JPH07242548A - 骨吸収抑制・骨形成促進剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 新しいタイプの、骨吸収抑制・骨形成促進剤
を提供する。 【構成】 一般式（Ｉ）により表わされる化合物を含ん
で成る骨吸収抑制・骨形成促進剤。 〔式中、Ｘはテトラサイクリン系化合物の１価基であ
り；Ｙは式（III）、式（IV）あるいは式（Ｖ）で表わ
される２価又は３価の基（但し、式（III）乃至（Ｖ）
において、−Ｘ−は直接結合、−Ｏ−又は−ＮＨ−であ
り、ｎは０〜４である）であり；Ｚはエストロゲン等の
ステロイド化合物の１価基である〕 【効果】 一般式（Ｉ）の化合物は、骨組織に集中する
ことができ、且つ骨吸収抑制・骨形成促進作用を有す
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規な骨吸収抑制・骨
形成促進剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】骨の正常な維持は骨吸収と骨形成とのバ
ランスにより達成されており、骨吸収が促進されれば骨
成分が溶解・減少し、骨粗しょう症等の骨疾患の原因と
なる。エストロゲン等の性ホルモンが骨吸収を抑制する
作用を有することが知られており、このため骨粗しょう
症の予防・治療剤として欧米においては使用されてい
る。しかしながら、これらのホルモンは骨に集中するこ
とは確認されていない。これらのホルモンの単独投与に
起因する発癌の危険も否定できない。

【０００３】他方、テトラサイクリン系抗生物質は骨に
集中する性質を有するが、骨吸収抑制作用及び骨形成促
進作用のいずれも有していない。わずかに、米国特許第
４９２５８３３号にはテトラサイクリンが、細胞レベル
の実験において、骨蛋白質の合成を促進することが記載
されている。しかしながら、骨蛋白質の合成は骨形成の
ために必要ではあるが、骨蛋白質の合成のみによって骨
形成が促進されるものではない。現在まで、骨形成促進
作用を有し、骨疾患予防又は治療剤として使用すること
ができる物質は知られていない。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明は、好ま
しくは相剰的に、骨吸収抑制作用及び骨形成促進作用を
有し、且つ骨に集中することができる骨疾患治療剤を提
供しようとするものである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく種々検討した結果、テトラサイクリン系
抗生物質とエストロゲン等のステロイド系性ホルモンを
リンカーにより共有結合させてることにより得られる化
合物が、骨吸収抑制作用に加えて骨形成促進作用をも有
し、しかも骨に集中する性質を有することを見出し、本
発明を完成した。

【０００６】従って、本発明は、次の式（Ｉ）： Ｘ−Ｙ−Ｚ （Ｉ） 〔式中、Ｘは次の式（II）：

【０００７】

【化４】

【０００８】（式中、Ｒ₁ は水素又はヒドロキシル基で
あり；Ｒ₂ は水素又はヒドロキシル基であり；Ｒ₃ は水
素又はメチル基であり；そしてＲ₄ は水素、ハロゲン、
又はジメチルアミノ基である）により表わされる１価基
であり；Ｙは次の式（III ），（IV）又は（Ｖ）：

【０００９】

【化５】

【００１０】（式中、ｎは０〜４であり、そして−Ｘ−
は直接結合、−Ｏ−又は−ＮＨ−である）により表わさ
れる２価基又は３価基であり；そしてＺは次の式（V
I）：

【００１１】

【化６】

【００１２】（式中、Ｒ₁ ′はＨＯ−又はＯ＝であり；
Ｒ₂ ′は水素原子又はメチル基であり；Ｒ₃ ′は水素原
子、フェニル基又は置換フェニル基であり；Ｒ₄ ′はメ
チル基又はエチル基であり；Ｒ₅ ′はヒドロキシル基、
ケトン基又はアセチル基であり；Ｒ₆ ′は水素、ヒドロ
キシ基、メチル基、エチニル基又はプロピニル基であ
り；あるいはＲ₅ ′とＲ₆ ′は一緒になって＝Ｏを構成
し；Ｒ₇ ′は水素、ヒドロキシル基、又は＝Ｏであり、
あるいはＲ₆ ′とＲ₇ ′は２，２−ジオキシプロピル基
の酸素に結合しており；そして は単結合又は二重結合
を表わす）で表わされる化合物の水素又はヒドロキシル
基が除去された１価基であり、この結合基は式（VI）の
化合物の２位、３位、４位、６位、７位又は１７位、あ
るいは１１位に結合したフェニル基に存在し；式（II）
の（１）と式（III ）〜（Ｖ）の（２）とは直接連結さ
れており、そして式（III ）〜（Ｖ）の（３）と式（V
I）の前記結合基のいずれかとが直接連結されている〕
により表わされる化合物を含んで成る骨吸収抑制・骨形
成促進剤を提供する。上記式（II）においてハロゲンは
例えば弗素、塩素、臭素、又はヨウ素であり、好ましく
は塩素である。

【００１３】

【具体的な説明】本発明の医薬の活性成分である式
（Ｉ）の化合物を構成する式（II）の１価基としては、
例えば次のものが挙げられる。 次の式（II−１）：

【００１４】

【化７】

【００１５】（式（II）中の、Ｒ₁ が水素であり、Ｒ₂
がヒドロキシル基であり、Ｒ₃ がメチル基であり、そし
てＲ₄ が水素である）により表わされるテトラサイクリ
ンの１価基。 次の式（II−２）：

【００１６】

【化８】

【００１７】（式（II）中のＲ₁ がヒドロキシル基であ
り、Ｒ₂ がヒドロキシル基であり、Ｒ₃ がメチル基であ
り、そしてＲ₄ がメチル基である）により表わされるテ
ラマイシンの１価基。 次の式（II−３）：

【００１８】

【化９】

【００１９】（式（II）中のＲ₁ が水素であり、Ｒ₂ が
ヒドロキシル基であり、Ｒ₃ がメチル基であり、そして
Ｒ₄ が塩素である）により表わされるクロロテトラサイ
クリンの１価基。 次の式（II−４）：

【００２０】

【化１０】

【００２１】（式（II）中のＲ₁ がヒドロキシル基であ
り、Ｒ₂ が水素であり、Ｒ₃ がメチル基であり、そして
Ｒ₄ が水素である）により表わされるデオキシテトラサ
イクリン１価基。 次の式（II−５）：

【００２２】

【化１１】

【００２３】（式（II）中のＲ₁ が水素であり、Ｒ₂ が
水素であり、Ｒ₃ が水素であり、そしてＲ₄ がジメチル
アミノ基である）により表わされるアミノテトラサイク
リンの１価基。本発明の医薬の活性成分である式（Ｉ）
の化合物を構成する式（VI）の化合物の１価基として
は、例えば次のものが挙げられる。 次の式（VI−１）：

【００２４】

【化１２】

【００２５】（式（VI）中のＲ₅ ′とＲ₆ ′が一緒にな
って＝Ｏを表わし、そしてＲ₇ ′が水素である）により
表わされるエストロンの１価基。 次の式（VI−２）：

【００２６】

【化１３】

【００２７】（式（VI）のＲ₅ ′がヒドロキシル基であ
り、Ｒ₆ ′が水素であり、そしてＲ₇′が水素である）
により表わされるエストラジオールの１価基。 次の式（VI−３）：

【００２８】

【化１４】

【００２９】（式（VI）中のＲ₅ ′がヒドロキシル基で
あり、Ｒ₆ ′がエチニル基であり、そしてＲ₇ ′が水素
である）エストロアルキノールの１価基。 次の式（VI−４）：

【００３０】

【化１５】

【００３１】（式（VI）中のＲ₅ ′がヒドロキシル基で
あり、Ｒ₆ ′が水素であり、そしてＲ₇ ′がヒドロキシ
ル基である）エストリオールの１価基。上記式（VI）〜
（VI−４）の化合物の結合基はそれらの３位、６位又は
１７位に存在する。（VI）はさらに、例えば次の化合物
の水素又はヒドロキシル基を除去した１価基であること
ができる。

【００３２】

【化１６】

【００３３】

【化１７】

【００３４】

【化１８】

【００３５】従って、本発明の医薬の活性成分は、例え
ば次の式により表わされる。 〔II−１〕−〔III 〕−（３）〔VI−１〕（（ ）内
の数字は式〔VI−１〕の基の結合基の位置を示す。以下
同じ）、〔II−１〕−〔III 〕−（６）〔VI−１〕、
〔II−１〕−〔III 〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−
１〕−〔III 〕−（３）〔VI−２〕、〔II−１〕−〔II
I 〕−（６）〔VI−２〕、〔II−１〕−〔III〕−（１
７）〔VI−２〕、〔II−１〕−〔III 〕−（３）〔VI−
３〕、〔II−１〕−〔III 〕−（６）〔VI−３〕、〔II
−１〕−〔III 〕−（１７）〔VI−３〕、〔II−１〕−
〔III 〕−（３）〔VI−４〕、〔II−１〕−〔III 〕−
（６）〔VI−４〕、〔II−１〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−４〕、〔II−１〕−〔IV〕−（３）〔VI−１〕、
〔II−１〕−〔IV〕−（６）〔VI−１〕、〔II−１〕−
〔IV〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−１〕−〔IV〕−
（３）〔VI−２〕、〔II−１〕−〔IV〕−（６）〔VI−
２〕、〔II−１〕−〔IV〕−（１７）〔VI−２〕、〔II
−１〕−〔IV〕−（３）〔VI−３〕、〔II−１〕−〔I
V〕−（６）〔VI−３〕、〔II−１〕−〔IV〕−（１
７）〔VI−３〕、〔II−１〕−〔IV〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−１〕−〔IV〕−（６）〔VI−４〕、〔II−
１〕−〔IV〕−（１７）〔VI−４〕、

【００３６】〔II−１〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−１〕、
〔II−１〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−１〕、〔II−１〕−
〔Ｖ〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−１〕−〔Ｖ〕−
（３）〔VI−２〕、〔II−１〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−
２〕、〔II−１〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI−２〕、〔II
−１〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−３〕、〔II−１〕−
〔Ｖ〕−（６）〔VI−３〕、〔II−１〕−〔Ｖ〕−（１
７）〔VI−３〕、〔II−１〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−１〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−４〕、〔II−
１〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI−４〕、〔II−２〕−〔II
I 〕−（３）〔VI−１〕、〔II−２〕−〔III 〕−
（６）〔VI−１〕、〔II−２〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−１〕、〔II−２〕−〔III 〕−（３）〔VI−
２〕、〔II−２〕−〔III 〕−（６）〔VI−２〕、〔II
−２〕−〔III 〕−（１７）〔VI−２〕、〔II−２〕−
〔III 〕−（３）〔VI−３〕、〔II−２〕−〔III 〕−
（６）〔VI−３〕、〔II−２〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−３〕、〔II−２〕−〔III 〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−２〕−〔III 〕−（６）〔VI−４〕、〔II
−２〕−〔III 〕−（１７）〔VI−４〕、

【００３７】〔II−２〕−〔IV〕−（３）〔VI−１〕、
〔II−２〕−〔IV〕−（６）〔VI−１〕、〔II−２〕−
〔IV〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−２〕−〔IV〕−
（３）〔VI−２〕、〔II−２〕−〔IV〕−（６）〔VI−
２〕、〔II−２〕−〔IV〕−（１７）〔VI−２〕、〔II
−２〕−〔IV〕−（３）〔VI−３〕、〔II−２〕−〔I
V〕−（６）〔VI−３〕、〔II−２〕−〔IV〕−（１
７）〔VI−３〕、〔II−２〕−〔IV〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−２〕−〔IV〕−（６）〔VI−４〕、〔II−
２〕−〔IV〕−（１７）〔VI−４〕、〔II−２〕−
〔Ｖ〕−（３）〔VI−１〕、〔II−２〕−〔Ｖ〕−
（６）〔VI−１〕、〔II−２〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI
−１〕、〔II−２〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−２〕、〔II
−２〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−２〕、〔II−２〕−
〔Ｖ〕−（１７）〔VI−２〕、〔II−２〕−〔Ｖ〕−
（３）〔VI−３〕、〔II−２〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−
３〕、〔II−２〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI−３〕、〔II
−２〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−４〕、〔II−２〕−
〔Ｖ〕−（６）〔VI−４〕、〔II−２〕−〔Ｖ〕−（１
７）〔VI−４〕、

