養条件については、用いる微生物が生育
し、分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−
１，４−グルカンを生産する条件であればよく、通常、
ｐＨ５〜９、好ましくは５〜７、温度は２０〜４０℃、
好ましくは２７〜３２℃、期間は２〜１０日間、好まし
くは４〜７日間が適当である。また、培養方法は、通気
攪拌培養でも静置培養でもよい。通気攪拌培養において
は、Ｎ−アセチルグルコサミン含量を高めたり、Ｎ−ア
セチルグルコサミン残基が均一に分布した、分子中にＮ
−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカ
ンを生産させることができる。

【００１２】生産された分子中にＮ−アセチルグルコサ
ミン残基を含むβ−１，４−グルカンは、必要に応じて
除蛋白処理をした後、通常水洗して使用する。さらに、
所望により水洗後、風乾などの方法で乾燥させてもよ
い。

【００１３】

【実施例】次に、本発明を実施例により詳しく説明す
る。 実施例１ アセトバクター・キシリナムＩＦＯ１３７７２をHestri
n-Schramm 培地〔グルコース2.０ｇ，バクトペプトン
（ディフコ社製）0.５ｇ，酵母エキス（ディフコ社製）
0.５ｇ，クエン酸0.１１５ｇ，リン酸水素二ナトリウム
0.２７ｇ，蒸留水１００ｍｌ，ｐＨ６.0〕のうち、グル
コース２ｇをグルコース0.５ｇおよびグルコサミン1.５
ｇに変更した培地５０ｍｌに植菌し、２８℃で７日間静
置培養した。比較のために、上記のグルコサミン1.５ｇ
をＮ−アセチルグルコサミン1.５ｇに変更した培地でも
同様に培養を行なった。

【００１４】培養終了後、培養液表面に生産されたゲル
状の膜を取り出し、２％ＳＤＳ溶液に浸漬し、１００℃
で３時間煮沸し、菌体成分や培地成分由来の蛋白質を除
去した後、２％ＮａＯＨ水溶液に浸漬してさらに１００
℃で1.５時間処理した。この後、１％酢酸溶液に浸漬し
て室温で２４時間中和処理し、水で十分に洗浄して不純
物を除去し、目的とする分子中にＮ−アセチルグルコサ
ミン残基を含むβ−１，４−グルカンを得た。

【００１５】得られた分子中にＮ−アセチルグルコサミ
ン残基を含むβ−１，４−グルカンの重量は、ガラス板
上で乾燥させて測定した。乾燥して得られた分子中にＮ
−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカ
ンの赤外線（ＩＲ）分析結果を図１、２に、Ｘ線解析結
果を図３、４に示した。グルコサミンを添加した培地で
産生された分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含
むβ−１，４−グルカンのＩＲチャートは、対照のＮ−
アセチルグルコサミンを添加した培地で産生された分子
中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−
グルカンと同じ吸収スペクトルを示しており、また、Ｘ
線解析の結果でも、１１０面と０２０面にピークが認め
られ、１１０／０２０のピーク面積比から求めた面配向
性は、それぞれ0.９９、1.０２であり、ほぼ同一の性質
を示した。