【００３８】〔II−３〕−〔III 〕−（３）〔VI−
１〕、〔II−３〕−〔III 〕−（６）〔VI−１〕、〔II
−３〕−〔III 〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−３〕−
〔III 〕−（３）〔VI−２〕、〔II−３〕−〔III 〕−
（６）〔VI−２〕、〔II−３〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−２〕、〔II−３〕−〔III 〕−（３）〔VI−
３〕、〔II−３〕−〔III 〕−（６）〔VI−３〕、〔II
−３〕−〔III 〕−（１７）〔VI−３〕、〔II−３〕−
〔III 〕−（３）〔VI−４〕、〔II−３〕−〔III 〕−
（６）〔VI−４〕、〔II−３〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−４〕、〔II−３〕−〔IV〕−（３）〔VI−１〕、
〔II−３〕−〔IV〕−（６）〔VI−１〕、〔II−３〕−
〔IV〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−３〕−〔IV〕−
（３）〔VI−２〕、〔II−３〕−〔IV〕−（６）〔VI−
２〕、〔II−３〕−〔IV〕−（１７）〔VI−２〕、〔II
−３〕−〔IV〕−（３）〔VI−３〕、〔II−３〕−〔I
V〕−（６）〔VI−３〕、〔II−３〕−〔IV〕−（１
７）〔VI−３〕、〔II−３〕−〔IV〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−３〕−〔IV〕−（６）〔VI−４〕、〔II−
３〕−〔IV〕−（１７）〔VI−４〕、

【００３９】〔II−３〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−１〕、
〔II−３〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−１〕、〔II−３〕−
〔Ｖ〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−３〕−〔Ｖ〕−
（３）〔VI−２〕、〔II−３〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−
２〕、〔II−３〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI−２〕、〔II
−３〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−３〕、〔II−３〕−
〔Ｖ〕−（６）〔VI−３〕、〔II−３〕−〔Ｖ〕−（１
７）〔VI−３〕、〔II−３〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−３〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−４〕、〔II−
３〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI−４〕、〔II−４〕−〔II
I 〕−（３）〔VI−１〕、〔II−４〕−〔III 〕−
（６）〔VI−１〕、〔II−４〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−１〕、〔II−４〕−〔III 〕−（３）〔VI−
２〕、〔II−４〕−〔III 〕−（６）〔VI−２〕、〔II
−４〕−〔III 〕−（１７）〔VI−２〕、〔II−４〕−
〔III 〕−（３）〔VI−３〕、〔II−４〕−〔III 〕−
（６）〔VI−３〕、〔II−４〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−３〕、〔II−４〕−〔III 〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−４〕−〔III 〕−（６）〔VI−４〕、〔II
−４〕−〔III 〕−（１７）〔VI−４〕、

【００４０】〔II−４〕−〔IV〕−（３）〔VI−１〕、
〔II−４〕−〔IV〕−（６）〔VI−１〕、〔II−４〕−
〔IV〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−４〕−〔IV〕−
（３）〔VI−２〕、〔II−４〕−〔IV〕−（６）〔VI−
２〕、〔II−４〕−〔IV〕−（１７）〔VI−２〕、〔II
−４〕−〔IV〕−（３）〔VI−３〕、〔II−４〕−〔I
V〕−（６）〔VI−３〕、〔II−４〕−〔IV〕−（１
７）〔VI−３〕、〔II−４〕−〔IV〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−４〕−〔IV〕−（６）〔VI−４〕、〔II−
４〕−〔IV〕−（１７）〔VI−４〕、〔II−４〕−
〔Ｖ〕−（３）〔VI−１〕、〔II−４〕−〔Ｖ〕−
（６）〔VI−１〕、〔II−４〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI
−１〕、〔II−４〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−２〕、〔II
−４〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−２〕、〔II−４〕−
〔Ｖ〕−（１７）〔VI−２〕、〔II−４〕−〔Ｖ〕−
（３）〔VI−３〕、〔II−４〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−
３〕、〔II−４〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI−３〕、〔II
−４〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−４〕、〔II−４〕−
〔Ｖ〕−（６）〔VI−４〕、〔II−４〕−〔Ｖ〕−（１
７）〔VI−４〕、

【００４１】〔II−５〕−〔III 〕−（３）〔VI−
１〕、〔II−５〕−〔III 〕−（６）〔VI−１〕、〔II
−５〕−〔III 〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−５〕−
〔III 〕−（３）〔VI−２〕、〔II−５〕−〔III 〕−
（６）〔VI−２〕、〔II−５〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−２〕、〔II−５〕−〔III 〕−（３）〔VI−
３〕、〔II−５〕−〔III 〕−（６）〔VI−３〕、〔II
−５〕−〔III 〕−（１７）〔VI−３〕、〔II−５〕−
〔III 〕−（３）〔VI−４〕、〔II−５〕−〔III 〕−
（６）〔VI−４〕、〔II−５〕−〔III 〕−（１７）
〔VI−４〕、〔II−５〕−〔IV〕−（３）〔VI−１〕、
〔II−５〕−〔IV〕−（６）〔VI−１〕、〔II−５〕−
〔IV〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−５〕−〔IV〕−
（３）〔VI−２〕、〔II−５〕−〔IV〕−（６）〔VI−
２〕、〔II−５〕−〔IV〕−（１７）〔VI−２〕、〔II
−５〕−〔IV〕−（３）〔VI−３〕、〔II−５〕−〔I
V〕−（６）〔VI−３〕、〔II−５〕−〔IV〕−（１
７）〔VI−３〕、〔II−５〕−〔IV〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−５〕−〔IV〕−（６）〔VI−４〕、〔II−
５〕−〔IV〕−（１７）〔VI−４〕、

【００４２】〔II−５〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−１〕、
〔II−５〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−１〕、〔II−５〕−
〔Ｖ〕−（１７）〔VI−１〕、〔II−５〕−〔Ｖ〕−
（３）〔VI−２〕、〔II−５〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−
２〕、〔II−５〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI−２〕、〔II
−５〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−３〕、〔II−５〕−
〔Ｖ〕−（６）〔VI−３〕、〔II−５〕−〔Ｖ〕−（１
７）〔VI−３〕、〔II−５〕−〔Ｖ〕−（３）〔VI−
４〕、〔II−５〕−〔Ｖ〕−（６）〔VI−４〕、〔II−
５〕−〔Ｖ〕−（１７）〔VI−４〕。

【００４３】前記の化合物は、それ自体既知の方法によ
り製造することができる。例えば、まず、式（III ）〜
（Ｖ）で示されるリンカーを式（VI）で示されるステロ
イド化合物と結合せしめ、次にその結合生成物とテトラ
サイクリン系物質とを結合させればよい。式（III ）〜
（Ｖ）のリンカーと式（VI）のステロイド化合物の３位
と結合は、例えば次の反応式により行われる。

【００４４】

【化１９】

【００４５】さらに、Ｒ₅ ′がヒドロキシル基であり、
Ｒ₆ ′が水素又はエチニル基である化合物は例えば次の
反応により得ることができる。

【００４６】

【化２０】

【００４７】また、式（III ）〜（Ｖ）のリンカーと式
（VI）のステロイド化合物の６位とを結合させるには、
ステロイド化合物の６位に＝Ｏ基を導入した後、次の反
応を行えばよい。

【００４８】

【化２１】

【００４９】次に、リンカーとステロイド化合物との反
応生成物に、テトラサイクリン化合物を結合せしめるに
は、リンカーのＮ原子とテトラサイクリン化合物のアミ
ド基のＮ原子とをホルムアルデヒドにより架橋すればよ
い。本発明の医薬は、経口投与、又は非経口投与、例え
ば静脈内注射、皮下注射、筋肉内注射、腹腔内注射、等
により投与することができる。ヒトに対する有効日用量
は、経口投与において０．２〜２００mgであり、非経口
投与において０．１〜１００mgである。本発明の化合物
は毒性が極めて低く、例えば、実施例１において製造さ
れる化合物１のマウスでの経口投与におけるＬＤ₅₀は約
１４３mg／kgである。

【００５０】本発明の医薬は、投与経路に応じた常用の
剤形をとることができる。例えば、経口投与の場合は、
カプセル剤、錠剤、顆粒剤、粉剤、液剤等の形態をとる
ことができる。これらは常法に従って製造することがで
きる。例えば、液剤は、本発明の活性物質を適当な液体
媒体、例えば水性緩衝液等に溶解又は懸濁すればよい。
また、粉剤は、本発明の活性成分を粉末状増量剤、例え
ば、澱粉、例えばトウモロコシ澱粉、及び／又は糖、例
えばラクトース等と混合することにより製造される。

【００５１】錠剤は、増量剤、例えば上記の増量剤及び
結合剤、例えば澱粉糊と混合した後、錠剤形成機により
圧縮することにより製造される。顆粒剤は、活性成分
を、増量剤、結合剤等と混合して、液体、例えば水及び
／又はグリセリン等と共にこね合わせた後、篩を通して
顆粒化し、それを乾燥することにより製造される。カプ
セル剤は、前記の粉末又は顆粒剤を適当な大きさのカプ
セルに封入することにより製造される。

【００５２】非経口投与剤は、活性成分を注射用媒体、
例えば生理食塩水、緩衝液、例えばリン酸緩衝液、等に
溶解又は懸濁することにより製造される。非経口投与剤
はまた、使用前に溶解又は懸濁するための凍結乾燥物で
あってもよく、凍結乾燥のための担体として、例えばラ
クトース等の糖類、あるいはその他の常用の凍結乾燥担
体を用いることができる。

【００５３】

【実施例】以下に、本発明による化合物の具体的な実施
例を述べる。但し、本発明の主体範囲はこれらの実施例
に限定されるものではない。合成例１ ： １−１．３−クロルエトキシ−１７−オキシエストラ−
１，３，５（１０）−トリエン（化合物１−１）の合
成：エストロン２７．１ｇ、３−クロロエトキシ−１７
−オキシエストラ−１，３，５（１０）−トリエン２
２．２ｇ及び少量のトリエチルアニリン塩酸塩を混合し
た、トルエン溶液の中に、ＮａＯＨ溶液を加え、pHを約
１０に調整し、４時間反応させ、溶剤を蒸発させる。固
型物をアルコールで結晶させ、化合物（１−１、Ｒ₇ ＝
Ｈ）が得られる。その時の収率は７９％、ｍｐ８６−８
８℃、元素分析はＣ７２．４０ Ｈ．４３ Ｃ１１０．
７１である。

【００５４】１−２．Ｎ−〔１７−オキシ−エストラ−
１，３，５（１０）−トリエン−３−オキシエチル〕ピ
ペラジン（化合物１−２）の合成：上記化合物（１−
１）７．８ｇ、無水ピペラジン４６．６ｇ及びジメチル
・ホルムアミド（ＤＭＦ）１２０mlを、８０〜１００℃
で５時間反応させ、ＤＭＦを蒸発、除去させ、得られた
固型物を、アルコールとアセトンで再び結晶させ、白色
結晶性化合物（VI）を得る。収率は８５％、ｍｐは１４
０−１４２℃、元素分析はＣ７５．１０ Ｈ９．２０
Ｎ７．４０である。