【００１６】さらに、産生された分子中にＮ−アセチル
グルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンのＮ−ア
セチルグルコサミン含量を求めるため、アミノ酸分析を
行なった。上記試料をあらかじめ８５％リン酸で膨潤さ
せ、２Ｎ塩酸にて減圧下で１００℃，１２時間加水分解
を行なった後、塩酸を除去し、アミノ酸分析計に供し
た。使用したアミノ酸分析計は日立製８３５型で、カラ
ムは日立製♯２６１７（４ｍｍ径×２５０ｍｍ）を使用
した。サンプルはサンプル溶解用バッファー（クエン酸
ナトリウム二水和物4.９ｇ，クエン酸一水和物３５．０
ｇ，ＮａＣｌ８．７７ｇ，カプリル酸0.１ｍｌ，チオジ
グリコール５．０ｍｌを蒸留水に溶解して１リットルに
調整する。ｐＨ4.９）に溶解後、適当量をカラムに注入
して分析した。カラムはあらかじめバッファー１（クエ
ン酸ナトリウム二水和物１4.７１ｇ，クエン酸一水和物
１0.５ｇ，ＮａＣｌ2.９２ｇ，カプリル酸0.１ｍｌ，チ
オジグリコール5.０ｍｌ，ブリーチ4.０ｍｌを蒸留水に
溶解して１リットルに調整したもの。ｐＨ4.３）で平衡
化しておき、サンプル注入後、バッファー２（クエン酸
ナトリウム二水和物２6.６７ｇ，クエン酸一水和物6.１
０ｇ，ＮａＣｌ５4.３５ｇ，カプリル酸0.１ｍｌ，チオ
ジグリコール5.０ｍｌ，ブリーチ4.０ｍｌを蒸留水に溶
解して１リットルに調整したもの。ｐＨ4.９）でグラジ
ェントをかけ溶出させた。その時の溶出速度は0.２７５
ｍｌ／ｍｉｎであった。その結果、上記の培地で産生さ
せた分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−
１，４−グルカンの加水分解試料は、いずれも溶出位置
５1.４ｍｉｎにＮ−アセチルグルコサミンに相当するピ
ークの存在を確認し、グルコサミン塩酸塩として定量し
た。

【００１７】定量結果を第１表に示す。含量は、分析に
供した試料の重量をもとにアミノ酸分析計の結果から求
めた標品中のＮ−アセチルグルコサミン量およびＮ−ア
セチルガラクトサミン量から残基数の割合で表した。表
から明らかなように、炭素源にグルコサミンを導入して
培養を行なっても、Ｎ−アセチルグルコサミンで培養し
たときとほぼ同等の収量が得られ、Ｎ−アセチルグルコ
サミン含量もほぼ同じであった。

【００１８】

【表１】

【００１９】実施例２ アセトバクター・キシリナムＩＦＯ１３７７２をHestri
n-Schramm 培地〔グルコース2.０ｇ，バクトペプトン
（ディフコ社製）0.５ｇ，酵母エキス（ディフコ社製）
0.５ｇ，クエン酸0.１１５ｇ，リン酸水素二ナトリウム
0.２７ｇ，蒸留水１００ｍｌ，ｐＨ６.0〕のうち、グル
コース2.０ｇをグルコース1.４ｇとＮ−アセチルグルコ
サミン0.６ｇに変更し、それ以外の成分は同一である培
地に植菌し、２８℃で７日間静置培養した。

【００２０】培養終了後、培養液表面に生成した微生物
セルロースを含まないようにして得た培養液の一部を種
培養とし、実施例１に記載のHestrin-Schramm 培地のう
ち、グルコース2.０ｇをグルコサミン０，0.１，0.５，
1.０，2.０，5.０ｇに変更した培地を入れた培養装置
（容量２リットル，ガラス製，柴田科学製，円筒形，高
さ２８０ｍｍ，内径１２０ｍｍ，液量1.５リットル）に
１０％（ｖ／ｖ）の割合で植菌した。

【００２１】この装置（特願平５−１６５９０６号明細
書記載）には、直径６ｃｍ，高さ１３ｃｍでメッシュサ
イズ１６の中空円筒状の支持体（ステンレス製金網）を
装置底部に設けたマグネチック攪拌子（直径５ｍｍ×長
さ５０ｍｍ）の回転を妨げないように、底面から２０ｍ
ｍの高さに設置してある。また、通気はエアーポンプ
（日本水槽工業株式会社、チカラアルファ１５００）を
用い、除菌フィルター（ミリポア製、型番号ＳＰ０００
３０９）で除菌した空気を、上記マグネチック攪拌子と
中空円筒支持体の間の空間に、液面と水平に配置した内
径３ｍｍのステンレス製パイプ（先端を閉じ、先端より
１０ｍｍの位置から７ｍｍ間隔で直径１ｍｍの穴を７個
開けたもの）を通して、毎分１リットルの割合で注入し
た。上記攪拌子を５０ｒｐｍの速度で回転させ攪拌しな
がら、通気攪拌培養を行なった。なお、培養は、３０℃
で５日間行なった。培養終了時、分子中にＮ−アセチル
グルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンは支持体
に付着、保持されていた。支持体から分子中にＮ−アセ
チルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンを含
む生産物を剥離し、実施例１と同様に精製処理を行なっ
た。