【００５５】１−３．Ｎ−４−〔１７−オキシ−エスト
ラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オキシエチ
ル〕−ピペラジン−１−メチレン−テトラサイクリン
（化合物１−３）の合成：上記化合物（１−２）３．８
ｇ、メタホルムアルデヒド０．０３ｇ、イソプロパノー
ル１５mlを、４０℃で２時間反応させ、テトラサイクリ
ン３．５ｇを加え、撹拌し、５時間反応させる。反応が
終わった後、濾過し、イソプロパノール及びエチルエー
テルで洗浄する。その後黄色の固型物（化合物１−３）
（そのＲ₁＝Ｒ₄ ＝Ｈ，Ｒ₂ ＝ＯＨ，Ｒ₃ ＝ＣＨ₃ ）が
得られる。収率は９５％、ｍｐは１６０℃（ｄｅｃ）、
元素分析はＣ６７．２１ Ｈ７．１２ Ｎ６．６７であ
る。

【００５６】

【化２２】

【００５７】合成例２： ２−１．Ｎ−〔１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，
３，５（１０）−トリエン−３−オキシエチル）ピペラ
ジン（化合物２−１）の合成：実施例１の化合物（１−
２）３．８ｇをメチルアルコール中に溶かし、アルカリ
条件下で、ポタシウムボロハイドレート０．５ｇを加え
て、加熱回流して、３時間反応させる。反応液を酸で中
和させ、メチルアルコールを蒸発し、得られた固型粗成
分を、アルコールで再結晶させる。最後に白色の結晶
（化合物２−１、Ｒ₇ ＝Ｈ）が得られる。収率は９１
％、ｍｐは１４１−１４２℃、元素分析はＣ７５．２１
Ｈ９．２３ Ｎ７．１４である。

【００５８】２−２．Ｎ−４−〔１７β−ヒドロキシ−
エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オキシ
エチル〕−ピペラジン−１−メチレン−テトラサイクリ
ン（化合物２−２）の合成：上記化合物（２−１）３．
８４ｇ、メタホルムアルデヒド０．０３ｇ、イソプロパ
ノール２０mlを、４０℃で２時間反応させ、テトラサイ
クリン３．５ｇを加えて、撹拌し、５時間反応させる。
反応終了後、濾過し、イソプロパノール及びエチルエー
テルで洗浄する。その後淡黄色の固型物（化合物２−
２）（Ｒ₁ ＝Ｒ₄ ＝Ｈ，Ｒ₂ ＝ＯＨ，Ｒ₃ ＝ＣＨ₃ ）を
得る。収率は９５％、ｍｐは１６５℃（ｄｅｃ）、元素
分析はＣ６７．３０ Ｈ７．３４ Ｎ６．５４である。

【００５９】

【化２３】

【００６０】合成例３： Ｎ−４−〔１７β−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５
（１０）−トリエン−３−オキシエチル〕−１−ピペラ
ジン−１−メチレン−オキシテトラサイクリン（化合物
３−１）の合成：実施例２の化合物（２−１）３．８
ｇ、メタホルムアルデヒド０．０３ｇ、イソプロパノー
ル２０mlを、４０℃で２時間反応させ、テラマイシン
３．５ｇを加え、撹拌し、５時間反応させる。反応後は
実施例１−３と同様に処理して、淡黄色の固型物（化合
物３）（Ｒ₁ ＝Ｒ₂ ＝ＯＨ，Ｒ₃ ＝ＣＨ₃ ，Ｒ₄ ＝Ｈ）
を得る。収率は９３％、ｍｐは１７１℃（ｄｅｃ）、元
素分析はＣ６５．６２ Ｈ７．１０ Ｎ６．６７であ
る。

【００６１】

【化２４】

【００６２】合成例４： ４−１．ビス−Ｎ，Ｎ−〔１７−オキシ−エストラ−
１，３，５（１０）−トリエン−３−オキシエチル〕ア
ミン（化合物４−１）の合成：塩化マスタゲン３．６
ｇ、エストロン１２ｇ、トリエチルアニリン４ｇ、水、
トルエン等を、撹拌しながら、ＮａＯＨ溶液を加える。
その後５時間回流させた後、溶剤を蒸発させる。その固
型分をアルコールで再結晶させた後、目的物を得る。収
率は７２％、ｍｐは２５６〜２５９℃、元素分析はＣ７
８．５０ Ｈ８．６０ Ｎ２．３１である。

【００６３】４−２．ビス−Ｎ，Ｎ−〔１７−オキシ−
エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オキシ
エチル〕アミノメチレン−テトラサイクリン（化合物４
−２）の合成：上記化合物（４−１）６．１ｇ、メタホ
ルムアルデヒド０．０３ｇ、イソプロパノール２０ml
を、４０℃で２時間反応させた後、テトラサイクリン
３．５ｇを加え、撹拌して８時間反応させる。反応終了
後、例１−３の如く、淡黄色の固型物（化合物４−２）
（Ｒ₁ ＝Ｒ₄ ＝Ｈ，Ｒ₂ ＝ＯＨ，Ｒ₃ ＝ＣＨ₃ ）が得ら
れる。収率は６８％、ｍｐは１８３℃（ｄｅｃ）、元素
分析はＣ７１．１０ Ｈ７．２１ Ｎ３．８９である。
その構造は以下の分子式であらわされる。

【００６４】

【化２５】

【００６５】合成例５： ５−１．ビス−Ｎ，Ｎ−〔１７β−ヒドロキシ−エスト
ラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オキシエチ
ル〕アミン（化合物５−１）の合成：上記化合物（４−
１）６．１ｇにメチルアルコールを加え、アルカリ条件
下で、ポタシウムボロハイドレート０．５を加え、回流
して、５時間反応させる。次に酸で中和させ、メチルア
ルコールを蒸発する。固体はアセトンとアルコールの溶
液で精製する。得た化合物（４−１）中の、エストロン
−１７−ケトンは、−１７β−水酸基の白色物に還元す
る。収率は８２％、ｍｐは１９３〜１９７℃、元素分析
はＣ７８．４１ Ｈ８．５１ Ｎ２．３３である。

【００６６】５−２．ビス−Ｎ，Ｎ−〔１７β−ヒドロ
キシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−
オキシエチル〕アミノメチレン−テトラサイクリン（化
合物５−２）の合成：上記化合物（５−１）５．４ｇ、
メタホルムアルデヒド０．０３ｇ、イソプロパノール２
０mlを、４０℃で２時間反応させた後、テトラサイクリ
ン３．５ｇを加え、撹拌して８時間反応させる。反応終
了後、実施例１−３の如く、淡黄色の固型物（化合物５
−２）（Ｒ₁ ＝Ｒ₄ ＝Ｈ，Ｒ₂ ＝ＯＨ，Ｒ₃ ＝ＣＨ₃ ）
が得られる。収率は９４％、ｍｐは１７１℃（ｄｅ
ｃ）、元素分析はＣ７１．０２ Ｈ７．０２ Ｎ３．９
８である。その構造は以下の分子式であらわされる。

【００６７】

【化２６】

【００６８】合成例６： ６−１．ビス−Ｎ，Ｎ−〔１７β−ヒドロキシ−１７α
−エチニル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン
−３−オキシエチル〕アミン（化合物６−１）の合成：
実施例４の化合物（４−１）６．１ｇをテトラヒドロフ
ラン１００ml及び水酸化カリウム末１．０ｇの中に溶解
し、激しく撹拌して、０℃の条件下で、アセチレンガス
を導入し、完全に反応させる。それから、酸でpH４に中
和させ、溶剤を蒸発する。その後、水で洗浄し、乾燥さ
せる。また、アルコール及びクロロホルムで再結晶さ
せ、白色固型物（６−１）を得る。収率は７８％、ｍｐ
は２０１〜２０５℃、元素分析はＣ７９．２１ Ｈ８．
５８ Ｎ２．１８である。その構造は以下の分子式であ
らわされる。

【００６９】

【化２７】

【００７０】６−２．上記の化合物（６−１）６．６
ｇ、メタホルムアルデヒド０．０３ｇ、イソプロパノー
ル２０mlを、６０℃で２時間反応させた後、テトラサイ
クリン３．４ｇを加え、撹拌して８時間反応させる。反
応終了後、例１−３の如く、淡黄色の固型物（化合物６
−２）ビス−Ｎ，Ｎ−〔１７β−ヒドロキシ−１７α−
エチニル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−
３−オキシエチル〕アミノメチレン−テトラサイクリン
（Ｒ₁ ＝Ｒ₄ ＝Ｈ，Ｒ₂ ＝ＯＨ，Ｒ₃ ＝ＣＨ₃ ）を得
る。収率は９３％、ｍｐは１７８℃（ｄｅｃ）、元素分
析はＣ７２．１ Ｈ７．１２ Ｎ３．９０である。その
構造は以下の分子式であらわされる。

【００７１】

【化２８】

【００７２】合成例７： ７−１．Ｎ−〔１７−オキシ−エストラ−１，３，５
（１０）−トリエン−３−オキシエチル〕−Ｎ−メチル
アミン（化合物７−１）の合成：エストロン２．７ｇ、
クロロエチルメチルアミン１ｇ、及び少量のトリエチル
アニリンを、トルエン溶液に混和し、水酸化ナトリウム
溶液を加え、pHを約１０にし、４時間反応させる。その
後、溶剤を蒸発させ、アルコールで固型物を再結晶さ
せ、化合物（７−１、Ｒ₇ ＝Ｈ）を得る。収率は７１
％、ｍｐは２６２〜２６６℃、元素分析はＣ７５．２４
Ｈ９．４１ Ｎ４．２８である。その構造は以下の分
子式であらわされる。

【００７３】

【化２９】

【００７４】７−２．上記の化合物（７−２）３．３
ｇ、メタホルムアルデヒド０．０３ｇ、イソプロパノー
ル２０mlを、６０℃で２時間反応させた後、テトラサイ
クリン３．５ｇを加え、撹拌して８時間反応させる。反
応終了後、例１−３の如く、淡黄色の固型物（化合物７
−２）Ｎ−〔１７−オキシ−エストラ−１，３，５（１
０）−トリエン−３−オキシエチル〕−Ｎ−メチルアミ
ノメチレン−テトラサイクリン（Ｒ₁ ＝Ｒ₄ ＝Ｈ，Ｒ₂
＝ＯＨ，Ｒ₃ ＝ＣＨ₃ ）を得る。収率は９０％、ｍｐは
１９０℃（ｄｅｃ）、元素分析はＣ６８．８ Ｈ７．２
２ Ｎ３．６２である。その構造は以下の分子式であら
わされる。

【００７５】

【化３０】

【００７６】合成例８： ８−１．Ｎ−〔３，１７β−ジヒドロキシ−エストラ−
１，３，５（１０）−トリエン−６−アミノエチル〕ピ
ペラジン（化合物８−１）の合成：化合物（８−０）
５．２ｇをテトラヒドロフラン１２０mlの中に溶かし、
アミノエチル・ピペラジン３．２ｇを加え、回流し、２
時間反応させる。ＴＨＦを蒸発し、除去させ、メチルア
ルコール１００mlとぎ酸アンモニウム２．８ｇ加え、更
に回流し、３時間反応させ、メチルアルコールを蒸発
し、除去させ、残りをアルコールで再結晶させ、化合物
８−１を得る。ｍｐ：１７２〜１７７℃。

【００７７】８−２．Ｎ−４−〔３，１７β−ジヒドロ
キシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−６−
アミノエチル〕−ピペラジン−１−メチレン−テトラサ
イクリン（化合物８−２）の合成：上記化合物（８−
１）４．１ｇ、メタホルムアルデヒド０．０３ｇ、イソ
プロノール２０mlを混合し、５０℃で２時間反応させ、
テトラサイクリン３．５ｇを加え、撹拌し、５時間反応
させる。反応が終了後、濾過し、イソプロパノールとエ
チルエーテルで洗浄し、真空で乾燥させ、淡黄色の固形
物（化合物８−２）を得る。ｍｐは１６７℃（ｄｅ
ｃ）、収率は８１．２％である。

【００７８】

【化３１】

【００７９】化合物（８−０）は次の様にして製造す
る。 １．１７β−エストロアルキノールの調製 エストロン４ｇをメチルアルコールに溶かし３０℃位の
状態に、ポタシウムボロハイドレート０．８ｇ、水酸化
ナトリウム１．７６ｇ、水８．８mlの混合液を点滴して
入れる。それを終わったご２時間反応させ、稀酢酸で中
和し、中性までさせ、水で薄める。固体を生成した後、
濾過、水洗い、乾燥を行う。また、含水アルコールで再
結晶させ、白色の結晶体を得る。ｍｐ１７３〜１７４
℃、収率は９７．２％である。

【００８０】２．１７β−エストロアルキノール・ジア
セテートの調製 １７β−エストロアルキノール１０ｇをピリテインに溶
かし、３５ml酢酸カンを入れ、１時間回流、反応させ、
氷水に流して固体を生成した後、濾過、乾燥を行う。無
水アルコールで再結晶をさせ、白色の結晶体を得る。ｍ
ｐ１２６〜１２８℃、収率は９７％である。

【００８１】３．６−カルボニル−１７β−エストロア
ルキノール・ジアセテート（化合物（XII)) の調製 １７β−エストロアルキノール・ジアセテート５ｇをベ
ンゼンに溶かし、冷却の状態に０．４５ｇ三酸化クロム
を点滴して入れ、３０mlの氷酢酸、２０mlの酢酸と３０
mlのベンゼン混合液に溶かす。終了後、暫く撹拌を行
い、水の中に流して行き、エチルエーテルで抽出し、飽
和炭酸水素ナトリウム溶液で洗い、また、水洗を行う。
乾燥、濃縮した後、シリカゲルで分離させ、産物を得
る。ｍｐ１７３〜１７５℃、収率は４０％である。

【００８２】合成例９： Ｎ−４−〔１７−オキシ−エストラ−１，３，５（１
０）−トリエン−３−オキシエチル〕−ピペラジン−１
−メチレン−ドキシサイクリン・ＨＣｌ（化合物９）合
成：化合物（１−２）２．２ｇ、ポリホルムアルデヒド
０．２０ｇ、イソプロパノール１００mlを６０℃で１．
５時間加熱、撹拌し、塩酸ドキシサイクリン３ｇを加
え、６０℃で保温し、２．５時間撹拌する。反応後、濾
過し、イソプロパノールとエチルエーテルで洗浄し、乾
燥させ、淡黄色の固形物（化合物９）ｍｐ１７２℃（ｄ
ｅｃ．）を得る。収率は８７％である。

【００８３】

【化３２】

【００８４】合成例１０： Ｎ−４−〔１７−オキシ−エストラ−１，３，５（１
０）−トリエン−３−オキシエチル〕−ピペラジン−１
−メチレン−オキシテトラサイクリン（化合物１０）の
合成：化合物（１−２）０．９１ｇ、ポリホルムアルデ
ヒド８０mg、イソプロパノール５０mlを６０℃で撹拌
し、２時間反応させ、テラマイシン１．０ｇを加え、６
０℃で保温し、３時間撹拌する。濾過し、イソプロパノ
ールとエチルエーテルで洗浄し、乾燥させ、淡黄色の固
形物（化合物１０）ｍｐ１７５℃（ｄｅｃ．）を得る。
収率は８９％である。

【００８５】

【化３３】

【００８６】合成例１１： Ｎ−４−〔１７−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５
（１０）−トリエン−３−エトキシエチル〕−ピペラジ
ン−１−メチレン−テトラサイクリン（化合物１１）の
合成：Ｎ−（１７ハイドロキシエストロン１，３，５
（１０）トリエン−３−オキシエチル）ピペラジン４．
１ｇ、ポリホルムアルデヒト０．５ｇ、イソプロパノー
ル５０mlを６０℃で撹拌し、２時間反応させ、テトラサ
イクリン４ｇを加え、４０℃〜４５℃で保温し、３時間
反応させ、濾過し、イソプロパノールとエチルエーテル
で洗浄し、淡黄色の固形物（化合物１１）ｍｐ１５４℃
（ｄｅｃ．）を得る。収率は６８．６％である。

【００８７】

【化３４】

【００８８】合成例１２： １７−ヒドロキシ−アンドロスト−４−エン−３−オキ
シエチルアミノメチレン−テトラサイクリンの合成

【００８９】

【化３５】

【００９０】３−アミノエトキシ−１７−ヒドロキシ−
アンドロスト−４−エン３．３ｇ、メタホルムアルデヒ
ド０．３ｇ、イソプロパノール４０mlを、６０℃で４時
間反応させ、テトラサイクリン４．５ｇを加え、撹拌
し、５時間反応させ、濾過し、イソプロパノール及びエ
チルエーテルで洗浄する。その後黄色の固型物が得られ
る。収率は９２％、元素分析はＣ６６．７８，Ｈ７．４
１，Ｎ５．３８である。

【００９１】合成例１３： １７−ヒドロキシ−アンドロスト−４−エン−３−オン
−６−メチレンオキシエチルアミノメチレン−テトラサ
イクリンの合成

【００９２】

【化３６】

【００９３】６−アミノエトキシメチレン−１７−ヒド
ロキシ−アンドロスト−４−エン−３−オン３．６ｇ、
メタホルムアルデヒド０．３ｇ、テトラサイクリン４．
５ｇ、アセトン３５mlを、光を避け、常温で２４時間撹
拌し、反応させる。反応終了後、濾過し、アセトン及び
エチルエーテルで洗浄する。その後黄色の固型物が得ら
れる。収率は８６％、元素分析はＣ６７．９０，Ｈ７．
６７，Ｎ５．１８である。

【００９４】合成例１４： １７−ヒドロキシ−アンドロスタン−３−オキシエチル
アミノメチレン−テトラサイクリンの合成

【００９５】

【化３７】

【００９６】３−アミノエトキシ−１７−ヒドロキシ−
アンドロスタン３．３５ｇ、メタホルムアルデヒド０．
３ｇ、テトラサイクリン４．５ｇ、アセトン３０mlを、
光を避け、常温で３０時間撹拌し、反応させる。反応終
了後、濾過し、アセトン及びエチルエーテルで洗浄す
る。その後黄色の固型物が得られる。収率は８５％、元
素分析はＣ６６．６１，Ｈ７．６８，Ｎ５．４０であ
る。

【００９７】合成例１５： １７β−ヒドロキシ−１８−メチル−１９−ノルアンド
ロスト−４−エン−３−オン−１７α−ブチニレンアミ
ノメチレン−テトラサイクリンの合成

【００９８】

【化３８】

【００９９】１７α−アミノエチルエチニル−１７β−
ヒドロキシ−１８−メチル−１９−ノルアンドロスト−
４−エン−３−オン３．７ｇ、メタホルムアルデヒド
０．３ｇ、イソプロパノール３０mlを、６０℃で４時間
反応させ、テトラサイクリン４．５ｇを加え、撹拌し、
６時間反応させる。反応終了後、濾過し、イソプロパノ
ール及びエチルエーテルで洗浄する。その後黄色の固型
物が得られる。収率は８５％、元素分析はＣ６８．５
１，Ｈ７．１１，Ｎ５．１７である。

【０１００】合成例１６： １６α，１７β−ジヒドロキシ−エストラ−１，３，５
（１０）−トリエン−３−オキシエチルアミノメチレン
−テトラサイクリンの合成

【０１０１】

【化３９】

【０１０２】３−アミノエトキシ−１６α，１７β−ジ
ヒドロキシエストラ−１，３，５（１０）−トリエン
３．３ｇ、メタホルムアルデヒド０．３ｇ、イソプロパ
ノール５０mlを、８０℃で２時間反応させ、４０℃まで
冷却して、テトラサイクリン４．５ｇを加え、６時間反
応させる。反応終了後、濾過し、イソプロパノール及び
エチルエーテルで洗浄する。その後黄色の固型物が得ら
れる。収率は８５％、元素分析はＣ６５．４８，Ｈ６．
８２，Ｎ５．１３である。

【０１０３】合成例１７： １８−メチル−１７−オキシ−エストラ−１，３，５
（１０）−トリエン−３−オキシエチルアミノメチレン
−テトラサイクリンの合成

【０１０４】

【化４０】

【０１０５】３−アミノエトキシ−１８−メチル−エス
トラ−１，３，５（１０）−トリエン−１７−オン３．
３ｇ、メタホルムアルデヒド０．３ｇ、アセトン５０ml
を、３０℃で光を避け、４８時間反応させる。反応終了
後、濾過し、イソプロパノール及びエチルエーテルで洗
浄する。その後黄色の固型物が得られる。収率は８２
％、元素分析はＣ６７．４５，Ｈ６．８６，Ｎ５．２７
である。

【０１０６】合成例１８： １７α−ヒドロキシ−プレグナ−４−エン−２０−オン
−３−オキシエチルアミノメチレン−テトラサイクリン
の合成

【０１０７】

【化４１】

【０１０８】３−アミノエトキシ−１７α−ヒドロキシ
−プレグナ−４−エン−２０−オン３．８ｇ、メタホル
ムアルデヒド０．３ｇ、イソプロパノール５０mlを、６
０℃まで加熱し、２時間反応させ、４０℃まで冷却し
て、テトラサイクリン４．５ｇを加え、６０℃で５時間
反応させる。反応終了後、濾過し、アセトン及びエチル
エーテルで洗浄する。その後黄色の固型物が得られる。
収率は８７％、元素分析はＣ６６．５２，Ｈ７．３７，
Ｎ５．０１である。

【０１０９】合成例１９： プレグナ−５−エン−２０−オン−３−オキシエチルア
ミノメチレン−テトラサイクリンの合成

【０１１０】

【化４２】

【０１１１】３−アミノエトキシ−プレグナ−５−エン
−２０−オン３．６ｇ、メタホルムアルデヒド０．３
ｇ、イソプロパノール４０mlを、８０℃まで加熱し、２
時間反応させ、４０℃まで冷却して、テトラサイクリン
４．５ｇを加え、４０℃で６時間反応させる。反応終了
後、濾過し、イソプロパノール及びエチルエーテルで洗
浄する。その後固型物が得られる。収率は９３％、元素
分析はＣ６７．７０，Ｈ７．３６，Ｎ５．０５である。

【０１１２】合成例２０： １７−ヒドロキシ−アンドロスト−１，４−ジエン−３
−オキシエチルアミノメチレン−ドキシサイクリン

【０１１３】

【化４３】

【０１１４】３−アミノ−エトキシ−１７β−ヒドロキ
シ−アンドロスト−１．４−ジエン３．３ｇ、メタホル
ムアルデヒド０．３ｇ、イソプロパノール５０mlを、８
０℃で２時間反応させ、４０℃まで冷却して、塩酸ドキ
シサイクリン４．５ｇを加え、４時間反応させる。反応
終了後、イソプロパノール及びエチルエーテルで洗浄す
る。その後黄色の固型物が得られる。収率は８９％、元
素分析はＣ６７．２３，Ｈ７．２５，Ｎ５．２８であ
る。

【０１１５】合成例２１： １７α−メチル−１７β−ヒドロキシ−アンドロスト−
４−エン−３−オン−６−メチレンオキシエチルアミノ
メチレン−ドキシサイクリンの合成

【０１１６】

【化４４】

【０１１７】６−アミノ−エトキシメチレン−１７α−
メチル−１７β−ヒドロキシ−アンドロスト−４−エン
−３−オン３．８ｇ、メタホルムアルデヒド０．３ｇ、
イソプロパノール２５mlを、６０℃で４時間反応させ、
加熱反応後、４０℃まで冷却して、塩酸ドキシサイクリ
ン４．５ｇを加え、８時間反応させる。反応終了後、イ
ソプロパノール及びエチルエーテルで洗浄する。その後
黄色の固型物が得られる。収率は８６％、元素分析はＣ
６３．６２，Ｈ７．０２，Ｎ５．１３である。