【００２２】得られた分子中にＮ−アセチルグルコサミ
ン残基を含むβ−１，４−グルカンの生成量は湿重量を
測定して求めた。この一部を凍結乾燥させて実施例１と
同様の方法で加水分解処理を行ない、アミノ酸分析計で
Ｎ−アセチルグルコサミン含量を求めた。結果を第２表
に示す。表から明らかなように、グルコサミンの添加濃
度が高まるにつれて、生成する分子中にＮ−アセチルグ
ルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカン量は多く、
またＮ−アセチルグルコサミン含量も高かった。

【００２３】

【表２】

【００２４】実施例３ アセトバクター・キシリナムＩＦＯ１３７７２をHestri
n-Schramm 培地に窒素源として、硫酸アンモニウム、塩
化アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウ
ムなどのアンモニウム塩および／またはグルタミン酸ナ
トリウム0.１％を添加した培地で実施例１と同様な方法
で培養した。この後、実施例１と同様な処理を行ない、
分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，
４−グルカン生成量とＮ−アセチルグルコサミン含量を
求め、結果を第３表に示した。表から明らかなように、
各種窒素源を添加すると、いずれも分子中にＮ−アセチ
ルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンが生成
していた。

【００２５】また、窒素源として硫酸アンモニウム、ま
たはグルタミン酸ナトリウムを添加培養し、その後乾燥
して得られた分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を
含むβ−１，４−グルカンの赤外線（ＩＲ）分析を図
５、６に、およびＸ線回析結果を図７、８に示した。硫
酸アンモニウム、またはグルタミン酸ナトリウムを添加
した培地で産生された分子中にＮ−アセチルグルコサミ
ン残基を含むβ−１，４−グルカンのＩＲチャートは、
対照のＮ−アセチルグルコサミンを添加した培地で産生
された分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ
−１，４−グルカンと同じ吸収スペクトルを示してお
り、またＸ線回析の結果でも１１０面と０２０面にピー
クが認められ、１１０／０２０のピーク面積比から求め
た面配向性は、それぞれ1.１６、1.３８であり、対照の
Ｎ−アセチルグルコサミンを添加した培地で産生された
分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，
４−グルカンとほぼ同一の性質を示した。

【００２６】

【表３】

【００２７】実施例４ アセトバクター・キシリナムＩＦＯ１３７７２をHestri
n-Schramm 培地に硫酸アンモニウムを0.１，0.２５，0.
５％添加した培地で実施例１と同様な方法で培養した。
この後、実施例１と同様な処理を行ない、分子中にＮ−
アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカン
の生成量とＮ−アセチルグルコサミン含量を求め、結果
を第４表に示した。表から明らかなように、硫酸アンモ
ニウムを0.１〜0.５％添加すると、分子中にＮ−アセチ
ルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンが生成
していた。

【００２８】

【表４】

【００２９】実施例５ アセトバクター・キシリナムＩＦＯ１３７７２をHestri
n-Schramm 培地にグルタミン酸ナトリウムを0.１，0.２
５，0.５％添加した培地で実施例１と同様な方法で培養
した。この後、実施例１と同様な処理を行ない、分子中
にＮ─アセチルグルコサミン残基を含むβ─１，４─グ
ルカンの生成量とＮ−アセチルグルコサミン含量を求
め、結果を第５表に示した。表から明らかなように、グ
ルタミン酸ナトリウムを0.１〜0.５％添加すると、分子
中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−
グルカンが生成していた。

【００３０】

【表５】

【００３１】実施例６ アセトバクター・キシリナムＩＦＯ１３７７２を実施例
２と同様な方法で種培養液を調製し、この培養液の一部
（容量で１０％）を、実施例２で用いた装置に充填した
培地に植菌し、通気攪拌培養を行なった。培養条件はHe
strin-Schramm 培地に硫酸アンモニウムを0.２％添加し
たものに変更した以外は、実施例２と同様である。この
後、実施例１と同様な処理を行ない、産生された分子中
にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グ
ルカンのＮ−アセチルグルコサミン含量を求めたとこ
ろ、1.７３モル％であった。