【０１１８】合成例２２： １７α−メチル−１７β−ヒドロキシ−アンドロスタン
−３−オン−２−オキシエチルアミノメチレン−ドキシ
サイクリンの合成

【０１１９】

【化４５】

【０１２０】２−アミノエトキシ−１７α−メチル−１
７β−ヒドロキシ−アンドロスタン−３−オン３．６
ｇ、メタホルムアルデヒド０．３ｇ、イソプロパノール
３０mlを、６０℃で２時間反応させ、塩酸ドキシサイク
リン４．５ｇを加え、反応させる。反応終了後、イソプ
ロパノール及びエチルエーテルで洗浄する。その後黄色
の固型物が得られる。収率は９１％、元素分析はＣ６
５．９１，Ｈ７．５１，Ｎ５．０７である。

【０１２１】合成例２３： １７α−メチル−１７β−ヒドロキシ−１９−ノルアン
ドロスト−４−エン−３−オン−６−メチレンオキシエ
チルアミノメチレン−ドキシサイクリンの合成

【０１２２】

【化４６】

【０１２３】６−アミノエトキシメチレン−１７α−メ
チル−１７β−ヒドロキシ−１９−ノルアンドロスト−
４−エン−３−オン３．７ｇ、メタホルムアルデヒド
０．３ｇ、アセトン５０mlを、３０℃で２時間反応さ
せ、塩酸ドキシサイクリン４．５ｇを加え、３０時間反
応させる。反応終了後、濾過し、イソプロパノール及び
エチルエーテルで洗浄する。その後黄色の固型物が得ら
れる。収率は８７％、元素分析はＣ６３．６４，Ｈ７．
０３，Ｎ５．１８である。

【０１２４】合成例２４： １７α−エチニル−１７β−ヒドロキシ−アンドロスト
−５（１０）−エン−３−オン−６−メチレンオキシエ
チルアミノメチレン−ドキシサイクリンの合成

【０１２５】

【化４７】

【０１２６】６−アミノ−エトキシメチレン−１７β−
エチニル−１７β−ヒドロキシ−アンドロスト−５（１
０）−エン−３−オン３．７ｇ、メタホルムアルデヒド
０．３ｇ、イソプロパノール５０mlを、６０℃で２時間
反応させ、塩酸ドキシサイクリン４．５ｇを加え、４０
℃で８時間反応させる。反応終了後、濾過し、イソプロ
パノール及びエチルエーテルで洗浄する。その後黄色の
固型物が得られる。収率は８７％、元素分析はＣ６６．
８１，Ｈ７．０６，Ｎ５．０１である。

【０１２７】合成例２５： １７α−プロピニレン−１７β−ヒドロキシ−１１−ジ
メチルアミノフェニル−アンドロスト−４，９−ジエン
−３−オン−６−メチレンオキシエチルアミノメチレン
−ドキシサイクリンの合成

【０１２８】

【化４８】

【０１２９】６−アミノエトキシメチリジン、６−アミ
ノ−エトキシ−メチレン−１１−（４′−ジメチルアミ
ノフェニル）−１７α−プロピニル−１７β−ヒドロキ
シ−アンドロスト−４，９−ジエン−３−オン５ｇ、メ
タホルムアルデヒド０．３ｇ、イソプロパノール４０ml
を、８０℃で２時間加熱反応させ、４０℃まで冷却し
て、塩酸ドキシサイクリン４．５ｇを加え、６時間反応
させる。反応終了後、濾過し、イソプロパノール及びエ
チルエーテルで洗浄する。その後黄色の固型物が得られ
る。収率は９０％、元素分析はＣ６８．７６，Ｈ６．８
８，Ｎ５．７２である。

【０１３０】合成例２６： １６，１７−イソプロピリデン−１６，１７−ジオキシ
−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−オキ
シエチルアミノメチレン−ドキシサイクリンの合成

【０１３１】

【化４９】

【０１３２】１６，１７−イソプロピリデン−１６，１
７−ジオキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエ
ン−３−アミノエチルエーテル３．７ｇ、メタホルムア
ルデヒド０．３ｇ、イソプロパノール５０mlを、６０℃
で２時間反応させ、塩酸ドキシサイクリン４．５ｇを加
え、８時間反応させる。反応終了後、濾過し、イソプロ
パノール及びエチルエーテルで洗浄する。その後黄色の
固型物が得られる。収率は９５％、元素分析はＣ６６．
６１，Ｈ６．９０，Ｎ５．１８である。

【０１３３】合成例２７： ３，１７−ジヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１
０）−トリエン−１７−アセテート−７−メチレンオキ
シエチルアミノメチレン−ドキシサイクリンの合成

【０１３４】

【化５０】

【０１３５】７−アミノエチルオキシメチレン−エスト
ラ−３．１７−ジエン−１７−アセテート３．８ｇ、メ
タホルムアルデヒド０．３ｇ、イソプロパノール５０ml
を、６０℃で４時間反応させ、塩酸ドキシサイクリン
４．５ｇを加え、４時間反応させる。反応終了後、濾過
し、イソプロパノール及びエチルエーテルで洗浄する。
その後黄色の固型物が得られる。収率は８８％、元素分
析はＣ６５．３４，Ｈ６．６８，Ｎ４．９５である。

【０１３６】合成例２８： １７α−ヒドロキシ−プレグナ−４−エン−２０−オン
−３−オキシエチルアミノメチレン−ドキシサイクリン
の合成

【０１３７】

【化５１】

【０１３８】３−アミノエチルオキシ−１７α−ヒドロ
キシプレグナ−４−エン−２０−オン３．７ｇ、メタホ
ルムアルデヒド０．３ｇ、イソプロパノール４０mlを、
６０℃で２時間加熱反応させ、塩酸ドキシサイクリン
４．５ｇを加え、４時間反応させる。反応終了後、濾過
し、イソプロパノール及びエチルエーテルで洗浄する。
その後黄色の固型物が得られる。収率は９２％、元素分
析はＣ６６．４１，Ｈ７．４０，Ｎ５．１４である。

【０１３９】合成例２９： プレグナ−４−エン−３，２０−ジオン−６−メチレン
−オキシエチルアミノメチレン−ドキシサイクリン

【０１４０】

【化５２】

【０１４１】６−アミノエトキシメチレン−プレグナ−
４−エン−３，２０−ジオン３．９ｇ、メタホルムアル
デヒド０．３ｇ、イソプロパノール５０mlを、６０℃で
３時間反応させ、塩酸ドキシサイクリン４．５ｇを加
え、４時間反応させる。反応終了後、濾過し、イソプロ
パノール及びエチルエーテルで洗浄する。その後黄色の
固型物が得られる。収率は９３％、元素分析はＣ６７．
７７，Ｈ７．３６，Ｎ４．５９である。

【０１４２】合成例３０： ３，１７−ジヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１
０）−トリエン−１１−（４−フェノキシ−エチルアミ
ノ）−メチレン−ドキシサイクリンの合成

【０１４３】

【化５３】

【０１４４】１１−（４′−アミノエトキシフェニル）
−３，１７−ジヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１
０）−トリエン４ｇ、メタホルムアルデヒド０．３ｇ、
イソプロパノール５０mlを、６０℃で２時間反応させ、
塩酸ドキシサイクリン４．５ｇを加え、８時間反応させ
る。反応終了後、濾過し、イソプロパノール及びエチル
エーテルで洗浄する。その後黄色の固型物が得られる。
収率は８９％、元素分析はＣ６８．１３，Ｈ６．６９，
Ｎ４．７３である。合成例３１ ： １７β−ヒドロキシ−１７α−メチル−アンドロスタノ
（３，２−Ｃ）−ピラゾール−Ｎ−メチレン−テトラサ
イクリンの合成

【０１４５】

【化５４】

【０１４６】１７β−ヒドロキシ−１７α−メチル−ア
ンドロスタノ−（３，２−Ｃ）−ピラゾール３．２９
ｇ、メタホルムアルデヒド０．３ｇ、イソプロパノール
３０mlを、４０℃で２時間反応させ、テトラサイクリン
４．５ｇを加え、攪拌し、６時間反応させる。反応終了
後、濾過し、イソプロパノール及びエチルエーテルで洗
浄する。その後黄色の固型物が得られる。収率は８９
％、元素分析はＣ６７．４８，Ｈ７．０７，Ｎ７．３０
である。

【０１４７】実験例１． 化合物の体内分布 合成例１−３において製造した化合物１−３を ³Ｈによ
り放射能標識し（０．３４ mCi／mg）、これを２０μCi
／２０ｇの量でマウス尾静脈に注入した。注射後、１
分、５分、１５分、３０分、１時間、４時間、６時間、
２４時間、４８時間、及び７２時間目にマウスを５匹ず
つ殺し、眼窩から５０μｌの血液を採取し、さらに心
臓、卵巣、子宮、小腸、骨（大腿骨）等を採取し、組織
５０mg（血液は５０μｌ）をプラスチック製試験管に入
れ、さらに過塩素酸０．２ml、過酸化水素０．４ml及び
ｎ−オクチルアルコールを１滴加えて７５℃の水浴に４
５分間置いた。この消化液０．１mlを取り、閃輝液を入
れたビンに入れ、さらに５mlの０．５％閃輝液を混合し
た。透明になってからＦＪ２１０５液体シンチレーショ
ンカウンターに入れ、放射能を測定してサンプルのｃｐ
ｍを決定した。これとは７に、４組の動物から得られた
５２のサンプルのｄｐｍを測定した（外部標準法）。組
織内薬物量を次の様にして求めた。

【０１４８】

【数１】 結果は次の通りであった。

【０１４９】

【表１】

【０１５０】

【表２】

【０１５１】

【表３】

【０１５２】実験例２． 急性毒性試験 （１）サンプル：化合物１−３は淡黄色の結晶性粉末
で、ロット番号９３０１１３である。その溶液は淡黄色
の透明液で、濃度：５０mg／ml pH：約５。華西医科大
学薬学院骨粗鬆症研究所から提供されるものである。 （２）動物：昆明種マウス、健康一級、体重１８〜２１
ｇ、雄雌それぞれ半数。華西医科大学実験動物センター
から提供されたものである。

【０１５３】（３）半数致死量（ＬＤ₅₀）の測定：予備
試験から得られた０％〜１００％の致死量範囲内に等比
で（１：０．７〜０．８）４〜５つの投与組を作る。経
口投与の薬物は固体薬物を１％ ＣＭＣＮａ₂ で懸濁液
を作る。注射投与の薬物はＸＷ６３０を生理食塩水で低
比重希釈法によって濃度の違う溶液を作る。動物は絶食
（水制限しない）２０時間後に性別、体重に拘らず、無
作為配分で１０匹を１組とする。投与容積０．２ml／１
０ｇ、１回投与後７日間観察し、死亡した動物を解剖
し、肉眼で病変を観察する。

【０１５４】（４）試験結果 （ａ）マウスＸＷ６３０経口投与の最大許容量測定：予
備試験時、死亡が見られなかった場合の最大許容量を測
定する。マウス２０匹（雄雌それぞれ１０匹）に１回経
口最大濃度、最大容積の薬物を投与した後、７日間を観
察した結果は動物には何らかの異常もなく、死亡例もな
い。最大許容量（ＭＴＤ）は＞６ｇ／kg。 （ｂ）マウス尾静脈に化合物１−３を注射した後の結果
は次の表の通り：

【０１５５】

【表４】

【０１５６】（５）結論 ＸＷ−６３０のマウスの一回服用量の最大許容量（ＭＴ
Ｄ）は６ｇ／kg以上で、毒性は極めて低い。マウスの尾
静脈注射ＬＤ₆₀は１４３．１１mg／kgである。静脈注射
後、活動が減少、その後飛び跳ねだし、けいれんし、眼
球が突出し、白色に変わり、大小便の失禁があり、中毒
者の大多数は即死するが、ごく少数の一部は２４時間内
に死亡し、２４時間以上生存したものは７日間内には死
亡しなかった。死亡した動物の性別の差は見られず、死
亡したものの解剖では、肉眼ではいかなる病変もみられ
なかった。試験室の室温は１７℃であった。