【００３２】実施例７ アセトバクター・キシリナム１０５１（ＦＥＲＭ Ｐ−
１２０００）を実施例２と同様な方法で種培養を調製
し、この種培養液の一部（容量で１０％）を実施例２で
用いた装置に充填した培地に植菌し、通気攪拌培養を行
なった。培養条件は、Hestrin-Schramm 培地に硫酸アン
モニウムを0.２％添加したものに変更した以外は、実施
例２と同様である。この後、実施例１と同様な処理を行
ない、産生された分子中にＮ−アセチルグルコサミン残
基を含むβ−１，４−グルカンのＮ−アセチルグルコサ
ミン含量を求めたところ、4.９８モル％であった。

【００３３】

【発明の効果】本発明は、生体適合性や生体内消化性に
優れ、傷口治癒剤、縫合糸、薬物送達システム担体、化
粧品などの素材として利用でき、さらに透析膜、気体分
離膜、アフィニティー膜、物質透過性膜などの分離膜素
材や固定化担体、光学分割、アフィニティー分離クロマ
トグラフィーの担体などの素材として使用可能な分子中
にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グ
ルカンおよびそれを微生物を用いて効率よく安価に、し
かも従来のＮ−アセチルグルコサミンを含む培地で培養
して製造したものと同程度の品質である製造方法を提供
する。

【図面の簡単な説明】

【図１】 実施例１で対照となるＮ−アセチルグルコサ
ミンを添加した培地で産生された新規セルロースの赤外
吸収スペクトルである。

【図２】 実施例１でグルコサミンを添加した培地で産
生された新規セルロースの赤外吸収スペクトルである。

【図３】 実施例１で対照となるＮ−アセチルグルコサ
ミンを添加した培地で産生された新規セルロースのＸ線
回析パターンである。

【図４】 実施例１でグルコサミンを添加した培地で産
生された新規セルロースのＸ線回析パターンである。

【図５】 実施例３で硫酸アンモニウムを添加した培地
で産生された新規セルロースの赤外吸収スペクトルであ
る。

【図６】 実施例３でグルタミン酸ナトリウムを添加し
た培地で産生された新規セルロースの赤外吸収スペクト
ルである。

【図７】 実施例３で硫酸アンモニウムを添加した培地
で産生された新規セルロースのＸ線回析パターンであ
る。

【図８】 実施例３でグルタミン酸ナトリウムを添加し
た培地で産生された新規セルロースのＸ線回析パターン
である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 秋田 澄男 愛知県名古屋市瑞穂区高田町１丁目23番地 の３ (72)発明者 川村 吉也 愛知県江南市古知野町古渡132

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 アセトバクター属またはグルコノバクタ
   ー属に属し、分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を
   含むβ−１，４−グルカン生産能を有する微生物をグル
   コサミンを含有する培地で培養し、分子中にＮ−アセチ
   ルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカンを該培
   地中に生成蓄積させ、該分子中にＮ−アセチルグルコサ
   ミン残基を含むβ−１，４−グルカンを採取することを
   特徴とする分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含
   むβ−１，４−グルカンの製造方法。
2. 【請求項２】 培地中のグルコサミンの添加濃度が0.１
   〜５％である請求項１記載の分子中にＮ−アセチルグル
   コサミン残基を含むβ−１，４−グルカンの製造方法。
3. 【請求項３】 アセトバクター属またはグルコノバクタ
   ー属に属する微生物を培養する培地が、炭素源としてグ
   ルコースならびに窒素源として無機窒素および／または
   グルタミン酸を含むものである請求項１記載の分子中に
   Ｎ−アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グル
   カンの製造方法。
4. 【請求項４】 請求項３記載の無機窒素が硫酸アンモニ
   ウム、塩化アンモニウム、酢酸アンモニウムおよびリン
   酸アンモニウムの中から選ばれた少なくとも一種のもの
   である分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を含むβ
   −１，４−グルカンの製造方法。
5. 【請求項５】 アセトバクター属またはグルコノバクタ
   ー属に属し、分子中にＮ−アセチルグルコサミン残基を
   含むβ−１，４−グルカンの生産能を有する微生物とし
   て該微生物を請求項１または３記載の培地で継代培養し
   たものを使用する請求項１または３記載の分子中にＮ−
   アセチルグルコサミン残基を含むβ−１，４−グルカン
   の製造方法。