【０１５７】実験例３． 骨形成実験（１） 実験用細胞として、ウイスターラット（雌、６ケ月齢）
の頭蓋冠由来骨芽細胞初代培養系を用い、培養開始後、
２日目及び３日目（増殖期）に培地に１日１回、１０^-6
Ｍ，１０^-8Ｍ又は１０^-9Ｍの被験化合物（化合物１−
３）を添加し、あるいは培養開始後７日目から４日間
（石灰化期）に、培地に１日１回前記の量の化合物１−
３を添加した。培養開始１４日目に細胞をｖｏｎ Ｋｏ
ｓｓａ染色し、リン酸塩の検出を行って茶褐色に染色し
た骨結節の面積を視覚により確認し、骨形成の指標とし
た。結果は次の通りとなった。

【０１５８】

【表５】

【０１５９】また、３回繰返した結果を図１〜図３に示
す。図中、Ａは無添、Ｂは１０^-9Ｍ添加、Ｃは１０^-8Ｍ
添加、Ｄは１０^-6Ｍ添加の結果を示す。上記の結果から
明らかな通り、本発明の化合物は骨形成促進作用を示し
た。実験例４． 骨形成実験２ 実験用細胞として、ウイスターラット（雌、６ケ月齢）
の大腿骨由来骨髄細胞初代培養系を用い、培養開始後７
日、９日及び１１日目（石灰化期）に培地に１日１回、
１０^-8Ｍ又は１０^-6Ｍの化合物１−３を添加し、実験例
３の場合と同様に評価を行った。その結果は次の表に示
す通りとなった。

【０１６０】

【表６】 上記の表から明らかな通り、本発明の化合物は骨形成促
進作用を示した。実験例５． 化合物１−３の抗骨粗鬆症薬理研究 一、実験設計：化合物１−３の抗去勢ラット骨粗鬆症の
薬効果学実験設計の臨床観察によって、閉経後の女性の
エストロゲン不足により骨量紛失は骨粗鬆症を引起こす
可能性があることが明らかにされた。エストロゲンで治
療すれば、比較的満足な治療効果が得られるが、長期的
に使用すると、子宮内膜癌、乳腺癌などを誘発する危険
性があるので、臨床での応用が制限されている。その欠
点を克服し、治療効果を高める為、華西医科大学薬学院
はエストロゲンの構造を改善し、抗骨粗鬆症の化合物１
−３を合成した。毒性実験を完了した上で、去勢ラット
骨粗鬆動物の模型及び培養成骨細胞ＵＮＲ１０６を利用
して薬物の骨粗鬆模型及び細胞に対する作用を観察し、
更に化合物１−３の骨粗鬆症に対する治療効果及び作用
功能を確定し、その薬の臨床応用の為に基礎を固めた。

【０１６１】二、材料と方法： （一）薬物：化合物１−３（華西医科大学薬学院が合成
したもの）。０．１ＮＨＣｌを使って１０mg／mlの貯蔵
液を調合し、実験濃度は蒸留水で薄める。エストラジオ
ール（華西医大）１００mgに９０％のアルコール５mlと
２０mlのポリエチレングリコール４００を加え、水に入
れ、９０℃まで加熱し溶解した。そして、蒸留水で１０
０mlまで薄め、１mg／mlの貯蔵液を調製した。

【０１６２】カルシウム剤（炭酸カルシウム、クエン酸
は全て北京化学工場が生産したもの）。１００mMの炭酸
カルシウムに１００mMのクエン酸を加えた（１ｇの炭酸
カルシウムに２．１ｇのクエン酸を加え、１００mlの蒸
留水に入れた。使う前に調合した）。 ³Ｈ−ＴｄＲ（中
国科学院放射能研究所）によりラベルした。その他の必
要な試剤及び薬物は全てＡＲ級（北京化学試剤公司）で
ある。

【０１６３】（二）動物：Ｗｉｓｔａｒラット雌８０
匹、雄２０匹、生後５〜６ヵ月、体重２６０±１０ｇ
（中国医科院動物研究所）につき、実験開始前、全ての
動物の体重を測定し、記録する。 （三）動物実験分類： １．健康のＷｉｓｔａｒ雌ラットを１０群に分類し、一
群に６匹づつを以下の図に基いて番号を付けた。

【０１６４】１０組は以下の通りである。 （１）７段手術群 （２）手術対照群 （３）低用量（化合物１−３、５０μｇ／匹／日） （４）中用量（化合物１−３、５００μｇ／匹／日） （５）高剤量（化合物１−３、５mg／匹／日） （６）化合物１−３、５００μｇ／匹＋Ｃａ ０．５ml （７）エストラジオール０．５mg／匹／日 （８）エストラジオール０．５mg／匹／日＋Ｃａ ０．
５ml （９）化合物１−３、５００μｇ／匹／日＋Ｃａ ０．
５ml（手術後５週目に投与） （10）化合物１−３、５００μｇ（手術後５週目）、腹
腔投与 １〜８群は手術後１週間経口投与する。９群は手術後５
週間経口投与する。１０群は手術後５週目から腹腔投与
した。

【０１６５】２．健康なＷｉｓｔａｒ雄ラットを３群に
分類し、番号付けは第１１群（仮手術）、第１２群は睾
丸摘出手術対照、第１３群は睾丸摘出後１週間化合物１
−３５００μｇ／匹／日を投与した。 ３．各群の動物に対し週６回投与し、対照群には蒸留水
を与え、１３週目に全部頭を切断し、致死させ、同時に
血液及び組織サンプルを採取した。

【０１６６】（四）動物模型の作成：実験用のＷｉｓｔ
ａｒ雌ラットは中国医学科学院動物研究所より提供され
たもので、生後５〜６ヵ月、体重２６０±１０ｇであ
る。手術前１２時間絶食した。ペントバルビタールナト
リウム（３５mg／Kg）を腹腔より注射して麻酔した状態
で手術板に固定し、腹部を上向きにし、下腹部の真中に
約３３mmぐらいの穴を開け、ピンク色のＹ字型の子宮を
露出した。子宮の上部には夫々濃い赤色の嚢包状の球が
あり、これが卵巣である。絹糸で底部を結紮し、鋏で両
側の卵巣を切除した。出血していないのを確認して、筋
肉、皮膚を縫合わせ、子宮を元の位置に戻した。仮手術
群はただ子宮を露出しただけで、切除しなかった。手術
後、腹部にペニシリン（８万単位／匹）を注射し、感染
を予防した。数時間後、ラットは正常な状態に戻った。
実験用雄Ｗｉｓｔａｒラットに対して、同じ麻酔方法で
睾丸を切除し、仮手術群は睾丸の一部の皮膚を切り開い
た後縫合わせ、切除しなかった。そして、局部に対して
消毒した。

【０１６７】（五）観察指標： １．体重：週に一回体重を測定した。 ２．子宮塗布：雌ラットに対し、１０週目から６日間連
続で子宮塗布を行い観察した（発情前期、発情期、間
隔）。 ３．２４時間の尿（１２週目）を収集し、尿Ｃａ、Ｐ、
クレアチニンを観察した。 ４．１３週目に殺す前に各群のラットの骨密度（骨科
所）を測定した。 ５．１３週目に動物を殺し、以下の指標を観察した。 （１）血清を取り、Ｃａ，Ｐ、アルカリ・ホスファター
ゼの含有量を測定した。 （２）子宮を取り、重量を秤った。 （３）肝臓と腎臓を取り、夫々薬物毒性を観察し、そし
て薬物が受容されたかどうかを観察した。 （４）右大腿骨の骨応力（骨科所）を測定した。 （５）左大腿骨に２０％の硝酸脱カルシウムを加え、形
態学的観察を行った。 （６）右脛骨を灰化し、骨灰の重量を計り、Ｃａ，Ｐを
測定する。 （７）右脛骨に対し受容体実験を行った。

【０１６８】（六）細胞の培養 ３７℃，５％ＣＯ₂ の培養条件で、１０％ＦＣＳを含む
ＤＭＥＭ／ＨａｍＦ−１２の培養液の中でＵＭＲ１０６
細胞を培養した。３日毎にトリプシン−ＥＤＴＡで一回
消化し、継代した。 １． ³Ｈ−ＴｄＲを混ぜ、実験を行った。消化細胞を２
０００rpm ×１０min で遠心し、７．５％ＣＳ−ＦＣＳ
（４ｇＮｏｒｉｔＡ 炭＋１００mlＦＣＳ）を含むＤＭ
ＥＭ／ＨａｍＦ−１２ノー・フェノールレッド培養液を
加え、細胞３×１０⁴ ／mlを２４穴プレート１ml／穴で
計測した。２４時間後０．２％ＦＳＡを含むＤＭＥＭ／
ＨａｍＦ−１２ノー・フェノールレッド培養液で取り換
えた。

【０１６９】４８時間培養後、薬物（エストラジオー
ル、化合物１−３）を投与した。 ³Ｈ−ＴｄＲ ０．５
uCi ／穴を３２時間投与した。４８時間投与後ＰＢＳ液
で５〜６回洗浄し、０．２Ｎ ＮａＯＨ １ml／穴を加
え、２４時間後トルエン−トリトン・シンチレーション
液を使って発光させ、その数値を計測した。 ２．細胞数計測 ２４穴プレートの中の細胞に投与後４８時間、トリプシ
ン−ＥＤＴＡで消化し計測した。 ３．細胞が分泌したＡＴＰの活性を測定した。２４穴プ
レートの中の細胞に投与後４８時間、培養液を吸収し、
生化学比色法でＡＴＰを測定した。

【０１７０】三、結果 （一）ラットに対し子宮塗布を行ない、細胞変化を観察
した。 １．判定の標準：手術後１０週目に、連続６日間子宮塗
布を行ない、顕微鏡で検査した。 発情期指標：大量の大きくて不規則な角化上皮細胞が現
れ、その中には少量の上皮細胞も含まれていた。 発情期間隔指標：大量の多核白細胞が現れ、その中には
少量の上皮細胞も含まれていた。 ２．結果：

【０１７１】

【表７】

【０１７２】総括：仮手術群の場合、週に３回発情期変
化が現れた。手術後１週間内に１〜２回の発情期変化が
現れたが、手術後投与した各群は１週間内に全て４〜６
回の発情期変化が現れた。これは化合物１−３、Ｅ₂ が
ラットの発情期変化に対して影響があることを明した。

【０１７３】（二）体重の変化：手術群と仮手術群の体
重の変化にはあまり差がないが、手術後Ｅ₂ 治療群の体
重の増加は明らかに手術群より高かった。手術後化合物
１−３ ０．０５mg／日及び手術後化合物１−３ ０．
５mg／日を５週間後投与した群及び５週間後に腹腔より
投与した群の体重の増加も明らかに手術群より高かっ
た。化合物１−３０．５mg／日及び５mg／日の群の体重
の増加は仮手術群とはあまり差がなかった。 化合物１−３の去勢雌ラットの体重に対する影響（表８
を参照）。

【０１７４】

【表８】

【０１７５】雄ラット０．５mg化合物１−３経口投与群
及び手術対照群を仮手術群と比較すると、体重が明らか
に増加した（Ｐ＜０．０１）が、前者の投与群と対照群
の体重の増加にはあまり差異がなかった。 化合物１−３が去勢雄ラットの体重に及ぼす影響（図４
を参照）。

【０１７６】（三）子宮重量の変化： １．仮手術群と比較した 手術群手術後、化合物１−３ ５mg／ｄ，０．５mg／
ｄ，０．０５mg／ｄを１２週間経口投与し、０．５mg／
ｄを６週間腹腔投与し、そしてＥ₂ を補充した。ラット
の子宮の重量は全て明らかな減少があった。 ２．手術群と比較した 術後、化合物１−３ ５mg／ｄ及び０．０５mg／ｄを１
２週間経口投与した群は、子宮の重量が少し増加した。
これは薬物が術後の子宮の重量に対して増加作用がある
ことを意味する。

【０１７７】（四）骨密度の測定：表８を参照。 １．手術群の骨密度は仮手術群より明らかに低下した。 ２．０．５mg Ｅ₂ を胃より注入し、１２週間後手術群
と比較すると、骨密度が明らかに高くなったが、仮手術
群と比較すると、あまり差がなかった。 ３．化合物１−３は術後の骨密度の変化に対しては明ら
かな影響がある。そして用量依存関係を現した（図５を
参照）。 ４．化合物１−３ ０．５mgをＥ₂ ０．５mgと比較する
と、骨密度は明らかに高くなった（図５を参照）。 ５．化合物１−３を経口投与及び腹腔投与した場合、両
方とも骨密度は著しく増加し、差がない（図６を参
照）。 ６．術後１週間投与及び術後５週間投与した場合、両方
とも骨密度は明らかに増加した（図７を参照）。

【０１７８】

【表９】

【０１７９】（五）カルシウム、燐の結果：ラットの卵
巣が取除かれた後、血中カルシウムが高くなり、血中燐
が低くなったが、著しい差異はなかった。投与して治療
した後、血中Ｃａ，Ｐの変化を観察した。 １．血中Ｃａ²¹：化合物１−３ ５mg／日で血中カルシ
ウムを正常なレベルに回復させた。治療群と手術対照群
を比較すると、明らかな差異があり、Ｐ＜０．０１であ
る。化合物１−３ ０．０５mg／日の群は影響がなかっ
た。 Ｅ₂ 治療：Ｅ₂ を単独或いはカルシウム剤と一緒に投与
すると、両方ともＯＶＸラットの血中カルシウムを回復
させた。Ｅ₂ ＋Ｃａ群を手術対照群と比較すると、明ら
かな差異があり、Ｐ＜０．０１であった。 ２．血中Ｐ：化合物１−３ ０．５mg／日と５mg／日、
両方とも血中Ｐを回復させたが、０．０５mg／日の方が
明らかである。治療群を手術対照群と比較すると、明ら
かな差異があり、Ｐ＜０．０１である。

【０１８０】（六）血清オステオカルシン（ＢＧＰ）結
果 ラットの卵巣を除去した後、血清ＢＧＰはやや上昇し、
化合物１−３を使って治療後、ＢＧＰが下がり、そして
用量効果依存関係が現れた。その中、化合物１−３ ５
mg／日の群を仮手術群及び手術群と比較すると、全て明
らかな下降があり、Ｐ＜０．０５である。化合物１−３
０．０５mg／日の治療群はＯＶＸ対照群より明らかな
下降があり、Ｐ＜０．０５であった。

【０１８１】（七）血清ＡＬＰ変化：ＯＶＸラットの血
清ＡＬＰは仮手術群よりやや上昇し、Ｅ₂ ０．５mg／日
の治療群は手術群よりやや下降したが、明らかな差異が
ない。化合物１−３による治療はＯＶＸラットの血清Ａ
ＬＰを増加させ、用量効果依存関係を現した。化合物１
−３ ０．５mg／日、５mg／日の治療群を仮手術群と比
較すると、夫々Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．００１であっ
た。

【０１８２】（八）骨応力の変化：動物の頭を切断し、
大腿骨を整理し、生理食塩水の入った小瓶に入れ、ラベ
ルを貼って番号をつけた。電子万能試験機でテストし
た。大腿骨の力学指標条件をテストした。 １．方法：簡単にけたをたてる形で三点弯曲のテストを
行った。 ２．方向：前から後へ ３．テストの距離：２５mm。 ４．抗破壊強度を破壊荷重とし、kgで表す。 ５．抗弯強度が破壊荷重で、作用点にある変位をkg／mm
で表す。

【０１８３】化合物１−３が雌及び雄ラットの大腿骨力
学指標に対する影響に対して、各群の間でＴテスト及び
方差分析を行ったが、明らかな差が現れなかった。Ｉ組
からＶ組まで化合物１−３を経口投与し大腿骨の力学指
標を観察したが、大腿骨の材料選びが不合格だったの
で、繰返し試験する必要がある。その他の各群は統計学
によって処理した結果、明らかな差異が現れなかった。
それは動物の数が少なかったためである。更に繰返し試
験する必要がある。 注：抗弯強度を最大破壊弯矩と称し、その値を計算す
る。

【０１８４】

【数２】

【０１８５】（九）化合物１−３のＵＭＲ １０６細胞
に対する影響 １． ³Ｈ−ＴｄＲの混入：Ｅ₂ １０^-10 ＭはＵＭＲ１０
６細胞 ³Ｈ−ＴｄＲの混入に対して影響がない。Ｅ₂ １
０^-9 Ｍ−１０^-7 ＭはＵＭＲ１０６細胞 ³Ｈ−ＴｄＲ
を混入した後のピーク値を明らかに刺激し、ピーク値は
１０^-7 Ｍに変わり、対象群より６３％増加した。Ｅ₂
群と比較すると、化合物１−３ １０^-10 Ｍ，１０^-8
ＭのＵＭＲ１０６細胞 ³Ｈ−ＴｄＲの混入に対する刺激
作用が明らかに強まり、夫々Ｐ＜０．００１とＰ＜０．
０５であるが、化合物１−３ １０^-9 Ｍ，１０^-7 Ｍ
もＥ₂ より夫々１３％と９％高くなった。

【０１８６】２．細胞数計測：Ｅ₂ １０^-10 Ｍは細胞計
測数に対して影響がないが、１０^-9Ｍ〜１０^-7 Ｍは細
胞計測数を増加させ、ピーク値は１０^-7 Ｍにあった。
化合物１−３ １０^-10 Ｍ〜１０^-7 Ｍは両方とも明ら
かに細胞計測数を増加させ、ピーク濃度は１０^-7 Ｍで
ある。化合物１−３の効果はＥ₂ より強いが、両者を比
較すると、明らかな差異がなかった。

【０１８７】３．ＡＬＰ活性の測定： （１）羊水ＡＬＰ活性の測定：Ｅ₂ １０^-10 Ｍは羊水Ａ
ＬＰ活性に対して影響がなかった。Ｅ₂ １０^-9 Ｍ〜１
０^-7 ＭはＡＬＰ活性を明らかに増加させ、用量効果依
存関係を示した。化合物１−３ １０^-10 Ｍ〜１０^-7Ｍ
も羊水ＡＬＰ活性を明らかに増加させ、用量効果依存関
係を示した。そして、各濃度での作用は全てＥ₂ より強
く、明らかな差異があった（Ｐ＜０．００１）。

【０１８８】（２）培養液から分泌されたＡＬＰ活性の
測定：Ｅ₂ 、化合物１−３ １０^-9Ｍ−１０^-7 Ｍはす
べてＵＭＲ１０６細胞から分泌されたＡＬＰ活性を明ら
かに刺激し、Ｅ₂ は１０^-10 Ｍである時、酵素に対して
影響がないが、化合物１−３１０^-10 Ｍ，１０^-7ＭはＥ
₂ 群より酵素の活性が夫々２９％，２３％高くなった。
化合物１−３ １０^-9，１０^-8 もＥ₂ 群より作用が明
らかに強くなった。

【０１８９】実験例６． 化合物１−３の去勢ラットの
骨粗鬆症に対する薬効に関する実験報告 １．材料 １−１薬物 この実験に使う全ての薬品は鄭虎教授研究
組より提供され、要求に基いて調合されたものである。 １−２動物 ＳＤ雌ラット、生後３ヵ月、体重１８０〜
２２０ｇ、華西医科大学実験動物センターより提供。

【０１９０】２．実験方法 ２−１．動物の群別及び投与 実験前一週間観察し合格した動物１５０匹を、１群１５
匹、１０群に分類した。 １群（ｓｈａｍ）：仮手術群。腹腔を開け、又閉じる手
術を行い、週に３回、１回毎に１匹に対し生理食塩水１
mlで灌胃した。 ２群（ＯＶＸ）：去勢群。両側卵巣を切除し、週に３
回、１回毎に１匹に対し生理食塩水１mlで灌胃した。 ３群（口Ｅ₂ ）：Ｅ₂ を経口投与した群。両側卵巣を切
除し、週に２回灌胃し、１回毎に１７β−エストラジオ
ール０．８mg／１mlのみ投与した。

【０１９１】４群（口低）：化合物１−３を経口投与し
た低用量群。両側卵巣を切除し、週に３回灌胃し、１回
毎に１匹に対し５mg／１mlのみ投与した。 ５群（口中）：化合物１−３を経口投与した中用量群。
両側卵巣を切除し、週に２回灌胃し、１回毎に１匹に対
し２０mg／１mlのみ投与した。 ６群（口高）：化合物１−３を経口投与した高用量群。
両側卵巣を切除し、週に３回灌胃し、１回毎に１匹に対
し８０mg／１mlのみ投与した。 ７群（注Ｅ₂ ）：Ｅ₂ を注射した群。両側卵巣を切除
し、週に２回注射し、前の４週間は１回毎に１匹に対し
２００μｇ／０．２mlを、後の６週間は１回毎に１匹に
対し７．５μｇ／０．２mlに変更した。

【０１９２】８群（注低）：低用量を注射した群。両側
卵巣を切除し、週に２回注射し、前の４週間は１回毎に
１匹に対し１mg／０．２mlを、後の６週間は１回毎に１
匹に対し０．１mg／０．２mlに変更した。 ９群（注中）：中用量を注射した群。両側卵巣を切除
し、週に２回注射し、前の４週間は１回毎に１匹に対し
３．７５mg／０．２mlを、後の６週間は１回毎に１匹に
対し０．３７５mg／０．２mlに変更した。 １０群（注高）：高用量を注射した群、両側卵巣を切除
し、週に２回注射し、前の４週間は１回毎に１匹に対し
１５mg／０．２mlを、後の６週間は１回毎に１匹に対し
１５mg／０．２mlに変更した。

【０１９３】２−２．動物の致死及び観察 実験が１１週目になった時、股動脈から血を出し、動物
を致死させた。子宮を分離し、両側大腿骨及び両側脛骨
に対し、夫々右脛骨双光子骨密度の測定、左脛骨病理組
織学的検査、右脛骨計量学の測定、左大腿骨生物力学の
測定、右大腿骨骨灰重量及び生化学的測定、子宮重量の
測定等を行った。 ２−３．統計分析 全ての定量パラメーターは全てＸ±ＳＤで表示する。各
群の指標は全て去勢群と比較し、統計水準は０．０５で
ある。

【０１９４】３．結果 ３−１．化合物１−３が去勢ラットの体重及び全身状況
に及ぼす影響 実験開始後最初の４週間、化合物１−３を経口投与した
高用量群、及び注射した低用量群と中用量群、Ｅ₂ を注
射した群のラットに毛髪直立、動きが鈍い、脱毛などの
現象が現れたので、全ての実験動物に対し１週間投与を
中止した。後の６週間、注射した動物に対し減量投与し
た結果、上記症状は軽減し、或いはなくなった。実験終
了後、化合物１−３を高用量経口投与した群の体重の増
加が抑制（１．４％）されたのを除いて、他の群の増加
率は大体３０〜４０％であった。

【０１９５】３−２．化合物１−３が去勢ラットの骨生
物力学に及ぼす影響 仮手術群ラットの大腿骨の抗湾曲強度は９７ニュートン
で、去勢群は８０ニュートンまで低下した。この２群に
明らかな差異（Ｐ＜０．０５）があった。Ｅ₂を経口投
与及び注射した群のラットの大腿骨の抗湾曲強度は夫々
１０１と９０ニュートンに上がり、去勢群と比較すると
明らかな差があった。化合物１−３を経口投与した低、
中、高用量群のラットの大腿骨の抗湾曲強度は夫々１０
５，１０５と７４ニュートンで、去勢群と比較すると、
低、中用量群が上昇し、明らかな差があった。化合物１
−３を注射した低、中、高用量群のラットの大腿骨の抗
湾曲強度は夫々８３，１０３と９７ニュートンで、中、
高用量群は去勢群と比較すると、明らかな差があった。
この実験は西南交大生物力学実験室の協力で完成したも
のである。

【０１９６】３−３．化合物１−３が去勢ラットの脛骨
密度に及ぼす影響 去勢群の脛骨密度（０．０３７ｇ／cm）は仮手術群
（０．０７２ｇ／cm）より明らかに低下し、Ｅ₂ を経口
投与及び注射した群のラットの骨密度は夫々０．０５７
と０．０６５ｇ／cmに増加した。化合物１−３を経口投
与した低、中、高用量群のラットの骨密度は夫々０．０
５６，０．０６２，０．０６４ｇ／cmであった。化合物
１−３を注射した低、中、高剤量組のラットの骨密度は
夫々０．０５４，０．０６６，０．０８５ｇ／cmで、ど
れも去勢群より高く、そして用量−効果関係があった。

【０１９７】３−４．化合物１−３が去勢ラットの大腿
骨灰の重量に及ぼす影響 仮手術群ラットの大腿骨灰の重量は平均０．２４６ｇ／
匹で、去勢群は０．２２７ｇ／匹まで低下し、明らかな
差（Ｐ＜０．０５）があった。Ｅ₂ 及び化合物１−３を
経口投与及び注射した各群の大腿骨灰の重量は全て去勢
群より明らかに増加し、仮手術群のレベルに達したか或
いは越えた。

【０１９８】３−５．化合物１−３が去勢ラットの大腿
骨カルシウムに及ぼす影響 去勢群ラットの大腿骨カルシウムの含有量は仮手術群及
び各治療群より明らかに（Ｐ＜０．０５）下がった。仮
手術群の大腿骨カルシウムの含有量は３０８mg／ｇで、
去勢群は２０９mg／ｇで、Ｅ₂ を経口投与及び注射した
群は夫々３１９mg／ｇ，３３０mg／ｇで、化合物１−３
を経口投与した低、中、高用量群は夫々３１５，３２
１，３２２mg／ｇで、化合物１−３を注射した低、中、
高用量群は夫々３１２，３１５，３２２mg／ｇである。
化合物１−３を経口投与或いは注射した場合、大腿骨カ
ルシウム含有量の影響には全て一定程度の用量−効果関
係が存在していた。

【０１９９】３−６．化合物１−３が去勢ラットの脛骨
病理学に及ぼす影響 仮手術群の骨筋が正常。去勢群の骨筋がやや疎らで、幅
が狭くなり、ボタン式の骨筋が増えた。一部の骨筋のと
ころに隙間がみられ、骨髄腔が明らかに拡大した。一部
の骨筋の表面に吸収窪みが増え、破骨細胞が明らかに増
え、活動した。骨筋成骨細胞も増え、活動したが、成骨
より破骨のほうが大きい。Ｅ₂ 及び化合物１−３による
各治療群の骨筋の密度と幅に夫々一定程度の増加があっ
たが、ボタン式の骨筋が明らかに減少し、活動した成骨
と破骨細胞は減少しつつある。

【０２００】３−７．化合物１−３が去勢ラットの子宮
重量に及ぼす影響 去勢群ラットの子宮が明らかに縮み、重量が減り（０．
１７ｇ）、仮手術群（０．３７ｇ）より明らかに低下し
た。Ｅ₂ を経口投与及び注射した場合、子宮の重量が明
らかに（０．４０，０．２１）増加した。化合物１−３
を経口投与した低、中、高用量群の場合、子宮の重量は
夫々０．３３，０．４５，０．４８ｇである。化合物１
−３を注射した低、中、高用量群の場合、子宮の重量は
夫々０．１２，０．２３，０．４０ｇである。化合物１
−３を経口投与及び注射した低用量群を除いて、中、高
用量群の子宮の重量は明らかに去勢群より高かった。３
−８．化合物１−３による各実験群と去勢群との比較に
関する各指標の変化は表９を参照。

【０２０１】４．中間総括 ４−１．化合物１−３を経口投与及び注射した場合、去
勢ラットの骨筋含有量、骨密度、骨生物力学特性及び骨
カルシウム含有量に対して、全て顕著な作用があり、有
効的に去勢後の骨質の安定を維持することが出来た。去
勢群と比較すると顕著な差異があった。ある指標は仮手
術群のレベルに達し或いは越えた。今回の実験から、化
合物１−３を高用量経口投与した群が例え中毒症状を呈
しても骨量は相変わらず増加しているが、骨の抗湾曲強
度は非常に弱いことがわかった。

【０２０２】４−２．化合物１−３を経口投与或いは注
射した場合、去勢ラットの骨量、骨密度、骨生物力学、
骨灰の重量及び骨カルシウム含有量に対する影響は一定
程度の用量−効果関係があった。 ４−３．この実験条件下で、化合物１−３の去勢ラット
の骨質に対する作用はＥ₂ の治療効果に達し或いは越え
た。 ４−４．化合物１−３を低用量経口投与或いは注射した
場合、去勢ラットの骨質の各種パラメーターに対し、全
ての顕著な改善作用があった。化合物１−３を低用量経
口投与した群の場合、子宮が軽い程度で増殖したが、仮
手術群のレベルには達しなかった。化合物１−３を低用
量注射した場合、ラットの子宮の重量に対しては影響が
なかった。これは、化合物１−３の去勢ラットの失骨を
予防治療する作用が有効用量の場合、軽度の子宮刺激作
用を持つか、或いは持たなくても良いと言うことを表し
た。

【０２０３】

【表１０】

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、実験例３における骨形成の結果を示す
写真であって、生物の形態を示す図面に代る写真であ
る。

【図２】図２は、実験例３における骨形成の結果を示す
写真であって、生物の形態を示す図面に代る写真であ
る。

【図３】図３は、実験例３における骨形成の結果を示す
写真であって、生物の形態を示す図面に代る写真であ
る。

【図４】図４は、化合物１−３の去勢雄ラットの体重に
対する影響を示すグラフである。

【図５】図５は、種々の量の化合物１−３がＯＶＸラッ
トの骨密度（ＢＭＤ）に対する影響を示すグラフであ
る。

【図６】図６は、化合物１−３の種々の方法による投与
がＯＶＸラットの骨密度（ＢＭＤ）に与える影響を示す
グラフである。

【図７】図７は、化合物１−３を０．５mg／日高カルシ
ウム食に添加してＯＶＸラットに投与した場合の骨密度
ＢＭＤに対する影響を示すグラフである。

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 次の式（Ｉ）： Ｘ−Ｙ−Ｚ （Ｉ） 〔式中、Ｘは次の式（II）： 【化１】 （式中、Ｒ₁ は水素又はヒドロキシル基であり；Ｒ₂ は
   水素又はヒドロキシル基であり；Ｒ₃ は水素又はメチル
   基であり；そしてＲ₄ は水素、ハロゲン又はジメチルア
   ミノ基である）により表わされる１価基であり；Ｙは次
   の式（III ），（IV）又は（Ｖ）： 【化２】 （式中、ｎは０〜４であり、そして−Ｘ−は直接結合、
   −Ｏ−又は−ＮＨ−である）により表わされる２価基又
   は３価基であり；そしてＺは次の式（VI）： 【化３】 （式中、Ｒ₁ ′はＨＯ−又はＯ＝であり；Ｒ₂ ′は水素
   原子又はメチル基であり；Ｒ₃ ′は水素原子、フェニル
   基又は置換フェニル基であり；Ｒ₄ ′はメチル基又はエ
   チル基であり；Ｒ₅ ′はヒドロキシル基、ケトン基又は
   アセチル基であり；Ｒ₆ ′は水素、ヒドロキシ基、メチ
   ル基、エチニル基又はプロピニル基であり；あるいはＲ
   ₅ ′とＲ₆ ′は一緒になって＝Ｏを構成し；Ｒ₇ ′は水
   素、ヒドロキシル基、又は＝Ｏであり、あるいはＲ₆ ′
   とＲ₇ ′は２，２−ジオキシプロピル基の酸素に結合し
   ており；そして は単結合又は二重結合を表わす）で表
   わされる化合物の水素又はヒドロキシル基が除去された
   １価基であり、この結合基は式（VI）の化合物の２位、
   ３位、４位、６位、７位又は１７位、あるいは１１位に
   結合したフェニル基に存在し；式（II）の（１）と式
   （III ）〜（Ｖ）の（２）とは直接連結されており、そ
   して式（III ）〜（Ｖ）の（３）と式（VI）の前記の結
   合基のいずれかとが直接連結されている〕により表わさ
   れる化合物を含んで成る骨吸収抑制・骨形成促進剤。
2. 【請求項２】 式（II）で表わされる１価基が、Ｒ₁ が
   水素であり、Ｒ₂ がヒドロキシル基であり、Ｒ₃ がメチ
   ル基であり、そしてＲ₄ が水素であるテトラサイクリン
   化合物の１価基である、請求項１に記載の骨吸収抑制・
   骨形成促進剤。
3. 【請求項３】 式（II）で表わされる１価基が、Ｒ₁ が
   ヒドロキシル基であり、Ｒ₂ がヒドロキシル基であり、
   Ｒ₃ がメチル基であり、そしてＲ₄ が水素であるテラマ
   イシンの１価基である、請求項１に記載の骨吸収抑制・
   骨形成促進剤。
4. 【請求項４】 式（II）で表わされる１価基が、Ｒ₁ が
   水素であり、Ｒ₂ がヒドロキシル基であり、Ｒ₃ がメチ
   ル基であり、そしてＲ₄ が塩素であるクロロテトラサイ
   クリンの１価基である、請求項１に記載の骨吸収抑制・
   骨形成促進剤。
5. 【請求項５】 式（II）で表わされる１価基が、Ｒ₁ が
   ヒドロキシル基であり、Ｒ₂ が水素であり、Ｒ₃ がメチ
   ル基であり、そしてＲ₄ が水素であるデオキシテトラサ
   イクリンの１価基である、請求項１に記載の骨吸収抑制
   ・骨形成促進剤。
6. 【請求項６】 式（II）で表わされる１価基が、Ｒ₁ が
   水素であり、Ｒ₂ が水素であり、Ｒ₃ が水素であり、そ
   してＲ₄ がジメチルアミノ基であるアミノテトラサイク
   リンの１価基である、請求項１に記載の骨吸収抑制・骨
   形成促進剤。
7. 【請求項７】 式（VI）で表わされる１価基が、Ｒ₅ ′
   とＲ₆ ′が一緒になって＝Ｏを表わし、そしてＲ₇ ′が
   水素であるエストロンの１価基である、請求項１〜６の
   いずれか１項に記載の骨吸収抑制・骨形成促進剤。
8. 【請求項８】 式（VI）で表わされる１価基が、Ｒ₅ ′
   がヒドロキシル基であり、Ｒ₆ ′が水素であり、そして
   Ｒ₇ ′が水素であるエストラジオールの１価基である、
   請求項１〜６のいずれか１項に記載の骨吸収抑制・骨形
   成促進剤。
9. 【請求項９】 式（VI）で表わされる１価基が、Ｒ₅ ′
   がヒドロキシル基であり、Ｒ₆ ′がエチニル基であり、
   そしてＲ₇ ′が水素であるエストロアルキノールの１価
   基である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の骨吸収
   抑制・骨形成促進剤。
10. 【請求項１０】 式（VI）で表わされる１価基が、Ｒ
    ₅ ′がヒドロキシル基であり、Ｒ₆ ′が水素であり、そ
    してＲ₇ ′がヒドロキシル基であるエストリオールの１
    価基である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の骨吸
    収抑制・骨形成促進剤。